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AVALIAO DA RESISTNCIA A PROCESSOS DE DESINFECO/ ESTERILIZAO FISICO E QUMICO EM INTRUMENTAIS COM LMEN: testes microbiolgicos Rosivaldo dos Santos

Pierin1 Rogria Maria Alves de Almeida2 RESUMO: Deficincias relacionadas desinfeco e esterilizao de instrumentais com lmen e a busca por solues quanto diminuio do alto ndice de infeces por procedimentos realizados com tais instrumentais tem sido algo que preocupa os profissionais da rea e tambm os pacientes que se submetem a tais procedimentos. A no realizao dos procedimentos necessrios de desinfeco e esterilizao, a falta de conhecimento necessrio e a escassez de pesquisas na rea tornam ineficazes os mtodos utilizados para desinfeco e esterilizao de tais instrumentais. O presente artigo tem como objetivo testar os mtodos de desinfeces atualmente conhecidos e indicados pela Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA), avaliar a resistncia fsica e qumica dos instrumentais aps o processo de desinfeco e encontrar um mtodo eficaz de desinfeco dos mesmos. Para o desenvolvimento da pesquisa, realizaram-se procedimentos de contaminao de cnulas de lipoaspirao e agulha de puno por Staphylococcus aureus e Cndida albicans e logo aps foi realizado o processo de limpeza atravs da imerso dos materiais em detergente enzimtico e cido peractico. Foi realizado tambm teste de resistncia a corroso por agentes qumicos e fsicos dos instrumentais, esterilizao em autoclave, corroso e exposio trmica Ensaio previsto na NBR ISO 13402/97. (ASSOCIAO BRASILEIRA DE NORMAS TCNICAS, 1997). Resultado Concluso

Palavras-chave: Cnulas de lipoaspirao. Agulhas de puno. Esterilizao. Micobactrias atpicas. Teste de resistncia. Instrumentais com lmen. ABSTRACT:

Keywords: Liposuction Instrumental with lumen.

cannulas.

Sterilization.

Atypical

mycobacterium.

Resistance

test.

INTRODUO
1 2

Graduando do curso de Tecnologia em Sistemas Biomdicos (FATEC-Bauru). Graduada em Biologia (UNESP), Mestre em Cincias Biolgicas (USP) e Doutora em Cincias Biolgicas (USP). Docente da Faculdade de Tecnologia de Bauru.

Com o grande avano da tecnologia na rea da sade e o surgimento de novos equipamentos para procedimentos cirrgicos tornando-os cada vez menos invasivos aumenta e muito o nmero de pessoas que procuram tratamentos especializados na rea de vdeo cirurgia, endoscopia e at mesmo a lipoaspirao. Esses equipamentos geralmente possuem uma estrutura de forma tubular com lmen interno, os quais pela dificuldade na sua desmontagem tornam mais difceis sua limpeza e desinfeco. De acordo com a Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) em seu INFORME TCNICO No 01/09, os microorganismos que sobrevivem nos instrumentais cirrgicos est diretamente relacionado com a transmisso de infeces hospitalares. Devido dificuldade de limpeza, muitos microorganismos aderem a superfcies desses instrumentais formando biofilmes, o qual envolve bactrias, fungos filamentosos, leveduras e protozorios. (COSTERTON et al, 1995 apud NASCIMENTO; TAVEIRA, 2001). INSTRUMENTAIS COM LMEN E CONTAMINAO POR MICOBACTRIAS ATPICAS A lipoaspirao uma cirurgia realizada para remoo de gordura localizada, indicada s pessoas que tm excesso de gordura em reas especficas do corpo. Seu principal objetivo a modelagem do corpo, diferente da perda de peso a qual se utiliza de dietas. No Brasil o ndice de cirurgias de lipoaspirao vem crescendo visivelmente. Segundo ..................

Com esse crescente nmero de cirurgias estticas, as infeces ps-operatrias por micobactrias tm sido notada, pois so crescentes os relatos desse tipo de infeces principalmente na lipoaspirao. Dentre essa populao de microorganismos encontram-se as Micobactrias atpicas ou tambm chamadas de bactrias no tuberculosas que segundo Cabral e Andrade (2011), representam uma emergncia epidemiolgica e sanitria, especialmente, em pacientes submetidos a procedimentos invasivos. Conforme a ANVISA (2011), em seu relatrio descrito de investigao de casos de infeces por Micobactrias no tuberculosas de crescimento rpido no Brasil no perodo de 1998 a 2009, foram notificados 2.520 casos de infeces por mico bactrias no tuberculosa nesse perodo, sendo o Rio de Janeiro o estado com maior ndice de contaminao, sendo 1.107 casos totalizando 43.9% de todos os casos notificados no pas.

