CONTAMINAO MICROBIOLGICA DO SOLO E DOS FRUTOS DE CAFEEIROS FERTIRRIGADOS COM ESGOTO SANITRIO Suzana Souza dos Santos1; Antnio

Alves Soares2; Antonio Teixeira de Matos3; Everardo Chartuni Mantovani 4; Rafael Oliveira Batista5; Jlio Csar de Melo6
RESUMO O trabalho teve com o objetivo estudar a contam inao m icrobiolgica do solo e dos frutos de cafeeiros fertirrigados com esgoto sanitrio tratado. O experim ento foi m ontado em delineam ento inteiram ente casualizado (DIC) com cinco tratam entos e quatro repeties. Os seguintes tratam entos foram usados: T 0 - aplicao de gua lim pa, sem interrupo; T 1 - aplicao do efluente at um a sem ana antes da colheita; T 2 - aplicao do efluente at duas sem anas antes da colheita; T 3 - aplicao do efluente at trs sem anas antes da colheita; e T 4 - aplicao do efluente at quatro sem anas antes da colheita. Am ostras de solo e de frutos de cafeeiros foram coletadas para anlise m icrobiolgica. Os resultados com provaram que a aplicao de efluente deve ser suspensa, pelo m enos, duas sem anas antes da colheita para m inim izar o risco de contam inao am biental e que no houve contam inao m icrobiolgica dos frutos do cafeeiro coletados no solo. Palavras-chave: gua residuria, coliform es, fertirrigao. ABSTRACT Microbiological contamination of the soil and coffee fruits fertirrigated with domestic wastewater T he objective of this work was to study the m icrobiological contam ination of the soil and coffee fruits fertirrigated with dom estic wastewater. T he experim ent was set up on an entirely random ized design (DIC) with five treatm ents and four replicates. T he treatm ents were the following ones: T 0 - application of clean water, without interruption; T 1 - application of effluent until one week before harvesting; T 2 application of effluent until two week s before harvesting; T 3 - application of effluent until three week s before harvesting; and T 4 - application of effluent until four week s before harvesting. Sam ples of the soil and coffee fruits were collected for m icrobiological analysis. T he results showed that the application of effluent m ay be suspended until two week s before harvesting in order to m inim ize the risk of contam inating the environm ent and no m icrobiological contam ination of the coffee beans collected in the soil occurred. Keyw ords: wastewater, coliform s, fertirrigation.

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Mestre em Eng. Agrcola, Depto. de Eng. Agrcola, Universidade Federal de Viosa, Viosa, MG. Eng. Agrcola, Prof. Titular, Depto. de Eng. Agrcola, Univ. Federal de Viosa, Viosa, MG, e-mail: aasoares@ufv.br 3 Eng. Agrcola, Prof. Adjunto, Depto. de Eng. Agrcola, Universidade Federal de Viosa, Viosa, MG. 4 Eng. Agrcola, Prof. Titular, Depto. de Eng. Agrcola, Universidade Federal de Viosa, Viosa, MG. 5 Eng. Agrcola, Doutorando em Engenharia Agrcola, Depto. de Eng. Agrcola, Univ. Federal de Viosa, Viosa, MG. 6 Estudante de Eng. Agrcola e Ambiental, Universidade Federal de Viosa, Viosa, MG.

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INTRODUO O uso de guas residurias na agricultura tem sido uma forma alternativa de minimizar problemas ambientais, proporcionados pelo lanamento das mesmas em cursos dgua, alm de favorecer o incremento na produtividade agrcola, que depende de fatores como: cultura, disponibilidade de nutrientes no efluente, demanda nutricional das plantas e manejo. No entanto, a utilizao de guas residurias na agricultura requer o desenvolvimento e aprimoramento de tcnicas que visem minimizao dos riscos de contaminao do solo, do produto agrcola e dos agricultores. O aproveitamento agrcola de guas residurias est associado a alguns riscos sanitrios, devido possibilidade da presena de patgenos, tais como Escherichia coli, Salmonella sp., Shigella sp., bem como ovos de nematides intestinais. Entretanto, o risco da disseminao de coliformes fecais e de outras bactrias pode ser minimizado por meio de um manejo adequado do esgoto sanitrio. A sobrevivncia de bactrias patognicas no solo depende de alguns fatores, tais como: umidade, pH, radiao solar, temperatura, concentrao de matria orgnica e predao por outros microrganismos (Chernicharo, 1997). Segundo Leon Suematsu & Cavallini (1999), os microrganismos podem sobreviver por perodos mais longos no solo do que nas superfcies das culturas, devido maior exposio aos raios solares. Beard (1940) comprovou que a umidade interfere na sobrevivncia de Salmonella typhosa no solo. A persistncia da bactria nos solos arenosos com baixa capacidade de reteno de gua foi de 4 a 7 dias, durante o perodo seco, porm a sobrevivncia da bactria nos solos argilosos com alta capacidade de reteno de gua foi superior a 42 dias. Em geral, a persistncia da Salmonella typhosa em todos os tipos de solos estudados foi maior durante o perodo chuvoso.

