Determinacin de antgeno Du Objetivo: El alumno investigara la presencia de variante Du que es una expresin dbil o incompleta de un factor del Rho,

pero con capacidad antignica.

Introduccin: El Du, es un alelo de D, muy importante pero irregular. No existe suero anti-Du especfico. Algunas sangres Du deben esta caracterstica al hecho de que el factor D normal heredado, de uno de los padres, est enmascarado por el factor C de un cromosoma aparejado dCe (r) heredado de otro progenit or: este tipo se conoce como Du por interaccin gentica. El otro tipo Du hereditario puede atribuirse a transmisin de un D debilitado.

Los glbulos de algunos sujetos Du pueden ser aglutinados directamente por casi todos los sueros anti D, es tos casos se denominanDu de titulo elevado. Otras sangres Du son aglutinados solamente por unos cuantos sueros anti D; son los Du de ttulo bajo. Lo importante respecto a los glbulos Du, especialmente la variedad titulo bajo, es que probablemente parecern Rho. Negativos al ser mezclados con anti D. Solamente podrn reconocerse mediante:

1) Modificacin enzimtica previa, o sea, ficnizacin 2) Exposicin previa al suero anti D incompleto y luego prueba de Coombs. Los glbulos Du dan una prueba de Coombs positiva en estas circunstancias. Se recomienda el segundo mtodo.

Otra consideracin todava ms importante respecto al Du, es que todos los que poseen el alelo Du deben considerarse como donadores Rho. Negativos. Esto se debe a que el Du puede producir anti D en un sujeto Rho. Positivos, pero receptores Rho. Negativos. Esto se debe a que el Du puede producir anti D en un sujeto Rho. Negativo, y tambin a que algunos Du producen ellos mismos anti D. Adems los sujetos Du por accin intergentica no deben recibir sangre que contenga el antgeno c, muy potente, en otras palabras, debe recibir sangre del genotipo Dce/dCe o DuCe/dCe esta ltima generalmente corresponde a su propio genotipo. Fundamento: Ciertos eritrocitos Rho.+, alrededor del 1% con mayor frecuencia en la raza negra que en la caucsica, no son aglutinados por el suero anti Rho. (anti D) pero despu s de ser expuesto a los anticuerpos Rho. (D), darn una reaccin positiva si se tata con suero de Coombs. Generalidades: Los hematies del grupo D presentan diferencias en cuanto a su reactividad; se acepta que varios de los factores del sistema Rho. en ocasiones se expresan en forma dbil o incompleta los ms importantes son: el Du, el Cw y el Eu en realidad solo el Du tiene importancia en el banco de sangre debe sospecharse de ser Du, las sangres que son difciles de clasificar como Rh positivos o negativos, utilizando solo el suero anti-D El paciente Du positivo debe recibir sangre Du negativa ya que se han reportado casos que por recibir sangre Rho. positiva desarrollan anticuerpos Anti Rho. de especificidad Anti-D, elfactor Du de Stratton, como es dbil no es fcil determinarlo, pero conserva su capacidad antignica. Para investigar este grupo, la tcnica de aglutinacin con el suero Anti-D ha dado resultados dbiles, sin embargo ha servido para que los Anticuerpos se fijen y la prueba de Coombs indirecta nos dar el resultado positivo; observando macroscpicamente el fenmeno de aglutinacin: el Antigeno Du se determina por la aglutinacin de los glbulos rojos en presencia del suero Anti-D y Antiglobulina Humana

Material y equipo

1 gradilla 4 tubos 10 x 75 2 pipetas pasteur con bulbo 1 Centrifuga Sarofuge 1 bao maria a 370c Suero Anti-D Suero de Coombs Albmina bovina al 22% Solucin salina en pizeta

Mtodo en tubo:

1. Preparar glbulos Rho. negativos al 5% 2. Marcar dos tubos No 1 problema y No 2 control, agregar en cada tubo dos gotas de la suspensin de glbulos rojos. 3. Al tubo No 1 agregar una gota de suero Anti-D y una gota de Albmina bovina al 22%, al tubo No 2 dos gotas albmina bovina al 22% 4. Mezclar y dejar reposar durante dos minutos 5. Centrifugar en busca de aglutinacin 6. Lavar por tres ocasiones 7. Despues del ltimo lavado, decantar completamente y agregar dos gotas de Antiglobulina humana a cada tubo 8. Incubar durante 15 minutos a 37 C 9. Centrifugar a 3,500 rpm x 1 minuto 10.Leer sobrenadante y despegar el boton del fondo del tubo cuidadosamente en busca de aglutinacin 11.Reportar por escrito

Interpretacin de resultados

En el tubo control no debe encontrarse aglutinacin. Si el tubo problema se observa con aglutinacin se habla de la presencia del factor Du. Si hubiese aglutinacin enlos dos tubos signifia que se trata de glbulos rojos cubiertos o bloqueados, por lo tanto si se trata de donador la sangre ser desechada