FLUIDOS SUPERCRTICOS EM QUMICA ANALTICA. I.

CROMATOGRAFIA COM FLUIDO SUPERCRTICO:

CONCEITOS TERMODINMICOS
Emanuel Carrilho, Maria Ceclia H. Tavares e Fernando M. Lanas*
Instituto de Qumica de So Carlos, Universidade de So Paulo, CP 780, 13560-970 So Carlos - SP
Recebido em 15/6/00; aceito em 22/11/00
SUPERCRITICAL FLUID IN ANALYTICAL CHEMISTRY. I. SUPERCRITICAL FLUID
CHROMATOGRAPHY: THERMODYNAMIC DEFINITIONS. Under the chromatographic point of view,
the physico-chemical properties of a supercritical fluid are intermediate to those of the gases and
liquids. Many times they approach the best features of each one, as for example, the solubilization
power of liquids and low viscosity of gases. The thermodynamic definitions and main physico-chemical
features of a supercritical fluid will be presented in this article. The use of supercritical fluids in
analytical chemistry has been extremely modest in Brazil, even considering the enormous potential of
their applications, and their use in several techniques, such as chromatography (SFC) and supercritical
fluid extration (SFE). This article series is intended to discuss the historical evolution, instrumentation
features and potential and limitations of the supercritical fluid use in analytical chemistry. A special
focus will be centered on chromatography and extration techniques using supercritical fluids.
Keywords: supercritical fluid; supercritical fluid chromatography; thermodynamic definitions.
Reviso Quim. Nova, Vol. 24, No. 4, 509-515, 2001.
INTRODUO
Apesar da descoberta do grande poder de solubilizao dos
fluidos supercrticos ter ocorrido no final do sculo XIX
1
, seu
uso em qumica, e particularmente em qumica analtica, so-
mente se verificou quase um sculo depois, no final do sculo
XX
2
. Ainda assim, o uso de fluidos supercrticos em qumica
analtica tem sido extremamente modesto no Brasil, fato no
justificado considerando-se o enorme potencial de aplicao
dos mesmos em vrias tcnicas, destacando-se a cromatografia
com fluido supercrtico (SFC, do ingls supercritical fluid chro-
matography) e a extrao com fluido supercrtico (SFE, do
ingls supercritical fluid extraction). Nesta srie de artigos
pretende-se discutir a evoluo histrica, principais caracters-
ticas, instrumentao, potencial e limitaes do uso de fluidos
supercrticos em qumica analtica, principalmente as tcnicas
de cromatografia e extrao com fluido supercrtico.
Quando um composto confinado em um espao determi-
nado, gs e lquido esto em equilbrio entre si. Aquecendo-se
o sistema, as propriedades intrnsecas de ambos convergem
para um mesmo ponto at serem idnticas (por exemplo, den-
sidade, viscosidade, ndice de refrao, condutividade trmica,
etc.). Este ponto denominado ponto crtico
3
, e nele acaba-se
a interface gs/lquido, pois a partir deste ponto encontra-se
uma nica fase supercrtica. Fluido supercrtico portanto toda
substncia que se encontrar em condies de presso e tempe-
ratura superiores aos seus parmetros crticos. Essa regio
melhor visualizada no diagrama de fases da Figura 1.
Hannay e Hogarth
1
foram os primeiros a descobrir o grande
poder de solvatao dos fluidos supercrticos quando estudaram a
solubilidade de cloretos metlicos em etanol supercrtico. Apenas
10 anos aps o advento da cromatografia gasosa por James e
Martin
4
em 1952, a utilizao de fluidos no estado supercrtico
foi postulada e demonstrada por Klesper, Corwin e Turner
5
.
Sob o ponto de vista cromatogrfico, as propriedades fsi-
co-qumicas de um fluido supercrtico so intermedirias que-
las dos gases ou dos lquidos e, muitas vezes, se aproximam
s melhores caractersticas de cada um como, por exemplo, o
alto poder de solvatao de um lquido e a baixa viscosidade
de um gs.
As definies termodinmicas e principais caractersticas fsi-
co-qumicas de um fluido supercrtico sero discutidas a seguir.
EVOLUO HISTRICA
O desenvolvimento e a consolidao da cromatografia com
fluido supercrtico tem sido precedida de vrios desenvolvi-
mentos maiores na tecnologia de separao. Em 1952, James e
Martin
4
introduziram a cromatografia gs-lquido. Pouco de-
pois, Golay
6
introduziu o uso de colunas de tubo aberto (capi-
