UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS UFMG INSTITUTO DE CINCIAS BIOLGICAS - ICB PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM MICROBIOLOGIA ESPECIALIZAO EM MICROBIOLOGIA

Leveduras utilizadas no processo de fabricao da cerveja

Nayara Aline Muniz de Oliveira

Belo Horizonte 2011

Nayara Aline Muniz de Oliveira

Leveduras utilizadas no processo de fabricao da cerveja

Monografia apresentada ao Departamento de Microbiologia do Instituto de Cincias Biolgicas da Universidade Federal de Minas Gerais, como requisito para obteno do ttulo de Especialista em Microbiologia Ambiental e Industrial

Orientador: Prof. Carlos Augusto Rosa Laboratrio de Ecologia e Biotecnologia de Leveduras ICB/UFMG

Co-orientador: Prof. Luiz Henrique Rosa Laboratrio de Ecologia e Biotecnologia de Leveduras ICB/UFMG

Belo Horizonte 2011

UNIVERSIDADE FEDERAL DE MINAS GERAIS ESPECIALIZAO EM MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL E AMBIENTAL

Monografia intitulada Leveduras utilizadas no processo de fabricao da cerveja, de autoria da aluna Nayara Aline Muniz de Oliveira, aprovada pela banca examinadora constituda pelos seguintes professores:

__________________________________________________________ Prof. Dr. Carlos Augusto Rosa ICB/UFMG - Orientador

__________________________________________________________ Prof. Dr. Luiz Henrique Rosa ICB/UFMG Co-Orientador

_________________________________________________________ Prof. Dra. Carla Pataro ICB/UFMG

_________________________________________________________ Prof. Dra. Valeria Martins Godinho ICB/UFMG

Belo Horizonte, 28 de julho de 2011

DEDICATRIA
Dedico esse trabalho aos meus pais e ao meu namorado, que tanto me apoiaram.

AGRADECIMENTOS
Agradeo a Deus pelas oportunidades que me foram dadas na vida, principalmente por ter conhecido pessoas interessantes, mas tambm por ter vivido fases difceis, que foram matrias-primas de aprendizado;

No posso deixar de agradecer aos meus pais Devanir Ado de Oliveira e Rosimeire Muniz dos Santos, sem os quais no estaria aqui, e por terem me fornecido condies para me tornar o profissional que sou;

Ao meu namorado Welisson pelo apoio e incentivo. Meu agradecimento pelas horas em que ficou ao meu lado no me deixando desistir e me mostrando que sou capaz de chegar onde desejo, sem dvida foi quem me deu o maior incentivo para conseguir concluir esse trabalho;

Aos meus orientadores, Prof. Carlos Rosa e Prof. Luiz Rosa pelo ensinamento indispensvel no auxlio concretizao dessa monografia;

A incansvel ajuda dos meus amigos: Daniel, Laura, Luciana e Aline;

Obrigada a todos.

A cerveja, se bebida com moderao, torna a pessoa mais dcil, alegra o esprito e promove a sade.

Thomas Jefferson

RESUMO
O presente trabalho visa apresentar as leveduras responsveis, pela fermentao alcolica e sensorial da cerveja produzida nas cervejarias. A cerveja uma bebida fermentada com uma histria de 6.000 a 8.000 anos, cujo processo de elaborao cada vez mais regulado e melhor controlado, tendo permanecido inalterado durante sculos. A cerveja pode ser definida como sendo uma bebida carbonatada, de baixo teor alcolico, preparada a partir da fermentao por leveduras do malte de cevada, contendo lpulo e gua, podendo ainda utilizar-se de outras matrias-primas, como arroz, trigo ou milho. As leveduras do gnero Saccharomyces apresentam vrias linhagens consideradas seguras para a produo da cerveja. Estas linhagens so capazes de produzir dois metablicos primrios

importantssimos na cerveja, etanol e dixido de carbono, alm dos compostos secundrios responsveis pelo gosto da bebida. O processo cervejeiro um processo de mltiplos estgios envolvendo a converso biolgica de materiais in natura no produto final. A fermentao dos mostos cervejeiros pode ser influenciada por vrios fatores, sendo a temperatura, um dos mais importantes. A viabilidade e a atividade dos microrganismos so de primordial importncia para qualquer sucesso do processo fermentativo. As caractersticas de sabor e aroma de qualquer cerveja esto determinadas de forma preponderante pelo tipo de levedura utilizada.

Palavras-chaves: cerveja; fermentao; Saccharomyces.

ABSTRACT
This work presents the responsible yeast for sensory and alcohol fermentation of beer produced in breweries. Beer is a fermented beverage with a history of 6.000 to 8.000 years. The development process of the beer is increasingly better regulated and controlled. This process remained stable for centuries. Beer is considered a carbonated beverage with low alcohol, prepared from the fermentation by yeasts of barley malt, containing hops and water can be manufactured by other materials, like rice, wheat or corn.

Yeast Saccharomyces present several lines considered safe for the production of beer. These lines produce two major metabolic beer, ethanol and carbon dioxide, and other materials responsible for the taste of the drink. The brewing process of the beer has many stages involving the conversion of biological materials in natura in the final product. The Brewers may be influenced by several factors the temperature is one of the most important. The viability and activity of microorganisms are important for

any successful fermentation process.

Word-keys: beer; fermented; Saccharomyces.

LISTA DE FIGURAS
FIGURA 1. Mercado da cerveja no Brasil ............................................................................. 14 FIGURA 2. Gros de cevada ................................................................................................ 17 FIGURA 3. Lpulo ................................................................................................................ 19 FIGURA 4. Levedura do gnero Saccharomyces ................................................................ 21 FIGURA 5. Tempo de fermentao dos tipos lager e ale de cervejas ................................. 24 FIGURA 6. Seqncia das reaes enzimticas pela fermentao alcolica de carboidratos endgenos (glicognio e trealose) ou exgenos (sacarose e maltose), conduzida por Saccharomyces cerevisiae ................................................................................................... 26

LISTA DE TABELA
TABELA 1. As 10 cervejas mais consumidas no mundo ...................................................... 13 TABELA 2. Teor alcolico de diferentes bebidas alcolicas ................................................ 13 TABELA 3. Variao da nomenclatura taxonmica de linhagens de Saccharomyces cerevisiae e S. uvarum utilizadas na fabricao da cerveja nos anos de 1952/1970/1984 e 2011....................................................................................................................................... 23 TABELA 4. Caractersticas dos tipos de cervejas ................................................................ 31 TABELA 5. Aspectos que relacionam s aplicaes prticas e potencial da levedura cervejeira recombinante ....................................................................................................... 35

LISTA DE ABREVIATURAS E SIGLAS

AMBEV EMBRAPA FAO FDA SINDICERV -

Companhia de Bebidas das Amricas Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Food and Agriculture Organization Food and Drug Administration Sindicato Nacional da Indstria da Cerveja

SUMRIO
1 INTRODUO ................................................................................................................... 12 2 REVISO BIBLIOGRFICA .............................................................................................. 15 2.1 Histrico ....................................................................................................................... 15 2.2 Matrias primas ........................................................................................................... 16 2.2.1 gua .................................................................................................................... 16 2.2.2 Malte de cevada .................................................................................................. 17 2.2.3 Adjuntos do malte ................................................................................................ 18 2.2.4 Lpulo .................................................................................................................. 19 2.2.5 Leveduras ............................................................................................................ 20 2.2.6 Adjuntos de fabricao ........................................................................................ 21 2.2.6.1 Antioxidantes ................................................................................................. 21 2.2.6.2 Estabilizantes ................................................................................................. 21 2.2.6.3 Acidulantes .................................................................................................... 21 2.2.6.4 Antiespumante ............................................................................................... 22 2.3 Microbiologia no processo de fabricao de cerveja .................................................... 22 2.3.1 Leveduras ............................................................................................................ 22 2.3.2 Carboidratos de reserva presentes na levedura ................................................. 24 2.3.3 Contaminantes Microbianos no processo cervejeiro ........................................... 25 2.3.3.1 Bactrias contaminantes ............................................................................... 25 2.3.3.2 Leveduras selvagens ..................................................................................... 26 2.4 Processo fermentativo .................................................................................................. 27 2.5 Processos de produo da cerveja .............................................................................. 32 2.6 Melhoramento gentico e molecular das leveduras ..................................................... 34 3 OBJETIVOS ....................................................................................................................... 38 3.1 Objetivo geral ............................................................................................................... 38 3.2 Objetivos especficos ................................................................................................... 38 4 METODOLOGIA ................................................................................................................ 39 5 RESULTADOS .................................................................................................................. 40 6 CONSIDERAES FINAIS ............................................................................................... 41 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS .................................................................................. 42

