Monitorando a qualidade da água

FEDERAO DA AGRICULTURA DO ESTADO DE PERNAMBUCO - FAEPE COMISSO ESTADUAL DE CARCINICULTURA - COMCARCI SERVIO DE APOIO S MICRO E PEQUENAS EMPRESAS EM PERNAMBUCO
- SEBRAE/PE
Manual para o Monitoramento Hidrobiolgico em Fazendas de Cultivo de Camaro
Elaborao Cleudison de Siqueira Alves (bilogo) Giovanni Lemos de Mello (engenheiro de aqicultura)
Recife 2007
FICHA CADASTRAL Nome do empreendimento:
CNPJ:
rea da propriedade:
rea de viveiros:
Quantidade de viveiros:
Espcies cultivadas:
Proprietrio:
Endereo:
7 36 22 Latitude sul 34 49 40 Longitude oeste
Georeferenciamento da propriedade (GPS)
APRESENTAO Devido necessidade de aglutinar os produtores e solucionar os entraves da produo aqcola de camares, a Faepe e o Sebrae/PE vm realizando esforos no sentido de coordenar aes no setor privado, apoiando diversas atividades, tais como cursos de capacitao, palestras, viagens tcnicas, consultorias em fazendas e divulgao de materiais tcnicos preparados pelos consultores contratados. O Manual para o monitoramento hidrobiolgico em fazendas de cultivo de camaro tem como objetivo fornecer informaes bsicas sobre os principais parmetros a serem monitorados e interpretados em aqicultura, mais precisamente na carcinicultura marinha, bem como documentar as anlises fsico-qumicas e presuntivas realizadas nas fazendas de Pernambuco ligadas Comisso Estadual de Carcinicultura, durante o ano 2007. Em Pernambuco, as anlises nas fazendas so realizadas por um bilogo capacitado, com ampla experincia em anlises de gua e avaliaes presuntivas dos camares de cultivo. A partir dos resultados e da interpretao desses dados, gera-se um conjunto de informaes em tempo real na fazenda, que representa uma importante ferramenta para a avaliao da situao do cultivo em cada viveiro. Na prtica, ao final das anlises, o consultor disponibiliza um relatrio para o produtor, preenchendo uma planilha deste manual, com uma sntese dos resultados encontrados, dos possveis problemas detectados e das sugestes de manejo para solucionar eventuais alteraes. medida que o trabalho for se desenvolvendo, ao longo do ano, o manual se enriquecer de informaes e passar a ser um banco de dados importante para a fazenda e para os rgos ambientais e fiscalizadores.
AGRADECIMENTOS Agradecemos empresa Alfakit, pelo apoio s anlises fsico-qumicas de gua e solo, realizadas em Pernambuco, e pelo fornecimento de material de laboratrio, durante o ano 2006 e incio de 2007. Agradecemos equipe da Agncia Estadual de Meio Ambiente e Recursos Hdricos (CPRH), pela parceria e colaborao prestada na realizao de polticas pblicas sustentveis, no mbito do Plano de Monitoramento Ambiental - PMA - das fazendas de cultivo de camaro ligadas Comisso Estadual de Carcinicultura. Agradecemos ao Sebrae, pela parceria para a efetivao dos projetos que do suporte realizao do presente trabalho. Tais projetos so pioneiros e tm ajudado bastante o setor produtivo a ter apoio tecnolgico, com excelentes resultados no desenvolvimento do setor produtivo da carcinicultura pernambucana.
SUMRIO Apresentao----------------------------------------------------------------------------------------3 Agradecimentos-------------------------------------------------------------------------------------4 1 Introduo-----------------------------------------------------------------------------------------6 2 Principais parmetros fsico-qumicos---------------------------------------------------------7 2.1 Oxignio Dissolvido (OD)-----------------------------------------------------------7 2.2 pH---------------------------------------------------------------------------------------9 2.3 Temperatura--------------------------------------------------------------------------13 2.4 Amnia--------------------------------------------------------------------------------16 2.5 Nitrito----------------------------------------------------------------------------------18 2.6 Nitrato---------------------------------------------------------------------------------20 2.7 Fsforo--------------------------------------------------------------------------------21 2.8 Slica-----------------------------------------------------------------------------------22 2.9 Ferro-----------------------------------------------------------------------------------23 2.10 cido sulfdrico--------------------------------------------------------------------24 2.11 Turbidez-----------------------------------------------------------------------------26 2.12 Alcalinidade-------------------------------------------------------------------------27 2.13 Salinidade---------------------------------------------------------------------------28 2.14 Clorofila A--------------------------------------------------------------------------30 2.15 Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO)-------------------------------------30 2.16 Slidos em suspenso--------------------------------------------------------------31 2.17 Coliformes totais-------------------------------------------------------------------31 3 Anlise de fito e zooplncton-----------------------------------------------------------------32 3.1 Caractersticas do fitoplncton-----------------------------------------------------32 3.2 Caractersticas do zooplncton-----------------------------------------------------34 4 Anlises presuntivas----------------------------------------------------------------------------37 5 Anlises moleculares---------------------------------------------------------------------------41 5.1 Procedimentos para amostragem--------------------------------------------------41 5.2 Diagnstico em situao de doena-----------------------------------------------41 5.3 Diagnstico em crustceos assintomticos---------------------------------------41 5.4 Conservao de amostras para testes moleculares------------------------------43 5.5 Tipos de amostras--------------------------------------------------------------------43 6 Plano de Monitoramento Ambiental---------------------------------------------------------44 Apndice-------------------------------------------------------------------------------------------45 5
1 INTRODUO O Brasil, dentre outros pases produtores de camaro marinho em cativeiro, tem enfrentado, nos ltimos anos, vrios impactos causados por enfermidades que contriburam para a queda dos ndices de desenvolvimento da carcinicultura. O risco do aparecimento de novas ou emergentes enfermidades sempre estar presente, porm a dimenso do seu impacto depender da capacidade das fazendas no controle do grau de sade dos camares estocados, ou seja, na manuteno do ecossistema aqutico com parmetros abaixo do limite tolervel pelos camares. Para isso, preciso conhecer melhor a dinmica desses ecossistemas por meio de monitoramento freqente e contnuo dos viveiros e esturios. Paralelamente ao monitoramento, fundamental fazer o correto registro dos resultados, correlacionando anlises de gua e solo com avaliaes presuntivas dos camares e das comunidades fito e zooplanctnicas dos viveiros, compreendendo melhor as interaes entre os processos fsico-qumicos e biolgicos que compreendem a produo de camares marinhos. No captulo seguinte, apresentamos os principais parmetros de qualidade da gua relacionados com o cultivo de camares marinhos em sistema semi-intensivo e aberto, descritos de maneira simples e prtica, de forma a despertar nos produtores e tcnicos a importncia de quantific-los e monitor-los constantemente. A metodologia que ser apresentada para a realizao das anlises pode ser considerada simples, prtica e, ao mesmo tempo, extremamente confivel, representando uma tima relao custo/benefcio para as fazendas, que podem dispor de um completo monitoramento hidrobiolgico a um custo relativamente baixo.
2 PRINCIPAIS PARMETROS FSICO-QUMICOS 2.1 Oxignio Dissolvido (OD) O Oxignio Dissolvido a mais importante varivel da gua na aqicultura. Da maneira mais abrangente possvel, os produtores precisam entender os fatores que influenciam as concentraes de oxignio na gua de seus viveiros. Devem estar tambm plenamente conscientes da influncia das baixas concentraes de oxignio sobre o desenvolvimento das espcies aqcolas (BOYD, 2000). O oxignio o gs mais abundante na gua depois do nitrognio, e tambm o mais importante, j que nenhum camaro poderia viver sem ele (PIPER ET AL, 1989). De acordo com Petit (1990), dependendo da quantidade de oxignio presente nos viveiros, os organismos aquticos podem enfrentar quatro situaes diferentes: independncia de oxignio (> 5mg/l) - O animal tem O2 suficiente para realizar satisfatoriamente todas as suas atividades metablicas; dependncia alimentar (3 - 5mg/l) - O animal no dispe de O2 suficiente para metabolizar os alimentos ingeridos; dependncia fisiolgica (2 - 3mg/l) - O animal fica estressado e doente; mortalidade (0 - 1mg/l) - O animal morre por hipoxia. De acordo com Boyd (1990), as concentraes do Oxignio Dissolvido decrescem com o aumento da temperatura e da salinidade (ver tabela no Apndice). As concentraes de oxignio no ponto de saturao tambm diminuem com a reduo da presso baromtrica. por isso que, em poca de inverno, os problemas com oxignio so menos freqentes que no vero, pois temos temperaturas e salinidades na gua menores e, consequentemente, maior quantidade de OD. Os viveiros de cultivo possuem cinco fontes principais de oxignio: fitoplncton e plantas aquticas (fotossntese), oxignio atmosfrico (difuso), oxignio da gua adicionada (troca de gua), oxignio a partir de aeradores mecnicos e oxignio oriundo de produtos qumicos. O oxignio pode ser perdido ou consumido atravs da respirao biolgica (seres vivos, gua e lodo), oxidao qumica, difuso para a atmosfera e por meio de efluentes (Figura 1).
Oxignio atmosfrico
(+) Difuso (-)

