Anda di halaman 1dari 21

BAB I PENDAHULUAN

I. LATER BELAKANG Prednisolon adalah glukokortikoid sintetik, ia memiliki lima kali potensi kortison asetat tetapi dalam dosis setara menyebabkan retensi natrium berkurang dan cairan meskipun beresiko lebih terhadap lambung. Metode kromatografi dan spektrofotometri diperkenalkan untuk penentuan prednisolon. Tetracycline adalah klasik, khas, generik dan relatif murah,golongan tetrasiklin adalah obat pilihan pada infeksi dengan Mycoplasma pneumoniae, klamidia, rickettsia dan beberapa spirochetes. Mereka digunakan dalam rejimen kombinasi untuk mengobati penyakit tukak lambung dan duodenum yang disebabkan olehHelicobacter pylori. Metode terakhir untuk penentuan tetrasiklin termasukmetode volumetrik, metode elektrokimia, metode spektrofotometri dan metode kromatografi. Kloramfenikol bersifat bakteriostatik

berdasarkanpenghambatanbiosintesisproteinbakteridan pada tingkat lebih rendah dalam ribosom inang. kloramfenikol adalahantibiotik spektrum luas aktif terhadap bakteri aerobikdan anaerobik, gram positif dangramnegatif.Hal ini juga aktif terhadap rickettsia tetapi tidak pada klamidia. Metodeterakhir untukpenentuankloramfenikol termasuk kromatografidanmetode spektrofotometri.Kombinasiprednisolon dengan tetrasiklin atau dengan kloramfenikolmemberikan aktivitasantibakteri yang sangat lokal terhadap Grampositive dan mikroorganisme Gram negatif,spesifik antiinflamasi dan antialergi aksi. Spektrofotometri derivatif adalah analisisuntuk menyelesaikan beberapa

campuransenyawa dengan spektrum tumpang tindih. Zero-crossing diukur dengan mencari nilaiturunan dari kurva jumlah analit dangangguan pada nilai absorbansi (panjang gelombang)sesuai dengan zero-crossing. Spektrum rasio derivatif

mampumenyelesaikan tumpang tindihspektrum. Dalam metode ini, spektrum penyerapan campuran dicatat dan dibagi, amplitudo-by-amplitudo, dengan spektrum penyerapan larutan standar salah satu komponen, dan kemudian turunan pertama dari spektrum rasio diperoleh. Konsentrasi komponen lain kemudian ditentukan dari grafik kalibrasi.

Metode kalibrasi multivariat diterapkan spektralData sedang semakin digunakan untuk analisisfarmasi. Classical least squares (CLS) dan principalcomponents regression(PCR) analisis sebagian besarmetode multivariat sederhana yang dapat dilakukandengan perangkat lunak statistik mudah diakses.Teknik CLS mengasumsikan bahwa respon (absorbansi)di masing-masing frekuensi (panjang gelombang) sebanding denganunit konsentrasi komponen. Model adalah kesalahandiasumsikan berasal dari pengukuran spektralabsorbansi. Jadi CLS mensyaratkan bahwa semua campurkomponen kimia yang dikenal dan termasuk dalamData kalibrasi ditetapkan. CLS memiliki keuntungan dari peningkatanpresisi saat menggunakan banyak frekuensi,karena sinyalrata-rata. Kalibrasi diwujudkan dengan merekam spektrum dim campuran standar, yang diketahui panjang gelombang n-komposisi komponen c. Spektrum (absorbansiatau emisi) disusun menjadi kolom matriks Y (dimensi n x m), dengan komposisi masingmasingcampuran membentuk kolom konsentrasi matriks X ( c x m ) Y=K.X (1)

Dengan pengetahuan sebelumnya dari X dan dengan merekamdata untuk Y, maka matriks sensitivitas, K, dapatdihitung, tapi setelah rearrengment persamaan 1persamaan berikut dengan mengalikan persamaankomponen dengan nilai Xt sebagai : Y . Xt = K . X . Xtkemudian, K = (X. Xt) -1.Y. Xt (2)

Untuk menghindari berada di bawah yang ditentukan, harus adapengukuran pada panjang gelombang lebih dari adakomponen (yaitu n c ). Jika n > c maka komponenkonsentrasi dalam campuran yang tidak diketahui diperolehdari spektrum oleh, Xunknown = (Kt .K)-1 . Kt.Yunknown Metode ini CLS secara intuitif menarik karenadidasarkan pada beberapa hubungan umum diasumsikan, misalnya Hukum Beers, dan dapat digunakan untuk cukup komplekskomposisi campuran kalibrasi , yaitu yangkonsentrasi masing-masing absorbansi. PCR adalahprosedur dua langkah, pada langkah pertama, satu

memperkirakanjumlah komponen utama oleh satu atau lebihdari kriteria berikut, persentase menjelaskanvarians, mengingat nilai satu kriteria, uji Scree dancross validasi.

