Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario

Jos A. Lpez Garca-Asenjo Servicio de Anatoma Patolgica Seccin de inmunohistoqumica

Marcadores tumorales
El cncer constituye el resultado de la transformacin geno y fenotpica de la clula normal. En los ltimos aos se han realizado esfuerzos para identificar marcadores tumor-especficos, as como eptopos igualmente especficos Cualquier molcula que pueda ser identificada con el proceso de transformacin maligna, proliferacin, desdiferenciacin y metstasis de las clulas neoplsicas puede, en ltima instancia, considerarse un marcador tumoral

Caractersticas biolgicas de las neoplasias

1. Autosuficiencia en cuanto a seales de crecimiento. 2. Insensibilidad a las seales inhibidoras del crecimiento 3. Escape de la apoptosis 4. Potencial de multiplicacin ilimitado 5. Capacidad de producir angiognesis 6. Capacidad invasiva y metastatizante

Marcadores tumorales
El valor clnico de un marcador tumoral depende de su utilidad clnica y de su sensibilidad y especificidad. En esta lnea, el uso de marcadores tumorales no slo en el diagnstico y monitarizacin de la enfermedad sino a nivel de pronstico o de riesgo constituye cada vez ms un campo de desarrollo. Sensibilidad: La capacidad de un test para detectar pacientes que actualmente presentan la enfermedad. Especificidad: La capacidad de un test para distinguir aquellos pacientes que no tienen cncer de aquellos que lo tienen.

Marcadores tumorales
El valor umbral, tambin llamado valor cut-off, para un marcador tumoral se obtiene del percentil 95 de los valores encontrados en la poblacin bajo investigacin que se conoce que no tienen cncer. Valor predictivo positivo (VPP) se define como la probabilidad de que un paciente con un test positivo tenga cncer. Valor predictivo negativo (VPN) se define como la probabilidad de que un paciente con un test negativo no tenga cncer.

Marcadores tumorales
Diagnstico
La frecuencia de valores elevados de los marcadores tumorales en enfermedades no neoplsicas y su solapamiento entre concentraciones normales y aquellas observadas en pacientes con cncer, plantea un problema en su diagnstico. Utilizacin de patrones de marcadores mltiples parecen asociarse con el desarrollo especfico de procesos neoplsicos. CEA, CA125, CA19.9 y CA15.3 Lugar primario y/o el desarrolllo de metstasis.

Marcadores tumorales
Diagnstico

Marcadores tumorales
Monitorizacin del tratamiento
Los valores de los marcadores tumorales pueden informar sobre el desarrollo de una remisin o de una recidiva y, por tanto, aportar informacin sobre la eficiencia del tratamiento. Deben considerarse siempre las tendencias y/o pendientes de los valores seriados del marcador. Existen situaciones donde la instauracin de un tratamiento, normalmente de radio y/o quimioterapia, puede mostrar incrementos del marcador tumoral.

Marcadores tumorales
Deteccin de recurrencia
La monitorizacin de un marcador tumoral para la deteccin de recurrencia posterior a su reseccin quirrgica constituye la segunda utilidad ms frecuente de estas molculas. Marcadores tumorales altamente sensibles para detectar la recurrencia de la forma ms precoz posible. Intervalos de seis meses a un ao son normalmente suficientes para proceder al anlisis seriado del marcador especfico. En la monitorizacin de la recidiva, la pendiente de los niveles sricos de marcadores tumorales es ms importante que en la monitorizacin del tratamiento debido a que en ste ltimo puede haber influencia o cambios subsidiarios al mismo proceso teraputico

Marcadores tumorales
Pronstico
La prediccin de la supervivencia tanto global como libre de enfermedad constituye uno de los objetivos principales en el manejo del paciente oncolgico. Existen dos grandes grupos de marcadores tumorales: los marcadores tumorales de secrecin cuya principal aplicacin est en el seguimiento y, algunas veces, en el pronstico; y los marcadores tumorales tisulares, que permiten caracterizar biolgicamente los tumores.

Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario

1 Tumores del epitelio de superficie 2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma 3 Tumores de clulas germinales

Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario

1 Tumores del epitelio de superficie 2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma 3 Tumores de clulas germinales

Marcadores tumorales en la neoplasia epitelial superficial de ovario

Antgeno CA125 Descrito por Bast et al en 1983 como un antgeno que se observaba elevado en el 80% de las mujeres con cncer epitelial de ovario. Es una glicoprotena que se expresa en las clulas derivadas del epitelio celmico como en las clulas mesoteliales de pleura, pericardio y peritoneo,

tambin en las trompas de Falopio, endometrio, endocrvix y ovario.