Fotossntese Plantas Respirao da gua
(+)
Oxignio dissolvido
(-)
CO2 + H2O
(-)
(-)
Plantas Bactrias Zooplncton Peixes Oxidao qumica
Oxidao qumica
Bactrias e bentos
Respirao do sedimento
Figura 1 - Principais ganhos e perdas de oxignio em viveiros de cultivo (FAST; LANNAN, 1992)
Tal como se pode deduzir da Figura 2, durante o dia o nvel de OD eleva-se at alcanar um nvel mximo, devido, quase que totalmente, aos processos fotossintticos. J durante a noite, a respirao biolgica e a oxidao qumica do sedimento provocam uma perda substancial do OD presente nos tanques, podendo alcanar concentraes crticas que colocam em risco os organismos cultivados. Essas flutuaes do Oxignio Dissolvido em tanques variam de acordo com o tipo de cultivo que se est praticando. Como regra, quanto maior a quantidade de organismos por unidade de volume (cultivos intensivos), maior ser a variao diurna do OD. Outro fator que contribui fortemente para grandes variaes e dficit de oxignio o tipo de microalgas predominante - as cianobactrias se desenvolvem muito bem em cultivos semi-intensivos e intensivos e so muitas vezes responsveis por grandes variaes de oxignio.
Oxignio dissolvido (mg/l) 15 C
D 10 B A
5 Saturao 0 06 12 18 06 Hora do dia
Figura 2 - Flutuao diria tpica do OD em tanques de cultivo de camares: (A) cultivo extensivo, (B) cultivo semi-intensivo sem aerao, (C) cultivo intensivo sem aerao, (D) cultivo intensivo com aerao (FAST; LANNAN, 1992)
Observa-se que os cultivos intensivos sem aerao (C) chegam a experimentar elevados teores de oxignio durante o dia, muito mais altos do que seus semelhantes com aerao (D). Isto se explica porque nos cultivos intensivos as altas cargas de nutrientes presentes no alimento dos animais - e as excrees dos mesmos - fomentam um crescimento exagerado do fitoplncton, que responsvel pela grande produo de oxignio durante o dia. Nos cultivos com aerao, o excesso de oxignio rapidamente eliminado para a atmosfera, fato que evita que os animais sofram as conseqncias da doena das borbulhas, muito freqente nas situaes de supersaturao de oxignio (o caso da curva C, perto das 18:00h). gua Trs vezes durante o dia, e a cada duas horas durante a noite Em que parte do viveiro? De preferncia na comporta de despesca, anotando-se o oxignio da superfcie e do fundo Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora? Oxmetro microprocessado 5 - 10 mg/l Aerao mecnica e renovao de gua
Onde medir? Com que freqncia?
2.2 pH O pH um parmetro pouco monitorado e pouco entendido pelas fazendas de cultivo de camaro no Brasil, apesar de muito importante na aqicultura. Possui um profundo efeito sobre o metabolismo e os processos fisiolgicos de todos os organismos aquticos, alm de influenciar em muitos processos qumicos - por exemplo, na disponibilidade de nutrientes que esto diretamente relacionados com a produtividade primria, que por sua vez influencia toda a cadeia trfica da qual o camaro faz parte. O termo pH se refere concentrao de ons de hidrognio (H+) na gua, indicando quo ela cida ou bsica. Por definio, o pH o logaritmo negativo da concentrao de ons de hidrognio, a saber: pH = -log (H+) 9
Para gua pura (H+) = 10-7 , ou seja, o pH 7. pH = -log (10-7 ) = - (-7) = 7 A gua pura no cida nem bsica, porque H+ (acidez) e OH- (basicidade) so iguais em concentrao. Usualmente, a faixa de pH representada por uma escala que vai de 0 a 14, na qual o pH 7 indica absoluta neutralidade (no cido e nem bsico), conforme se pode verificar na Figura 3.
Acidez letal
Alcalinidade letal
10
11
12
13 14
Diminuio do crescimento e da reproduo
Ideal para a maioria dos organismos de cultivo
Diminuio do crescimento e da reproduo
Figura 3 - Representao esquemtica do pH e sua relao com a aqicultura
Tem sido demonstrado que o pH influencia em vrios processos que ocorrem em tanques de cultivo. Vejamos algumas dessas interaes: o pH influenciando a disponibilidade de nutrientes A solubilidade de muitos micronutrientes importantes para a produo primria (fitoplncton) depende do grau de acidez ou alcalinidade da gua. Boyd (1995) credita que o pH desempenha um papel fundamental na disponibilidade de fsforo, to importante para o fitoplncton. Ao aumentar o pH, o fsforo adsorvido pelo clcio presente na gua; j ao baixar o pH (ambiente cido), o fsforo junta-se ao ferro e ao alumnio. Entretanto, em um pH de 6,5, este elemento encontra-se em soluo, livre e amplamente disponvel para ser fixado pelas microalgas. Alm do fsforo, outros nutrientes - ferro, cobre, mangans e zinco - tambm se tornam bastante solveis neste pH (Figura 4). 10
Concentrao Al3+, Fe3+, H+ Mxima disponibilidade Ca2+, OH-
Fosfato
pH 4 5 6 7 8 9
Figura 4 - Solubilidade do fosfato em funo do pH da gua
bom lembrar que mesmo com pH de 6 a 7, a maioria do fsforo que adicionada aos viveiros de cultivo torna-se indisponvel devido adsoro que sofre junto aos colides bipolares do solo, ou pela precipitao sob a forma de compostos insolveis. Contudo, este elemento sempre se encontra em concentraes acima do desejvel em cultivos semi-intensivos e intensivos de camares, em funo do uso dirio de rao (que contm fsforo). Mesmo o fsforo sendo adsorvido pela gua (e tambm pelo clcio, ferro e alumnio) ou pela reao com o lodo (fundo do viveiro), este elemento provavelmente estar sempre em concentraes ideais ou acima da desejvel. o pH influenciando os organismos aquticos Segundo Esteves (1998), o pH possui uma estreita interdependncia entre as comunidades vegetais e animais e o meio aqutico. Este fenmeno ocorre na medida em que as comunidades aquticas interferem no pH, assim como o pH interfere de diferentes maneiras no metabolismo dessas comunidades. Um exemplo da comunidade aqutica interferindo no pH o processo da fotossntese realizado pelas algas. Para realizar tal processo, as algas usam o CO2 (dixido de carbono) do sistema de equilbrio HCO3- (bicarbonato) da seguinte maneira: 2 HCO3- = CO2 + CO32- + H2O medida que o CO2 removido, a reao avana para a direita da equao e o CO32- (carbonato) se acumula. A hidrlise do CO3-2 ocorre de acordo com a seguinte reao: 11
CO32- + H+ = HCO3Quando o H+ usado na hidrlise do CO32-, uma maior quantidade de gua deve dissociar-se para manter a constante de equilbrio da gua. Como resultado, existe mais OH- e menos H+ do que quando a fotossntese se iniciou. Dessa maneira, o pH aumenta medida que a fotossntese remove CO2 da gua. J noite, quando no ocorre fotossntese e o CO2 no retirado, a sua quantidade aumenta com a respirao dos organismos aquticos. Este gs reage com o CO32- e o H2O para formar o HCO3-, que se dissocia para liberar H+. Ento o pH diminui. Os organismos hetertrofos (bactrias e animais aquticos) interferem no pH do meio, em geral reduzindo-o. Esta situao ocorre devido aos intensos processos de decomposio e respirao atravs dos quais h liberao de CO2, que por hidrlise origina cido carbnico e ons de hidrognio, conforme podemos observar na equao: CO2 + H2O = H2CO3 = H+ + HCO3Segundo Leivestad (apud Boyd, 1990), em pH cido o tecido branquial afetado, pois quando os peixes so expostos a baixos teores de pH, a quantidade de muco da superfcie branquial se incrementa. O excesso de muco interfere no intercmbio gasoso e inico, que se realiza atravs das brnquias. Dessa forma, um desequilbrio do balano cido-bsico sanguneo resulta em estresse respiratrio e diminuio da concentrao do cloreto de sdio sanguneo, fato que provoca um srio distrbio osmtico. Com isso, o animal gastar mais energia para osmorregular e, consequentemente, apresentar uma menor taxa de crescimento. Em condies de estresse alcalino, as brnquias tambm so afetadas, ocorrendo uma hipertrofia nas clulas mucosas da base dos filamentos branquiais. Tanto em condies cidas como alcalinas, os camares sofrem mudanas no pH dos fluidos corporais. Para tamponar tais fluidos, estes animais reabsorvem a poro mineral da carapaa (carbonato). Para isso, gastam uma grande quantidade de energia, alm de apresentarem problemas de endurecimento da carapaa. Isto se reflete diretamente no crescimento. Os organismos aquticos tambm sofrem com alguns compostos txicos que so influenciados pelo pH, tais como amnia, enxofre e alumnio. Com o aumento do pH, a amnia vai tendo o seu efeito potencializado. O pH regula tambm a distribuio do total de enxofre reduzido entre suas partes: quanto menor o pH, maior a quantidade de cido sulfdrico no12
ionizado e de ons de alumnio disponvel. Um detalhamento da interao do pH na amnia e no enxofre ser necessrio quando estes forem comentados mais adiante. gua e solo Na gua, duas vezes ao dia; no solo, a cada duas semanas Em que parte do viveiro? Na gua, de preferncia na comporta de despesca, 30 cm abaixo da superfcie; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora? pHmetro digital 7,0 - 9,0* Renovao de gua e aplicao de melao ou probitico, em casos de pH elevado; renovao de gua e aplicao de carbonato de clcio, em casos de pH baixo
* O melhor valor para a fazenda, dentro deste intervalo, vai depender da infra-estrutura e da sua qualidade de gua e solo. Por exemplo, se a fazenda dispe de pouca renovao de gua e no usa probitico, aconselhvel que trabalhe com uma faixa de pH baixa - de 7,0 a 7,5. J se o viveiro apresentar uma grande quantidade de matria orgnica em anaerobiose, o melhor ser trabalhar na faixa de pH compreendida entre 8,0 e 9,0.
2.3 Temperatura Segundo Vinatea (2004), a temperatura no vista como parmetro qumico de qualidade da gua, mas de um fator fsico. um dos principais limitantes numa grande variedade de processos biolgicos, desde a velocidade de simples reaes qumicas at a distribuio ecolgica de uma espcie animal. Peixes e camares so animais pecilotermos e, ao contrrio dos mamferos e aves, a temperatura de seu sangue no est internamente regulada. Em vista disso, a temperatura ambiental tem um profundo efeito sobre o crescimento, a taxa de alimentao e o metabolismo destes animais. Segundo Hardy (1981), os animais pecilotermos encontram-se subordinados ao seu ambiente, j que a sua atividade e sobrevivncia esto permanentemente sujeitas temperatura prevalecente. 13
De vrias maneiras, um ambiente aqutico simplifica o modo de vida pecilotermo. As grandes massas de gua propiciam um ambiente mais estvel. Os invertebrados aquticos e os peixes apresentam uma zona restrita de tolerncia trmica (em nvel de espcie) e temperaturas letais caractersticas, que podem variar por meio de aclimatao experimental ou de habitats com diferentes limites trmicos. Segundo Morales (1996), quanto maior a temperatura, maior ser a velocidade de crescimento dos animais cultivados, sempre que todas as demais variveis se conservarem timas. Quanto mais constante a temperatura, mais previsvel o comportamento dos animais e, portanto, mais fcil ser o seu cultivo nas referidas condies. Variaes considerveis de temperatura por longos perodos causam estresse nos camares, que ficam suscetveis a doenas. No inverno, so comuns grandes variaes de temperatura, o que significa condies de qualidade da gua bastante comprometidas e um efeito drstico nos resultados zootcnicos. medida que aumenta a temperatura, eleva-se a atividade at um ponto limite (plat). Um aumento de temperatura provoca a morte do animal (temperatura letal T2), j a diminuio de temperatura produz uma queda da atividade fisiolgica, apropriada para o transporte e a manipulao de espcimes, sendo que abaixo de uma certa temperatura o animal morre (temperatura letal T1 - Figura 5). O aumento da atividade fisiolgica e metablica implica um maior consumo de oxignio e um incremento das necessidades nutritivas. A temperatura torna-se um fator crtico, pois seu aumento no ambiente produz uma diminuio na solubilidade dos gases na gua e no Oxignio Dissolvido, e um aumento da sua demanda por parte dos organismos.
Temperatura
T2
Temperatura letal 2
Intervalo apropriado para a vida aqutica
T1
Temperatura letal 1 Atividade
Figura 5
A temperatura tem forte influncia no processo de aclimatao de larvas do L. vannamei. Mouro (2002) obteve os melhores resultados de sobrevivncia quando a aclimatao se deu em temperaturas baixas (24C a 27 C). medida que o processo era feito em temperaturas mais elevadas, a sobrevivncia diminua. O mesmo aplica-se 14
na transferncia das larvas para os viveiros, que deve ocorrer nas primeiras horas da manh. Como j foi dito, a temperatura tem um pronunciado efeito nos processos qumicos e biolgicos. Em geral, o ritmo das reaes qumicas e biolgicas dobra a cada 10 C de aumento da temperatura da gua. Isto significa que, no ambiente de 30 C, organismos aquticos usam at duas vezes mais a quantidade de Oxignio Dissolvido consumida no ambiente de 20C. Nos viveiros, o calor entra pela superfcie da gua, que nessa camada esquenta mais rapidamente do que a gua de maior profundidade. Em vista de que a densidade da gua diminui com o aumento da temperatura acima de 4 C, a gua superficial pode ficar to quente e leve que deixa de se misturar com as camadas mais frias e, portanto, mais pesadas. A separao da gua dos viveiros em diversas camadas com diferentes temperaturas conhecida como estratificao trmica. A camada superficial mais quente chamada de epilimnio e, a de maior profundidade, hipolimnio. J a de rpida mudana de temperatura entre o epilimnio e o hipolimnio conhecida como termoclima (Figura 6). Os viveiros de aqicultura que possuem pequenas profundidades e apresentam alta turbidez sofrem um rpido aquecimento da camada superficial em dias ensolarados e com pouco vento. Quando se d a estratificao trmica em um tanque de cultivo, a termoclima facilmente reconhecida como um estrato em que a temperatura muda mais rapidamente com a profundidade.
Epilimnion Termoclina Hipolimnion
Fotossntese Produo de oxignio
Respirao Consumo de oxignio
Figura 6 - Estratificao do Oxignio Dissolvido na gua
A maior incidncia de luz no epilimnio faz com que a fotossntese das plantas, principalmente do fitoplncton, fique favorecida, fenmeno que resulta num aumento do Oxignio Dissolvido nesta camada superficial. O contrrio ocorre no hipolimnio, onde a menor incidncia de luz pode chegar a ser insuficiente para as plantas poderem realizar a fotossntese, passando a respirar com o conseqente consumo de oxignio e a produo de dixido de carbono, que pode acidificar a gua se a alcalinidade no for 15
adequada. Por outro lado, no fundo sempre se deposita a matria orgnica resultante da rao no consumida e da morte do fito e zooplncton. Isto diminuir ainda mais a concentrao de Oxignio Dissolvido devido respirao das bactrias. O lugar da coluna de gua onde termina a fotossntese e comea a respirao conhecido como ponto de compensao, que pode ser facilmente calculado multiplicando a transparncia do disco de Secchi pelo fator 2,5 ou 3,5. Por exemplo, se a transparncia da gua for de 40cm, teramos: 0,40 x 3,5 = 1,40m; portanto, se o viveiro de cultivo tiver 1,35m de profundidade mdia, pode-se dizer que toda a coluna de gua se encontrar iluminada para promover a fotossntese e, consequentemente, a produo de oxignio. J no caso do viveiro ser mais profundo ou da transparncia ser ainda menor, parte do viveiro apresentar condies anaerbicas em funo da respirao. gua Trs vezes ao dia De preferncia na comporta de despesca, anotando-se a temperatura da superfcie e do fundo Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora? Oxmetro microprocessado ou termmetro 26 - 32 oC Aumentar o nvel do viveiro para evitar grandes oscilaes ao longo do dia e cobrir os viveiros com plstico (estufas)
Onde medir? Com que freqncia? Em que parte do viveiro?
2.4 Amnia o principal produto de excreo dos organismos aquticos, resultado do catabolismo das protenas, principalmente da degradao da matria orgnica realizada pelas bactrias. A amnia um gs extremamente solvel e ocorre de duas formas: a amnia no-ionizada (NH3) e o on de amnio (NH4+ ). Quando se encontra em soluo, apresenta a seguinte reao de equilbrio: NH3 + H2O = NH4+ + OH-
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Este equilbrio depende de pH, temperatura e salinidade. medida que o pH aumenta, a amnia no-ionizada tambm cresce em relao ao on de amnio. A temperatura da gua tambm pode causar um aumento na proporo da amnia noionizada, sendo que esse efeito menor do que o provocado pelo pH. Por conveno, diversos autores tm chamado o NH4+ de amnia ionizada e o NH3 de amnia noionizada - a soma destes dois denominada simplesmente de amnia ou amnia total. De acordo com Wuhrmann e Worker (1948), a forma no-ionizada mais txica para os organismos aquticos. Segundo Russo (1985), as membranas branquiais dos peixes so relativamente permeveis ao NH3, mas no ao NH4+. Isto se d devido amnia no-ionizada ser de natureza lipoflica (afinidade por gorduras), difundindo-se facilmente atravs das membranas respiratrias. Por outro lado, a amnia ionizada tem caractersticas lipofbicas (repele gorduras), penetrando com menos rapidez nas membranas, as quais so de natureza lipoprotica (KORMANIK; CAMERON, 1981). Meade (1989) constata que a forma no-ionizada incrementa-se dez vezes para cada grau de pH que aumente na gua. A amnia liberada na gua dos viveiros pode ser usada novamente pelas plantas ou ser nitrificada por bactrias quimioautotrficas. A oxidao do on de amnio em nitrito pela bactria do gnero Nitrosomonas o primeiro passo do processo de nitrificao. Em seguida, o nitrito oxidado em nitrato pela bactria do gnero Nitrobacter, conforme as seguintes equaes: Nitrosomonas: NH4+ + 1 O2 = NO2- + 2H+ + H2O Nitrobacter: NO2- + O2 = NO3Estas reaes de nitrificao so mais rpidas com pH entre 7,0 e 8,0 e temperaturas de 25 C a 35 C (BOYD, 1979). A nitrificao importante na reduo das concentraes de amnia nos viveiros. Isto benfico para a aqicultura, tendo em vista a toxidez potencial desta substncia. Contudo, a nitrificao pode tambm ter efeito adverso na qualidade da gua, por ser uma significante fonte de acidez com liberao de ons de hidrognio (H+) e por exigir requerimento de oxignio para oxidar a amnia. Na ausncia de oxignio, muitos organismos podem usar nitratos ou outros compostos oxidados de nitrognio como fontes de oxignio e como eltrons e receptores de hidrognio no processo da respirao. Tal processo heterotrfico denominado de desnitrificao, onde o nitrato reduzido a nitrito que, por sua vez, pode ser reduzido a xido nitroso, que finalmente pode ser reduzido ao nitrognio perdido pelos viveiros anaerbios. O processo ocorre em solos de viveiros nos quais as 17
concentraes de Oxignio Dissolvido so baixas, representando a forma de maior perda de nitrognio dos viveiros (BOYD, 1990). Problemas de toxidez de amnia so comuns em cultivos de alta densidade, onde a taxa de excreo e alimentao elevada. A toxidez causa vrios efeitos danosos aos organismos aquticos, todos ligados diminuio do crescimento e da capacidade do sistema imunolgico de debelar doenas. Devido ao fato de, na maioria dos casos, a amnia no causar grandes mortalidades, mesmo tendo um efeito subletal (diminuio do crescimento), os produtores ficam sem entender o mau desenvolvimento zootcnico e a baixa sobrevivncia, e as especulaes mais comuns para justificar tais fatos dizem respeito qualidade da larva, da rao etc. Na verdade, o vilo a toxidez por amnia, que geralmente deve estar associada a outros elementos txicos decorrentes da alta densidade. gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada duas semanas Em que parte do viveiro? Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Fotocolormetro At 1,0 mg/l de amnia total e at 0,02 mg/l de amnia no-ionizada Quais os mecanismos de melhora? Renovao de gua, aplicao de melao ou probitico, e aerao mecnica
2.5 Nitrito O nitrito (NO2) a forma ionizada do cido nitroso (HNO2). A reao e ionizao deste composto, segundo Colt e Armstrong (1981), assim se expressam: HNO2 = H+ + NO2O nitrito um composto intermedirio do processo de nitrificao em que a amnia transformada (oxidada) por bactrias para nitrito e, logo a seguir, para nitrato (NO3-), em sistemas de aqicultura (SPOTTE, 1970; BOYD, 1979). 18
O principal efeito do nitrito a oxidao dos pigmentos respiratrios dos peixes e crustceos. O nitrito em altas concentraes provoca a oxidao do tomo de ferro da molcula de hemoglobina, que passa do estado ferroso (Fe+2) para o estado frrico (Fe+3), com a conseqente formao da metahemoglobina (incapaz de transportar oxignio aos tecidos), estabelecendo um quadro de hipoxia e cianose. Acredita-se que o mesmo fenmeno ocorra com o tomo de cobre da molcula de hemocianina dos crustceos (COLT e ARMSTRONG, 1981; CHEN e CHIN, 1988). Existe uma acentuada diminuio na toxidez do nitrito em gua salgada (32,5 ppt), quando comparado em gua doce, podendo o clcio ser o responsvel pelo aumento da resistncia dos peixes ao nitrito (CRAWFORD; ALLEN, 1977). O nitrito tem uma relao direta com o pH - quanto maior o pH do meio, maior a toxidez do nitrito, devido provavelmente ao incremento da forma ionizada (NO2-). Por outro lado, foi verificado que a presena de alguns ons comuns no meio aqutico (cloreto de potssio, cloreto de clcio, bicarbonato de sdio e cloreto de sdio) teve um forte efeito na diminuio da toxidez do nitrito, atuando de forma antagnica na formao da metahemoglobina. importante salientar algumas observaes a respeito da toxidez do nitrito: o nitrito 55 vezes mais txico em gua doce do que em gua salobra (ALMENDRAS, 1987); o nitrito tem efeito negativo na taxa de metamorfose nos estgios larvais de L. vannamei, sendo o estgio de nuplio o mais sensvel (JAYASANKAR; MUTHU, 1983); nas larvas, as altas concentraes de nitrito interferem no processo de ecdise (muda); um importante efeito crnico do nitrito a diminuio da resistncia dos peixes e crustceos contra infeces causadas por bactrias, ficando eles mais suscetveis a doenas; a amnia no-ionizada e o nitrito, quando juntos, ainda que em menores concentraes, so mais letais que quando separados - um pequeno incremento de nitrito, quando a concentrao txica da amnia est prxima, poderia aumentar significativamente essa toxidade. Em viveiros com solo coberto com lona (liners) ou em pr-berrios de fibra e/ou concreto, os valores de nitrito dissolvido na gua tornam-se extremamente elevados, uma vez que as bactrias que transformam a amnia em nitrito se encontram, em sua grande maioria, no solo.
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gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada duas semanas Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Fotocolormetro At 0,5 mg/l Renovao de gua e aplicao de melao ou probitico
Em que parte do viveiro?
Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora?
2.6 Nitrato O nitrato (NO3-) o produto final da oxidao do on de amnio que, como j vimos, compreende dois passos: a transformao da amnia em nitrito por ao das Nitrosomonas e a transformao do nitrito em nitrato por ao de Nitrobacter. Este processo, por realizar-se em condies aerbias, conhecido como nitrificao. J a diminuio do nitrito para a amnia conhecida como desnitrificao e se realiza em condies anaerbias, prprias de ambientes eutrofizados onde ocorre a decomposio da matria orgnica. A toxidez do nitrato em animais aquticos parece no ser um srio problema, o que explica por que os fertilizantes base de nitrato so mais seguros do que aqueles base de amnia. Em sistemas fechados (recirculao), este composto pode se tornar potencialmente txico, como resultado da nitrificao da amnia. A toxidez deste composto devido ao seu efeito sobre a osmorregulao e, possivelmente, sobre o transporte de oxignio. O nitrato desempenha uma importante funo na cadeia trfica dos ecossistemas aquticos, como fonte de nitrognio para as plantas aquticas, base da cadeia trfica. O seu monitoramento de fundamental importncia para estabelecer relaes adequadas de nitrognio e fsforo. Detalhes sobre essa relao sero abordados quando formos discorrer sobre fertilizao.
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gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada duas semanas Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Fotocolormetro At 50 mg/l -
2.7 Fsforo O fsforo menos abundante do que o nitrognio, porm tem grande importncia na biota aqutica. Em geral, limitado para a produtividade biolgica, cujas taxas so governadas pela concentrao de fsforo no ambiente. O fsforo oxida muito facilmente e, nas rochas terrestres, principalmente, incide como ortofosfato (PO43). A principal fonte deste on so as rochas gneas, contendo mineral fosftico: Ca5(PO4)3+. Quando se diz fsforo na gua, h referncia ao fsforo total (fsforo em suspenso na matria particulada e na forma dissolvida) e ao fsforo solvel inorgnico (ortofosfato). Nas comunidades aquticas, o fsforo extremamente importante e fundamental para a vida de certos organismos. Este nutriente um fator limitante para o desenvolvimento do fitoplncton e, quando disponvel no ambiente, rapidamente absorvido. Uma parte do fsforo presente nos viveiros absorvida pelos produtores (fitoplncton e macrfitas) e outra grande parte absorvida pelo sedimento dos viveiros. Como j vimos, o pH regula a disponibilidade de fsforo, tornando-o indisponvel devido precipitao com o alumnio e o ferro (pH cido), ou mesmo com o clcio (pH bsico). Em viveiros que usam grandes quantidades de rao, o fsforo sempre estar em concentraes desejveis ou acima do ideal, mesmo com toda a perda nos sistemas aquticos. Isto se d devido ao uso da rao ser dirio, com vrias aplicaes por dia. Como a rao rica em fsforo, sempre o teremos nos viveiros, no precisando da sua fertilizao. Em sistemas que usam alta densidade, o fsforo extrapola os valores ideais e ento ocorre uma eutrofizao, com conseqentes blooms de cianobactrias que 21
comprometem a qualidade dos resultados dos cultivos e a sustentabilidade da aqicultura.

gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada duas semanas Em que parte do viveiro? Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora? Fotocolormetro At 0,4 mg/l Renovao de gua e, em alguns casos, aplicao de um fertilizante nitrogenado para corrigir a relao N:P
2.8 Slica um macronutriente essencial para o desenvolvimento do fitoplncton, sobretudo das diatomceas, cuja parede celular contm grande quantidade deste elemento. A slica pouco monitorada pelas fazendas e menos ainda usada como fertilizante - o desenvolvimento das diatomceas s se d na presena de concentraes altas de slica (1mg/l). aconselhvel o cultivo de camares em guas com predominncia de diatomceas (gua marrom), pois estas so ricas em cidos graxos (compostos importantssimos para estimular o sistema imunolgico destes crustceos) e tambm de fcil digesto, j que sua parede celular de slica (inorgnico). Alm disso, provocam menores variaes de parmetros qumicos como o pH e o oxignio - essas variaes tm uma grande ligao com enfermidades que atingem os camares. fato que viveiros com predominncia de diatomceas apresentam menor acmulo de matria orgnica, ao longo do tempo, quando comparados com viveiros onde predominam cianobactrias. No se tem conhecimento, at o momento, de diatomceas como vetores de vrus que causem enfermidades ao camaro, ao contrrio das cianobactrias, que so vetores do vrus da Mionecrose Infecciosa (NUNES, 2005). A slica quando presente nas microalgas parece desempenhar um papel importante na nutrio de certos invertebrados de cultivo, como ostras e camares (RODHOUSE, 1983). O mesmo autor demonstrou que em se alimentando ostras com 22
Skeletonema sp., Nitzschia sp. e Chaetoceros sp., ricos em slica, o crescimento e o ndice de condio do molusco melhoram significativamente, em comparao com uma alimentao base de microalgas cultivadas em meios pobres deste elemento. O uso da slica e a sua relao com os outros fertilizantes sero abordados no item referente fertilizao. gua Uma vez por semana Coletar gua da superfcie e do fundo Fotocolormetro Acima de 1 mg/l Aplicao de metasilicato de sdio - em alguns casos, farelo de arroz
Onde medir? Com que freqncia? Em que parte do viveiro? Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora?
2.9 Ferro O efeito dos metais pesados nos organismos aquticos ainda pouco estudado e quase nenhuma fazenda faz monitoramento de metais pesados. O ferro um importante parmetro a ser monitorado durante as fundaes das fazendas e o seu funcionamento. comum fazendas apresentarem problemas de ferro nos solos dos viveiros, onde este elemento passa para a gua pelo processo de dissoluo. Boa parte do ferro presente na gua absorvida pela argila e quelada (entram na composio de complexos orgnicos) pela matria orgnica. A toxidez do ferro est relacionada, primariamente, com a forma inica dissolvida (ferro ferroso Fe2+), muito mais do que com as formas absorvidas, queladas ou complexadas. Uma pequena porcentagem de ferro em muitas guas estuarinas encontrada na forma inica, de tal modo que a forte toxidez desses metais geralmente no constitui um problema nos viveiros. O efeito danoso do ferro geralmente est mais relacionado com concentraes elevadas no solo. comum fazendas construdas em solos arenosos retirarem camadas dessa areia antes da construo dos viveiros. Com isso, o ferro que estava protegido por essa camada entra em contato com a gua, aumentando a sua concentrao. O ferro parece retirar os carbonatos e bicarbonatos da gua, pois viveiros com altos teores de ferro apresentam problemas de baixa alcalinidade e tambm pH baixo no solo e na gua. 23
Em solos argilosos, o ferro tambm se apresenta em grandes quantidades, ocasionando problemas de acidez e alcalinidade. Em solos orgnicos (manguezal), o problema ainda maior, pois neles predomina o metabolismo obtido da reduo de sulfato, onde existem grandes quantidades de sulfeto - este geralmente no fica livre (precipita-se com o ferro e fica estvel). Quando o sulfeto de ferro oxidado, alm de gerar acidez, porque gera H2SO4 (cido sulfrico), libera tambm ferro livre. Este ferro migra para a gua, que vai ter o oxignio formando o hidrxido de ferro (um colide), e se acumula na interface do sedimento com ela, no fundo dos viveiros, exatamente onde vivem os camares (bentnicos). Esses flocos de hidrxido de ferro entopem as brnquias do camaro. Logo, um estudo de perfil do solo se faz necessrio antes da construo de uma fazenda. importante salientar que solos de manguezal so inviveis para a produo de camaro. gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada ms Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Fotocolormetro At 0,5 mg/l na gua Aplicao de carbonato de clcio e renovao de gua
2.10 cido sulfdrico (H2S) De acordo com Boyd (1990), o ciclo do enxofre encontra-se fortemente influenciado por certos processos biolgicos, j que grande parte do enxofre presente na matria orgnica se encontra dentro das protenas de origem vegetal e animal. Sob condies anaerbicas, certas bactrias heterotrficas podem usar sulfato e outros compostos oxidados de enxofre como eltrons receptores terminais, excretando sulfitos, como se demonstra a seguir: SO42- + 8H+ S2- + 4H2O Estes ons sulfdricos formam uma parte da reao de equilbrio do cido sulfdrico (H2S), qual seja: H2S = HS- + H+ HS- = S2- + H+ 24
O pH regula a distribuio dos sulfitos totais entre as suas diferentes formas (H2S, HS- e S2-). O sulfito de hidrognio no-ionizado txico para os organismos aquticos, contudo as formas inicas no apresentam toxidez acentuada. Uma tabela que mostra a porcentagem de cido sulfdrico em funo da temperatura e do pH encontrase no Apndice. De acordo com Morales et al (1992), a reduo microbiana dos ons sulfatos para sulfetos depende do potencial redox do sedimento e do pH predominante. No chegam a se produzirem grandes quantidades de sulfetos quando o potencial redox est acima de -150mV ou com valores de pH entre 6,5 e 8,5. O potencial redox um conceito fsico-qumico que indica a proporo de substncias oxidadas (comuns em meios aerbios) e reduzidas (comuns em meios anaerbios) de uma soluo. Os valores extremos para viveiros muito oxidados so da ordem de 600mV e de -300mV para fundos muito reduzidos (Figura 7).
A partir daqui se forma o H2S Presena de oxignio
S-2 SO4-2 CH4 CO2
Fe +2 Fe+3
Mn+2 Mn+4 N2 NO3H2O O2
-300 mV -100 Ambiente anaerbio
+100
+300 Figura 7
+500
+700 mV Ambiente aerbio
gua e solo Na gua, uma vez por semana; no solo, a cada duas semanas Na gua, de preferncia na comporta de despesca; no solo, em pelo menos trs pontos por viveiro Fotocolormetro No detectvel Na gua, renovao e aerao mecnica; no solo, incremento do oxignio do fundo, gradeamento no perodo de entressafra e aplicao de gesso agrcola na preparao 25
2.11 Turbidez Existem dois tipos bsicos de turbidez nos viveiros: a que resulta do crescimento do fitoplncton e a que ocasionada pelas partculas de slidos suspensos. Ambas restringem a penetrao da luz na gua - uma menor quantidade de luz no fundo evita ou limita o crescimento de indesejveis filamentos de algas aquticas. Porm, o fundo no deve ser destitudo totalmente de luz, pois teremos um ambiente anaerbio. Assim, o produtor deve estar atento para o ponto de compensao. Os viveiros com gua transparente contm pouco fitoplncton, o que pode significar uma limitada quantidade de alimento natural para o camaro. Em alguns casos de guas transparentes, as algas crescem no fundo dos viveiros (algas bentnicas) e proporcionam alimento natural para o camaro. O ideal se trabalhar com uma transparncia onde se possa ter fitoplncton e fitobento. Sempre bom lembrar que viveiros que possuem excesso de fitoplncton sofrem com dficit de oxignio, acmulo de matria orgnica e variaes indesejveis de parmetros qumicos que causam estresse ao camaro. Em existindo excesso de cianobactrias, ainda h um grande risco de o camaro sofrer com toxinas. A turbidez das partculas de solo suspenso um problema comum nos viveiros, especialmente nos de gua doce com baixas concentraes totais de slidos dissolvidos. As partculas de argila que entram nos viveiros pela gua podem ser suspensas pela ao de ondas, correntes de gua geradas por aeradores e organismos aquticos (viveiros rasos sofrem mais com este efeito). As partculas coloidais de argila tm carga eltrica lquida negativa em suas superfcies - assim repelem-se umas s outras. Muitas vezes, viveiros com turbidez de solo suspenso apresentam gua de baixa alcalinidade, podendo causar sujidade nas brnquias do camaro e dificuldade nas trocas gasosas e osmorregulao. Onde medir? Com que freqncia? Em que parte do viveiro? Que tipo de equipamento utilizar? Qual o nvel ideal? Quais os mecanismos de melhora? gua Uma vez ao dia - entre 12:00 e 13:00h De preferncia na comporta de despesca Disco de Secchi 40 a 60 cm Renovao e aplicao de calcrio e de fertilizantes qumicos inorgnicos, em casos de transparncia elevada 26
2.12 Alcalinidade A concentrao de bases na gua, expressa em miligramas por litro do equivalente de carbonato de clcio (CaCO3), a alcalinidade total. As bases na gua incluem hidrxido, amnia, borato, fosfato, silicato, bicarbonato e carbonato, sendo que estas duas ltimas so encontradas em concentraes bem maiores do que as demais. As guas com pH superior a 8,3 contm uma pequena frao de dixido de carbono livre, tendo um padro mensurvel de acidez. Porm, do ponto de vista da aqicultura, a acidez mensurvel tem pouco interesse quando a gua apresenta certa alcalinidade. Praticamente, somente nas guas com pH inferior a 4,5 (sem alcalinidade) o CO2 presente incapaz de tornar mais cidas estas guas. Entretanto, nas guas com presena de cidos orgnicos ou minerais (cidos sulfrico, hidrxido ou ntrico), o pH poder cair a menos de 4,5. A origem mais comum de acidez mineral em tanques de aqicultura o cido sulfrico, originado pela oxidao da pirita de ferro (FeS2). Em guas naturais, o CO2 liberado pelos processos respiratrios do fitoplncton e dos organismos, assim como adicionado da atmosfera por difuso. A remoo do CO2 da gua provoca um aumento do pH. Em ambientes de cultivo, onde o fitoplncton costuma proliferar em grandes quantidades (blooms algais), o pH pode aumentar bastante devido liberao de ons hidroxila (OH-), resultantes da hidrlise do bicarbonato realizada pelas clulas vegetais para obteno de CO2. O sistema buffer de bicarbonato evita essas mudanas repentinas de pH. Se a concentrao dos ons de hidrognio aumentar, este ir reagir com bicarbonato para formar CO2 e gua; sendo assim, o equilbrio mantido e o pH varia apenas um pouco (Figura 8).
pH 9,0
8,0
7,0
06:00 12:00 18:00 06:00 Hora Figura 8 - Oscilaes do pH em viveiros de cultivo, 24:00 em funo da alcalinidade da gua (BOYD, 1995)
Alm da importncia do efeito tampo na gua, a alcalinidade tambm exerce uma grande influncia no equilbrio dos organismos aquticos. Viveiros com solos com 27
altas concentraes de ferro e alumnio, possuem nveis de alcalinidade baixos, onde estes reagem com os carbonatos e bicarbonatos, precipitando-os. Com isso, a alcalinidade cai para nveis drsticos e afeta todo o equilbrio qumico da gua. Com os nveis de carbonato e bicarbonato baixos, a fotossntese fica comprometida e o viveiro experimenta uma queda no fitoplncton. Aumentando a transparncia, ocorre tambm um desequilbrio inico afetando a osmorregulao dos camares. A ecdise (muda) tambm afetada com a dificuldade de endurecimento da carapaa. gua Uma vez por semana De preferncia na comporta de despesca Titulao com cido sulfrico 120 - 180 mg/l Aplicao peridica de carbonato de clcio (CaCO3)
2.13 Salinidade A salinidade definida como a concentrao total de ons dissolvidos na gua. Frequentemente a salinidade expressa em miligrama por litro (mg/l), porm na aqicultura mais comum express-la em partes por mil (ppt ou ). A salinidade da gua doce considerada sempre como zero, entretanto a maioria das guas continentais possui de 0,05 ppt a 1,0 ppt de salinidade. Nas regies ridas, as guas interiores podem ser altamente salinas. guas que contm mais de 0,5 de salinidade, geralmente no so adequadas para fins domsticos. A gua do mar tem uma salinidade de 30 a 35, j as guas estuarinas podem variar de cerca de 0 a 30. Se as guas marinhas ou estuarinas so colocadas dentro de tanques de aqicultura durante as pocas secas, a evaporao pode incrementar a salinidade. Os ons de sdio, potssio, clcio, magnsio, cloro, sulfato e bicarbonato so os maiores contribuintes para a salinidade da gua (Tabela 1). Tambm existem na gua elementos como o fsforo, nitrognio inorgnico, ferro, mangans, zinco, cobre, boro, que em pequenas quantidades so essenciais para o crescimento do fitoplncton.
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Tabela 1 - Concentrao tpica dos maiores ons (mg/l) em gua do mar, salobra e doce ----------------------------------------------------------------------------------on gua do mar gua salobra gua doce ----------------------------------------------------------------------------------Cloro 19,000 12,090 6 Sdio 10,500 7,745 8 Sulfato 2,700 995 16 Magnsio 1,350 125 11 Clcio 400 308 42 Potssio 380 75 2 Bicarbonato 142 156 174 Outros 86 35 4 Total 34,558 21,529 263 --------------------------------------------------------------------------------Fonte: Boyd, 1989. O cultivo de camaro , na sua maioria, desenvolvido em reas costeiras planas, onde a gua do mar se mistura com a gua doce dos rios. As concentraes de salinidade nos rios, canais e gamboas que abastecem os viveiros de camaro so reguladas pelas propores da mistura de guas salgadas e doces. No inverno, o volume de gua dos rios aumenta, influenciando as concentraes de salinidade dos esturios, diminuindo-as. A diminuio da salinidade em si no um grande problema para o L. vannamei, j que o mesmo apresenta alta capacidade de osmorregulao e se adapta salinidade baixa, desde que a alcalinidade e a dureza se mantenham em nveis adequados. O maior problema enfrentado pelos camares no a diminuio da salinidade ou da temperatura, mas o aporte de guas fluviais oriundas da lixiviao. Essas guas so ricas em nutrientes, agrotxicos e metais pesados, o que compromete a qualidade do ecossistema aqutico. Mas o principal problema para um mau desenvolvimento zootcnico dos camares diz respeito ao fato de que, com o grande aporte de gua doce nos esturios, ocorre uma descompensao inica que afeta enormemente a osmorregulao dos camares. Estes alocam grande parte da energia que usariam para o crescimento e para o sistema imunolgico na osmorregulao incessante. Isto causa um estresse no animal, que fica muito mais suscetvel a doenas. Alm do mais, os nveis de alcalinidade caem, o que acarreta comprometimento tambm do sistema osmorregulatrio e da ecdise. comum, nesta situao, observar que os camares rodam mais que o normal (s vezes passam at oito dias seguidos). Isto uma estratgia deles para aumentar o fluxo de gua nas brnquias, na tentativa de compensar o dficit de ons. Outro grave problema a diminuio dos micronutrientes
