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Artigo Nmero 27 UTILIZAO DE ENZIMAS NA ALIMENTAO ANIMAL Evandro Campestrini1; Vagner Thiago Mozer da Silva2; Matias Djalma Appelt2

Introduo Segundo o decreto lei n. 76.896 de 06 de janeiro de 1976, atualmente em vigor, define-se como aditivo alimentar toda a substancia intencionalmente adicionada ao alimento, com a finalidade de conservar, intensificar ou modificar as suas propriedades, desde que no prejudique o seu valor nutricional. Os aditivos enzimticos no possuem funo nutricional direta, mas auxiliam o processo digestivo melhorando a digestibilidade dos nutrientes presentes na dieta. Enzimas so protenas globulares, de estrutura terciria e quaternria, que agem como catalisadores biolgicos, aumentando a velocidade das reaes qumicas no organismo, sem serem, elas prprias alteradas neste processo (Champe & Harvery, 1989). So altamente especficas para os substratos e dirigem todos os eventos metablicos. As enzimas digestivas tm um sitio ativo que permite que elas atuem na ruptura de uma determinada ligao qumica (Penz Jnior, 1998), sob condies favorveis de temperatura, pH e umidade. Esses aditivos alimentares tm sido incorporados aos alimentos dos animais com o propsito de melhorar o seu desempenho e com isso a sua rentabilidade. At hoje, somente uma frao dos componentes das dietas animais so suplementados com estes aditivos. Esta situao dever mudar rapidamente assim que o desenvolvimento de novas enzimas alimentares ou novas formas de aplicao desses produtos progredirem (Cousins, 1999). De acordo com a sua finalidade, as enzimas usadas em raes animais podem ser divididas em dois tipos: 1) enzimas destinadas a complementar quantitativamente as prprias enzimas digestrias endgenas dos animais (proteases, amilases, fitases) e 2) enzimas que esses animais no podem sintetizar e/ou sintetizam em pequenas propores (-glucanases, pentosanas, e -galactosidases). Segundo Guenter (2002), as principais metas da suplementao enzimtica para os animais so: - Remover ou destruir os fatores antinutricionais dos gros; - Aumentar a digestibilidade total da rao; - Potencializar a ao das enzimas endgenas e; - Diminuir a poluio ambiental causada por nutrientes excretados nas fezes. comum o uso de alimentos proticos nas raes contendo grande quantidade de fatores antinutricionais e constituintes de baixa digestibilidade (Charlton, 1996). A soja, ao contrrio do que se pensava, possui quantidade aprecivel de polissacardeos no amilceos (PNAs) (Ward e Fodge, 1996) na forma de pectinas, hemiceluloses e oligassacardeos (rafinose e estaquiose) (Charlton, 1996). Alm desses PNAs, fatores antinutricionais como inibidores de proteases e lectinas esto amplamente distribudos na soja e no podem ser degradados pelo sistema digestrio dos monogstricos, principalmente aves e sunos.
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Mestrando em Zootecnia Nutrio de Monogstricos Universidade Estadual de Maring UEM. Graduandos em Zootecnia Universidade Estadual do Oeste do Paran UNIOESTE

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As enzimas exgenas caracterizam-se por aumentar a disponibilidade de polissacardeos de reserva, gorduras e protenas, protegidas da atividade digestria, pelos polissacardeos da parede celular, alm de minimizar os efeitos negativos provocados pelos fatores antinutricionais presentes nos diversos ingredientes e otimizar a atividade enzimtica endgena, principalmente em animais jovens que possuem um sistema enzimtico imaturo. Trabalhos recentes tm demonstrado respostas positivas quanto a digestibilidade de nutrientes e ao desempenho de sunos e aves alimentados com raes base de milho e soja, quando estas foram suplementadas com enzimas, como carboidrases, proteases, pectinases e alfa-galactosidase, portanto, o uso de enzimas na alimentao animal pode aumentar a eficincia de produo.

Enzimas e suas caractersticas Todas as enzimas so protenas, possuindo as estruturas proticas primria, secundria, terciria e quaternria, que so essenciais para o exerccio da atividade cataltica. Esta atividade cataltica depende, portanto, da integridade da sua conformao protica nativa, sendo que, geralmente esta atividade perdida caso a enzima seja desnaturada ou dissociada em subunidades (Vieira, 2003). Substrato dependente A secreo enzimtica ativada pela presena do substrato ao qual ser responsvel pela digesto. Cada enzima , em algum grau, especfica para certo substrato, apresentando estrutura espacial adequada para atuar neste substrato. Por exemplo, a quimiotripsina catalisa especificamente a hidrlise das ligaes peptdicas, nas quais o grupo carbonila pertence a um resduo de fenilalanina, tirosina ou triptofano. Stio ativo A caracterstica distintiva de uma reao catalisada enzimaticamente que ela ocorre no interior dos limites de uma cavidade, ou fenda, na estrutura molecular da enzima chamada de stio ativo. Este stio ativo que contm aminocidos cujas cadeias laterais criam uma superfcie complementar ao substrato, permitindo que as enzimas atuem na ruptura de uma determinada ligao qumica. O stio ativo liga-se ao substrato, formando um complexo enzima-substrato que ser convertido enzima e produto.