INTRODUO
Define-se cerveja como uma bebida carbonada de teor alcolico entre 3 e 8% (v/v),

preparada a partir de malte de cevada, lpulo, fermento e gua de boa qualidade, permitindo-se ainda o uso de outras matrias primas como arroz, milho e trigo (ALMEIDA E SILVA, 2005). No se sabe ao certo a origem das primeiras cervejas, porm autores como Kunze (1996) e Aquarone (1993) acreditam que a prtica da cervejaria tenha se originado na regio da Mesopotmia, onde, como no Egito, a cevada cresce em estado selvagem. H evidncias de que a cerveja feita de cevada maltada j era consumida na mesopotmia em 6.000 a.C., e que a cerveja nesta poca no era usada somente na dieta, mas tambm exercia funo cosmtica e medicinal. O sabor da cerveja determinado pela matria prima, pelo tipo de processo e pela levedura utilizada, alm dos compostos produzidos durante a fermentao e maturao, que exercem maior impacto nas caractersticas sensoriais da bebida (CARVALHO et al., 2007). Cervejas so classificadas basicamente em dois tipos: lager (de baixa fermentao) e ale (de alta fermentao). Cervejas do tipo lager so fermentadas temperatura entre 7 a 15 C e a durao da fermentao e da maturao de 7 a 10 dias (ARAJO; SILVA; MINIM, 2003). Devido s baixas temperaturas usadas no processo, os sabores e aromas das cervejas lager so mais suaves e leves em comparao com as ales (HARDWICK, 1994). As cervejas do tipo lager, so elaboradas com linhagens de Saccharomyces uvarum sendo mais populares mundialmente. As cervejas do tipo ale so fermentadas temperatura de 18 a 22 C e a durao da fermentao e da maturao de 3 a 5 dias, so elaboradas com linhagens de Saccharomyces cerevisae sendo muito populares na Gr Bretanha (VARNAM, A.H.; SUTHERLAND, J.P., 1994; TIPOS DE CERVEJAS, 2010). Embora exista esta diferenciao tecnolgica no setor de cervejarias, geralmente a espcie de levedura cervejeira o Saccharomyces cerevisiae, sendo que outras classificaes so utilizadas para agrupar diferentes linhagens de Saccharomyces (VAUGHAN-MARTINI; MARTINI, 1993; ANDRIETTA, S.R.; MIGLIARI, P.C.; ANDRIETTA, M.G.S.; 1999). A produo e o consumo de cervejas no Brasil so caracterizados pela presena de poucas marcas sendo quase todas de um nico tipo de cerveja, a cerveja do tipo lager. Outros tipos apresentam um consumo restrito, principalmente por consumidores mais exigentes em termos de qualidade sensorial, que buscam um produto diferenciado, independentemente do preo. A baixa diversidade de produtos de cervejaria brasileira contrasta com o modelo de outros pases, onde se observa uma grande variedade de marcas e tipos de cervejas, com sabores e coloraes distintas (TAB.1).

TABELA 1 As 10 cervejas mais consumidas no mundo Ranking 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 Fonte: Sindicerv, 2011 Comparada com outras bebidas alcolicas, a cerveja apresenta baixo teor de lcool, principalmente pela proporo de gua que possui, porm contm uma grande riqueza aromtica exatamente pelas caractersticas das matrias-primas utilizadas em sua preparao (TAB.2). TABELA 2 Teor alcolico de diferentes bebidas alcolicas BEBIDAS Cerveja (baixo teor) Cerveja (mdio teor) Cerveja (alto teor) Vinho Champanhe Licor Whisky Conhaque Rum Vodka Gin Tequila Cachaa Fonte: Sade vida, 2011 TEOR ALCOOLICO (%v/v) 0,2 a 2 2 a 4,2 4,2 a 8 10 a 13 10 a 13 18 a 24 24 a 36 24 a 36 40 a 41 40 a 41 40 a 47 40 a 46 24 a 40 ou mais Cerveja Bud Light Budweiser Skol Corona Brahma Heineken Miller Life Coors Light Asahi Super Dry Snow

No mercado de cerveja, o Brasil s perde, em volume, para a China (35 bilhes de litros/ano), Estados Unidos (23,6 bilhes de litros/ano) e Alemanha (10,7 bilhes de litros/ano). O consumo da bebida, em 2009, apresentou crescimento em relao ao ano anterior, totalizando 10,8 bilhes de litros e o faturamento ficou em torno dos R$ 31 milhes, de acordo com dados do Sindicerv. (Fig.1). A fabricao de cerveja passou de ser uma atividade artesanal ao longo dos anos e converteu-se em um ramo economicamente muito importante dentro da biotecnologia industrial.

FIGURA 1 - Mercado da cerveja no Brasil Fonte: Sindicerv, 2011.

REVISO BIBLIOGRFICA
2.1 Histrico

A produo e o consumo de bebidas alcolicas uma das atividades mais antigas desenvolvidas pelo homem. No caso da cerveja, a mais popular das bebidas, sua produo vem de milhares de anos, sofrendo aprimoramento tcnico visando o aumento da produo e do consumo. A prtica da cervejaria originou-se na regio da Mesopotmia, onde a cevada cresce em estado selvagem, porm a origem das primeiras bebidas alcolicas ainda e incerta, mas provavelmente tenham sido feitas de cevada, tmaras, uvas ou mel. No passado o processo cervejeiro era exercido por padeiros, devido natureza da matria prima (gros de cereais e leveduras). No Egito, a cerveja era uma bebida nacional e de grande consumo, ocupando um lugar importante nos rituais religiosos (DRAGONE et al., 2010). Para a produo da cerveja, a cevada era deixada de molho at germinar e aps ser moda era moldada em bolos adicionando-se a levedura. Aps serem assados e desfeitos os bolos eram colocados em uma jarra com gua para fermentar. Esta cerveja, chamada rstica ainda fabricada no Egito com o nome de Bouza. Aps algum tempo a cerveja ficou conhecida pelos outros povos orientais, chegou at a Europa e da para o resto do mundo. A cervejaria japonesa Kirin Brewery encontrou recentemente uma receita de cerveja extrada de murais de tmulos egpcios. Segundo a cervejaria, a bebida obtida atravs dessa frmula tem cor castanha escura, gosto amargo e grau alcolico de 10%, apresentando baixo teor de gs carbnico e quase nenhuma espuma (DRAGONE et al., 2010).

Embora o lpulo j fosse cultivado na Babilnia, no existem registros do seu uso na produo de cerveja at o ano de 1079. Tal matria prima s foi introduzida na idade mdia, quando a arte cervejeira teve algum avano dando inicio a produo em alto escala. A Lei Alem Reinheitsgebot, aprovada em 1516 pelo Duque Guilherme IV, aprovou o que conhecido hoje, como a lei mais antiga do mundo sobre a manipulao de alimentos: a cerveja deve ser produzida somente com cevada, lpulo e gua, sendo que, somente o lpulo poderia ser utilizado para conferir o sabor amargo da cerveja produzida no pas. Atualmente o lpulo considerado em nvel mundial como uma matria prima essencial para a produo de cerveja (DRAGONE et al., 2010).

No sculo XIX, durante a permanncia da famlia real portuguesa em territrio brasileiro, Dom Joo XI trouxe o hbito do consumo de cerveja para o Brasil. Nessa poca,

a cerveja era importada da Holanda e Inglaterra, e somente em 1888 foi fundada a Manufatura de Cerveja Brahma Villigier e Cia na cidade do Rio de Janeiro. Em 1891 foi fundada em So Paulo a Companhia Antrtica Paulista (MORADO, 2009).

O incio do sculo XX foi marcado pelo surgimento de muitas microcervejarias, animadas com a nascente sociedade burguesa, o incio da industrializao e a chegada de um grande nmero de imigrantes europeus. Em 1966 surge a Cerpa Cervejaria Paraense e em 1967 surge a Skol. Quatro anos depois, lanada a primeira cerveja em lata brasileira, feita de folha de flandres: a Skol Pilsen. Em 1980, surge cervejaria kaiser, em Divinpolis (MG), e em 1989 a Primo Schincariol passa a produzir cerveja no interior de So Paulo (MORADO, 2009; DRAGONE et al., 2010).

