METROSUL IV IV Congresso Latino-Americano de Metrologia A METROLOGIA E A COMPETITIVIDADE NO MERCADO GLOBALIZADO 09 a 12 de Novembro, 2004, Foz do Iguau, Paran BRASIL Rede

de Paranaense de Metrologia e Ensaios

ERROS ENCONTRADOS NA UTILIZAO INADEQUADA DE PIPETAS

L.S. Lima 1
Instituto Nacional de Metrologia, Normalizao e Qualidade Industrial - INMETRO ; Diviso de Metrologia Mecnica; Laboratrio de Fluidos; Av. Nossa Senhora das Graas, 50 - Xerm; Duque de Caxias - R.J.; Brasil; CEP 25250-020 e-mail: laflu@inmetro.gov.br
Resumo: Existem no mercado vrios tipos de pipetas para utilizao nos laboratrios qumicos, que muitas das vezes no so usadas de forma correta, causando, desta forma, erros em sua medio. Este trabalho visa a alertar a todos que utilizam pipetas volumtricas, graduadas ou de tempo especificado em suas medies, da necessidade de se conhecer melhor o instrumento que est sendo usado, e assim, de tal forma, diminuir certos erros, apontando aos tcnicos de laboratrio a melhor forma de manuseio do equipamento para que se tenha maior confiabilidade nos resultados. Em funo disto, o Laboratrio de Fluidos do INMETRO est procurando ajudar na melhoria da qualidade dos laboratrios, podendo ser credenciados ou no a rede brasileira de calibrao (RBC), eliminando dvidas acerca de calibrao ou uso de pipetas. Palavras chave: Pipeta, calibrao, confiabilidade 1. INTRODUO Nos dias de hoje temos vrios fabricantes de vidrarias de diversos tipos. No caso das pipetas de laboratrios no diferente. Mesmo tcnicos bastante experimentados podem cometer erros devido ao desconhecimento de alguns desses tipos de pipetas, que sero cuidadosamente detalhadas neste artigo. De certo a experincia nos mostra a falta de conhecimento destas pipetas, visto que h vrias reclamaes e desacordos nos resultados de uma calibrao e at mesmo em intercomparaes laboratoriais . normal, nos casos acima mencionados, perder-se uma boa parte do tempo de trabalho revisando clculos, estudando procedimentos e tentando achar alguma coisa que justifique a diferena encontrada. Conhecendo melhor cada tipo de pipeta e suas respectivas funes de manuseio, podero ser amenizados os erros do dia-a-dia.
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2. TIPOS DE PIPETAS Segundo as normas ISO 835/1 [1] e ISO 835/2 [2] , existem hoje no mercado de trabalho pipetas de tipos 1, 2 e 3, para o uso em geral dos laboratrios. Essas pipetas podem ser graduadas ou volumtricas, podem possuir ou no um tempo especificado para o descarte do lquido, e podem ser de sopro ou no, dependendo da sua identificao e tipo. As normas ISO 1769 [3] e ASTM E969-83 [4], tambm mencionam sobre a codificao em faixas e cores para cada tipo de pipeta dependendo da sua faixa de escala e diviso. Isso quer dizer que cada pipeta tem sua cor e quantidade de faixas especficas para o seu tipo. 2.1. Pipetas do tipo 1 ( Graduadas ) Conhea agora uma pipeta do tipo 1 apresentada nesta figura:

Fig.1. Pipeta do tipo 1

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto zero (no alto da escala) at o ponto mximo indicado.

Nesse tipo de pipeta, no descartado todo o lquido, pois ela possui uma marcao limite mxima que deve ser respeitada em seu descarte. Ela no considerada uma pipeta de sopro, e se divide em duas classes (A e B) de acordo com as normas [1],[2],NBR 12617 [5] e DIN 12696 [6]. Mais adiante sero vistas as diferenas entre elas.

