UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA FACULTAD DE ZOOTECNIA ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA VETERINARIA

ASIGNATURA

: Sanidad de caninos y felinos

DOCENTE

: M.V. Isabel Choquehuanca

ALUMNOS

: Mara Teresa Aparicio Zapata Arnold Requena Martens Jaime Pizarro Bruno

TEMA

: Citologa vaginal

F. DE ENTREGA

17 de octubre del 2013

CITOLOGA VAGINAL

INTRODUCCION

La citologa vaginal es una herramienta diagnostica de la cual se afianza el profesional mdico veterinario en este caso para ver en qu etapa del ciclo estral se encuentra una perrita y poder determinar de esta manera cuando es que posiblemente este ovulando ya que en algunas oportunidades este proceso pasa desapercibido y la perra no queda preada. La citologa nos orienta para saber cundo es que se debe actuar en una inseminacin o en caso contrario cuando es que la perra no debe ser cubierta para que no quede preada. Con este fin y continuando con las practicas se ha desarrollado esta prctica para aprender cmo se realiza el proceso y determinar en base a la microscopia en que estadio del ciclo estral se encuentra el animal prueba.

OBJETIVOS

Conocer la toma de muestra, preparacin e interpretacin de los frotis vaginales para la adecuada utilizacin en los programas de reproduccin

CITOLOGA VAGINAL INTRODUCCIN AL CICLO ESTRAL CANINO Hormonas Sexuales La adenohipfisis produce tres hormonas de importancia en la reproduccin de la hembra: FSH (Hormona Foliculoestimulante), LH (Hormona Luteinizante) y PRL (Prolactina). La funcin principal de la FSH es estimular el crecimiento de los folculos estrales. LH es necesaria para el proceso ovulatorio y para la luteinizacin de la granulosa, lo que resulta en la formacin del cuerpo lteo (estas dos hormonas son sinrgicas). La PRL es responsable del desarrollo del tejido secretor de la glndula mamaria y del mantenimiento de la lactacin. Esta hormona en la perra tiene accin luteotrfica. La liberacin de FSH y LH est controlada por GnRH (Hormona liberadora de Gonadotrofinas) y existen 2 formas de influenciar la secrecin de gonadotropinas. Una es variar la frecuencia o amplitud de los pulsos de liberacin de GnRH ya que se ha demostrado que la liberacin pulstil de la misma es esencial para mantener la secrecin de LH y FSH por la adenohipfisis. Otra es modificar la sensibilidad de la adenohipfisis a los pulsos de GnRH por medio de los efectos moduladores de los

estrgenos

y progesterona. El incremento de las concentraciones de

estrgeno aumenta la sensibilidad a la GnRH y aumenta la liberacin de gonadotrofinas. La progesterona posee un efecto opuesto. El 17 b-estradiol causa un efecto de retroalimentacin positiva con la consiguiente liberacin concentraciones contraposicin, de de una oleada de gonadotropinas en respuesta a estrgenos que aumentan gradualmente. En

la retroalimentacin negativa requiere la exposicin a

concentraciones de estrgenos basales o mnimas y de corta duracin. La FSH controla la sntesis estrognica de los folculos ovricos y acta sobre las clulas de la granulosa.

La LH tambin acta sobre la sntesis de estrgenos, ya que controla la produccin de la molcula precursora esencial (testosterona) por las clulas de la Teca Interna. Las acciones de los Estrgenos son: Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales (necesario para el mantenimiento del cigoto antes de la implantacin). Estimular el crecimiento de los conductos de la glndula mamaria. Causar actividad secretoria en el oviducto (para favorecer la

supervivencia del vulo y del espermatozoide) Regular la secrecin de gonadotropinas. Detener el crecimiento de los huesos largos al iniciar el cierre de la placa epifisaria de crecimiento. Favorecer el metabolismo proteico.

Las acciones de la Progesterona son: Estimular el crecimiento de las glndulas endometriales. Estimular el crecimiento lbulo-alveolar de la glndula mamaria. Estimular la actividad secretora del oviducto y de las glndulas endometriales. Estimular la conducta de estro en algunas especies (oveja y perra) en coordinacin con los estrgenos. Prevenir la contractibilidad del tero durante la gestacin. Regular la secrecin de gonadotropinas.