Marcadores Marcadores tumorales tumorales en en la la neoplasia neoplasia epitelial de ovario superficial de ovario
Antgeno CA125 La concentracin srica de CA125 est elevada en el 90% de las mujeres con cncer de ovario en estadios avanzados. Tambin durante la menstruacin, en el primer trimestre del embarazo y en el postparto. En situaciones que provoquen cambios mesoteliales y peritoneales: peritonitis, ascitis, hemorragias intraabdominales y en enfermedades benignas como la endometriosis y miomas uterinos.

Marcadores Marcadores tumorales tumorales en en la la neoplasia neoplasia epitelial de ovario superficial de ovario
Antgeno CA125 Diagnstico: La conjuncin de la determinacin de CA125, con otros medios diagnsticos, principalmente la ecografa, mejora la sensibilidad; sin embargo no puede afirmarse que aquel constituya, por el momento, un sistema eficaz de diagnstico precoz del cncer de ovario El CA125 se halla elevado en el 90% de los carcinomas de ovario en estadios avanzados y slo en el 50% de los estadios iniciales. Rustin GS et al. Ann. Oncol. 1999; 10 (suppl 1):21-27

Marcadores Marcadores tumorales tumorales en en la la neoplasia neoplasia epitelial de ovario superficial de ovario
Antgeno CA125 Diagnstico (Inmunohistoqumica):
Diagnstico diferencial en metstasis de origen desconocido. Valor limitado. Expresin en adenocarcinomas de crvix, endometrio, tiroides, mama y gastrointestinales.

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Antgeno CA125 Seguimiento: Los niveles de CA125 no descienden hasta tres
semanas despus de la ciruga debido al dao tisular ocasionado. Durante el seguimiento postquirrgico se considera significativa una elevacin del 25% del valor anterior, con una confirmacin posterior; este criterio presenta una especificidad del 100% y una sensibilidad del 40%. En el 70% de las pacientes una elevacin del CA125 es la primera manifestacin de una recidiva en su enfermedad, 4 meses antes de las manifestaciones clnicas. Segn el grupo de van der Burg un examen clnico y ginecolgico aumenta la deteccin de recidivas a un 92%.

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Antgeno CA125
Monitorizacin del tratamiento: Rustin et al. (1996). Definieron una respuesta del 50% cuando se observaba un descenso del 50% de los niveles de dos muestras anteriormente elevadas, confirmndose esta disminucin con una cuarta muestra. As mismo, definieron una respuesta del 75% si exista un descenso del 75%. En cada caso, la ltima determinacin se debe de analizar al menos 28 das despus de la determinacin precedente. La tasa de falsos positivos era menor a un 3 %, sin embargo, la tasa de falsos negativos fue del 21%, lo cual supone un alto porcentaje de mujeres a las que se les suspendera el tratamiento de acuerdo al valor de CA125. En estos casos se debe evidenciar la respuesta con el seguimiento clnico y radiolgico.

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Antgeno CA125
Pronstico: Nagele et al en un estudio con 201 mujeres en estadio I mostraron que el CA125 presentaba valor pronstico independiente en un anlisis multivariante, atribuyndose un riesgo relativo de fallecer 6.3 veces mayor en las mujeres con valores de CA125 superiores a 65 U/ml. En 1999 The American Joint Committee on Cancer (AJCC) consensu que no existan suficientes estudios con el nmero adecuado de pacientes para concluir que los niveles de CA125 preoperatorios presentasen valor pronstico independiente en las mujeres diagnosticadas de cncer de ovario.

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Otros marcadores tumorales
Factor estimulante de colonias de macrfagos (M-CSF) se ha detectado en el suero o en el lquido asctico en el 70% de mujeres con carcinoma epitelial de ovario. OVX-1. Complementario al CA125. Estudios preliminares han puesto de manifiesto la sensibilidad de la determinacin de CA125, M-CSF y OVX-1 del 98% en la identificacin del cncer de ovario en estadios precoces sin embargo, la especificidad era baja y el 11% de las mujeres sanas y el 51% con enfermedades benignas presentaban valores aumentados. cido lipofosfatdico (LPA). Sensibilidad en estadios avanzados cercana al 100% y en enfermedad limitada al ovario del 90% con especificidad del 90%.