lares) em cromatografia gasosa, re-escrevendo algumas equa-
es clssicas em cromatografia. Devido baixa viscosidade
da fase mvel gasosa e baixa resistncia ao fluxo apresenta-
das pelas colunas tubulares abertas, uma pequena queda de
presso foi observada atravs de toda extenso da coluna capi-
lar. Ento, colunas de grande comprimento puderam ser utili-
zadas, gerando um elevado nmero de pratos tericos, o que
passou a permitir a anlise de amostras mais complexas. e-mail: flancas@iqsc.sc.usp.br
Figura 1. Diagrama presso / temperatura e os equilbrios entre os
estados slido, lquido e gasoso. Definio de regio supercrtica
para o CO
2
; T
c
: temperatura crtica; P
c
: presso crtica.
510 Carrilho et al. Quim. Nova
Desde sua introduo nos anos 50 a cromatografia gasosa
(GC, do ingls gas chromatography) teve grande aceitao para
anlises de compostos orgnicos volteis. A busca de fases
mveis lquidas para anlise de compostos no volteis e po-
lares em cromatografia lquida de alta eficincia (CLAE, mais
conhecida como HPLC, do ingls high performance liquid
chromatography) comeou em meados de 1960. Com base nos
princpios de partio lquido-lquido descritos por Martin e
Synge
7
e na cromatografia de adsoro desenvolvida por
Tswett
8
, a HPLC apresenta a vantagem do aumento da fora
de solvatao na separao de compostos antes no separveis
por GC. Os aspectos bsicos em separaes envolvendo HPLC
podem ser encontrados na obra clssica de Snyder e Kirkland
9
.
A principal diferena entre cromatografia gasosa (GC) e cro-
matografia lquida (LC) provm da dissimilaridade existente na
densidade dos gases e lquidos, respectivamente empregados
como fase mvel. A baixa densidade dos gases, em contraste
com a alta densidade dos lquidos, resulta em um maior coefi-
ciente de difuso, conduzindo a uma maior eficincia e a anli-
ses mais rpidas. Por outro lado, os gases possuem poder de
solvatao limitado devido a sua baixa densidade, no podendo
ser usados em anlises de compostos no volteis
10
.
Admitindo a necessidade de uma fase mvel com caracte-
rsticas fisico-qumicas intermedirias entre gases e lquidos,
Klesper, Corwin e Turner
5
postularam e demonstraram a
praticabilidade do uso de fluido supercrtico como fase mvel.
Sie e Rijnders
11-14
desenvolveram extensa pesquisa sobre a
nova tcnica, onde avaliaram alguns parmetros cromatogrfi-
cos em diferentes sistemas.
Em 1981 Lee e Novotny
2
introduziram as colunas capilares
em SFC. Isto desenvolveu a tcnica de colunas recobertas com
filme imobilizado, visto que um dos primeiros problemas en-
contrados pelos pioneiros foi a extrao do filme lquido do
suporte estacionrio em colunas empacotadas (ou recheadas).
Outra vantagem mostrada pelos autores foi a utilizao da pro-
gramao de presso/densidade em sistemas de colunas de tubo
aberto, pois este no apresenta o efeito adverso da queda de
presso observado em colunas empacotadas.
A combinao destes e outros avanos em cromatografia,
em conjunto com o aprimoramento da instrumentao e de sis-
temas de alta presso, tornaram vivel a SFC.
ASPECTOS TERICOS E TERMODINMICOS
As propriedades termodinmicas de um gs podem ser re-
presentadas por uma equao de estado a qual fornece o volu-
me em funo da temperatura e da presso. O comportamento
volumtrico real de gases a altas presses algo complexo,
tornando difcil a obteno de uma equao que o expresse. A
equao de estado de Virial a que permite uma melhor apro-
ximao desse comportamento real
11
.
...
V
D
V
C
V
B
A PV
3 2
+ + + +
(1)
A equao (1) representa a forma genrica da equao de
Virial sendo A seu primeiro coeficiente, B o segundo coefici-
ente de Virial e assim por diante, onde cada coeficiente fun-
o da temperatura. Outra maneira de expressar a equao (1)
na forma de uma srie positiva de potncias de presso (P),
que mais conveniente para nossos propsitos,
PV = A + BP + CP
2
+ DP
3
+ ... (2)
sendo o termo A a mesma quantidade nas duas equaes; o
primeiro coeficiente de Virial (A) justamente o termo corres-
pondente a lei dos gases perfeitos. Assim, a equao [2] pode
ser escrita como
PV = RT + BP + CP
2
+ DP
3
+ ... (3)
Em 1907 Berthelot
15
props a seguinte equao de estado
P
T
T
6 1
P 128
RT 9
RT PV
2
2
c
c
c
1
1
]
1