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dissolvidos na gua, comprometendo o contedo das microalgas e afetando a sua qualidade nutricional. gua Uma vez por semana De preferncia na comporta de despesca Refratmetro 15 25 ppt Monitoramento da gua do esturio para bombeamento em momento ideal Os parmetros descritos no so muito usados no manejo dos viveiros de aqicultura, porm so bastante usados para estimar a fora dos elementos de poluio dos efluentes, sejam urbanos ou ligados ao agronegcio. Em vista das recentes preocupaes sobre os efeitos dos efluentes de viveiros nos corpos dgua onde so despejados, de se esperar que as questes de manejo ambiental se transformem em uma rea crtica da aqicultura. Portanto, os produtores devem estar familiarizados com tais parmetros, principalmente para mant-los dentro dos limites aceitveis pela legislao.
2.14 Clorofila A A clorofila A um pigmento que auxilia a fotossntese das algas e usado como um dos indicadores de produtividade primria, que uma estimativa da quantidade de matria orgnica fixada pela fotossntese. Nos viveiros, o fitoplncton usualmente representa o maior produtor de matria orgnica. A produtividade primria corresponde ao aumento de biomassa, em um dado intervalo de tempo, considerando todas as perdas ocorridas no perodo. Desta maneira, a produo primria a quantidade de matria orgnica acrescida pela fotossntese ou quimiossntese, de acordo com um intervalo de tempo.
2.15 Demanda Bioqumica de Oxignio (DBO) A taxa de consumo de oxignio pelo fitoplncton e bactrias, numa amostra de gua, medida para determinar a Demanda Bioqumica de Oxignio. Uma amostra de 30
gua bruta ou diluda incubada no escuro, por cinco dias, a 20 C. A perda de Oxignio Dissolvido na gua durante o perodo da incubao a DBO. Quanto mais elevada for a DBO, maior ser o grau de enriquecimento da gua do viveiro com matria orgnica. A reduo do oxignio a nveis mnimos representa um perigo nos viveiros sem aerao mecnica, quando a DBO excede 20mg/l.
2.16 Slidos em suspenso Todas as impurezas da gua, com exceo dos gases dissolvidos, contribuem para a carga de slidos presentes nos recursos hdricos e podem ser classificadas de acordo com o seu tamanho e caractersticas qumicas. Os slidos suspensos so medidos pesando a quantidade do material retido quando a gua passa por um filtro fino.
2.17 Coliformes totais As bactrias coliformes, como a Escherichia coli e os estreptococos fecais (enterococos), que residem no intestino humano, so eliminadas em grandes quantidades, nas fezes do homem e outros animais de sangue quente - uma mdia de 50 milhes por grama. O esgoto domstico bruto, geralmente, contm mais de trs milhes de coliformes/100ml. Segundo o Ministrio da Sade, os coliformes so definidos como todos os bacilos gram-negativos capazes de crescer na presena de sais biliares ou outros compostos ativos de superfcie (surfatantes), com propriedades similares de inibio de crescimento, que fermentam a lactose com a produo de aldedo e gs. Coliformes fecais ou coliformes termolatentes so bactrias do grupo dos coliformes que apresentam uma temperatura de 44,5 C, mais ou menos 0,2 por 24 horas (BRASIL, 1990). A contagem de bactrias dada em Unidades Formadoras de Colnias (UFC) e obtida por semeadura em placa de Petri.
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3 ANLISE DE FITO E ZOOPLNCTON Com o crescente desenvolvimento da aqicultura nos ltimos anos, estudos e pesquisas que abordam a produo do fito e zooplncton, em grande escala, so muito relevantes. O plncton constitui a unidade bsica da produo de matria orgnica nos ecossistemas aquticos. As zonas de maior riqueza pesqueira no mundo so aquelas onde o plncton abundante, uma vez que ele essencial na dieta de muitos organismos aquticos, principalmente nas primeiras fazes do cultivo de camares. A produo controlada de fito e zooplncton (marinho e de gua salobra) j bem conhecida, principalmente em pases como Japo, Frana, Espanha e Estados Unidos, mas no Brasil so necessrios estudos voltados para a produo em larga escala, com a utilizao de espcies regionais de fcil obteno de inculos. Um dos fatores mais importantes para o sucesso no cultivo de camares e peixes a utilizao de alimento natural, em especial nos estgios iniciais de desenvolvimento. A necessidade de alimento natural pode ser resolvida pelo cultivo do fito e zooplncton em instalaes especiais designadas para este propsito. Diversos autores tm enfatizado que o alimento vivo, devido ao seu contedo de cidos graxos essenciais e enzimas, essencial para o crescimento e a sobrevivncia dos camares, principalmente nas fases larval e juvenil.
3.1 Caractersticas do fitoplncton As microalgas, como todos os vegetais, possuem clorofila e outros pigmentos com os quais realizam a fotossntese. Por meio desse processo, estes organismos produzem matria orgnica a partir de sais inorgnicos, gua e dixido de carbono, utilizando como fonte de energia a luz solar. A reproduo do fitoplncton nos viveiros depende, principalmente, dos nutrientes inorgnicos (N, P, Si e K) disponveis no ambiente. Estes elementos so geralmente escassos na gua de captao para abastecimento dos viveiros, sendo necessrio fertilizar a gua para estimular o desenvolvimento destes organismos, o que dever concorrer para manter uma boa qualidade da gua e incrementar o alimento natural nesses ambientes. A florao de microalgas est relacionada com a freqncia, o tipo e as dosagens dos fertilizantes, bem como com a densidade do animal cultivado. A resposta s fertilizaes se d por meio da colorao da gua do viveiro, determinada pela presena de grupos especficos de microalgas. Porm, dependendo da espcie 32
predominante, as floraes podem representar um risco para o produtor, como o caso das floraes de cianobactrias. Estas so as principais causadoras da perda da qualidade da gua, por reduzirem a transparncia ou os nveis de oxignio na coluna de gua e no sedimento dos viveiros com circulao restrita. A predominncia das cianobactrias conseqncia da queda do nitrognio decorrente da absoro por estas algas. Paralelamente, os nveis de fsforo vo aumentando e a relao Nitrognio/Fsforo (N/P) diminui, favorecendo ainda mais as cianobactrias. Mesmo com os nveis baixos de nitrognio, as cianobactrias continuam se proliferando, pois tm a capacidade de absorver nitrognio atmosfrico, sobressaindo-se em relao s outras microalgas. A colorao da gua depende dos tipos de pigmentos encontrados nos grupos de microalgas predominantes no ambiente aqutico (Tabela 2). Se forem algas verdes (clorofceas) ou verde-azuladas (cianobactrias), a gua ter uma cor esverdeada; se forem algas marrons (diatomceas e dinoflagelados), a gua ter a cor marrom (no confundir com a colorao marrom decorrente do excesso de argila em suspenso). Da mesma forma, os organismos com colorao vermelha, como o ciliado autotrfico Mesodinium rubrum, ou certos dinoflagelados, entre eles a Scrippsiela trochoidea, tornaro a gua vermelha. Portanto, h um desafio constante em manter a gua com floraes algais de grupos que favorecem uma boa qualidade, tais como as diatomceas e clorofceas.
Tabela 2 - Principais pigmentos encontrados nas microalgas
Grupos Crysophyta Pyrrophyta Chorophyta Cyanophyta Euglenophyta
Nome comum Diatomceas Dinoflagelados Clorofceas Cianobactrias Euglenofceas
Pigmentos Clorofila A e C, e fucoxantina Clorofila A e C, e fucoxantina Clorofila A e B Clorofila A, ficoeritrina e ficocianina Clorofila A e B
A transparncia da gua, medida com o disco de Secchi, uma informao muito importante. Porm, o simples resultado da leitura no suficiente para indicar a qualidade da gua, j que necessrio conhecer o que pode estar interferindo nessa medio. Seria a presena de microalgas? De que espcies? Seriam nocivas ao camaro? Qual a quantidade (cel/ml)? Essa transparncia seria resultado da presena macia do zooplncton? A anlise microscpica do plncton torna-se, portanto, 33
importante para responder a essas perguntas, principalmente se for feita antes do povoamento do viveiro. Com relao densidade algal, na Tabela 3 encontram-se indicados os nveis considerados ideais em viveiros semi-intensivos. Os viveiros podem conter predominantemente um grupo de algas indesejveis ou potencialmente txicas que, em concentraes elevadas, podem causar a mortalidade dos camares por meio de liberao de toxinas, ou propiciar o acmulo de neurotoxinas e hepatotoxinas na cadeia trfica, como o caso das cianobactrias. No caso de camares cultivados em gua de baixa salinidade, a florao deste grupo de algas pode provocar gosto e odor desagradveis na gua e nos camares (off flavor).
Tabela 3 - Densidade algal em viveiros semi-intensivos Grupo de algas Diatomceas Clorofceas Cianobactrias Dinoflagelados Algas totais Mnimo 20.000 50.000 10.000 --80.000 Mximo ----40.000 500 300.000
de suma importncia conhecer qual microalga est predominando no ambiente, bem como a sua concentrao, para que sejam tomadas medidas quanto aplicao de fertilizantes ou uso de trocas de gua. Este controle evita tambm o crescimento excessivo de algas, que ter como conseqncia o processo de eutrofizao, que vem a ser o aumento nos nveis de matria orgnica da gua em funo da maior disponibilidade de nutrientes. Diante do exposto, as fazendas necessitam implementar anlises fsico-qumicas e biolgicas para realizar um manejo correto e em tempo real.
3.2 Caractersticas do zooplncton O zooplncton dos viveiros de camaro constitudo principalmente por Protozoa, Rotfero e Crustcea, este ltimo composto por Copepoda e Cladocera. Apesar de ser pouco monitorado e pouco entendido pelos produtores, o zooplncton desempenha um importante papel na nutrio e no equilbrio do ecossistema aqutico.
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3.2.1 Rotferos So organismos microscpicos, pseudocelomados e com simetria bilateral. Caracterizam-se por possuir uma coroa e um mstax que apresentam uma srie de peas que atuam como uma estrutura mastigadora. A reproduo partenogentica por ovos diplides. Alguns rotferos so vivparos, carregando um ou mais embries em um oviduto. Em resposta s adversidades das condies ambientais, algumas fmeas, chamadas mticas, podem produzir ovos haplides, os quais do origem aos machos. Os rotferos so considerados um excelente alimento para larvas de crustceos e peixes, devido ao pequeno tamanho e ao estmulo sensorial causado por sua constante movimentao na massa de gua, alm do curto ciclo de vida e do alto valor nutritivo dos mesmos.
3.2.2 Cladoceras Os cladoceras representam um dos grupos mais caractersticos de guas doces. So popularmente conhecidos como pulgas dgua. A maioria apresenta um tamanho entre 0,2 e 3,0 mm (ou mais) e possui cabea e corpo cobertos por uma dobra de cutcula, a qual estende-se para trs e para baixo, a partir do lado dorsal da cabea, constituindo uma carapaa bivalva. A reproduo por partenognese e o nmero de ovos varia de dois, como em Chydoridae, a mais de 20, como em Daphidae, os quais so depositados em uma cmara, onde se desenvolvem. Os cladoceras so encontrados em todos os tipos de gua doce, mas geralmente os lagos, reservatrios e viveiros contm uma densidade muito maior do que os rios. A Moina considerada um gnero de fcil cultivo e possui admirveis atributos para utilizao na aqicultura, tais como o alto valor nutritivo e a reproduo partenogentica, que permite a obteno de uma grande populao em curto espao de tempo. Tambm vista como uma presa fcil, devido sua forma e ao dimetro e pigmentao do seu olho (LAZZARO, 1987).
3.2.3 Coppodes So os microcrustceos mais importantes no plncton marinho, mas no plncton de gua doce eles compartilham esta posio com os Cladoceras. Podem ser parasitas ou de vida livre, e compreendem trs subordens: Calanoida, Cyclopoida e Haparcticoida. Todas so encontradas em guas doces, marinhas e salobras. Das trs 35
subordens, a mais utilizada no cultivo para alimentao de larvas de peixes a Calanoida. Geralmente, os Cyclopoidas so carnvoros e os Haparcticoidas so detritvoros. A reproduo do tipo sexuada e o macho bem menor que a fmea. Os machos apresentam, na antena, uma musculatura que permite dobr-la para segurar a fmea para copulao. Informaes sobre alimentao de coppodes, particularmente Calanoidas, indicam que o nanofitoplncton a principal fonte de energia existente para estes organismos, sendo que bactrias e detritos podem funcionar como fonte adicional e, s vezes, alternativa.
3.2.4 Protozoas Os protozoas compreendem um grupo com cerca de 15.000 a 20.000 organismos. Cada indivduo completo em seus contedos, porm so organismos unicelulares. Muitos contm mais de um ncleo e, geralmente, o protoplasma no dividido em compartimentos pela membrana celular. Por outro lado, h muitas espcies de protozorios coloniais, e muitos indivduos so envoltos por uma membrana. Os coloniais geralmente apresentam um ncleo simples. As espcies de protozorios vivem sob diversas condies e obtm seu alimento de vrias maneiras. O modo de vida pode ser livre ou associado a organismos maiores. Podem viver sobre a superfcie, chamados de ectozicos, ou dentro de outros organismos, chamados de endozoicos. Ambos podem ser comensais, parasitas ou simbiticos. bem conhecido o papel de destaque que desempenham como consumidores de bactrias, em ambientes ricos em matria orgnica, reduzindo significativamente a porcentagem da mesma. Tambm atuam como consumidores de fitoplncton, podendo, por sua vez, ser consumidos por diferentes espcies de Cladocera, Copepoda e Rotifera, alm de serem extremamente eficientes na ciclagem de nutrientes. Em viveiros de camaro que apresentam excesso de matria orgnica, protozorios parasitas como Vorticella, Zoothamnium e Epstylis causam impregnao nas brnquias, epipodito e carapaa, prejudicando suas funes fisiolgicas.
