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DOCUMENTO ELABORADO POR: Dr. Juan A. Figueredo Gloria B. Cabrera

REVISADO POR: Dr. Juan A. Figueredo

APROBADO POR: Dr. Oscar Merlo

APOYO TECNICO Este Manual de Procedimiento es el resultado de Curso de Gestin de Calidad para Laboratorios realizado en el Laboratorio Central de Salud Pblica (LCSP), del 5 de septiembre de 2007 al 2 de julio de 2008. Dra. Mara Magdalena Alonso, Coordinadora LCSP Dra. Mara Eugenia Len, Tutora - LSCP

MINISTERIO DE SALUD PBLICA Y BIENESTAR SOCIAL

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

MANUAL DE PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR

LABORATORIO DE URGENCIAS

MAYO 2.008

LABORATORIO DEL INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL GESTION DE CALIDAD PARA LABORATORIOS MISION
Realizar la totalidad de los anlisis con la mayor brevedad y precisin posible, tanto a pacientes ambulatorios, urgencias y pacientes internados que acuden al Hospital en su carcter de Instituto de Referencia para afecciones Infecto-Contagiosas y en su rol de Laboratorio de urgencias, bsicamente.

VISION
Contar con equipamientos bsicos y con servicio de mantenimiento principalmente para determinaciones bsicas como ser: Gases Electrolitos Crasis Hemograma

CODIGO DE ETICA
Lineamientos: Todo informe de resultados deber contar con la firma y el sello del profesional responsable del anlisis o bien del Jefe de Servicio. Cualquier resultado dudoso a contradictorio ser verificado previamente antes de ser informado. Todo resultado de anlisis de pacientes internados deber ser entregado en enfermera o al personal mdico responsable, no al familiar, manteniendo as la cadena de confidencialidad. Evitar cualquier tipo de comentarios sobre resultados al paciente o a familiares, remitiendo directamente al mdico.

ORGANIGRAMA DEL LABORATORIO


DIRECTOR GENERAL DR. OSCAR MERLO
VICE DIRECTOR MEDICO DRA. NIDIA CACERES JEFATURA DE LABORATORIO DR. JUAN FIGUEREDO COORDINACION GENERAL DRA. ROSE M. ALBORNO

LABORATORIO BACTERIOLOGIA DR. JUAN D. IRALA L. DRA. EDELIRA AYALA DRA. STELLA SOSA DRA. M EUGENIA MAYOR SRA. IRENE FLEITAS

LABORATORIO DE URGENCIAS

CONTROL DE CALIDAD Y SUMINISTROS SRTA. GLORIA CABRERA SRA. FELICIA MONTANIA

ESTADISTICAS SRTA. GLORIA CABRERA

TURNO FIN DE SEMANA COORDINACION: DR. ENRIQUE GRANADO DRA. MABEL DUARTE DRA. ANGELA NA SRA. MARIANA FERNANDEZ SRA. DIONISIA ARELLANO

TURNO MAANA COORDINACION: SRTA. GLORIA CABRERA DRA. LUDY CABRAL DRA. SOFIA SALDIVAR SRA. FELICIA MONTANIA SRA. CLORINDA GONZALEZ

TURNO TARDE COORDINACION: DRA. ROSE M. ALBORNO DRA. GLADYS NUEZ DRA. ESTELA RIVEROS DRA. CYNTHIA CASTRO SRA. ANA RUIZ SRA. M ELENA AYALA

TURNO NOCHE COORDINACION: DRA. BALBINA PAVON DR. TOMAS GONZALEZ DRA. ROSA PORTILLO DRA. NORMA FARIA DRA. SUSANA RIVELA SRA. JUANA VERGARA SRA. FATIMA OVELAR SRA. NELIDA ENCISO

GESTION DE CALIDAD PARA LABORATORIOS FLUJOGRAMA


INTERNADOS TERAPIA ADMISION DEL PACIENTE AMBULATORIOS URGENCIAS

Remitir al lab.pedidos de anlisis para retirar materiales p/ toma de muestra.

Identificacin del paciente - Ambulatorio - Urgencias - Internados - Terapia

Cumple con

Toma de muestras
requisitos p/ toma de muestra cumple requisitos

No

Indicar procedimientos correctos

Rechazo SI

Registro y preparacin del paciente

Obtencin de muestras

Informaciones al paciente Transporte y registro de muestras en el lab.

Informar a las enfermeras

Apto NO

Verificacin de muestras en el laboratorio

Apto NO

Comunicar y Solicitar nueva muestra

Apto SI Rechazo Preparacin Y Procesamiento Rechazo

INDICE GENERAL

- POE para Toma de muestra - POE para Hemograma - POE para Frotis de sangre perifrica - POE para Gota Gruesa - POE para Crasis sangunea - POE para Tipificacin - POE para Lquido Cefalorraqudeo - POE para Lquido Pleural - POE para Lquidos en general - POE para Toma de muestra para anlisis de orina - POE para Anlisis de Orina simple - POE para Frotis de mucus fecal - POE para Glucosa - POE para Urea - POE para Creatinina - POE para Perfil Lipdico - POE para Hepatograma - POE para Protenas - POE para Amilasa - POE para Electrolitos - POE para Gases Arteriales - POE para Control de calidad - POE para Antiestreptolisina O - POE para Factor Reumatoideo - POE para Protena C. reactiva - POE para V.D.R.L - POE para Test rpido para Dengue - POE para Test rpido para Hepatitis B - POE para Test rpido para Hepatitis C - POE para Test rpido para H.I.V - POE para Control de calidad de Electrolitos - POE para Control de calidad para Hemograma - POE para Control de calidad para Crasis sangunea - POE para Control de calidad para Gases arteriales

TM01-01 HG02-01 FSP03-01 GG04-01 CS05-01 T06-01 LCR07-01 LP08-01 L09-01 TMO10-01 OS11-01 FMF12-01 G13-01 U14-01 CR15-01 PL16-01 HEP17-01 P18-01 A19-01 E20-01 GA21-01 CC22-01 AST23-01 FR24-01 PCR25-01 VD26-01 TRD27-01 TRHB28-01 TRHC29-01 HIV30-01 CCE31-01 CCH32-01 CCCS33-01 CCGA34-01

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE TOMA DE MUESTRA

POE TM01-01

INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Pacientes ambulatorios/externo Pacientes de urgencias Pacientes internados Pacientes de terapia intensiva Reactivos, materiales y equipos Fundamentos Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

10 2) Objeto/Propsito: Describir el proceso de la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para la obtencin y su trasporte hasta el Laboratorio. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, enfermera: adultos, pediatra y terapia que estn encargados de la toma de muestra y del traslado de los materiales hasta el laboratorio, tcnicos y bioqumicos. 4) Responsables: Enfermeras, Bioqumicos y Tcnicos de turno. 5) Definiciones: - P.C.R: Protena C Reactiva. - L.C.R: Lquido cefalorraqudeo. - G.O.T: Aspartato aminotransferasa. - G:P:T: Alanita aminotransferasa. - H.D.L: Lipoprotenas de alta densidad. - L.D.L: Lipoprotenas de baja densidad. 6) Desarrollo del procedimiento: Todo paciente que concurre al Hospital para utilizar los servicios de Laboratorio necesariamente deber pasar por Admisin en donde se brindar toda la informacin requerida sobre costos, anlisis realizados, sistema de exoneracin (Servicio social o Cuenta paciente), toma de muestras y plazos de entrega de anlisis. Bsicamente existen cuatro tipo de pacientes: Pacientes ambulatorios o externos: son aquellos que concurren en forma habitual o normalmente a realizarse sus anlisis y que cuentan ya con pedidos de anlisis. Pacientes de urgencia: son aquellos que concurren al servicio de urgencias afectados por patologas que requieren de una atencin rpida. Pacientes internados: son aquellos que se encuentran ya sean en urgencias o en las respectivas salas del hospital. Pacientes de terapia intensiva: son aquellos que se encuentran internados en la sala de terapia intensiva, sean estos adultos o peditricos. Segn el tipo de paciente considerado se establecer mecanismo de toma de muestras, forma de pago o exoneracin y tipos de anlisis a realizar, as como tambin la entrega de resultados. Los pacientes ambulatorios concurrirn directamente al rea de toma de muestras en Urgencias donde se proceder a la toma de muestra en si, toda vez que tenga habilitado su pedido de anlisis (exonerado o pagado con sello de perceptora), las muestras sern remitidas al laboratorio por enfermeras y los resultados sern entregados en perceptora segn plazos establecidos y comunicados claramente al paciente ya sea en admisin o en rea de extraccin. Para este grupo de pacientes no podr realizarse anlisis tales como: gases y electrolitos, hepatograma, crasis sangunea y cultivos en general salvo casos excepcionales debidamente autorizados. Pacientes de Urgencia: se realizara extraccin o toma de muestra en la misma sala de urgencias por enfermeras y/o mdicos y derivados al laboratorio por estas mismas personas, no por familiares; los resultados sern retirados del laboratorio en un plazo establecido por el bioqumico de guardia y no mayor a 3 horas desde el momento de su recepcin. Se podr realizar anlisis de crasis sangunea para pacientes que acuden por casos de accidente ofdico, no as anlisis como hepatograma, electrolitos, gases y cultivos. -