Temperatura Quando a temperatura aumenta, a velocidade da reao inicialmente aumenta em virtude da energia cintica aumentada das molculas com o substrato. Em temperaturas timas, a velocidade de destruio das enzimas pelo calor equilibrada pelo aumento na reatividade enzima-substrato e a velocidade de reao mxima. Temperaturas excessivas tm efeitos letais nas estruturas das enzimas. A peletizao das dietas com temperaturas acima de 75C desnatura as enzimas. Neste caso, devero ser adicionadas dieta aps o processo de peletizao. As enzimas possuem uma temperatura ou uma faixa de temperatura tima, no qual a sua atividade mxima, sendo que em valores de temperatura maiores ou menores sua atividade diminui.

pH A concentrao de H+ afeta a velocidade das reaes qumicas. Extremos de pH podem levar a desnaturao das enzimas. O pH timo varia para diferentes enzimas. Por exemplo, a pepsina digestiva do estomago, ativada em pH 2, enquanto que outras Revista Eletrnica Nutritime 260

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enzimas, destinadas a devendo ser protegidas timo ou uma faixa de sendo que em valores enzimas.

funcionarem em pH neutro, so desnaturas neste pH cido, ao passar pelo estmago. Portanto, as enzimas possuem um pH pH ideal para que possam desenvolver sua atividade cataltica, de pH superior ou inferior podem suprimir ou desnaturar as

No so consumidas nas reaes que catalisam Qualquer que seja o mecanismo cataltico de uma reao, uma vez que as molculas de substratos tenham reagido, a enzima separa-se dos produtos, liberando a molcula de enzima para novas reaes. Portanto, as enzimas no so consumidas nas reaes que catalisam. As enzimas podem aumentar a velocidade de uma reao por diminuir a energia de ativao da mesma, sem alterar a termodinmica da reao. A velocidade da reao reflete a energia de ativao, ou seja, uma energia de ativao alta corresponde a uma reao lenta. Todas as enzimas empregadas na nutrio animal so hidrolases, que so usadas diretamente como aditivos alimentares, com o objetivo de suplementar a atividade digestiva endgena do animal hospedeiro, incluindo proteases e amilases. As enzimas atuam na remoo dos fatores antinutricionais, tornando certos nutrientes disponveis para absoro e tambm aumentando o valor energtico de ingredientes mais baratos (Walsh et al., 1993).

Secreo enzimtica endgena Os sunos apresentam deficincia de certas enzimas nas primeiras semanas de idade, pois dispem de um nico substrato que o leite. Em aleitamento, possuem a lactase como enzima fundamental para a digesto de acar, pois este o glicdio disponvel no leite. Na fase ps desmama (que poder iniciar com 16 a 17 dias ou menos no desmame precoce ou 21 dias no desmame tradicional), dependendo do tipo de alimentao slida que o animal recebeu durante a lactao (rao), ele poder necessitar de alguns dias para ter as enzimas amilase, maltase e sacarase disponveis em quantidades adequadas. Estas enzimas so responsveis pela digesto do amido, e dos dissacardeos maltose (glicose-glicose) e sacarose (glicose-frutose). O mesmo ocorre com a secreo de lpase e de protease, que tambm dependem dos substratos para a sua ativao. Na natureza, o leito consome leite at cerca dos 60 dias de idade, quando ocorrer o desmame natural pela falta de leite da me. Nas criaes industriais e intensivas, com o intuito de obter alta produtividade, o desmame ocorre ainda com o leito imaturo fisiologicamente, com produo muito pequena de enzimas, com exceo da lpase. Para contornar este problema, devem ser administradas dietas altamente digestveis ou at pr-digeridas e/ou suplementadas com enzimas exgenas, visto que nesta fase de vida do leito a produo de enzimas insuficiente. No caso das aves, este fenmeno tambm ocorre. Os pintos ao eclodirem no dispem de enzimas que digerem os glicdios e os lipdios. Eles j dispem de proteases, pois estas so ativadas por protenas que entram no trato digestrio ainda durante a fase embrionria, confirmando o conceito de estimulo de secrees pelo substrato. Uma melhoria na eficincia alimentar das aves tem sido demonstrada com a adio de enzimas Lipase, que tm a capacidade de aumentar a digesto das gorduras em uma grande variedade de alimentos. Pugh (1993), citado por Garcia (1998), relata que a suplementao com lipase pode ser eficiente, principalmente em dietas iniciais, pois os animais jovens possuem um Revista Eletrnica Nutritime 261