,
_

+
(4)
onde P
c
a presso crtica e T
c
a temperatura crtica de um
gs. Neste caso, o termo entre colchetes representa o segundo
coeficiente de Virial, o termo B na equao (2).
Continuidade entre as fases gs/lquido:
o Ponto Crtico
A descoberta do fenmeno do ponto crtico e suas implica-
es contriburam muito para o entendimento da relao entre
um lquido e o seu vapor. Andrews
16
encontrou que a
condensao ordinria de um vapor ou a evaporao de um
lquido envolve uma descontinuidade entre as duas fases; to-
davia possvel passar de lquido a vapor, ou do vapor para o
lquido, por um processo no qual a substncia permanece per-
feitamente homognea. Assim, se um lquido sob alta presso
aquecido acima de seu ponto crtico, e a presso for reduzida
isotermicamente at um valor baixo, a substncia passar por
imperceptveis etapas do lquido para o vapor.
Na Figura 2 mostrado um diagrama Presso/Volume, onde
cada curva representa uma isoterma. Na temperatura mais ade-
quada (curva mais distante dos eixos) o gs praticamente
perfeito e a curva aproxima-se de uma hiprbole regular. A
medida em que diminui-se a temperatura, os desvios da lei dos
gases perfeitos tornam-se cada vez mais pronunciados at al-
canar-se o ponto C, no qual a inclinao assume valor zero,
uma vez que dP/dV = 0. Este o denominado ponto crtico
(por exemplo, para o CO
2
Tc = 31,3
o
C e Pc = 72,9 atm).
Abaixo deste ponto, so encontradas duas fases capazes de
coexistncia e duas curvas separadas so determinadas experi-
mentalmente, na mesma temperatura: uma pela mudana do
volume do lquido com a presso e a outra pela mudana do
volume do gs com a presso
3
.
Figura 2. Isotermas de variao do volume molar com a
presso.(adaptado da referncia 3).
Vol. 24, No. 4 Fluidos Supercrticos em Qumica Analtica 511
Efeito da Presso sobre o Coeficiente de Partio (K).
O coeficiente de partio em cromatografia gs/lquido (K)
definido como sendo a relao entre a quantidade de soluto
por unidade de volume de fase estacionria pela quantidade de
soluto por unidade de volume da fase mvel, ou seja,
fm
fe
C
C
K
(5)
onde: C
fe
a concentrao do analito na fase estacionria e
C
fm
a concentrao do analito na fase mvel
A mudana na presso do fluido de arraste pode alterar este
coeficiente de trs modos:
1) Interao entre molculas do fluido de arraste e molculas
do soluto,
2) Efeito da presso mecnica sobre a fase estacionria,
3) Solubilizao do fluido de arraste no filme lquido, alte-
rando sua natureza.
A medida do desvio do comportamento de gs perfeito para
o sistema binrio fluido de arraste/soluto o segundo coefici-
ente de virial, B
nm
, o qual pode ser descrito como uma funo
quadrtica da composio
11
B
nm
=(1-y)
2
B
11
+2y(1-y)B
12
+y
2
B
22
(6)
onde y a frao molar do componente 2, B
11
e B
22
(coefici-
entes de dois gases puros) so funes somente de temperatura
e foras entre os pares de molculas 1,1 e 2,2, e B
12
uma
funo idntica para foras entre 1,2. A interao entre gs de
arraste e soluto pode ser descrita pelo segundo coeficiente de
virial atravs de B
12
.
Para uma fase gasosa no ideal, o relacionamento entre
volume (V
g
), nmero de moles (n
g
), presso (P) e temperatura
(T) pode ser escrito como

