Presentado por Cristian Douglas Cabezas Bastidas Cdigo: 87.433.673 Francisco Javier Hinestroza Cdigo: 88.188.840 Diego Alejandro Marentes Cdigo: Servio Javier Burbano Cdigo: Ricardo Ernesto Rueda Montenegro Cdigo 87215811
GRUPO 201504_32
Tutora
INTRODUCCIN
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones fsicas ptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos. Estos medios son esenciales en el Laboratorio de Microbiologa por lo que un control en su fabricacin, preparacin, conservacin y uso, asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados obtenidos. En los laboratorios de microbiologa se utilizan diferentes tipos de medios de cultivo que pueden ser preparados en forma lquida o en forma slida. En este informe se muestra la forma de llevar a cabo el reporte de crecimiento de microorganismos en una muestra de aguas residuales. As mismo, se elaborar un cuadro comparativo entre diferentes medios de cultivo dando a conocer sus composiciones qumicas y los microorganismos que a travs de estos se pueden sembrar. Finalmente, se expondr qu es un desinfectante y cules son los niveles en los que se pueden clasificar qumicamente y teniendo en cuenta su eficacia de destruccin de microorganismos.
OBJETIVO
Realizar el reporte de crecimiento de microorganismos, teniendo como base la tabla de resultados de una siembra hecha anticipadamente con una muestra de aguas residuales. Distinguir los medios de cultivo enriquecido, selectivo y diferencial. Determinar la composicin qumica de diferentes medios de cultivo. Establecer qu tipo de microorganismos se pueden sembrar en los diferentes medios de cultivo. Definir qu es un desinfectante. Diferenciar entre desinfectante de nivel alto, de nivel medio y de nivel bajo.
1. Se realiz un anlisis a una muestrea de aguas residuales. Se hizo dilucin hasta 10-4 y se sembr por duplicado, en el cuadro a continuacin se muestran los resultados que se obtuvieron, con ellos realice el reporte del crecimiento.
10-3 67 145
10-4 1 10
10-1= Caja 1 + Caja 2 / 2(Prom.)= 600 + 850= 1450 / 2= 725 colonias. 725 x 10-1= 725 x 100= 72500 clulas/ml. El factor de dilucin es 100 porque se inocul en placa slo 0,1 ml, equivalente a otra dilucin al dcimo. Dilucin 10-1 = 7,25 x 104 ufc/ml. 10-2= 340 + 489 / 2= 415 colonias. 415 x 10-2= 415 x 1000= 415000 clulas/ml Dilucin 10-2 = 4,15 x 105 ufc/ml. 10-3= 67 + 145 / 2= 106 colonias. 106 x 10-3= 106 x 10000= 1060000 clulas/ml Dilucin 103 = 1,06 x 106 ufc/ml. 10-4= 1 + 10 / 2= 6 colonias. 6 x 10-4= 6 x 100000= 600000 cl/ml Dilucin 10-4 = 6 x 105 ufc/ml. Los microorganismos filamentosos forman las colonias a partir de una espora o de un fragmento de hifa o de cumulo de hifas. Debido a esto el nmero de UFC/ml pueden variar dependiendo las condiciones de homogenizacin de hifas y por lo tanto se aumentaran las UFC/ml, por lo que se debe poner especial cuidado en esta etapa. Los tiempos de homogenizacin citados en esta metodologa son los recomendados en la norma oficial mexicana para este grupo microbiano. En las cajas se observa que hay mayor crecimiento y alteracin en el cultivo de los microorganismos en la caja 2 con respecto a la caja 1.
2. Elabore un cuadro comparativo donde se expliquen claramente las diferencias entre un medio de cultivo enriquecido, un medio de cultivo selectivo, un medio de cultivo diferencial, y de un ejemplo de cada tipo de medio explicando la composicin qumica y el tipo de microrganismos que se puede sembrar.
medios
slidos
que Son medios de cultivos que nos que permiten distinguir entre varios de gneros y especies de
es un medio de cultivo que contienen contiene necesarios crecimiento los para de nutrientes inhiben apoyar una el algunas el
amplia permite el de otras.Se utiliza si al medio se le ha aadido un para seleccionar y aislar carbohidrato y un indicador y la de bacteria que se cultiva es capaz Por de fermentar dichocarbohidrato,
variedad de microorganismos.
partir
mixtas.
microbios que se encuentran en ejemplo Agar salado-manitol o se produce una acidificacin del pequeas cantidades en la Chapman (permite de el medio con el consiguiente viraje ciertos de color del indicador por el cambio de pH. El citrato de Simmons es un medio cuya
muestra y cuyo crecimiento es crecimiento lento, que las especies estafilococos). bacterias
presentes. tienen
Algunas requisitos
especficos para su crecimiento. por sus siglas en ingls), utiliza citrato sdico, entonces en l El principio del cultivo de nutrientes provenientes de la solo crecern de las bacterias
enriquecimiento es el control de planta de soya. Una versin capaces los nutrientes y las condiciones lquida de cultivo (la temperatura, el trptico. es caldo de
desarrollarse
suministro de aire, luz, pH) de El agar MacConkey, el cual menudo la separacin se basa tal manera que se adapte slo a contiene lactosa y permite la en la diferencia de color de las la especie. multiplicacin de los colonias aisladas, como en el
Algunos ejemplos de medios de organismos que suelen invadir agar con azul de metileno -
cultivo de enriquecimiento son: Agar sangre. Agar CLED Agar McConkey Agar chocolate Agar Sabouraud Caldo Selenito
el tracto gastrointestinal.
eosina que permite diferenciar E. coli (colonias oscuras y de brillo metlico) de Enterobacter aerogenes (colonias rosadas
de centro azul sin brillo). Estos dos microorganismos en agar nutritivo producen colonias de color gris blancuzco.