Mereka dapat dianggap sebagaivariabel baru yang meringkas secara optimal variasiyang terjadi dalam spektrum, dalam langkah kedua, CLSditerapkan pada variabel laten yang baru diperoleh. Ketika co-linearitas antara variabel asli terjadi, plot komponen utama sering membiarkan interpretasi yang lebih baik dari variasi yang diamati dalam kumpulan data dari plot variabel asli yang dipilih oleh CLS. Sebagai metode pemodelan, itu kurang performant dari CLS saat melakukan prediksi dalam domain kalibrasi dan ketika model memang linier. Hal ini lebih dapat diandalkan jika ekstrapolasi mungkin diperlukan. Ini adalah metode linear, tapi ia mampu tampil cukup baik untuk data cukup nonlinear. Seperti CLS, itu adalah metode yang umum.

II.

TUJUAN Menunjukkan kemampuan turunan pertama, rasio spektrofotometri derivatif, classical least squares (CLS) dan principle component regression(PCR) untuk analisis simultan mempelajari obat dalam campuran tanpa perlu atau awal langkah pemisahan.

BAB II METODE EKSPERIMEN


Alat : Spektrofotometer UV Vis (Milton Roy, Amerika Serikat) Kuvet 1CM Computer Pentium III750Mhz Alat-alat gelas Bahan : Tetrecort salep Cortiphen tetes mata dan salep Etanol absolut

Cara kerja : Persiapan larutan stock dan standar Larutan stok yang otentik yang dibuat dengan melarutkan jumlah yang akurat ditimbang (50mg) dari obat dipelajari dalam 50 mL etanol. Penambahan larutan dengan sesuai dari larutan stok diselesaikan secara kuantitatif dengan pelarut untuk mendapatkan larutan standar kerja yang cocok sesuai dengan rentang kalibrasi linier untuk setiap obat.

Pembuatan larutan sampel dari bentuk sediaan farmasi Untuk salep: Lima tabung salep dievakuasi dalam gelas bersih dan dicampur dengan baik, timbang seberat 5 g salep diekstraksi pada pemanasan dan pengadukan dengan pelarut yang cocok dan difiltrasi untuk 50 mL labu ukur. Bagian pertama dari filtrat dibuang. Penambahan larutan

dengan berbeda larutan disiapkan diencerkan dengan etanol untuk menghasilkan pengenceran yang berbeda mirip dengan yang di bentuk sediaan. Untuk tetes mata: 10 ml cortiphen tetes mata setara dengan 50 mg prednisolon dan 20

mgkloramfenikol diencerkan dengan etanol 50 mL dalam labu ukur50 mL, 5 mL diencerkan dengan 50 mL dengan etanol dalam labu ukur 50 mL dimana setiap 1 mL mengandung 100 g prednisolon dan 40 g kloramfenikol. Penambahan larutan berbeda larutan disiapkan diencerkan dengan etanol untuk menghasilkan pengenceran dengan konsentrasi yang berbeda mirip dengan yang di bentuk sediaan. prosedur umum Prosedur untuk penentuan rentang linearitas dari larutan standar Untuk mendapatkan kurva kalibrasi untuk menerapkan analisis kuantitatif enam larutan dari masing-masing komponen murni, masing-masing campuran disiapkan dengan konsentrasi dalam kisaran kalibrasi. Kisaran tersebut sebelumnya diverifikasi untuk mematuhi hukum Beers untuk masing-masing sampel obat. Prosedur untuk persiapan laboratorium disiapkan campuran larutan Campuran disiapkan disusun oleh sejumlah campuran yang diketahui larutan kerja salah satu komponen campuran dengan jumlah yang telah diketahui larutan kerja dari komponen lain dalam proporsi yang berbeda (rasio) untuk memverifikasi ketepatan metode untuk analisis campuran tersebut dan mencocokkan formulasi komersial yang memiliki konsentrasisebanding. Prosedur persiapan untuk larutan sampel Larutan sempel dipersipkan dari Pengenceran yang berbeda dalamlarutankerja. dosis diuji untuk mengetahui kandungan obat sebagai prosedur untuk langkah prediksi.

Prosedur untuk teknik penambahan standar Sebagian larutan kerja bentuk sediaan yang kuantitatif ditransfer ke enam labu volumetrik, maka bagian seri larutan kerja otentik kedua obat yang ditambahkan ke dalam tiap labu dan larutan telah diselesaikan dengan menggunakan pelarut dan diukur pada panjang gelombang tertentu.

BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN


Spektrum absorpsi untuk obat diteliti menunjukkan spektrum yang tumpang tindih. spektrum yang tumpang tindih dapat dengan mudah diberikan oleh (Di) 0,5, dimana Di adalah besarnya ketergantungan yang dapat dihitung untuk campuran dua komponen dari persamaan:

dimana k1 dan k2 adalah I x n matriks koefisien regresi untuk obat dipelajari dan kt adalah dialihkan k matriks.