2.2. Pipetas do tipo 2 ( Graduadas )

Conhea agora uma pipeta do tipo 2 apresentada nesta figura:

Fig.3. Pipeta do tipo 3

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto zero (no alto da escala) at o ponto mximo no indicado. Nesse tipo de pipeta tambm descartado todo seu lquido. As consideraes para o uso da pipeta tipo 2 e suas caractersticas, so vlidas para este tipo de pipeta tambm. Segundo a norma [2], essa pipeta s se apresenta na classe B. 2.3.1 Pipetas do tipo 3 ( Tempo de 15s )
Fig.2. Pipeta do tipo 2

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto mximo (no alto da escala) at o seu descarte total. Nesse tipo de pipeta descartado todo o lquido, pois sua fabricao feita para uso integral de toda a rea de graduao que deve ser respeitada em seu descarte. Ao descartar todo lquido, a sobra que fica dentro da pipeta no deve ser considerada, porque ela construda somente para a queda livre do lquido. Embora ela seja igual a uma pipeta de sopro em seu corpo fsico e em sua graduao, ela no pode ser considerada como uma pipeta de sopro, pois no apresenta a devida identificao que a norma recomenda e tambm se divide em duas classes (A e B) que mais adiante veremos suas diferenas.

Conhea agora uma pipeta do tipo 3, com tempo de 15 segundos para o seu escoamento, apresentada nesta figura:

2.3. Pipetas do tipo 3 ( Graduadas ) Conhea agora uma pipeta do tipo 3 apresentada nesta figura:

Fig.4. Pipeta do tipo 3 com tempo de 15s

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto zero (no alto da escala) at o ponto mximo no indicado. Nesse tipo de pipeta, tambm descartado todo seu lquido. Ao completar seu descarte total, deve-se esperar um tempo de 15 segundos com a pipeta na posio vertical do recipiente. Logo aps, encostar levemente a ponta da pipeta numa da paredes do recipiente para colher a ltima gota do lquido a ser descartado. Essa pipeta no considerada uma pipeta de sopro. Em seu corpo deve constar uma escrita indicando que a pipeta de tempo especificado de 15s.

2.4.1 Pipetas de sopro tipo 3 ( Graduadas )

Conhea agora uma pipeta de sopro do tipo 3 apresentada nesta figura:

2.4 Pipetas de sopro Conhea agora uma pipeta de sopro apresentada nesta figura:

Fig.6. Pipeta de sopro do tipo 3

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto zero no alto da escala at o ponto mximo no indicado. Nesse tipo de pipeta tambm descartado todo seu lquido.

2.5 Diferenas entre as pipetas de sopro e as pipetas de sopro tipo 3 ( Graduadas )

Fig.5. Pipeta de sopro

H algumas diferenas entre a pipeta de sopro e a pipeta de sopro do tipo 3. A escala da pipeta de sopro comea do seu valor mximo, no alto do corpo da pipeta, at o zero (no indicado), enquanto a pipeta de sopro do tipo 3 comea do zero no alto do corpo da pipeta, at seu valor mximo (no indicado). A pipeta de sopro do tipo 3 ser assoprada somente em seu ponto mximo da escala, enquanto a pipeta de sopro assoprada em todos os pontos da sua faixa de escala. A pipeta do tipo 3 citada pela norma ISO 835/4 [7], mas no informa mais nada quanto sua utilizao.

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto mximo desejado, em toda a faixa da escala at o seu descarte total. Sempre que se completar o descarte do lquido da pipeta no ponto desejado, deve ser assoprada a ltima gota que restar na ponta da pipeta. Segundo as normas consultadas para construo deste trabalho, toda pipeta de sopro deve ser marcada com um pequeno anel branco prximo da parte superior. Adicionalmente, este anel pode ter uma impresso indicando que o instrumento uma pipeta de sopro ( Blow-out, souffler, ou similar ). Segundo a norma [2], essa pipeta s se apresenta na classe B.

