Boletim de Pesquisa 54 e Desenvolvimento

Uso de imagens digitalizadas em metodologias de seleo para resistncia podrido radicular de mandioca

ISSN 1809-5003 Dezembro, 2011

ISSN 1809-5003 Dezembro, 2011

Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Embrapa Mandioca e Fruticultura Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento 54

Uso de imagens digitalizadas em metodologias de seleo para resistncia podrido radicular de mandioca
Harllen Sandro Alves Silva; Saulo Alves Santos de Oliveira; Fernando Haddad

Embrapa Mandioca e Fruticultura Cruz das Almas, BA 2011

Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na: Embrapa Mandioca e Fruticultura Rua Embrapa - s/n, Caixa Postal 007 44380-000, Cruz das Almas, Ba Fone: (75) 3312-8048 Fax: (75) 3312-8097 www.cnpmf.embrapa.br Comit de Publicaes da Unidade Presidente: Aldo Vilar Trindade Vice-presidente: Ana Lcia Borges Secretria-executiva: Maria da Conceio Pereira Borba dos Santos Membro: Cludia Fortes Ferreira Edson Perito Amorim Fernando Haddad Herminio Souza Rocha Marcio Eduardo Canto Pereira Paulo Ernesto Meissner Filho Superviso editorial: Ana Lcia Borges Reviso de texto: Antnio Alberto Rocha Oliveira Normalizao bibliogrfica: Lucidalva Ribeiro Gonalves Pinheiro Tratamento de ilustraes: Anapaula Rosrio Lopes Editorao eletrnica: Anapaula Rosrio Lopes 1a edio verso (2011): online

Todos os direitos reservados A reproduo no-autorizada desta publicao, no todo ou em parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei no 9.610). Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) Embrapa Mandioca e Fruticultura
Silva, Harllen Sandro Alves. Uso de imagens digitalizadas em metodologias de seleo para resistncia podrido radicular de mandioca [recurso eletrnio] / Harllen Sandro Alves Silva, Saulo Alves Santos de Oliveira, Fernando Haddad - Dados eletrnicos. Cruz das Almas: Embrapa Mandioca e Fruticultura, 2011. - (Boletim de Pesquisa e Desenvolvimento / Embrapa Mandioca e Fruticultura , ISSN 1809-5003; 54). Sistema requerido: Adobe Acrobat Reader.Modo de acesso: World Wide Web; <http://www. cnpmf.embrapa.br/publicacoes/boletins/boletimpesquisa_54.pdf>. Ttulo da pgina web (acesso em 30/03/2012) 1. Doena de planta 2. Podrido radicular. 3. Mandioca. 4. Melhoramento gentico. I.Silva, Harllen Sandro Alves. II. Oliveira, Saulo Alves Santos de. III. Haddad, Fernando. IV. Ttulo. V. Srie. CDD 633.582 (21 ed.) Embrapa 2011

Sumrio

Resumo ......................................................................4 Abstract ......................................................................6 Introduo ...................................................................7 Material e Mtodos .....................................................13 Resultados e Discusso ...............................................14 Concluses ................................................................16 Referncias ...............................................................18

Uso de imagens digitalizadas em metodologias de seleo para resistncia podrido radicular de mandioca
Harllen Sandro Alves Silva1 Saulo Alves Santos de Oliveira1 Fernando Haddad1

Resumo
A podrido radicular uma das doenas de maior importncia na cultura da mandioca na regio Nordeste do Brasil, e pode ser atribuda a muitos patgenos, incluindo oomicetos e fungos como Fusarium sp. A busca de resistncia a essa doena sempre um dos principais objetivos dos programas de melhoramento da mandioca em todo o mundo. O objetivo deste estudo foi definir a melhor metodologia de triagem, sob condies controladas, para avaliao de gentipos de mandioca podrido radicular, causada por Fusarium sp. Dentre os mtodos descritos na literatura, trs foram selecionados: a) inoculao em discos de razes; b) inoculao em manivas e c) inoculao em raiz inteira. Foram utilizadas plantas de mandioca, com um ano de crescimento, de duas cultivares consideradas resistentes (Aramaris e Kiriris), uma suscetvel (Caravelas), e trs com nvel desconhecido de suscetibilidade (Mani Branca, Fcula Branca e Verdinha). O ensaio foi montado em delineamento experimental inteiramente casualizado, com cinco repeties, tendo o material (discos de razes, manivas e razes inteiras) sido inoculado com suspenso de esporos de Fusarium sp. ajustada para 2x105 condios . mL-1. Diferenas no nvel de doena foram quantificadas pela medida da rea lesionada, por meio de anlise de imagem digital. Todos os resultados foram submetidos anlise
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Pesquisador da Embrapa Mandioca e Fruticultura. E-mail: harllen@cnpmf.embrapa.br; saulo@cnpmf.embrapa.br; fernando@cnpmf.embrapa.br