Analisis spektrofotometri derivatik teknik zero-crossing Pada gambar 1 dan 2 menunjukkan bahwa penyerapan spektrum prednisolon tumpang

tindih dengan spektrum penyerapan tetrasiklin dan kloramfenikol, masing-masing. Dalam sesuai derivatif pertama (1D) kurva (Gambar 3), tetrasiklin hidroklorida menunjukkan baik penyerapan turunan pertama (1D) nilai pada = 245,5 dan 350,5 nm sedangkan prednisolon tidak memilikikontribusi. Di sisi lain, prednisolon menunjukkan suatu penyerapan pada derivatif pertama (1D) = 236,5 dan 266,5 nm dimana tetrasiklin hidroklorida absorbansinya adalah nihil. Dalam Gambar 4, kloramfenikol menunjukkan baik penyerapan pada turunan pertama (1D) = 242,5 dan 293.5nm sedangkan prednisolon tidak memiliki kontribusi. Prednisolon menunjukkan suatu penyerapan maksimum pada turunan pertama (1D) pada = 234,5 dan 272,5 nm dimana absorbansi kloramfenikol adalah nihil. Parameter analisis untuk uji campuran biner (campuran I dan campuran II) dari obat yang diteliti disajikan pada Tabel.1

Teknik rasio Derivatif Pengaruh untuk mendapatkan turunan pertama dari spektrum rasio serta pengaruh

konsentrasi pembagi pada grafik kalibrasi untuk campuran diusulkan dipelajari dalam rangka untuk memilih faktor-faktor yang mempengaruhi penentuan terbaik. Hasil penelitian menunjukkan bahwa = 3 nm dianggap yang paling cocok, sedangkan konsentrasi pembagi tidak berpengaruh signifikan terhadap hasil uji untuk campuran dipelajari. Untuk penentuan prednisolon, spektrum penyerapan prednisolon dibagi dengan larutan standar tetrasiklinhidroklorida. (12,4 g/mL) dan kloramfenikol (18 g/mL) seperti yang ditunjukkan pada Gambar 5 dan 6, masing-masing. Derivatif pertama dari spektrum rasio dikembangkan dihitung dengan = 3 nm. Gambar 7 dan 8 menunjukkan bahwa prednisolon dapat ditentukan dengan mengukur amplitudo pada banyak panjang gelombang dimana tetrasiklinhidroklorida dan kloramfenikol tidak memiliki kontribusi, tapi itu menemukan bahwa amplitudo pada 260.5 dan 266,5 nm (untuk prednisolon dalam campuran I) dan 227,5 dan 245,5 nm (untuk prednisolon dalam campuran II) memberikan hasil yang paling akurat dan sensitif. Dalam penentuan tetrasiklin hidroklorida dan kloramfenikol dengan teknik rasio derivatif, spektrum penyerapan larutan standar tetrasiklin HCl atau kloramfenikol dibagi (amplitudo dengan amplitudo pada panjang gelombang yang sesuai) dengan penyerapan spektrum larutan standar 10 dan 20 g/ml prednisolon untuk campuran I dan campuran II, masing-masing, untuk memperoleh rasio spektrum yang sesuai (Gambar 9 dan 10). Derivatif pertama dari spektrum rasio yang diperoleh dihitung dengan = 3 nm, (Angka 11 dan 12). Dari angka tersebut, dapat diketahui bahwa, baik tetrasiklin hidroklorida dan kloramfenikol dapat ditentukan dengan adanya prednisolon dengan mengukur amplitudo pada 227,5 dan 287,5 nm (campuran I) dan pada 218,5 dan 287,5 nm (campuran II), di mana tidak ada kontribusi dari prednisolon. Dalam kondisi tertentu dan panjang gelombang tertentu untuk setiap obat, persamaan regresi untuk obat diturunkan menggunakan least-squares regession analys, Tabel 1 merangkum hasil yang diperoleh untuk semua teknik yang digunakan, hasilnya termasuk intercepts (a), slope (b), koefisien korelasi (r), koefisien determinasi (r2), limit of detection (LOD) dan limit of quantification (LOQ)