2.6. Pipeta Volumtrica (Tempo de 15s) Conhea agora uma pipeta volumtrica, apresentada nesta figura: No comum esse tipo de pipeta ser apresentado nas normas mais usuais. Porm, de conhecimento dos fabricantes e dos laboratrios que operam com ela, que esses dois traos gravados no alto do corpo da pipeta, caracterizam uma pipeta de sopro. O mtodo operacional desse tipo de pipeta idntico ao apresentado no item anterior (2.5). 3. DIFERENAS ENTRE PIPETAS DA CLASSE A E CLASSE B 3.1. Pipetas do tipo 1 A tabela abaixo nos mostra o tempo limite de descarte do lquido para pipetas do tipo 1 das classes A e B.
Fig.7. Pipeta volumtrica com tempo 15 s Capacidade Nominal Tempo de Descarte Classe A (s) Min. Max. 7 8 10 13 15 10 12 14 17 21 Classe B (s) Min. Max. 2 2 5 5 9 10 12 14 17 21

A leitura dessa pipeta feita ajustando-se o menisco no ponto marcado (no alto da pipeta), indicando o volume desejado. Nesse tipo de pipeta tambm descartado todo seu lquido. Ela pode ser volumtrica com tempo especificado de 15 segundos, igual figura apresentada acima, ou volumtrica de sopro de acordo com a norma 835/3 [8]. O procedimento de sopro ou tempo especificado de 15 segundos, serve tanto para as pipetas graduadas como para as pipetas volumtricas.

mL 1 2 5 10 25

Fig.9. Tabela do tempo de descarte para pipetas do tipo 1

3.2. Pipetas do tipo 2 A tabela abaixo nos mostra o tempo limite de descarte do lquido para pipetas do tipo 2 das classes A e B.

2.7. Pipetas com dois traos Conhea agora uma pipeta volumtrica com dois traos apresentada nesta figura:
Capacidade Nominal mL 1 2 5 10 25

Tempo de Descarte Classe A (s) Min. 5 6 8 10 11 Max. 7 9 11 13 16 Classe B (s) Min. 2 2 5 5 9 Max. 10 12 14 17 21

Fig.10. Tabela do tempo de descarte para pipetas do tipo 2

Fig.8. Pipeta volumtrica com dois traos

3.3. Pipetas do tipo 3 A tabela abaixo nos mostra o tempo limite de descarte do lquido para pipetas do tipo 3 da classe B.
Tempo de Descarte Classe B (s) Min. 7 8 10 13 15 Max. 10 12 14 17 21

4. POSSVEIS ERROS ENCONTRADOS Como dito anteriormente, se o equipamento for usado de maneira inadequada, bem provvel que sejam encontradas vrias diferenas nos resultados das medies. Foram analisadas algumas medies, usando o equipamento com seu manuseio correto, e com possveis erros que podem ser cometidos pelo desconhecimento do equipamento, como: Uma pipeta comum sem sopro ser assoprada no descarte da ltima gota do lquido em sua ponta; Uma pipeta de sopro no ser assoprada no final do descarte do seu lquido; Uma pipeta de tempo especificado de 15 segundos, ser assoprada em vez de aguardar 15 segundos na hora do descarte de seu lquido. No levar em considerao o tempo especificado de 15 segundos de uma pipeta na hora do descarte do seu lquido. 4.1. Resultados obtidos Foram realizadas seis medies para cada comparao e os resultados comprovam que o erro pode variar consideravelmente de uma medio para outra. Os resultados esto apresentados nas tabela abaixo.
Classe B () 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,02 0,04 0,06 0,06 0,06 0,10 0,20 0,20

Capacidade Nominal mL 1 2 5 10 25

Fig.11. Tabela do tempo de descarte para pipetas do tipo 3

3.4. Tolerncia de erro para as pipetas

A tabela abaixo nos mostra a tolerncia de erro que uma pipeta das classes A e B pode ter segundo a norma [6], ASTM E 694-92 [9].

Tabela Limites de erros de pipetas Capacidade Nominal (mL) 0,5 1 2 3 4 5 10 15 20 25 50 100 200 Classe A () 0,005 0,008 0,010 0,01 0,01 0,01 0,02 0,03 0,03 0,03 0,05 0,08 0,10 Limite de erro (mL)

4.1.1. Pipeta volumtrica de sopro

Instrumento Pipeta 1mL correto Pipeta 1mL incorreto Vol. Calculado 0,999 mL 0,962 mL Incerteza 0,004 mL 0,024 mL

Tab.1. Pipeta volumtrica de sopro

4.1.2. Pipeta graduada de sopro

Fig.12. Tabela de tolerncia de erro para pipetas das classes A e B.

