Veterinaria Uruguay Intoxicacin por 119:4-16, 1993 Amaranthus quitensis

NECROSIS TUBULAR TXICA Y EDEMA PERIRENAL EN BOVINOS ASOCIADO A LA INGESTIN DE AMARANTHUS QUITENSIS

Dr. Fernando Dutra*, Dr. Elias Lewin** y Dr. Norberto Paiva*1

RESUMEN
Se describe un brote de intoxicacin causado por la ingestin del Amaranthus quitensis ("yuyo colorado"). Durante el verano '89-90, en un establecimiento agrcola-ganadero de la 7ma seccin del departamento de Treinta y Tres, enfermaron y murieron un total de 47 bovinos sobre un total de 105, pastoreando un rastrojo invadido por el Amaranthus quitensis. El cuadro clnico se caracteriz por debilidad extrema, diarrea oscura, ascitis y edemas seguidos de postracin y muerte. El edema perirenal, la necrosis de los tbulos renales y los elevados niveles de urea y creatinina caracterizaron a la enfermedad como una nefrosis tubular txica. La enfermedad se reprodujo experimentalmente en un ternero sin antecedentes de consumo de la planta, lo que permiti confirmar el diagnstico y estudiar la evolucin de los niveles de urea, creatinina, calcio y GT. Se discute la presencia de una nefrotoxina especifica en la planta como causa del cuadro txico. Palabras claves: Bovinos, edema perirenal, Amaranthus quitensis, nefrotoxina.

SUMMARY
An outbreak of Amaranthus quitensis poisoning in beef cattle is described. Forty seven yearlings, heifers and adult cows out of 105, died after several days of weakness, hemorrhagic diarrhea and ascitis. The cattle became recumbent and died. At necropsy, perirenal edema and toxic tubular nephrosis were seen. Pertinent clinical laboratory findings included incresed urea nitrogen and creatinin content. The confirmation of the toxicity of Amaranthus quitensis was done by a calf-feeding trial. The serum levels of urea, creatinin, calcium and GT were also studied in this trial. The possibility of a nephrotoxin in the plant as the cause of poisoning is discussed. Key words: Cattle, perirenal edema, Amaranthus quitensis, nephrotoxin

Introduccin. Las plantas con un efecto txico primario sobre el rin son relativamente pocas. Sin
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Laboratorio Regional de Treinta y Tres, DILAVE, "Miguel C. Rubino. **Ejercicio liberal, Treinta y Tres. 1
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embargo, su presencia se asocia frecuentemente a extensas y severas prdidas entre las especies de inters econmico20. En efecto, la intoxicacin por Amaranthus spp., comnmente conocido como "yuyo colorado", ha sido descrita en diversas partes del mundo en cerdos 6,12, ovinos y caprinos7,13,14, as como en bovinos3,5,8,9,10,11,15. En el cono sur la enfermedad fue descrita en la Argentina2,16, Brasil17 y Uruguay1. La accin txica de la planta ha sido atribuida a diferentes principios. El Amaranthus retroflexus, la especie mejor estudiada de dicho gnero, puede contener elevados niveles de nitratos y hasta un 30% del peso seco de las hojas como oxalato 4. Si bien ambos principios han sido responsabilizados de cuadros txicos, la mayora de las comunicaciones hacen referencia a un tercer principio, an no identificado, de accin especficamente nefrotxica y responsable del cuadro patolgico conocido como "Edema perirenal" en el cerdo 10,12, o "Enfermedad perirenal", en bovinos2,3,6,. El brote y la reproduccin experimental descritos en sta comunicacin corresponden a ste ltimo cuadro clnico-patolgico y su reporte, dirigido a los colegas, tiene como finalidad hacer conocer sta intoxicacin de creciente importancia en la regin agrcola-ganadera del Este de nuestro pas. I. Historia y Cuadro Clnico En el mes de enero de 1990 se solicit la intervencin del Laboratorio Regional de Treinta y Tres (DILAVE,"Miguel C. Rubino"), por una mortandad de bovinos en un establecimiento ubicado en la 7ma seccin del departamento de Treinta y Tres. El lote problema se compona de 105 novillitos y vaquillonas de 2 aos de edad y novillos de ms de 3 aos, todos mayora Hereford, Holando y sus cruzas, as como algunas vacas. Al comenzar el problema los animales se encontraban desde haca 9 das en un rastrojo de soja de 40 Ha. En los aos 1987, 1988 y 1989 el potrero fue sembrado con soja. En 1989 se fertiliza y se siembra con Moa de Hungra. Al momento de la primer visita el potrero en cuestin presentaba muy poca Moa (abundante slo en pequeas reas), estando compuesto el resto de tapiz por malezas dentro de las cuales predominaba el Amaranthus quitensis o "yuyo colorado", el cual se encontraba muy comido. Otras malezas halladas fueron la Conyza bonaeriensis ("yerba carnicera") y la Setaria sp.
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El motivo de consulta por parte del propietario del establecimiento fue el hallazgo de una vaca muerta as como de 20 a 25 animales con debilidad del tren posterior, tambaleo y cada. Ante la recomendacin del colega actuante el lote es retirado hacia un potrero de campo natural fuertemente infestado por mo-mo y con escaso forraje disponible debido a la sequa que se padeca en ese momento. La sintomatologa remite en los siguientes 3 a 5 das, pero los animales pierden estado y se muestran dbiles y desganados. A los 5 das de estar en el nuevo potrero ( 14 das despus de haber entrado a pastorear en el rastrojo) 3 animales son encontrados muertos en posicin decbito dorsal, con los miembros en extensin, prolapso rectal y corrimiento sanguinolento por la aberturas naturales. Es en ste momento que interviene el Laboratorio Regional ante el llamado del colega actuante. A partir de entonces los animales desarrollan manifestaciones clnicas caracterizadas por extrema debilidad, flaccidez muscular, atona ruminal y edema subcutneo no muy manifiesto, especialmente en abdomen y en la regin submandibular, sntoma que se observa solamente en algunos animales. En otros se constat tambin ascitis (abdomen dilatado, sucusin positiva). La temperatura se mantiene dentro de los rangos normales. El sntoma ms llamativo, adems de la acentuada debilidad y la ascitis, es una diarrea escasa, oscura casi negra y de aspecto similar al barro. En los das siguientes la debilidad se hacia ms evidente, lo que se manifestaba por la posicin en que eran encontrados los animales al morir. En efecto, a excepcin de las primeras muertes, los cadveres se encuentran en decbito esternal, con los miembros posteriores en extensin posterior ("posicin de rana") y cabeza extendida o en posicin de autoauscultacin. Los animales mueren en la misma posicin en que caen ("muerte tranquila") sin manifestaciones de excitacin ni convulsiones. Esto fue constatado en un novillito que muri al salir de las mangueras.