Em 1999, a partir da fuso entre a Companhia Antarctica Paulista e a Companhia Cervejeira Brahma, surge a AmBev. A criao da Ambev e sua posterior fuso com a gigante belga Interbrew foram dois dos fatos mais marcantes da histria da cerveja brasileira e mundial das ltimas dcadas. Com o nome de InBev, a nova empresa mundial, a partir de 2004, tornou-se a maior produtora do mundo (MORADO, 2009).

2.2

Matrias primas

2.2.1 gua
A gua a matria-prima mais importante na fabricao de cerveja, sendo as suas caractersticas fsicas e qumicas de fundamental importncia para a obteno de uma cerveja de boa qualidade (MADRID et al.,1996). A sua importncia tanta que ela um dos fatores decisivos na escolha do local para a instalao de uma cervejaria. Uma gua que precisa de muitas correes da qualidade requer um tratamento mais minucioso, o que ir resultar em um aumento no custo do produto final. Ento necessrio que a fbrica esteja instalada prxima a uma fonte abundante de gua de boa qualidade (VENTURINI FILHO, 2000). A indstria cervejeira consome grandes volumes de gua, e em mdia so utilizados, 10L de gua, para cada litro de cerveja produzido (REINOLD, 1997). O controle do pH da gua fundamental, pois um pH alcalino poder ocasionar a dissoluo de materiais existentes no malte e nas cascas dos cereais, que so indesejveis no processamento da bebida. O ideal que se tenha um pH cido, o que facilita a atividade enzimtica do gro do cereal, com um consequente aumento no rendimento de maltose, e

um maior teor alcolico. Em geral, o pH ideal da gua para a fabricao de cerveja est em torno de 6.5 a 7.0 (AMBEV, 2011). Toda a gua requer alguma forma de tratamento antes de ser utilizada em uma cervejaria, no importando se ela provm de poos artesianos, rios, lagos ou mananciais. Sendo necessrio, antes de sua utilizao, a anlise de alguns parmetros fsicos, qumicos, tais como: turbidez, dureza, pH. Para se definir o tipo de tratamento a ser empregado. Dependendo da origem da gua, todas ou apenas algumas das seguintes operaes so efetuadas na cervejaria: a) b) Aerao - oxidao: para remover odores; Clarificao: adio de produtos qumicos para a aglomerao ou coagulao de

material em suspenso, que ser decantado ou filtrado; c) d) e) Filtrao: remoo de slidos em suspenso; Clorao: para eliminao de micro-organismos; Desmineralizao: para a remoo de sais em guas que contenham alto teor de sais

dissolvidos.

2.2.2 Malte de cevada

O cereal mais usado para a fabricao de cerveja a cevada, apesar de diversos outros cereais, como o milho, arroz, trigo, aveia podem ser utilizados tambm (FIG.2). Esta preferncia deve-se a uma srie de fatores, dentre eles est o fato da cevada ser rica em amido, cuja estrutura modificada durante o processo de maltagem, onde o amido convertido em acares, tais como a maltose e a glicose e possuir um alto teor de protenas em quantidade suficiente para fornecer os aminocidos necessrios para o crescimento da levedura e possuir substncias nitrogenadas que desenvolvem um papel importante na formao da espuma (NAKANO, 2000).

FIGURA 2 Gros de cevada Fonte: AmBev, 2011

A cevada uma gramnea pertencente ao gnero Hordeum, que cultivada desde a antiguidade, sendo originria do Oriente. Dentre as espcies cultivadas existem as chamadas "cevadas cervejeiras", que so as mais utilizadas para a obteno do malte utilizado na fabricao de cervejas. A grande maioria das espcies de cevada utilizada possui uma casca cimentada ao gro, que funciona como um agente filtrante contribuindo com o aroma, cor e sabor do mosto, alm de proteger o gro de impactos mecnicos sofridos durante o processo de maltagem (EHRHARDT; SASSEN; 1995). A cevada tem algumas caractersticas que a tornam mais adequada para a produo de cerveja do que outros cereais: a) Possui alto teor de amido, o que a torna atrativa em termos de custo por ser mais

barata e mais fcil de maltar que outros cereias; b) Quando maltada, possui um teor elevado de enzimas que ajudam no processo de

fabricao do mosto, principalmente na quebra do amido em acares; c) Contm outras protenas que proporcionam equilbrio nos efeitos em relao

espuma, ao corpo e a sua estabilidade coloidal; d) Possui teor de lipdios relativamente baixo, o que vantajoso para a estabilidade de sabor da bebida. Os tipos de cevada utilizados na fabricao de cerveja se diferenciam pelo nmero de fileiras de gros: o com duas e com seis fileiras de gros de cada lado do ramo do cereal. Esses gros devem ter algumas qualidades especificas como o contedo de protena, a taxa de gordura, o rendimento da extrao e a capacidade de germinao. Somente 15% dos gros se destinam a produo da cerveja, o restante da produo mundial acaba sendo usada na produo de rao animal.

2.2.3 Adjuntos do malte

Alguns cereais como cevada, trigo, arroz, milho, sorgo acar e xarope podem ser usado como adjuntos substituindo o malte. Esses elementos so adicionados na fase de fabricao do mosto proporcionando material fermentvel adicional alm de reduzir os custos e diminuir o teor de nitrognio no extrato. Os adjuntos derivados de cereal utilizados para produo de mosto de cerveja so definidos como fonte de carboidratos no malteados de composio e propriedades adequadas ao uso como matrias-primas complementares para o principal componente, o malte. Eles exercem papel complementar na produo do mosto, fornecendo acares

fermentveis para a levedura cervejeira; possuem um elevado teor de amido e compostos proticos com pouca solubilidade. A legislao dos diferentes pases europeus, quanto ao emprego de adjuntos, pode ser dividido em trs grupos: 1 grupo: Pases em que obrigatria a utilizao de 100% de malte de cevada,

devido "Lei da Pureza" (exceto para a fabricao de cervejas de alta fermentao): ex.: Alemanha e Grcia; 2 grupo: Pases com utilizao limitada de adjuntos, variando de 25 a 40%: ex.: 3 grupo: Pases com utilizao ilimitada de adjuntos, por exemplo:

Frana, Blgica e Itlia; ex.;

Dinamarca, Irlanda, Gr-Bretanha. Nos Estados Unidos, a utilizao de adjuntos atinge, em certos casos at cerca de 50% da dosagem de matrias-primas na fabricao. No Brasil, a legislao no limita o percentual de arroz, gritz de milho e xarope de milho. Limita, no entanto, o emprego de acar em cervejas claras, que deve ficar entre 10 e 15% em relao ao extrato primitivo e 50% no caso de cervejas escuras.

2.2.4 Lpulo
O lpulo uma planta da famlia das Cannabaceae, sendo diica, o que quer dizer que produz flores masculinas e femininas (FIG.3). As flores so ordenadas em espigas e possuem secretoras de resinas e leos de substncias amargas, que d o amargor tpico e contribuem para o aroma caracterstico da cerveja. Na fabricao de cerveja utilizam-se apenas as flores femininas, pois so estas que contm a substncia amarga lupulina. Pode ser comercializado na forma de flores secas, p e em extratos, sendo que em p esses extratos possuem maior densidade e, portanto, ocupam menos volume ao ser transportado.

FIGURA 3 Lpulo Fonte: Cerveja artesanal, 2011.

Existem dois tipos de lpulos fundamentais: os assim chamados de amargor e os aromticos, conforme caractersticas de amargor ou de aroma. Os lpulos aromticos so usados como lpulos de acabamento ou condicionadores e so adicionados ao mosto normalmente nos minutos finais da fervura para conferir aroma a cerveja. Lpulos amargos so utilizados no processo de fervura para extrao do amargor. Alm das caractersticas citadas, dadas a cerveja pelo lpulo, esta planta ainda possui outras funes como evitar a formao de espuma durante a fervura e funciona como agente bacteriosttico (CERVESIA, 2011). O lpulo responsvel pelo aroma acre e sabor amargo caractersticos da cerveja, e era usado na antiguidade como planta medicinal. O lpulo utilizado em pequena quantidade, sendo necessrios de 40 a 300 gramas de lpulo para produzir 100 litros do produto final. Ao contrario do malte, o lpulo no altera o teor alcolico nem o corpo da cerveja (MORADO, 2009). A maior parte da produo de lpulo ocorre entre os paralelos de latitude 35 e 55. Por ser uma planta muito sensvel ao clima, suas caractersticas variam consideravelmente, de acordo com o microclima da regio. No Brasil, varias tentativas de cultiv-lo nas Serras Gachas no foram bem sucedidas. Alemanha, Estados Unidos, China e Republica Checa produzem mais de 80% do lpulo mundial, segundo a FAO (Food and Agricultural Organization, da Organizao das Naes Unidas).

