INTRODUCCION

Los carbohidratos son derivados aldehdicos o cetnicos de alcoholes polioxidrilados y por lo tanto tienen las propiedades caractersticas de esos grupos como son la formacin de oxina e hidrazonas. Existen diferentes tipos de reacciones qumicas que sirven para determinar cualitativamente la presencia de carbohidratos (monosacridos, disacridos y polisacridos). Un carbohidrato que no puede ser hidrolizado en uno ms simple es llamado monosacrido. Los monosacridos ms comunes son la glucosa, la fructosa, la galactosa y la manosa. Un carbohidrato que puede ser hidrolizado en dos molculas de monosacridos es llamado disacrido. Los ms importantes son la lactosa (presente en la leche), la sacarosa (presente en el azcar comn) y la maltosa. Por su parte, aquellos carbohidratos que pueden ser hidrolizados en varias molculas de monosacridos son llamados polisacridos. Los ms comunes son el almidn y la celulosa, este ltimo es componente estructural de las plantas. Los carbohidratos se presentan en forma de azcares, almidones y fibras, y son uno de los tres principales macronutrientes que aportan energa al cuerpo humano (los otros son los lpidos y las protenas). Actualmente est comprobado que al menos el 55% de las caloras diarias que ingerimos deberan provenir de los carbohidratos. Estas molculas presentan variadas reacciones, algunas de las cuales hacen posible su identificacin. Entre las reacciones ms comnmente usadas para la identificacin de carbohidratos se encuentran: benedict, tollens, fehling, formacin de osazonas, bial, molish-udransky, seliwanoff, dishe y par polisacridos la reaccin con yodo. Dependiendo de las caractersticas qumicas de cada carbohidrato y de lo que queremos obtener se utilizara la reaccin.

Los monosacridos que comnmente se encuentra en humanos se clasifican de acuerdo al nmero de carbonos que contienen sus estructuras. Los monosacridos ms importantes contienen entre cuatro y seis carbonos.

OBJETIVO. Utilizar los mtodos de identificacin de carbohidratos, para identificar diferentes tipos de muestras que los contengan para posteriormente realizar su anlisis. METODOLOGA EXPERIMENTAL. La indicada en el manual de Bioqumica Estructural, correspondiente a la prctica 5 (Pruebas de Identificacin de Carbohidratos) de las pginas 42 - 44

Resultados: Tabla1: Resultados de las reacciones generales para carbohidratos Carbohidrato Prueba de molish + + + + + Prueba de vial Prueba de fehling + + Prueba de lugol +

Sacarosa Glucosa Ribosa Miel de abeja Jarabe de maz Papa Hidrolizado de sacarosa Hidrolizado de almidn Suero de leche Hidrolizado de papa

+ -

+ -

Observacin de polisacridos al microscopio Almidn Celulosa

Cuadro 1: Resultados de la formacin de osazonas

Anlisis de resultados: FORMACIN DE OSAZONAS

Para la tcnica de formacin de osazonas se tiene que el mecanismo general es:

Por lo cual se obtienen las estructuras planteadas en los resultados, y tomando en cuenta la estructura inicial del carbohidrato correspondiente se obtiene mediante las reacciones siguientes:

Ahora bien comparando con el proceso experimental se obtienen los valores tericos para los tiempos de formacin de cada osazona los cuales son:

 Daniel J. Pasto,Carl R. Johnson, pp.449 (manosa, 30 segundos) Entonces tomando en cuenta esto y comparando con los datos obtenidos experimentalmente ; los cuales son: Glucosa: minutos; manosa minutos; xilosa: minutos; ribosa: 30 minutos; fructosa: 3 minutos se observa que son bastante similares con los esperados tericamente. PRUEBA DE MOLISH. En esta prueba todos los carbohidratos (almidn, sacarosa, glucosa, miel de abeja y jarabe de maz) todas fueron positivas ya que en la reaccin de Molish da positiva con todos los glcidos sean o no reductores). Todos los glcidos por accin del cido sulfrico concentrado se deshidratan formando compuestos furfricos (las pentosas dan furfural y las hexosas dan hidroximetilfurfural). Estos furfuralesreaccionan positivamente con el reactivo de Molish (solucin alcohlica de alfa-naftol) dando un producto coloreado (anillo de color Rojo Violeta). Por lo tanto en cada una de las pruebas todas dieron positivo ya que contienen glcidos.