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En el correr de los siguientes 10 das mueren un total de 47 animales. Desde el ingreso del lote al rastrojo problema hasta la muerte del ltimo animal se sucedieron 24 das. Los datos

Figura I epidemiolgicos se muestran en la Figura I. II. Diagnstico y Evolucin Para el diagnstico y diagnstico diferencial se cumplieron diversas etapas. Se efectuaron un total de 6 necropsias y muestras de diversos rganos se fijaron en formol al 10% para su estudio histopatolgico. Se hizo cultivo bacteriolgico en una muestra de sangre previo a la primer necropsia. Se procesaron adems 5 muestras de sangre de animales con sintomatologa, en las que se determin los niveles de urea. Se us la prueba de la difenilamina para determinar los niveles de nitratos y nitritos, tanto en la pastura problema como en los lquidos orgnicos de los animales necropsiados. Por ltimo, con la finalidad de confirmar el diagnstico y estudiar ms detalladamente la patognesis de la intoxicacin por el Amaranthus quitensis en aspectos tales como el perodo de incubacin, la patologa clnica y los hallazgos macroscpicos e histopatolgicos, se llev a cabo
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la reproduccin experimental de la enfermedad. a. Patologa Los 6 animales necropsiados presentaron un cuadro similar. El hallazgo ms constante, sin embargo, y que fue observado en todos los animales necropsiados, fue el masivo edema hemorrgico perirenal y retroperitoneal que rodeaba los riones, urteres, vejiga urinaria y los otros rganos pelvianos. Ambos riones eran de color marcadamente amarillo plidos, lo que estaba en claro contraste con el color oscuro normal del parnquima. La superficie de corte era plida, hmeda debida al edema, y con pequeas hemorragias localizada en la corteza. La mdula, en cambio, era de color rojo oscuro, marcando un contraste muy evidente con la corteza. En algunos animales la vejiga se encontr distendida con abundante orina clara y transparente. En otros, en cambio, la vejiga estaba vaca y colapsada debido, posiblemente, a la anuria. Edemas serosanguinolentos, adems del manifiesto edema perirenal, se encontraron en el tejido subcutneo y mesentrico. En el tubo digestivo exista una intensa congestin, hallndose un contenido oscuro hemorrgico, sumamente lquido. El epitelio ruminal se desprenda fcilmente pero la pared tena aspecto y color normal. El cuajo presentaba un severo cuadro congestivo-hemorrgico, edema de pliegues y un contenido escaso y oscuro. El mismo tipo de lesin fue hallada en el intestino delgado, aunque aqu el contenido lquido-hemorrgico predominaba y era ms evidentes en la porcin posterior (yeyuno-leon). No se encontraron lesiones de tipo erosivo/ulcerativas en el tubo digestivo, incluyendo esfago, excepto un animal que presentaba una lesin erosiva en la cara lateral de la lengua. En varios animales se encontr gran cantidad de liquido seroso, de color amarillo pajizo, que no coagulaba a la exposicin. Esta ascitis, si bien no era constante, en alguno de los animales alcanzaba a varios litros y era la causa de la dilatacin abdominal observada clinicamente. El mismo tipo de trasudado se encontraba presente en las cavidades pleural y pericrdica. Se observ tambin corrimiento de lquido seroso por los orificios nasales, acompaado en algn caso, por estras de sangre. Otros hallazgos inespecficos y ms inconstantes incluan las hemorragias subendocrdicas y subepicrdicas, congestin de traquea, as como una superficie de corte pulmonar hmeda que rezumaba lquido espumoso a la presin. En todos los casos, sin embargo, el msculo cardaco y esqueltico se encontraban plidos.
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b. Histopatologa2 Histopatologicamente, lo ms importante y caracterstico era una extensa necrosis del epitelio de los tbulos renales. Los tbulos proximales estaban particularmente afectados, pero tambin haba degeneracin, necrosis, descamacin y formacin de cilindros en los otros tbulos. La membrana basal de los tbulos se encontraba intacta en todos los casos. La luz de los tbulos contena cilindros hialinos y granulares. En el tejido intersticial, especialmente rodeando los vasos sanguneos, era evidente el edema. En los glomrulos se evidenciaba la presencia de material granular en el espacio de Bowman, debido a la necrosis y descamacin de la cpsula. En suma, la extensa necrosis de los tbulos junto a la preservacin de la membrana basal caracterizan las alteraciones histopatolgicas como una necrosis tubular aguda txica, o necrosis tubular txica. En el intestino se presentaba una intensa descamacin y hemorragia en las extremidades de las vellosidades, congestin de la lmina propia y de la submucosa, edema e infiltracin inflamatoria de clulas mononucleares. En la mayora de los cortes histolgicos la degeneracin y descamacin no afectaba a las criptas, las cuales estaban intactas o hipertrficas. El acortamiento (atrofia) y la fusin de las vellosidades desnudas, junto a la infiltracin inflamatoria, caracterizaba dichas zonas menos afectadas. La prdida total de la mucosa (incluyendo las criptas) acompaada de una severa infiltracin inflamatoria era ms comn en el duodeno, aunque las glndulas submucosas se encontraban siempre intactas. La degeneracin de las pequeas arterias musculares y arteriolas de la submucosa se caracterizaban por la hipertrofia y descamacin del endotelio, que perda su disposicin aplanada para convertirse en clulas redondas, y por la deposicin subendotelial de fibrina. La degeneracin de la pared muscular y la trombosis (cosa no muy frecuente) se vio asociada, en un caso, a una necrosis coagulativa (infarto) de la mucosa del duodeno, aunque tambin aqu las glndulas submucosas escapaban al cuadro isqumico. El hgado presentaba una clara degeneracin vacuolar con un buen nmero de ncleos mostrando una acentuada condensacin de la cromatima. Debido al severo edema intracelular los sinusoides se encontraban colapsados. En el pulmn haba congestin y edema de las paredes alveolares as como derrame