Ciclo Estral de la Perra La perra es monostrica estacional con escasa o nula estacionalidad. Luego de la ocurrencia del ciclo estral se produce un perodo de anestro de duracin variable, lo que da como resultado un intervalo entre los ciclos que puede oscilar entre 5 y 12 meses. El periodo de proestro y comportamiento de estro es variable, de 3 a 20 das, y el inicio del comportamiento de estro puede ser tan temprano como 5 das antes de la ovulacin o tan tardo como 3 das despus. La ovulacin ocurre 2 das despus del pico de LH. La hembra canina, a diferencia de otras especies, ovula ovocitos primarios que tardan 2 o 3 das en madurar en el oviducto, momento en el cual podrn ser fecundados, es decir, aproximadamente 4 das despus del pico preovulatorio de LH. En la perra la pubertad puede reconocerse por el comienzo del primer proestro. El inicio de la pubertad se correlaciona con el momento en que la perra alcanza la talla de adulto. Por lo tanto, puede ocurrir entre los 6 y 10 meses en las perras de talla pequea, mientras que en las de talla grande puede demorarse hasta aproximadamente los dos aos. La madurez sexual o mxima capacidad reproductiva puede no ser alcanzada hasta el segundo, tercer o cuarto celo. Es probable que las perras pberes demuestren menos su comportamiento de estro durante la ovulacin y en ellas, la duracin del proestro y estro sea menor. Generalmente mostrarn celos silentes, durante los cuales ocurrir ovulacin pero en ausencia de comportamiento o signos clnicos notables de proestro-estro. El ciclo reproductivo de la perra incluye 4 estadios: proestro, estro, diestro anestro. La duracin del intervalo interestral es variable, pudiendo oscilar

entre 4 a 10 meses con un promedio de 7 meses. Si bien las hembras de talla pequea tienden a tener ms ciclos estrales por ao que las de talla grande, esto no siempre ocurre, ya que el Ovejero Alemn tiene ms ciclos estrales por ao que el Boston Terrier. Los intervalos interestrales ms frecuentes que 4 meses se asocian con infertilidad y los que demoran ms de

11 meses con subfertilidad. Las excepciones son las razas caninas africanas como el Basenji que ciclan una vez por ao. La heredabilidad del intervalo interestral ha sido estimada en un 35%.

A. Proestro Estadio en el que son fcilmente reconocibles cambios externos (vulva edematosa y turgente, con descarga serosanguinolenta de origen uterino). Se extiende desde la primera observacin de sangrado hasta que la perra acepta al macho. La duracin promedio es de 9 das con un rango de 0 a 27 das. La perra usualmente atrae al macho pero no est receptiva, de manera que no permite el servicio. Este patrn de conducta cambia gradualmente a medida que avanza el proestro y la perra se torna ms pasiva en su resistencia a la aproximacin del macho. El proestro, en general, est asociado a cantidades variables de

secrecin vaginal sanguinolenta que proviene del tero. Esta hemorragia es el resultado de la diapdesis endometrio. A medida que avanza el proestro, la vulva se agranda, esto asociado al edema y tumefaccin de los labios vulgares. En el proestro tardo la vulva estar hinchada y turgente para luego ablandarse de manera notable en el estro. Ya hacia el final del proestro, pueden ser observados 3 reflejos sexuales: 1) inclinacin hacia arriba o guie de la vulva expuesta a la friccin de la piel inmediatamente dorsal a la vulva. 2) curvatura ipsilateral de los miembros posteriores en respuesta a golpes suaves en la piel a la derecha o izquierda de la vulva. 3) desviacin contralateral o vertical de la cola en respuesta a golpes suaves en la piel a cada lado de la vulva. Este estadio se encuentra bajo influencia de los estrgenos, el cual es sintetizado y secretado por los folculos ovricos en desarrollo. El pico de estrogenemia se produce 24 a 48 hs. antes de que ocurra la aceptacin y ruptura capilar subepitelial dentro del

