Evaluacin de mtodos analticos

- Calibracin

Estadstica aplicada a la evaluacin de mtodos analticos

- Lmites de deteccin y de cuantificacin - Linealidad - Selectividad - Precisin - Veracidad y exactitud - Incertidumbre - Contaminacin
Ref Docs CLSI: EP5, EP6, EP9, EP10, EP17, EP28 IUPAC SEQC

Curso de Estadstica para el Laboratorio Clnico

Conceptos previos
Veracidad.- grado de concordancia entre el valor medio de una serie grande de medidas y el valor del mensurando que se acepta como referencia. No puede tomar valores numricos Sesgo (Bias).- Expresin cuantitativa de la veracidad: diferencia entre el resultado esperado para el test y el valor aceptado como verdadero. En general, la desviacin/diferencia se estima en medidas replicadas entre un mtodo aceptado (definitivo, referencia, o diseado para comparacin) y el mtodo evaluado, y se expresa en las unidades de la medida o en porcentaje. Refleja el error total sistemtico [ISO 3534: 3.13]

Conceptos previos
Exactitud (Accuracy).- En esencia significa ausencia de error. Concordancia entre el resultado de una prueba y el valor aceptado como verdadero. Incluye componentes aleatorios de la medida y componentes sistemticos (sesgo) [ISO 3534: 3.11] Estrictamente slo se debe aplicar a resultados y no a mtodos analticos, individuos o laboratorios.

Conceptos previos
Precisin.- Grado de concordancia de diversas medidas independientes entre s, obtenidas en determinadas condiciones. No puede tomar valores numricos. Depende slo de la distribucin de los errores aleatorios y no tiene relacin con el valor verdadero del valor especificado. Imprecisin.- Expresin cuantitativa de la precisin. Dispersin de los resultados obtenidos en determinadas condiciones

Conceptos previos
Condiciones de precisin Intermedia Se obtienen los resultados con el mismo mtodo y sistema de medida pero en condiciones operacionales distintas que pueden referirse a tiempo, calibracin, operador y equipo. Especificar los elementos que cambian: inter-ensayo, intra-dia, interda, intra-laboratorio Condiciones de Repetibilidad Condiciones en que se obtienen resultados independientes con el mismo mtodo, en materiales idnticos, en el mismo laboratorio, por el mismo operador y con el mismo equipamiento durante un corto periodo de tiempo (ISO 3534-1); (precisin intra-ensayo) Condiciones de Reproducibilidad Se obtienen resultados del mismo test con el mismo mtodo en diferentes laboratorios con diferentes operadores y diferentes equipos (ISO 5725-1).

Conceptos previos
ISO 5725 Discute las medidas de precisin intermedia y proporciona notacin acerca de las condiciones en que varan tiempo, calibracin, operador y equipo. Estimadores de la imprecisin: Repetibilidad Precisin estimada bajo condiciones de repetibilidad [ISO 3534: 3.15] Reproducibilidad Precisin estimada reproducibilidad. [ISO 3534: 3.20] bajo condiciones de

Conceptos previos
Incertidumbre Estimacin asociada a un resultado de un test que caracteriza el rango de valores en lo que se considera que estn los verdaderos valores. [ISO 3534: 3.25] Incertidumbre (de medida): Parmetro, asociado con el resultado de una medida, que caracteriza la dispersin de los valores que podran ser atribuidos razonablemente al mensurando [GUM: 2.2.3] La ilustracin clsica de la exactitud y la precisin en trminos de una diana no se corresponde con la descripcin actual. La exactitud se refiere a la combinacin de errores sistemticos y aleatorios, no slo a los errores sistemticos.

Precisin interensayo Precisin estimada cuando se obtienen los resultados en series analticas diferentes, en el mismo laboratorio con el mismo mtodo y el mismo material

Conceptos previos
Los conceptos bsicos en la evaluacin de la incertidumbre son los siguientes: el conocimiento de toda magnitud que influya en el mensurando es, en principio, incompleto y puede expresarse como una funcin de densidad de probabilidad (FDP) para los valores atribuibles a la magnitud basndose en ese conocimiento; el valor esperado de la FDP se considera la mejor estimacin del valor de la magnitud; la desviacin tpica de la FDP se considera la incertidumbre tpica asociada a esa estimacin; la FDP se basa en el conocimiento de una magnitud que puede inferirse de - mediciones repetidas evaluacin de tipo A; - juicio cientfico basado en toda la informacin existente sobre la posible variabilidad de la magnitud evaluacin de tipo B. Principales fuentes cuantitativo:

