Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Publica

ISSN 1726-4634 versin impresa

Rev. per. med. exp. salud publica v.18 n.34 Lima jul./dic. 2001

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TRABAJOS ORIGINALES

Validacin de sustratos atractivos a oviposicin para la deteccin de Aedes Aegypti

Pablo Villaseca C 1; Walter Len C 1; Miriam Palomino S 1; Rosa Mostorino E 2; Leonid Lecca G 3.

Divisin de Entomologa, Centro Nacional de Salud Pblica, Instituto Nacional de Salud. 2 Direccin Ejecutiva de la Red de Laboratorios, Centro Nacional de Salud Pblica, Instituto Nacional de Salud. 3 Instituto Nacional de Salud.

RESUMEN Objetivo: Comparar tres tipos de atrayentes a oviposicin para la deteccin de Aedes aegypti (agua local, infusin de pasto Stenotaphrum secundatum y solucin acuosa de propionato de metilo al 0,5%) en tres ciudades endmicas de Dengue del Per. Materiales y mtodos: Entre Setiembre y Octubre del 2001 se realiz un muestreo dirigido en viviendas de localidades de las provincias de Tarapoto (departamento San Martn), Satipo (Junn) y Tumbes (Tumbes) en base al antecedente de haber presentado, un caso confirmado de dengue o la presencia de pupas y larvas de Ae. aegypti a la inspeccin. En cada vivienda se colocaron 4 ovitrampas (con las 3 soluciones y una solucin control: agua mineral) y se observaron por 3 das consecutivos, inspeccionndolas cada 24 horas. Para el anlisis se emple el test de rango mltiple de Duncan y la prueba de Dunnett, siendo significativo un p<0,05. Resultados: De 248 ovitrampas instaladas (88 en Tarapoto, 88 en Satipo y 72 en Tumbes) en 62 lugares,

resultaron positivas 13,7%. El promedio global de huevos por ovitrampa. fue 8,02 (rango: 0-131) y se encontr que el promedio de huevos en la infusin de pasto fue mayor al encontrado en las otras soluciones (p<0,05). Conclusin: La infusin de pasto result la ms efectiva sustancia atrayente en las ovitrampas empleadas para detectar Ae. aegypti. Palabras clave: Aedes; Oviposicin; Insectos vectores; Per (fuente: BIREME).

ABSTRACT Objective: To compare three types of oviposition baits (local water, Stenotaphrum secundatum solution and 0.5%-methyl propionate solution) for the detection of Aedes aegypti in three Dengue endemic cities in Peru. Materials and methods: Based upon one confirmed Dengue case and in the occurrence of Aedes pupae and larvae, a selective sampling of houses in Tarapoto (San Martfn), Satipo (Junin) and Tumbes (Tumbes) was performed between September and October, 2001. Four traps (containing the three solutions, as well as a control solution: mineral water) were placed in each house and observed for a 3-day period, being supervised every 24 hours. The Duncan Multiple Test and the Dunnet Test (significance level, p < 0,05) were used to perform the analysis. Results: Of 248 traps placed (88 in Tarapoto, 88 in Satipo and 72 in Tumbes) in 62 houses, 13.7% were positive. The average egg content for each trap was 8,02 (range: 0-131) and the average egg content found in the vegetable infusion was higher than those met in the other solutions (p<0,05). Conclusion: The vegetable infusion is the most effective trap bait used for detection of Aedes aegypti. Key words: Aedes; Oviposition; Insect vectors; Peru (source: BIREME).

INTRODUCCIN El Aedes aegypties el vector principal de la enfermedad producida por el virus Dengue. Su reinfestacin en nuestro pas data desde 1984 y, desde entonces, este vector se ha distribuido a lo largo del territorio nacional, encontrndose hasta el ao 2000 en 15 departamentos y 110 distritos. Ante este problema, dentro de la poltica de control del dengue, se desarrolla una vigilancia. entomolgica en diferentes departamentos del pas, teniendo como una de sus principales tareas la bsqueda del mosquito (Ae. aegypti) en su fase larvaria en las viviendas de las localidades. Para realizar esta actividad se requiere gran cantidad de recursos humanos, por lo que se buscan otras alternativas do deteccin del vector, utilizando sitios de

oviposicin artificial u "ovitrampas"1, que son ms sensibles y efectivas que la encuesta adica, tal como lo refiere Barata2. Las ovitrampas se fundamentan en la predileccin del mosquito por depositar sus huevos en la zona hmeda, cerca de la interfase con el lquido 1. Generalmente, estas ovitrampas son utilizadas en el campo por varios das, aunque en algunas regiones han sido incorporadas en la vigilancia cotidiana, observndose que, si bien el nmero de trampas que reciben huevos y el nmero de huevos por trampa son bajos, ello depende de la estacin en que se realiza la recoleccin 3. Desde que Buxton y Hopkins, en 1927, refirieron que las infusiones de materias vegetales atraan un mayor nmero de mosquitos hembras y por ende mayor cantidad de huevos depositados, diversos investigadores han venido empleando tales soluciones como "atrayentes" para mejorar la efectividad de las ovitrampas 4-6. Por ejemplo, Reiter utilizando ovitrampas con infusin de heno concentrada y con una solucin al 10%, encontr 8 veces ms huevos en aquellas que en las ovitrampas que contenan agua o propionato de metilo al 0,5% 7. En nuestro pas, ante la necesidad de contar con un monitoreo efectivo del mosquito Ae. aegypti, se realiz la presente investigacin en reas endmicas del vector, con el objetivo de comparar tres tipos de atrayentes a oviposicin: agua local, solucin de pasto Stenotaphrum secundatum y solucin acuosa de propionato de metilo al 0,5%. Se incluye esta ltima solucin debido a que existen reportes de laboratorio que afirman que mejoran la oviposicin 8-9.

