UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA EL DESARROLLO

ESCUELA PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

CURSO DOCENTE TEMA PRCTICA CICLO ALUMNOS : ANLISIS INSTRUMENTAL : Mg. Q.F. RAMIREZ ROCA EMILIO : ESPECTROFOTOMETRIA : N 03 : V : TOLEDO MEDINA, FRANKLIN RAMIREZ ZURITA, DELFIN PEREYRA MELGAREJO, JACKY CORDOVA CHAVEZ , EDMUNDO ROS CONTRERAS, SERGIO QUISPE HILARIO, MIZRAIM OSCO JUICA, LUIS PATRICIO CASTILLEJO, WILMER

LIMA 2013

PRACTICA N 03 DE ANLISIS INSTRUMENTAL ESPECTROFOTOMETRIA

La espectrofotometra se refiere a mtodos cuantitativos de anlisis qumico que utilizan la luz para medir la concentracin de las sustancias qumicas. Se conocen como Espectrofotometra de adsorcin visible (colorimetra), ultravioleta, infrarroja. La espectrofotometra se basa en principios colorimtricos, en este proceso los colorantes y productos qumicos se combinan con una solucin que contienen una analito, el color de la solucin da lugar a diferentes cantidades de luz absorbida; La cantidad de luz absorbida, medida con un espectrofotmetro, indica la cantidad de este analito. I. OBJETIVOS: Conocer y aplicar los fundamentos de la espectrofotometra para la determinacin de concentraciones en soluciones. Conocer los fundamentos de la espectrofotometra y las variables

involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger. Seleccionar la longitud de onda apropiada para poder medir la absorbancia. Construir una curva patrn de soluciones de permanganato de potasio. II. FUNDAMENTO: La Espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la deteccin especfica de molculas. Se caracteriza por su precisin, sensibilidad y su aplicabilidad a molculas de distinta naturaleza (contaminantes, biomolculas, etc.) y estado de agregacin (slido, lquido, gas). Los fundamentos fsico-qumicos de la espectrofotometra son relativamente sencillos.

La espectroscopia UV-Visible estudia el fenmeno de adsorcin de la radiacin UVVisible de molculas orgnicas e inorgnicas. La regin visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm. U.V lejano 0.6 190 U.V cercano 190 380 nm Visible 380 780 nm

La absorcin de la radiacin ultravioleta o visible por molculas orgnicas e inorgnicas, generalmente se produce por la excitacin de los electrones de enlace, por lo tanto, la longitud de onda de los mximos de absorcin se puede relacionar con los enlaces de las especies absorbentes. Los mtodos espectroscpicos se (o emitir) radiacin basan en la capacidad de las sustancias de absorber reactivo o producto durante una reaccin. El aparato detecta la cantidad de luz transmitida o absorbida a travs de la solucin en la celda y la compara con la que se transmite o absorbe a travs de una solucin de referencia denominada blanco. La lec tura en la escala ya est convertida en absorbancia.

electromagntica. stos se pueden emplear para determinar la concentracin de un

La transmitancia de la muestra se define como la relacin de la radiacin transmitida y la incidente (T= I/ I 0). La disminucin de la intensidad de la radiacin depende de la concentracin del absorbente y de la longitud del camino recorrido por el haz. Estas relaciones se recogen en la Ley de Lambert-Beer-Bourger:

A = -log T A = log ( I / I 0 ) = ( b) c ABSORBANCIA = ( b) c Que establece una relacin lineal entre la absorbancia y la concentracin, donde: () es la constante de proporcionalidad llamada coeficiente de absorcin molar, absortividad molar o coeficiente de extincin (M -1 cm -1). Es la caracterstica de una sustancia que nos dice cunta luz absorbe a una longitud de onda determinada. (b) es el paso ptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm). (c) es la concentracin de la especie de la cual estamos absorbancia (M). La ecuacin mencionada es el fundamento de la espectrofotometra. La ley de Lambert-(0.01M), cuando la especie absorbente no participa en un equilibrio que dependa de su concentracin. Beer Bourger se cumple para una radiacin monocromtica que atraviesa una disolucin diluida. midiendo la

III. MATERIALES: KMno4 Espectrofotmetro. Fiolas. Pipetas. Balanza. Agua destilada. Tubos de ensayo.

IV.

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar una solucin de KMnO4 10 mg % Pesar 100mg de permanganato de potasio, disolver en 100 ml de agua de esta

solucin tomo 10 ml y agrego agua destilada C.S.P 100 ml, para obtener KMnO4 10mg %

 Tabla de las concentraciones.