2.2.5 Leveduras
As leveduras so micro-organismos eucariticos predominantemente unicelulares e pertencentes ao Reino Fungi (FIG.4). As leveduras possuem a habilidade de metabolizar eficientemente os constituintes do mosto que um caldo resultante da mistura fervida de malte e gua, rico em acares fermentveis. Esse caldo filtrado, para receber o lpulo e o fermento ser transformado em lcool e gs carbnico a fim de produzir uma cerveja com qualidade e estabilidade sensorial satisfatria (CARVALHO et al., 2006). As leveduras mais utilizadas em cervejaria so de duas espcies do gnero Saccharomyces: Saccharomyces cerevisiae (alta fermentao) e Saccharomyces uvarum (baixa fermentao) (EMBRAPA, 2010). Por ser fundamental na formao de aromas na cerveja, de suma importncia que a cultura de levedura seja a mais pura possvel, isto , isenta de micro-organismos contaminantes (bactrias e leveduras selvagens).

FIGURA 4 Levedura do gnero Saccharomyces Fonte: Cerveja artesanal, 2011.

2.2.6 Adjuntos de fabricao 2.2.6.1 Antioxidantes

Tem como funo evitar a ao do oxignio, que o principal fator da deteriorao das gorduras dos alimentos. Quando sofrem transformaes, essas gorduras acabam por alterar o sabor e odor dos alimentos, tornando-os imprprios para o consumo (NAKANO, 2000). 2.2.6.2 Estabilizantes Os estabilizantes mantm as caractersticas fsicas das emulses e suspenses, isto , misturas como a bebida alcolica. So adicionados s cervejas com a finalidade de aumentar a viscosidade. So adicionados tanto a cerveja destinada ao engarrafamento como a cerveja destinada ao embarrilamento, estabilizantes a base de alginatos (REINOLD, 1997). Para verificar a estabilidade da espuma usado um aparelho chamado Nibem (Haffmans), que faz os clculos verificando o tempo que a espuma demora a baixar em um recipiente a temperatura de 20 C (SCHINCARIOL, 2011).

2.2.6.3 Acidulantes
Atuam como adjunto de aroma e sabor, so largamente encontrados na natureza, sendo disponveis comercialmente na forma de solues aquosas que so incolores, inodoras, viscosas e no volteis (CERVESIA, 2011). Estes compostos so geralmente produzidos pela fermentao de sacarose altamente refinada. Por ser um componente largamente distribudo na natureza, e um dos primeiros agentes acidificantes a ser utilizado

no processamento de alimentos, o cido ltico utilizado na indstria cervejeira. Este componente tambm auxilia no ajuste do pH, diminuindo o tempo de macerao e favorecendo a precipitao das protenas, melhorando a cor e auxiliando a filtrao do mosto (REINOLD, 1997). O uso do cido ltico reconhecido como seguro e recomendado para alimentos e bebidas por instituies internacionais de grande prestgio como o FDA norte americano e a FAO (Food and Agricultural Organization, da Organizao das Naes Unidas).

2.2.6.4 Antiespumante
Atuam regulando a formao de espumas, minimizando a incidncia de formao de espuma e tambm atuando como desespumante de ao imediata no processo de fermentao alcolica.

2.3

Microbiologia no processo de fabricao de cerveja

2.3.1 Leveduras
As caractersticas de sabor e aroma de qualquer cerveja esto determinadas de forma preponderante pelo tipo de levedura utilizada. Embora o etanol seja o principal produto de excreo produzido pela levedura durante a fermentao do mosto, esse lcool primrio tem pequeno impacto no sabor da cerveja. O tipo e a concentrao de vrios produtos de excreo formados durante a fermentao so quem primariamente determinam o sabor da cerveja. A formao desses compostos depende do processo metablico do cultivo da levedura. Vrios fatores podem afetar esse processo metablico e, consequentemente, o sabor da cerveja, incluindo a linhagem de levedura, a temperatura e o pH da fermentao, o tipo e a proporo de adjunto, o modelo de fermentador e a concentrao do mosto (MORADO, 2009) O gnero Saccharomyces apresenta vrias linhagens consideradas seguras e capazes de produzir dois metabolitos primrios importantes, etanol e dixido de carbono. Os tipos de cervejas mais importantes (lager e ale) so fermentados com linhagens de S.uvarum (S. carlsbergensis) e S. cerevisiae, respectivamente. Atualmente, taxonomistas de leveduras tm designado todas as linhagens empregadas na produo de cerveja como pertencentes a espcie S. cerevisiae. A tabela 3 mostra as mudanas na nomenclatura das linhagens pertencentes espcie S. cerevisiae.

TABELA 3 Variao da nomenclatura taxonmica de linhagens de Saccharomyces cerevisiae e S. uvarum utilizadas na fabricao da cerveja nos anos de 1952/1970/1984 e 2011 1952 S. cerevisiae S. willianus 1970 S. cerevisiae 1984 2011

S. coreanus

S. coreanus

S. uvarum S. logos

S. uvarum

S. bayanus S. pastorianus S. oviformis S. beticus

S. bayanus

S. cerevisiae

S. heterogenicus

S. heterogenicus

S. cerevisiae

S. chevalieri S. fructuum S. italicus S. steineri S. globosus S. italicus S. globosus S. aceti S. diastaticus S. prostoserdovii S. capensis S. inusitatus S. hispalensis S. cerevisiae Fonte: Jin e Speers (1998); LIBKIND,D. (2011) S. chevalieri S. uvarum

A literatura cientifica cita dois tipos de Saccharomyces com algumas diferenas bioqumicas a serem consideradas: As cepas de S. uvarum (carlsbergensis) tipo lager possuem os genes MEL que produzem a enzima extracelular -galactosidase (melibiase), permitindo a utilizao do dissacardeo melibiose (glicose-galactose) e no apresentam crescimento a temperaturas superiores a 34C. J as cepas de S. cerevisiae tipo ale carecem desses genes MEL, o que impossibilita a utilizao da melibiose e apresentam crescimento a temperaturas equivalentes a 37C. Tradicionalmente, a cerveja lager produzida por leveduras de baixa fermentao entre 7-15 C, as quais floculam no final da fermentao primria ou principal (7 a 10 dias), sendo coletadas na base do fermentador. As leveduras de alta fermentao, usadas para a produo das cervejas ale, fermentam com temperaturas entre 18 e 22 C. No final da fermentao (3 a 5 dias), as clulas adsorvidas nas bolhas de CO2, so carreadas at a superfcie do mosto onde so coletadas. A diferena entre lager e ale, baseada em leveduras de fundo ou de superfcie, tem se tornado menos usual com a utilizao dos fermentadores cilindro-cnicos e das centrfugas. A Figura 5 mostra um esquema genrico dos principais processos de produo de cerveja em funo da levedura utilizada. Saccharomyces uvarum (Lager) 7 C a 15 C Fermentao principal (7 a 10 dias) O C Fermentao secundria (3 a 5 semanas)

Saccharomyces cerevisiae (Ale) 18 C a 22C Fermentao principal (3 a 5 dias) 0 C Fermentao secundria (at uma semana)

FIGURA 5 - Tempo de fermentao dos tipos lager e ale de cervejas Fonte: Russel (1994).

2.3.2 Carboidratos de reserva presentes na levedura

As clulas de leveduras produzem dois carboidratos de reserva, glicognio e trealose. Ambos so acumulados pela levedura ao final da fermentao. Glicognio uma

molcula multi-ramificada consistindo de numerosas cadeias de resduos de D-glicose unidos por ligaes -(1,6). A trealose um dissacardeo que consiste de dois resduos de D-glicose ligados por meio de tomos de carbono redutores. O glicognio serve como uma reserva bioqumica de energia e carbono para suprir a clula durante o estgio aerbico da fermentao quando os lipdios esto sendo sintetizados. medida que os constituintes do mosto vo sendo absorvidos pelas leveduras, o nvel de glicognio das clulas aumenta at alcanar o mximo e, ento, diminui levemente no final da fermentao. Idealmente, o contedo de glicognio na levedura a ser inoculada deveria ser alto (DRAGONE et al., 2010). Como o glicognio rapidamente consumido durante o armazenamento, importante que a levedura seja preferencialmente reutilizada aps 24 a 48 horas de sua coleta, sendo que a velocidade de consumo de glicognio dependente de um nmero de fatores incluindo a linhagem de levedura e as condies de utilizao. Os procedimentos de manipulao da levedura sobre o desenvolvimento do flavor da cerveja durante a fermentao provocam baixos nveis de glicognio nas clulas, resultante de efeitos, tais como altas temperaturas e tempos excessivos de armazenagem. Isso influi na viabilidade celular, nos tempos de fermentao e nos nveis de diacetil, acetaldedo e dixido de enxofre ao final da fermentao (DRAGONE et al., 2010). Quando as clulas de Saccharomyces cerevisiae encontram-se sob condies nutricionais baixas, produzem ATP pelo catabolismo de trealose que envolve a ao da enzima trealase para a obteno de glicose. A trealose garante a viabilidade da levedura durante a germinao, ausncia de nutrientes e desidratao protegendo a membrana plasmtica contra autlise (MORADO, 2009).