Instrumento Pipeta 10mL correto Pipeta 10mL incorreto

Vol. Calculado 9,992 mL 9,884 mL

Incerteza 0,010 mL 0,013 mL

Tab.2. Pipeta graduada de sopro

7.REFERNCIAS
[1] ISO 835/1 Laboratory glassware Graduated pipettes Part 1: General requirements, First edition 1981-07-01. ISO 835/2 Laboratory glassware Graduated pipettes Part 2: Pipettes for which no waiting time is specified , First edition 1981-08-01. ISO 1769 Laboratory glassware Pipettes Colour coding, First edition 1975-09-01. ASTM Designation: E 969-83 (Reapproved 1988) Standard Specification for Volumetric (Transfer) 1 Pipets , Current edition approved 1983-09-30. NBR 12617 Vidraria de laboratrio Pipeta volumtrica Formato e Dimenso - Agosto 1992 DIN 12696 - Mepipetten fr vlligen Ablauf September 1959 ISO 835/4 Laboratory glassware Graduated pipettes Part 4: Blow-out Pipettes, First edition 1981-08-01. ISO 835/3 Laboratory glassware Graduated pipettes Part 3: Pipettes for which a waiting time of 15 s is specified , First edition 1981-08-01. ASTM Designation: E 694-92 Standard Specification for Volumetric Ware1, Current edition approved 1992-02-15.

4.1.3. Pipeta graduada de tempo especificado de 15 segundos

Instrumento Pipeta 10mL correto com 15 s Pipeta 10mL incorreto 15s + sopro Pipeta 10mL incorreto sem 15s + sopro Pipeta 10mL incorreto sem 15s e sem sopro Vol. Calculado 9,915 10,015 10,018 9,913 mL mL mL mL Incerteza 0,016 0,013 0,013 0,026 mL mL mL mL

[2]

[3] [4]

[5] [6] [7]

Tab.3. Pipeta graduada de tempo especificado de 15 segundos 5. CONCLUSO Os resultados nos mostram que se as pipetas dos diversos tipos acima citados forem usadas de modo incorreto, podem ser obtidos erros considerveis nas medies. Podemos afirmar que se a construo das pipetas for feita de acordo com as normas usuais para este tipo de instrumento, auxiliar melhor aos tcnicos e usurios nos seus respectivos laboratrios. No pode ser esquecido que a limpeza bem feita das pipetas de grande importncia na utilizao do equipamento. O produto (sabo especial para laboratrios, do tipo neutro) usado na limpeza e a prpria gua devem ser da melhor qualidade possvel. recomendado que, aps a limpeza das pipetas, se faa um ltimo enxge usando gua destilada, tomando-se o cuidado de observar se na parede da pipeta no restaram gotculas de gua ou gorduras, pois, se isso ocorrer, haver necessidade de um novo processo de limpeza. Nossos resultados foram obtidos por um procedimento de calibrao de queda livre do lquido da pipeta. Foi observado que na pipeta de tempo especificado de 15 segundos, o tempo de escoamento do lquido no fez muita diferena nos resultados, porm, devemos levar em considerao que o volume do lquido do equipamento foi pequeno. No podem ser considerados os mesmos resultados para medies de volumes maiores. 6. AGRADECIMENTOS Agradecemos as tcnicas Estela Cristina Cavalcante de Farias e Tuanny de Lima Barros, do Laboratrio de Fluidos do Inmetro, pelo auxlio nas medies.

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[9]

Autor: Tcnico de Metrologia, Leandro Santos Lima, Inmetro (Diretoria de Metrologia Cientfica e Industrial / Diviso de Metrologia Mecnica / Laboratrio de Fluidos ), Av. Nossa Senhora das Graas, 50, CEP 25250-020, Duque de Caxias, Rio de Janeiro, Brasil, Tel 55 (21)2679-9040, lslima@inmetro.gov.br