de varincia. Os melhores resultados neste estudo foram obtidos pelo mtodo da raiz inteira, avaliado aos 10 dias aps a inoculao. Esta metodologia pode ser usada como ferramenta preliminar em programas de seleo de gentipos visando a resistncia podrido radicular de Fusarium sp. Palavras-chave: Fusarium sp.; Resistncia de Plantas; Manihot esculenta

Use of digital images in screening methologies for resistance to rot root cassava

Abstract
The root rot complex is one of the most hazardous diseases of cassava in the Brazilian Northeast region, and can be attributed to many pathogens, including oomycetes and fungus as Fusarium sp. The search for resistance to this disease is the main objective of the cassava development programs worldwide. The aim of this study was to define the best screening methodology for evaluation of cassava genotypes to root rot (CRR), caused by Fusarium sp., under controlled conditions. Among the methods described in the literature, three were selected: (i) inoculation of cassava root slice, (i) inoculation of stem cuttings and (iii) inoculation in the whole root. One year cassava plant parts of two cultivars considered resistant (Aramaris and Kiriris), one susceptible (Caravelas), and three with unknown level of susceptibility (Mani Branca, Fcula Branca e Verdinha) were used in assay. The experiment was arranged in a completely randomized experimental design, with five replicates, and three pieces (root slice, stem cuttings and whole root) for each replicate, inoculated with spore suspension of Fusarium sp. adjusted to 2x105 macroconidia . mL-1. Disease level differences were accessed by measurement of lesion area by digital image analysis. All dates were subjected to variance analysis. The best results in this study were obtained trough of the whole root method evaluated 10 days after inoculation. This methodology will be used for the screening of 1291 cassava access present on the germplasm bank of the CNPMF. Key words: Fusarium sp.; Plant Resistance; Manihot esculenta

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Introduo
A mandioca, Manihot esculenta Crantz, uma cultura amplamente cultivada em reas tropicais e subtropicais, de alta importncia social, considerada como principal fonte de carboidratos para mais de 700 milhes de pessoas. Adicionalmente, tem havido um crescente interesse do setor industrial devido ao emprego do amido em vrios processos e uso na alimentao animal. Esse fato, juntamente com o aumento da demanda mundial de alimentos, tem contribudo para a expanso de reas de cultivo de mandioca em todo o mundo. A rea cultivada com mandioca no mundo de, aproximadamente, 18,7 milhes de hectares. Atualmente, o Brasil, com uma produo de 26,52 milhes de toneladas de razes, obtida em uma rea de cerca de 1,89 milho de hectares, o que corresponde a 12,37% da produo mundial e 10,20% da rea, respectivamente, o terceiro produtor mundial de mandioca (M. esculenta), sendo superado apenas pela Nigria e Tailndia (FAOSTAT, 2009). A mandioca cultivada em todo o territrio nacional e a regio Nordeste apresenta-se como a responsvel por aproximadamente 50% da rea plantada e quase 40% de toda a produo brasileira, sendo a Bahia o maior estado produtor da regio, que em 2009 foi estimada em 3,4 milhes de toneladas de razes em rea plantada de 271,6 mil hectares, com produtividade mdia de 13,8 t ha-1. A seguir vem a regio Norte, onde se destaca o estado do Par no tocante quantidade da produo de razes. Porm, os estados de So Paulo, Paran e Mato Grosso do Sul detm as maiores produtividades, com mdia de 20 toneladas de razes/ha (IBGE, 2011). Apesar de tanto no Brasil quanto em outras partes do mundo ocorrer atualmente um aumento no interesse de grandes empresrios no cultivo da mandioca com a finalidade de produzir amido e, aventando-se a possibilidade do etanol, ainda uma espcie cultivada principalmente por agricultores familiares, na maioria das vezes como produto de