Van Donsel et al. (1967) encontraram reduo de 90% no nvel populacional de coliformes fecais com 3,3 e 13,4 dias nas amostras de solo expostas ao ar livre no vero e inverno, respectivamente. Chandler & Craven (1978) constataram que perodos de 18 dias em solo com 30% de umidade e de 2,5 dias em solo com 10% de umidade reduziram, em 90%, o nvel populacional de Escherichia coli, para uma temperatura ambiente de 20C. O tempo de sobrevivncia de Salmonella typhosa em solos cidos (pH de 3 a 5) bem menor do que em solos alcalinos (Beard, 1940). Butler et al. (1954) aplicaram esgoto sanitrio tratado na superfcie de um solo argilo-arenoso e verificaram que, na camada de 1,2 a 2,1 m de profundidade, os nveis de contaminao por coliformes fecais foram inferiores a um microrganismo por 100 mL de efluente. Bitton (1994) afirmou que, a partir de 3 m no perfil do solo, os coliformes fecais no conseguem sobreviver, provavelmente, em razo da ausncia de material orgnico, fundamental sua sobrevivncia. Al-Nakshabandi et al. (1997) observaram que o nvel populacional de bactrias heterotrficas, na camada de 0,07 a 0,10 m de profundidade, menor que na superfcie de um solo que recebeu a aplicao de esgoto sanitrio tratado. Relataram, tambm, que a aplicao deste efluente no solo proporcionou considervel aumento no nvel populacional dos coliformes fecais, em relao ao solo seco. Os resultados apresentados por Hayat et al. (2002) confirmaram que a aplicao de efluente tratado de refinaria de leo, durante 12 anos, no acarretou alterao significativa na atividade microbiolgica do solo. Segundo Rocha et al. (2003), aps 54 dias da aplicao de esgoto sanitrio tratado, no foram identificados coliformes fecais no solo, sendo que, a partir dos 60 dias, nenhuma amostra positiva com ovos de helmintos foi encontrada, apesar do alto nvel de contaminao inicial.
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Um dos maiores problemas da utilizao de guas residurias na agricultura a possibilidade de contaminao microbiolgica do produto agrcola. Entretanto, se as tcnicas de tratamento e manejo dessas guas forem adequadas, os riscos de contaminao microbiolgica dos vegetais passam a ser mnimos. Geralmente, as bactrias esto mais expostas a condies ambientais adversas, tais como uma elevada temperatura, baixa umidade relativa do ar e incidncia de radiao na superfcie das culturas do que no solo. Estudos indicaram que a prpria estrutura da planta influencia na sobrevivncia de microrganismos, particularmente no sistema radicular. Com respeito ao efeito da estrutura da planta, Bell & Bole (1978) encontraram que 10 horas de exposio radiao solar foram suficientes para erradicar os coliformes fecais nas plantas de alfafa fertirrigadas com esgoto sanitrio tratado, porm 50 horas foram requeridas para eliminar os coliformes fecais na grama ( Phalaris arundinacea ). Sadovski et al. (1978) comprovaram que o nvel populacional de Escherichia coli na casca do pepino decresceu de 10 4 bactrias por 100 gramas para 65 bactrias por 100 gramas, em 8 dias de exposio radiao solar. O clima quente e seco da regio e a forma do pepino foram os fatores responsveis pelo tempo de sobrevivncia da Escherichia coli . Al-Lahham et al. (2003) analisaram a contaminao microbiolgica de frutos do tomateiro, fertirrigados com esgoto sanitrio tratado via sistema de irrigao por sulcos. Os nveis populacionais de coliformes fecais, na casca do fruto, oscilaram de 1,3x10 2 a 3x10 2 UFC por 100 gramas, porm nenhum coliforme fecal foi detectado na polpa do fruto. O presente trabalhou objetivou estudar a contaminao microbiolgica do solo e dos frutos de cafeeiros fertirrigados com esgoto sanitrio tratado.