11 Pacientes internados y de Terapia intensiva: para estos pacientes se realizar todos los anlisis que el laboratorio realiza; la toma de muestra se realizar en las distintas salas por enfermeras y/o mdicos y trasladadas las muestras por los mismos (no familiares) al laboratorio para su procesamiento, as tambin los resultados sern retirados por mdicos y/o enfermeras. - Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, anticoagulantes, bandas adhesivas, etc., as como instrucciones para una buena toma de muestra ser proporcionada por el laboratorio a las distintas reas de extraccin. - Fundamento: como el laboratorio no realiza la toma de muestra es de vital importancia delimitar responsabilidades y establecer los mecanismos necesarios para una buena y eficiente toma de muestra; como ser la responsabilidad del laboratorio de brindar todo el asesoramiento necesario tanto para la toma en si, as como el transporte de muestras y entrega de resultados, tambin las reas de extraccin estn comprometidos a cumplir con las directrices dadas por el laboratorio para el efecto. - Especificaciones: el listado de anlisis realizados por el laboratorio as como al tipo de pacientes que involucra son las siguientes: Pacientes externos y/o ambulatorios, y de Urgencias: Hemograma, VSG, recuento de plaquetas, frotis de sangre perifrica, gota gruesa, frotis de mucus fecal, orina simple, glicemia, urea, creatinina, acido rico, perfil lipdico, amilasa, frotis y coloracin de gram para secreciones, lquidos de puncin (LCR, Pleural, Asctico, Articular, etc.), tinta china, VDRL, ASTO, factor reumatoideo, PCR, test rpido para HIV para accidentes laborales y tipificacin sangunea. El anlisis de crasis sangunea ser incluida para los pacientes con accidentes ofdicos. Pacientes internados y de Terapia intensiva: al listado anterior deber agregarse los anlisis de gases arteriales, electrolitos, hepatograma (GOT, GPT, Fosfatasa alcalina, bilirrubinas), y cultivos generales segn protocolo de bacteriologa. Instrucciones detalladas: No sern admitidas muestras de dudosa procedencia o remitidas de otros servicios en ninguno de los turnos, excepto casos debidamente justificadas y autorizadas por el jefe de servicio o la direccin del Hospital. En los turnos tarde, noche y fin de semana se procesaran anlisis considerados de urgencia nicamente, no se consideran as anlisis como Perfil lipdico (colesterol, triglicridos, HDL, LDL,y VLDL-Colesterol), acido rico, y VDRL en sangre; anlisis que se procesaran de lunes a viernes en el turno maana. Los anlisis de cultivo se recepcionaran directamente en el departamento de bacteriologa las 24hs. segn protocolo de dicha rea. Se dar prioridad a los pedidos de anlisis de urgencia y de terapia sobre todo a muestras de Hemograma, PCR, LCR, gases, electrolitos y crasis sangunea para accidentes ofdicos. La recepcin de las muestras as como los criterios de aceptacin y rechazo se tomaran en el mismo momento de manera a definir rpidamente su procesamiento o no, y si es necesario solicitar nueva muestra, as tambin se verificara que los pedidos de anlisis cumplan con todos los requisitos como ser: nombre y apellido del paciente en forma clara, edad, sexo, sello de perceptora ya sea para pacientes externos e internados (Cuenta paciente). Tener en cuenta: Hora de recepcin en el laboratorio as como hora de entrega de resultados.

12 Condiciones de la muestra: recipientes adecuados, recipientes con identificacin y coincidente con el pedido de anlisis, condiciones de transporte, personal que transporta el material al laboratorio (no familiares ni el mismo paciente), cantidad o volumen de muestra, relacin sangre-anticoagulante, hemlisis, lipmia, etc. Mecanismo de entrega de resultados: pacientes externos en perceptora. Pacientes de urgencias retiran personal de blanco de urgencias. Pacientes internados o en terapia intensiva, por el personal de blanco (enfermeras, asistentes, mdicos y ocasionalmente por personal del laboratorio).

7) Formularios y registros: Las muestras decepcionadas sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier anomala referente a la muestra y el pedido de anlisis, antes de proceder a su procesamiento. El profesional competente de turno deber corroborar y confirmar la validez de la muestra decepcionada. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 9) Lista de distribucin: Los pedidos originales sern archivados en carpetas habilitadas para el efecto y las muestra de suero sern alicuotadas despus de su procesamiento y conservadas por 24hs. en el congelador por si hubiere necesidad de corroborar algn resultado, despus de ste tiempo sern desechadas de forma habitual.

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INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE HEMOGRAMA

POE HG02-01

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INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestras requeridas Almacenamiento Reactivos, materiales y equipos Fundamento. Determinacin manual Especificaciones Instrucciones detalladas Ejecucin de los anlisis con el contador Contador hematolgico Reactivos del contador hematolgico Operacin con el Cell Dyn 1700 Procesado de muestras en modo abierto Expresin de resultados Interferencias Calibradores Necesidad de calibracin Preparacin del calibrador Ejecucin de la calibracin Calibracin modo abierto Calibracin en modo cerrado Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

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HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describe el procedimiento operativo para realizar la toma de muestra para la elaboracin del anlisis de hemograma. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con el pedido mdico, a la seccin de enfermera, al bioqumico de turno y al tcnico. 4) Responsables: Bioqumicos y tcnicos de turno.

16 4) Definiciones: El sistema efecta las mediciones hematolgicas que se conocen siguientes abreviaturas: WBC: Recuento de glbulos blancos o MCV: Volumen corpuscular medio leucocitos GRA: Recuento absoluto de granulocitos. MCH: Hemoglobina corpuscular medio %G: Porcentaje de granulocitos. MCHC: Concentracin de hemoglobina corpuscular media LYM: Recuento absoluto de linfocitos. RDW: Amplitud de la distribucin de tamao de eritrocitos %L: Porcentaje de linfocitos. PLT: Recuento de Plaquetas *MID: Recuento de MID CELLS. VPM: Volumen plaquetario medio %M: Porcentaje de MID. RBC: Recuento de Glbulos Rojos. HGB: Concentracin de Hemoglobina. HCT: Hematocrito. con las

5) Desarrollo del procedimiento: - Muestra requerida: sangre capilar, venosa, o arterial segn necesidad obtenida de forma asptica. - Almacenamiento: Las muestras frescas son las indicadas para su procesamiento. Los parmetros RBC, HGB, HTC, MCV, MCH, MCHC, RDW, PL T Y MPV son estables (+/5%) dentro de las 24 horas siguientes. Los parmetros diferenciales de la serie blanca (NEU, L YM, MONO, EOS Y BAS) son estables (+/- 10%) hasta un mximo de 12 horas. No parecen existir cambios significativos entre las muestras mantenidas a temperatura ambiente y las refrigeradas. Reactivos, Materiales y Equipos para procesamiento manual: Tubos al vaco, frascos estriles de vidrio o tubos de plstico, contador hematolgico, micro centrfuga, capilares, baco, pipetas para eritrosedimentacin, soporte para pipetas, lminas, colorante ( Wright ), pipeta automtica, diluyente de glbulos blancos, cmara de Neubauer, microscopio. - Fundamento: Determinacin Manual: a partir de la muestra obtenida se realizar una dilucin 1/20(0.38 de diluyente + 20 ul de sangre) para el contaje de glbulos blancos en cmara de Neubauer, mediante la sumatoria del total observado en los cuatro cuadrantes por 50, con un aumento de 10x; a la vez se carga un capilar para determinar hematocrito de la misma se obtiene los valores de la hemoglobina y la cantidad aproximada de glbulos rojos, el capilar se centrifuga 5min. a 12 mil rpm despus del cual se realiza la lectura con la ayuda de un baco. Paralelamente se realizara un frotis que se colorea con wright el cual ser observado con objetivo de inmersin para realizar frmula leucocitaria, recuento de plaquetas, y cualquier variacin morfolgica intra y extracelular, por ltimo se realiza la determinacin del VSG mediante la utilizacin de una pipeta adecuada y medida en un lapso de una hora los mm. que sedimenta. - Especificaciones: Los parmetros que se miden a travs del contador hematolgico poseen su especificidad y limites dados por el equipo que debern ser controlados y corregidos mediante la utilizacin de controles provedos y propios para el equipo. Instrucciones detalladas:

17 Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras remitidas de terapia en jeringas utilizando heparina como anticoagulante sern transvasadas en recipientes adecuados para determinacin de hemoglobina/hematocrito o excepcionalmente hemograma segn amerite el caso. A partir del frasco de muestra colectada, homogeneizar y realizar un frotis que ser coloreado y observado al microscopio, luego aspirar en forma directa por el equipo; todo resultado dudoso se tendr que repetir y confirmar en forma manual y por observacin del frotis coloreado, aquellas muestras con volmenes inadecuados sern rechazados as como aquellas que presenten cogulos o microcogulos, una vez realizado la corrida por el contador se medir el VSG con el uso de la pipeta adecuada y lectura a las una hora de los milmetros sedimentados. Ejecucin de los analisis por el contador con Contador Hematolgico: basado en la determinacin automatizada de la muestra de sangre recogida con anticoagulante previa buena homogeneizacin de la misma, por cada muestra analizada por el equipo se realizar un frotis de manera a confirmar tanto la frmula leucocitaria como tambin el recuento de plaquetas as como tambin las variaciones citolgicas de los elementos formes. Reactivos del contador hematolgico: - Diluyente: sulfato sdico anhidro, cloruro sdico, agente antimicrobiano, tampn, estabilizante. - Reactivo de lisis: sal de amonio cuaternario, sal de hidroxilamina. - Detergente: sulfato sdico, cloruro sdico, agente antimicrobiano, ter de plioxietileno. - Limpiador enzimtico - Colorante Wrigth Estos reactivos se conservan a temperatura ambiente, protegidos de la luz solar directa, del calor y la congelacin. Operacin con el Cell Dyn 1700 El sistema permanece en Stand By, con el ordenador central conectado y la pantalla apagados. Encender la pantalla. Comprobar los niveles de reactivos y en especial el frasco de desechos. Desde la pantalla principal pulsar RUN para salir del Stand by. El sistema realiza un purgado de reactivos y un background automtico. Comprobar que el Background est dentro de las especificaciones. Si se desea repetirlo desde el men RUN, pulsar Specimen Type y Background. Procesado de muestras en modo abierto Desde el Men RUN, pulsar Specimen Type y Patient Identificar adecuadamente cada muestra: Next ID, Patient, Sex Homogeneizar la muestra y colocarla bajo la sonda de aspiracin y pulsar la palanca de inicio. Para procesar cada nueva muestra es preciso que el sistema est en Ready. Expresin de resultados Leucocitos WBC: k/ul Frmula leucocitaria: en % y K/UL Hemates RBC: M/ul HGB: g/dl RDW: % Plaquetas PLT: K/ul MPV: fl HCT: % MCV: fl. MCH: pg MCHC: g/dl asdasdasdasdasdasdasdasda