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Inmunohistoqumica
Citoqueratinas EMA y CEA Vimentina S-100 WT-1 N-Cadherina Amilasa CK 20 siempre negativa en Seroso Mayor expresin en neoplasias malignas no de tipo seroso. Variable Borderline Positivo slo en Seroso Positiva en Mucinoso Positiva en Seroso y Endometrioide

Laminina y C-IV Prdida de expresin en invasin

Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario

1 Tumores del epitelio de superficie 2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma 3 Tumores de clulas germinales

Hum Pathol. 1998 Aug;29(8):840-5. Mullerian inhibiting substance, alpha-inhibin, and CD99 expression in sex cord-stromal tumors and endometrioid ovarian carcinomas resembling sex cord-stromal tumors. Matias-Guiu X, Pons C, Prat J. Department of Pathology, Hospital de la Santa Creu i Sant Pau, Universitat Autonoma de Barcelona, Spain.

Mod Pathol. 1998 Aug;11(8):769-73 CD99, keratin, and vimentin staining of sex cord-stromal tumors, normal ovary, and testis. Gordon MD, Corless C, Renshaw AA, Beckstead J. Department of Pathology, Oregon Health Sciences University, Portland 97201, USA. Am J Surg Pathol. 2002 Nov;26(11):1477-83. Calretinin, a more sensitive but less specific marker than alpha-inhibin for ovarian sex cord-stromal neoplasms: an immunohistochemical study of 215 cases. Movahedi-Lankarani S, Kurman RJ. Department of Pathology, Johns Hopkins Hospital, Baltimore, Maryland 21231, USA.

Marcadores tumorales en la neoplasia de ovario

1 Tumores del epitelio de superficie 2 Tumores de los cordones sexuales y del estroma 3 Tumores de clulas germinales

Marcadores en tumores de clulas germinales Alfa-feto protena Gonadotropina Corinica Fosfatasa Alcalina Placentaria Lactgeno Placentario CD 117 Citoqueratinas PAGF Desmina

Clula normal
Reparacin del DNA Lesin del DNA Fracaso en la reparacin de DNA

Mutacin
Activacin de oncogenes promotores Inactivacin de Alteracin de genes genes supresores reguladores de apoptosis

Expansin clonal Progresin y heterogeneidad Neoplasia maligna

Marcadores tumorales
El cncer constituye el resultado de la transformacin geno y fenotpica de la clula normal. En los ltimos aos se han realizado esfuerzos para identificar marcadores tumor-especficos, as como eptopos igualmente especficos Cualquier molcula que pueda ser identificada con el proceso de transformacin maligna, proliferacin, desdiferenciacin y metstasis de las clulas neoplsicas puede, en ltima instancia, considerarse un marcador tumoral

Dianas moleculares de la lesin gentica

Protooncogenes Genes supresores Genes reparadores Genes que regulan la apoptosis

Productos de los oncogenes

Factores de crecimiento
PDGF FGF sis sobreexpresin Astrocitoma, osteosarcoma Cncer gstrico Cncer de vejiga, mama, melanoma hst-1 sobreexpresin int-2 Amplificacin

Receptores de factores de crecimiento

EGF erbB1 erbB2 erbB3 fms ret Sobreexpresin Amplificacin Sobreexpresin Mutacin puntual Mutacin puntual Carcinoma epidermoide Carcinoma de mama Carcinoma de mama Leucemia MEN

CSF

Gynecol Oncol. 2004 Apr;93(1):78-86. Expression of platelet-derived growth factor and activated receptor in clinical specimens of epithelial ovarian cancer and ovarian carcinoma cell lines. Apte SM, Bucana CD, Killion JJ, Gershenson DM, Fidler IJ. Department of Gynecologic Oncology, The University of Texas M.D. Anderson Cancer Center, Houston, TX 77030, USA.

Ai Zheng. 2003 Nov;22(11):1162-5. Expression of aFGF and bFGF in ovarian cancer and their Medical University, Shenyang, Liaoning, PR China effect on ovarian cancer cell proliferation Zhang Y, Shang H, Sun LG, Liu N, Yu HY. Department of Gynecology, The First Affiliated Hospital of China.

Methods used to determine EGFR status in human tumors

EGFR target
Protein Expression

Assay
IHC, ELISA, FACS, Ligand-binding assay, Western Blot. Northern Blot, mRNA protection assay, RT-PCR, dot blot, mRNA in situ hybridization Southern bloth, FISH, slot blot, PCR

RNA

Gene amplif/mutation

Int J Gynecol Cancer. 2004 Mar-Apr;14(2):259-70. A new prognostic model comprising p53, EGFR, and tumor grade in early stage epithelial ovarian carcinoma and avoiding the problem of inaccurate surgical staging. Skirnisdottir I, Seidal T, Sorbe B. Department of Gynecology and Obstetrics, University Hospital, Akademiska Sjukhuset, SE-751 85 Uppsala, Sweden. Hum Cell. 2003 Sep;16(3):131-9. Correlation between expression of oncogene products and resistance to anticancer drugs in cultured ovarian cancer cell lines. Okuma Y, Kiguchi K, Koshitaka Y, Okamura A, Ishiwata I, Kondo H, Ishizuka B, Tadokoro M.