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subsistncia. Nesta questo, o alimento bsico de quase um bilho de pessoas em 105 pases, proporcionando at um tero das calorias dirias. De acordo com dados da FAO (Organizao das Naes Unidas para a Agricultura e Alimentao), a mandioca tem forte presena na frica Tropical, sia e Amrica Latina e o quarto cultivo mundial mais importante nos pases em desenvolvimento, com uma produo estimada em 226 milhes de toneladas em 2006. Alm disso, tem um enorme potencial, j que atualmente o rendimento mdio da mandioca de apenas 20% do que pode ser obtido em condies timas. O ciclo de produo da mandioca dura cerca de 6 a 36 meses, dependendo da variedade. Comercialmente, a cultura cultivada durante o perodo de 12 a 18 meses. Para a mandioca de mesa, a colheita ocorre com 8 a 10 meses. A faixa de temperatura ideal para o cultivo situa-se entre 20C e 27C (mdia anual), podendo a planta crescer bem entre 16C e 38C. A faixa mais adequada de precipitao pluviomtrica est compreendida entre 1.000 a 1.500 mm/ano. Porm, a mandioca produz em locais com ndices de at 4.000 mm/ano e tambm em regies semiridas, com 500 a 700 mm/ano (FUKUDA et al., 2006). A caracterstica da planta de mandioca de acumular amido em suas razes tuberosas lhe confere a capacidade de tolerar a seca e lhe d uma grande flexibilidade quanto poca de colheita. Por um lado, isso permite aos agricultores colher quando os preos so mais compensadores, e por outro, estocar alimento para si e para os seus animais nas pocas mais difceis, como os perodos de seca no Nordeste e de geadas, no Sul do Brasil. Outra caracterstica que, apesar de ser uma planta que extrai grandes quantidades de nutrientes, tambm tem a capacidade de produzir em solos pobres em nutrientes, o que permite que seja cultivada em condies nas quais poucas espcies de importncia econmica conseguem produzir. Essas caractersticas tornam a mandioca uma espcie da maior importncia para a sobrevivncia, tanto das populaes humanas quanto dos seus animais, principalmente

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nas regies semiridas, frequentemente reas de baixos recursos financeiros (BANDYOPADHYAY et al., 2006). Devido s caractersticas da planta, as atividades do plantio ao processamento ainda so realizadas manualmente, e desse modo, uma cultura que emprega muita mo de obra. Considerando-se a fase de produo primria e o processamento de farinha e fcula, estima-se que so gerados, no Brasil, um milho de empregos diretos. A produo de mandioca que transformada em farinha e fcula gera, respectivamente, uma receita equivalente a 600 milhes e 150 milhes de dlares, respectivamente (MATOS; CARDOSO, 2003). Embora a mandioca seja uma planta rstica, sua produo por vezes dificultada por muitos fatores, dentre os mais srios as doenas foliares e radiculares como bacteriose (Xanthomonas axonopodis pv. manihotis), superbrotamento (Sphaceloma manihoticola), ferrugem (Uromyces spp.), antracnose (Colletotrichum gloesporioides f. sp. manihotis) e podrido das razes (complexo Phytophthora spp. e Fusarium spp.), vrus do mosaico comum (Cassava common mosaic virus, CsCMV) e vrus do mosaico das nervuras (Cassava vein mosaic virus, CsVMV), alm do complexo envolvendo vrus e fitoplasma associados ao couro-de-sapo (Cassava Frogskin disease, CFSD). A infeco por patgenos fngicos, bacterianos e virticos pode causar perdas significativas na produo de razes, caso sua ocorrncia no seja devidamente constatada e medidas efetivas de controle no sejam implementadas (MASSOLA et al., 2005). A podrido radicular da mandioca causada por um complexo de patgenos de solo, com destaque para Phytophthora spp. e Fusarium spp., dentre mais de 20 j relatados. Geralmente se observa o seu aparecimento em reas com compactao do solo e com m drenagem e estima-se que a doena ocasione uma reduo mdia de 30% na produtividade. Todavia, as perdas podem ser totais, sobretudo onde no se adotam prticas culturais que previnam a doena e so usadas variedades suscetveis.