Conceptos previos
de incertidumbre de un mtodo diagnstico

Incertidumbre asociada con el valor numrico asignado al mensurando presente en el material calibrador usado en el mtodo en evaluacin. Esta incertidumbre ha de ser estimada por el fabricante del calibrador, o por el laboratorio si se trata de un calibrador no comercial. El mtodo para estimar la incertidumbre del valor del calibrador depender de cmo se determinen sus valores (ej, gravimetra, mtodo definitivo, etc), pero para la mayora de los mtodos se requieren los mtodos A y B descritos en GUM.

Conceptos previos
Incertidumbre asociada con el valor de un test debida a errores aleatorios que ocurren normalmente cuando se procesa el test.

Conceptos previos
A efectos prcticos, se recomienda emplear la imprecisin de los datos obtenidos mediante el control de calidad de la prctica diaria como estimacin cuantitativa de la incertidumbre de la medida. Para los clnicos, la dispersin de los resultados de los tests en torno al valor de decisin clnica es la principal imprecisin con efecto potencial que afecta a la interpretacin y el manejo clnico. Cuando se conoce la estimacin de la incertidumbre del calibrador y la imprecisin analtica del mtodo, la estimacin de la incertidumbre total de los resultados medidos puede calcularse sumando ambas estimaciones.

Esta componente de la incertidumbre se demuestra con la dispersin de valores observados cuando un mensurando se mide repetidamente en el mismo espcimen mediante un mtodo adecuado. En el laboratorio clnico esta dispersin se asocia a la imprecisin, como estimacin cuantitativa bsica de la confianza que se puede tener en un resultado.

Conceptos previos
Qu incluye la medida de la incertidumbre? ISO 15189, 5.6.2: Fuentes que contribuyen a la incertidumbre incluyen muestreo, preparacin de muestra, seleccin de una porcin de muestra, calibradores, materiales de referencia, equipo usado, condiciones ambientales, condicin de la muestra y cambios de operador. La incertidumbre de la medida de un test es la suma de las incertidumbres asociadas con las etapas de la tcnica requeridas para efectuar un test de acuerdo con el procedimiento operacional estndar del mtodo.

Conceptos previos
Error (de medida) Es el resultado de una medida menos el verdadero valor del mensurando Dado que el verdadero valor no puede ser determinado, en la prctica se emplea un valor verdadero convencional. [VIM: 3.10] Error aleatorio (de un resultado) Componente del error que, en el curso de un nmero de tests de la misma caracterstica vara de forma impredecible. No es posible corregir el error aleatorio. [ISO 3534: 3.9] Resultado de una medida menos la media que resultara de obtener un nmero infinito de medidas del mismo mensurando llevadas a cabo bajo condiciones de repetibilidad [VIM; 3.13]

Conceptos previos
Error sistemtico Componente del error que, en el curso de un nmero de tests de la misma caracterstica, permanece constante o vara de manera predecible. Los errores sistemticos y sus causas pueden ser conocidos o desconocidos. [ISO 3534: 3.10] Diferencia entre la media que resultara de obtener un nmero infinito de medidas del mismo mensurando llevadas a cabo bajo condiciones de repetibilidad y el verdadero valor del mensurando [VIM; 3.14]; a) El error sistemtico es igual al error total menos el aleatorio; b) Al igual que el verdadero valor, el error sistemtico y sus causas no pueden conocerse completamente.

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Detecci Deteccin de valores aberrantes
Dixon: slo permite detectar un valor aberrante en cada paso. Distribucin normal

Q=
N 3 4 5 6 7 8 9 10 15 20 25 30 =0.001 0.999 0.964 0.895 0.822 0.763 0.716 0.675 0.647 0.544 0.491 0.455 0.430

x n x n 1 x n x1
=0.002 0.998 0.949 0.869 0.792 0.731 0.682 0.644 0.614 0.515 0.464 0.430 0.407 =0.005 0.994 0.921 0.824 0.744 0.681 0.633 0.596 0.568 0.473 0.426 0.395 0.371

Horn: (1) Normalizar los datos originales (BoxCox)