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sistema enzimtico imaturo e conseqentemente possuem uma baixa eficincia em digerir gorduras. Na determinao de secreo de algumas enzimas e componentes biliares no duodeno de frangos de 4 a 21 dias de idade, Noy e Sklan (1995), citados por Garcia (1998), verificaram que as secrees de lipase, tripsina e amilase aumentavam de 20 a 100 vezes neste perodo, entretanto, a atividade da lipase aumentava mais lentamente quando comparada com a atividade das outras enzimas, sugerindo que a atividade da lipase pancretica pode ser um fator limitante na digesto em aves jovens. Portanto, vrios experimentos foram realizados e demonstraram que a adio de lipase nas dietas tem efeitos benficos no desempenho de frangos de corte, promovendo uma reduo na energia fecal e aumentando os valores de Energia Metabolizvel Aparente (EMA). Existe, porm, enzimas que no so secretadas mesmo na presena de substratos. Entre elas esto a celulase, hemicelulase, xilanases, fitases e outras. Elas no so secretadas porque o cdigo gentico dos monogstricos no dispe da indicao para sua sntese. Segundo Baldwin (1970) citado por Penz Junior (1998), a lgica para um organismo ter em seu cdigo gentico a possibilidade da produo de determinada substncia est ligada com a real necessidade de produzi-la, seja porque o meio no a proporciona ou porque o substrato no est disponvel para ser utilizado. No caso, esta teoria questionada, pois os polissacardeos no amlceos (PNA) e a fitina esto disponveis em vrios gros ingeridos pelos no-ruminantes, que no produzem enzimas para digerir estes componentes vegetais. A incluso de enzimas digestivas exgenas nas dietas de aves reduz a sntese de enzimas endgenas. Em conseqncia, o organismo teria a disposio mais aminocidos para a sntese protica. Segundo Garcia, citado por Zanella et al. (1999), em situaes normais, cerca de 25% das necessidades dirias de Nitrognio podem ser destinadas para a sntese de enzimas endgenas. Os autores observaram que a tripsina, quimiotripsina, lpase e -amilase, tiveram uma reduo de 40% da secreo duodenal quando as dietas foram suplementadas com enzimas exgenas. Zanella (1999) verificou em seu trabalho que a suplementao de amilase e protease na dieta a base de milho e soja para frangos de corte, reduziu a sntese destas enzimas endgenas em 23,4 e 35,5% respectivamente. Supe-se que a secreo de enzimas pancreticas seja afetada pela concentrao de enzimas no intestino delgado e/ou substratos ou produtos de hidrlise.

Por que adicionar enzimas s dietas Existem inmeras justificativas para a adio de enzimas exgenas nas dietas dos animais. Entre elas est a possibilidade de empregar ingredientes que possuem nutrientes pouco disponveis aos animais (farelos de arroz e trigo, gros de trigo, centeio, cevada e aveia), pelo fato dos animais no terem enzimas para a sua digesto. o caso dos ingredientes ricos em PNA e em fsforo ftico. Eliminar efeitos negativos de fatores antinutricionais (fatores antinutricionais so aqueles gerados nos alimentos in natura, pelo metabolismo normal da espcie da qual o material se origina, e, por mecanismos diferentes como decomposio ou inativao de alguns nutrientes, diminuio digestiva ou metablica do alimento, exercendo efeito contrrio nutrio adequada). Os fatores antinutricionais no so txicos para os animais, mas sua presena nos alimentos causa crescimento reduzido, piora na converso alimentar, alteraes hormonais e espordicas leses nos rgos. A poluio ambiental, pela excreo fecal de nitrognio e fsforo, pode ser maior ou menor. Depende da capacidade de utilizao desses nutrientes, pelos animais, que diminuda com a adio de enzimas exgenas.

