TITULO DE LA PRCTICA DETERMINACIN DE COLESTEROL EN SUERO UTILIZANDO EL MTODO CHOD-PAP (PRUEBA ENZIMTICA COLORIMTRICA PARA COLESTEROL CON FACTOR

ACLARANTE DE LIPIDOS (LCF)) PARA LA CUANTIFICACIN POR ESPECTROFOTOMETRA VISIBLE NMERO: 2-1-2 OBJETIVO: Realizar el anlisis qumico, aplicando mtodos normalizados para determinar la concentracin de colesterol en la sangre. MUESTRA: Suero o plasma EQUIPOS: Centrifuga Espectrofotmetro o fotocolormetro Bao Mara

MATERIALES DE PROTECCIN PERSONAL: Mandil Guantes Vestimenta apropiada

REACTIVOS: Alcohol Kit para anlisis de colesterol

MATERIALES E INSUMOS: Torundas 7 Torniquetes 14 Jeringas de 5 mL 14 Tubos morados 30 Tubos de vidrio pequeos 10 Cubetas espectrofotomtricas 7 Gradillas 7 Micropipetas de 10L 7 Micropipetas de 1000L 14 pares de Guantes

PROCEDIMIENTO: Sacar la muestra de sangre, tomando las precauciones adecuadas, especialmente la manipulacin con guantes. Centrifugar la muestra para separar el plasma o suero

Pipetear en tubos de ensayo: el blanco, estndar y muestra de la forma que se muestra en el cuadro Pipetear Muestra Estndar Reactivo de trabajo Blanco 1000L Estndar 10 L 1000 Muestra 10 L 1000

Agitar bien e incubar los tubos durante 5 minutos a 37C o 10 min a temperatura ambiente (20 a 25) C Medir la absorbancia frente al blanco del reactivo en el espectrofotmetro a 500nm, llevando el aparato a cero con agua destilada, antes de los 60 minutos.

RESULTADOS PRIMAROS: Reacciones del proceso

CHE (COLESTEROL ESTEREASA) CHOD (COLESTEROL OXIDASA) POD (PEROXIDASA)

Valor de absorbancia

CLCULOS: La concentracin de colesterol total en la muestra se calcula a partir de la siguiente frmula general: C = Absorbancia de la muestra/Absorbancia del estndar Se multiplica por 200 para obtener en mg/dL de colesterol y por 5.17 para obtener en mmol/L de colesterol REPORTE DE RESULTADOS: Concentracin de colesterol en sangre en mg/dL y en mmol/L y su respectivo valor cualitativo VALORES DE REFERENCIA Sospechoso sobre 220 mg/dL o5.7mmol/L Elevado sobre 260 mg/dL o 6.7mmol/L

CUESTIONARIO: Representar en un esquema las principales lipoprotenas

Rangos mnimos y mximos de HDL, LDL y VLDL en el organismo

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS: DOcon Navaza C, Garca-Saavedra MJ, Vicente Garca JC (1999): Fundamentos y Tcnicas de Anlisis Bioqumico, Anlisis de Muestras Biolgicas. Editorial Paraninfo, Madrid. Gonzlez de Buitrago JM, Arilla Ferreiro E, Rodrguez-Sedade M, Snchez Pozo A (1998): Bioqumica Clnica . Editorial McGraw-Hill.-Interamericana, Madrid. Informacin detallada a cerca de los productos analticos de Linear Chemical SL lo encontrar en htp:// www.linear.es Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982). McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983). Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pg. 329. Expert Panel of National Cholesterol Education Program - JAMA 285/19:2486 (2001). Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", AACC Press, 4th ed., 2001.

ELABORADO POR:

Ing. Patricia Moreira