1.

2 Fungsi Reseptor Permukaan Seperti yang telah ditinjau, sebagian ligan bertanggung jawab untuk sinyal sel-sel (termasuk neurotransmiter, peptida hormon , dan faktor pertumbuhan ) mengikat reseptor pada permukaan sel target mereka. Akibatnya, tantangan utama dalam memahami sinyal selsel mengungkap mekanisme yang reseptor permukaan sel mengirimkan sinyal diprakarsai oleh ligan mengikat. Seperti dibahas dalam Bab 12, beberapa neurotransmitter reseptor saluran ion ligand-gated yang secara langsung mengontrol fluks ion melintasi membran plasma . Reseptor permukaan sel lain, termasuk reseptor untuk hormon peptida dan faktor pertumbuhan, bukan bertindak dengan mengatur aktivitas intraseluler protein . Protein ini kemudian mengirimkan sinyal dari reseptor untuk serangkaian target intraseluler tambahan, sering termasuk transkripsifaktor. Ligan mengikat ke reseptor pada permukaan sel sehingga memulai rantai reaksi intraseluler, akhirnya mencapai sel target inti dan mengakibatkan perubahan terprogram dalam gen ekspresi. Fungsi kelas utama reseptor permukaan sel dibahas di sini, dengan jalur hilir sinyal intraselular dari reseptor ini sedang dipertimbangkan di bagian berikutnya dari bab ini. G-Protein Coupled Reseptor Keluarga terbesar reseptor permukaan sel mengirimkan sinyal intraseluler target melalui aksi perantara dari guaninnukleotida -mengikat protein yang disebut protein

G. Lebih dari seribu seperti reseptor G protein-coupled telah diidentifikasi, termasuk reseptor bagi banyak neurotransmiter, neuropeptida, dan peptida hormon . Selain itu, protein-coupled reseptor Gkeluarga meliputi sejumlah besar reseptor yang bertanggung jawab untuk bau, penglihatan, dan rasa. Reseptor G protein-coupled secara struktural dan fungsional terkait protein ditandai dengan tujuh membran-spanning heliks ( Gambar 13.10 ). Pengikatan ligan ke domain ekstraseluler reseptor ini menginduksi perubahan konformasi yang memungkinkan domain sitosol reseptor untuk mengikat protein G yang terkait dengan wajah bagian dalam membran plasma . Interaksi ini mengaktifkan protein G, yang kemudian berdisosiasi dari reseptor dan membawa sinyal ke target intraseluler, yang dapat berupa enzim atau saluran ion .

Gambar 13.10 Struktur dari G protein-coupled reseptor. Reseptor G protein-coupled ditandai dengan tujuh transmembran heliks. Penemuan G protein berasal dari penelitian terhadap hormon (seperti epinephrine) yang mengatur sintesis siklik AMP (cAMP) dalam sel target mereka. Sebagaimana dibahas kemudian dalam bab ini, cAMP adalah penting utusan kedua yang menengahi respon seluler terhadap berbagai hormon. Pada 1970-an, Martin Rodbell dan rekan-rekannya membuat pengamatan kunci yang GTP diperlukan untuk stimulasi hormonal adenylyl cyclase (enzim yang bertanggung jawab untuk pembentukan cAMP). Temuan ini menyebabkan penemuan bahwa guanin nukleotida pengikat protein (disebut protein G) adalah perantara dalam adenylyl cyclase aktivasi ( Gambar 13.11 ). Sejak itu, sebuah array dari protein G telah ditemukan untuk bertindak sebagai saklar fisiologis yang mengatur kegiatan berbagai sasaran intraseluler sebagai respons terhadap sinyal ekstraseluler.