del macho y comience la declinacin de las concentraciones de esta hormona. Las concentraciones de progesterona son bajas durante todo el proestro, salvo en las ultimas 12 a 48 hs. El final del proestro y el comienzo del estro estn caracterizados por progesteronemias. Este incremento de la

progesterona srica est relacionado con la luteinizacin preovulatoria de los folculos. Las concentraciones de gonadotropinas aumentan en el proestro

temprano para luego retornar a niveles basales hasta la prxima onda en el comienzo del estro. Las concentraciones de FSH disminuyen durante el proestro, probablemente en relacin a la retroalimentacin negativa producida por Inhibina. VAGINOSCOPA: mucosa edematosa y gruesa, de color rosa plido, con pliegues redondeados y de borde liso que llenan la luz vaginal. El fluido uterino es claro y de color rojo brillante. A medida que avanza el proestro los pliegues se tornan mas turgentes e hipermicos.

B. Estro Se caracteriza por la receptividad de la hembra y la aparicin de reflejos servicio. La vulva contina aumentada de tamao pero el edema disminuye, siendo entonces ms flcida. La descarga vulvar disminuye y contiene menos sangre que en el proestro. La secrecin vaginal contiene glucosa, debido a las crecientes posturales s especficos. Finaliza cuando sta ya no acepta el

progesteronemias que promueven intolerancia a los carbohidratos mediante la estimulacin de la GH (Hormona de Crecimiento) inducida por la Progesterona. El estro est asociado a una continua declinacin de la estrogenemia. La perra comienza a ser receptiva cuando la concentracin srica de estradiol cae y la de progesterona aumenta.

La disminucin de la estrogenemia es un reflejo del proceso madurativo final de los folculos. La declinacin de las concentraciones sricas de

estradiol, precede al pico de LH que ocurre el da 0 del ciclo y antecede a la ovulacin. La combinacin de progesteronemias crecientes y estrogenemias declinantes estimula por un lado el cambio en la conducta de la hembra que se vuelve receptiva y por otro ejerce una retroalimentacin positiva que redunda en una onda secretoria de FSH y LH cuando comienza la aceptacin del macho. La onda de LH es seguida por el inicio de la ovulacin 24 a 48 hs. ms tarde, para luego producirse la formacin del cuerpo lteo. Luego de permanecen la onda de LH, bajas. las concentraciones de esta hormona

La ovulacin ocurre aproximadamente 2 o 3 das

despus de que ocurre la onda preovulatoria de LH. VAGINOSCOPA: los pliegues de la mucosa desarrollan surcos en su superficie, el color es ms plido y la tonalidad griscea. Disminuye el edema. La duracin promedio del celo es de 9 das con un rango que vara de 4 a 24 das. Se considera un estro endrocrinolgico al que comienza con el pico de LH y termina cuando la observacin del extendido vaginal indica el primer da del diestro. La abrupta cada en el porcentaje de clulas superficiales que indica el comienzo del diestro, ocurre en promedio 8 das despus del pico de LH.

C. Diestro Comienza con el cese del celo, la perra rechaza al macho, al tiempo que es menos atractiva. La descarga vaginal disminuye hasta desaparecer y el edema vulvar se resuelve. Las concentraciones de progesterona srica aumentan rpidamente antes de la ovulacin y continuarn aumentando durante el estro. Luego comenzar a declinar gradualmente durante las prximas 5 o 6 semanas. Las perras normales no gestantes que han pasado el celo poseen cuerpos lteos funcionales a pesar de la ausencia de gestacin, el cuerpo lteo de las perras

no gestantes posee un perodo funcional mayor que el de las gestantes. La fase ltea finaliza abruptamente en la perra gestante con el parto, mientras que en la no gestante cae lentamente durante un lapso adicional de 10 a 20 das. Es decir, la duracin del diestro ser de 2 a 3 meses en ausencia de preez. En esta especie, el mantenimiento de la preez depende de la

produccin ovrica de progesterona. El cuerpo lteo parece ser la nica fuente de progesterona durante la preez y la induccin de lutelisis en cualquier momento de la gestacin causa interrupcin de la preez o parto prematuro. La cada abrupta de la progesterona ocurre antes del alumbramiento. Puede observarse desarrollo mamario durante el diestro, tanto en hembras preadas como no preadas. VAGINOSCOPA: los pliegues de la mucosa se tornan delgados, lisos y flcidos. El mucus es de color amarronado y filamentoso.