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4 ANLISES PRESUNTIVAS O camaro, a exemplo de outros animais aquticos, suscetvel a diversas patologias, quase sempre relacionadas a ocorrncias de estresses ambientais, razo pela qual a adoo de cuidados sanitrios para a manuteno do setor produtivo, dentro dos padres de sanidade e qualidade, constitui uma ferramenta indispensvel no controle e preveno de doenas. As tcnicas para identificao de patgenos, alm das tcnicas simples como as anlises presuntivas, incluem tcnicas tradicionais de bacteriologia e histologia e procedimentos complexos baseados em biologia molecular. As anlises presuntivas representam a maneira mais vivel, do ponto de vista do produtor, para identificar processos patolgicos. Essas anlises so caracterizadas por tcnicas laboratoriais de diagnstico rpido e consistente, na avaliao de estruturas especficas, mediante a preparao de amostras pela tcnica de montagem em fresco de lminas e sua observao direta atravs de microscopia. A minimizao de danos causados por enfermidades nos camares cultivados pode ser conseguida atravs das anlises presuntivas, associadas adoo de uma srie de procedimentos de monitoramento que, realizados sistematicamente, funcionam como um eficaz instrumento de preveno do estresse e dos efeitos adversos de patgenos oportunistas. Essas anlises devem ser realizadas seguindo as seguintes etapas: recolhimento das amostras e coleta Devem ser recolhidas amostras semanais em todos os viveiros, a partir da primeira semana de povoamento. H coleta de 10 a 20 indivduos de cada viveiro, atravs de amostragem dirigida, que consiste no recolhimento de animais moribundos, letrgicos ou que apresentem caractersticas externas anormais, indicando a presena de algumas enfermidades. acondicionamento das amostras fundamental acondicionar as amostras de cada viveiro em baldes separados e numerados para, em seguida, lev-los ao laboratrio, colocando uma mangueira com pedra de aerao em cada um, a fim de manter os indivduos vivos. O tempo entre a 37
captura e a realizao das anlises em laboratrio no deve exceder o perodo mximo de duas horas. pesagem do camaro Antes de iniciar as anlises, cada indivduo deve ser pesado e o seu peso ser anotado em planilha. realizao das anlises visuais necessrio avaliar as estruturas externas - rostro, pleopodos, pereipodos, antenas, antnulas, telso e carapaa, buscando sinais de deformaes, necroses multifocais, expanso dos cromatforos, brnquias escurecidas, sinais caractersticos de opacidade muscular ou qualquer outro sintoma caracterstico de alguma anormalidade. retirada da hemolinfa para avaliao do tempo de coagulao Tal procedimento deve ser realizado com o camaro ainda vivo, de acordo com os seguintes passos: secar o camaro por inteiro, com a ajuda de um papel-toalha, para que a gua no interfira no tempo de coagulao; retirar a hemolinfa atravs de uma puno entre o cefalotrax e o primeiro segmento prximo ao corao; colocar a hemolinfa sobre uma lmina de vidro esterilizada at que ocorra a coagulao, de forma gelatinosa, no devendo exceder 20 segundos. preparao das lminas para anlise em fresco Devem ser montadas lminas contendo as seguintes estruturas: brnquias, epipodito, intestino anterior e posterior, e hepatopncreas. Em seguida, com o auxlio de um microscpio binocular, deve-se realizar a varredura em cada estrutura, a fim de buscar sinais que indiquem a presena de enfermidades. Brnquias Levar para observao em microscpio, fazendo uma cuidadosa varredura em toda a poro da brnquia contida na lmina. Uma brnquia normal deve apresentar as seguintes caractersticas: boa formao do arco branquial e de seus lbulos 38
(ramificaes); e ausncia de sujeiras, necroses, parasitas epicomensais ou bactrias filamentosas. Epipodito Levar para o microscpio e examinar toda a extenso do epipodito, para identificar sinais clnicos de sujeira, necroses, parasitas, bactrias filamentosas ou caractersticas anormais que indiquem a presena de uma enfermidade. Intestino anterior e posterior Levar a lmina ao microscpio e realizar uma varredura de todo o material nela contido, utilizando as objetivas de 4x e 10x para analisar, quantitativa e qualitativamente, o contedo intestinal (presena de rao, alimento natural, detritos etc.), procurando sinais clnicos da presena de protozorios (gregarinas adultas, esporozotos e gametcitos) e observando a presena de partes ou estruturas de outros camares (antnulas, antenas, pereipodos etc.). Hepatopncreas Observar todo o material contido na lmina, utilizando as objetivas de 4x e 10x para analisar, primeiramente, o preenchimento dos tbulos do hepatopncreas, determinando o grau de lipdios para avaliao do estado nutricional dos animais analisados. Aps a determinao do grau de lipdios, deve-se observar os tbulos do hepatopncreas, a fim de procurar sinais de deformao, atrofias, enrugamentos, necroses, espessamento das paredes ou qualquer outro sintoma que caracterize uma possvel enfermidade, tais como NHP, vibriose ou enterite hemoctica. preenchimento da planilha com os dados obtidos Todos os dados obtidos nas anlises presuntivas devem ser anotados em uma planilha que, posteriormente, ser arquivada para auxiliar o monitoramento contnuo da evoluo da sanidade dos camares cultivados durante o ciclo de produo. A planilha deve ser padronizada, contendo espaos para preenchimento de data, horrio, nmero do viveiro e tudo que foi analisado, desde as avaliaes visuais at a anlise microscpica das estruturas.
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avaliao dos dados para elaborao do diagnstico O processo de diagnstico tem duas categorias interativas: a deteco e a
priorizao de agentes quanto contribuio relativa ao surto de uma doena. Depois das observaes em cada estrutura, deve-se estabelecer uma avaliao quanto incidncia ou extenso do problema, a fim de diagnosticar a ausncia ou o estgio da patogenia especfica, o que ir permitir a determinao do grau de infestao. Alguns estgios a considerar na avaliao: - G-0 = caractersticas normais sem indcios de enfermidade; - G-1 = apenas presena ou indcios iniciais do problema; - G-2 = manifestao, de leve a moderada, do problema (casos em que j se recomenda algum tratamento especfico); - G-3 = manifestao moderada do problema (grau em que j necessrio ter cautela e estabelecer tratamento o quanto antes); - G-4 = manifestao severa do problema que, dependendo do caso, no mais passvel de tratamento. realizao de uma nova amostragem A nova coleta deve ser realizada caso os indivduos de um determinado viveiro analisado apresentem caractersticas de leve a moderada (G-2 ou G-3) de alguma enfermidade especfica. A amostra deve ser coletada aleatoriamente e com um nmero maior de indivduos - entre 30 e 50, para que se possa determinar o percentual de incidncia de camares afetados pela enfermidade e traar critrios de tratamento. envio das amostras para anlises confirmatrias Caso a segunda avaliao demonstre um percentual acima de 10% de indivduos afetados com uma enfermidade especfica mais relevante (IMNV, IHHNV, NHP, vibriose, enterite hemoctica, entre outras), deve-se enviar amostras deles para um laboratrio especializado, a fim de realizar anlises confirmatrias atravs de tcnicas moleculares e histopatolgicas.
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5 ANLISES MOLECULARES Este captulo foi extrado da dissertao de mestrado de Robert Lenoch Avaliao do risco epidemiolgico da carcinicultura catarinense usando como modelos a Sndrome de Taura e a doena da mancha branca, do Programa de Mestrado Acadmico em Cincia e Tecnologia Ambiental, da Universidade do Vale do Itaja.
5.1 Procedimentos para amostragem As amostras podem ser coletadas de acordo com trs finalidades: vigilncia sanitria, certificao sanitria ou controle de reprodutores, e diagnstico da doena. O nmero e o tipo de amostra para anlise iro variar segundo a finalidade do exame.
5.2 Diagnstico em situao de doena Quando h ocorrncia da doena clnica, deve-se ter o cuidado de selecionar espcimes com leses significativas de animais vivos ou moribundos. Todos os esforos devem ser feitos para a coleta de amostras de todas as espcies suscetveis doena, tanto de indivduos moribundos como tambm com sintomas clnicos. A coleta de espcimes mortos deve ser evitada. Quando crustceos nativos apresentarem sinais clnicos de uma doena com caractersticas listadas como de notificao obrigatria pela OIE, deve-se coletar amostras de todas as espcies para garantir aes de preservao e um diagnstico antecipado. aconselhvel um nmero mnimo de espcimes a serem coletados para teste de diagnstico: 100 ou mais para estgios larvais, 50 para estgios ps-larvas e 10 se forem juvenis ou adultos. O nmero de amostras com a doena clnica deve ser grande, a fim de poder observar a cuidadosa seleo dos pontos de coleta e a qualidade dos espcimes.
5.3 Diagnstico em crustceos assintomticos Quando amostras so coletadas para vigilncia sanitria, necessria a realizao de testes com animais assintomticos para a preveno de doenas ou a certificao livre de patgenos especficos (SPF - Specific Pathogen Free). O tamanho da amostra a ser coletada ser determinado por uma tabela estatstica - o mnimo 41
previsto para teste deve confirmar que o espcime infectado est presente na amostra (95%), assumindo um mnimo de prevalncia da infeco igual ou maior que 2,5 (10%).
Tamanho das amostras baseadas na prevalncia do patgeno em uma populao (OIE, 2003) Tamanho da populao 2% 50 100 250 500 1.000 1.500 2.000 4.000 10.000 >/=100.000 50 75 110 130 140 140 145 145 145 150 5% 35 45 50 55 55 55 60 60 60 60 10 % 20 23 25 26 27 27 27 27 27 30 Tamanho da amostra necessria para a prevalncia em nmero de indivduos 20 % 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 30 % 7 9 9 9 9 9 9 9 9 9 40 % 5 7 8 8 9 9 9 9 9 9 50 % 2 6 7 7 8 8 8 8 8 8
Para a vigilncia sanitria e a certificao de doenas de notificao obrigatria, as amostras dos locais de cultivo ou de estoques selvagens devem conter um nmero apropriado de espcimes, a serem testados de acordo com a tabela anterior. O teste para uma prevalncia mnima de 2% recomendado. Para a lista de doenas de notificao obrigatria da OIE, aconselhvel que o planejamento de amostragem deva ser bem executado, de forma que a poca de amostragem esteja de acordo com a fase de crescimento dos crustceos, em particular quando o patgeno mais provvel de ser descoberto. Isto importante quando os mtodos de diagnstico dependem de simples microscpios ou de mtodos histolgicos e no incluem mtodos moleculares. Para baculoviroses (BP, MBV e BMV), larvas e ps-larvas so amostras mais apropriadas; para TSV, WSSV e YHV, juvenis e subadultas so amostras melhores; e para crayfish plague, juvenis e adultas so amostras superiores. No caso de diagnsticos de infeces assintomticas, quando se
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pressupe a presena do patgeno, o nmero de amostras dever refletir que a prevalncia exceder 5%.
5.4 Conservao de amostras para testes moleculares Para diagnsticos de rotina por PCR, RT-PCR ou dot-blot com provas de DNA, as amostras devem preservar os cidos nuclicos dos patgenos.
5.5 Tipos de amostras As amostras coletadas para provas de DNA ou anticorpos devem ser guardadas em sacos plsticos ou frascos novos, com a inteno de minimizar o risco potencial de contaminao com outras amostras de locais, tanques ou lotes diferentes. necessrio sempre usar material de primeiro uso. As amostras devem ser identificadas por local e data de coleta. Alguns procedimentos para preservao e transporte de amostras: elas podem ser processadas no campo ou enviadas para laboratrio - o melhor mtodo para processamento; elas devem ser coletadas com agulha e seringa, puncionando o sinus ventral ou a parede lateral do corpo do animal; os espcimes devem ser transportados para laboratrio em at 24 horas. Os sacos plsticos devem ser acondicionados em meio ao gelo, em quantidade suficiente para manter a temperatura, ou em caixas de material isotrmico (isopor); os espcimes devem ser selecionados de acordo com o diagnstico ou a vigilncia sanitria, e rapidamente congelados no campo, usando gelo seco triturado ou freezer (temperatura de -18 C a -20 C). No transporte para o laboratrio, as amostras devem ser levadas em caixas isotrmicas contendo gelo; em locais onde o uso de gelo ou freezer for problemtico, pode-se utilizar etanol (90% - 95%) para conservao, estocagem e transporte; os tecidos usados para amostra so obtidos da hemolinfa de crustceos inteiros (menores que 2 g a 3 g - os crustceos maiores devem ter tecidos que no iro ser usados para testes). Essas amostras devem ser acondicionadas em embalagens individuais para transporte.
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6 PLANO DE MONITORAMENTO AMBIENTAL De acordo com a Resoluo Conama n 312, de 10 de outubro de 2002, as fazendas de cultivo de camares marinhos devem realizar monitoramento de seus afluentes e efluentes, com o objetivo de avaliar possveis alteraes na qualidade da gua utilizada na sua produo. Nos Estados de Pernambuco e Santa Catarina, o Plano de Monitoramento Ambiental foi elaborado pelo rgo ambiental estadual e pelo setor produtivo, e ambos prevem anlises quinzenais dos parmetros fsico-qumicos de qualidade da gua em pelo menos trs viveiros de cada propriedade. Dessa forma, as anlises realizadas para o monitoramento hidrobiolgico tm dois objetivos principais: servir de ferramenta para o manejo dos cultivos e servir para a elaborao do PMA. A cada duas semanas este manual ser preenchido com uma nova bateria de dados, obtidos das anlises nas fazendas. Ao final do cultivo, o conjunto dessas planilhas compor o Plano de Monitoramento Ambiental da fazenda. A Faepe e a sua Comisso de Carcinicultura, juntamente com a CPRH, tm somado esforos para legalizar e fiscalizar as fazendas de Pernambuco. O resultado dessa parceria a legalizao de uma grande parte das fazendas.
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APNDICE
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FICHA DE AVALIAO DE DADOS HIDROBIOLGICOS
EMPREENDIMENTO: DATA: Parmetros Amnia Nitrito Nitrato Nitrognio total Ortofosfato N/P Slica Ferro Sulfeto pH Alcalinidade Salinidade Oxignio Transparncia Temperatura Material em susp. Clorofila A DBO Coliformes totais Matria orgnica Carbono orgnico C/N Vbrios Microalgas Unidade
mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l mg/l H+ mg/l g/l mg/l cm C mg/l ----mg/l NMP/100ml % % mg/l UFC -----
COMENTRIOS
Tabela 1 - Variaes aceitveis de concentrao dos principais parmetros nas guas de viveiros de aqicultura Parmetro Concentrao desejada Temperatura 26-32 C Oxignio 5,0 mg/l pH 7,0~9,0 Transparncia 40~60 cm Salinidade 15-25 ppt Amnia < 0,3 mg/l (no ionizvel) Nitrito < 0,3 mg/l Nitrato 0,2~20 mg/l Ortofosfato < 0,4 mg/l Slica 2,0 mg/l Ferro < 0,5 mg/l Sulfeto No detectvel Alcalinidade 120 mg/l Relao N/P 10-15: 1 Matria orgnica 2~ 4% C/N 5-10:1 Status de microalgas Diatomceas (predomnio)
Tabela 2 - O efeito do pH em peixes e crustceos de viveiro pH Efeito <4,5 Ponte de morte cida 4,5-5 No h reproduo 5-6,5 Crescimento lento 6,5-9 Melhor crescimento 9-10 Crescimento lento 10 Ponte de morte bsica
Tabela 3 - Influncia das concentraes de Oxignio Dissolvido em espcies de viveiros de aqicultura Concentrao OD Efeito Menor 1ou 2 mg/l Letal se a exposio durar mais que algumas horas Crescimento lento se a exposio ao baixo nvel de OD 2 ~ 5 mg/l contnua Melhor condio para um bom crescimento 5 ~ saturao Acima saturao Normalmente no h problemas (se menor que 200%)
Tabela 4 - Porcentagem de amnia no-ionizada em diferentes valores de pH e temperatura