Teknik validasi dari spektofotometri derivatif I. Linearitas

Linearitas dari metode yang diusulkan dievaluasi untuk setiap obat dengan menganalisis serangkaian konsentrasi yang berbeda masing-masing obat dipelajari dalam kisaran dinyatakan dalam Tabel 1 dan dalam dan tanpa adanya konsentrasi tertentu dari komponen lain dalam campuran. Pengujian dilakukan sesuai dengan kondisi eksperimental ditetapkan sebelumnya. Rasio derivatif pertama untuk setiap obat diukur, pada panjang gelombang tertentu (Tabel 1) dan diplot terhadap konsentrasi. Sebuah garis lurus diperoleh dalam setiap kasus. Analisis statistik dari grafik ini menggunakan metode kuadrat terkecil dibuat untuk slope, mencegat dan koefisien korelasi. Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa linearitas grafik kalibrasi dan kepatuhan dengan hukum Beers telah divalidasi, seperti yang digambarkan oleh nilai-nilai yang sangat baik dari koefisien korelasi dari persamaan regresi dan nilai-nilai kecil penyadapan. Selain itu, kemiringan grafik kalibrasi untuk setiap obat adalah independen terhadap konsentrasi dari komponen lain dalam campuran (Tabel 1). Table I Parameter analisis untuk penentuan prednisolon, hidroklorida tetrasiklin dan kloramfenikol dengan teknik spektrofotometri derivatif yang diusulkan.
Linear regretion equation parameters Standard of solution Tetracycline HCl (mix I) technique D (Zero crossing) Conc. (g/ml) 5-30 5-30 D (derivative ratio) 5-30 (nm) 245.5 350.5 227.5 a -0.0055 0.00048 -0.0199 b 0.00075 0.00057 -0.0071 R 0.9998 0.9999 0.9999 r2 0.9996 0.9998 0.9998 LOD (g/ml) 0.25 0.32 1.44 LOQ (g/m l) 0.84 1.06 4.80

5-30 Prednisolone (mix I) D(zero crossing) 5-30 5-30 D (Derivative ratio) 5-30

287.5 236.5 266.5 260.5

1.04548 -0.005 -0.0004 -0.0025

0.9304 0.00078 -0.0013 -0.148

0.9999 9 0.9999 0.9999 0.9998

0.9998 0.9998 0.9998 0.9996

1.11 0.32 0.60 1.02

3.71 1.04 2.00 3.39

5-30 Chloramphenic ol D (zero crossing) 10-35

266.5 242.5

0.00133 0.00329

-0.0133 0.00073

0.9998 0.9999

0.9996 0.9998

1.12 0.60

3.78 2.00

(mix II) D (derivative ratio) Prednisolone (mix II) D (zero crossing)

10-35 10-35 10-35 10-35 10-35 D (derivative ratio) 10-35 10-35

293.5 218.5 287.5 234.5 272.5 227.5 245.5

0.0002 0.00354 0.0046 0.01134 0.00059 -0.0309 0.01237

0.00051 0.00559 0.03808 0.00255 0.0014 0.02317 -0.0180

0.9999 0.9997 0.9999 0.9999 0.9999 0.9997 0.9998

0.9998 0.9994 0.9998 0.9998 0.9998 0.9994 0.9996

0.62 2.20 0.48 0.40 0.63 1.64 1.25

2.08 7.35 1.60 1.33 2.08 5.46 4.18

a: intersep, b: slope, r: koefisien korelasi, r2: koefisien determinasi, LOD= 3/S, LOQ= 10/S (di mana adalah standar deviasi intercept dan S adalah sensitivitas).

Gambar 1 Tingkat tumpang tindih seperti yang ditunjukkan oleh spektrum penyerapan tetrasiklin hidroklorida (>) (30 g / mL) dan prednisolon (---) (30 g / mL)

Gambar 2 Tingkat tumpang tindih seperti yang ditunjukkan oleh spektrum penyerapan kloramfenikol (>) (30g/mL) dan prednisolon (---) (15 g/mL).

Gambar 3 penentuan turunan Pertama dari tetrasiklin hidroklorida (>) di 245,5 dan 350,5 nm dan prednisolon (---) di 236,5 dan 266,5 nm menggunakan teknik spektrofotometrizerocrossing.

Gambar 4 penentuanturunanPertama kloramfenikol (>) di 242,5 dan 293,5 nm dan prednisolon (---) di 234,5 dan 272,5 nm menggunakan teknik spektrofotometrizero-crossing.

Gambar 5 Rasio spektrum prednisolon (5-30 g/mL). Bilangan pembagi adalah 12,40 g/ml tetrasiklin hidroklorida

Gambar 6 Rasio spektrum prednisolon (10-35 g/mL). Bilangan pembagi adalah 18 g/mL kloramfenikol.

Gambar 7 Turunan pertama rasio spektrum prednisolon (5-30 g/mL). Bilangan pembagi adalah 12,40 g/mL tetrasiklin hidroklorida.

Gambar 8 Turunan pertama rasio spektrum prednisolon (10-35 g/mL) Bilangan pembagi adalah 18 g/mL kloramfenikol.

Gambar 9 Rasio spektrum hidroklorida tetrasiklin (5-30 g/mL) Bilangan pembagi adalah 10 g/mL prednisolone

Gambar 10 Rasio spektrum kloramfenikol (10-35 g/mL) Bilangan pembagi adalah 20 g/mL prednisolon.

Gambar 11 Pertama rasio spektrum turunan dari tetrasiklin hidroklorida (5-30 g/mL) Bilangan pembagi adalah 10 g/mL prednisolon.