El procesamiento de los materiales para histopatologa se realiz en su totalidad en el laboratorio "Miguel C. Rubino" de Montevideo. El diagnstico histopatolgico, por su parte, correspondi a la Dra. Cecilia Paullier.
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intraalveolar (edema pulmonar). El miocardio se encontraba con evidentes signos de degeneracin. La fibras musculares se presentaban delgadas, onduladas y con vacuolas claras perinucleares. En los segmentos afectados, el sarcoplasma de las fibras haba desaparecido, dejando el sarcolema vaco y colapsado. La contraccin y la prdida de las estriaciones, caracterizaba las extremidades de dichos segmentos musculares degenerados. Como es de esperarse, en el miocardio no se observ ningn intento reparativo. Degeneracin arteriolar acentuada, como la vista en el tubo digestivo, no se pudo observar en el miocardio. c. Bacteriologa El hemocultivo arroj resultados negativos para el Bacillus anthracis y otros patgenos conocidos. Debido a que las primeras muertes se presentaron sin un cuadro clnico definido (animales encontrados muertos), el hecho de descartar el carbunco ayud a encarar las necropsias con mayor tranquilidad. d. Patologa Clnica Los valores sricos de urea de 5 animales que presentaban debilidad, adelgazamiento, hidropesa y diarrea oscilaron entre 530 y 605 mg %, los cuales estn ms de 12-14 veces por encima de los normales, indicando una severa insuficiencia renal (Tabla I). e. Otros anlisis El test de la difenilamina para suero y lquidos orgnicos fue negativo, lo cual, junto a la ausencia de sangre color chocolate, descart la intoxicacin por nitratos y nitritos. El mismo test llevado a cabo en el campo, en las hojas y tal los del yuyo colorado y otros pastos, fue tambin negativo. Sin embargo, es de destacar que si el perodo de tiempo entre la cosecha de yuyo colorado y el test se demoraba algunas horas (en el traslado entre el establecimiento y el laboratorio, por ejemplo) el material se volva fuertemente positivo. Esto fue tambin observado por otros11,15. El yuyo colorado fue diagnosticado como Amaranthus quitensis en la ctedra de botnica de la Facultad de Agronoma de Montevideo. f. Diagnostico Diferencial
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Debido a la evolucin cambiante del cuadro se debieron encarar diversos diferenciales. La intoxicacin por Paspalum spp. y/o Cynodon spp. se consider en el diferencial al comienzo del brote cuando los animales fueron vistos con ataxia y temblores. Su ausencia del potrero permiti descartarlos. El mo-mo fue tambin considerado, al presentar los animales diarrea hemorrgica y al existir en el potrero al que fueron llevados, grandes cantidades del mismo. Los hallazgos de necropsia y el no encontrarse plantas comidas permiti eliminarlo como causa del brote. El BVD se elimin por la falta de hallazgos de sus lesiones caractersticas a la necropsia y por la alta letalidad del cuadro. El carbunco atpico fue tambin considerado en un principio, teniendo en cuenta la falta de antecedentes de vacunacin, la aparicin repentina de animales muertos sin un cuadro clnico previo muy claro y la presencia de edemas21. El cultivo y los frotis negativos eliminaron esa posibilidad. Por ltimo, la presencia de gran cantidad de yuyo colorado, en gran parte comido, y los hallazgos constantes de edema perirenal y ascitis, permitieron llevar a cabo el diagnstico presuntivo de necrosis txica asociada al Amaranthus quitensis. El cuadro histopatolgico, los niveles de urea en suero, el diagnostico diferencial y posteriormente la reproduccin experimental, confirmaron definitivamente el diagnstico. III. Reproduccin Experimental El 17/1/90 se ata en una estaca, en el rastrojo problema un novillito Holando x Hereford, de 15 meses de edad y alrededor de 200 kg. de peso, proveniente de otro establecimiento donde no exista el yuyo colorado3. Se opt por sta metodologa para evitar inconvenientes que pudieran surgir al cosechar la planta y administrarla en un box. En efecto, niveles elevados de nitratos y nitritos eran detectados por el test de la difenilamina, si el mismo se demoraba algunas horas luego del corte. Observaciones similares haban sido comunicadas por otros 11,15. Por sta razn, y para evitar confusiones con la intoxicacin por nitratos/nitritos, se prefiri usar el mtodo de la estaca con un estricto seguimiento y registro del tipo de forraje consumido. Se tuvo especial cuidado en que el largo de la cuerda le permitiera comer slo en reas invadidas por el Amaranthus quitensis. Diariamente se determinaron las especies pastoreadas por el animal, y cuando se crey necesario se cambi de lugar la estaca, buscando que la oferta forrajera del yuyo
Nuestro agradecimiento al productor y Tc. Agrop. Horacio Rodrguez, por donar el animal para ste trabajo experimental, pese haber soportado enormes prdidas de animales pocos das antes, a causa de la intoxicacin por el Amaranthus quitensis.
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colorado fuera siempre abundante. Se pudo constatar as que el animal seleccionaba preferentemente el Amaranthus como forraje, evitando comer otras hierbas presentes, tales como la Setaria spp. y la yerba carnicera (Coniza bonariensis)4. En los ltimos das del experimento el animal cosech tambin algunos brotes de la Moa de Hungra. Muestras de sangre y suero se tomaron previo al ingreso al rastrojo y en 4 oportunidades ms, hasta la muerte del animal. Los niveles de urea, creatinina y fueron determinados en cada oportunidad5. Asimismo se llevaron a cabo funcionales hepticos en cada una de las muestras. En cada visita se registraba tambin la evolucin clnica del paciente. A la necropsia se registraron las lesiones encontradas, y muestras de diversos rganos se fijaron en formol al 10% para su estudio histopatolgico. Resultados