MATERIALES Y MTODOS Estudio cuasiexperimental, realizado durante los meses de setiembre y octubre del 2001, en las ciudades de Tarapoto (departamento San Martn), Satipo (Junn) y Tumbes (Tumbes). En estas tres ciudades, el dengue es una enfermedad endmica y estacional, habiendo presentado en el segundo trimestre del 2001 ndices adicos >5. Las localidades o sectores periurbanos fueron escogidos de manera dirigida, segn la informacin proporcionada por el personal de Entomologa de las Direcciones Regionales de Salud basndose en la presencia de un ndice adico >5 y de casos confirmados de dengue, As, se escogieron en Tarapoto y Satipo 4 y 9 sectores periurbanos, respectivamente; en tanto que en Tumbes se escogieron 5 localidades (Aguas Verdes, Zarumilla, Tumbes, Caleta Grau y Caleta La Cruz). La seleccin de las viviendas tambin fue de manera dirigida, segn el antecedente de presentar en la vivienda un caso confirmado de dengue en los ltimos seis meses o de presentar al momento de la inspeccin domiciliaria pupas y larvas de Ae. aegypti. Las ovitrampas fueron preparadas en el Instituto Nacional de Salud (Lima-Per) y consistan en contenedores de vidrio de color mbar, de 9,2 cm de dimetro por 12,5 cm de alto, dentro del cual se coloc una faja de papel kraft de 28 cm de

largo por 6 cm de alto; igualmente y en forma cruzada, se coloc una paleta de cartn de 10 cm de largo por 3,5 cm de ancho, de tal manera que al aadir la solucin atrayente, parte del papel y la paleta quedaban sumergidos y humedecidos (Figura N 1).

Se emplearon tres tipos de soluciones atrayentes: Ovitrampa con solucin 1: con 250 mL de agua local, estancada por 7 das. Ovitrampa con solucin 2: con 250 mL de agua local conteniendo pasto (Stenotaphrum secundatum), estancada por 7 das (9 g de pasto para 2 L de agua). Ovitrampa con solucin 3: con 250 mL de agua local ms 1,25 mL de propionato de metilo para lograr una solucin al 0,5%. Adems, se utilizaron ovitrampas con solucin control (solucin 0): con 250 mL de agua mineral.

PROCEDIMIENTO DE RECOLECCIN En cada sitio escogido se colocaron 4 ovitrampas, con las soluciones control y atrayentes (soluciones 1, 2 y 3). Estas fueron observadas por 3 das consecutivos, cada 24 horas, teniendo en cuenta que en el caso de ser positiva solo se cambiaba la paleta y el papel kraft que recubra la parte interna de la ovitrampa, mantenindose la solucin 3,10. El papel y la paleta de los ovitrampas positivas fueron introducidos en una bolsa plstica de manera individual y transportadas inmediatamente al laboratorio donde se realiz la contabilidad de los huevos de Ae. Aegypti; para ello se emple un microscopio esteroscopio binocular a 35x. ANLISIS ESTADSTICO Para el anlisis de resultados se utiliz el programa SPSS 10,0. Se emple el test de rango mltiple de Duncan y la prueba de Dunnett para evaluar las diferencias entre ovitrampas, considerndose como significativo un p<0,05.

RESULTADOS

En total se instalaron 248 ovitrampas (88 en Tarapoto, 88 en Satipo y 72 en Tumbes) en 62 lugares. Resultaron positivas 13,7%(34/248) de las ovitrampas, distribuidas en 25,8% (16/62) de las viviendas (Tabla N1).

En Tarapoto se encontr que 40,9% (9/22) de los lugares presentaron ovitrampas positivas, totalizando 17 ovitrampas positivas y 335 huevos. Adems, se encontr que el promedio de huevos en el agua de pasto (solucin 2) fue mayor al de las otras soluciones (p<0,05). En Satipo, se encontr que 27,2% (6/22) de las viviendas presentaron ovitrampas positivas, totalizando 14 ovitrampas positivas y 41 huevos; y en Tumbes se encontr que slo una vivienda (de 18) tuvo 3 ovitrampas positivas, totalizando 140 huevos. En estas dos ltimas ciudades no se encontraron diferencias significativas en el nmero de huevos depositados entre las diferentes soluciones probadas. El promedio de huevos obtenidos en cada solucin de las ciudades del estudio se presenta en la Tabla N 2.