18 El informe se acompaa de 3 Histogramas de WBC, RBC, PLT. El men Data Log almacena todos los resultados (incluidos los histogramas y datos personales de los ltimos 10.000 pacientes. Una vez realizado el mantenimiento diario la mquina debe permanecer en Stand By, para ello desde el men Special Protocols seleccionar Daily Shut Down. Dejar el ordenador en funcionamiento (pantalla atenuada o apagada) hasta que se precise inicializar de nuevo el sistema. Luego llevar las fichas impresas por el contador al profesional responsable para la observacin al microscopio. Trabajar a temperatura ambiente en mesadas firmes, con precaucin de acuerdo a las normas de bioseguridad en el manejo de las muestras. Interferencias Pueden interferir con los parmetros medidos los siguientes componentes: WBC: crioglobulinas y criofibringeno. RBC: autoaglutinacin y plaquetas gigantes. HGB: triglicridos y bilirrubina. MCV: hiperglucemia y WBC muy elevados. PLT: crioglobulinas y microcitosis. Calibradores Cell-Dyn 1700 Series Calibrator Se guardan en heladeta 2-8 C de hematologa. Necesidad de la calibracin Se requerir calibrar el sistema cuando al procesar los controles internos, algn parmetro salga fuera de los lmites especificados para cada uno de los tres niveles del control de calidad interno. Los parmetros que pueden ser calibrados son: RBC, HGB, MCV y PL T, WBC. El resto de parmetros son derivados. Preparacin del calibrador Sacar el calibrador de la nevera y dejar a temperatura ambiente15 minutos, sin agitar. Mezclar primero suavemente con las palmas de la mano y despus por inversin. No agitar. Proceder a calibrar. Guardar en la heladera. Ejecucin de la calibracin La calibracin debe hacerse para modo abierto y modo cerrado desde el men de calibracin. Aunque la mquina puede calibrarse en modo automtico (autoca/), es preferible utilizar el modo manual. Calibracin modo abierto: Se basa en la modificacin manual del factor por parte del usuario. Para ello, procesar la muestra e imprimir los valores obtenidos. Desde el men Calibration, obtener los valores actuales. Calcular la frmula Valor de referencia Factor buscado: -------------------------- x Factor actual Valor obtenido Una vez calculado en Fb del parmetro desde el men Calibration pulsar Enter. Pulsar Retum.

19 Para obtener el Fb del WIC y del WOC los valores obtenidos deben tomarse del men Data Log. Calibracin en modo cerrado La sistemtica es la misma que para el modo abierto, slo que tenemos que tener en cuenta que Fact y Valores Obtenidos son los del modo cerrado (Closed sampler). Tener en cuenta: a. b. c. d. e. f. Volumen de muestra, o sea relacin sangre-anticoagulante. Presencia o no de cogulos. Tipo de anticoagulante ( EDTA o heparina ) Calibracin del contador hematolgico. Realizacin de un buen extendido para el frotis. Confirmacin de valores obtenidos.

6) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 7) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 8) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes (ambulatorios), mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

ANEXOS Equipos utilizados

Cell Dyn 1700

Microscopio y Contador

Microcentrfuga

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HOJA PARA INFORME DE RESULTADO

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INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE FROTIS DE SANGRE PERIFERICA

POE FSP03-01

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INDICE
a. b. c. d. e. f. g. h. i. j. k. l. m. n. o. p. Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos Fundamentos Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

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HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, enfermera, laboratorio.

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4) Responsables: Enfermera, mdicos hematlogos y laboratorio. 5) Definiciones: F.S.P: Frotis de sangre perifrica. 6) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: sangre capilar obtenida de forma asptica recogida en capilares con heparina o directamente sobre lminas en cuyo caso se debe realizar in situ el o los frotis. Reactivos, Materiales y Equipos: lminas, capilares con heparina, colorante de wright, microscopio. Fundamento: bsicamente se determina lo que normalmente se realiza en un hemograma, pero mediante una apreciacin aproximada por observacin directa de un frotis coloreado, tenindose en cuenta: Serie Roja: se debe informar todo lo observado en cuanto a tamao, formas, y concentracin de hemoglobina de los hemates, as tambin la presencia o no de hemoparasitos. Serie Blanca: cantidad aproximada sea normal, disminuida o aumentada, presencia de granulaciones txicas, vacuolas, elementos atpicos as como la frmula leucocitaria. Plaquetas: observando la cantidad aproximada as como la morfologa. Especificaciones: Los elementos que se observan a travs del frotis coloreado se informan de manera aproximada teniendo un valor de orientacin para ayudar en el diagnstico, de ah la importancia de la realizacin de un buen frotis as como una buena coloracin y por sobre todo la observacin microscpica minuciosa por parte de un profesional experimentado si es posible un Hematlogo.

Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras pueden ser remitidas ya sea en lminas o en capilares con heparina ocasionalmente. Tener en cuenta: a. Cantidad de frotis (por lo menos 3 lminas). b. Muestra colectada en capilares con heparina. c. Frotis coloreado para Hematlogo. d. Realizacin de un buen extendido para el frotis. e. 7) Formularios y registros: los frotis coloreados o no de pacientes internados remitidos para el/los hematlogos sern registrados en el cuaderno habilitado para el efecto y las lminas guardadas hasta el momento de su observacin. Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 9) Lista de distribucin: El informe final ser asentado en el cuaderno habilitado para el efecto y el pedido archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya

25 sea a los mismos pacientes (ambulatorios), mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

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INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE GOTA GRUESA

POE GG04-01

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INDICE
a. b. c. d. e. f. g. h. i. j. k. l. m. n. o. p. Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

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HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren a urgencias del IMT as como de pacientes internados y de terapia intensiva as como las condiciones requeridas para su obtencin, transporte y procesamiento. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al extraccionista o mdico encargado de la realizacin del frotis, al tcnico y bioqumico.

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4) Responsables: Mdicos, Tcnicos y Bioqumicos de turno. 5) Definiciones: a. E.D.T.A: anticoagulante. 6) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: preferentemente sangre perifrica tomada en pico de fiebre de la cual se realiza frotis (dos lminas como mnimo), o bien sangre venosa tomada con anticoagulante para hemograma (EDTA o heparina); ocasionalmente se podr utilizar sangre arterial. Reactivos, Materiales y Equipos: jeringas, anticoagulante (EDTA, heparina), capilares con heparina, lminas, colorante de wright, microscopio. Fundamento: basado en la observacin microscpica de un frotis coloreado con objetivo de inmersin teniendo en cuenta la presencia o no de formas de Plasmodium intra o extracelular. Especificaciones: la observacin en forma minuciosa del frotis coloreado teniendo en cuenta los glbulos rojos y la identificacin del parsito requieren de un profesional calificado as como un frotis bien hecho y colectado en tiempo adecuado. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras sern remitidas como frotis o en su defecto como para hemograma ( 2.5 ml de sangre ms una gota de EDTA ), ocasionalmente se podr tomar sangre capilar en capilares con heparina, en ste caso se realiza el frotis en el laboratorio, una vez coloreado se observar al microscopio con aumento de 100X , se observar la mayor cantidad de campos posible buscando formas intra y extracelulares de Plasmodium, en el caso de una lmina positiva se informar se observan formas de Plasmodium sin tipificar, o de lo contrario no se observa formas de Plasmodium. Tener en cuenta: - Sangre capilar - Cantidad de lminas o frotis - Sangre venosa o arterial con anticoagulante - Anticoagulantes (EDTA, heparina)

7) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 9) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos, mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias). Para los pacientes de

30 terapia intensiva se dar prioridad tanto para el procesamiento como para la entrega de resultados.

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INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE CRASIS SANGUINEA

POE CS05-01

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NDICE
a. b. c. d. e. f. g. h. i. j. k. l. m. n. o. p. q. r. Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Funcionamiento del coagulmetro Determinacin manual Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

HISTORICO DE MODIFICACIONES

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ED N

FECHA

APARTADOS

PAG

CAUSAS DE LA MODIFICACION

RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, a la persona encargada de tomar la muestra, a los tcnicos encargados de centrifugar la muestra y al bioqumico encargado de la realizacin de dicho examen.

34 4) Responsables: Bioqumicos y Tcnico de turno. 5) Definiciones: - T.P: Tiempo de protrombina. - TTPa: Tiempo de Tromboplastina Parcial activada. - r.p.m: Revoluciones por minuto. 6) Desarrollo del procedimiento: a. Muestra requerida: sangre venosa obtenida de forma asptica. b. Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos o frascos estriles de vidrio o tubos de plstico con anticoagulante en la proporcin adecuada, coagulmetro, cubetas de reaccin y barras de plomo, lminas, colorante (Wright), bao mara, timer, pipetas volumtricas, pipetas automticas, tips. Fundamento: con Coagulmetro: basado en la determinacin automatizada de la muestra de sangre recogida con anticoagulante citrato en la proporcin adecuada (4 gotas de anticoagulante + 2.5 ml de sangre o 2 gotas de anticoagulante + 1.5 de sangre), la muestra as obtenida se centrifuga lo antes posible 3 min. a 2500 rpm.y se trabaja con el plasma(sobrenadante); con este equipo se realiza tres determinaciones: Tiempo de protrombina, TTPa y Fibringeno, tambin se utilizara los datos de plaquetas que se obtiene a partir del contador hematolgico o mediante observacin de un frotis coloreado. Funcionamiento del Coagulmetro Al prender el equipo primeramente se deber introducir la fecha actual y aceptar con enter, aparecer en la pantalla los posibles parmetros a medir o sea TP, TTPa y Fibringeno y en la parte superior derecha aparecer el nmero 37 parpadeando, esto indica que el equipo todava no a alcanzado los 37C. requerido para la medicin, una vez que deje de parpadear se proceder a las mediciones; el equipo cuenta con posillos de incubacin (18 posillos) donde se incubarn las cubetas con las muestras a dosar, un posillo de reaccin donde una vez terminado el tiempo de incubacin se deber introducir la cubeta para la medicin, un posillo ms grande para posicionar o incubar el reactivo que as lo requiera, una vez que la cubeta con la muestra y su barrita correspondiente ste en posicin o sea en el posillo de reaccin se deber con la tecla reset activar el cronmetro de modo tal que al agregar el reactivo se dispare el cronmetro que se detendr una vez detectado el coagulo; para salir de un programa se deber apretar dos veces la tecla reset, aparece en pantalla salir del programa y se confirma con enter, este procedimiento se repite para el dosaje de cada muestra. El equipo previamente calibrado recurre a la utilizacin de cubetas cilndricas y barras de plomo donde se realiza la reaccin, basado en la deteccin del cogulo formado en un lapso de tiempo dado (TTPa), que se relaciona con el porcentaje (TP), o con una concentracin determinada (Fibringeno). Previamente se calibrara los programas de TP(N 1) y Fibringeno(N 3) mediante la utilizacin de plasma control normal en el caso de TP de manera a hallar el tiempo control para el equipo que deber controlarse cada vez que se abra una nueva caja de reactivo de tromboplastina as se controlara cualquier cambio en el tiempo control y el porcentaje correspondiente, en la misma operacin tambin se deber introducir el valor de ISI que posee cada lote de nuevo reactivo de tal forma que el equipo calcule el valor de INR juntamente con el porcentaje de actividad correspondiente a cada muestra dosada; una vez fijada el tiempo control correspondiente se utilizara la tabla proveda por el reactivo de manera a utilizar por lo menos ocho puntos de referencia que abarquen desde el 100% de actividad hasta el 10% de actividad cubriendo as el mayor rango posible; en el caso del Fibringeno se recurre al uso de un calibrador provedo por el reactivo con una concentracin conocida del cual se realiza diluciones seriadas especficos para cada reactivo, de esta forma se consigue cinco puntos de referencia suficientes para realizar una curva de calibracin, dichos puntos servirn tambin una vez introducidos en el equipo para obtener los valores de fibringeno en mg/dl correspondientes al tiempo de coagulacin. En el caso