Agradecemos al Tc. Agrop. Enrique Fernndez por la identificacin de las diferentes especies botnicas.

Nuestro agradecimiento al laboratorio de Patologa Clnica del CIVET "Miguel C. Rubino" por el procesamiento de las muestras de sta reproduccin experimental.
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La Tabla I muestra los valores de urea y creatinina durante el perodo experimental. Como puede observarse, los niveles de creatinina al comenzar el ensayo se encuentran dentro del rango normal (1.02-1.53 mg %). Los niveles de urea al comienzo del experimento (12 mg%) se encuentran dentro del rango aceptable (8-45 mg%), aunque cerca del valor mnimo normal. Sin embargo, las concentraciones de urea y creatinina muestran claramente que el animal no sufra de alteraciones renales al comienzo del experimento. Das Urea (mg%) 0 12 6 10 1,4 8 15 3,2 13 197 12,0 15 299 17,7

Creatinina (mg%) 1,1

Tabla I. El da 0 corresponde al primer da del ensayo.

Figura 2 Los hallazgos clnicos ms resaltables junto a la evolucin en la concentracin srica de urea
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y creatinina se resumen en forma grfica en la Figura 2. A partir del 6to. da de comenzar el experimento los niveles de urea y creatinina comienzan a aumentar, aunque el cambio se hace realmente manifiesto a partir del da 8. As, si bien los niveles de urea hacia el 8vo. da estn dentro del rango normal, la concentracin de creatinina (3.2 mg %) se encuentra por encima del rango aceptable. El da 10 el animal se encontraba alerta y mostraba una mayor docilidad. A diferencia de lo que era habitual das anteriores en animal era capturado, revisado y sangrado sin mayor dificultad. Hacia el 13er. da el animal se mostraba dbil, aptico y no prestaba resistencia a manejos tales como la revisacin clnica y/o extraccin de sangre. Alguna estra de sangre (rinorragia) se observ durante el sangrado y revisacin clnica a que se someti el animal. En el correr de los das siguientes, la debilidad se hizo ms acentuada permaneciendo el animal echado la mayor parte del tiempo. El da 15 los niveles de urea alcanzan 299 mg %, valor ste 25 veces por encima a los que tena el animal al ingresar al rea experimental. Incrementos similares se observaron en la concentracin de creatinina (ver Tabla 1). Hacia los das 15-16 el animal se presenta con taquipnea, y se hace evidente un ruido lquido al mover el animal, siendo la sucusin positiva en el 1/4 inferior del abdomen. A la necropsia pudo determinarse que el origen del ruido lquido era el hidrorumen que el animal presentaba. En ningn momento el animal present diarrea.