Cuando se evaluaron slo las 34 ovitrampas positivas, se encontr que el promedio de huevos en la infusin de pasto (solucin 2) fue significativamente mayor al encontrado en las otras soluciones (p<0,05). En la Tabla N 3 se muestra el promedio de huevos presente en las ovitrampas positivas.

DISCUSIN Al investigar diferentes sustancias atrayentes de Ae. aegypti, encontramos que las ovitrampas con infusin de pasto estancada resultaron 5,6 y 5,2 veces mis efectiva que el agua local y la solucin de propionato de metilo al 0,5%, respectivamente. Ello concuerda con lo reportado por Reiter 7 y con una investigacin previa (no publicada) realizada por nuestro equipo de trabajo el ao 2000 en Lima-Per, al comparar dos sustancias atrayentes (solucin de propionato de metilo al 0,5% e infusin de pasto concentrada), resultando sta ltima 8,8 veces ms efectiva. Asimismo, al comparar la sensibilidad en la atraccin de las diferentes soluciones en las viviendas con ovitrampas positivas, encontramos que la infusin de pasto alcanz 100% de positividad, muy superior a los porcentajes obtenidos con las soluciones de agua local y propionato de

metilo al 0,5% (con 56% y 50% de positividad, respectivamente) (Ver Tabla N 1). El aumento del nmero de huevos en las ovitrampas con infusin de pasto estara en relacin a una atraccin olfatoria del Ae. aegypti por esta sustancia 9, adems que se ha comprobado que este atrayente contiene una excelente fuente de nutricin que favorece el crecimiento del estado larvario del vector 11. Comnmente, los trabajos de campo realizados pueden dar la impresin que el Aedes prefiere hbitats con agua limpia para su reproduccin, debido a que sus larvas son a menudo encontradas en recipientes con agua libre de material suspendido11; sin embargo, se ha demostrado que el agua limpia es un ambiente estril para las larvas, mientras que la fauna microbiana de las infusiones de pasto contribuyen al crecimiento de las larvas. Por ejemplo, Barrera report la permanencia y competencia de estos mosquitos en floreros de cementerios 12. E incluso, existen pruebas de laboratorio que demuestran que la presencia de actividad microbiana es un indicador de la oviposicin, ya que muestran que el recipiente todava no est lleno de larvas competentes 13. Adems, existen estudios que reportan la presencia de flora bacteriana dentro del tracto digestivo de las larvas, reconocindose especies de Aeromonas, Escherichia coli y Tatunella 14. Las ventajas del uso de las ovitrampas en la vigilancia entomolgica del vector causante del dengue radica en su buena sensibilidad (detectan el vector en bajas densidades) y practicidad: en un rea urbana, dos operadores pueden instalar en slo una maana 80 ovitrampas, sin dificultad. Ello, en contraste por ejemplo a la inspeccin larval y la colecta de mosquitos por el mtodo de aspiracin, el cual requiere gran laboriosidad, habilidad y continuo entrenamiento 4. En nuestro estudio, encontramos slo 13,7% de ovitrampas positivas, lo que puede atribuirse a la poca en que se desarroll la recoleccin vectorial (setiembre y octubre) y, como sabemos, las densidades de Ae. aegypti son mayores durante la estacin lluviosa (entre diciembre y abril). Con los resultados obtenidos en el presente estudio, sugerimos emplear la infusin de pasto como atrayente de las ovitrampas en las localidades donde se desea investigar la presencia de Ae. aegypti. Con su utilizacin, se estara facilitando la deteccin de este vector dentro de un sistema de vigilancia en forma precoz y que permitir tomar acciones de prevencin y control en forma oportuna.

AGRADECIMIENTO Al Dr. Oscar Tovar por la identificacin de la especie de pasto (gramnea) utilizada en la infusin, al Tcnico agropecuario Oseas Sifuentes Mendoza por proporcionamos el pasto, a la Lic. Nancy Linares por su colaboracin en el anlisis estadstico, y al Dr. Csar Cabezas por su colaboracin en la revisin del manuscrito. Al personal de la DISA San Martn: Blgo. Elty Lpez y Tc. Juan Ruiz;

de la DISA Junn: Lic. Lucia Villar, Tc. Miguel Granza, Tc. Eugenio Francisco, Tc. Miguel Mamerto Zambache y Tc. Walter Torres; y de la DISA Tumbes: Tc. Vctor Herrera, Tc. Percy Purizaga, Tc. Antonio Ros, Tc. William Sandoval, Tc. Carlos Rivas, Tc. Ricardo Gamboa y Tc. Ricardo Alva.

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Correspondencia: Pablo Villaseca Campos. Divisin de Entomologa, Instituto Nacional de Salud. Calle Cpac Yupanqui 1400, Lima 11 Per. Telf: (51-1)4719920-Fax: (51-1) 4710179. E-mail: entomo@ins.sld.pe 2012 Instituto Nacional de Salud Cpac Yupanqui 1400 - Jess Mara Lima, Per, Apartado Postal 471 Telfono : ( 51-1) 4719920 Anexo 162 Fax: ( 51-1) 4717443