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As aves so animais onvoros e, portanto, no esto aptas a digerirem carboidratos no amdicos, como os presentes na fibra solvel e insolvel. Assim, muitos ingredientes vegetais usualmente utilizados nas dietas das aves apresentam valores de digestibilidade muito inferiores, quando administrados s aves em comparao com animais com superior capacidade fermentativa, caso dos sunos. A melhora da capacidade digestiva das aves, atravs do uso de enzimas suplementares, apresenta-se como uma alternativa sria para no s melhorar o desempenho animal, mas tambm como forma de reduzir a quantidade de excretas produzidas, o que reduz o potencial contaminante do ambiente de produo e, portanto, passa a ser uma alternativa a ser considerada para atenuar os efeitos da remoo dos promotores de crescimento (Vieira, 2003). Os carboidratos presentes no farelo de soja tm baixa digestibilidade e podem ser mais ou menos complexos. A principal caracterstica destes a quase ausncia de amido e o fato de que os demais carboidratos so de baixa digestibilidade pelas aves. Desta forma, enzimas que tenham capacidade de mobilizar, pelo menos parcialmente, estes componentes, agregaro um enorme valor ao farelo de soja (Vieira, 2003). Dentre os cereais, aqueles que tm maiores propores de baixa digestibilidade so os chamados cereais de inverno. Milho e sorgo, os cereais de vero mais utilizados em raes para aves, no apresentam grandes fraes de baixa digestibilidade. Uma ressalva pode ser feita ao sorgo, com alto teor de tanino (>1%) o qual tem reduzido valor energtico. Os cereais de inverno com maior utilizao nas dietas de aves e sunos so o trigo e a cevada. Estes gros possuem, entretanto, limitaes na digestibilidade da energia, devido presena de beta-glucanos na cevada e de xilanas no trigo e centeio (Ward & Marquardt, 1987). Estes componentes reduzem muito a digestibilidade de vrios nutrientes presentes nestes gros, alm de acentuarem a viscosidade das excretas das aves, o que eventualmente leva a problemas de alterao da flora intestinal (Choct et al., 1996). Em ambos os casos a utilizao de enzimas suplementares tm demonstrado a clara possibilidade de melhoras no valor nutritivo dos cereais de inverno (Choct, 2001.). O uso de beta-glucanases em dietas com cevada e de xilanases em dietas com trigo j so prticas correntes na Europa.

Produo de enzimas A biotecnologia moderna possibilita a produo industrial de enzimas especficas para certas reas de aplicao. Para utilizao na alimentao animal, no final da dcada de 1980, a produo de enzimas atingiu escala comercial. Diversos tipos de fungos, bactrias e leveduras podem produzir enzimas, por meio de tcnicas de recombinao de DNA e mutaes. A fitase industrial obtida atravs da recombinao gnica dos fungos Aspergillus nger e Aspergillus ficum. O produto um p e apresenta-se misturado ao farelo de trigo utilizado como veiculo, que lhe d a cor marrom claro. Apresenta uma atividade de 5000 unidades de fitase ativa (UFA/g). A celulase obtida atravs da extrao da fermentao de Trichoderma viride. Tem atividade de 250 unidades de celulase ativa (UCA/g). Este produto tambm um p e misturado ao amido de milho com corante amarelo. Uma UFA definida como uma quantidade de enzima que libera 1 mol de ortofosfato por minuto de uma soluo a 0,0051 mol/l de fitato de sdio a uma temperatura de 37C e pH 5,5. J a UCA definida como a quantidade de enzima que libera 1 mol de glicose em uma soluo com 5% (peso/volume) de celulase em uma hora a pH 5,0 e 37C (duas horas de incubao). Segundo Zanella (2001), existem trs grupos de enzimas disponveis no mercado: Revista Eletrnica Nutritime 263

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1. Enzimas para alimentos com baixa viscosidade (milho, sorgo e soja); 2. Enzimas para alimentos de alta viscosidade (trigo, centeio, cevada, aveia, triticale e farelo de arroz); 3. Enzimas para degradar o cido ftico dos gros vegetais.