,
_

+ +
nm nm
g
g
B
RT
p
1
P
RT
B
P
RT
n
V
(7)
Partindo da equao [7], Sie e Rijnders
11
, atravs de apro-
ximaes e rearranjos, chegaram na expresso
( )
2 12 Po P
V B 2
RT
Po P
K ln K ln

+
(8)
onde Po uma presso de referncia, de escolha arbitrria (por
exemplo 1 atm), na qual pode-se considerar o gs como per-
feito, P uma determinada presso de trabalho e V
2
o volume
molar do soluto no lquido. O termo B
12
no disponvel
experimentalmente, mas pode ser obtido atravs do princpio
da correspondncia dos estados, podendo ser escrito
11

,
_

* *
T
T
V
B
(9)
onde uma funo universal vlida para todas as substnci-
as, V* e T* so o volume e a presso caractersticos para os
quais geralmente so adotados os valores crticos. Para uma
mistura binria, a equao (9) pode ser escrita como

,
_

* *
12
12 12
T
T
V
B
(10)
onde a mesma funo anterior.
Vrias funes tem sido propostas na literatura, sendo duas
delas amplamente utilizadas por Sie e Rijnders11-12.
2
* *
*
12
T
T
757 , 0
T
T
881 , 0 438 , 0
V
B 12 12
12