Esses dados que embora no seja a realidade do Brasil, pois muitos casos deixam de ser notificados, mostram a grande necessidade de um mtodo eficaz de desinfeco dos instrumentais cirrgicos invasivos e uma ateno maior nesse quesito com o intuito de diminuir este ndice trazendo mais segurana para os pacientes que se submetem a esses procedimentos. Em contrapartida a ANVISA informa em seu INFORME TCNICO No 01/09, que a pratica de mtodos de limpeza manual ou automatizada eficaz contribua para o sucesso da esterilizao at que se tenham dados exatos sobre a efetividade dos agentes esterilizantes contra as Micobactrias de crescimento rpido envolvida nos surtos no Brasil. Ainda em seu texto a ANVISA prope a seguir um padro de limpeza no validado, apenas com o intuito de melhorar esse processo. Staphylococcus aureus Cndida albicans

INSTRUMENTAIS DE AO INOXIDVEL A NBR ISO 7.153 (1997) e a NBR 13.911 (ASSOCIAO DE NORMAS TCINICAS, 1997), diz em seu texto que a maior parte dos instrumentais cirrgicos deve ser fabricada em ao inoxidvel, devido a resistncia que esses materiais apresentam se comparados com outros materiais. No entanto alguns meios de desinfeco e esterilizao levam corroso. Lima (2012), afirma atravs de ensaios e anlises microscpicas que instrumentais fabricados em ao inoxidvel, possuem resistncia corroso quando expostos a altas temperaturas, mas substncias como o soro fisiolgico so meios agressivos para esse tipo de material devido aos ons cloretos presente na soluo. Com base nessas informaes bem visvel a necessidade de um processo correto para procedimentos de limpeza, desinfeco e esterilizao desses instrumentais garantindo assim uma maior vida til simultaneamente segurana microbiolgica ao paciente.

METODOLOGIA
A presente pesquisa foi desenvolvida no ano de 2013 no laboratrio de microbiologia da faculdade de tecnologia de Bauru-Fatec.

MATERIAL E MTODOS Material Os materiais utilizados para essa pesquisa (vidarias, reagentes e equipamentos) foram utilizados do laboratrio de Microbiologia da FATEC - Bauru. Os instrumentais com lmen (cnulas de lipoaspirao e agulhas de puno) foram utilizados provenientes de doao de Hospitais da regio de Bauru. Mtodos Contaminao dos instrumentais Inicialmente os instrumentais com lmen (1 cnula de lipoaspirao e 2 agulhas de puno) foram previamente limpos com imerso em soluo de detergente enzimtico durante 15 minutos e secos sob luz ultravioleta para descontaminao e esterilizados em autoclave. Aps esta etapa, os instrumentais com lmen foram contaminados com uma suspenso em soluo salina 0,9% de Staphylococcus aureus (1,0104 UFC/ml). Depois da contaminao, os materiais foram incubados em estufa de cultura (Fanem, mod. 515) por 30 minutos a 37C. Aps o perodo de incubao, realisou-se uma coleta de cada instrumental com lmen para verificar a aderncia da bactria na superfcie dos materiais, utilizando swabs estreis umedecidos em salina 0,9%, semeados em placa contendo meio agar nutriente e incubados em estufa de cultura a 37C por 24 horas. O mesmo processo foi repetido para todos os instrumentais utilizando Candida albicans utilizando o Agar Sabouraud. Limpeza e desinfeco Essa etapa iniciou-se com o processo de limpeza dos instrumentais, atravs da imerso dos mesmos em detergente enzimtico a 0,5% por 20 minutos, enxaguados com gua deionizada e secos com gaze estril. Realizou uma coleta de cada instrumental com lmen com swabs estreis umedecidos em salina 0,9%, semeados em placa contendo Agar nutriente quando contaminados com Staphylococcus aureus e Agar Sabouraud para Candida albicans. Todos os instrumentais foram incubados em estufa de cultura a 37C por 24 horas.

A ltima etapa foi desinfeco dos instrumentais com lmen atravs da imerso em soluo de cido peractico a 2,5% por 20 minutos 60C. Aps a desinfeco os materiais foram enxaguados com gua deionizada e secos com gaze estril. Realizou-se uma coleta de cada material com swabs estril umedecidos em salina 0,9%, semeados em placa contendo meio agar Baird Parker e incubados em estufa de cultura a 37C por 24 horas. Aps cada etapa, foi realizada contagem de colnias no contador (Phoenix Luferco, mod. CP600 plus) das placas de Petri e os resultados obtidos foram descritos em Unidades Formadoras de Colnias por centmetro quadrado (UFC/cm2).

Teste de resistncia a corroso por agentes qumicos e fsicos

O ensaio de resistncia dos instrumentais cirrgicos de ao inoxidvel, esterilizao em autoclave, corroso e exposio trmica seguiu o ensaio previsto na NBR ISO 13402/97. (ASSOCIAO BRASILEIRA DE NORMAS TCNICAS, 1997).