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A ocorrncia de Phytophthora spp. mais acentuada em plantios de mandioca em reas sujeitas a encharcamento, com textura argilosa e de pH ligeiramente alcalino. J Fusarium spp. est relacionado a solos cidos e adensados. Os sintomas so mais frequentes em razes maduras. Entretanto, existem casos de manifestao de sintomas na base das hastes jovens ou em plantas recm-germinadas, causando murcha e morte total. Os sintomas causados por Phytophthora spp. aparecem na fase adulta da cultura, causando podrides moles nas razes. No caso de Fusarium spp., os sintomas podem ocorrer em qualquer fase do desenvolvimento da planta. O fungo frequentemente ataca o colo da planta, junto ao solo, colonizando os tecidos vasculares e provocando necrose dos vasos, murcha e podrido direta ou indireta das razes. Sintomas de Fusarium spp. nas razes de mandioca so comumente descritos como uma podrido seca. Os sintomas de outros agentes causais no esto bem descritos, e precisam ser melhor estudados. Sabe-se, no entanto, que podem se apresentar como forma de podrido seca, mida ou nas duas formas. As medidas de controle da podrido radicular envolvem necessariamente a integrao do uso de variedades resistentes, prticas culturais, manejo do solo e sistemas de cultivo, entre outras. Com relao s prticas culturais, recomenda-se utilizar manivas sadias para o plantio, estabelecer os plantios em reas com drenagem adequada, rotao de culturas com gramneas, e evitar danos s razes durante as capinas. O manejo do solo envolve fundamentalmente prticas que facilitem a drenagem, adio de matria orgnica e correo do pH com o uso adequado de calcrio. O sistema de cultivo pode ser alterado pelo plantio em camalho. Esse conjunto de medidas, quando combinado na estratgia de manejo integrado, tem resultado na diminuio da podrido radicular em at 60%. Independentemente da doena que afeta a mandioca no Brasil, a medida de controle mais adequada o uso de cultivares resistentes. Em funo da disponibilidade de um nmero considervel de acessos existentes nas colees do BAG-Mandioca da Embrapa Mandioca e Fruticultura,

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a busca por fontes de resistncia a doenas e pragas tambm pode ser feita por meio da anlise do germoplasma proveniente de espcies silvestres. A variabilidade gentica dessas plantas e a seleo de gentipos superiores, por meio da utilizao de tcnicas eficientes de avaliao, podem identificar fontes de resistncia. de fundamental importncia, portanto, que se realize a caracterizao e se avaliem os acessos que compem a coleo (M. esculenta e Manihot sp. e hbridos interespecficos) visando conhecer as potencialidades dos mesmos no tocante resistncia s podrides radiculares. Um dos aspectos mais importantes a se considerar, num programa de melhoramento visando resistncia a doenas, a escolha de um mtodo adequado para selecionar os gentipos. Geralmente, a identificao de acessos resistentes baseada na expresso fenotpica dos sintomas das doenas pela planta infectada, no campo. Embora, muitas vezes eficaz, esse mtodo apresenta alguns problemas para estudos com podrides radiculares. Inicialmente, os danos causados s razes s podem ser mensurados aps a colheita das mesmas, envolvendo a uma etapa a mais no processo de seleo. Adicionalmente, a seleo baseada em sintomas de podrido radicular na parte area das plantas pode gerar dvidas devido a semelhanas com sintomas de outras doenas; isso acontece especialmente quando espcies de Fusarium so os agentes causais. Ainda, a no uniformidade do inculo no campo pode gerar a falsa impresso de gentipo resistente. Alm de requerer a disponibilidade de reas, o ensaio em campo no permite separar pequenas diferenas na reao dos acessos ao patgeno, baseando a seleo em resistncia qualitativa. Para se dirimirem problemas com uso de reas em campo e tornar possvel a seleo de acessos com variveis graus de resistncia podrido radicular, vrias metodologias para uso em laboratrio tm sido propostas e estudadas. Dentre elas, a inoculao de partes da planta como as razes, manivas ou ramos (LOPEZ; LOZANO, 1992). O mtodo consiste em basicamente inocular discos de razes, raiz inteira ou manivas com discos de miclio ou suspenso de condios. Aps