=0.01 0.988 0.889 0.782 0.698 0.636 0.591 0.555 0.527 0.438 0.393 0.364 0.342

(2) Estimar Q1, Q3 y IQR para los datos transformados (3)0.976 Definir las 0.886 2 bisagras de Tukey: 0.941 0.782
0.847 0.729 0.766 0.643 0.679 IQR 0.561 y Q3 +1.5 IQR. Q1 - 1.5 0.559 0.452 =0.02 =0.05 =0.1 =0.2

(4)0.646 Son posibles valores aberrantes los que queden fuera 0.563 0.484 0.387
0.587 0.542 0.508 0.482 0.398 0.356 0.329 0.310 0.507 0.467 0.436 0.412 0.338 0.300 0.277 0.260 0.433 0.398 0.370 0.349 0.284 0.251 0.230 0.216 0.344 0.314 0.291 0.274 0.220 0.193 0.176 0.165

Reed

r=

xn xn 1 1 > xn x1 3

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Estudio de la imprecisi imprecisin e inexactitud
Imprecisin intraensayo (Repetibilidad) Valor cuantitativo que indica la dispersin de una serie de medidas replicadas de un analito realizadas enla misma serie analtica. Una serie analtica (run) es el conjunto de resultados obtenidos en el periodo de tiempo en el que se consideran estables las caractersticas del mtodo Imprecisin total (Reproducibilidad) Valor cuantitativo que indica el grado de dispersin de las medidas replicadas de un analito en un periodo ms largo de tiempo, de modo que se incluyen todas las principales causas conocidas de error de la medida. Se mide como la suma de varias fuentes de error de la medida, incluida la imprecisin intraensayo
CLSI EP15

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Estudio de la imprecisi imprecisin e inexactitud
Asumiendo un 5% de probabilidad estadistica de falso rechazo: (a) Si intra < 2/3 total, el experimento deber realizarse durante 5d y constar de 4 replicados por nivel y serie analtica PROTOCOLO ADECUADO CUANDO LA VARIACION INTERDIA ES UN COMPONENTE IMPORTANTE DE LA IMPRECISION TOTAL (b) Si intra > 2/3 total, el experimento deber realizarse durante 3d y constar de 3 replicados por nivel y serie analtica PROTOCOLO ADECUADO CUANDO LA VARIACION INTERDIA NO ES UN COMPONENTE IMPORTANTE DE LA IMPRECISION TOTAL. (c) Si relacin entre intra y total es desconocida, debe realizarse el experimento de 5d, con 4 replicados por nivel.

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Estudio de la imprecisi imprecisin
Imprecisin intraensayo (Repetibilidad) Imprecisin total (Reproducibilidad)

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Estudio de la imprecisi imprecisin
Valor terico Da 1 0,06 0,08 0,08 0,05 0,05 0,09 0,05 0,09 0,09 0,10 0,023 0,015 0,021 0,015 0,025 0,024

intra > 2/3 total

1,13 2,82
2,53 3,10 2,82 2,92 3,35 2,73 3,29 3,23 2,71 0,285 0,585 0,291 0,585

0,62

Da 2

Da 3

S int ra =

(x
d =1 i =1

di

xd )

D (n 1)

B=

(x
d =1

x)2

Imprecisin segn EP-15 Anlisis imprecisin intra Anlisis imprecisin global Valor de Verificacin INTRA Valor de Verificacin GLOBAL Sintra intra Stotal Total C(gl=6)=16,24 C(T=8)=19,48

D 1

0,66 1,23 0,82 1,37 0,61 1,19 0,61 1,07 0,48 1,26 0,50 1,18 0,64 1,30 0,66 1,10 0,67 1,15 Resultados Globales 0,080 0,091 0,124 0,246 0,106 0,100 0,124 0,246

int ra = CV x d

S total =

n 1 2 S int ra + B n

Imprecisin intraensayo

Imprecisin global

D: n das N: n replicados

total = CV x

int ra C
gl

total
T
T=

gl = D (n 1)

(n 1)S 2 int ra + nB n2 B2 n 1 4 S int ra + D 1 D

2

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Estudio de la imprecisi imprecisin: APLICACIONES
Imprecisin intraserial Estudio previo a la estimacin de la imprecisin interdiaria. Definicin del valor ptimo alcanzable por la imprecisin interdiaria para un determinado procedimiento de medida. Imprecisin interdiaria Seleccin de procedimientos de medida. Establecimiento de intervalos de tolerancia de materiales de control interno. Interpretacin objetiva de la significacin de un cambio entre dos valores consecutivos de una magnitud bioqumica. Estimacin de la incertidumbre.