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Los niveles de GT se comportan en forma similar a la evolucin mostrada por la concentracin de urea y creatinina. Sin embargo, los cambios observados no tienen el mismo orden de magnitud que aquellos. El incremento de la GT es claro (rango normal: 4-20 U/L), pero no puede aseverarse que responda (unicamente, al menos) a una lesin heptica. En efecto, los niveles de la ASAT y de la LDH se encontraron siempre dentro de los rangos normales (datos no mostrados). Obsrvese que la concentracin de la GT, en la respectivamente). La concentracin de calcio por su parte, cae por debajo de lo normal luego del 8vo. da, llegando a los 6.1 mg % el da 16, valores stos que indican una severa hipocalcemia. Como puede observarse en la correspondiente figura, la cada en los niveles de calcio, al igual que el aumento en la concentracin de la GT, parece ser tambin un evento ms tardo que el incremento en la concentracin de creatinina. Figura 4 Hacia el 16to. da, y teniendo en cuenta su estado, se decide sacrificar el animal. Sin embargo, pocas horas despus el animal es encontrado muerto. El hallazgo de necropsia ms resaltable era un extenso edema perirenal y retroperitoneal que,
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Figura 3

Figura 3, comienza a aumentar ms tarde que los niveles de creatinina (da 8 contra da 6,