Modo de ao das enzimas exgenas De acordo com Soto-Salanova (1996), os resultados de diversas pesquisas indicam que as enzimas exgenas apresentam quatro formas principais de atuao: 1. Provocando a ruptura das paredes celulares das fibras; 2. Reduzindo a viscosidade, devido fibra solvel, na digesta do intestino proximal; 3. Degradando as protenas, por exemplo, do farelo de soja, reduzindo os efeitos dos fatores antinutricionais tais como os inibidores de proteases, e tornando-os mais disponveis ao animal; 4. Suplementando a produo de enzimas endgenas do animal, cuja ao mais importante em animais jovens. Fitase. J bem conhecido que quantidades considerveis de alguns nutrientes na rao no so utilizados e no so absorvidos pelas aves. Entre outros fatores, a disponibilidade de nutrientes pode ser influenciada pela formao de complexos naturais destes agentes. Este particularmente o caso de cereais, sementes de oleaginosas e legumes que contem fitatos. Conhecidos tambm como cido ftico, ele um complexo orgnico de armazenagem de fsforo nas plantas. Uma soluo para os efeitos negativos do fitato vem da natureza. A enzima fitase produzida por muitas espcies de bactria, fungos e leveduras e capaz de eliminar as propriedades antinutricionais do fitato. Esta enzima em escala comercial produzida por um nmero limitado de organismos, e o Aspergillus um dos mais importantes. A fitase est sendo usada por vrios anos para melhorar o aproveitamento do fsforo. A fitase uma fosfatase que hidrolisa um ou mais grupos fostato do fitato. Sabese que a maior parte do fsforo (P) contido nos ingredientes de origem vegetal, que so os principais componentes das dietas de sunos e aves, est na forma de fitato. Por isso, considera-se que apenas 30% do P dos vegetais seja disponvel para no-ruminantes. A indisponibilidade deve-se a quantidade de fsforo que est ligada molcula de cido ftico (Figura 6), ou cido mio-inositol hexafosfrico, ou simplesmente fitato. O fitato, alm de no disponibilizar o P, quelata ctions bivalentes como o Ca, Fe, Mg, Na, Cu, etc., conforme pode ser verificado na figura 7, e interfere na absoro de aminocido e pode tambm inibir a atividade da tripsina e da pepsina. De acordo com COUSINS (1999), a interao entre fitatos e protenas, aparentemente, se d por uma ligao inica que depende de condies de pH. Com pH baixo, o fitato forma ligaes eletrostticas com resduos bsicos, como a arginina, lisina e histidina resultando num complexo insolvel. Quando o pH se aproxima do ponto isoeltrico, a carga da protena neutra e ela no ir se ligar ao fitato. Sob condies de pH bsicas o fitato forma complexos com as protenas na presena de ctions divalentes. A presena de complexos fitato-protena pode ter uma influncia negativa na digestibilidade e absoro de protenas e aminocidos. Os fitatos tambm so conhecidos por inibir vrias enzimas digestivas endgenas como pepsina, amilase ou tripsina. Estes efeitos so devidos, provavelmente, a natureza inespecfica dos complexos fitato-protena ou a uma inibio devido ao efeito quelante dos ons de Ca, necessrios para a atividade

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destas enzimas endgenas. Resultados recentes demonstraram a formao de complexos fitato-protena no intestino e uma interao entre aminocidos livres e fitatos.

Figura 1. Esquema do cido bivalentes.Fonte: Cousins,1999.

ftico

quelatado

com

vrios

minerais

O contedo de fitato fosfrico em matria-prima usada freqentemente em nutrio de aves muito varivel. A Tabela 1 apresenta o contedo de fitato fosfrico em vrios ingredientes. Tabela 1. Contedo de fitato P em diferentes ingredientes da rao. Ingredientes Fsforo Ftico (g/100g de MS) Fsforo Ftico (% de Fsforo total) 72 64 69 67 66 70 77 51 80 71 89 28 24 24

Milho 0,24 Cevada 0,27 Trigo 0,27 Aveia 0,29 Sorgo 0,24 Milheto 0,19 Arroz 0,27 Arroz polido 0,09 Farinha de arroz 10,31 Farinha de trigo 0,92 Polimentos de arroz 20,42 Farelo de raiz de mandioca 0,04 Farelo de batata doce 0,05 Farelo de milho taro 0,09 Ravindran Brydenand Kornegay, 1995 (modificado).

O efeito de fitase microbiana em protena/aminocido pode ser considerado de interesse prtico e atualmente necessita ser quantificado para capacitar sua incluso em formulao de raes. Estudos tm demonstrado que, com a adio de fitase nas raes, ocorre uma melhora na utilizao de aminocidos e protenas pelos animais. Na literatura, bastante comentado os efeitos negativos do fitato em fsforo, minerais, protenas e aminocidos em animais monogstricos e da capacidade da fitase

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em liberar estes nutrientes ligados a fitatos. de grande interesse no mundo cientfico como tambm em nvel prtico para formulao de raes (COUSINS, 1999). A fitase uma ferramenta para reduo da suplementao de raes com fsforo inorgnico, protena e energia. O modo de ao da enzima fitase consiste no mecanismo de transferncia do grupo fosfato do substrato para a enzima e da enzima para a gua. O fitato a ser hidrolisado produz 5 classes de produtos intermedirios (mio-inositol penta, tetra, tri, bi e monofosfato) e libera o fosfato inorgnico juntamente com o nutriente preso a sua estrutura para possvel absoro . ao da fitase comea com a hidrlise do fosfato na posio 3, seguida de hidrlise nas posies 4, 5, 6 e depois na posio 1, enquanto o sexto grupo fosfato (na posio 2) no hidrolisado pela fitase (Kies, 1996). A absoro de fsforo mais pronunciada no duodeno, por difuso ativa e passiva, na forma de fosfato inorgnico ou ortofosfato (PO4-3), embora alguns fosfolipdios tambm possam ser hidrolisados. As enzimas adicionadas nos alimentos secos so ativadas no trato digestivo quando so misturadas aos fludos digestivos e sob temperatura do organismo. Sua ao mxima ocorre no estmago e poro inicial do intestino delgado isto , no duodeno. Nos ltimos anos, os nutricionistas tm trabalhado para estabelecer as exigncias dos sunos, em fsforo, com base ao fsforo disponvel. Entretanto, vrios so os fatores que influenciam os dados encontrados, como o estdio de maturao dos gros, idade e estado fisiolgico dos animais. Existem dados na literatura de valores estimados de disponibilidade biolgica de fsforo em diferentes ingredientes (Tabela 2). Tabela 2. Valores estimados de disponibilidade do fsforo de alguns ingredientes para sunos. Ingredientes Mdia (%) Amplitude (%) Fosfato biclcico 100 Fosfato de rocha defluorinado 87 83 - 90 Trigo (gro) 50 40 - 56 Aveia 30 23 - 36 Sorgo (gro) 22 Farelo de soja 38 36 - 39 Farelo de trigo 35 Farelo de algodo 21 0 42 Milho (gro) 15 9 29