Gambar 12 Rasio Pertama spektrum turunan kloramfenikol (10-35 g/mL) Bilangan pembagi adalah 20 g/mL prednisolon

II.

Akurasi Penelitian ini dilakukan dengan penambahan jumlah yang diketahui dari tiap obat dengan plasebo yang mengandung baik eksipien saja atau konsentrasi tertentu dari komponen lain dalam campuran. Setiap analit diuji pada tingkat yang berbeda di bawah dan di atas klaim label masing-masing. Campuran yang dihasilkan diuji dan

akurasi kemudian dihitung dari hasil uji sebagai persentase analit ditemukan oleh pengujian tersebut. Para pemulihan baik diperoleh (Tabel 2-5) menunjukkan bahwa akurasi yang baik dari metode yang diusulkan dan tidak ada gangguan dari eksipien dan komponen lain yang hadir dalam bentuk sediaan. Tabel 2 Analisis statistik hasil yang diperoleh untuk uji prednisolon dalam campuran I oleh diusulkan metode spektrofotometri derivatif
Statistical Reported D (zero crossing) parameter methods* 236.5 266.5 nm nm Pure X 99.60 100.25 100.10 S 0.72 0.82 0.69 n 6 6 6 S 0.51 0.67 0.48 t 1.459 1.228 F 1.297 1.089 Laboratory X 99.0 99.82 99.91 prepare S 0.45 0.76 0.79 mixtures n 5 5 5 S 0.20 0.58 0.62 t 2.076 2.238 F 2.2852 3.082 Tetra cort X 99.0 98.50 99.04 Ointment S 0.45 0.20 1.10 30/5 n 5 5 5 S 0.20 0.04 1.21 t 1.816 0.000 F 5.062 5.975 Standard X 99.95 99.99 addition S 1.10 0.28 technique S 1.21 0.08 D derivative ratio 260.5 nm 266.5 nm 99.56 99.68 0.89 0.88 6 6 0.79 0.77 0.068 0.172 1.528 1.494 99.38 99.36 1.00 1.32 5 5 1.00 1.74 0.723 0.734 5.812 4.938 100.00 99.00 1.00 1.00 5 5 1.00 1.00 2.039 0.00 4.938 4.938 98.22 99.01 0.32 0.45 0.11 0.09

Nilai teoritis pada batas kepercayaan 95% adalah; t = 2,306 dan F = 6.39 (n1 = 5, n2 = 5); t = 2,228 dan F = 5.05 (n1 = 6, n2 = 6), X = berarti, n = jumlah pengamatan, S = standar deviasi; S2 = varians III. Presisi Untuk menguji pengulangan dari metode yang diusulkan, penentuan terpisah pada tingkat konsentrasi yang berbeda dilakukan untuk setiap obat baik sendiri atau dengan adanya konsentrasi tertentu dari komponen lainnya. Hasil yang diperoleh (Tabel 2-5) menunjukkan bahwa, standar deviasi relatif kurang dari 2%, yang mengindikasikan tingkat presisi yang tinggi dari metode yang diusulkan.

IV.

Selektivitas

Metode selektivitas dicapai dengan menyiapkan campuran yang berbeda dari obat diuji dalam rentang linearitas. Campuran mengandung jumlah bervariasi dari satu komponen dan jumlah konstan yang lain. Campuran disiapkan laboratorium dianalisis sesuai dengan prosedur sebelumnya. Turunan pertama dari nilai rasio untuk setiap komponen diukur pada panjang gelombang tertentu (Tabel 1). Analisis statistik data menunjukkan bahwa kemiringan grafik kalibrasi untuk setiap obat adalah independen pada konsentrasi komponen lain dari campuran. Ini berarti bahwa turunan pertama dari nilai amplitudo rasio campuran itu hanya fungsi dari konsentrasi obat pada panjang gelombang tertentu. Akibatnya, hasil yang diperoleh (Tabel 2-5) juga menunjukkan selektivitas tinggi dari metode yang diusulkan dan potensinya untuk penentuan simultan campuran ini.

Multivariate Calibration Analysis Spektrum absorpsi dari obat yang diteliti ditunjukkan pada Gambar 1 dan 2. Seperti

dapat dilihat, Spektral yang tumpang tindih terjadi di wilayah 220-364 nm dan 212-320 nm, untuk komponen campuran I dan campuran II, masing-masing. Tingkat spektral tumpang tindih diberikan oleh (Di)
0.5