35 de TTPa se dosara en uno de los dos programas ya sea de TP o Fibringeno pues se tendr en cuenta el tiempo de coagulacin nicamente sin importar otro dato. Determinacin Manual: a partir de la muestra obtenida se trabaja con el plasma de la misma manera que el mtodo automatizado y con el mismo fundamento, la diferencia radica en que el tiempo de la formacin del cogulo es controlado con la ayuda de un cronmetro y la observacin macroscpica de la reaccin realizado en tubos atemperados a 37C en bao mara, los tiempos de formacin del cogulo se relaciones con valores previamente establecidos mediante la ayuda de tablas y curvas. c. Especificaciones: Los parmetros que se miden a travs del coagulmetro poseen su especificidad y limites dados por el equipo y los reactivos utilizados as como sus correspondientes calibradores o plasma control que debern ser controlados y corregidos cada vez que sea necesario, como ser en el cambio de reactivos. Cada vez que se abra una nueva caja de reactivo de la misma marca o diferente marca se deber calibrar con la ayuda de un plasma control de manera hallar los valores control para cada parmetro. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas, cabe mencionar que dicho anlisis se limitan a pacientes de urgencias con accidente ofdico y pacientes internados, no para pacientes externos o ambulatorios. Las muestras una vez recepcionadas sern centrifugadas lo antes posible para separar el plasma y se trabajara con dicho material, segn como sigue: Para Tiempo de Protrombina: Programa 1 en el coagulmetro. se preincuba por 3 min. 100 ul de plasma en una cubeta con una barra de plomo que se ubica en la posicin de incubacin del quipo, luego se traslada en posicin de reaccin se cera el equipo y se le agrega 200 ul de reactivo (tromboplastina clcica) que automticamente se dispara agitando la mezcla y se detiene al formarse el cogulo que posee su equivalente en porcentaje que viene a ser su valor. Valor de referencia: 70 100 %. Lo mismo se realiza en forma manual pero en tubos con el mismo fundamento. Para los pacientes ofdicos o anticoagulados que presentan coagulacin parcial o tiempos de coagulacin prolongado se deber informar como valor inferior al 10%, indicando si es o no coagulacin parcial. Para TTPa: Programa 1 o 3 en el coagulmetro.se preincuba por 3 min. 100 ul de plasma + 100 ul de cefalina activada en una cubeta con una barra de plomo, se traslada en posicin de reaccin y se le agrega 100 ul de cloruro de calcio atemperado a 37C., se mide el tiempo de formacin del cogulo en segundos que corresponde al valor de TTPa. Valor de referencia: 20 40 seg. El fundamento para el mtodo manual es el mismo. Para los pacientes ofdicos con coagulacin prolongada se deber informar superior a 120 seg., y si presenta o no coagulacin parcial. Para Fibringeno: se realiza una dilucin de 1/10 del plasma con el buffer y se trabaja con dicha dilucin, se preincuba 200 ul de la dilucin en una cubeta con una barra de plomo atemperado a 37C. se le agrega 100 ul de reactivo y se dispara automticamente el cronmetro que se detiene al detectar el cogulo formado. Valor de referencia: 150 400 mg/dl. El fundamento para el mtodo manual es el mismo.

36 Para los pacientes ofdicos con tiempos de coagulacin prolongados se deber informar inferior a 50 mg/dl. Para Recuento de Plaquetas : se obtiene a partir de muestra de sangre recogida con EDTA como para hemograma, es decir procesado como hemograma con el contador hematolgico o bien por contaje en lmina de un frotis coloreado con wright. Valor de referencia: 150 450 / mm3. Los valores inferiores a 50000/mm3 debern confirmarse con recuento en cmara. Los tiempos de coagulacin y sangra se determinan en el momento de la toma de muestra en las enfermeras de urgencias e internados y por lo tanto dichos parmetros es de responsabilidad de tales reas y no del laboratorio, los valores no sern informados por el laboratorio. Los reactivos reconstituidos (TP, TTPa cefalina y Fibringeno) tienen un tiempo de caducidad de una semana en refrigerador desde el momento de su reconstitucin y debern ser desechados al pasar este tiempo, de ah la importancia de fechar los reactivos una vez reconstituidos. Tener en cuenta: d. e. f. g. h. i. j. k. l. Volumen de muestra, o sea relacin sangre-anticoagulante. Presencia o no de cogulos. Tipo de anticoagulante ( Citrato ) Curvas y calibracin del coagulmetro. Lavado y secado de cubetas de reaccin Barras de plomo Reconstitucin de reactivos y fecha de caducidad Pacientes ofdicos, coagulacin parcial Confirmacin de valores obtenidos.

7) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 9) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos, mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

ANEXOS

37

HOJA PARA INFORME DE RESULTADO EQUIPOS UTILIZADOS

Coagulmetro

Pipetas y punteras

38

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE TIPIFICACION

POE T06-01

39

INDICE
- Histrico de modificaciones - Objeto/Propsito - Alcance/Campo de aplicacin - Responsables - Definiciones - Desarrollo del procedimiento - Muestra requerida - Reactivos, materiales y equipos - Fundamento - Especificaciones - Instrucciones detalladas - Tener en cuenta - Formularios y registros - Referencias - Lista de distribucin - Anexos

HISTORICO DE MODIFICACIONES

40
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

1) Objeto/Propsito: describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes ambulatorios que concurren al IMT as como de pacientes internados y de terapia intensiva, como tambin las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 2) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestran con el pedido mdico, persona encargada de la toma de muestra y al bioqumico.

41 3) Responsables: Tcnicos y Bioqumicos de turno. 4) Definiciones: EDTA: Anticoagulante. ul: microlitros. 5) Desarrollo del procedimiento: a- Muestra requerida: sangre venosa obtenida de manera usual y recogida con anticoagulante preferentemente EDTA, tambin se puede utilizar otros anticoagulantes como ser Citrato; para que se tenga una buena reaccin se trabajar con muestras sin coagulo. bReactivos, Materiales y Equipos: Tubos, lminas o placas de reaccin, frascos estriles de vidrio o tubos de plstico, solucin fisiolgica, centrifuga, bao mara, timer, pipeta automtica, palillos. cFundamento: Los glbulos rojos del paciente se ponen en contacto con reactivo Anti-A, Anti-B y Anti-D. Si existen en la superficie de los eritrocitos los antgenos correspondientes, se producir una aglutinacin visible macroscpicamente. La ausencia de aglutinacin en todos casos, implica grupo O, en el caso de Anti-A y Anti-B y un factor Rh(-) negativo en el caso de Anti-D. Se procede con lminas o placas de reaccin de fondo claro en el cual se deposita tres gotas de sangre (50 ul.) bien mezclado por agitacin suave, a dichas gotas se adiciona una gota con el mismo gotero del reactivo los reactivos de Anti-A, Anti-B y Anti-D y se mezclan bien con la ayuda de palillos individuales se continua mezclando balanceando la placa con la mano durante dos minutos, despus se evala macroscpicamente la reaccin que se produce, toda aglutinacin visible se considera como de grupo A, grupo B, grupo AB,y de factor Rh positivo; segn el tipo de reaccin en cada caso; en el caso de no producirse aglutinacin alguna en ninguna de las tres mezclas ( anti-A, anti-B, y anti-D ) se considerar del grupo O Cero con factor Rh(-) negativo. En el caso de un grupo con factor Rh(-) negativo se proceder al lavado de los glbulos rojos de la siguiente manera: en un tubo de hemlisis se coloca 1ml. de sangre en cuestin y 3 ml. de solucin fisiolgica se mezcla y se centrifuga a 2000rpm. por 2 min., se desecha el sobrenadante se mezcla bien el centrifugado se alcuota 100 ul. de la misma en un tubo de hemlisis y se le agrega 100 ul. de Anti-D y se lleva a bao mara mezclando y observando la reaccin por 2 min. manteniendo siempre el tubo en el bao mara, con esto se confirma el factor Rh. Especificaciones: hay que tener en cuenta las proporciones de gotas de sangre y de gotas de reactivos para la reaccin, as como tambin la presencia o no de coagulo que puede llegar a interferir en las reacciones haciendo que las mismas no sean tan evidentes, de ah la importancia de realizar las pruebas en placas de fondo claro de manera a recurrir al uso del microscopio de ser necesario para confirmar la prueba.

Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Tener en cuenta: a. Muestra adecuada. b. Tipo de anticoagulante, EDTA o Citrato.

42 c. Confirmacin de grupos factor Rh negativo. d. Tiempo considerado para interpretacin de resultado. d-Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. e- Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. f- Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias), o de ser posible remitido a terapia por personal del laboratorio si la urgencia as lo requiere.