Trabalhando com sunos, Cromwell et al. (1996) citado por Penz Jnior et al. (1999), avaliaram a eficincia da adio de fitase (1250 UFA/kg) em dois experimentos de digestibilidade, com dois nveis de fsforo total das dietas subestimadas. Conforme dados apresentados na Tabela 3, a reduo do fsforo total com a incluso de fitase reduziu a excreo fecal, urinria e total de fsforo, sem interferncia na reteno do mineral. Os autores observaram significativa reduo total de fsforo excretado nas duas fases estudadas e um aumento da eficincia de reteno de fsforo. Na fase de crescimento a enzima promoveu um aumento na eficincia de reteno de 50% e na fase de terminao de 72%.

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Tabela 3. Efeito da fitase no aproveitamento do fsforo da dieta de sunos. Experimento 1 Experimento 2 Parmetros 34 kg peso corporal 115 kg peso corporal 0,6% P 0,4% P + 0,5% P 0,3% P + fitase fitase Consumo de P g/d 9,5 6,7 15,3 9,1 P nas fezes g/d 4,5 2,7 8,3 4,2 P na urina g/d 1,6 0,4 2,7 0,5 P excretado g/d 6,1 3,1 11,0 4,7 Reteno de P g/d 3,4 3,6 4,3 4,4 Reteno de P % 35,8 53,7 28,1 48,4 Adaptado de Cromwell et al. (1996).

Complexos multienzimticos Os sunos secretam enzimas capazes de degradar as ligaes -1,4 e -1,6 ambas da glicose do amido, como tambm as ligaes -1,2, entre frutose e glicose da sacarose, ligaes -1,4 entre glicose e galactose na lactose e as ligaes -1,1 de glicose na treose. Entretanto, os sunos e as aves no degradam os polissacardeos no amilceos (PNA) com a mesma facilidade que o amido. PNA so polmeros de acares simples, devido natureza das cadeias de ligaes das unidades de acares que so resistentes a hidrlise no trato gastrintestinal dos animais no-ruminantes. Os PNA fazem parte da parede celular e consistem principalmente de pentoses, rafinose, estaquiose e sacarose, encontradas nas sementes de oleaginosas, -glucanos que se encontram em altas concentraes na cevada e aveia e pentosanas como as arabinoxilanas, que so encontradas no trigo, triticale e centeio. As sementes de oleaginosas, como a soja e a canola, os gros de cereais com os seus respectivos subprodutos, tais como o trigo, cevada, aveia, centeio, triticale, farelos de arroz e de trigo, apresentam em sua composio bromatolgica, constituintes que os animais no-ruminantes no digerem ou sua digesto incompleta, como os PNA. As principais enzimas para a degradao dos PNA so as xilanases, celulases e as glucanases, que no so sintetizadas pelos no-ruminantes. As aves so capazes de produzir certas enzimas digestivas, como a amilase para digerir o amido e as proteases para digerir as protenas, porm, elas no produzem as enzimas necessrias para a degradao da fibra, presente na maioria dos alimentos. A fibra dificulta a digesto, impedindo que as enzimas digestivas endgenas atinjam o substrato alvo dos alimentos. Os -glucanos e as pentosanas presentes nos gros no so digeridas pelas aves, porm, se tornam solveis durante o processo de digesto, produzindo aumento da viscosidade intestinal do quimo intestinal. Polissacardeos no-amilceos (PNAs) existem em vrias formas na natureza e so componentes da parede celular. Os motivos para as propriedades antinutricionais de PNAs so sua elevada capacidade de ligarem-se a grandes quantidades de gua, resultando num aumento da viscosidade do contedo intestinal quando o alimento contendo PNAs for consumido. Alm da baixa digestibilidade, uma alta incluso desses carboidratos pode causar um aumento da viscosidade intestinal e conseqentemente reduzir a digestibilidade de outros componentes da dieta, comprometendo o desempenho dos animais (CONTE et al., 2003). Em um ambiente viscoso, os nutrientes como as gorduras, amido e protenas, se tornam menos acessveis e disponveis as enzimas endgenas. O resultado disto uma