DETERMINACION DEL STATUS DE Her-2/ neu

Amplificacin gnica:
Southern Blot Dot Blot PCR Hibridacin in situ Northern Blot Slot Blot Hibridacin in situ Western Blot Inmunohistoqumica Inmunoensayo

Transcripcin:

Sobreexpresin de protena

Herceptest

Ai Zheng. 2004 May;23(5):568-72. Relationship of Expression of C-erbB2, C-erbB3, and CerbB4 with Ovarian Carcinoma. Li L, Zhong YP, Zhang W, Zhang JQ, Yao ZQ. Department of Gynecologic Oncology, Affiliated Tumor Hospital, Guangxi Medical University, Nanning,Guangxi,530021, P.R.China. Int J Gynecol Pathol. 1999 Oct;18(4):338-43. p53, c-erbB, and Ki-67 expression in ovaries removed prophylactically from women with a family history of ovarian cancer. Werness BA, Afify AM, Eltabbakh GH, Huelsman K, Piver MS, Paterson JM. Department of Gynecologic Oncology, Roswell Park Cancer Institute, Buffalo, New York, USA. Arch Pathol Lab Med. 1999 Apr;123(4):310-6. p53, c-erbB2, and PCNA status in benign, proliferative and malignant ovarian surface epithelial neoplasms: a study of 75 cases. Anreder MB, Freeman SM, Merogi A, Halabi S, Marrogi AJ. Baptist-Mercy Medical Center, Department of Pathology, New Orleans, LA, USA.

Productos de los oncogenes

Protenas transductoras de seal
Unin a GTP ras No R TK abl mutacin puntual Traslocacin Ca de pulmn, pancreas.... LMC y LMA L. De Burkitt Neuroblastoma, Carcinoma de c. pequeas Carcinoma de c. pequeas Linfoma del manto Carcinoma de mama, hgado, esfago Glioblastoma, melanoma, Sarcoma

Protenas reguladoras nucleares

myc translocacion transcripcin N-myc Amplificacin
Activadoras de

L-myc Amplificacin

Reguladores del ciclo celular

Ciclinas CDK
ciclina DTraslocacin

Amplicacin

CDK4 Amplificacin o Mutacin puntual

Cancer Res. 2004 Mar 1;64(5):1655-63. A genetically defined model for human ovarian cancer. Liu J, Yang G, Thompson-Lanza JA, Glassman A, Hayes K, Patterson A, Marquez RT, Auersperg N, Yu Y, Hahn WC, Mills GB, Bast RC Jr. Department of Pathology, The University of Texas M. D. Anderson Cancer Center, Houston, Texas 77030, USA. Gynecol Oncol. 2003 Aug;90(2):378-81. Role of KRAS and BRAF gene mutations in mucinous ovarian carcinoma. Gemignani ML, Schlaerth AC, Bogomolniy F, Barakat RR, Lin O, Soslow R, Venkatraman E, Boyd J. Department of Surgery, Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, New York, NY 10021, USA. Mol Cell Endocrinol. 2003 Apr 28;202(1-2):97-9. Genetic alterations in ovarian carcinoma: with specific reference to histological subtypes. Fujita M, Enomoto T, Murata Y. Department of Obstetrics and Gynecology, Osaka Rosai Hospital, Osaka, Japan

Genes supresores y sus productos

Gen Mutaciones somticas <Crecimiento Ca de colon Adherencia Ca estmago, mama <TransduccinSchwannomas ? Schwannomas Funcin

RTGF CadherinaE NF-1 NF-2

APC

Rb

p53 WT-1 p16 BRCA-1

BRCA-2

Mutaciones hereditarias ? Ca gstrico familiar NF 1 y Sarcomas NF 2,Meningiomas y Neurinomas acstico < TransduccinCa estmago, colon Poliposis familar pncreas, melanoma Cancer de colon Reg. Ciclo Retinoblastoma Retinoblastoma osteosarcoma.... Osteosarcoma Reg. Ciclo... Casi todos Li-Fraumeni Transcripcin T. Wilms T. Wilms Reg. Ciclo Ca pncreas, esfago Melanoma Reparacin Cncer de mama y ovario Reparacin Cncer de mama femenina y masculina