2.3.3 Contaminantes Microbianos no Processo Cervejeiro 2.3.3.1 Bactrias contaminantes

Bactrias so agentes deterioradores comuns da cerveja. As bactrias Gram-positivas, que trazem os maiores problemas para a cerveja, so as bactrias lcticas pertencentes aos gneros Lactobacillus e Pediococcus, sendo que pelo menos 10 espcies de lactobacilos podem causar danos a este produto. Os lactobacilos cervejeiros so heterofermentativos (fermentao da glicose resulta em vrios produtos como cido ltico, oxalactico e frmico) e homofermentativos (fermentao da glicose resulta apenas em cido lctico) e produzem cido lctico e actico, dixido de carbono, etanol e glicerol como produtos finais, com algumas espcies produzindo tambm diacetil. Os Pediococos so homofermentativos e possuem seis espcies identificadas, mas a espcie predominante encontrada na cerveja Pediococcus damnosus, sendo sua infeco caracterizada pela formao de cido lctico e

diacetil. Entre as bactrias Gram-negativas que causam danos cerveja incluem-se as bactrias acticas (Acetobacter e Gluconobacter), e certos membros da famlia das enterobactrias (Escherichia, Aerobacter, Klebsiella, Citrobacter e Obesumbacterium), como tambm Zymomonas, Pectinatus e Megasphaera (ALMEIDA E SILVA, 2005).

2.3.3.2. Leveduras selvagens

Levedura selvagem qualquer levedura diferente da levedura de cultivo utilizada na elaborao de determinada cerveja. Leveduras selvagens podem ser originadas de diferentes fontes. Estudos com 120 leveduras selvagens isoladas a partir da cerveja, leveduras em propagao e garrafas vazias, mostram que, alm de vrias espcies de Saccharomyces, foram encontradas espcies dos gneros Brettanomyces, Candida, Debaryomyces, Hansenula, Kloeckera, Pichia, Rhodotorula, Torulaspora e

Zygosaccharomyces (ALMEIDA e SILVA, 2005). Cerca de 80% das leveduras selvagens so pertencentes ao gnero Saccharomyces. Assim S. diastaticus (= S. cerevisiae) ataca a cerveja envasada, mas no pasteurizada (chopp), produzindo turbidez, super atenuao e sabor desagradvel. A fermentao contaminada com S. cerevisiae var. ellipsoideus resulta em cerveja com sabor fenlico. Linhagens deficientes respiratrias de S. cerevisiae podem se desenvolver ao lado da cultura industrial e produzir, na cerveja, odor e sabor anormais, dentre eles o diacetil (VENTURINI FILHO e CEREDA, 2001). As leveduras selvagens podem causar defeitos, como o caso da formao de pelcula na superfcie da cerveja, produo de turbidez, desenvolvimentos de odor e sabor estranhos e fermentao lenta (VENTURINI FILHO; CEREDA, 2001; ALMEIDA E SILVA, 2005). Segundo Venturini Filho e Cereda (2001), em fermentaes contnuas, tm-se observado a presena de leveduras produtoras de micocinas (toxinas Killer). Essas linhagens produzem uma protena letal para as leveduras (sensveis) de cultivo. A manuteno do pH baixo, indefinidamente, durante a fermentao contnua, propicia o crescimento de linhagens selvagens, que pode eliminar completamente a levedura iniciadora do processo e produzir sabor desagradvel (DRAGONE et al., 2010). As leveduras selvagens podem ser detectadas por exame microscpico, por provas de resistncia trmica, esporulao, fermentao de acar, sorolgicas etc. No mais, a eliminao da levedura selvagem ou a manuteno da sua concentrao em nveis mnimos na cervejaria, pode ser conseguida utilizando inculo da cultura iniciadora em condies asspticas, o que possvel quando se faz propagao da cultura em laboratrio a cada um ou dois meses (VENTURINI FILHO; CEREDA, 2001).

2.4

PROCESSO FERMENTATIVO

O processo fermentativo consiste no ponto central para a produo de qualquer bebida alcolica, possuindo como principal objetivo a converso de aucares em etanol e gs carbnico pela levedura, sob condies anaerbicas. As fermentaes so iniciadas utilizando culturas de leveduras renovadas aps certo nmero de ciclos fermentativos; entre os ciclos, as clulas so tratadas com solues cidas eliminando possveis contaminantes (DRAGONE et al., 2010). Segundo Venturini Filho e Cereda (2001), no incio da fermentao alcolica a quantidade de leveduras a ser utilizada deve ser tal que resulte numa concentrao de 5 a 15 milhes de clulas de levedura por mililitro de mosto. Embora as circunstncias variem de mostos para mostos e de linhagens para linhagens, uma fermentao requerer 1 ppm de oxignio dissolvido e 106 cel/mL por cada 1P (plato unidade de medida das concentrao do mosto) de extrato no mosto (ALMEIDA e SILVA, 2005). De acordo com Munroe (1994), o oxignio utilizado pela levedura para produzir esteris e cidos carboxlicos insaturados, que so essenciais para a sntese da membrana celular. Sem o oxignio inicial, o crescimento celular fica restrito causando fermentao anormal e mudanas no sabor da cerveja. O oxignio consumido pela levedura geralmente em poucas horas e, como os acares do mosto no so consumidos no incio da fase lag, o glicognio a principal fonte de energia para atividade celular. O metabolismo da levedura cervejeira pode ser dividido em anabolismo quando as reaes de sntese de material celular acontecem custa da energia armazenada na molcula de ATP e catabolismo as molculas so quebradas e oxidadas e a energia fica acumulada nas molculas de ATP. A transformao da glicose em etanol e gs carbnico envolve doze reaes que so catalisadas por enzimas especificas (FIG.6). A fermentao alcolica se processa no

citoplasma celular, pois nessa regio que se encontra todo aparato enzimtico. As enzimas glicolticas sofrem aes de diversos fatores (pH, temperatura, nutrientes, etc.) que podem estimular ou reprimir a ao enzimtica, afetando dessa forma o desempenho do processo fermentativo conduzido pelas leveduras (LIMA et al., 2001).

FIGURA 6 - Sequncia das reaes enzimticas pela fermentao alcolica de carboidratos endgenos (glicognio e trealose) ou exgenos (sacarose e maltose), conduzida por Saccharomyces cerevisiae. Fonte: LIMA et al.,2001.

A levedura Saccharomyces tem habilidade de se ajustar metabolicamente em presena ou ausncia de oxignio. Na presena de oxignio uma poro do acar transformada em biomassa, gs carbnico e gua e enquanto que na ausncia de oxignio a maior parte convertida em etanol e gs carbnico, a que se d o nome de fermentao alcolica. O processo de aerobiose energeticamente mais eficiente e tem a finalidade de promover o crescimento e o reviramento do fermento. O processo anaerbio tem a funo de promover a transformao do mosto em cerveja, pela converso do acar em etanol e gs carbnico (LIMA et al., 2001). O mosto cervejeiro composto principalmente por carboidratos e alguns acares: sacarose, frutose, glicose, maltose e maltotriose alm de dextrinas. O primeiro passo na