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menor digestibilidade destes nutrientes. Alm disso, viscosidade elevada deste bolo alimentar aumenta a quantidade de fezes midas. Nestas dietas de alta viscosidade, as enzimas adicionadas atuam reduzindo a viscosidade da digesta, degradando os complexos e fibras solveis responsveis em causar a viscosidade. Ocorrer otimizao da digesto dos nutrientes, diminuio no consumo de gua, e no ndice de umidade da cama. Tambm, mediante a decomposio da fibra presente nas paredes celulares pela adio de enzimas, h uma facilitao ao acesso das enzimas endgenas aos nutrientes encapsulados dentro destas paredes ricas em fibra. A diminuio da viscosidade ocorre devido degradao das arabinoxilanas solveis das paredes celulares dos gros, otimizando assim a digestibilidade de todos os nutrientes. Para dietas a base de cereais de alta viscosidade como a cevada, centeio, trigo e triticale, geralmente os complexos enzimticos so compostos por carboidrases (glucanases, amilases, silanases, arabnoxilanases, celulases e hemicelulases). Para dietas de baixa viscosidade (milho, sorgo e soja) esto sendo pesquisadas enzimas para sua adio (amilase, protease, lpase e xilanases), visto que so os ingredientes mais utilizados nas condies brasileiras de produo animal e podem ter a digestibilidade melhorada. Soto-Salanova (1996) cita que estas enzimas j esto no mercado com resultados iniciais promissores, sendo que a adio destas enzimas poder se tornar uma pratica rotineira e com boa relao benefcio/custo, como o caso com dietas baseadas em trigo e cevada. A baixa capacidade das aves em digerir os PNAs indica uma necessidade efetiva de enzimas suplementares adequadas, similares quelas produzidas pela microflora, com o objetivo de maximizar o potencial dos PNAs, como fonte de energia e ao mesmo tempo minimizar as propriedades antinutricionais. Enzimas de PNAs microbiano so usadas com sucesso h vrios anos na indstria alimentar para reduo de propriedades antinutricionais em dietas baseadas em cereais. O efeito positivo destas enzimas pode ser medido em termos de melhoria dos parmetros de performance como ganho de peso ou taxa de converso alimentar. As enzimas carboidrases, entre elas a xilanase e a glucanase, tambm produzidas por fungos do gnero Aspergillus, tm sido usadas para hidrolisar os polissacardeos no amilceos, aumentando a digestibilidade de alimentos como a cevada, o trigo, o centeio, a aveia e o triticale (Conte et al., 2003). A Figura 3 descreve o efeito de nveis graduais de preparados de xilanase e /ou glucanase em ganho de peso de taxa e converso alimentar numa dieta de frangos contendo 45% de trigo (Heindl and Steenfeldt, 1999). A adio de 100 ppm do preparado enzimtico melhorou o ganho de peso em 7.3% e taxa de converso alimentar em 4.1% durante o perodo do dia 0 ao dia 42. Normalmente, as enzimas comerciais usadas como aditivos no contm uma nica enzima, mas ao contrrio, so preparados enzimticos contendo uma variedade de enzimas, o que desejvel, uma vez que as raes so compostas por vrios ingredientes. importante ressaltar que nem sempre a suplementao de enzimas digestivas proporciona respostas positivas. Para uma enzima atuar, se faz necessrio ter o substrato especfico na dieta, dosagem correta de enzimas, capacidade das enzimas em ultrapassar barreiras encontradas no estmago, como o pH baixo e a ao das enzimas proteolticas como a pepsina, a temperatura qual a rao submetida durante o processo de peletizao. As enzimas digestivas exgenas atuam da mesma forma que as endgenas, apresentando stio ativo com a capacidade de atuar sobre um substrato especfico, hidrolisando-o. Esta ao cataltica especfica e determinada pelas estruturas primrias, secundrias, tercirias e quaternrias das enzimas, sendo que qualquer alterao na estabilidade das enzimas provoca uma alterao na sua estrutura e isto poder provocar a perda de sua capacidade cataltica. Revista Eletrnica Nutritime 268

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Figura 3. Performance de frangos de corte alimentados de 0 a 42 dias de idade com uma dieta baseada em trigo com nveis graduais de suplementao de xilanases e glucanases.