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extendindose a travs del anillo inguinal, infiltraba el tejido conectivo de la entrepierna y rodeaba el cordn testicular. Excepto en sta regin, no se encontraron edemas en el tejido subcutneo. Los riones se encontraban sumamente plidos, de color amarillo y con numerosas hemorragias puntiformes distribuidas en toda la corteza renal. La mdula renal era de color rojo oscuro. En la vejiga, que se encontraba totalmente colapsada, no se encontr orina. Escaso contenido lquido, de color amarillo pajizo se observ en las cavidades peritoneal, pericrdica y pleural. Dicho fluido no coagulaba a la exposicin (trasudado). Los msculos del tren posterior era marcadamente plidos, secos al corte, aunque con escaso edema en los planos intermusculares. El msculo cardaco estaba flccido, plido, seco al corte y con algunas petequias subepicrdicas. Los pulmones eran de color rojo vinoso, pesados y la superficie, que era hmeda al corte, exudaba espuma a la presin. Abundante contenido espumoso se encontraba en la traquea y el rbol bronquial. La laringe y el 1/3 superior de la traquea se encontraban muy congestivos. Un corrimiento lquido, de color verdoso y sanguinolento se observ en las fosas nasales. El contenido de los preestmagos estaba sumamente digerido, sin la estratificacin normal (hidrorumen), y era la causa del ruido lquido y de la sucusin positiva en el animal vivo. Salvo el contenido lquido del intestino y algunas petequias subserosas en el duodeno, no se encontraron lesiones macroscpicas significativas en el intestino delgado y grueso. Un contenido sumamente digerido, casi lquido, fue el nico hallazgo en el cuajo. Histopatolgicamente, lo ms importante y caracterstico era una extensa necrosis del epitelio de los tbulos renales. Degeneracin, necrosis, descamacin y formacin de cilindros hialinos y granulares en los tbulos, con preservacin de la membrana basal, caracterizaban a la lesin como una necrosis tubular aguda txica, o necrosis tubular txica. En el intestino se presentaba descamacin y hemorragia en las extremidades de las vellosidades, congestin de la lmina propia y de la submucosa con edema e infiltracin inflamatoria de clulas mononucleares. La degeneracin y descamacin no afectaba a las criptas, las cuales estaban intactas o hipertrficas. As, la lesin del tubo digestivo puede caracterizarse como una atrofia de las vellosidades con un compartimiento proliferativo hipertrfico o normal y con infiltracin mononuclear de la mucosa. La degeneracin de las pequeas arterias musculares y arteriolas de la submucosa se caracterizaban por la hipertrofia y descamacin del endotelio, que
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perda su disposicin aplanada para convertirse en clulas redondas, y por la deposicin subendotelial de fibrina. El hgado presentaba una importante degeneracin vacuolar. Varias de las clulas mostraban condensacin acentuada de la cromatina nuclear. Debido al severo edema intracelular los sinusoides se encontraban colapsados. En el pulmn haba congestin y edema de las paredes alveolares aunque el derrame intraalveolar (edema pulmonar) no era muy manifiesto. La fibras musculares del miocardio se presentaban delgadas, onduladas y con vacuolas claras perinucleares. En los segmentos afectados, el sarcoplasma de las fibras haba desaparecido, dejando el sarcolema vaco y colapsado. La contraccin y la prdida de las estriaciones, caracterizaba las extremidades de dichos segmentos musculares degenerados. Como era de esperarse, en el miocardio no se observ ningn intento reparativo. Degeneracin arteriolar del tipo de la vista en el tubo digestivo, no se pudo observar en el miocardio. Lesiones del mismo tipo de las del miocardio fueron observadas en el msculo esqueltico. En suma, las lesiones encontradas son prcticamente iguales a las descritas para el brote de intoxicacin. Sin embargo, el caso que nos ocupa no presentaba lesiones macroscpicas, exceptuando la nefrosis y el edema perirenal, tan evidentes y avanzadas, tales como ascitis, hidrotorax, enteritis y gastritis hemorrgica o diarrea. Esto puede explicarse por el hecho de que en sta reproduccin experimental el animal consumi casi exclusivamente "yuyo colorado", lo cual no es necesariamente el caso de los brotes de campo. Las lesiones histolgicas, en cambio, eran de la misma entidad que las encontradas en los casos de campo, lo que lleva a pensar que, dado suficiente tiempo o una menor ingesta txica, el animal hubiera desarrollado signos clnicos y lesiones macroscpicas en todo similares al caso de campo. DISCUSIN El Laboratorio Regional de Treinta y Tres funciona desde 1987. Fue poltica del mismo desde el comienzo, evitar en lo posible, funcionar meramente como un laboratorio receptor de muestras o de "anlisis clnico". Esto se basa en la conviccin de que el diagnstico como tal comienza en el campo y su xito depende fuertemente del estudio, seguimiento y recoleccin correcta de las muestras de cada brote. La discusin y el apoyo intelectual y tcnico al colega de
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ejercicio liberal son as vitales para arribar a un diagnstico correcto. Esto, a su vez, le permite al Laboratorio cumplir con otros objetivos, tales como establecer la presencia, epidemiologa e importancia econmica de aquellas enfermedades de la regin poco conocidas o desconocidas y de generar informacin para establecer lneas de investigacin sobre los problemas ms relevantes de la zona. El caso que se presenta en sta comunicacin tiene, adems de su inters acadmico intrnseco, la finalidad de mostrar el funcionamiento conjunto del Laboratorio y el colega en ejercicio liberal, en la bsqueda de dichos objetivos. La nefrosis tubular txica en bovinos, ovinos y suinos asociada al gnero Amaranthus es conocida en diversas partes del mundo2,3,6,10,12,14. En nuestro pas la intoxicacin por el "yuyo colorado", en su variante nefrotxica, fue comunicada por Rivero y col. en el Dpto. de Paysand1. La enfermedad era desconocida en la regin. La misma haba sido descrita en el estado de Ro Grande del Sur (Brasil), que presenta sistemas agrcolas-ganaderos similares a los de sta zona del pas17. Muchos establecimientos de la regin, tradicionalmente ganaderos, se han volcado en los ltimos aos a la actividad agrcola-ganadera. En stos sistemas productivos, cultivos de verano como la soja son sembrados 2 3 aos seguidos, dejando una pradera luego de la ltima cosecha. De seguirse sta prctica, no deberan existir rastrojos estivales, rastrojos que por lo general estn muy