,
_

,
_

(11)
e
3
* *
*
12
T
T
503 , 0
T
T
158 , 1 461 , 0
V
B 12 12
12

,
_

,
_

(12)
Utilizando-se portanto de equaes estabelecidas, possvel
calcular o segundo coeficiente de Virial e estimar com boa pre-
ciso o volume de fluido em funo da temperatura e presso.
PARMETROS DE OPERAO
Propriedades de um Fluido Supercrtico
Quando um composto confinado em um espao determi-
nado, a fase lquida e o seu vapor coexistem em equilbrio.
Aquecendo-se o sistema, as propriedades intensivas conver-
gem at serem idnticas no ponto crtico (p.ex., densidade,
viscosidade, condutividade trmica, ndice de refrao e ou-
tros). O ponto crtico marca a temperatura mais alta de coexis-
tncia de duas fases. Novo aquecimento resultar numa fase
supercrtica. Na Tabela 1 so listados os parmetros crticos de
alguns fluidos e na Tabela 2 mostrada uma comparao entre
as propriedades fisico-quimicas de maior interesse cromatogr-
fico, para melhor visualizao da potencialidade da tcnica
10
.
Tabela 1. Parmetros fisico-qumicos de alguns compostos.
Fluido F.M. Tc (
o
C) Pc (atm) c (g/mL)
Dixido de
Carbono CO
2
31,3 72,9 0,47
xido Nitroso N
2
O 36,5 71,7 0,45
n-Pentano C
5
H
12
196,6 33,3 0,23
Hexafluoreto
de Enxofre SF
6
45,5 37,1 0,74
Xennio Xe 16,6 58,4 1,10
Metanol CH
3
OH 240,5 78,9 0,27
Isopropanol C
3
H
7
OH 235,3 47,0 0,27
F.M.= Frmula Molecular, Tc = Temperatura Crtica,
Pc = Presso Crtica e c = Densidade Crtica.
Tabela 2. Propriedades fsicas de gs, lquido e fluido supercrtico.
Propriedade Unidades Gs Lquido Fluido
Supercrtico
Densidade () g/mL 10
-4
/10
-3
1 0,2/0,9
Difusibilidade (D) cm
2
/sec 10
-2
/1 <10
-5
10
-4/
10
-3
Viscosidade() poise 10
-4
10
-2
10
-4
/10
-3
A densidade de um fluido supercrtico maior que a dos
gases e muito prxima a dos lquidos. Existe um relaciona-
mento direto entre a densidade de um fluido supercrtico e seu
poder de solvatao a qual, devido sua alta compressibilidade,
extremamente dependente da presso. Por exemplo a varia-
o de 1 mmHg suficiente, sob certas condies, para causar
um aumento de 10% na densidade
17
. Consequentemente, a pro-
gramao de presso uma ferramenta importantssima para
auxiliar na separao de misturas complexas. A viscosidade do
512 Carrilho et al. Quim. Nova
fluido supercrtico muito similar a dos gases; com isso a
queda de presso atravs da coluna diminuda em relao
observada em LC. Os coeficientes de difuso dos solutos so
maiores em fluidos supercrticos que nos lquidos, porm
menor que nos gases. Ento, a transferncia de massa mais
rpida em fluidos supercrticos que em fases mveis lquidas.
Isto significa uma maior eficincia por unidade de tempo, ve-
locidade linear tima mais rpida (
ot
), e tempos de anlises
menores em SFC que em LC.
Qualquer composto termicamente estvel pode ser submeti-
do s suas condies supercrticas e, portanto, servir como fase
mvel. Na prtica, so feitas outras consideraes tais como
poder de solvatao, seletividade, estabilidade trmica do
solvente e do soluto nas condies supercrticas, alm de pro-
blemas mecnicos com o aumento demasiado da presso. Por
exemplo, o uso de lcool como eluente sobre uma fase estaci-
onria de slica pode causar uma desidratao parcial do mes-
mo, resultando na olefina correspondente
18
.
Solubilidade do Soluto na Fase Mvel
As primeiras pesquisas com SFC, ainda sob o ttulo de
Cromatografia Gasosa de Alta Presso, surgiram com a separa-
o de quelatos metlicos por GC, que na maioria dos casos
eram termicamente instveis e apresentavam baixa volatilidade
nos sistemas disponveis. Klesper et al.
5
mostraram que
porfirinatos de nquel podiam ser separados em sistemas de
alta presso utilizando diferentes gases freons como fase m-
vel; cada gs apresentou suas prprias condies de separao.
Karayannis et al.
19
compararam a baixa volatilidade de al-
guns quelatos metlicos em sistema convencional de GC e,
posteriormente, mostraram a eluio dos mesmos em sistema
de alta presso em termos de reteno relativa dos compostos.
Este trabalho confirmou as concluses do trabalho anterior
5
onde os efeitos obtidos sobre a volatilidade foram causados
pela ao do solvente e no somente pela presso, pois muitos
gases altamente pressurizados no conseguiram obter a
volatilizao alcanada pelo diclorodifluorocarbono.
Baseados nos parmetros de solubilidade de Hildebrand (),
Giddings et al.
20
descreveram o poder de solvatao de gases
sob alta presso (e no volatilizao de espcies como descrito
por Klesper) mostrando que , a principal varivel do efeito
de estado, proporcional densidade do fluido:
=1,25 Pc
1/2
[r/r
(liq.)
] (13)
onde est em cal cm
-3
, Pc em atm, e r
(liq.)
,
a
densidade redu-
zida dos lquidos. O efeito de estado pode ser identificado
pelo termo [r/r
(liq.)
] enquanto que o fator 1,25Pc1/2 pode ser
associado ao efeito qumico. Giddings et al.
20
mostraram ain-
da alguns valores de presso nos quais vrios compostos de
elevada massa molecular no apresentavam migrao na colu-
na at que se atingisse determinada presso limite.
Para se ter uma idia de como a densidade influencia no
poder de solvatao (ou o ), o CO
2
, o qual em condies
normais de T e P um gs apolar, sob altas presses apresenta
um igual ao da piridina, que dos mais elevados entre os
solventes lquidos.
Na Figura 3 mostrado o efeito da presso e da temperatu-
ra de um fluido supercrtico sobre a solubilidade. Nota-se que
baixas presses, a solubilidade diminui com o aumento da
temperatura.
Seletividade
A seletividade em SFC o parmetro cromatogrfico que
permite as maiores possibilidades de alterao para que seja
possvel a eluio e separao das espcies a serem analisadas.
Alguns itens que podem modificar a seletividade so: fase
mvel, fase estacionria, temperatura, presso de trabalho,
programao de presso durante a eluio, e adio de
modificadores tanto de modo programado como isocrtico.
Um dos estudos mais detalhados sobre a seletividade com
diferentes combinaes de fase mvel/estacionria foi feito por
Sie e Rijnders
11-14
, onde foi observada a alterao da sequncia
de eluio de alguns compostos em funo destes parmetros.
Com a adio de modificadores de fase mvel, pode-se
conseguir mudar totalmente as caractersticas do fluido
supercrtico, e os novos parmetros crticos podem ser deter-
minados, com boa aproximao, por
T
c
=
a
T
a
+
b
T
b
(14)
P
c
=
a
P
a
+
b
P
b
(15)
Onde
a
e
b
so fraes molares, T
a
e T
b
suas temperatu-
ras criticas e P
a
e P
b
suas presses crticas
21
, dos solventes a e
b, respectivamente.
Razo de Fluxo
Em um sistema de HPLC normal costuma-se controlar o
fluxo da fase mvel tornando a presso do sistema uma vari-
vel dependente. Em SFC invertem-se estes parmetros. Com
o controle da presso o fluxo varia proporcionalmente afetan-
do a separao de diferentes maneiras. Schmitz e Klesper
22
afirmaram que a fluxos baixos ( 1,0 mL/min), a funo de
resoluo, Q, era praticamente constante e a fluxos maiores
decrescia rapidamente.
Gouw e Jentoft
18,23
citaram uma observao feita por
Giddings
24
onde o mnimo da curva de van Deemter, a qual
relaciona a altura equivalente a um prato (AEP ou H) em fun-
o da velocidade linear mdia, , era muito prximo ao valor
dp
D
M
ot