Hall J, Paul J, Brown R. Critical evaluation of p53 as a prognostic marker in ovarian cancer. Expert Rev Mol Med. 2004 May 17;2004:1-20 Marx D, Meden H, Ziemek T, Lenthe T, Kuhn W, Schauer A. Expression of the p53 tumour suppressor gene as a prognostic marker in platinum-treated patients with ovarian cancer. Eur J Cancer. 1998 May;34(6):845-50. Hartmann LC, Podratz KC, Keeney GL, Kamel NA, Edmonson JH, Grill JP, Su JQ,Katzmann JA, Roche PC. Prognostic significance of p53 immunostaining in epithelial ovarian cancer. J Clin Oncol. 1994 Jan;12(1):64-9. Anttila MA, Kosma VM, Hongxiu J, Puolakka J, Juhola M, Saarikoski S,Syrjanen K. p21/WAF1 expression as related to p53, cell proliferation and prognosis inepithelial ovarian cancer. Br J Cancer. 1999 Apr;79(11-12):1870-8.

Mol Cell Biol. 2004 May;24(9):3885-93. p150(Sal2) is a p53-independent regulator of p21(WAF1/CIP). Li D, Tian Y, Ma Y, Benjamin T. Department of Pathology, Harvard Medical School, Boston, Massachusetts 02115,USA. Hum Pathol. 2004 Feb;35(2):165-75. Alteration of cell cycle regulators correlates with survival in epithelial ovarian cancer patients. Hashiguchi Y, Tsuda H, Inoue T, Nishimura S, Suzuki T, Kawamura N. Department of Obstetrics and Gynecology, Osaka City General Hospital, Japan. Gynecol Oncol. 2004 Jan;92(1):247-51. Cell cycle and apoptotic proteins in relation to ovarian epithelial morphology. Nnene IO, Nieto JJ, Crow JC, Sundaresan M, MacLean AB, Perrett CW, Hardiman P. Department of Obstetrics and Gynaecology, Royal Free and University College Medical School, Royal Free Campus, London.

Int J Gynecol Cancer. 2003 Sep-Oct;13(5):598-606. Independence of the prognostic value of tumor suppressor o protein expression in ovarian adenocarcinomas: A multivariate analysis of expression of p53,retinoblastoma, and related proteins. Tachibana M, Watanabe J, Matsushima Y, Nishida K, Kobayashi Y, Fujimura M,Shiromizu K. Research Division, Departments of Pathology and Gynecology, Saitama CancerCenter, Saitama, Japan Ann Oncol. 2003 Jul;14(7):1078-85. P21WAF1, P27KIP1, TP53 and C-MYC analysis in 204 ovarian carcinomas treated with platinum-based regimens. Plisiecka-Halasa J, Karpinska G, Szymanska T, Ziolkowska I, Madry R, Timorek A,Debniak J, Ulanska M, Jedryka M, Chudecka-Glaz A, Klimek M, Rembiszewska A,Kraszewska E, Dybowski B, Markowska J, Emerich J, Pluzanska A, Goluda M,Rzepka-Gorska I, Urbanski K, Zielinski J, Stelmachow J, Chrabowska M,Kupryjanczyk J. Department of Molecular Pathology, Institute of Oncology, Roentgena, Warsaw, Poland.

Clula normal
Reparacin del DNA

Lesin del DNA Mutacin

Activacin de oncogenes promotores Fracaso en la reparacin de DNA

Inactivacin de Alteracin de genes genes supresores reguladores de apoptosis

Expansin clonal
Progresin y heterogeneidad Neoplasia maligna

Valverde JJ, Martin M, Garcia-Asenjo JA, Casado A, Vidart JA, Diaz-Rubio E. Prognostic value of DNA quantification in early epithelial ovarian carcinoma. Obstet Gynecol. 2001 Mar;97(3):409-16.

Scott IS, Heath TM, Morris LS, Rushbrook SM, Bird K, Vowler SL, Arends MJ, Coleman N. A novel immunohistochemical method for estimating cell cycle phase distribution in ovarian serous neoplasms: implications for the histopathological assessment of paraffin-embedded specimens. Br J Cancer. 2004 Apr 19;90(8):1583-90.

Clula normal
Reparacin del DNA

Lesin del DNA Mutacin

Activacin de oncogenes promotores Fracaso en la reparacin de DNA

Inactivacin de Alteracin de genes genes supresores reguladores de apoptosis

Expansin clonal

Progresin y heterogeneidad
Neoplasia maligna

ANGIOGNESIS TUMORAL
1-2 mm sin vascularizacin Aporte de nutrientes Secrecin de Factores de crecimento por clulas endoteliales Metstasis VEGF; bFGF