MICROORGANISMO UTILIDAD Selectivo ORIGEN Sinttico CONSISTENCIA Solido COMPOSICION sulfadiacina y sulfato de polimixina Pancretico Recopilacin de casena, Peptona de soja, Tejido Animal, Dextrosa, Extracto de levadura, Cloruro de sodio, Bisulfito de sodio, Cofactor, sangre de oveja, Agua destilada. Peptona, Lactosa, Sacarosa, Fosfato dipotsico, Eosina, Azul de metileno. A REPRODUCIR Clostridium botulinum.
CHOC
Enriquecido (Chocalate) Sinttico Solido
Diferencial
Sinttico
Solido
3. Explique que es un desinfectante y diferencie claramente entre un desinfectante de nivel alto, uno de nivel medio y uno de nivel bajo.
Que es un desinfectante. La palabra desinfeccin hace referencia al proceso mediante el cual, a partir del uso de sustancias desinfectantes, se limpia y acondiciona un espacio o superficie para su uso
apropiado. La desinfeccin puede ser ms o menos agresiva dependiendo del tipo de material o implementos que se utilicen en l: en algunos casos, las personas y animales que vivan en ese espacio deben abandonarlo por un par de horas mientras que en otros casos tal situacin no es necesaria. La desinfeccin tiene por principal objetivo la limpieza de superficies o espacios en los cuales seres humanos y animales estarn viviendo o con las cuales tendrn contacto. De este modo se evita la presencia de bacterias o virus que pueden causar infecciones de diverso tipo as como tambin enfermedades, alergias o condiciones de salud serias. La desinfeccin se puede realizar tanto en espacios pblicos y abiertos como en espacios privados y cerrados. Para realizar el proceso de desinfeccin, se debe contar con materiales especficamente diseados para tal accin, es decir, desinfectantes y otros productos de limpieza que se consiguen de manera accesible en muchos lugares. Cuando se requiere utilizar productos ms agresivos y abrasivos es posible necesitar tener habitacin o permiso para hacerlo ya que su uso indebido puede generar muchas complicaciones de diverso tipo. Dependiendo del tipo de producto o sistema que se utilice, la desinfeccin puede ser qumica (por ejemplo, con el uso de desinfectantes y productos qumicos) como tambin fsica (a partir del uso de trapos, esponjas, rejillas, virulanas, etc.). Es importante, en el caso de usar productos qumicos, hacerlo con extremo cuidado, mantenerlos alejados del resto de la poblacin (especialmente de los nios) y utilizarlos siempre con el material o con la indumentaria adecuada a modo de no lastimar la piel, las vas respiratorias, el cabello, la visin, etc.
Desinfectantes de alto nivel. Los desinfectantes de alto nivel son sustancias qumicas que previo a un proceso exponencial de contacto sobre la superficie del instrumental mata o destruye microorganismos que producen enfermedad, incluyendo los virus todos los y
resistentes
mycobacterium tuberculosis, Dentro de este grupo se consideran a formaldehdo, glutaraldehdo, perxido de hidrgeno, cido peractico, calor seco, calor hmedo. Generalmente se emplean para desinfeccin de instrumental y equipos usados con los pacientes La accin desinfectante de las soluciones pueden ser comprometidas por la concentracin del desinfectante, tipo de microorganismos presentes, limpieza de la superficie del instrumental y el tiempo de contacto.
Desinfectante de nivel intermedio. Es la aplicacin de un procedimiento qumico que puede destruir todas las formas bacterianas vegetativas, Mycobacterium tuberculosis, as como la mayora de los virus y hongos, sin embargo no se asegura la destruccin de esporas y bacterianas; no
necesariamente todos los virus de tamao pequeo no lipdico los productos utilizados en esta prctica son: cido peracetico, alcoholes al 70 y 95%, hipoclorito de sodio, yodo povidona.
Desinfectante de nivel bajo. Es la aplicacin de un procedimiento qumico que puede destruir la mayor parte de las formas vegetativas bacterianas, algunos virus y hongos, pero no al complejo Mycobacterium tuberculosis, ni las esporas bacterianas; los productos utilizados son: alcohol etlico o isoproplico, las soluciones fenoladas, el hipoclorito de sodio o calcio 1 000 ppm y los amonios cuaternarios (cloruro de benzalconio).
CONCLUSIONES Para la elaboracin de un medio de cultivo en primer lugar se identifica los microorganismos que se pretenden reproducir, con esta informacin se procede a seleccionar el medio si es selectivo, enriquecido o diferencial. Al realizar un proceso de desinfeccin se debe tener en cuenta el microorganismo a eliminar, de esta forma se da un tratamiento, utilizando el nivel de desinfeccin ms adecuado (alto, intermedio, bajo).
BIBLIOGRAFA
Pia, Carmen (2012). Protocolo Acadmico, curso de microbiologa 201504. Universidad Nacional Abierta Y A Distancia, Unad. Pasto. Gonzlez, Paulo (2011) .Curso Ctedra Unadista, Escuela De Ciencias Sociales, Artes Y Humanidades, ECSAH. Universidad Nacional Abierta Y A Distancia, Unad.
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http://www.definicionabc.com/general/desinfeccion.php#ixzz2k7W4cD00 Wikipedia, Desinfeccin. Consultado de:
http://es.wikipedia.org/wiki/Desinfecci%C3%B3n