SACAROSA (Formada por glucosa y fructosa) MIEL DE ABEJA . Componentes principales. MAZ. Fructosa 28 44% Glucosa 22- 40% Sacarosa 0.2 7% La reaccin que invlucra esta prueba son las siguientes. JARABE DE Fructosa Sacarosa.

PRUEBA DE BIAL. Esta prueba se aplico con nuestras muestras (glucosa, ribosa, miel de abeja, jarabe de maz) de las cuales solo con la ribosa tuvimos un resultado positivo. Esto se debe a que la prueba de bial es especfica para pentosas (glcidos que presenten solo cinco carbonos) y en el caso de la fructosa, glucosa y maltosa encontramos que son hexosas (glcidos formados por seis carbonos). Por esta razn la ribosa que es una pentosa nos dio un resultado positivo cambiando de coloracin a una tonalidad azul, al contrario de la glucosa, la miel de abeja que est compuesta esencialmente de fructosa y glucosa y el jarabe de maz que contiene maltosa. La reaccin se basa en la formacin de un compuesto furfurico que se condensa con el orcinal del reactivo de bial como se muestra en el mecanismo de reaccin mostrado en la parte de abajo.

PRUEBA DE FEHLING. Esta prueba se aplic con muestras de sacarosa, glucosa, miel de abeja, hidrolizado de sacarosa y suero de leche, de las cuales solo la glucosa, miel de abeja y el suero de leche resultaron positivos. Este tipo de prueba da positiva con todos los glcidos reductores.El catin cprico (Cu++) del reactivo de Fehling reacciona con los glcidos reductores pasando a xido cuproso, que es un precipitado de color rojo ladrillo. Esta es una reaccin que resulta positiva slo si el glcido es reductor. Los glcidos reductores se manifiestan en medio alcalino, pero el Cu++ en ese medio tiende a precipitar espontneamente como xido cprico (que en esa forma no reacciona), de manera que es necesaria la presencia de tartrato doble de sodio y potasio en el reactivo para "secuestrar" al catin Cu++, a fin de evitar la formacin del xido cprico, y permitir que reaccione con los glcidos reductores.

En el disacrido Reductor tiene un enlace que si interacta con el cobre y produce la reaccin de fehling. A diferenncia que en el disacrido no reductor sus enlaces se encuentran unidos y nunguno interacciona con el Cobre lo que impide que se lleve la reaccin Es por esto que debido a las estructuras de la sacarosa y el hidrolizado de sacarosa no son reductores por eso no hubo reaccin de Fehling.

PRUEBA DE LUGOL. Esta prueba se le realizo a nuestras muestras (almidn, papa, hidrolizado de almidn, hidrolizado de papa) en el solo dio positivo en el almidn y la papa esto se debe a que el lugol solo reacciona con polisacridos (glcidos de ms de diez monosacridos), en la prueba realizada con el hidrolizado de almidn y de papa no hubo reaccin debido a que estos al ser hidrolizados se reducen a monmeros con lo cual ya no son polisacridos si no monosacridos y no reaccionan con el lugol. Esta prueba da positiva en polisacridos.

El color que dan los polisacridos con el lugol se debe a que el I2 ocupa espacios vacios en las hlices de la cadena de unidades de glucosa, formando un compuesto de ilusin que altera las propiedades fsicas del polisacrido especialmente la absorcin lumnica. Con el almidn da color azul.

Bibliografa Bohinsky R. (1998). Bioqumica. Quinta Edicin, Editorial Pearson Education, Mxico D.F. Pg. 111-112 Daniel J. Pasto, Carl R. Johnson Determinacin de estructuras orgnicas. Ed. Reverte. pp449 Horton Robert (1195). Bioqumica. Prentice Hall. Edo. De Mex. Pg. 8.1 8.27 http://www.ehowenespanol.com/diferentes-cristales-osazona-info_185415/

http://docencia.izt.uam.mx/japg/RedVirtualJAP/CursoDRosado/2_EstructuradeCompuestosBioqui micos/9-1_ReaccionesIdentificacion.pdf