. Dalam kasus senyawa saat ini dipelajari, spektrum

menyebabkan Di = 0,50 menyiratkan 70,70% dan 0.464 menyiratkan 68.12% tumpang tindih spektrum untuk campuran I dan campuran II, masing-masing. Tabel 6 menunjukkan jumlah sebenarnya dan diprediksi kesalahan (%) dari obat yang dipelajari. Hasil mengkonfirmasi tingkat tinggi perjanjian dan menunjukkan bahwa kedua metode yang cocok untuk analisis dalam domain yang diberikan untuk masing-masing obat. Beberapa campuran disiapkan menjadi sasaran CLS dan analisis PCR untuk mengkonfirmasi kesesuaian model kalibrasi untuk penentuan obat dipelajari dalam larutan sampel. Tabel 7 merangkum hasil yang diperoleh untuk laboratorium campuran biner disiapkan disarankan. Seperti bisa dilihat, konsentrasi diprediksi oleh model yang sangat dekat dengan konsentrasi nyata, hasil dalam semua kasus yang memuaskan. Di sisi lain, hasil untuk bentuk sediaan komersial dan laboratorium disiapkan campuran dengan konsentrasi sebanding yang ditemukan dicocokkan. Hal ini menunjukkan bahwa, eksipien ini atau tambah dan aditif tidak mengganggu penentuan.

Selain itu, hasil untuk bentuk sediaan yang dibandingkan dengan yang diperoleh dengan menerapkan metode yang digunakan. Seperti terlihat pada Tabel 8, hasilnya yang sesuai dari prosedur dilaporkan seperti yang ditunjukkan oleh t hitung dan nilai F. Tabel 3 Analisis statistik hasil yang diperoleh untuk uji tetrasiklin hidroklorida dengan teknik spektrofotometri derivatif yang diusulkan.
Statistical Reported D (zero crossing) D derivative ratio parameter methods* 245.5nm 350.5nm 227.5 nm 287.5 nm Pure X 100.8 100.21 99.91 99.98 100.12 S 0.68 1.11 1.1 1.21 0.32 N 6 6 6 6 6 S 0.46 1.23 1.21 1.46 0.10 T 1.110 1.686 1.447 2.138 F 2.665 2.617 3.166 3.202 Laboratory X 100.50 100.17 99.53 99.75 99.92 prepare S 0.40 1.00 0.96 0.91 0.65 mixtures N 5 5 5 5 5 S 0.16 1.00 0.92 0.83 0.42 T 0.685 2.086 1.687 1.699 F 6.250 5.760 5.176 2.641 Tetra cort X 100.50 101.0 100.57 100.11 101.0 Ointment S 0.40 0.42 0.65 0.20 0.37 30/5 N 5 5 5 5 5 S 0.16 0.18 0.42 0.04 0.14 t 1.976 0.472 2.000 1.976 F 1.000 3.062 4.000 1.000 Standard X 100.05 100.05 9.00 98.99 addition S 0.82 1.39 0.91 0.86 technique S 0.67 1.93 0.58 0.60

Nilai teoritis pada batas kepercayaan 95% adalah; t = 2,306 dan F = 6.39 (n1 = 5, n2 = 5); t = 2,228 dan F = 5.05 (n1 = 6, n2 = 6), X = berarti, n = jumlah pengamatan, S = standar deviasi; S2 = varians * Dilaporkan metode untuk otentik [27], metode untuk laboratorium campuran olahan dan preparat farmasi dilaporkan [28]

Tabel 4 Analisis statistik hasil yang diperoleh untuk uji prednisolon dalam campuran II oleh diusulkan metode spektrofotometri derivatif.
Statistical Reported D (zero crossing) parameter methods* 234.5 272.5 nm nm X 99.60 99.91 99.93 S 0.72 0.47 0.89 D derivative ratio 272.5 nm 245.5 nm 99.91 99.98 0.75 0.98

Pure

n S t F Laboratory X prepare S mixtures n S t F Cortiphen X Drop S 6/15 n S t F Cortiphen X Ointment S 1/0.5 n S t F Standard x edition S technique S X S S

6 0.51 99.00 0.45 5 0.20 99.54 0.49 3 0.24 99.54 0.49 3 0.24 -

6 0.22 0.88 2.35 100.03 0.97 5 0.94 2.16 4.64 100.20 0.20 3 0.40 2.160 6.002 99.80 0.31 3 0.10 0.777 2.498 99.84 0.35 0.12 99.50 0.41 0.17

6 0.79 0.70 1.55 99.81 0.79 5 0.63 1.98 3.11 100.20 0.79 3 0.62 1.230 2.599 100.20 0.80 3 0.64 1.219 2.666 99.60 0.30 0.09 99.67 0.53 0.28

6 0.57 O.74 1.11 99.80 0.77 5 0.59 2.01 2.91 99.53 0.57 3 0.33 0.023 1.353 100.60 0.81 3 0.66 1.939 2.733 98.14 0.42 0.18 97.97 0.51 0.15

6 0.96 0.77 1.88 99.87 0.72 5 0.52 2.30 2.56 99.93 0.39 3 0.15 1.079 1.79 100.00 0.86 3 0.74 0.805 3.080 98.67 0.26 0.31 98.00 0.45 0.68

Nilai teoritis pada batas kepercayaan 95% adalah; t = 2,306 dan F = 6.39 (n1 = 5, n2 = 5); t = 2,228 dan F = 5.05 (n1 = 6, n2 = 6); t = 2,776 dan F = 19,0 (n1 = 3, n2 = 3), X = berarti, n = jumlah observasi, S = standar deviasi; S2 = varians * Dilaporkan metode untuk otentik [27], metode untuk laboratorium campuran olahan dan preparat farmasi dilaporkan [28].