Gambar 13.11

Aktivasi hormonal adenilat siklase. Pengikatan hormon mempromosikan interaksi reseptor dengan protein G. The diaktifkan protein G subunit kemudian berdisosiasi dari reseptor dan merangsang adenylyl cyclase, yang mengkatalisis konversi. G protein terdiri dari tiga subunit, ditunjuk , , dan ( Gambar 13.12 ). Mereka sering disebut protein G heterotrimeric untuk membedakan mereka dari yang

lain guanin nukleotida -mengikat protein, seperti Ras protein dibahas kemudian dalam bab ini. The subunit mengikat nukleotida guanin, yang mengatur aktivitas protein G. Dalam keadaan istirahat, terikat terhadap PDB di kompleks dengan dan . Mengikat hormon menginduksi perubahan konformasi dalam reseptor, sehingga domain sitosol reseptor berinteraksi dengan protein G dan merangsang pelepasan PDB terikat dan pertukaran untuk GTP. The diaktifkan GTP-bound subunit kemudian berdisosiasi dari dan , yang tetap bersama-sama dan fungsi sebagai kompleks . Baik aktif GTP yang terikat subunit dan kompleks kemudian berinteraksi dengan target mereka untuk mendapatkan respon intraseluler. Kegiatan subunit dihentikan oleh hidrolisis GTP terikat, dan subunit aktif (sekarang dengan PDB terikat) maka reassociates dengan kompleks , siap untuk siklus untuk memulai sesuatu yang baru.

Gambar 13.12 Peraturan protein G. Genom mamalia encode setidaknya 20 subunit berbeda, 6 subunit , dan 12 subunit . G berbeda proteinmengasosiasikan dengan reseptor yang berbeda, jadi ini array G protein reseptor pasangan dengan target intraseluler yang berbeda. Misalnya, protein G yang terkait dengan reseptor epinefrin disebut G s karena yang subunit s timulates adenylyl cyclase (lihat Gambar 13.11 ). Protein G lainnya dan subunit bertindak bukan untuk menghambat adenilat siklase atau untuk mengatur kegiatan target lainnya enzim .

Selain

mengatur

menargetkan enzim ,

baik

dan

subunit

beberapa

G protein secara langsung mengatur saluran ion.Sebuah contoh yang baik disediakan oleh aksi neurotransmitter asetilkolin pada otot jantung, yang berbeda dari efek pada saraf dan otot rangka. Reseptor asetilkolin pada sel otot saraf dan tulang adalah ligan -gated saluran ion (lihat Gambar 12.23 ). Sel otot jantung memiliki reseptor asetilkolin yang berbeda, yaitu G protein-coupled. G protein ini ditunjuk G i karena subunit yang saya nhibits adenilat siklase . Selain itu, G i subunit bertindak langsung untuk membuka K + channel dalam membran plasma , yang memiliki efek memperlambat kontraksi otot jantung. Reseptor Kinase Protein-Tirosin Berbeda dengan reseptor G protein-coupled, reseptor permukaan sel lain secara langsung terkait dengan intraseluler enzim. Keluarga terbesar reseptor enzim-linked tersebut adalah reseptor protein kinase-tirosin , yang phosphorylate merekasubstrat protein pada residu tirosin. Keluarga ini termasuk reseptor untuk sebagian besar polipeptida faktor pertumbuhan , sehingga protein-tirosin fosforilasi telah dipelajari dengan baik sebagai mekanisme sinyal yang terlibat dalam pengendalian pertumbuhan sel hewan dan diferensiasi. Memang, pertama protein kinase-tirosin ditemukan pada tahun 1980 selama studi dari protein onkogenik hewan tumor virus, khususnya virus sarkoma Rous , oleh Tony Hunter dan Bartolomeus Sefton.The EGF reseptor kemudian ditemukan berfungsi sebagai protein kinase-tirosin oleh Stanley Cohen dan rekan-rekannya, jelas membangun fosforilasi protein-tirosin sebagai mekanisme signaling kunci dalam respon sel terhadap stimulasi faktor pertumbuhan. Sekarang lebih dari 50 reseptor protein kinase-tirosin telah diidentifikasi, termasuk reseptor untuk EGF , NGF, PDGF , insulin, dan banyak lainnya faktor pertumbuhan . Semua reseptor ini berbagi sebuah organisasi umum struktural: sebuah ekstraseluler Nterminal ligand domain-mengikat, transmembran tunggal heliks , dan C-terminal domain sitosol denganprotein kinase tirosin- kegiatan ( Gambar 13.13 ). Sebagian besar reseptor protein kinase-tirosin terdiri dari polipeptida tunggal, meskipun reseptor insulin dan beberapa reseptor terkait adalah dimer yang terdiri dari dua pasang polipeptidarantai. Pengikatan ligan (misalnya, faktor pertumbuhan) ke ekstraselular domain reseptor mengaktifkan domain kinase sitosolik mereka, sehingga fosforilasi dari kedua reseptor sendiri dan sasaran intraseluler protein yang menyebarkan sinyal diprakarsai oleh faktor pertumbuhan mengikat.