RESULTADOS E DISCUSSO
Os resultados obtidos com os testes realizados na cnula de lipoaspirao esto expressos nas tabelas abaixo:

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de cnulas de lipoaspirao contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans
Microorganis mos cnula de lipoaspirao contaminada S. aureus Primeiro ciclo
S. aureus Segundo ciclo

Suspenso inicial UFC/mL Diluio 1/10 P.1 P.2


4,4x106 4,4x106 1,4x106 1,4x106

Inoculo inicial UFC/mL Coleta interna P.1 P.2


4,5x105 4,6x105 2,3x105 229

Diluio 1/100 P.1 P.2


7,7x105 7,9x105 5,2x105 5,7x105

Coleta externa P.1 P.2


1,9x105 1,7x105 28 12,5

Ps-limpeza com detergente enzimtico Coleta Coleta interna externa P.1 P.2 P.1 P.2 71 1
5,5 ND ND 1 ND ND

Ps-desinfeco com cido peractico Coleta Coleta interna externa P.1 P.2 P.1 P.2 ND ND
ND ND ND ND ND ND

C. albicans Primeiro ciclo C. albicans Segundo ciclo

*ND - No detectado

Microorganismos cnula de lipoaspirao contaminada

Suspenso inicial UFC/mL Diluio 1/10 (mdia) Diluio 1/100 (mdia)

Inoculo inicial UFC/mL Coleta interna (mdia) Coleta externa (mdia)

Ps-limpeza com detergente enzimtico Coleta Coleta interna externa (mdia) (mdia)

Ps-desinfeco com cido peractico Coleta Coleta interna externa (mdia) (mdia)

S. aureus C. albicans

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de cnulas de lipoaspirao contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans - Inculo inicial

Microorganismos cnula de lipoaspirao contaminada S. aureus Primeiro ciclo S. aureus Segundo ciclo C. albicans

Suspenso inicial UFC/mL Coleta interna Coleta interna Placa 1 Placa 2 Placa 1 Placa 2 3,7x106 5,1x106 8,4x105 7,1x105 3,7x106 1,4x106 5,1x106 1,4x106 8,2x105 6,4x105 7,6x105 4,1x105

Primeiro ciclo C. albicans Segundo ciclo

1,3x106

1,6x106

5,7x105

5,8x105

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de cnulas de lipoaspirao contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans - Suspenso inicial

Microorganismos cnula de lipoaspirao contaminada S. aureus Primeiro ciclo S. aureus Segundo ciclo C. albicans Primeiro ciclo C. albicans Segundo ciclo
*ND - No detectado

Inoculo inicial UFC/mL Diluio 1/10 Diluio 1/100 Placa 1 Placa 2 Placa 1 Placa 2 3,8x105 5,2x105 2,4x105 1,4x105 3,9x105 1,7x105 198 5,3x105 3x105 261 2,3x105 56 ND 1,2x105 ND 25

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de cnulas de lipoaspirao contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans - Ps-limpeza com detergente enzimtico

Microorganismos cnula de lipoaspirao contaminada S. aureus Primeiro ciclo S. aureus Segundo ciclo C. albicans Primeiro ciclo C. albicans Segundo ciclo
*ND - No detectado

Ps-limpeza com detergente enzimtico Coleta interna Coleta interna Placa 1 Placa 2 Placa 1 Placa 2 67 76 1 ND 1 ND ND 10 ND ND 1 ND ND 0 ND ND

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de cnulas de lipoaspirao contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans - Ps-desinfeco com cido peractico

Microorganismos cnula de lipoaspirao contaminada S. aureus Primeiro ciclo S. aureus Segundo ciclo C. albicans Primeiro ciclo C. albicans

Ps-desinfeco com cido peractico Coleta interna Coleta interna Placa 1 Placa 2 Placa 1 Placa 2 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND

Segundo ciclo
*ND - No detectado

Os resultados obtidos com os testes realizados nas agulhas de puno esto expressos nas tabelas abaixo:
Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de agulhas de puno contaminada com Staphylococcus aureus e Candida albicans suspenso inicial

Microorganismos Agulha de puno contaminada Cndida albicans Staphylococcus aureus

Suspenso inicial UFC/mL Diluio 1/10 Diluio 1/10 1,4x106 5,6x105 Incontvel Incontvel

Tabela XXX resultado das anlises da eficincia dos processos de limpeza e desinfeco qumica de agulhas de puno contaminada com Staphylococcus aureus e Cndida albicans Microorganismos Inoculo inicial UFC/mL Ps-limpeza com detergente Ps-desinfeco com Agulha de enzimtico cido peractico puno Coleta interna Coleta externa Coleta interna Coleta Coleta Coleta contaminada externa interna externa P.1 P.2 P.1 P.2 P.1 P.2 P.1 P.2 P.1 P.2 P.1 P.2 S. aureus 1,4x106 7,9x105 62 51 7,6x105 8,9x105 ND 1 53 57 ND ND Agulha 1 S. aureus 5,7x105 4,6x105 83 104 3x105 3,2x105 ND ND ND ND ND ND Agulha 2 C. albicans 70 1,6x105 7 4 ND 1 ND ND ND ND ND ND Agulha 1 C. albicans 136 46 ND 1 1 1 ND ND ND ND ND ND Agulha 2 *ND - No detectado

CONCLUSO

REFERNCIAS