MATERIAL E MTODOS O experimento foi instalado na EstaoPiloto de Tratamento de Esgoto do Departamento de Engenharia Agrcola, Universidade Federal de Viosa, localizado na cidade de Viosa - MG, Zona da Mata de Minas Gerais. A Estao-Piloto de Tratamento de Esgoto composta das seguintes unidades: 1) tratamento preliminar constitudo por um desarenador para a remoo dos slidos de elevada massa especfica; 2) tratamento secundrio dotado de faixas sistematizadas, tendo, como planta extratora e depuradora do esgoto, o capim Tifton 85 gnero Cynodon spp.; e 3) tratamento tercirio composto por lagoa de maturao com capacidade de 300 m3 (50 x 6 x 1 m) que tem, como objetivo primordial, a remoo de patgenos. O solo da rea experimental foi classificado como CAMBISSOLO. Utilizando-se a variedade de cafeeiro Catua, sendo o plantio realizado em covas espaadas de 2,5 x 0,75 m. Para aplicao do efluente da lagoa de maturao, foi utilizado o sistema de irrigao por gotejamento, o qual era composto por uma unidade de controle (conjunto motobomba com 3 cv de potncia, filtro de membrana auto-limpante automtico 500 mesh e manmetros), uma linha principal, duas linhas de derivao, 18 linhas laterais e por gotejadores com vazo mdia de 2,55 L h-1 e espaados de 0,75 metros entre si. Os tratamentos impostos, referentes aplicao do efluente da lagoa de maturao, foram: tratamento T0 - aplicao de gua limpa, sem interrupo; tratamento T1 - aplicao do efluente at uma semana antes da colheita; tratamento T2 - aplicao do efluente at duas semanas antes da colheita; tratamento T3 - aplicao do efluente at trs semanas antes da colheita; e tratamento T4 - aplicao do efluente at quatro semanas antes da colheita. O perodo de coleta de dados foi de maio a julho de 2003, restringindo-se somente ao perodo seco. As lminas de efluente, aplicadas em cada tratamento, esto apresentadas no Quadro 1.

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Quadro 1. Valores das lminas de efluente aplicadas nos cinco tratamentos do experimento, no perodo de maio a julho de 2003
T0 T4 T3 Lmina de efluente aplicada (mm) 0 163,53 170,77 176,2 181,63 T2 T1

As amostras de solo foram coletadas entre plantas na linha de plantio, dentro da rea til de cada parcela, um dia antes da colheita dos frutos do cafeeiro. A coleta foi realizada nas camadas de 0-10, 10-20 e 2030 cm e encaminhadas ao Laboratrio de Microbiologia do Solo da UFV, para serem feitas as anlises de coliformes fecais e totais. As amostras foram pesadas (10 g), colocadas em frascos de vidro com 90 mL de soluo salina, completando um volume de 100 mL e agitadas manualmente (20 vezes). Em seguida, foi retirada uma alquota de 1 mL do material, que foi colocada no meio de cultura (placas de petrifilm). As placas de petrifilm foram colocadas para incubar em estufa, sob temperatura controlada de 37C, durante 48 horas. Aps este perodo, as placas foram retiradas da estufa e levadas para serem feitas as contagens das colnias de coliformes fecais e totais, utilizando-se uma lupa. A anlise microbiolgica dos frutos do cafeeiro coletados no cho foi realizada de forma idntica. O experimento foi montado em delineamento inteiramente casualizado (DIC) com cinco tratamentos e quatro repeties; cada unidade experimental continha quatro linhas de cafeeiros, das quais as duas externas foram consideradas bordaduras. Os dados foram interpretados por meio das anlises de varincia e de regresso. Aps a anlise de varincia, as mdias foram comparadas, utilizando-se o teste de Dunnet a 5% de probabilidade. Na anlise de regresso, os modelos foram escolhidos com base na significncia dos coeficientes de regresso (utilizando-se o teste t, com nvel de significncia de 5%) e no valor do coeficiente de determinao Para realizao das anlises (R2). estatsticas, foi utilizado o programa

estatstico SAEG 5.0, desenvolvido Universidade Federal de Viosa.