(16)
sendo
ot
= velocidade linear tima; D
M
= coeficiente de
difuso; dp = dimetro mdio do material de empacota-
mento (recheio)
Figura 3. Solubilidade de naftaleno em etileno supercrtico (1 atm =
1,013 bar). (adaptado da referncia 22)
Vol. 24, No. 4 Fluidos Supercrticos em Qumica Analtica 513
Neste estudo
23
, compararam-se diferentes tamanhos de par-
tculas, avaliando-se a variao H e a queda de presso (P)
atravs da coluna em funo do fluxo. A queda de presso
um efeito indesejvel em qualquer modalidade de cromatogra-
fia, ainda mais em SFC onde a base da separao cromatogrfi-
ca est no controle da presso. Se o aumento de presso causa
uma melhor solvatao, pode causar tambm uma grande queda
de presso atravs da coluna e, com isso, diminuir a densidade.
O aumento da presso aumenta a velocidade linear a qual, por
sua vez, faz com que H aumente (perda de resoluo)
25
.
Procurando sanar o problema da queda de presso com o
aumento do fluxo, Hirata e Nakata
26
apresentaram um bom
sistema dotado de duas bombas de pressurizao, uma antes e
outra depois do sistema injetor/coluna/detector. Neste sistema
foi possvel uma programao de presso sem aumento do flu-
xo ou da queda de presso.
Temperatura
O efeito da influncia da temperatura sobre o comporta-
mento cromatogrfico pode ser analisado sob duas condies:
uma a presso constante e outra sob densidade constante.
densidade constante, a dependncia do fator de reteno (k)
com a temperatura pode ser calculada por uma equao termo-
dinmica (equao de Vant Hoff)
27
.
R
H
T
1
d
k ln d
0
T