43

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE LIQUIDO CEFALORRAQUIDEO

POE LCR07-01

INDICE

44

Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Observacin macroscpica Aspecto Citologa Determinacin del predominio Determinacin de Pandy Determinaciones qumicas (Glucosa, Protenas/Albmina, VDRL) Coloracin de Gram Tinta china Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

HISTORICO DE MODIFICACIONES

45
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, enfermera, laboratorio. 4) Responsables: Medicos, Bioqumicos y Tcnicos de turno. 5) Definiciones: L.C.R: Lquido Cefalorraqudeo

46

6) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: lquido cefalorraqudeo remitido en frasco estril bien identificado, por lo general se toman dos muestras y se utiliza para citoqumico aquel frasco que no presente cogulo, en el caso que alguno de los frascos lo tuviere, de manera que dicha muestra se utilice para bacteriologa. Las muestras sern tomadas por mdicos y trasladadas al laboratorio por personal de blanco lo antes posible. Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, centrifuga, lminas, laminillas, microscopio, fotocolormetro, cmara de Neubauer, diluyente de glbulos blancos, coloracin de gram, tinta china, reactivos para dosaje de: Glucosa, Protenas, Pandy. Fundamento: a partir del frasco de muestra recepcionada se proceder a realizar los estudios: de observacin macroscpicas: Aspecto y Sobrenadante, las de observacin microscpica o citolgica: recuento de leucocitos, hemates y sus predominios, Coloracin de Gram y Tinta china y el estudio Qumico: Glucosa, Protenas o Albmina, Pandy. A- Observacin Macroscpica: A-1- Aspecto: Citologa: se procede a cargar en forma directa la cmara de Neubauer de manera a realizar el contaje de leucocitos y hemates; para la cantidad de leucocitos se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica por 2.5 y se expresa por mm3.; en el caso de hemates se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica x 10 y se expresa en mm3. Determinacin de predominio: para los hemates se observara la prevalencia de hemates frescos o crenados y se expresara en porcentaje, en el caso de leucocitos se informara en porcentaje el predominio de polimorfonucleares o mononucleares ya sea con la ayuda del diluyente de blancos, coloracin de gram, u otro tipo de coloracin (wright, etc.) Determinacin de Pandy: dependiendo del aspecto del lquido se trabaja directamente con el material o con el sobrenadante del lquido centrifugado, en un tubo alicuotar 1 ml. de reactivo de pandy al cual se le agrega 50ul del lquido y observar cuidadosamente la reaccin, informando una reaccin positiva en el caso de presentarse una ligera opalescencia hasta un evidente color blanco que enturbia la solucin. Determinaciones qumicas: Glucosa: se trabaja con el sobrenadante del lquido y se procesar lo antes posible una vez recepcionado el material de manera a evitar una disminucin de la misma por la presencia de grmenes. La tcnica a utilizarse es la misma que en sangre, se utiliza 10ul de lquido ms 1ml. de reactivo y se incuba 5min. segn tcnica vigente a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura fotomtrica, normalmente su valor representa el 70% del valor en sangre. - Protenas/Albmina : se utiliza 20ul de lquido ms 1ml. de reactivo y se incuba 10min. a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura; todos aquellos valores superiores a 150 mg/dl. de protenas deber diluirse el lquido para hallar un valor exacto. - VDRL : la prueba se realizar con el sobrenadante del lquido, el antgeno ser diluido 1:2 con solucin de cloruro de sodio al 10%; se utiliza 50ul de muestra ms 10ul del antgeno diluido, se mezcla bien y se rota horizontalmente por 8min. a 180 rpm. aproximadamente y luego se observa al microscopio con aumento de 10x., se informa de forma habitual segn la ltima dilucin que aglutine.

47 Coloracin de gram: se realizar un frotis a partir del sedimento del centrifugado se seca a T ambiente y se fija a la llama, luego se colorea con los colorantes: 1min. con cristal violeta se lava con agua, 1min. con lugol se lava con suficiente agua, se decolora con decolorante( alcohol-acetona ), se lava con agua y finalmente se deja 1min. con safranina y se vuelve a lavar, se deja secar a T ambiente y se observa al microscopio con objetivo de inmersin 100x. Se informa: Gram positivos: los que retienen el color azul del cristal violeta resistiendo la decoloracin y el contra color con safranina. Gram negativos: aquellos que retienen el color rojo de la safranina. Tambin la coloracin es til para determinar el predominio de leucocitos. En el caso de alguna duda con relacin al informe deber guardarse la lmina y registrar la misma en el cuaderno habilitado para el mismo que deber ser confirmado por bacteriologa o por un profesional bacterilogo del plantel del laboratorio. Tinta china: se trabaja con el sedimento del lquido centrifugado mnimo por 15min. del cual se toma 20ul. ms 20ul. de tinta china entre lmina y laminilla y se mira con aumento de 40x., se informara si se observa o no formas de cryptococcus neoformans, en el caso que se observare se tendr que informar el porcentaje de gemacin si hubiere, siendo igual a la cantidad de cryptococcus en gemacin en relacin al total observado. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas; se podr recepcionar muestras con pedidos provisorios de manera a acelerar el procesamiento. Las muestras remitidas de otras dependencias u otras instituciones de salud debern cumplir con ciertos requisitos de manera a ser admitidas, el pedido mdico deber contar con los siguientes datos: nombre legible del paciente, edad, sexo, hora de toma de muestra, medicacin actual, diagnostico presumible, anlisis solicitado, sello y firma del mdico solicitante, as tambin el sello de perceptora. En ningn caso se admitir muestras con pedido de cultivo de otras instituciones, excepto casos bien justificados y por sobre todo autorizados por la direccin del Hospital. Todos los lquidos procesados debern ser conservados por un periodo de una semana hasta el momento de ser desechados, de manera a confirmar cualquier duda que pueda existir con respecto a la muestra. Tener en cuenta: a. b. c. d. e. f. Volumen de muestra. Presencia o no de cogulos. ( informar siempre ) Utilizacin o no de anticoagulante ( de preferencia citrato) Confirmacin del informe de gram. Informe del porcentaje de gemacin de Cryptococcus, en la prueba de tinta china. Prioridad en el procesamiento y entrega de resultados.

7) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS.

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9) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes en el caso de muestras remitidas, mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

49

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE LQUIDO PLEURAL

POE LP08-01

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INDICE
a. b. c. d. e. f. g. h. i. j. k. l. m. n. o. p. q. r. s. t. Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Observacin macroscpica (Aspecto, sobrenadante) Observacin macroscpica (Citologa, determinacin del predominio) Determinaciones qumicas (Rivalta, pH, glucosa, Alb/Prot, colesterol) Determinaciones qumicas (Ldh) Coloracin de Gram Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

HISTORICO DE MODIFICACIONES

51

ED N

FECHA

APARTADOS

PAG

CAUSAS DE LA MODIFICACION

RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

2) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT por sala de Urgencias, pacientes internados, para muestras derivadas de otras instituciones de salud pblica y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 3) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido, a los mdicos, enfermeras, tcnicos y bioqumico del laboratorio.

52 4) Responsables: Mdicos encargados de la toma de muestra, enfermeras que remiten la muestra al laboratorio, Tcnicos encargados de centrifugar el material y el Bioqumico que procesa la muestra. 5) Definiciones: Ldh: Lactato deshidrogenasa 6) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: lquido de puncin pleural remitido en frasco estril bien identificado, por lo general se toman dos muestras y se utiliza para citoqumico aquel frasco que no presente cogulo, en el caso que alguno de los frascos lo tuviere, de manera que dicha muestra se utilice para bacteriologa. Las muestras sern tomadas por mdicos y trasladadas al laboratorio por personal de blanco lo antes posible. Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, centrifuga, lminas, laminillas, microscopio, fotocolormetro, cmara de Neubauer, diluyente de glbulos blancos, coloracin de gram, reactivos para dosaje de: Glucosa, Protenas, Colesterol, Ldh, Rivalta. Fundamento: a partir del frasco de muestra recepcionada se proceder a realizar los estudios: citolgico y qumico. Deber tenerse en cuenta las observaciones macroscpicas como ser la del Aspecto del lquido, Sobrenadante (una vez centrifugado), y determinaciones qumicas como: pH, Glucosa, Colesterol, Protenas, Ldh, Rivalta; y observaciones microscpicas para el recuento citolgico de leucocitos, hemates y sus predominios as como el informe de la coloracin de Gram. A- Observacin Macroscpica: A-1- Aspecto: deber tenerse en cuenta detalles como: carcter hemtico (presencia moderada de sangre), hemorrgico (presencia franca de sangre), purulento (presencia de pus), coagulado, etc. A-2- Sobrenadante: se tendr en cuenta despus de centrifugado el lquido, pudiendo ser: turbio, lig.turbio, lmpido, de color citrino (amarillo), hemtico o incoloro, etc. B- Citologa: se procede a cargar en forma directa la cmara de Neubauer de manera a realizar el contaje de leucocitos y hemates; para la cantidad de leucocitos se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica por 2.5 y se expresa por mm3.; en el caso de hemates se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica x 10 y se expresa en mm3. Determinacin de predominio: para los hemates se observara la prevalencia de hemates frescos o crenados y se expresara en porcentaje, en el caso de leucocitos se informara en porcentaje el predominio de polimorfonucleares o mononucleares ya sea con la ayuda del diluyente de blancos, coloracin de gram, u otro tipo de coloracin (wright, etc.) C- Determinaciones Qumicas: C-1- Determinacin de Rivalta: se trabaja directamente con el con el sobrenadante del lquido centrifugado, en un tubo alicuotar 3 ml. de reactivo de rivalta (Acido actico al 2%) al cual se le agrega 50ul del lquido y observar cuidadosamente la reaccin, informando una reaccin positiva en el caso de presentarse una ligera opalescencia hasta un evidente color blanco que enturbia la solucin en forma de humo de cigarrillo. C-2- Determinacin de pH: a partir del lquido centrifugado se carga en un capilar para hematocrito y se procesa como una muestra de gasometra en el gasmetro, teniendo en cuenta el valor de pH que se obtiene.