DETERMINACION DE CONCENTRACION N 01 N 02 N 03 N 04 2.0 4.0 2.0 10 8 6 8 2mg % 5mg %

KMnO4 K2CrO7 H2O Concentracin mg%

N 05 4.0 6

Proceso de preparacin de las soluciones a utilizar en el Espectrofotmetro.

 Luego cargamos en una celda del Espectrofotmetro la solucin obtenida de KMnO4 2mg %, y luego procedemos a la medicin de la longitud de onda con respecto a la absorbancia.

V.

RESULTADOS:

LONGITUD DE ONDA CON RESPECTO A LA ABSORBANCIA

EVENTO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 (nm) 400 405 410 415 420 425 430 435 440 ABSORBANCIA 0.06 -0.02 -0.09 -0.15 -0.22 0.57 0.51 0.45 0.39 EVENTO 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 (nm) 445 450 455 460 465 470 475 480 485 490 ABSORBANCIA 0.33 0.28 0.23 0.19 0.16 0.13 0.78 0.04 0.00 -0.27

 Luego determinaos el Lambda ptimo con un grfico.

1.00 0.80

LAMBDA OPTIMO

ABSORBANCIA

0.60 0.40 0.20

0.00
400405410415420425430435440445450455460465470475480485490 -0.20 -0.40

LONGITUD DE ONDA

VI.

CONCLUSIONES

La correcta preparacin de la solucin de KMnO4 2mg % nos ayud a obtener datos confiables de la medicin de la longitud de onda con respecto a la absorbancia.

Se aprendi el uso correcto del Espectrofotmetro, sus funciones, el tiempo de espera que se debe tener antes de hacer una medicin, la correcta posicin que debe adoptar una determinada celda y la importancia del cuidado del instrumento de medicin.

Los datos obtenidos en el Espectrofotmetro nos sirvi para determinar el Lambda ptimo en el grfico.

La Espectrofotometra es un mtodo analtico indirecto porque se basa en la medicin de la absorbancia o transmitancia de las radiaciones.

La Espectrofotometra es el mtodo ms usado, debido a que es sencillo, especfico y sensible y que nos ayuda a determinar la transmitancia de un determinado analito.

Esta prctica nos ayud a conocer y aprender el uso y manejo correcto del espectrofotmetro de absorcin de UV visible a travs de una solucin que presenta color.

Aprendimos a medir la longitud de onda y que vara de acuerdo al aumento o disminucin de esta, tambin se puede utilizar esta tcnica para la cuantificacin de una sustancia.

VII.

RECOMENDACIONES

Se debe seguir las indicaciones del docente a cargo de la prctica, para que no haya errores en los procedimientos y resultados.

Realizar con precisin los clculos y tomar el peso adecuado, al momento de la preparacin de las soluciones para obtener unos resultados ptimos.

Encender el Espectrofotmetro con un tiempo de 15 a 20 minutos de anticipacin para calentar el equipo.

Calibrar el Espectrofotmetro con la solucin a trabajar que en este caso es el agua destilada y llevarlo a 0 de absorbancia o 100 de tramitancia.

Limpiar sumamente con cuidado la celda donde se pondr la solucin y poner el lado transparente virando hacia en el foco de luz que se encargara de darnos las medidas ptimas.

Solicitar con una semana de anticipacin los materiales, reactivos, equipos que se van a utilizar en la prctica para no tener ningn inconveniente durante el desarrollo de esta.

VIII.

BIBLIOGRAFIA

Conceptos de fsica, Hewitt P. G., Limusa, 1997

Fisicoqumica, Castellan G. W., Addison Wesley Longman, 2 Edicin, 1987.

Fisicoqumica, Keith J. Laidler, John H. Meiser, CECSA, 1a. Edicin, 1997.

Fisicoqumica, Ira N. Levine, Mc Graw Hill, 4 edicin, 1996.

http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/quimbiotec/FQpractic a4.pdf

http://www.mexicoforense.org/biblioteca/balistica/fundamentos_espectrof otometria.pdf

http://www.uam.es/docencia/qmapcon/QUIMICA_GENERAL/Practica_4 _Colorimetria_Ley_de_Lambert_Beer.pdf

http://www.uv.es/qflab/2012_13/descargas/cuadernillos/qf1_innovacion/c astellano/3-pKindicador.pdf