infestados con malezas. Muchas veces, sin embargo, y por diversas circunstancias, dicha prctica no se sigue, y rastrojos viejos son abiertos al pastoreo en el verano. Bajo stas condiciones epidemiolgicas (malas prcticas de cultivo y rastrojos viejos invadidos por malezas) sera de esperar que la intoxicacin fuera ms frecuente en el futuro. Ello es debido a que el Amaranthus quitensis o "yuyo colorado", hierba anual, rojiza, de porte erguido y que florece y fructifica en verano, es comn en dichos rastrojos. La misma es considerada maleza de los cultivos de verano en todas las regiones agrcolas24. El Amaranthus sp. puede contener elevados niveles de oxalatos, los cuales son tambin causantes de necrosis tubular txica e insuficiencia renal4,7,14. El presente caso no parece corresponder a sta variante de la intoxicacin ya que no se hallaron cristales de oxalato en los tbulos renales. Si bien la concentracin de oxalato en la planta no fue determinado, no podra descartarse que, niveles insuficientes como para causar la formacin de cristales, explicaran parte del cuadro clnico como los vistos al comienzo del brote. Signos clnicos tales como ataxia,
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temblores musculares e hiperexitabilidad, son comunes en estos tipos de intoxicacin, y generalmente se atribuyen a la hipocalcemia e hipomagnesemia causados por el efecto quelante del oxalato22. La ausencia de ste cuadro clnico y la tarda cada de los niveles de calcio vistos en la reproduccin experimental (Figura 4), son todos datos que hablan en favor de la existencia de un agente txico en la planta, otro que el oxalato, con efecto primario sobre los tbulos renales. Es probable entonces que la hipocalcemia, que se desarrolla tardiamente, sea del tipo de la que se describe en la insuficiencia renal aguda21. La presencia de nitratos y nitritos en el Amaranthus sp. ha sido tambin responsable de brotes caracterizados por disnea, temblores, tambaleos, cianosis y sangre de color marrn chocolate5,8,11,15. Ninguno de estos sntomas fueron vistos y el test de la difenilamina fue negativo tanto en los lquidos orgnicos como en la pastura recin cosechada. Si el test era llevado a cabo pocas horas despus de la cosecha, el material se volva fuertemente positivo. Otros autores han observaron lo mismo11,15. No parece haber una explicacin satisfactoria para el aumento en los niveles de nitratos en las plantas. Suelos cultivados con altos niveles de fertilizacin, una prolongada sequa y plantas capaces de acumular nitratos, factores todos existentes aqu, parecen ser los hallazgos ms comunes de la intoxicacin por nitratos/nitritos9,15. Probablemente la falta de otros factores necesarios para desencadenar la enfermedad, tales como una alta tasa de conversin de nitratos a nitritos en el rumen o bajos niveles en la planta de la enzima nitrato reductasa (que previene el acumulo de nitratos), expliquen porque el yuyo colorado no acumul niveles txicos de nitratos9,23. Cursack y col.16 describen una epizootia en la provincia de Santa Fe entre fines de 1965 y principios de 1966, con una mortandad estimada en 25000 cabezas vacunas. La misma se caracteriz antomo-patologicamente por un sndrome nefrotxico, atribuido por los autores a una intoxicacin sub-aguda por nitratos y nitritos. Sin embargo, los niveles de stos txicos no fueron determinados ni el tratamiento con azul de metileno dio algn resultado. Bradley y col., citado por Dodd et al.9,luego de llevar a cabo experimentos con dosis subletales de nitrato de potasio, concluy que el nitrato no produce intoxicacin crnica. La alta letalidad, la sintomatologa, los hallazgos de necropsia y la epidemiologia descriptas por Cursack y col. coinciden, por lo dems, con el brote aqu descrito. Es improbable entonces que la mortandad reportada por stos autores haya sido causada por la presencia de nitratos y nitritos en la planta. Parece entonces, que el ni el oxalato ni los nitrato/nitritos puedan ser capaces de explicar el sndrome nefrotxico aqu descrito. Un principio especficamente nefrotxico, an no
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identificado, se ha propuesto como el causante de los cuadros de "Edema perirenal" en bovinos y suinos12,20. Esta nefrotoxina especifica para los tbulos renales parece ser el caso que nos ocupa. Los hallazgos clnico-patolgicos ms resaltables del presente brote y del estudio experimental, la ascitis, los edemas, la gastroenteritis hemorrgica, y la gran debilidad muscular, pueden ser explicados en su totalidad por la necrosis txica masiva de los tbulos renales y la insuficiencia renal aguda que resulta. El edema perirenal fue el hallazgo ms constante y caracterstico tanto del brote de campo como de la reproduccin experimental. El mismo parece estar causado por el reflujo de orina a travs de los tbulos necrticos, el drenaje linftico y el consiguiente derrame y edema en el tejido conectivo perirenal y pelviano18. La interferencia con la regulacin del balance hidroelectroltico puede resultar tanto en deshidratacin como anasarca, as como en exceso de sodio y potasio. La retencin de sodio y agua contribuyen a la anasarca y la prdida de la funcin renal lleva a la anuria18. En varios animales, incluyendo el novillito del estudio experimental, sto se vio dramticamente reflejado en la falta total de orina en la vejiga, que era encontrada colapsada. La causa de la gastroenteritis en la uremia no est claramente determinada. El cuadro degenerativo de las arteriolas de la submucosa en la uremia (degeneracin y descamacin del endotelio, deposicin subendotelial de fibrina) parece ser un factor importante en la gnesis de las lesiones gastrointestinales19. La inadecuada circulacin sangunea del intestino causa la degeneracin y descamacin del epitelio, comenzando en los extremos de las vellosidades y progresando con el tiempo hacia la base de las criptas. La lmina propia desnuda se contrae, las vellosidades se atrofian, se fusionan y se producen extravasaciones sanguineas. Si la isquemia es leve el compartimiento proliferativo (criptas) se hipertrofia y y se produce la infiltracin inflamatoria2,19. La atrofia de las vellosidades con un compartimiento proliferativo hipertrofico o normal, cosa observada en varias lminas, es compatible con la hiptesis isqumica arriba descripta. El infarto masivo observado en la mucosa, asociado a degeneracin y trombosis de las arteriolas de la submucosa parece apoyar sta interpretacin. La hiperkalemia que se produce en la uremia es la responsable de la generalizada debilidad muscular que se observa y de la arritmia y paro cardiaco que conducen a la muerte 18,19. En particular, era muy llamativa la acentuada debilidad de los animales, especialmente luego de varios das de evolucin cuando el cuadro qued plenamente definido. El decbito esternal con