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determinado perodo de tempo, as leses so medidas com auxlio de paqumetro, estimada a rea lesionada e os resultados comparados. A quantificao de leses por esse mtodo pode resultar em valores aproximados, que no refletem a real dimenso do tecido danificado. O mtodo comumente empregado a medio do dimetro da leso em dois sentidos perpendiculares, seguida de clculo da rea lesionada com base nesses dimetros. Quando as leses so simtricas, esse tipo de estimativa consegue representar muito bem a rea lesionada real. Entretanto, no caso das inoculaes com Fusarium sp. em razes e hastes de mandioca, as leses apresentam aspectos assimtricos, fato que exigiria diferentes abordagens para a estimativa da rea afetada. Uma das formas de contornar as dificuldades de mensurao direta da severidade de doenas a utilizao de softwares de anlises de imagens digitais, reduzindo assim o risco de erro. Esse tipo de avaliao sofre uma menor influncia de fatores como avaliador, formato das leses e formato do tecido afetado. A utilizao de anlise de imagem para a quantificao da severidade de doenas de plantas uma ferramenta muito mais antiga do que se imagina, com relatos de utilizao desde o incio da dcada de 1920, e aplicada a diversos patossistemas. Com o avano das ferramentas digitais (incluindo as fotografias digitais e softwares de anlises), foram realizados diversos estudos mostrando a aplicao de anlises de imagem para quantificar a severidade de doenas, em screening por resistncia. Pode-se citar Newton, na dcada de 1980, como um dos pioneiros do assunto, na tentativa de discriminar gentipos pertencentes ao germoplasma de cevada, quanto resistncia a Erisyphe graminis (odio) (BOCK et al., 2010). A proposta desse trabalho foi de validar tcnicas de inoculao de Fusarium sp. em partes vegetais, quantificando a rea lesionada do tecido por meio de anlises de fotografias digitais do material, a fim de identificar, dentre as metodologias, a que permitisse a separao de diferentes acessos de mandioca em funo do seu nvel de resistncia podrido radicular, para suporte ao programa de melhoramento de mandioca da Embrapa Mandioca e Fruticultura.

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Material e Mtodos
Seis variedades de mandioca foram empregadas nos ensaios: Caravelas (suscetvel); BRS Kiriris e BRS Aramaris (resistentes); Verdinha, Fcula Branca e Mani Branca (cultivares em teste). Inocularam-se segmentos de hastes, discos de razes e raiz inteira de todas as variedades com Fusarium sp. na concentrao de 2 x 105 condios.mL-1. Segmentos de hastes de mandioca de 20 cm foram dispostos em Beckers, inoculados com 20 L de suspenso de esporos do patgeno (Fig. 1A), e colocados em cmara mida. A avaliao da capacidade invasiva do patgeno foi estimada por corte longitudinal dos segmentos de haste, para mensurao do tamanho de tecido afetado a partir do ponto de inoculao. Efetuou-se o clculo do percentual de tecido afetado. Os discos de razes com 10 mm de espessura foram retirados da parte central de razes mdias de mandioca (4-6 cm de dimetro) e desinfestadas em soluo de hipoclorito. A seguir, os discos foram colocados em placas de Petri esterilizadas, contendo algodo umedecido. Os discos foram inoculados com 20 L de suspenso de esporos de Fusarium sp. (Fig. 1B). Aps quatro dias de crescimento a 26C, o tecido foi fotografado com cmera digital e a rea lesionada mensurada com o auxilio do software ImageTool v.3.0 (UTHSCSA, University of Texas Health Science Center, San Antonio). Razes inteiras de mandioca, com dimetro aproximado de 4-6 cm, oriundas de plantas de 10 a 12 meses de idade, foram lavadas e desinfestadas em soluo de hipoclorito, e postas para secar sobre papel de filtro esterilizado. As inoculaes foram realizadas com e sem a presena de ferimentos nas razes. Para as inoculaes com ferimentos, furos de 3-4 mm de profundidades foram feitos na regio central das razes, com um furador metlico de 2 mm de dimetro. As razes foram inoculadas no ponto de perfurao com 20 L de suspenso de esporos (Fig. 1C). J nas inoculaes sem ferimentos, apenas a desinfestao superficial foi realizada, e a suspenso de esporos foi depositada sobre

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a epiderme das razes. As razes permaneceram em cmara mida a 26C por 10 dias. As razes foram cortadas longitudinalmente e avaliadas quanto ao volume total colonizado pelo patgeno, por meio de fotografia digital e anlises de imagens com o software ImageTool. Todos os experimentos foram conduzidos em delineamento inteiramente casualizado (DIC) com cinco repeties, sendo a testemunha absoluta a inoculao apenas com gua. Foram avaliadas as reas lesionadas da entrecasca (crtex) e polpa, sendo estas utilizadas nas anlises estatsticas para a separao entre os acessos, com base no nvel de resistncia e clculo do volume de colonizao. Os resultados das reas lesionadas e do volume de colonizao foram comparados pelos testes: Skott-Knott, e anlise de agrupamento com base na distncia de Mahalanobis. Os resultados foram submetidos anlise de varincia.