na

RESULTADOS E DISCUSSO No Quadro 2, esto apresentados os nmeros de unidades formadoras de colnias (UFC) de coliformes fecais e totais presentes nas amostras de solo, coletadas em trs profundidades do solo, nas diferentes unidades experimentais. Com relao aos coliformes totais no solo, observou-se aumento significativo do nvel populacional nos tratamentos T4 (aplicao do efluente at quatro semanas antes da colheita), T3 (aplicao do efluente at trs semanas antes da colheita), T2 (aplicao do efluente at 2 semanas antes da colheita), T1 (aplicao do efluente at 1 semana antes da colheita) em relao a T0 (aplicao de gua limpa sem interrupo) nas profundidades de 010, 10-20 cm. Constatou-se tambm nos tratamentos T3, T2 e T1, na profundidade de 2030 cm, aumento significativo no nvel populacional dos coliformes totais em relao a T0. Observa-se, ainda que, na testemunha (T0), verificou-se maior quantidade de coliformes totais, nas profundidades de 0-10 e 10-20 cm, quando comparada ao T4. Isto se deve ao fato de existir abundncia de tais organismos no meio ambiente. Os resultados comprovaram que os tratamentos T4, T3 e T2, que ficaram quatro, trs e duas semanas, respectivamente, sem aplicao do efluente da lagoa, at o dia da colheita, no apresentaram nenhum organismo do grupo dos coliformes fecais, nas profundidades de 0-10, 10-20 e 20-30 cm. No tratamento T1, no qual houve suspenso da aplicao de efluente uma semana antes da colheita, foi verificada a presena de coliformes fecais nas camadas de 0-10 e 10-20 cm.

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Esta ausncia de organismos do grupo de coliformes fecais nos tratamentos T0, T2, T3 e T4 devida existncia de condies desfavorveis a esses microrganismos, aps a interrupo da aplicao do efluente, mostrando que a desidratao um importante fator na eliminao de patgenos, indicando poder utiliz-la como condio a ser monitorada para controle da descontaminao do solo em que houve a aplicao de efluentes. A sobrevivncia desses microrganismos menor em altas temperaturas, baixas umidades do solo, ou quando expostos a maior incidncia da luz solar (Bitton & Gerba, 1984). Segundo Leon Suematsu & Cavallini (1999), os microrganismos podem sobreviver por perodos mais longos no solo do que nas superfcies das culturas, sendo que o tempo de sobrevivncia dos coliformes fecais no solo, em clima quente (temperatura entre 20 e 30C) pode variar de 20 a 70 dias. Os resultados obtidos no tratamento T1 (aplicao do efluente at uma semana antes da colheita) indicaram a presena de coliformes fecais de 3,66 UFC g-1 (Unidade Formadora de Colnia) na camada de 0-10 cm. Estes resultados so considerados muito baixos, embora se saiba que a presena dos microrganismos indicadores de poluio fecal e organismos patognicos,

mesmo em nveis baixos, pode colocar em risco a sade dos trabalhadores, podendo causar enfermidades diarricas, febre tifide e hepatite A (Leon Suematsu & Cavallini, 1999). A presena de coliformes fecais no solo, fertirrigado com esgoto sanitrio tratado, pode ter ocorrido devido ao menor tempo de exposio incidncia de luz solar e maior umidade neste solo, condies estas essenciais para a sobrevivncia dos microrganismos patognicos. Na Figura 1, esto apresentados os valores mdios do nvel populacional de coliformes totais nos distintos tratamentos adotados no experimento, bem como os modelos de regresso ajustados para as profundidades de 0-10 cm, 10-20 cm e 2030 cm. Verificou-se, que o modelo de regresso quadrtico foi o que melhor se ajustou ao processo em estudo. O coeficiente de determinao (R2) foram de 0,9860; 0,8878 e 0,9723, para as profundidades de 0-10 cm, 10-20 cm e 2030 cm, respectivamente. Com relao anlise microbiolgica dos frutos, no foi observada, em nenhum dos tratamentos adotados, a presena de coliformes fecais e totais nos frutos do cafeeiro coletados do cho. Provavelmente, isto ocorreu devido ao fato de os frutos