utilizao dos acares fermentescveis pela levedura pode ser a passagem intacta do acar pela membrana celular ou a hidrolise fora da membrana celular, seguida pela entrada na clula de alguns produtos da hidrolise. A maltose e a maltodriose passa direto pela membrana, enquanto a sacarose a hidrolisada por uma enzima no meio extracelular, e seus produtos (glicose e frutose) so metabolizados pela clula (ALMEIDA e SILVA, 2005). Em situao normal as leveduras cervejeiras so capazes de utilizar glicose, frutose, maltose e maltotriose respectivamente, sendo que, as dextrinas so utilizadas somente por S. diastaticus (uma variedade de S. cerevisiae) (RUSSEL, 1994). A respirao e a fermentao em clulas de leveduras so reguladas principalmente pela disponibilidade de glicose e oxignio. A represso catablica ou efeito Crabtree ocorre em presena de glicose e em condies estritamente aerbias (metabolismo do tipo respiro fermentativo), esse mecanismo ocorre principalmente pelo forte efeito repressivo da glicose sobre atividades de enzimas respiratrias e tambm pela inibio da expresso gentica da via respiratria; Como o piruvato no pode ser oxidado pelo ciclo de Krebs no processo fermentativo, ele reduzido a etanol (BAKKER et al., 2001). O efeito Pasteur ocorre em baixas concentraes de glicose e em condies de nutriente limitantes. A principal diferena entre o efeito Cabtree e o Pasteur que, no efeito Cabtree observa-se a tendncia da levedura respirar em meios anaerbios e no Pasteur a levedura pode fermentar em presena de oxignio. Em condies elevadas, a glicose e a frutose reprimem a respirao da levedura alcolica, desse modo apenas ser possvel a respirao na presena de oxignio e em baixa concentrao de acar (VENTURINE FILHO e CEREDA, 2001). Ao metabolizar anaerobicamente o acar, o principal objetivo da levedura gerar ATP, que ser empregado na realizao de trabalhos fisiolgicos e biossntese. O etanol e o gs carbnico so considerados produtos de excreo sem utilidade metablica para a clula em anaerobiose. Entretanto, o etanol pode ser oxidado metabolicamente gerando mais ATP e biomassa, mais apenas em condies de aerobiose. Na seqncia das reaes enzimticas de ATP aparecem rotas metablicas alternativas propiciando formao de materiais necessrios a constituio da biomassa, e formao de outros produtos de interesse metablico. O metabolismo anaerbico juntamente com o etanol e o gs carbnico permite a formao e a excreo de glicerol, cidos orgnicos, lcois superiores, acetaldeido, acetoina, butilenoglicol, entre outros. Simultaneamente ocorre a formao de biomassa (WALKER, 2000; LIMA et al., 2001).

O glicerol o mais abundante dos compostos orgnicos secundrios da fermentao e sua formao est ligada a manuteno do equilbrio redox celular, a resposta ao estresse osmtico e a concentraes elevadas de acares ou de sais no mosto (WALKER, 2000; LIMA et al., 2001). Problemas relacionados viabilidade celular tm sido encontrados em mostos cervejeiros com concentraes de slidos solveis acima de 18%, alm da fermentao lenta e incompleta, a alta presso osmtica e a toxidade do etanol so relacionados como fatores limitantes. Dragone et al. (2003) verificaram experimentalmente que um aumento na concentrao do mosto cervejeiro de 15 para 20 P resultou na diminuio da produtividade em etanol em 0,08 g.l-1.h-1. Segundo Vanderhaegen et al. (2006), as leveduras produzem tambm sulfito em uma quantidade que geralmente est relacionada com o total de acares fermentescveis no mosto. Cervejas produzidas com a fermentao do mosto a cerca de 12 P contm menos que 10 mg/L de sulfito. Em contrapartida, cervejas elaboradas com a fermentao do mosto acima de 12P podem conter sulfito em nveis acima de 10 mg/L. Estes autores tambm afirmam que mostos com a mesma concentrao de slidos solveis, mas com alterao na proporo entre os tipos de carboidratos, podem produzir cervejas com diferentes quantidades de sulfito. Usando diferentes mostos elaborados com 65% de malte e 35% de vrios tipos de adjuntos, mostraram que um aumento na quantidade de substrato fermentescvel aumenta expressivamente a quantidade de SO2 final (VANDERHAEGEN et al.;2006). Ainda so discutveis as razes fisiolgicas que levam a levedura a produzir e excretar o cido succnico. Este produto secundrio o segundo mais abundante na fermentao alcolica e admite-se que sua formao se deve a um meio fermentativo inadequado. Como no h evidencias de necessidades metablicas desse cido para a levedura observa-se que sua formao e excreo conferem as leveduras maior competitividade com as bactrias contaminantes. Este cido juntamente com o etanol exerceria uma atividade antibacteriana (LIMA et al., 2001). Quantidades significativas de acetaldedo passam para o mosto fermentado e so reabsorvidas. Este produto secundrio e o precursor imediato da sntese do etanol, e em grandes quantidades proporcionam o flavor de amnia na cerveja. O aumento do teor de acetaldedo pode ser ocasionado pela fermentao em alta temperatura e pela super dosagem de fermento na cerveja (AZEREDO, 1999). Em grandes cervejarias, o gs carbnico gerado na fermentao recuperado, purificado em instalaes especiais e reutilizado em diversas fases do processo, como, por

exemplo, na correo de carbonatao da cerveja, ou no enchimento de barris e garrafas. O excedente costuma ser vendido para microcervejarias que no possuem plantas de recuperaes de CO2, ou utilizado na produo de refrigerantes, nos casos de fbricas e conjuntas. O cuidado microbiolgico na fermentao deve ser redobrado, para evitar aromas indesejveis provenientes de contaminao microbiolgica. Logo aps a retirada das leveduras, tem se inicio o processo de maturao, que ocorre em temperaturas inferiores s da fermentao. Durante essa fase acontecem reaes fsicoqumicas que transformam o aspecto visual e produzem alguns aromas e sabores. Essa etapa considerada como afinamento da cerveja. A maturao quando se inicia a maior parte dos acares j foi metabolizado e transformado em lcool etlico, dixido de carbono, glicerol, cido actico, alcois superiores e steres. nessa etapa que ocorre a carbonatao natural da bebida, como efeito da contrapresso exercida no prprio taque de maturao pelo gs carbnico produzido na fermentao do extrato que resta. A precipitao das leveduras e a formao, a baixa temperatura, de complexos de protenas e polifenis, ajudam na clarificao da cerveja (Tab.4). TABELA 4 Caractersticas dos tipos de cerveja Cerveja Pilsen Origem Republica Tcheca Export Lager Dortmunder Munchen Bock Malzbier Ale Stout Alemanha Alemanha Alemanha Alemanha Alemanha Alemanha Inglaterra Inglaterra Clara Clara Clara Escura Escura Escura Dourada Escura Mdio Mdio Mdio Mdio Alto Alto Mdio/Alto Alto Baixa Baixa Baixa/Alta Baixa Baixa Baixa Alta Geralmente baixa Porter Weissbier Ice Inglaterra Alemanha Canad Escura Clara Clara Alto Mdio Alto Alta ou Baixa Alta ----Colorao Clara Teor alcolico Mdio Fermentao Baixa

Fonte: Sindicerv, 2011.

2.5

Processos de produo da cerveja

No fluxograma abaixo, est representado uma viso geral do processo de obteno de cervejas. Embora todas as cervejas de mesma classificao so produzidas utilizando basicamente o mesmo processo, elas podem apresentar algumas variaes de marca para marca.

Recebimento e Armazenagem do Malte : O malte recebido granel a partir de

caminhes (1) e armazenado em silos (2).

Moagem do Malte : O malte enviado para os moinhos(3) que possuem como

funo promover um corte na casca e ento liberar o amido para o processo. A moagem tambm promove a diminuio do tamanho da partcula do amido, aumentando assim, ocasionando um aumento na velocidade de hidrlise do amido.

Mosturao : Aps ser modo o malte enviado at os tanques de mostura (4). O

malte modo misturado com gua e submetido a aquecimento. importante que a temperatura no ultrapasse 72C, pois em altas temperaturas as enzimas so inativadas. As enzimas contidas no malte so liberadas para o meio e sob ao de calor so ativadas para promover a hidrlise cataltica do amido.

Filtrao :A mistura obtida, tambm chamada de mostura, atravessa um sistema de

filtros (5) que tem por funo separar a casca da mistura. Na torta formada ainda existem fraes de aucares que podero ser utilizados na fermentao. Aps filtrada, a mostura passa a denominar-se mosto.

Fervura : Em seguida o mosto adicionado a um tanque (7) e recebe a adio de

lpulo (6). A mistura fervida por volta de 30min e, durante esse intervalo, ocorre a extrao e isomerizao de alguns leos essenciais extrados do lpulo.

Resfriamento : Aps o processo de fervura, o mosto acrescido de lpulo resfriado

por trocadores de calor, com o objetivo de receber a levedura (8) que ir promover a fermentao. Fermentao : Fase em que as leveduras iro consumir os acares

fermentescveis,

se reproduzir e produzir lcool e dixido de carbono alm de alguns

steres, cidos e alcois superiores que iro transmitir propriedades organolpticas cerveja. A fermentao ocorre em tanques fechados, revestidos por uma camisa externa que permite a passagem de fludo refrigerante (amnia ou etileno glicol) para manter o sistema na temperatura desejada, que pode variar de 10 a 25C de modo geral.

