EXPERIMENTO N2: Evaluacin de los efectos teratognicos del etanol en Zebrafish. Frmacos: Especie: Etanol QP. Danio rerio.

En este experimento se trata de demostrar los efectos del alcohol sobre el desarrollo de embriones de pez cebra. Se utilz el embrin de pez cebra porque es transparente y puede ser fcilmente fotografiada con cualquier nmero de manchas. EL presente trabajo tambin trata de asociar el efecto que causara el etanol sobre fetos humanos provocndose un trastorno conocido como el sndrome de alcoholismo fetal (SAF) que es una manifestacin grave de la exposicin de embriones al etanol. Se presenta con defectos caractersticos en la cara y rganos, incluyendo el retraso mental debido al desarrollo del cerebro desordenado y daado.

En esta imagen se puede distinguir los efectos del etanol a diferentes concentraciones sobre el desarrollo de los somitas. Tambin se document el desarrollo anormal de los tejidos axiales, incluyendo la notocorda. El retraso en el desarrollo producido por el etanol aparentemente conduce a la interrupcin de la elongacin adecuada de la notocorda, que conduce a una notocorda acortada y ocasionalmente interrumpida. Este retraso temprano y el defecto de la notocorda probablemente conduzcan en parte a las alteraciones posteriores en los somitas que han perdido su forma normal como se ve en los controles no tratados.

Otra consecuencia de la exposicin de etanol es el retraso en el desarrollo y defectos ms tarde en una longitud acortada de la notocorda del embrin. Incluso la medicin de embriones para tener en cuenta la curvatura producida por la exposicin de etanol, conduce a un tronco acortado que es dependiente de la dosis de etanol en los embriones que se expuso. Este hallazgo es similar a la persistencia de la baja estatura encontrada en los nios expuestos a etanol durante el desarrollo, lo que sugiere que el modelo de pez cebra es relevante para la comprensin del defecto de nacimiento humano.

Una de las caractersticas clsicas en esta especie son las alteraciones faciales, incluyendo una mandbula reducida, apertura de los ojos pequeos, y un surco nasolabial liso. Gran parte de estas caractersticas estn relacionadas con una reduccin en los tejidos de la lnea

media. Se ha demostrado en modelos animales que la exposicin severa etanol conduce a fenotipos incluso ms pronunciados, incluyendo synopthalmia y ciclopa. Cuando la exposicin de embriones de pez cebra a dosis ms altas de etanol, la distancia intraocular (IOD) disminuye de una manera dependiente de la dosis coincidente con la naturaleza del defecto de nacimiento humano.

Para comprender el mecanismo subyacente a los defectos en el cuerpo y la cara producidos por la exposicin de etanol, se trat de determinar los cambios de expresin gnica que se producen temprano en el desarrollo y que podra razonablemente esperarse que contribuyan a defectos en el desarrollo posterior. En este caso hay dos genes cuya expresin se reduce despus de la exposicin a etanol y estos son: Gli1 y six3bUna vez que se identifican los genes que se ven afectados por el etanol, existen mecanismos mediante los cuales la expresin de

ellos puede ser aumentado o disminuido. En este ejemplo en particular, hemos demostrado 2 genes que han disminuido ( Gli1 y six3b ). DISCUSIN Los resultados mostrados demuestran que la punta de la forma en pez cebra puede ser utilizada para monitorizar defectos del desarrollo. Debido a la accesibilidad del embrin, alto nmero de huevos puestos para cada embrague, y una alta reproducibilidad de los resultados, estos vertebrados son ideales para los estudios teratognicos. En los estudios de etanol, las dosis utilizadas parecen bastante altas en comparacin con los niveles de alcohol en la sangre de mamferos. Sin embargo, estos niveles reflejan lo que est presente en el agua, y no todo el etanol se entrega al embrin.