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Estudio de la inexactitud
Comparacin de resultados obtenidos en muestras de pacientes con el mtodo en estudio (xi) y con los de otro mtodo (xi) Importante: definir la desviacin clnicamente tolerable entre ambos mtodos Clculo del sesgo de cada muestra individual: bi=xi - xi % bi=100 . (xi - xi)/ xi

b=

b
i =1

Sb =

(b b )
i =1 i

n 1

Recuperacin.- Comparacin del resultado obtenido al medir el constituyente en estudio medido en materiales de referencia con los valores esperados

CLSI EP15

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Estudio de la inexactitud
Clculo de la diferencia de cada muestra individual: bi=xi - xi % bi=100 . (xi - xi)/ xi
xi bi- (bi- ) 2 -1 -3,5 12,25 6 3,5 12,25 -6 -8,5 72,25 9 6,5 42,25 4 1,5 2,25 -3 -5,5 30,25 1 -1,5 2,25 0 -2,5 6,25 10 7,5 56,25 1 -1,5 2,25 1 -1,5 2,25 3 0,5 0,25 4 1,5 2,25 -2 -4,5 20,25 0 -2,5 6,25 6 3,5 12,25 5 2,5 6,25 -2 -4,5 20,25 9 6,5 42,25 5 2,5 6,25 50 357 0 2,5 >2 mg/dL 4,33 4,46 500 t19=2,539 x'i bi 76 127 256 303 29 345 42 154 398 93 240 72 312 99 375 168 59 183 213 436 77 121 262 294 25 348 41 154 388 92 239 69 308 101 375 162 54 185 204 431

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Linealidad: Ventajas del an anlisis de regresi regresin polin polinmica
Mejor aprox que chequear la bondad del ajuste Ambos tienen dos vertientes (lineal y no lineal), pero el mtodo polinmico cuenta con un modelo espercfico y paramtrico para la alternativa no lineal, que facilita la identificacin de condiciones de no linealidad e incluye la repetibilidad en el estudio, de modo que: se estima la magnitud de la no linealidad a cada nivel se controla la falta de repetibilidad en el estudio de la no linealidad

10 5 Bias 0 0 -5 -10 Mtodo de referencia 100 200 300 400 500

se aporta un modelo estadstico testable puede ser fcilmente programado en software disponible SIEMPRE el Primer paso ha de ser la inspeccin visual: Representacin grfica
CLSI EP6

tS b n

Linealidad: Evaluaci ) Evaluacin polin polinmica de la linealidad (Kroll (Kroll)

Se asume de antemano que el conjunto de datos no es lineal Mtodo paramtrico: asume que los datos pueden representarse por una funcin lineal o curva y que el error aleatorio sigue una normal Se requieren mltiples medidas de entre 5 y 9 concentraciones diferentes obtenidas por dilucin o por formulacin. No es preciso que sean equidistantes El anlisis consta de dos partes: -Chequear si un polinomio de grado 2 ajusta los datos mejor que una recta - Establecer si la diferencia entre el mejor ajuste no lineal y el lineal es recta o parbola? recta o cbica? inferior a la permitida para el mtodo

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Linealidad: Muestras deseables (efecto matriz)
- Pool de muestras de pacientes: alto y bajo - Pool de muestras de pacientes diluido con diluyente recomendado - Pool de muestras de pacientes suplementado con el analito a estudiar - Controles comerciales, calibradores o materiales de estudio de linealidad - Pool diluido con salino u otros diluyentes distintos del recomendado - Material de control diluido con volumen diferente del estipulado - Soluciones acuosas
N Muestras recomendado
niveles 9 - 11 7-9 5-7 replicados 2-4 2-3 2

Objetivo Establecer rango lineal Validar un mtodo propio /modificado Confirmar la linealidad comercial

140

150

160

170

180

190

200

140

150

160

170

180

190

200

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Linealidad: Procedimiento

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Lmite de detecci deteccin
LB: Lmite de Blanco: resultado ms alto que indica que no hay analito presente

Grados de libertad df = L R - Rdf L: n de niveles de concentracin R: n de replicados de cada nivel Rdf: n de gl consumidos por el anlisis de regresin (n de coeficientes)