Maturao : Terminada a fermentao, a cerveja obtida do fermentador, tambm

chamada de cerveja verde, enviada aos tanques de maturao (10) onde mantida por perodos variveis a temperaturas de aproximadamente 0C. nessa fase que ocorre a sedimentao de partculas em suspenso e desencadeiam reaes de esterificao que iro produzir aromatizantes essenciais para cerveja. Segunda Filtrao : Nessa etapa (12), acrescido terra diatomcea (11) a cerveja

madura, com o objetivo de remover as partculas em suspenso e adsorver as substncias que conferem cor desagradvel para a cerveja.

Acabamento : Aps a segunda filtrao, a cerveja passa por uma fase de

acabamento (13) onde ir receber dixido de carbono e outras substncias que iro garantir a qualidade da cerveja e aumentar seu tempo de prateleira, como estabilizantes e antioxidantes.

Engarrafamento : Nessa etapa, a cerveja acabada (14) enviada para a

engarrafadora (16) que recebe as garrafas limpas (15) com soluo de hidrxido de sdio;

Pasteurizao : O objetivo da pasteurizao (17) eliminar alguns microorganismos

que iro prejudicar as caractersticas originais da cerveja. Costuma ser realizada a temperaturas por volta de 70C, de modo que essa seja a temperatura letal dos microorganismos em questo.

Expedio : Aps pasteurizada, a cerveja encaminhada para a fase de expedio

(18) para ser comercializada.

2.6

Melhoramento gentico e molecular das leveduras

Avanos importantes foram atingidos usando a tecnologia de DNA recombinante, essa tcnica tem como objetivo melhorar as caractersticas das leveduras cervejeiras. Estratgias de transformao tm aberto a possibilidade do uso de leveduras cervejeiras que: fermentam uma ampla variedade de acares; floculam apropriadamente e em tempos curtos da fermentao; toleram melhor o stress qumico e fsico causado pela fermentao e produz cerveja mais estvel e saborosa

Os benefcios das leveduras recombinantes na indstria so relacionados a: diminuio de custo da matria-prima; aumento na eficincia e produtividade da fermentao; melhoria na qualidade da cerveja e desenvolvimento de novas cervejas. A tabela 5 destaca algumas das melhorias no processo cervejeiro utilizando-se leveduras recombinantes.

De acordo com alguns autores as leveduras geneticamente modificadas tm sido desenvolvidas com a finalidade de manter a concentrao de diacetil em valores inferiores ao limiar de deteco sensorial, facilitar a filtrao da cerveja e produzir cervejas com baixos teores de carboidratos.

Alguns fatores impedem o uso da tecnologia do DNA recombinante, entre eles: a duvidosa e demorada aprovao do governo para seu uso; disponibilidade de solues alternativas aplicaes de patente e a preocupao pela aprovao do consumidor.

Reino Unido, uma levedura cervejeira recombinante foi aprovada para uso comercial, mas ainda tem que receber a aprovao do mercado industrial mundial. Mesmo sendo os obstculos cientficos e tcnicos superados, considera-se a aceitao do consumidor o obstculo mais desafiante.

TABELA 5 Aspectos que relacionam s aplicaes prticas e potencial da levedura cervejeira recombinante Limitaes espcie atuais da Propriedades da cepa desejveis Melhorias tecnologia recombinante Tolerncia etanol limitada ao Tolerncia mais elevada ao Transferncia do gene usando de a DNA

etanol para a fermentao acetoacetil- CoA tiolase para do mosto de alta densidade. levedura poder aumentar a tolerncia ao etanol mas este trao difcil de conferir devido a sua natureza polignica.

Limite

estreito

para Utilizao e fermentao das Conseguido

por

fermentao carboidratos

de maltodextrinas para produzir transferncia de genes da a cerveja light (de baixo teor glucoamilase da S.cereviase de carboidratos) var. diastaticus ou de Aspergillus ssp.

Suscetvel a contaminao

Propriedades antimicrobianas leveduras e (junto

Plasmdios a assassinas

de

toxinas de

(assasinas

bactrias laboratrio) transferidas pela ou eletro-

selvagens) de modo que as citoduo

cepas produtoras de cerveja transformao para cepas pudessem agir esterilizando cervejeiras. as contaminadas fermentaes floculantes Assassinas encontram-se

tambm disponveis atravs da fuso de protoplasto.

Limite de tolerncia ao Osmo-, stress Barotolerancia nveis acima

thermo-e As mudanas fisiolgicas da requererem clula causada por

daqueles nutrientes e por condies

encontrados na produo de fsicas so mais provveis cerveja acontecer do que por

tecnologia de clonagem. Nenhuma hidrolise do A degradao do -glucan Os genes da -Glucanase glucan viscoso que deriva do malte tem cevada esperada sido sucessivamente

para clonada de bactria, fungo e pra dentro da

melhorar a filtrao do mosto cevada

e eliminar a turbidez da levedura cervejeira. cerveja

Hidrolise protena

limitada

de Proteolises para melhorar o S.

cereviase

foi

mosto utilizando o nitrognio transformada para incorporar e evitando a turbidez da com sucesso uma protease. cerveja

A cerveja produzida requer Os nveis reduzidos, ou o Os longa maturao (ex. diacetil e H2S) que

genes

que

codificam

metabolismo de off-flavour enzimas da via sinttica da valina (que pode causar o

aumento de diacetil) foram so indesejados, resultando clonados de vrios num tempo reduzido de microrganismos dentro de maturao leveduras cervejeiras. A

produo reduzida do H2S tambm possvel por

transferncia de genes na sntese da cistationina.

Floculao descontrolada

Corrige a temporizao da Os genes da floculao (ex. floculao da levedura para FLO1) foram clonados na atender o processo de reproduo da levedura e apenas expressados no final da fermentao

purificao da cerveja

Sntese steres

limitada

dos Determinados

steres O gene codificado do lcool

fornecem os estabilizantes e acetil transferase (AFTI) os antioxidantes desejveis responsvel pela sntese do ao flavour ster do acetato clonado em uma espcie de S.cereviase.

Instabilidade do flavour da O aumento da produo de Os genes do sulfito redutase cerveja produzida SO2 age comoo estabilizante foram suprimidos tendo por e o antioxidante do flavour resultado os nveis S02 aumentados na cerveja.

Utilizao reprimida

da

maltose A anulao da glicose de Transferncia de genes da represso fermentao maior uso melhoraria e dos a maltose permease (MAL61)

permitiria resulta na melhoria do uso adjuntos da maltose.

baseados na glicose Fonte: Walker, 2000

3 OBJETIVOS
3.1 Objetivo geral
O presente trabalho visa apresentar as leveduras do gnero Saccharomyces responsveis, na cervejaria, pela fermentao alcolica.

3.2 Objetivos especficos

Identificar a diferena de metabolismo de cada linhagem; Identificar as diferenas entre a cerveja ale e lager; Identificar os diferentes processos de fabricao da cerveja; Compreender o processo de fermentao alcolica.

4 METODOLOGIA
A metodologia adotada para o desenvolvimento desse trabalho foi a reviso bibliogrfica de artigos cientficos encontrados em revistas, jornais e sites de carter cientifico.

5 RESULTADOS
At o presente momento foram encontradas apenas duas espcies do gnero Saccharomyces que so capazes de produzir etanol e dixido de carbono, a espcie S. uvarum (carlsbergensis) e a espcies S. cerevisiae.

CONSIDERAES FINAIS
Acredita-se que a cerveja, uma das principais bebidas alcolicas consumidas no

mundo, originou-se no Egito a 6.000 a.C pelo crescimento em estado selvagem da cevada nessa regio, desde ento a bebida vem-se aprimorando cada vez mais. Das matrias primas utilizadas para fabricao da cerveja, a gua a principal e esta deve ser potvel e observada caractersticas fsicas e qumicas, como p.H, cor, turbidez, entre outras. O cereal mais utilizado a cevada, por ser rica em amido e protena. O lpulo tambm uma matria prima importante na fabricao da bebida pois dele que vem o sabor amargo tpico da cerveja alm de contribuir com o aroma. Outras substncias como estabilizantes, antioxidantes, acidulantes tambm so utilizadas na fabricao. As leveduras utilizadas para fermentao que determinam o aroma final do produto, e a cultura dessas deve ser pura e sem contaminantes. As leveduras mais utilizadas so Saccharomyces cerevisiae e Saccharomyces uvarum. O conhecimento do metabolismo dessas leveduras no decorrer da fermentao primordial para o pesquisador cervejeiro na elaborao de estratgias de controle e aperfeioamento do processo de fabricao da bebida. O sabor do produto obtido difere de uma levedura para outra, em funo de pequenas diferenas bioqumicas e de metabolismo. Isto influencia na formao de substncias capazes de conferir aroma e sabor diferentes, caracterizando os variados tipos de cerveja. Sendo assim, pode-se concluir que o sabor e qualidade final da cerveja sero determinados pelo tipo de processo, pela levedura utilizada e pelos compostos produzidos durante a fermentao e maturao que exercem maior impacto nas caractersticas sensoriais da bebida.