Resultados e Discusso
As inoculaes em discos de razes e em segmentos de hastes (manivas), no apresentaram uma boa repetibilidade de resultados e falta de uniformidade, no sendo indicadas para as avaliaes e busca por fonte de resistncia podrido radicular da mandioca, incitada por Fusarium sp. Dentre os mtodos avaliados neste trabalho, a inoculao em razes inteiras, com ferimento, foi a que melhor permitiu a diferenciao entre os acessos avaliados quanto ao nvel de resistncia (Fig. 2). Alm disso, a avaliao via anlise digital das imagens mostrou-se uma ferramenta muito precisa e de fcil utilizao, alm de uma maior confiabilidade em funo do armazenamento das informaes e possibilidade de verificaes de erro nas avaliaes. A anlise da rea lesionada e do volume de colonizao, obtidos a partir da inoculao de razes inteiras com perfurao, permitiu uma separao muito clara dos diferentes nveis de resistncia dos seis gentipos avaliados (Fig. 3). Entretanto, alguns resultados discordantes da informao inicial sobre o nvel de

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resistncia de cada um dos gentipos foram obtidos, como o comportamento da cultivar Caravelas, tida como suscetvel, e que nas inoculaes com razes inteiras se mostrou resistente, enquanto a cultivar BRS Aramaris tida como resistente, mostrou-se suscetvel nos ensaios realizados. Resultados semelhantes foram obtidos por Onyeka et al. (2005), realizando trabalho semelhante, porm avaliando-se os resultados por mensuraes convencionais. Esta discrepncia nos resultados pode estar relacionada s diferenas nas condies em que foram conduzidas as inoculaes e estratgia utilizada para a caracterizao destas cultivares pelo programa de melhoramento. Estes acessos foram selecionados em condies de campo, onde a influncia das caractersticas edafoclimticas das regies, bem como das populaes de patgenos e antagonistas presentes no solo, podem ter contribudo para a expresso diferenciada da resistncia podrido radicular. Alm disso, a ausncia de conhecimento sobre a distribuio e prevalncia das principais espcies causadoras de podrido radicular nas regies produtoras da mandioca, pode inserir artefatos na seleo exclusivamente em campo, uma vez que outras espcies de patgeno, que no as do gnero Fusarium, podem estar presentes. Com relao inoculao em laboratrio, Dhingra e Sinclair (1986) reportam que a anlise de resultados deve ser criteriosa, j que a resistncia de diferentes rgos das plantas ao patgeno pode variar. H que se considerar a alta presso de inculo em ensaios com rgos de plantas, que, em se tratando de seleo de gentipos, algo at certo ponto desejado. Diferentemente, a seleo em campo pode permitir escapes exatamente pela possibilidade de uma baixa presso da doena. Segundo Mahungu et al. (1994), gentipos selecionados sob a incidncia de altos nveis de doena consequentemente apresentaro nveis de resistncia e/ou tolerncia diferenciados, sob variadas condies de estresse. Em linhas gerais, o mtodo de inoculao em razes inteiras e anlise por fotografia digital so ferramentas de grande utilidade para

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programas de melhoramento da mandioca, requerendo pouco espao, quantidade de razes e inculo, possibilitando seu emprego como uma avaliao preliminar do material em teste, mesmo em grande escala.

Concluso
O mtodo de inoculao de razes inteiras, seguido de anlise digital das imagens para quantificao da rea lesionada, pode ser usado, em programas de melhoramento de mandioca, para a separao em diferentes nveis de resistncia podrido radicular causada por Fusarium sp.. H que se realizarem estudos correlacionando os nveis de resistncia obtidos por inoculaes em condies controladas com os encontrados em condies de campo.
Fotos: Jos Raimundo Ferreira Filho e Harllen Sandro Alves Silva

Fusarium sp. (2x105 con . mL-1) (20 mL)

Fusarium sp. (2x105 con . mL-1) (20 mL)

Manivas (20 cm)

1. Inoculao em segmentos de hastes

2. Inoculao em discos de razes

Raiz com ferimento

Fusarium sp. (2x105 con . mL-1) (20 mL)

Raiz sem ferimento

3. Inoculao em razes

Figura 1. Mtodos de inoculao de partes vegetativas de mandioca.

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Kiriris

Caravela

Mani branca

Aramaris

Verdinha

Fcula branca

Figura 2. rea lesionada em razes inteiras de mandioca inoculadas com Fusarium sp.

3.000

Distncia de Fuso

2.000

1.000

Resistente

Suscetvel

Figura 3. Agrupamento dos gentipos com base na distncia de Mahalanobis do volume da colonizao das razes inteiras.

Fcula branca

Caravela

Aramaris

Mani branca

Kiriris

Verdinha

Fotos: Saulo Alves Santos de Oliveira

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Referncias
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