Tabel 5 Analisis statistik hasil yang diperoleh untuk uji kloramfenikol oleh teknik spektrofotometri derivatif yang diusulkan.
Statistical Reported D (zero crossing) D derivative ratio parameter methods* 242.5nm 293.5nm 218.5 nm 287.5 nm X 99.90 100.11 100.56 100.04 100.21

Pure

S n S t F Laboratory X prepare S mixtures n S t F Cortiphen X drop 6/15 S n S t F Cortiphen X ointment S 1/0.5 n S t F Standard X addition S technique S X S S

0.93 6 0.87 99.68 0.84 5 0.71 99.50 0.87 3 0.75 99.50 0.87 3 0.75 -

0.63 6 0.40 0.458 2.179 99.81 0.91 5 0.83 0.235 1.174 100.80 0.47 3 0.22 2.277 3.426 99.00 o.32 3 0.10 0.934 7.392 100.20 0.56 0.31 98.80 0.40 0.16

0.96 6 0.92 1.210 1.066 100.11 0.84 5 0.71 0.809 1.000 100.33 1.26 3 1.59 0.939 2.098 99.00 0.37 3 0.14 1.916 5.529 99.70 0.71 0.50 100.10 0.36 0.13

0.96 6 0.92 0.257 1.066 100.74 1.19 5 1.42 1.627 2.007 100.50 1.36 3 1.84 1.073 2.444 99.70 1.10 3 1.20 0.247 1.599 99.58 0.66 0.51 99.01 0.34 0.10

0.58 6 0.34 0.693 2.571 99.10 1.15 5 1.32 0.911 1.874 98.50 0.59 3 0.35 1.648 2.174 99.00 0.77 3 0.59 0.745 1.277 99.54 0.65 0.55 98.78 0.40 0.12

Nilai teoritis pada batas kepercayaan 95% adalah; t = 2,306 dan F = 6.39 (n1 = 5, n2= 5); t = 2,228 dan F = 5.05 (n1 = 6,n2 = 6); t = 2,776 dan F = 19,0 (n1 = 3, n2 = 3) X = berarti, n = jumlah observasi, S = standar deviasi; S2 = varians * Dilaporkan metode untuk otentik [26], metode untuk campuran disiapkan laboratorium dilaporkan dan [29] metode yang dilaporkan untuk farmasi persiapan [28]

Tabel 6 Jumlah aktual dan prediksi obat dipelajari diberikan dengan menerapkan CLS dan analisis PCR dalam domain linier.
Real(g/ml) Prednisolone ( mix 1) 5 5.03 100.60 0.60 0.95 99.00 1.00 Cls Recovery (%) pcr Recovery (%)

Predicted (g/ml)

RRMSE*(%)

Predicted (g/ml)

RRMSE*(%)

10 15 20 25 30 Tetracycline (mix I) 5 10 15 20 25 30 Prednisolone (mix II) 10 15 20 25 30 35 Chloramphenocol (mix II) 10 15 20 25 30 35