LD: Lmite de Deteccin: menor cantidad de analito detectada con una probabilidad establecida LQ: Lmite de Cuantificacin: menor cantidad de analito determinada cuantitativamente con una incertidumbre establecida Error de Tipo I: asumir incorrectamente que una muestra contiene el analito (prob: ) Error Tipo II: asumir incorrectamente que no hay analito presente (prob: )

DLi = p ( xi ) (b0 + b1 xi )
Si algn coeficiente es estadsticamente significativo, se estudia el grado de desviacin de la linealidad del modelo de menor error estndar de la regresin Si las DL observadas para cada nivel son menores que el error aleatorio establecido, aunque se haya detectado no linealidad estadsticamente significativa, sta no es importante porque el error est dentro de lo asumido para el mtodo (segn el estudio de repetibilidad)

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Lmite de detecci deteccin: aproximaci aproximacin convencional convencional
Generar resultados replicados en blancos LD = Media + x . SDb Aadir media o mediana de los replicados? Qu mltiplo X (2-10) elegir basados en el error ? Alternativa: concentracin muy baja LD = 0 + x . SDb

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Lmite de detecci deteccin

Otras Aproximaciones Modelos para errores Tipo 1 y Tipo 2 CLSI EP17, ISO 11843 Relacin Seal vs. Ruido Lmites de Confianza para la relacin de varianzas Lmite del rango lineal (regresin) Sensibilidad ISO/VIM definicin (pendiente de la recta de calibracin)

Evaluacin de mtodos analticos

Lmite de detecci deteccin
Introduccin al procedimiento estadstico: El lmite de deteccin (LD) de un ensayo es una caracterstica que habitualmente se informa con la imprecisin y el sesgo. Frecuentemente, se estima slo sobre la base de medidas repetidas del blanco y se informa como la media ms 2 DS de las medidas del blanco (ESTO NO ES CORRECTO). De acuerdo con los estndares ISO, el LD de un ensayo debera estimarse teniendo en cuenta los errores de tipo I y II.

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Lmite de detecci deteccin
Lmite de Blanco (LB): Lmite que slo es excedido con una probabilidad del 5% por una medida de un blanco. El resultado ms alto que es probable obtener cuando el analito no est presente en la muestra. LB = p95 de todas las medidas de muestras de blanco Para una distribucin Gaussiana de los valores del blanco, LB= B+ 1.645 x B, donde B y B son la media y DS de las medidas del blanco

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Lmite de detecci deteccin
LB no es la concentracin de analito en una muestra, sino el umbral para el resultado medido, de modo que un resultado LoB, es no detectado, un resultado > LoB, es detectado. Otros trminos para LB (CLSI): valor crtico (ISO) umbral para la deteccin de seal

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Lmite de detecci deteccin
Lmite de deteccin (LD): Menor cantidad real de analito existente en una muestra que puede ser detectada con una probabilidad establecida (habitualmente, 95%). La cantidad de analito de LB no es LD, sino que LB < LD.

Una muestra con una concentracin verdadera exactamente igual al LB tendr slo un 50% de probabilidad de proporcionar un valor que se interprete como la presencia de analito.

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Lmite de detecci deteccin
Con una muestra que tenga como verdadera concentracin el LD, slo el 5% de las medidas se declararn errneamente como no diferentes del blanco.

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Lmite de detecci deteccin
Lmite de cuantificacin (LQ): menor cantidad de analito presente en una muestra que puede detectarse con fiabilidad y a la cual el error total cumple los requerimientos del laboratorio para la exactitud. Dependiendo del objetivo del error definido, el LQ podra ser igual al LD o mucho mayor. No puede ser inferior al LD. Ejemplo: Ensayo para cuantificacin del RNA de la hepatitis C vrica (HCV) en suero o plasma LB ( = 1%): 3100 copias / mL LD ( = 5%): 5500 copias / mL LQ (requerimiento para exactitud: sesgo 10% y CV 20%: error total 50%: 9000 copias/mL