Temperatura (oC) 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 6,0 0,0274 0,0295 0,0318 0,0343 0,0369 0,0397 0,0427 0,0459 0,0493 0,0530 0,0569 0,0610 0,0654 0,0701 0,0752 0,0805 6,5 0,0865 0,0933 0,101 0,108 0,117 0,125 0,135 0,145 0,156 0,167 0,180 0,193 0,207 0,221 0,237 0,254 7,0 0,273 0,294 0,317 0,342 0,368 0,396 0,425 0,457 0,491 0,527 0,566 0,607 0,651 0,697 0,747 0,799 7,5 0,859 0,925 0,996 1,07 1,15 1,24 1,33 1,43 1,54 1,65 1,77 1,89 2,03 2,17 2,32 2,48 pH 8,0 2,67 2,87 3,08 3,31 3,56 3,82 4,10 4,39 4,70 5,03 5,38 5,75 6,15 6,56 7,00 7,46 8,5 7,97 8,54 9,14 9,78 10,5 11,2 11,9 12,7 13,5 14,4 15,3 16,2 17,2 18,2 19,2 20,3 9,0 21,5 22,8 24,1 25,5 27,0 28,4 29,9 31,5 33,0 34,6 36,3 37,9 39,6 41,2 42,9 44,6 9,5 46,4 48,3 50,2 52,0 53,9 55,7 57,5 59,2 60,9 62,6 64,3 65,9 67,4 68,9 70,4 71,8 10,0 73,3 74,7 76,1 77,4 78,7 79,9 81,0 82,1 83,2 84,1 85,1 85,9 86,8 87,5 88,3 89,0
Tabela 5 - Solubilidade do oxignio (mg/l) em funo de temperatura e salinidade