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
ALMEIDA E SILVA, JB. Cerveja. In: Venturini Filho, G. W. Tecnologia de Bebidas. Edgar Blucher, Brasil, 2005, p.347-380. AMBEV. Disponvel em: <http://www.ambev.com.br/produtos/cervejas>. Acesso em 15 de agosto de 2011. ANDRIETTA, S. R.; MIGLIARI, P. C.; ANDRIETTA, M. G. S. Classificao das cepas de levedura de processos industriais de fermentao alcolica utilizando capacidade fermentativa. STAB: Acar, lcool e Subprodutos, v. 17, n. 5, p. 54-59, 1999. AQUARONE, E., et al. Alimentos e bebidas produzidos por fermentao. 4.ed. So Paulo : Edgard Blcher, 1993, 243p. ARAJO, F. B.; SILVA, P. H. A.; MINIM, V. P. R. Perfil sensorial e composio fsico qumica de cervejas provenientes de dois segmentos do mercado brasileiro. Cincias e Tecnologia de Alimentos, v.23, n.2, p. 121-128, 2003. AZEREDO, DRP. Sntese e Degradao de Glicognio e Viabilidade de Levedura Cervejeira. 1999. 103f. Dissertao (Mestrado em Engenharia Qumica) Universidade Federal do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 1999. BAKKER, B.M.; OVERKAMP, K.M; VAN MARIS, A.J.; KOTTER, P.; LUTTIK, M.A.; VANDIJKEN, J.P.; PRONK, J.T. Storchiometry and compartmentation of NADH metabolism in Sacchoromyces cerevisiae. FEMS Microbiol. Rev. v.25, p. 15-37, 2001. CARVALHO, G.B.M., ROSSI, A.A., ALMEIDA e SILVA, J.B. Elementos biotecnolgicos fundamentais no processo cervejeiro: 2. parte, A fermentao. Revista Analytica, v.26, p.46 - 54, 2007. CARVALHO, G.B.M., BENTO, C.V., ALMEIDA e SILVA, J.B. Elementos biotecnolgicos fundamentais no processo cervejeiro: 1. Parte- As leveduras. Revista Analytica, v.25, p.36 42, 2006. CARVALHO, GBM; DRAGONE, G; BENTO, CV; SANTOS, DT; SARROUH, BF; FELIPE, MGA; ALMEIDA E SILVA, JB. Utilizao da banana como adjunto na obteno de mosto cervejeiro de alta densidade: um estudo para fim biotecnolgico clssico indito. In: Congresso Mineiro de Propriedade Intelectual, Agosto 9-11, UFJF, Juiz de Fora - MG, 2006. CASEY, G. P.; MAGNUS, C. A,; INGLEDEW, W. M. Hight gravity brewing: effects of nutrition on yeast composition, fermentative ability, and alcochol production. Applied and Environmental Microbiology, Washington, DC, v.48, n.3, p. 639-646, 1984. CERVEJA ARTESANAL. Disponvel em: <http//www.cervejaartesal.com.br>. Acesso em 10 de agosto de 2011. CERVESIA. Tecnologia Cervejeira. Disponvel em: <http://www.cervesia.com.br>. Acesso em: 20/01/2011. DRAGONE, G. ALMEIDA e SILVA, J.B. In: VENTURINI FILHO, W.G. Bebidas Alcolicas: Cincias e tecnologia. V.1. So Paulo: Edgard Blcher, 2010

DRAGONE, G; SILVA, DP; ALMEIDA E SILVA, JB. Influncia da Concentrao do Mosto na Produo em Escala Piloto de Cervejas pelo Processo High Gravity. Engarrafador Moderno. p. 30-35, 2003. DRAGONE, G; SILVA, DP; ALMEIDA E SILVA, JB; LIMA, UA. Improvement of the ethanol productivity in a high gravity brewing at pilot plant scale. Biotechnology Letters, v.25, p. 1171-1174, 2003. EHRHARDT, P.; SASSEN, H. Fermentao. Vassouras: Senai DR/RJ, 1995. 37p. KUNZE, W. Techonogy, brewing and malting. Berlin: VLB, 1996. 726p. EMBRAPA. Disponvel em : <http://www.embrapa.br>. Acesso em 14 de dezembro de 2010. HARDWICK, W. A. Handbook of brewing. New York: Macel Dekker, 1994. 714p. JIN, Y.L.; SPERRS, R.A. Flocculation of Saccharomyces cerevisiae. Food Res. Intern. Ed. 31. P. 421-440. 1998. LIBKIND, D.; et al. Microbe domestication and the identification of the wild genetic stock of lager-brewing yeast. PNAS, v.108, n. 35, p. 14539-14544, 2011. LIMA, U. de A; BASSO, LC; AMORIM, HV. Produo de Etanol. In: Almeida Lima, U., Aquarone, E., Borzani, W., Schmidell, W. Biotecnologia Industrial (Processos Fermentativos e Enzimticos) v.3, p. 01-43. So Paulo: Edgar Blcher, 2001. MADRID, A., et. al. Manual de Indstrias de alimentos. 1.ed. So Paulo: Varela, 1996, 599p. MORADO, RONALDO;. Larousse da cerveja. 1.ed. So Paulo: Larousse, 2009, 357p. MUNROE, JH. Fermentation. In: HARDWICK, W.A. Handbook of Brewing. New York: Marcel Dekker, 1994. p.323-353. NAKANO, VALRIA MITIKO. Teoria da Fermentao e Maturao. In: WORKSHOP ADEGAS, 1, 2000, Braslia. Anais. Braslia: AMBEV, 2000. 96p R.REINOLD, M. Manual Prtico de Cervejaria. 1.ed. So Paulo : Aden, 1997. 213p. RUSSELL, I. Yeast In: HARDWICK, W.A. Handbook of Brewing. New York: Marcel Dekker, 1994. p.169-202. SAUDE VIDA. Disponvel em: <http://www.saudevidaonline.com.br/alcool.htm>. Acesso em: 15 de agosto de 2011. SCHINCARIOL. Disponvel em: <http://www.schincariol.com.br>. Acesso em 15 de agosto de 2011. SINDICERV. Disponvel em: <http://www.sindicerv.com.br>. Acesso em: 10 de agosto de 2011.

STEWART, G. G.; RUSSELL, I. An introduction to brewing science & technology: series III: brewers yeast. London: Institute of Brewing, 1998. 108p. TIPOS DE CERVEJAS. Disponvel em: <http://www.montana.com.br>. Acesso em: 5 janeiro de 2011. VANDERHAEGEN, B. et al. The chemistry of beer aging a critical review. Food Chem., v. 95, p. 357-381, 2006. VANDERHAEGEN, B; DELVAUX, F; DAENEN, L; VERACHTERT, H; DELVAUX, FR. Aging Characteristics of Different Beer Types. Food Chemistry, 2006. VARNAM, A.H.; SUTHERLAND, J.P. Beverages technology Chemistry and microbiology. London: Chapman &Hall. 1994, 464p. VAUGHAN-MARTINI, A.; MARTINI, A. A taxonomic key for the genus Saccharomyces. Systematic and Applied Microbiology, v. 16, n. 1, p. 113-119, 1993. VENTURINI FILHO, W. G. Tecnologia de cerveja. Jaboticabal: FUNEP, 2000. 83p. VENTURINI FILHO, WG; CEREDA, MP. Cerveja. In: Almeida lima,U., Aquarone, E., Borzani, W., Schmidell, W. Biotecnologia Industrial (Biotecnologia na produo de alimentos). So Paulo: Edgar Blucher, v.1. p. 91-144, 2001. WALKER, GM. Yeast Technology. In: Yeast Physiology and Biotechnology. Scotland:John Wiley & Sons. p. 265-320, 2000.