,
_

(17)
ondeH
T
0
a entalpia para transio do soluto entre a fase
mvel e estacionria, e R a constante dos gases.
presso constante, a influncia da temperatura no pode ser
tratada de uma maneira to simples. Em um de seus trabalhos,
Sie e Rjinders
13
fizeram uma extensa investigao sobre este as-
sunto. Para a maioria dos solventes, partindo-se da temperatura
ambiente, observa-se um decrscimo de k com o aumento de tem-
peratura, devido ao aumento da solubilidade do soluto. Depois da
passagem da temperatura crtica, ocorre um aumento considervel
de k. Esse aumento mais pronunciado para presses prximas
ao ponto critico e para compostos de elevada massa molecular. A
presses mais elevadas, a curva passa por um mximo, a partir do
qual retorna aos nveis observados em temperaturas menores.
Qualitativamente isto pode ser explicado pelo aumento do volu-
me livre da fase mvel a qual leva uma reduo na solubilidade
e um desvio na partio em favor da fase estacionria
28
. Com
aumento da temperatura, a presso de vapor e a solubilidade do
soluto aumentam e a concentrao na fase estacionria decresce,
sendo transferida para a fase mvel (reduzindo, assim, o valor de
k). A combinao destes efeitos pode levar a situaes curiosas
como mostrado na Figura 4, onde uma mudana na ordem de
eluio foi observada. Esse tipo de comportamento pode ser ex-
plorado para resoluo de problemas analticos, mas a dependn-
cia de presso/temperatura/densidade esto totalmente relaciona-
das entre si, e a escolha na faixa de operao crtica, como pode
ser visto na Figura 5.
Como mencionado, grficos de fator de reteno (k) contra
temperatura em SFC so caracteristicamente formados com um
pronunciado mximo acima da temperatura crtica. A variao
de log (k) com 1/T para uma srie homloga mostrada na
Figura 6, onde a distncia entre as curvas em determinado valor
de 1/T representa a seletividade (), e mostra que uma peque-
na variao na seletividade entre homlogos possvel com
uma pequena mudana na temperatura
29
. Para compostos dife-
rentes o cruzamento de curvas possvel e demonstra uma
reverso na ordem de eluio (como ilustrado na Figura 4).
Chester e Innis
30
explicaram termodinamicamente a varia-
o de log (k) com 1/T em SFC. Na Figura 7, a regio de
inclinao positiva corresponde a um comportamento tipo
cromatografia gasosa, enquanto que a regio de inclinao nega-
tiva tem como mecanismo predominante o do tipo cromatografia
lquida; a passagem pelo mximo indica uma combinao dos
mecanismos. Essa combinao pode ser dada pela expresso:
( )
RT
H 43 , 0
log
RT
H 43 , 0
k log
m s

+

(18)
Figura 4. Efeito da temperatura na separao de antraceno de
binaftila. Eluente: pentano, Presso: 40 atm; Coluna: alumina (adap-
tado da referncia 11)
Figura 5. Dependncia da densidade de CO
2
com a presso e a
temperatura. (adaptado da referncia 20).
514 Carrilho et al. Quim. Nova
onde H
s
e H
m
so, respectivamente, o calor molar parcial de
soluo do soluto na fase estacionria e fase mvel, H
m

funo da densidade da fase mvel e a razo de fases da
coluna. A interpretao da equao (18) pode levar a concluir-
se que a entalpia muda na remoo do soluto da fase estacio-
nria para a fase mvel sob condies de cromatografia gasosa
(vaporizao), sendo reduzida pela entalpia de solvatao atra-
vs da fase mvel.
do uma possvel alterao na eluio. Vrios trabalhos foram
escritos sobre o efeito da presso na eluio
11,31-33
. Sie et al.
9
estudaram a dependncia do fator de reteno com a presso
pela equao (8). Observaram que para quase todos os siste-
mas estudados, log (k) varia linearmente com a presso at um
valor prximo a P
c
, a partir do qual o decrscimo de log (k)
muito mais acentuado. Mostrou-se tambm um curioso cruza-
mento das isotermas justamente neste ponto de maior inflexo:
temperaturas menores diminuem a volatilidade dos solutos fa-
zendo com que tenham um maior k a baixas presses; acima
da presso crtica uma temperatura menor causa uma eluio
mais rpida devido ao aumento da densidade.
Jentoft e Gouw
31
mostraram o efeito da programao da
presso sobre algumas amostras de grande faixa de massa
molecular, incluindo oligmeros de poliestireno e uma mistura
de hidrocarbonetos aromticos polinucleares. Numa eluio
isobrica, o coroneno eluiu em 75 minutos enquanto que com
programao de presso ele eluiu em 25 minutos.
No diagrama Densidade-Presso (Figura 5), nas proximida-
des da regio supercrtica, a densidade no varia linearmente
com a presso. Consequentemente, uma programao linear de
presso acarretaria em uma eluio assimtrica em relao ao
espaamento numa srie homloga. Procurando contornar este
efeito, Campbell e Lee
34
desenvolveram um software onde
fazia-se o controle da densidade, levando em considerao o
nmero de termos da srie homloga.
A eluio de uma srie homloga descrita pela equao
ln(k)=A+B
o
n-mn (19)
onde A, Bo e m so constantes, n o nmero da unidade
monomrica a ser eluida e a densidade da fase mvel. Deri-
vando-se a equao (19) e escrevendo em termos de tempo de
reteno, obtm-se
t t
K
a
+