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Lmite de detecci deteccin
Uso del trmino Sensibilidad Analtica El lmite de deteccin no debera confundirse con la sensibilidad analtica (en muchos laboratorios clnicos y aplicaciones diagnsticas, sensibilidad analtica se emplea como sinnimo de lmite de deteccin). De acuerdo con ISO, la sensibilidad analtica es la pendiente de la funcin de calibracin. La funcin de calibracin relaciona la media de las concentraciones medidas con las concentraciones reales; cuanto mayor sea la pendiente, ms sensible es el ensayo para ligeros cambios en la cantidad de analito. Por tanto el concepto es distinto al de lmite de deteccin

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Lmite de detecci deteccin

Incluso si la pendiente de la funcin de calibracin es pronunciada, la menor concentracin que puede detectarse con fiabilidad puede ser grande si hay una gran variacin de la seal medida. Por otra parte, un mtodo con moderada sensibilidad analtica (pendiente moderada de la funcin de calibracin) y muy baja variacin aleatoria de la seal puede tener un lmite de deteccin bajo.

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Lmite de detecci deteccin
Informe de intervalos para los resultados Cuantitativos: el informe de valores cuantitativos depende de dnde estn los resultados observados con relacin a los lmites analticos a niveles bajos. 0 LB LD LQ

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Lmite de detecci deteccin
Relacin entre LD para mtodos cuantitativos y el Intervalo de 95% en torno al cutoff para mtodos cualitativos El lmite de deteccin es tambin un importante criterio para tests cualitativos en los que existe un continuo fondo de seal del instrumento, los resultados se informan como Positivo o Negativo. Una definicin til para el punto de corte en mtodos cualitativos es la concentracin verdadera a la que medidas repetidas de un test en la misma muestra dan resultados positivos en el 50% de los casosy negativos el otro 50%. A concentraciones cercanas al valor de corte, algunos resultados sern positivos y algunos negativos. Las concentraciones por encima o por debajo del valor de corte a las cuales el 95% de los resultados son positivos o el 95% negativos, respectivamente, se denominan intervalo del 95% del valor de corte para el mtodo (NCCLS documento EP12-A).

LB < Resultado LD Analito detectado; no cuantificable; concentracin <LQ Resultado LB Sustancia no detectada; concentracin <LD LB < Resultado LQ a) Analito detectado; concentracin < LQ b) informar resultado advirtiendo acerca de la posible mayor incertidumbre LB LQ Informe de resultado (incertidumbre si se solicita)

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Lmite de detecci deteccin

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Lmite de detecci deteccin
Para determinar LB y LD Frmula General: LD = LB + 1.65 SD LD = LB + 1.65 SDS (alfa = beta = 5%) LB = p95 de las medidas del blanco SDS= Estimacin de la SD conjunta de las medidas en muestras de baja concentracin de analito

Si el resultado Negativo de un test cualitativo significa Ausencia de sustancia y uno positivo significa Presencia de Sustancia, entonces el punto final superior del intervalo del 95% entorno al cutoff es el LD.

Para determinar LB, se recomienda un mnimo de 60 medidas de uno o varios blancos En el caso de = 5% y N=60, LB = p95 = promedio de las medidas de orden 57 y 58

Evaluacin de mtodos analticos

Lmite de detecci deteccin
Para determinar el LD, la desviacin estndar se obtiene a partir de medidas repetidas de muestras con muy baja concentracin. Se recomienda un mnimo de 60 resultados obtenidos de varias (4-6) muestras de bajo nivel. La SDS se calcula conjuntamente si es aceptable hacer un pool. Una estimacin del LD se obtiene Segn LD = LB+ cSDS El Factor c se deriva del percentil 100% - de una distribucin estandar Gaussiana y el factor de correccin se aplica debido a que SDS es un estimador sesgado de la desviacin estndar poblacional

Evaluacin de mtodos analticos

Lmite de detecci deteccin y l lmite de cuantificaci cuantificacin
15 Valores Blanco ms altos (U/L) Muestras de Bajo nivel: 0.05 0.2 UI/L (Comprobada N y Homogeneidad S2) 10 pacientes, una muestra de cada uno 10 rplicas por muestra SDs=0.0299 gl=10(10-1)=90
f = N S K = 100 10 = 90
1.645 1.645 = 1.6494 c = = 1 1 1 1 4 90 4f

c =

1.645 1 4f

donde f = Ns k son los grados de libertad de SDS. Para = 5% y 60 resultados obtenidos de K=5 muestras 1.645 c = = 1.653 de concentracin baja (f = 60 K), 1
1 4 55