53 C-3- Glucosa: se trabaja con el sobrenadante del lquido y se procesar lo antes posible una vez recepcionado el material de manera a evitar una disminucin de la misma por la presencia de grmenes. La tcnica a utilizarse es la misma que en sangre, se utiliza 10ul de lquido ms 1ml. de reactivo y se incuba 5min. segn tcnica vigente a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura fotomtrica, el valor as obtenido se expresa en mg/dl. C-4- Protenas/Albmina : se utiliza 50ul de lquido ms 3.5ml. de reactivo, se incuba 15min. a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura; como la concentracin de protenas en lquido pleural es superior que en LCR, el reactivo a utilizarse ser la misma usada para dosaje de protenas en sangre siguiendo la tcnica descrita arriba y el resultado obtenido se expresar en g/l. C-5- Colesterol: el reactivo a usarse es la misma que en sangre y la tcnica tambin, es decir: 10ul de lquido centrifugado ms 1 ml. de reactivo el cual se incuba 10 min. en bao mara a 37C., despus del cual se realiza la lectura expresndose el resultado obtenido en mg/dl C-6- LDH: de la misma manera que en sangre se procede con el lquido centrifugado, una vez preparado el reactivo de trabajo 1ml. se le adiciona 20 ul. de lquido y se aspira inmediatamente en el fotocolormetro el cual realiza las lecturas en intervalos de tiempo ( mtodo cintico ), el resultado obtenido se expresa en U/l. D- Coloracin de Gram: se realizar un frotis a partir del sedimento del centrifugado se seca a T ambiente y se fija a la llama, luego se colorea con los colorantes: 1min. con cristal violeta se lava con agua, 1min. con lugol se lava con suficiente agua, se decolora con decolorante( alcohol-acetona ), se lava con agua y finalmente se deja 1min. con safranina y se vuelve a lavar, se deja secar a T ambiente y se observa al microscopio con objetivo de inmersin 100x. Se informa: Gram positivos: los que retienen el color azul del cristal violeta resistiendo la decoloracin y el contra color con safranina. Gram negativos: aquellos que retienen el color rojo de la safranina. Tambin la coloracin es til para determinar el predominio de leucocitos. En el caso de alguna duda con relacin al informe deber guardarse la lmina y registrar la misma en el cuaderno habilitado para el mismo que deber ser confirmado por bacteriologa o por un profesional bacterilogo del plantel del laboratorio. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas; se podr recepcionar muestras con pedidos provisorios de manera a acelerar el procesamiento. Las muestras remitidas de otras dependencias u otras instituciones de salud debern cumplir con ciertos requisitos de manera a ser admitidas, el pedido mdico deber contar con los siguientes datos: nombre legible del paciente, edad, sexo, hora de toma de muestra, medicacin actual, diagnostico presumible, anlisis solicitado, sello y firma del mdico solicitante, as tambin el sello de perceptora. En ningn caso se admitir muestras con pedido de cultivo de otras instituciones, excepto casos bien justificados y por sobre todo autorizados por la direccin del Hospital. Todos los lquidos procesados debern ser conservados por un periodo de una semana hasta el momento de ser desechados, de manera a confirmar cualquier duda que pueda existir con respecto a la muestra.

54 Tener en cuenta: a. b. c. d. e. Volumen de muestra. Presencia o no de cogulos. ( informar siempre ) Utilizacin o no de anticoagulante ( de preferencia citrato) Confirmacin del informe de gram. Prioridad en el procesamiento y entrega de resultados.

7) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 8) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 9) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes en el caso de muestras remitidas, mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

55

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE LIQUIDOS EN GENERAL

POE L09-01

56

INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Observacin macroscpica (Aspecto, sobrenadante) Observacin macroscpica (Citologa, determinacin del predominio) Determinaciones qumicas (Rivalta, pH, glucosa,Alb/Prot) Coloracin de Gram Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

57 HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

10) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT por sala de Urgencias, pacientes internados, para muestras derivadas de otras instituciones de salud pblica y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 11) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, Urgencias y Laboratorio. 12) Responsables: Enfermera, mdicos, tcnicos y bioqumicos del laboratorio.

58

13) Definiciones: a. LCR: Liquido cefalorraqudeo. b. Cmara de neubauer: material utilizado para el contaje de Glbulos blancos, Glbulos rojos y plaquetas. 14) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: lquido de puncin remitido en frasco estril bien identificado, por lo general se toman dos muestras y se utiliza para citoqumico aquel frasco que no presente cogulo, en el caso que alguno de los frascos lo tuviere, de manera que dicha muestra se utilice para bacteriologa. Las muestras sern tomadas por mdicos y trasladadas al laboratorio por personal de blanco lo antes posible. Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, centrifuga, lminas, laminillas, microscopio, fotocolormetro, cmara de Neubauer, diluyente de glbulos blancos, coloracin de gram, reactivos para dosaje de: Glucosa, Protenas. Fundamento: a partir del frasco de muestra recepcionada se proceder a realizar los estudios: citolgico y qumico. Deber tenerse en cuenta las observaciones macroscpicas como ser la del Aspecto del lquido, Sobrenadante (una vez centrifugado), y determinaciones qumicas como: pH, Glucosa, Protenas, Rivalta y observaciones microscpicas para el recuento citolgico de leucocitos, hemates y sus predominios as como el informe de la coloracin de Gram. A- Observacin Macroscpica: A-1- Aspecto: deber tenerse en cuenta detalles como: carcter hemtico (presencia moderada de sangre), hemorrgico (presencia franca de sangre), purulento (presencia de pus), coagulado, etc. A-2- Sobrenadante: se tendr en cuenta despus de centrifugado el lquido, pudiendo ser: turbio, lig.turbio, lmpido, de color citrino (amarillo), hemtico o incoloro, etc. B- Citologa: se procede a cargar en forma directa la cmara de Neubauer de manera a realizar el contaje de leucocitos y hemates; para la cantidad de leucocitos se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica por 2.5 y se expresa por mm3.; en el caso de hemates se cuenta los cuatro cuadrantes de blancos y el total se multiplica x 10 y se expresa en mm3. Determinacin de predominio: para los hemates se observara la prevalencia de hemates frescos o crenados y se expresara en porcentaje, en el caso de leucocitos se informara en porcentaje el predominio de polimorfonucleares o mononucleares ya sea con la ayuda del diluyente de blancos, coloracin de gram, u otro tipo de coloracin (wright, etc.) C- Determinaciones Qumicas: C-1- Determinacin de Rivalta: se trabaja directamente con el con el sobrenadante del lquido centrifugado, en un tubo alicuotar 3 ml. de reactivo de rivalta (Acido actico al 2%) al cual se le agrega 50ul del lquido y observar cuidadosamente la reaccin, informando una reaccin positiva en el caso de presentarse una ligera opalescencia hasta un evidente color blanco que enturbia la solucin en forma de humo de cigarrillo. C-2- Determinacin de pH: a partir del lquido centrifugado se carga en un capilar para hematocrito y se procesa como una muestra de gasometra en el gasmetro, teniendo en cuenta el valor de pH que se obtiene; las muestras muy viscosas o con mucha fibrina deber descartarse para sta determinacin.

59 C-3- Glucosa: se trabaja con el sobrenadante del lquido y se procesar lo antes posible una vez recepcionado el material de manera a evitar una disminucin de la misma por la presencia de grmenes. La tcnica a utilizarse es la misma que en sangre, se utiliza 10ul de lquido ms 1ml. de reactivo y se incuba 5min. segn tcnica vigente a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura fotomtrica, el valor as obtenido se expresa en mg/dl. C-4- Protenas/Albmina : se utiliza 50ul de lquido ms 3.5ml. de reactivo, se incuba 15min. a 37C. en bao mara, despus del cual se realiza la lectura; como la concentracin de protenas en lquido pleural es superior que en LCR, el reactivo a utilizarse ser la misma usada para dosaje de protenas en sangre siguiendo la tcnica descrita arriba y el resultado obtenido se expresar en g/l.

D- Coloracin de Gram: se realizar un frotis a partir del sedimento del centrifugado se seca a T ambiente y se fija a la llama, luego se colorea con los colorantes: 1min. con cristal violeta se lava con agua, 1min. con lugol se lava con suficiente agua, se decolora con decolorante( alcohol-acetona ), se lava con agua y finalmente se deja 1min. con safranina y se vuelve a lavar, se deja secar a T ambiente y se observa al microscopio con objetivo de inmersin 100x. Se informa: Gram positivos: los que retienen el color azul del cristal violeta resistiendo la decoloracin y el contra color con safranina. Gram negativos: aquellos que retienen el color rojo de la safranina. Tambin la coloracin es til para determinar el predominio de leucocitos. En el caso de alguna duda con relacin al informe deber guardarse la lmina y registrar la misma en el cuaderno habilitado para el mismo que deber ser confirmado por bacteriologa o por un profesional bacterilogo del plantel del laboratorio. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas; se podr recepcionar muestras con pedidos provisorios de manera a acelerar el procesamiento. Las muestras remitidas de otras dependencias u otras instituciones de salud debern cumplir con ciertos requisitos de manera a ser admitidas, el pedido mdico deber contar con los siguientes datos: nombre legible del paciente, edad, sexo, hora de toma de muestra, medicacin actual, diagnostico presumible, anlisis solicitado, sello y firma del mdico solicitante, as tambin el sello de perceptora. En ningn caso se admitir muestras con pedido de cultivo de otras instituciones, excepto casos bien justificados y por sobre todo autorizados por la direccin del Hospital. Todos los lquidos procesados debern ser conservados por un periodo de una semana hasta el momento de ser desechados, de manera a confirmar cualquier duda que pueda existir con respecto a la muestra. Tener en cuenta: a. b. c. d. e. Volumen de muestra. Presencia o no de cogulos. ( informar siempre ) Utilizacin o no de anticoagulante ( de preferencia citrato) Confirmacin del informe de gram. Prioridad en el procesamiento y entrega de resultados.

60

15) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 16) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 17) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes en el caso de muestras remitidas, mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

61

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE TOMA DE MUESTRA PARA ANALISIS DE ORINA SIMPLE

POE TMO10-01

62

INDICE
- Histrico de modificaciones - Objeto/Propsito - Alcance/Campo de aplicacin - Responsables - Definiciones - Desarrollo del procedimiento - Muestra requerida - Reactivos, materiales y equipos. - Fundamento - Especificaciones - Instrucciones detalladas - Tener en cuenta - Formularios y registros - Referencias - Listas de distribucin - Anexos

63 HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

1) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 2) Alcance/Campo de aplicacin: rea de toma de muestras, enfermera, laboratorio. Utilizacin correcta de frascos estriles, colectores sondas, etc., hasta su traslado al laboratorio. 3) Responsables: Enfermera, mdicos y encargados de toma de muestra.

64

4) Definiciones: Colectores: Bolsa colectora de orina para nios. Sondas: Material utilizado para la excrecin de orina en pacientes internados o impedidos.

5) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: Orina fresca libre de contaminacin previa higiene, preferible la primera orina de la maana (chorro medio). En el caso de pacientes con sondas, no utilizar la orina colectada en la bolsa. Reactivos, Materiales y Equipos: i. Frascos estriles. ii. Colectores para orina. iii. Sondas. Fundamento: Basado en una correcta toma de muestra. Especificaciones: Se debe tener en cuenta el volumen de orina que fue recolectado, si el paciente estaba higienizado y si la< orina fue recogida en un frasco estril.

Instrucciones detalladas: Verificar si el paciente tom las debidas precauciones para la toma de muestra, si lo recogido fue tomado en frascos limpios y estriles. Cuales son los signos y sntomas que presenta y la edad y sexo del paciente. Tener en cuenta: Si el recipiente en el que fue tomada la muestra se rene las condiciones. Si la orina es la primera de la maana y fue desechado el primer chorro. Si el paciente estaba higienizado antes de la toma de muestra. Si la muestra fue tomada por miccin espontnea, por sonda, etc. Edad y sexo del paciente.