D. Anestro Fase de reposo del ciclo reproductivo canino. La perra no atrae al macho y no est receptiva. La vulva es pequea y la descarga vaginal es mnima o est ausente. En la hembra no preada no existe una demarcacin clnica obvia entre el diestro y el anestro. Las concentraciones de progesterona srica alcanzan niveles basales. En el anestro de tardo GnRH se produce la liberacin pulstil desde el

hipotlamo

que induce la liberacin de FSH y LH, cuyas

concentraciones aumentan en ondas pulstiles con la proximidad del proestro. Las concentraciones de estradiol srico fluctan durante el anestro, aumentando luego en el proestro con el desarrollo folicular. VAGINOSCOPA: los pliegues estn delgados, flcidos y plidos. La duracin del anestro depende de la edad, salud, raza y otros factores. En la perra promedio durar aproximadamente 4,5 meses.

CITOLOGA VAGINAL La citologa vaginal es un mtodo complementario econmico y de simple realizacin, orientativa para determinar en qu etapa del ciclo estral se encuentra la perra. Otras utilidades incluyen la prediccin de la fecha probable de parto, ayuda en la determinacin de problemas de infertilidad, diagnstico de vaginitis, tumores vaginales, pimetra y metritis aguda, y orientacin para la utilizacin de

anticonceptivos en el momento adecuado del ciclo. Tener presente que la tcnica tambin tiene sus limitaciones, entre las que podemos citar: No identifica el da de ovulacin. No diagnostica preez. No sustituye la observacin de la conducta animal (siempre la citologa vaginal debe ser evaluada en conjunto con la observacin visual de la actitud de la perra hacia el macho).

Fundamento de la citologa vaginal El principio de la citologa vaginal exfoliativa se basa en determinar el tipo y cantidad de clulas de las diferentes etapas del ciclo estral, ya que los

cambios hormonales que sufre la mucosa vaginal durante el ciclo estral se reflejan en la morfologa de sus clulas epiteliales. Al inicio del ciclo, la clula epitelial est en contacto con la irrigacin sangunea. Conforme los niveles de estrgenos se incrementan, el epitelio vaginal se va engrosando ocasionando que la clula epitelial se vaya separando del aporte sanguneo dando como resultado una transformacin celular que va de clula parabasal a clula anucleada o escama.

Toma de muestras: Para tomar muestras para una citologa vaginal se recomienda el uso de guantes. Se introduce un hisopo estril por la comisura dorsal de los

labios vulvares (previa limpieza de estos). Se debe hacer suavemente hasta atravesar el cingulum (unin vestbulo - vaginal) para llegar a la porcin caudal de la vagina, en la cual, mediante movimientos circulares del hisopo, se colectar el material celular. Hecho esto, se retira el hisopo y se hace un frotis por rodamiento en un portaobjetos (comnmente se realizan tres frotis lineales), se fija en alcohol al 95 % durante 5 a 10 minutos y se tie para observarla al microscopio. Existen tcnicas de tincin como la de Papanicolau, Diff-Quick, Giemsa, Wright y Shorr que pueden ser utilizadas para teir muestras de citologa vaginal.

Secuencia del correcto hisopado de la vagina en las perras. Ntese que el hisopo contacta la pared caudal dorsal de la vagina.

CLASIFICACIN DE LAS CLULAS VAGINALES En cuanto al tipo de clulas vaginales estas se clasifican en:

Clula parabasal: Es una clula de forma oval o redonda con ncleo aparente y pequea cantidad de citoplasma. Esta clula se desprende de la capa de clulas

germinales cercana a los vasos sanguneos y predomina en el anestro y principios del proestro. Clula intermedia: Es una clula grande de bordes irregulares con ncleo ms pequeo o ms grande que la parabasal pero con mayor cantidad de citoplasma. La presencia de esta clula indica la etapa anterior a su transformacin a superficial, predomina a la mitad del proestro. Clula superficial: Es una clula de bordes angulosos, con ncleo de menor tamao que las anteriores. Es caracterstica del final del proestro y todo el estro, que es cuando la vagina se encuentra bajo la influencia del pico estrognico. Clula anucleada: Tambin se le conoce como escama, es una clula, sin ncleo, de bordes angulosos e irregulares que predomina en el estro y marca el final del proceso de descamacin de la clula parabasal.