Temperatura ( C) 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35
o
Salinidade (ppt) 0 10,0 9,8 9,6 9,4 9,2 9,0 8,9 8,7 8,5 8,4 8,2 8,0 7,9 7,8 7,6 7,5 7,4 7,2 7,1 7,0 6,9 5 9,7 9,5 9,3 9,1 8,9 8,8 8,6 8,4 8,3 8,1 8,0 7,8 7,7 7,5 7,4 7,3 7,2 7,0 6,9 6,8 6,7 10 9,4 9,2 9,0 8,9 8,7 8,5 8,3 8,2 8,0 7,9 7,7 7,6 7,5 7,3 7,2 7,1 7,0 6,9 6,7 6,6 6,5 15 9,1 9,0 8,8 8,6 8,4 8,3 8,1 8,0 7,8 7,7 7,5 7,4 7,3 7,1 7,0 6,9 6,8 6,7 6,6 6,5 6,4 20 8,9 8,7 8,5 8,3 8,2 8,0 7,9 7,7 7,6 7,4 7,3 7,2 7,1 6,9 6,8 6,7 6,6 6,5 6,4 6,3 6,2 25 8,6 8,1 8,3 8,1 7,9 7,8 7,6 7,5 7,4 7,2 7,1 7,0 6,9 6,7 6,6 6,5 6,4 6,3 6,2 6,1 6,0 30 8,3 8,2 8,0 7,9 7,7 7,6 7,4 7,3 7,2 7,0 6,9 6,8 6,7 6,6 6,5 6,3 6,2 6,1 6,1 6,0 5,9 35 8,1 7,9 7,8 7,6 7,5 7,3 7,2 7,1 6,9 6,8 6,7 6,6 6,5 6,4 6,3 6,2 6,1 6,0 5,9 5,8 5,7 40 7,8 7,7 7,5 7,4 7,3 7,1 7,0 6,9 6,7 6,6 6,5 6,4 6,3 6,2 6,1 6,0 5,9 5,8 5,7 5,6 5,6
Fonte: Vinatea, 2004.
Tabela 6 - Porcentagem de cido sulfdrico no-ionizado (H2S) em soluo aquosa em funo de pH e temperatura Temperatura pH 6,0 6,5 7,0 7,5 8,0 8,5 9,0 16 93,2 81,2 57,7 30,1 12,0 4,1 1,3 18 92,8 80,2 56,2 28,9 11,4 3,9 1,3 20 92,3 79,2 54,6 27,5 10,7 3,7 1,2 22 92,0 78,1 53,0 26,3 10,1 3,4 1,1 24 91,4 77,0 51,4 25,0 9,6 3,2 1,0 26 90,8 75,8 49,7 23,8 9,0 3,0 1,0 28 90,3 74,6 48,2 22,7 8,5 2,9 0,9 30 89,7 73,4 46,6 21,6 8,0 2,7 0,9 32 89,1 72,1 45,0 20,6 7,6 2,5 0,8
Tabela 7 - Concentraes aproximadas de fertilizantes comuns Substncia N% P% K 2O Uria 45 0 0 Nitrato de clcio 15 0 0 Nitrato de sdio 16 0 0 Nitrato de amnia 33 0 0 Sulfato de amnia 21 0 0 Superfosfato 0 16 0 Superfosfato triplo 0 46 0 Monoamnio fosfato 11 48 0 Diamnio fosfato 18 48 0 Amnio polifosfato 10-13 34-37 0 Muriato de potassa 0 0 60
CIANOFCEAS
CLOROFCEAS
DIATOMCEAS
EUGLENOFCEAS
DINOFLAGELADOS
CLADOCERAS
Alona costatahel
Alonella nana
Bosmina longirostris
Ceriodaphinia cornuta
Ceriodaphinia reticulata
Cladocera
Cladocera
Daphinia
Daphinia gessneri
Diaphanosoma
Disparalona rostrata
Evadne
Evadne
Eubamina tubicen
Evadne nordmanni
Cladocera
Evadne spinifera
Moina micrura
Penilia avirostris
Podon 10
Polyphemus pediculus
Sida crystalina
Simocephalus sp
Semocephalus vetulus
PROTOZORIOS
Clepus
Diffugia sp
Codomaria
Codonella
Dictyocysta
Epiplocyloides
Favella ehenbergii
Leoprotintinnus
Lumirella
11
PROTOZORIOS Parafavella sp
Podophrya
Tintennopis
12