Gambar 13.13 Organisasi reseptor protein kinase-tirosin. Setiap reseptor terdiri dari Domain ekstraseluler N-terminal ligand-binding, transmembran heliks tunggal, dan C-terminal domain sitosol dengan aktivitas kinase protein-tirosin. Langkah pertama dalam sinyal dari sebagian besar reseptor protein kinasetyrosine ligand -induced dimerisasi reseptor (Gambar 13.14 ). Beberapa faktor pertumbuhan , seperti PDGF dan NGF, sendiri adalah dimer yang terdiri dari dua identikpolipeptida rantai, faktor-faktor pertumbuhan langsung menginduksi dimerisasi oleh sekaligus mengikat dua molekul reseptor yang berbeda. Faktor pertumbuhan lainnya (seperti EGF ) adalah monomer tetapi memiliki dua reseptor yang berbeda mengikat yang berfungsi untuk CrossLink reseptor.

Gambar 13.14 Dimerisasi dan autofosforilasi reseptor protein kinase-tirosin. Faktor pertumbuhan mengikat reseptor menginduksi dimerisasi, yang menghasilkan reseptor autofosforilasi sebagai dua rantai polipeptida phosphorylate satu sama lain. Ligan-induced dimerisasi kemudian mengarah ke autofosforilasi reseptor sebagai terdimerisasi polipeptida rantai 13.14 ). Autofosforilasi seperti lintas memfosforilasi dua satu sama kunci lain dalam (lihat Gambar sinyal dari

memainkan

peran

reseptor. Pertama, fosforilasi residu tirosin dalam domain katalitik mungkin memainkan

peran regulasi dengan meningkatkan reseptor protein kinase kegiatan. Kedua, fosforilasi residu tirosin luar dari domain katalitik menciptakan situs mengikat khusus untuk tambahan protein yang mengirimkan sinyal intraseluler hilir reseptor diaktifkan. Asosiasi ini molekul sinyal hilir dengan reseptor protein kinase tirosin-dimediasi oleh protein domain yang mengikat spesifik peptida phosphotyrosine mengandung ( Gambar 13.15 ). Yang terbaik-ditandai domain ini disebut SH2

domain (untuk S rc homology 2) karena mereka pertama kali diakui pada protein kinasetirosin yang terkait dengan Src , protein onkogenik darivirus sarkoma Rous . SH2 domain terdiri dari sekitar seratus asam amino dan mengikat urutan peptida pendek tertentu yang mengandung residu phosphotyrosine ( Gambar 13.16 ). Yang dihasilkan asosiasi SH2 mengandung protein dengan diaktifkan reseptor protein kinase-tirosin dapat memiliki beberapa efek: Ini melokalisasi protein SH2 mengandung kemembran plasma , menyebabkan hubungan mereka dengan protein lain, mempromosikan mereka fosforilasi , dan merangsang aktivitas enzimatik mereka. Asosiasi protein dengan reseptor autophosphorylated demikian merupakan langkah pertama dalam transmisi sinyal intraseluler diprakarsai oleh pengikatan faktor pertumbuhan ke permukaan sel.