Tipos celulares epiteliales a reconocer durante un hisopado vaginal. Mnemotecnia PISA

Observacin e interpretacin de los resultados La interpretacin de los extendidos se realiza de acuerdo al predominio de los distintos tipos celulares presentes, los cuales pueden ser orientativos de los diferentes momentos del ciclo estral canino. No obstante, es

imprescindible hacer un seguimiento de la evolucin del cuadro celular a travs del ciclo estral, ya que un preparado aislado podra resultar compatible con distintos momentos del ciclo estral de la perra.

Proestro: Duracin: 9 das en promedio. Se observar un nmero variable de numerosas Se clulas puede

eritrocitos junto con escasas intermedias y escasas

clulas

parabasales,

clulas

intermedias superficiales.

encontrar neutrfilos en bajo nmero y bacterias en pequeas o grandes cantidades. El fondo a menudo tiene aspecto sucio debido a la

presencia de secreciones cervicales y vaginales viscosas. En el proestro medio desaparecen los neutrfilos (estas clulas entran a la luz vaginal a travs del epitelio vaginal pero luego ya no pueden atravesar la pared vaginal de mltiples capas inducida por los estrgenos). Los neutrfilos no deberan ser observados nuevamente hasta el diestro. El nmero de clulas parabasales e intermedias pequeas disminuye y son reemplazadas por

clulas intermedias grandes e intermedias superficiales. Los eritrocitos pueden o no estar presentes y el fondo es sucio o claro. En el proestro tardo, ms del 80% de las clulas vaginales son superficiales con ncleos picnticos o son superficiales anucleadas.

Imagen citolgica de proestro. Clulas epiteliales parabasales e intermedias en presencia de eritrocitos y algunos neutrfilos. Las clulas epiteliales comienzan a formar ngulos a medida que comienza la queratinizacin.

Estro: No existen modificaciones que sugieran el pico de LH o de ovulacin o el momento de la fertilizacin. Las clulas superficiales nucleadas y

anucleadas (queratinizadas) o con ncleo picntico representan ms del 80% y a menudo alcanzan el 100% de las clulas observadas en le frotis. No se observan neutrfilos, los eritocitos pueden o no estar presentes y el fondo es limpio y libre de detritus celulares. Cuando se realizan frotis seriados durante el estro, un cambio abrupto en el nmero relativo del tipo de clulas epiteliales marca el comienzo del diestro.

Imagen caracterstica de estro. Las clulas epiteliales superficiales no presentan ncleo, hay presencia de bacterias y algunas clulas con ncleo picntico.

Diestro: Duracin: 56 a 58 das. Durante dicho perodo el nmero de clulas superficiales disminuye mientras que las clulas parabasales e

intermedias se incrementan marcadamente. Asimismo, en los 7 - 10 das iniciales del diestro reaparecen los neutrfilos en nmero variable. Es importante reconocer como normal esta aparicin de neutrfilos en los extendidos de diestro temprano a fin de diferenciarlo de posibles cuadros infecciosos. En algunas perras pueden no observarse los neutrfilos en frotis del diestro. A veces pueden encontrarse clulas Metaestrales, que son

clulas epiteliales vaginales con uno o dos neutrfilos en su interior. Puesto que los glbulos rojos pueden presentarse en extendidos

vaginales obtenidos durante principios del diestro, es imposible diferenciar el proestro del diestro basndose exclusivamente en la citologa vaginal. Adems, luego de los primeros das del diestro, la citologa vaginal es similar a la del anestro con leucocitos y eritrocitos en cantidades escasas y las clulas epiteliales corresponden a intermedias y parabasales.