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pleurosttonos y miembros posteriores en extensin posterior, posicin caracterstica en la que los animales moran, solo puede entenderse si se comprende la falta de fuerza muscular para adoptar otra posicin una vez cado. El mecanismo del edema pulmonar y de la degeneracin muscular y cardiaca en la uremia es an oscuro 18,19. Ambos hallazgos eran muy claros en el presente caso. El seguimiento hecho al forraje consumido por el animal durante la reproduccin experimental mostr que el Amaranthus quitensis es una hierba apetecida por el bovino. Tambin Cursack y col.16 observaron que el "yuyo colorado" era consumido con preferencia, aun cuando la oferta forrajera era buena (sorgo forrajero var. Leotti) y abundante. Asimismo, la seleccin del Amaranthus retroflexus frente a otras plantas potencialmente txicas, fue comunicada por Stuart y col.10 en bovinos. La misma observacin ha sido hecha en suinos3. En un intento por evaluar el potencial forrajero del Amaranthus hybridus en animales, Mugerwa y col.7 suplementaron ovinos exclusivamente con esta especie hasta por 5 semanas. Si bien estos autores concluyen que el Amaranthus spp. puede administrarse con seguridad a rumiantes adultos, cuadros txicos atribuidos a esta hierba han sido descritos en ovinos y caprinos por otros 13,14. As, y teniendo en cuenta la apetecibilidad de estas plantas, an rastrojos o pasturas escasamente invadidos deberan ser considerados potencialmente txicos para todas nuestras especies de inters econmico. Los niveles de urea y creatinina comienzan a aumentar a partir del 6to. da del comienzo del experimento, y parecen ser estos los primeros metabolitos que se alteran en el curso de la intoxicacin (ver Figura 2). Hacia el da 8 la concentracin de creatinina ya se encuentra por encima de los niveles mximos aceptables. En el brote descrito por Stuart y col. 10, 5 das de pastoreo sobre un rea infestada por el Amaranthus retroflexus fueron suficientes para causar un 100% de mortalidad y letalidad, aun cuando los animales fueron retirados tempranamente del potrero. Los datos presentados por Cursack y col.4 indican un perodo de incubacin de 7 das hasta la aparicin del primer animal enfermo y varios con sintomatologa. Se han sealado, en casos experimentales en cerdos, perodos de incubacin de 7 y 8 das hasta la aparicin del cuadro clnico2. En el brote aqu descrito se sucedieron 9 das hasta la aparicin del primer animal muerto y varios con sintomatologa (ver Fig. 1). As, el perodo de incubacin necesario para causar lesiones irreversibles a nivel renal, tanto
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en casos naturales como experimentales, puede estimarse en alrededor de 6 das o menos. Hacia el 10mo. da de pastorear en el rea experimental el animal se mostraba ms dcil, permitiendo acercrsele y facilitando incluso la revisacin clnica. Esto estaba en claro contraste con lo que suceda das anteriores, cuando el animal luchaba y era difcil de controlar. Es muy factible pensar que estuviramos frente al comienzo del cuadro clnico, aunque al momento no fuera posible descartar que el animal simplemente se hubiese acostumbrado al manejo que se le haca. Si bien tres das despus la debilidad era bastante manifiesta, la sintomatologa era an lo bastante sutil como para ser pasada por alto a nivel de campo. El hallazgo inesperado de animales muertos es una referencia comn en la mayor parte de los casos de campo comunicados en la literatura2,3,16. El aumento en los niveles de la GT y la cada en la calcemia parecen ser eventos que se manifiestan algunos das mas tarde, con respecto a los cambios en los niveles de urea y creatinina (ver Fig. 4 y 5). En efecto, aquellos comienzan hacia el 8vo. da, cuando la creatinina se encuentra ya por encima del rango aceptable. La lesin heptica, caracterizada como degeneracin vacuolar, no repercuti en los niveles de la ASAT y la LDH (datos no mostrados) que se mantuvieron siempre dentro del rango aceptable. Es factible entonces que el incremento moderado en la GT haya sido causado bsicamente por la lesin renal (Dr. G. Uriarte, com. personal). No es factible determinar si la lesin heptica tiene como origen el principio txico propuesto o si es secundario a la insuficiencia renal que se desarrolla. Es probable que la hipocalcemia observada, por su parte, sea del tipo de la que se observa en la insuficiencia renal aguda18. El cambio de alimentacin, la alta digestibilidad y el bajo contenido en fibra cruda del Amaranthus7, as como la atona ruminal, podran ser la explicacin del contenido lquido altamente digerido y la prdida de estructuracin del contenido ruminal. Debido a la extensa necrosis tubular, todo tratamiento es infructuoso. Una vez aparecido el cuadro la enfermedad evoluciona inevitablemente a la muerte. La alta letalidad de esta intoxicacin ha sido puesta de manifiesto por varios2,10,16. El mtodo de control se reduce entonces al reconocimiento de la planta, a buenos mtodos de cultivo y a evitar que los animales la consuman. Teniendo en cuenta que la actividad agricola-ganadera va en aumento en sta zona del pais es que apuntamos a difundir el conocimiento de la enfermedad entre los colegas, para as
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colaborar en la implementacin de stos nuevos sistemas productivo y evitar las prdidas que en ellos se producen. Eso es en definitiva, el objetivo final de la labor de los Laboratorios Regionales. CONCLUSIONES 1. Una nefrotoxina especifica presente en el Amaranthus quitensis es la causante del sndrome nefrotxico conocido como "Enfermedad Perirenal" en bovinos. 2. El cuadro clnico (diarrea, debilidad) y anatomo-patolgico de la intoxicacin (edema perirenal, ascitis, nefrosis) se explican en su totalidad por la necrosis tubular y la uremia que le sigue. 3. El perodo de incubacin necesario para causar lesiones irreversibles a nivel renal, tanto en casos naturales como experimentales, puede estimarse en alrededor de 6 das o menos. 4. La alta letalidad, la gran apetecibilidad de la planta y la carencia de tratamiento especfico determinan que las buenas prcticas de cultivo sean la nica forma de evitar la invasin de los rastrojos por sta maleza y prevenir as las prdidas que causa.

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