6) Formularios y registros: Los datos del paciente sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando la hora que fue recogida la muestra. 7) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000de la OPS. 8) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes (ambulatorios), mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

65

ANEXOS

Hoja de informe para resultado de orina

66

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE ANALISIS DE ORINA SIMPLE

POE OS11-01

67

INDICE
- Histrico de modificaciones - Objeto/Propsito - Alcance/Campo de aplicacin - Responsables - Definiciones - Desarrollo del procedimiento - Muestra requerida - Reactivos, materiales y equipos. - Fundamento - Examen fsico - Especificaciones - Parmetro - Instrucciones detalladas - Tener en cuenta - Formularios y registros - Referencias - Listas de distribucin - Anexos

68 HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

1) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 2) Alcance/Campo de aplicacin: Orina con su pedido de anlisis, al rea de toma de muestras, enfermera, laboratorio. Utilizacin correcta de frascos estriles, colectores sondas, etc., hasta su traslado al laboratorio. 3) Responsables: Enfermera, mdicos y personal del laboratorio.

69 4) Definiciones: - Tiras reactivas: tiras utilizadas para el procedimiento del anlisis. - pH: valor normal de 5-9, se utiliza para la deteccin de hidrgeno. - Densidad: registra la concentracin inica de la orina. Su valor normal es de 1.000 a 1.030. 5) Desarrollo del procedimiento: Muestra requerida: Orina fresca libre de contaminacin previa higiene, preferible la primera orina de la maana (chorro medio). En el caso de pacientes con sondas, no utilizar la orina colectada en la bolsa. Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos cnicos, tiras reactivas, centrfuga, pipeta pasteur, lminas, laminillas, microscopio. Fundamento: Basado en la observacin microscpica del sedimento urinario y descripcin de lo observado por campo analizado, previa utilizacin de tiras reactivas para la medicin de parmetros fsico-qumicos ( ph, densidad, glucosa, leucocitos, protenas, cuerpos cetnicos, bilirrubina, urobilingeno, hemoglobina, nitritos) que complementan al anlisis y el informe final.

Especificaciones: Los parmetros que se miden son: Examen fsico: Aspecto: Se realiza homogeneizando la orina sin centrifugar en el tubo colectando y mirando a tras luz. Color: Se realiza homogeneizando la muestra en el tubo colectado. Examen qumico: Se introducen las tiras reactivas en el tubo de orina recin emitida bien mezclada y sin centrifugar, retirar la tira luego de 1 segundo, eliminando el exceso de orina de la tira tocando el borde del tubo que contiene la muestra. Los cambios de color que solo aparecen en los bordes de la zona reactivas o despus de transcurridos mas de 2 minutos, carecen de importancia diagnstica. Parmetro Intervalo de lectura Densidad 1.000-1.030 Valor de pH 5-9 Leucocitos Negativo Aprox. 500 leucoc/ul (3+) Nitritos Negativo Positivo (1+) Proteinas Negativo 500mg/dl (5g/l; 4+) Glucosa Normal 1000 mg/dl (55mmol/l; 4+) C. cetnicos Negativo 150 mg/dl (15 mmol/l;3+) Urobilinogeno Normal 12 mg/dl Lectura visual Limite de deteccin prctico

10-25 leucoc/ul

0.05 mg/dl (11umol/L) 6 mg albminas /dl 40 mg/dl (2.2mmol/l) Para cido acetilactico 5mg/dl (0.5 mmol/l) 0.4 mg/dl (7uml/l)

70 (200umol/l;4+) Bilirrubina Negativo 6 mg/dl (100umol/l;3+) Sangre y Negativo hemoglobina Aprox.250 eri/ul(4+)

0.5mg/dl (9umol/l) Ertrocitos intactos:5 eri/ul de hemoglobina,resp, eritrocitos hemolizados equivale a 10 eri/ul.

Principios del test y observaciones respecto a los diferentes parmetros Densidad: Para valores de pH 7 o mas se debe aumentar el resultado del ensayo en 0.005. Pequeas cantidades de protenas (100-500)y las orinas cetoacidticas pueden llevar a falsos resultados positivos. Valor pH: El papel reactivo contiene los indicadores rojo metileno, fenolftaleina y azul de bromotimol. Leucocitos: se detectan leucocitos intactos y tambin los lisados Nitritos: Los agentes patgenos ms frecuentes causantes de infecciones de la va urinaria, E. Coli y la mayora de los grmenes patgenos urinarios, transformas el nitrato absorbido con la alimentacin en nitrito. Este es detectado por una coloracin del rosa al rojo de la zona reactiva. De este modo se realiza una deteccin indirecta de grmenes formadores de nitrito en la orina. Incluso una leve coloracin roja indica una bactiuria significativa. Protenas: Reacciona de manera especialmente sensible a la albmina. Glucosa: Puede ser negativo o 1, 2,3, o 4(+). Si la tira marca reactiva las cruces se confirman con la reaccin de Benedict: 1,25 ml de reactivo + 2 gotas de orina en tubo de vidrio; calentar en el mechero hasta la ebullicin, dejar enfriar y observar el cambio de color o formacin del precipitado. Cuerpos cetnicos:La deteccin se basa en el principio de la prueba de legal y reaccin ms interesante al cido acetilacetico que a la acetona. Urobilingeno: grandes cantidades de bilirrubina producen una coloracin amarilla inmediata y pueden conducir al cabo de aprox. 60 segundos a una coloracin verde hasta azul. Bilirrubina: La deteccin se basa en la copulacin de una sal de diazonio con bilirrubina para formar un colorante azoico. Incluso los ms leves matices rosa ya deben ser considerados como positivo y con ello como patolgico. Sangre: La hemoglobina respectivamente la mioglobina, cataliza la oxidacin del indicador por el hidroperoxido orgnico contenido en el papel reactivo. Para los eritrocitos y la hemoglobina se indican en la etiqueta del tubo escalas cromticas diferentes. Puntos verdes aislados hasta acumulados en la zona reactiva amarilla indican la presencia de eritrocitos intactos. La hemoglobina as como los eritrocitos hemolizados la mioglobina son indicados por una coloracin verde homognea de la zona reactiva. a travs de las tiras poseen su especificidad y limites dados por cada marca de reactivo, medidos por observacin macroscpica de la reaccin afectadas por las condiciones fsico-qumicas de la orina, (hematricas, colricas, medicamentosas, etc.)

Instrucciones detalladas: A partir del frasco de orina colectada, homogeneizar y transvasar un volumen adecuado a un tubo cnico, introducir la tira reactiva y dejar en contacto por un periodo de 3 a 4 seg., retirar y realizar la lectura despus de 1 minuto, centrifugar durante 5 minutos a 2.500 rpm, retirar y desechar el sobrenadante de una sola vez, homogeneizar el sedimento, utilizar una gota del mismo y observar entre lmina y laminilla con aumento 40x e informar lo observado por campo.

71 Tener en cuenta: 6) Tiras en condiciones (no contaminadas). Tubos, lminas, laminillas limpios. Tiempo de lecturas de las tiras. Tiempo y velocidad de centrifugado. Observacin microscpica con aumento de 40x.

Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes (ambulatorios), mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

7) 8)

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

72

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE FROTIS DE MUCUS FECAL

POE FMF12-01

73

INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

74

HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

18) Objeto/Propsito: Describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes que concurren al IMT as como de pacientes internados y las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 19) Alcance/Campo de aplicacin: Abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestra, enfermera, laboratorio. 20) Responsables: Enfermera, tcnicos y bioqumicos de turno.

75

21) Definiciones: a. F.M.F: Frotis de mucus fecal. 22) Desarrollo del procedimiento: a. Muestra requerida: heces frescas recogidas en frascos adecuados o bien remitidas en el propio paal del paciente toda vez que sea reciente y no resecadas. b. Reactivos, Materiales y Equipos: frascos boca ancha de plstico limpios o estriles, paal, lminas, laminillas, microscopio. c. Fundamento: basado en la observacin directa entre lmina y laminilla de una alcuota de la muestra tomada en forma directa con solucin fisiolgica si fuere necesario, en un microscopio con aumento de 40x. d. Especificaciones: se tomara cuidadosamente la porcin ms representativa de la muestra y se observara cuidadosamente al microscopio, teniendo en cuenta la presencia de leucocitos, hemates, esporos micticos, mucus, vermes y protozoarios, que sern informados en cantidad proporcional a lo observado por campo. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas; sern rechazadas todas aquellas muestras remitidas en frascos inadecuados y sin nombre, o en el caso de paal aquellas que ya estn secas o contaminadas. Tener en cuenta: e. f. g. h. i. Tipo de recipiente, de toma y transporte. Viabilidad de la muestra. Recoleccin y transporte en paal. Contaminacin de la muestra. Cantidad representativa de muestra.

23) Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. 24) Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. 25) Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a los mismos pacientes (ambulatorios), mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias).

76

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

77

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE GLUCOSA

POE G13-01

78

INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Listas de distribucin Anexos

79 HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

26) Objeto/Propsito: describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes ambulatorios que concurren al IMT as como de pacientes internados y de terapia intensiva, como tambin las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 27) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, enfermera, terapia intensiva, laboratorio. 28) Responsables: Enfermera, mdicos, tcnicos y bioqumicos de turno.