Diestro. Clulas epiteliales parabasales e intermedias. Las clulas presentan bordes ms redondeados, ncleo visible, presencia de eritrocitos y clulas epitelilales con neutrfilos en su interior (clulas metestrales).

Anestro: Se caracteriza por un predominio de clulas parabasales y de clulas intermedias pequeas. Si bien pueden hallarse algunos neutrfilos, su nmero es muy inferior al observado durante el principio del diestro. Pueden o no verse

bacterias y la apariencia del fondo puede ser clara o sucia.

El conocimiento de las caractersticas del ciclo reproductivo canino es de suma utilidad para: Determinar el da de mayor fertilidad ya sea para implementar servicio natural o inseminacin artificial. Determinar el primer da del diestro y as aproximar la fecha probable de parto. Aproximar el diagnstico y evaluar las posibilidades teraputicas de las diversas enfermedades reproductivas. Realizar un adecuado manejo del ciclo estral, ya sea para prevenir como para inducir ciclos frtiles.

HISTORIA CLINICA N 0029 FECHA 11/10/12 DATOS DEL PACIENTE NOMBRE OSA ESPECIE CANINO RAZA MESTIZO SEXO DATOS DEL PROPIETARIO NOMBRE: JAIME PIZARRO DIRECCION: CAPAC YUPANQUI 215

VETPEQ

EDAD 11AOS COLOR CREMA MARCAS NACIMIENTO SETIEMBRE 2002

TELEFONO: 964955005 CORREO: Jaime_ 12@hotmail.com

HISTORIA ESTERILIZACION : NO INTERVENCIONES QUIRURGICAS: Atasco fecal ANTECEDENTES Otitis crnica, ambos odos hace tres aos Perdida de la visin Queratoconjuntivitis - ALERGIAS Dermatitis CONTROLES VACUNACION Todas, anualmente Ultima hace 4 meses ANAMNESIS DIETA: comida balanceada BAOS: cada dos semanas PROCEDENCIA: urbano CONSTANTES FISIOLOGICAS FC : 104latidos/min PESO: 6kg

N PARTOS: 0

DESPARACITACION Hace dos semanas

FR:

T : 38.9C

EXPLORACION FISICA HIDRATACION: NORMAL MUCOSAS: ROSADAS HUMEDAS TUGENCIA DE LA PIEL: BIEN ARTICULACIONES CON POCO DOLOR MUSCULO ESQUELETICO S.RESPIRATORIO AUSCULTACION, SONIDOS CLAROS S.CARDIOVASCULAR AUCULTACION, LATIDOS NORMALES DIAGNOSTICO PRESUNTIVO LITIASIS

VETPEQ
OJOS QUERATOCONJUNTIVITIS, SECRECION OCULAR OIDOS OTITTIS CRONICA PIEL Y ANEXOS DERMATITIS LOCAL EN ABDOMEN Y GRUPA S.DIGESTIVO PALPACION, NORMAL POCAS HECES S.GENITOURINARIO S.NERVIOSO REFLEJOS NORMALES, OJO IZQUIERDO REFLEJO BAJO

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL REALIZAR ECOGRAFIA, ANTECENTES DE LITIASIS DIAGNOSTICO DEFINITIVO OTITIS, QUERATITIS, ALERGIA EN PIEL

TRATAMIENTO BAOS MEDICADOS, CON CLORHEXIDINA

Mara Fernndez Zapata

MEDICO VETERINARIO CMVP 5821

RESULTADOS Por las clulas observadas en el frotis (parabasales en pocas cantidades) podemos decir que osita se encontraba en anestro

CONCLUSIONES Es importancia que el mdico veterinario sepa el procedimiento de cmo se realiza una citologa vaginal ya que esta prueba diagnstica nos ayudara a saber en qu fase del ciclo estral se encuentra la perrita y en caso de una inseminacin determinar cul es el momento oportuno para realizarla.

BIBLIOGRAFA Universidad nacional del litoral. Citologa vaginal. Disponible en: http://www.fcv.unl.edu.ar/archivos/grado/catedras/teriogenologia/infor macion/110411/PDFs%20word/TP12.pdf. Datos obtenidos en la clase de prctica.