Material
Para as amostras
Água
Corante alimentar
Glicerina (disponível nas farmácias)
Pipetas descartáveis
Preparação
E
7. Ligue as 5 pilhas, encaixando o pólo positivo de umas no
pólo positivo das outras. Ligar uma das extremidades dos
cabos aos dois pólos das pilhas disponíveis e a outra
extremidade aos eléctrodos. O sistema eléctrico deverá
agora estar pronto a utilizar (Ilustração E)
9. Quando a preparação de gel estiver pronta, verta a solução tampão suficiente para
cobrir o gel solidificado. Verifique se encheu o espaço deixado pelo gel cortado e se
o gel está completamente submerso.
10. Remova o pente puxando suavemente sem contrair o gel. Os poços devem ser
preenchidos com solução tampão.
11. Utilize a pipeta com ponta de agulha para transferir ~ 10 μl de cada amostra para um
poço vazio. O volume da ponta fina da pipeta é de cerca 10 μl. Coloque a ponta
directamente em contacto com a solução tampão acima do poço e esprema a amostra
suavemente para dentro do poço. Ela deve cair no poço,
pois é mais densa do que a solução tampão ao redor. Deve
usar uma nova pipeta para cada amostra para evitar a
contaminação entre amostras. Se tiver apenas algumas
pipetas, enxagúe bem a ponta numa taça de água antes da
reutilização (Ilustração F).
F
12. Quando todas as amostras estiverem carregadas, ligue o fio
condutor desde a bateria aos eléctrodos presos em fios de
aço inoxidável fixados à caixa. Ligue o terminal negativo
ao eléctrodo na parte superior do gel (perto do pente) e o
terminal positivo ao eléctrodo na parte inferior do gel.
Deve ver bolhas a formar-se ao longo dos eléctrodos,
quando o circuito estiver pronto (Ilustração G).
G
13. Aguarde entre 15-20 minutos e observe o que acontece a cada amostra.