Poluio ambiental Sunos e aves excretam mais da metade do fsforo e do nitrognio que consomem. O uso de enzimas na rao das aves e sunos e outros animais domsticos, melhora a digestibilidade e disponibilidade de certos nutrientes para os animais, principalmente o fsforo, nitrognio, clcio, cobre e zinco, diminuindo a sua presena nas fezes e urina, e conseqentemente, a sua deposio no meio ambiente. A maior preocupao ocorre como o fsforo dos alimentos vegetais, que por estar ligado ao cido ftico na forma de fitato, pouco disponvel aos animais monogstricos, pois estes no dispem da enzima fitase para aproveit-lo. Somente cerca de um tero do fsforo total destes alimentos disponvel para aves e sunos. A lixiviao do fsforo a partir de excretas de aves e outros animais domsticos para a gua de superfcie e lenis um grave problema de poluio ambiental, que pode ser minimizado com o uso de enzimas fitase exgena. O fsforo e o nitrognio so dois nutrientes limitantes para o crescimento das algas e, quando estes nutrientes alcanam os mananciais hdricos, provocam o aceleramento da eutrofizao e com isso, a poluio da gua. Este fato especialmente importante para regies com grandes concentraes de criatrios de sunos e aves. A morte e a deteriorao destas algas diminui a quantidade de oxignio na gua, dificultando ou impedindo a vida neste ambiente. O nitrognio pode transformar-se em nitrato, nitrito e amnia, que representam as principais substncias poluentes do ar e das guas. Para amenizar este problema, estratgias nutricionais como formular dietas com base em nutrientes digestveis (protena ideal), alimentos processados, diminuir margens de segurana e utilizar enzimas exgenas so pertinentes. Enzimas para ruminantes Cereais e forrageiras so degradados por uma mistura de microorganismos no rmen, que incluem bactrias, fungos e protozorios. Espcies nessas populaes possuem enzimas que degradam a parede celular das plantas: enzimas como as celulases, xilanases, e uma quantidade de enzimas que degradam as ramificaes de Revista Eletrnica Nutritime 269

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xilanas. As bactrias envolvidas na degradao das pores facilmente digestveis da fibra so Fibrobacter succinogenes, Ruminococcus albus e R. flavefasciens. O F. succinogenes e fungos degradam as pores menos digestveis (EMBRAPA). A manipulao de enzimas que digerem fibras poderia aumentar a taxa e extenso da digesto de forragem para ruminantes. Os mtodos propostos incluem a suplementao direta de enzimas (celulases etc.) produzidas por fermentao em larga escala de Aspergillus sp. e Trichoderma sp. e a produo de fungos/bactrias ruminais contendo enzimas como xilanase e amilases. Os trabalhos encontram-se ainda na fase inicial: Lewis, et al (1996) observaram aumento no desaparecimento da matria seca e fibra detergente neutra, assim como aumento na digestibilidade total da matria seca e fibra detergente neutra e cida, em bovinos, recebendo dieta baseada em volumosos tratada com enzimas fibrolticas. Alguns autores consideram que ruminantes adultos, provavelmente, no teriam melhor desempenho com o tratamento de gros com enzimas, embora bezerros jovens pudessem ser beneficiados.

Funes A) Melhorar e aumentar a converso e eficincia alimentar para ruminantes, aumentando os ndices de ganho de peso, crescimento, fertilidade e produo leiteira.

B)

Acelerar o desenvolvimento do rumem, antecipando o desmame.

C)

Obter uma maior eficincia alimentar com maior ganho de peso dirio, melhorando a eficincia digestiva.

D)

Promover a adaptao rpida dos animais, quando h mudana alimentar por desmame, pastagens secas, brotaes, entrada de animais no confinamento, semiconfinamento e mineral protico.

E)

Prevenir a ocorrncia de distrbios gastrintestinais (diarrias).

F)

Aumentar a resistncia do organismo naturalmente contra todos os tipos de infeces devido ao aumento da flora bacteriana normal com o uso de enzimas.

G)

Diminuir o consumo dirio aproveitamento do alimento.

de

matria

seca

com

melhor

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Concluso O interesse no uso de enzimas, em raes para aves, tem aumentado devido ao custo cada vez maior das matrias-primas tradicionais e a busca por outros ingredientes alternativos como a cevada, aveia, arroz e trigo, entre outros. A enzima tambm considerada como uma forma de reduzir a contaminao ambiental com nutrientes nas excretas, tais como o fsforo, nitrognio, cobre, zinco, etc. Alm de aumentar a digestibilidade dos alimentos e o desempenho dos animais. Embora nem sempre se observem benefcios no uso de enzimas, a maioria das pesquisas de alimentao de poedeiras, frangos de corte e sunos, indicam uma melhora na digestibilidade dos alimentos e no desempenho das aves e uma reduo na quantidade de resduos nas excretas. Uma melhora significativa na digestibilidade dos alimentos obtida com o uso de enzimas nas dietas permite alteraes nas formulaes das raes de forma a minimizar o custo, maximizando o uso dos ingredientes energticos e proticos das raes, possibilitando o uso de ingredientes alternativos regionais de menor custo, em substituio ao milho e ao farelo de soja.

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