LD = LB + C s LD=0.0544+1.6494x0.0299=0.104UI/L
p95=0.0544

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Incertidumbre en el laboratorio clnico

Evaluacin de mtodos analticos

Incertidumbre en el laboratorio clnico
2) Estimar la incertidumbre de la medida La mayora de los tests se interpretan frente a unos valores de referencia adecuados al mtodo Se estima la incertidumbre mediante la imprecisin a largo plazo (6m) del control de calidad habitual, expresado con lmites de confianza del 95%, como 1.96 DS o 1.96 CV%. Si los resultados se interpretan frente a un valor de decisin clnica obtenido por otro mtodo, la incertidumbre del resultado incluye cualquier error sistemtico (sesgo). Conviene conocer dicho sesgo a travs de la trazabilidad del calibrador o por control de calidad externo

1) Definir el mensurando Principio analtico compuesto para el que est diseado el mtodo de anlisis (unidades) limitaciones diagnsticas del mtodo otras sustancias con posible reaccin cruzada que afecten a la interpretacin clnica

Evaluacin de mtodos analticos

3) Cuantificar las incertidumbres: Ajuste para propsitos clnicos Hay dos formas de determinar las incertidumbres individuales: a. Calculndolas por medios estadsticos a partir de medidas repetidas (Tipo A) b. Estimando valores de otras fuentes (Tipo B) Tipo A: Incertidumbres estndar calculadas a partir de series de n medidas Se calcula el promedio de las n medidas independientes

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Incertidumbre en el laboratorio clnico
3) Cuantificar las incertidumbres: Ajuste para propsitos clnicos Un objetivo analtico puede no ser clnica ni fisiolgicamente relevante El objetivo de comparacin debera ser relevante para la aplicacin clnica del resultado del test. Se admite internacionalmente que se aproxime ese valor objetivo con base en la variacin biolgica intra-individual del mensurando Existen 3 niveles de objetivo analtico para la imprecisin basados en la variacin biolgica intra-individual Optimo: CVA = 0.25 x CVI Deseable: CVA 0.50 x CVI Minima: CVA 0.75 x CVI Para frmacos, el componente de variacin biolgica intra-individual puede, si es clnicamente til, basarse en variables farmacocinticas como la vida media plasmtica del compuesto (t) y la pauta de dosificacin (T): Deseable: CVA 0.25 [ (2T/t 1) / (2T/t + 1) ] x 100

SD experimental de una nica medida SD experimental de la media

Incert ( x j ) = s (q )

La DS se usa directamente como incertidumbre estndar del correspondiente componente xj medido n veces

Evaluacin de mtodos analticos

Incertidumbre en el laboratorio clnico
3) Cuantificar las incertidumbres: Ajuste para propsitos clnicos Si los resultados del test se interpretan en funcin de valores de decisin clnica o de referencia determinados por diferente mtodo, el sesgo debera contemplarse como una parte de la estimacin de la incertidumbre de la medida y utilizar un objetivo analtico apropiado Optimo: BA = 0.125 (CVI2 + CVG2)1/2 Deseable: BA 0.250 (CVI2 + CVG2)1/2 Minimo: BA 0.375 (CVI2 + CVG2)1/2 BA = Sesgo, componente sistemtico del error CVI = Coeficiente de variacin (intra-individual), derivado de la variacin biolgica intra-individual del mensurando especificado (analito). CVG = CV de la variacin biolgica inter-individual

Evaluacin de mtodos analticos

Para mtodos donde tanto sesgo como imprecisin deban cumplir criterios adecuados para la aplicacin clnica, conviene combinar ambos parmetros como Error Total permisible (ETp), estableciendo nuevos niveles de tolerancia: Optimo: ETp = 1.65 (0.25 CVI ) + 0.125 (CVI2 + CVG2)1/2 Deseable: ETp 1.65 (0.50 CVI ) + 0.250 (CVI2 + CVG2)1/2 Minimo: ETp 1.65 (0.75 CVI ) + 0.375 (CVI2 + CVG2)1/2

Evaluacin de mtodos analticos

Para estimar la incertidumbre de la medida de un resultado calculado por suma o diferencia de medidas independientes (esto es, medidas cuya covarianza es nula).

Evaluacin de mtodos analticos

Para estimar la incertidumbre de la medida de un resultado calculado por producto o cociente de medidas independientes (esto es, medidas cuya covarianza es nula).