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FEDERAO DA AGRICULTURA DO ESTADO DE PERNAMBUCO - FAEPE COMISSO ESTADUAL DE CARCINICULTURA - COMCARCI SERVIO DE APOIO S MICRO E PEQUENAS EMPRESAS EM PERNAMBUCO

Manual para o Monitoramento Hidrobiolgico em Fazendas de Cultivo de Camaro

FICHA CADASTRAL Nome do empreendimento:

7 36 22 Latitude sul 34 49 40 Longitude oeste

Georeferenciamento da propriedade (GPS)

(+) Difuso (-)

Plantas Bactrias Zooplncton Peixes Oxidao qumica

5 Saturao 0 06 12 18 06 Hora do dia

Onde medir? Com que freqncia?

Diminuio do crescimento e da reproduo

Ideal para a maioria dos organismos de cultivo

Diminuio do crescimento e da reproduo

Figura 3 - Representao esquemtica do pH e sua relao com a aqicultura

Concentrao Al3+, Fe3+, H+ Mxima disponibilidade Ca2+, OH-

Figura 4 - Solubilidade do fosfato em funo do pH da gua

Onde medir? Com que freqncia?

Intervalo apropriado para a vida aqutica

Temperatura letal 1 Atividade

Epilimnion Termoclina Hipolimnion

Fotossntese Produo de oxignio

Respirao Consumo de oxignio

Figura 6 - Estratificao do Oxignio Dissolvido na gua

Onde medir? Com que freqncia? Em que parte do viveiro?

Onde medir? Com que freqncia?

Onde medir? Com que freqncia?

Em que parte do viveiro?

Onde medir? Com que freqncia?

Em que parte do viveiro?

comprometem a qualidade dos resultados dos cultivos e a sustentabilidade da aqicultura.

Onde medir? Com que freqncia?

S-2 SO4-2 CH4 CO2

Mn+2 Mn+4 N2 NO3H2O O2

-300 mV -100 Ambiente anaerbio

+700 mV Ambiente aerbio

Onde medir? Com que freqncia?

Em que parte do viveiro?

Tabela 2 - Principais pigmentos encontrados nas microalgas

Grupos Crysophyta Pyrrophyta Chorophyta Cyanophyta Euglenophyta

Nome comum Diatomceas Dinoflagelados Clorofceas Cianobactrias Euglenofceas

FICHA DE AVALIAO DE DADOS HIDROBIOLGICOS

Tabela 4 - Porcentagem de amnia no-ionizada em diferentes valores de pH e temperatura

Tabela 5 - Solubilidade do oxignio (mg/l) em funo de temperatura e salinidade

Fonte: Vinatea, 2004.

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