80 29) Definiciones: 30) Desarrollo del procedimiento: a- Muestra requerida: sangre venosa obtenida de manera usual (suero), o arterial segn necesidad, tambin se puede utilizar muestras remitidas con anticoagulante heparina en ste caso se procesa como plasma o bien como lquido de puncin toda vez que se pueda obtener como lquido claro y transparente. g- Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, frascos estriles de vidrio o tubos de plstico, centrifuga, bao mara, timer, pipeta automtica, fotocolormetro. c- Fundamento: la determinacin est basado en el dosaje de glucosa en muestras de suero, plasma, o lquido de puncin segn el procedimiento descrito: c-1. Mtodo: Colorimtrico de punto final con Standard. En tres tubos marcados como blanco (B), Standard (St.) y muestra (M), con ayuda de una pipeta automtica de 10 ul. se alcuota 10 ul. de St. y 10 ul. de suero, plasma o lquido problema y se agrega 1ml. de reactivo de trabajo a cada uno de los tubos que se incuban 15 min. a 37C. en bao mara tiempo despus del cual se realiza la lectura de la absorbancia a 505 nm., como la concentracin del St. es de 100 mg/dl. la misma se divide con la absorbancia del mismo para obtener el factor que se utiliza para calcular el valor de la glucosa en el suero en cuestin. Factor = Concentracin St./ Abs. del St. Glucosa en mg/dl = F x Abs. de la muestra. Valor de referencia: 70 110 mg/dl. 6) Especificaciones: hay que tener en cuenta que en suero se debe tener en cuenta las condiciones de ayuno as como la presencia o no de hemlisis que afectan el valor de la glucosa, por lo menos se requiere de 2 a 3 horas de ayuno en condiciones normales para el dosaje en suero, tambin que en lquidos de puncin se debe de dosar lo antes posible de manera a evitar el consumo de la misma por la posible presencia de grmenes; la hemlisis acentuada eleva falsamente el valor de la glucosa. En general todo valor de glucosa superior a 250 mg/dl. deber ser dosado por dilucin de la muestra para obtener un valor ms fiable. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras de sangre y lquidos sern centrifugados, el suero y sobrenadante obtenidos as sern procesadas toda vez que sean aptas (libre de hemlisis y turbidez). Las muestras de lquidos remitidas en jeringas sern transvasadas en recipientes adecuados para su centrifugacin y toda vez que se obtengan sobrenadantes lmpidos sern procesados. Tener en cuenta: a. b. c. d. e. f. g. Volumen de muestra adecuada. Tipo de muestra suero o lquido de puncin. Tipo de anticoagulante (citrato) en el caso de lquidos. Presencia de hemlisis y turbidez visibles. Tiempo de ayuno requerido. Tiempo de procesamiento. Confirmacin de valores obtenidos.

81 h- Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. i- Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. j- Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias), o de ser posible remitido a terapia por personal del laboratorio si la urgencia as lo requiere.

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

82

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE UREA

POE U14-01

83

INDICE
Histrico de modificaciones Objeto/Propsito Alcance/Campo de aplicacin Responsables Definiciones Desarrollo del procedimiento Muestra requerida Reactivos, materiales y equipos. Fundamento Especificaciones Instrucciones detalladas Tener en cuenta Formularios y registros Referencias Lista de distribucin Anexos

84

HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

31) Objeto/Propsito: describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes ambulatorios que concurren al IMT as como de pacientes internados y de terapia intensiva, como tambin las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 32) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, enfermera, terapia intensiva, laboratorio.

85 33) Responsables: Enfermera, mdicos, tcnicos y bioqumicos de turno. 34) Definiciones: Ureasa: solucin estabilizada y tamponada de alta potencia. 35) Desarrollo del procedimiento: a- Muestra requerida: sangre venosa obtenida de manera usual (suero), para anlisis de rutina se trabajara principalmente con suero o sangre arterial heparinizada segn la urgencia o necesidad, en ste caso se procesa como plasma. k- Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, frascos estriles de vidrio o tubos de plstico, centrifuga, bao mara, timer, pipeta automtica, fotocolormetro. c- Fundamento: la determinacin est basado en el dosaje de urea en muestras de suero plasma segn el procedimiento descrito: c-1. Mtodo: Colorimtrico de punto final con Standard. En tres tubos marcados como blanco (B), Standard (St.) y muestra (M), con ayuda de una pipeta automtica de 10 ul. se alcuota 10 ul. de St. y 10 ul. de suero plasma y se agrega 1ml. de reactivo uno preparado previamente ( llevando a 500ml.un volumen de reactivo tampn el cual se mezcla en una proporcin 2 a 1 con ureasa ) a cada uno de los tubos que se incuban 5 min. a 37C. en bao despus del cual se agrega 1 ml. de reactivo dos ( Oxidante de uso, que se prepara llevando a 500 ml. el oxidante concentrado ) y se sigue incubando 5 min. ms en las mismas condiciones, despus se retira del bao formndose una coloracin verde cuya intensidad es proporcional a la concentracin de urea en la muestra, y se realiza la lectura de la absorbancia a 578 nm., como la concentracin del St. es de 70 mg/dl. la misma se divide con la absorbancia del mismo para obtener el factor que se utiliza para calcular el valor de la urea en el suero en cuestin. Factor = Concentracin St./ Abs. del St. Urea en mg/dl = F x Abs. de la muestra. Valor de referencia: 10 50 mg/dl. 6) Especificaciones: hay que tener en cuenta que en suero las condiciones de ayuno as como la presencia o no de hemlisis afectan el valor de la urea y en general a la mayora de los analitos, por lo menos se requiere de 6 a 8 horas de ayuno en condiciones normales para el dosaje en suero, no obstante queda a criterio del mdico la interpretacin del resultado si el paciente no rene dichas condiciones especialmente cuando se requiere su determinacin en casos de urgencias. En general todo valor de urea superior a 250 mg/dl. deber ser dosado por dilucin de la muestra para obtener un valor ms exacto y fiable. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras de sangre sern centrifugadas, los sueros obtenidos as sern procesados toda vez que sean aptos (libre de hemlisis). Tener en cuenta: a. Volumen de muestra adecuada. b. Tipo de muestra suero o plasma. c. Tipo de anticoagulante (heparina) en el caso de plasma.

86 d. e. f. g. Presencia de hemlisis. Tiempo de ayuno requerido. Tiempo de procesamiento. Confirmacin de valores obtenidos.

l- Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. m- Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. n- Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias), o de ser posible remitido a terapia por personal del laboratorio si la urgencia as lo requiere.

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

87

INSTITUTO DE MEDICINA TROPICAL

PROCEDIMIENTO OPERATIVO ESTANDAR PARA LA

REALIZACION DE CREATININA

POE CR15-01

88

INDICE
- Histrico de modificaciones - Objeto/Propsito - Alcance/Campo de aplicacin - Responsables - Definiciones - Desarrollo del procedimiento - Muestra requerida - Reactivos, materiales y equipos. - Fundamento - Especificaciones - Instrucciones detalladas - Tener en cuenta - Formularios y registros - Referencias - Lista de distribucin - Anexos

89 HISTORICO DE MODIFICACIONES
ED N
FECHA APARTADOS PAG CAUSAS DE LA MODIFICACION RECUALIFICACION NECESARIA SI/NO (1)

36) Objeto/Propsito: describir el proceso desde la toma de muestras de pacientes ambulatorios que concurren al IMT as como de pacientes internados y de terapia intensiva, como tambin las condiciones requeridas para su obtencin y procesamiento. 37) Alcance/Campo de aplicacin: El alcance abarca a la muestra con su pedido mdico, al rea de toma de muestras, enfermera, terapia intensiva, laboratorio. 38) Responsables: Enfermera, mdicos, tcnicos y bioqumicos de turno.

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39) Definiciones: - Std: Standard 40) Desarrollo del procedimiento: a- Muestra requerida: sangre venosa obtenida de manera usual (suero), para anlisis de rutina se trabajara principalmente con suero o sangre arterial heparinizada segn la urgencia o necesidad, en ste caso se procesa como plasma. o- Reactivos, Materiales y Equipos: Tubos, frascos estriles de vidrio o tubos de plstico, centrifuga, bao mara, timer, pipeta automtica, fotocolormetro. c- Fundamento: la determinacin est basado en el dosaje de Creatinina en muestras de suero plasma segn el procedimiento descrito: c-1. Mtodo: Cintico de punto final con Standard. Primeramente se procede a preparar el reactivo de trabajo en una proporcin de 4 a 1 entre el reactivo hidrxido y el cido pcrico, en una cantidad suficiente segn la cantidad de muestra a procesar; se toma 1 ml. de reactivo de trabajo y se agrega 100ul. de Std.(para hallar el factor) 100ul. de muestra en cuestin e inmediatamente se aspira en el fotocolorimetro midiendo el equipo la variacin de absorbancia a los 30seg. y a los 2 min. 30seg., dicha variacin se multiplica por el factor hallado previamente, como la concentracin del Std. es de 4 mg/dl. la misma se divide con la variacin de absorbancia del mismo para obtener el factor que se utiliza para calcular el valor de la creatinina en el suero en cuestin. Factor = Concentracin St./ variacin de Abs. del St. Creatinina en mg/dl = F x variacin de Abs. de la muestra. Valor de referencia: 0,4 1,4 mg/dl. 6) Especificaciones: hay que tener en cuenta que en suero las condiciones de ayuno as como la presencia o no de hemlisis afectan el valor de la urea y en general a la mayora de los analitos, por lo menos se requiere de 6 a 8 horas de ayuno en condiciones normales para el dosaje en suero, no obstante queda a criterio del mdico la interpretacin del resultado si el paciente no rene dichas condiciones especialmente cuando se requiere su determinacin en casos de urgencias. En general todo valor de creatinina superior a 5,0 mg/dl. deber ser dosado por dilucin de la muestra para obtener un valor ms exacto y fiable. Instrucciones detalladas: Las muestras sern remitidas al laboratorio desde el punto de toma de muestra por personal habilitado para el efecto en ningn caso por familiares o por el propio paciente; y sern recepcionadas por personal del laboratorio y segn los criterios sern admitidas o rechazadas. Las muestras de sangre sern centrifugadas, los sueros obtenidos as sern procesados toda vez que sean aptos (libre de hemlisis y sin ictericia muy acentuada que da valores falsamente disminuidos). Tener en cuenta: a. b. c. d. e. f. g. Volumen de muestra adecuada. Tipo de muestra suero o plasma. Tipo de anticoagulante (heparina) en el caso de plasma. Presencia de hemlisis e ictericia intensa. Tiempo de ayuno requerido. Tiempo de procesamiento. Confirmacin de valores obtenidos.

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p- Formularios y registros: Los resultados sern anotados en cuadernos habilitados para el efecto, corroborando cualquier resultado u observacin discordante, antes de su informe en el formato adecuado. El profesional competente deber corroborar y confirmar el informe para firmar y sellar la misma para darle validez al resultado. q- Referencias: Manual de Gestin de Calidad para laboratorios ISO 9000 de la OPS. r- Lista de distribucin: El informe final ser archivado en la carpeta habilitada para el efecto, hasta el momento de su entrega ya sea a mdicos, enfermeras o personal de blanco (internados y urgencias), o de ser posible remitido a terapia por personal del laboratorio si la urgencia as lo requiere.

ANEXOS

HOJA PARA INFORME DE RESULTADOS

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