10.03 14.9 19.8 25.1 30.1

100.30 99.33 99.00 100.40 100.33

0.30 0.67 1.00 0.40 0.33

9.92 14.9 19.8 24.8 29.5

99.20 99.33 99.00 99.20 98.33

0.80 0.67 1.00 0.80 1.67

4.93 9.91 14.8 19.9 25.1 30.1

98.60 99.10 98.67 99.50 100.40 100.33

1.40 0.90 1.33 0.50 0.40 0.33

4.97 9.92 14.9 19.8 24.8 29.4

99.40 99.20 99.33 99.00 99.20 98.00

0.60 0.80 0.67 1.00 0.80 2.00

9.94 15.2 19.8 24.7 30.0 35.3

99.40 101.33 99.00 98.80 100.00 100.86

0.60 1.33 1.00 1.20 0.00 0.86

9.9 14.5 19.7 24.4 29.4 34.6

99.00 96.67 98.50 97.60 98.00 98.86

1.00 3.33 1.50 2.40 2.00 1.14

9.84 14.8 20.1 25.1 30.2 34.9

98.40 98.67 100.50 100.40 100.67 99.71

1.60 1.33 0.50 0.40 0.67 0.29

9.91 14.7 19.7 24.3 29.1 34.5

99.10 98.00 98.50 97.20 97.00 98.57

0.90 2.00 1.50 2.80 3.00 1.43

* RRMSE adalah Akar Relatif Berarti Kesalahan Squared

Tabel 7 Hasil yang diperoleh dengan menerapkan CLS dan analisis PCR dengan campuran disiapkan laboratorium.
Mix 1 2 3 4 component Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL real (g/ml) 10 25 15 30 15 20 25 Found (g/ml) 10.02 24.6 14.9 29.5 15.1 19.9 25.1 CLS Found (%) 100.20 98.40 99.33 98.33 100.67 99.50 100.40 RRMSE (%) 0.20 1.60 0.67 1.67 0.67 0.50 0.40 Found (g/ml) 9.95 24.8 15.1 30.1 14.9 19.9 24.9 PCR Found (%) 99.50 99.20 100.67 100.33 99.33 99.50 99.60 RRMSE (%) 0.50 0.80 0.67 0.33 0.67 0.50 0.40

5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8

Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Tetracycline HCL Prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone Chloramphenicol prednosolone

10 25 25 30 15 30 5 5 30 12 30 13 32.5 25 15 20 10 30 15 20 20 30 10 10 10

9.83 25.1 24.4 29.8 14.7 30.3 5.0 4.97 29.6 12.2 29.8 13.2 32.3 25.1 14.9 20.3 9.9 29.5 14.9 20.4 19.6 29.4 10.1 10.2 9.8

98.30 100.40 97.60 99.33 98.00 101.00 100.00 99.40 98.67 101.67 99.33 101.54 99.39 100.40 99.33 101.5 99.00 98.33 99.33 102.0 98.00 98.00 101.0 102.0 98.20

1.70 0.40 2.40 0.67 2.00 1.00 0.00 0.60 1.33 1.67 0.67 1.54 0.61 0.40 0.67 1.50 1.00 1.67 0.67 2.00 2.00 2.00 1.00 2.00 1.80

9.2 25.3 25.1 28.9 15.2 30.2 4.9 4.9 29.4 11.9 29.7 12.9 31.6 24.7 15.1 20.1 10.0 29.8 14.9 19.5 19.8 29.2 9.9 9.9 9.9

92.00 101.20 100.40 96.33 101.33 100.67 98.00 98.00 98.00 99.17 99.0 99.23 97.23 98.80 100.67 100.50 100.00 99.33 99.33 97.50 99.00 97.33 99.00 99.00 99.00

8.00 1.20 0.40 3.67 1.33 0.67 2.00 2.00 2.00 0.83 1.00 0.77 2.77 1.20 0.67 0.50 0.00 0.67 0.67 2.50 1.00 2.67 1.00 1.00 1.00

Tabel 8 Hasil yang diperoleh dengan menerapkan CLS dan analisis PCR untuk bentuk sediaan komersial
Dosage Form Tetracort Ointment component Tetracycline HCL CLS (% S) RRMSE (%) 1.00 PCR (% S) 99.50.70 t=2.774 F=3.062 99.40.31 t=1.637 F=2.107 98.830.56 t=1.122 F=2.414 95.330.40 t=1.152 F=1.501 99.70.83 t=3.601 F=1.099 RRMSE (%) 0.50 Reported (% S) 100.50.4 (28) 99.040.4 (28) 99.50.87 (29) 99.040.4 (29) 99.50.87 (29)

Cortiphen Drops

Cortiphen ointment

101.00.45 t= 1.857 F=1.266 prednisolone 98.60.25 t=1.737 F=3.240 chloramphenicol 100.50.50 t=1.726 F=3.028 prednosolone 99.330.20 t=0.683 F=6.002 chloramphenicol 99.001.04 t=0.693 F=1.429

1.40

0.60

0.50

1.17

0.67

4.67

1.00

3.00

prednosolone

98.000.92 t=2.559 F=3.525

2.00

98.000.90 t=2.603 F=3.374

2.00

99.040.4 (29)

Nilai teoritis pada batas kepercayaan 95% adalah t = 2,776 dan F = 19,0 (n1= 3, n2= 3)

BAB IV PENUTUP
Kesimpulan Derivatif,rasioderivatif,CLS danmetodePCRdapat digunakan untuk penentuan

simultan tetrasiklin HCl, kloramfenikol dan prednisolonsebagaicampuran binerbaik dalam bentuk bubuk murni atau dalam sediaan farmasinya. Metode yang tepat, akurat dan sederhana. Juga, tidak ada langkah pemisahan diperlukan. Mereka cepat dan tidak memerlukan peralatan mahal atau canggih jika dibandingkan dengan metode kromatografi. Jadi, metode yang benar-benar divalidasi dan cocok untuk laboratorium kontrol kualitas, di mana biaya dan waktu sangat penting.

Daftar Pustaka

Anonim.1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta: Depkes RI Anonim.1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Depkes RI Prof.Dr. gholib gandjar Ibnu, DEA.,Apt dkk. 2010. Kimia Farmasi Analisis. PUSTAKA PELAJAR. Yogyakarta

Anda mungkin juga menyukai