Quadro 2. Nmero de unidade formadoras de colnias (UFC) de coliformes fecal e total presente em trs profundidades do solo, para os diferentes tratamentos estudados
Tratamentos Profundidade (cm) 0 10 10 20 Coliformes totais (UFC g-1) T0 T4 T3 T2 T1 2,12 A 0,00 B 3,59 B 27,29 B 49,87 B 1,49 A 0,00 B 1,49 B 33,35 B 40,68 B Coliformes fecais (UFC g ) T0 T4 T3 T2 T1 0,00 A 0,00 A 0,00 A 0,00 A 3,66 B 0,00 A 0,00 A 0,00 A 0,00 A 1,49 A 0,00 A 0,00 A 0,00 A 0,00 A 0,00 A
-1

20 30

0,00 A 0,00 A 3,66 B 16,61 B 24,28 B

Mdias seguidas de mesma letra maiscula no diferem significativamente do tratamento T0, em nvel de 5 % de probabilidade, pelo teste de Dunnet

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-1 Coliformes totais (UFC g )

50 40 30 20 10 0 1 2 Tempo (semanas) 3 4 y = 4,7475x2 - 41,069x + 87,253 R2 = 0,986

(a) Profundidade de 0-10 cm

50 40 30 20 10 0 1 2 Tempo (semanas) 3 4 y = 1,46x2 - 22,69x + 64,655 R2 = 0,8878

-1 Coliformes totais (UFC g )

(b) Profundidade de 10-20 cm

30 y = 1,0025x2 - 13,592x + 37,598 R2 = 0,9723

-1 Coliformes totais (UFC g )

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10

0 1 2 Tempo (semanas) 3 4

(c) Profundidade de 20-30 cm

Figura 1. Regresses quadrticas do nvel populacional dos coliformes totais com os distintos tratamentos adotados nas profundidades de 0-10 cm (a), 10-20 cm (b) e 20-30 cm(c), utilizando-se o teste t com nvel de significncia de 5%

estarem mais expostos ao germicida do sol e sua superfcie lisa dificultar a aderncia dos microrganismos.

Os resultados mostram que a aplicao do efluente de lagoa de maturao na fertirrigao do cafeeiro deve ser suspensa

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duas semanas antes da colheita dos frutos, eliminando-se, assim, o risco de contaminao do operador do sistema com microrganismos patognicos. CONCLUSES De acordo com os resultados obtidos, conclui-se: A aplicao de esgoto sanitrio tratado no solo, desprovida de um manejo adequado, pode proporcionar a contaminao microbiolgica do solo e, conseqentemente, do meio ambiente. Verificou-se que a aplicao de efluente deve ser suspensa pelo menos duas semanas antes da colheita, para minimizar o risco de contaminao do operador do sistema de aplicao. Em nenhum dos tratamentos adotados foi constatada a contaminao microbiolgica dos frutos do cafeeiro, coletados no solo. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS AL-LAHHAM, O.; EL-ASSI, N. M.; FAYYAD, M. Impact of treated wastewater irrigation on quality attributes and contamination of tomato fruit. Agricultural Water Management, v.61, p.51-62, 2003. AL-NAKSHABANDI, G. A.; SAQQAR, M. M.; SHATANAWI, M. R.; FAYYAD, M.; AL-HORANI, H. Some environmental problems associated with the use of the wastewater for irrigation in Jordan. Agricultural Water Management. v.34, n.1, p.8194, 1997. BEARD, P. J. Longevity of Eberthella Tyhosus in various soils. American Journal of Public Health. v.30, p.1077-1082, 1940. BELL, R. G.; BOLE, J. B. Elimination of faecal coliform bacteria from soil irrigated with municipal sewage lagoon effluent. Journal Environmental Quality. v.7, n.2, p.193-196, 1978. BITTON, G. Wastewater microbiology. New York: Willey-liss, 1994. 478 p.

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