(20)
sendo K uma nova constante dependente da razo de progra-
mao de densidade, t o tempo, t o tempo de referncia,
(K e t determinam o espaamento e reteno dos componen-
tes), e
a
densidade de coeluio dos monmeros, e pode ser
calculado pela relao
ln()=B
o
-m (21)
Portanto, atravs do grfico de ln () por , obtm-se
a
quando = 1.
A programao de densidade durante uma corrida analtica
em SFC to comum e eficiente quanto a programao de
temperatura em cromatografia gasosa (GC) ou gradiente de
eluio em cromatografia lquida (LC). O aumento da presso
acarreta um aumento de densidade e, por conseqncia, todos
os efeitos acima citados. Entretanto, aumenta-se tambm a vis-
cosidade do eluente e, com isso, a queda de presso torna-se
mais pronunciada. Este efeito observado principalmente em
colunas empacotadas (recheadas) com partculas de dimetro
inferior a 40 m, provocando diminuio na densidade no fim
da coluna.
Fase Mvel
Em SFC a variedade de fases mveis grande (vide Tabela
1), permitindo a escolha do solvente que melhor preencha os
requisitos para determinada amostra. A anlise de substratos
termolbeis deve ser feita com um eluente de baixa temperatu-
ra crtica como o CO
2
, N
2
O ou trifluorometano. Como foi vis-
to na equao (13), a magnitude de P
c
proporcional a fora
do solvente ou vice-versa. Geralmente, os compostos mais
Figura 6. Variao logartmica de k contra o recproco da tempera-
tura absoluta sob presso constante de CO
2
. 1: pireno; 2: fenantreno;
3: fluoreno; 4: naftaleno, coluna: 25 cm octadecilsilano (adaptado
da referncia 29)
Figura 7. Modelo do comportamento de reteno observado em SFC.
(adaptado da referncia 30)
Presso/Densidade
O controle da presso em SFC o mais importante
parmetro operacional pois como j foi afirmado, a densidade
do fluido extremamente influenciada pela mesma, acarretan-
Vol. 24, No. 4 Fluidos Supercrticos em Qumica Analtica 515
polares possuem maiores P
c
, como por exemplo a amnia. O
pentano no estado supercrtico apresenta um muito prximo
ao do pentano lquido
20
, enquanto que o CO
2
supercrtico pos-
sui um muito mais elevado, sendo superado apenas pelo
metanol supercrtico.
A compatibilidade dos eluentes com detectores para croma-
tografia com fluido supercrtico outro importante parmetro
a ser analisado. Detectores por ionizao em chama so in-
compatveis com pentano ou qualquer outro solvente orgnico,
sendo preferido o uso de CO
2
ou N
2
O. Detectores espectrofo-
tomtricos aceitam um maior nmero de eluentes pois a maio-
ria no absorve em baixos comprimentos de onda (detector de
UV o mais comum), como o pentano, CO
2
, metanol entre
outros, mas a necessidade de uma cela em fluxo de alta pres-
so faz com que os eluentes de menor P
c
sejam os escolhidos.
Para espectrmetro de massas, so preferveis os fluidos de
menor massa molecular como o CO
2
e N
2
O. Para deteco na
regio do infravermelho praticamente s o xennio usado,
mas o CO
2
pode ser utilizado sob determinadas condies
supercrticas
35
.
A resoluo oferecida por hidrocarbonetos supercrticos
maior para os de menor massa e T
c
, tais como o etano e o
propano. Entretanto, o pentano pode apresentar tempos de an-
lises muito menores com razovel eficincia
36
.
Adicionalmente aos critrios instrumentais para a escolha
de um fluido supercrtico como fase mvel, devem ser explo-
rados outros aspectos como, por exemplo, a capacidade de
formar misturas de fluidos permitindo, assim, a utilizao de
gradiente de fase mvel similar aos empregados em cromato-
grafia lquida. Fica evidente, portanto, que as possibilidades
de manipulao da seletividade da separao em SFC so in-
meras.
No prximo artigo desta srie, ser discutida a instrumenta-
o comumente empregada em Cromatografia com Fluido
Supercrtico, tanto comercial quanto adaptada em laborat-
rio
37,38
. Na terceira parte deste tema, sero apresentadas algu-
mas aplicaes da SFC desenvolvidas no Laboratrio de Cro-
matografia (CROMA) do IQSC/USP
39,40
.
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