Relatrio Experimental

Fundamentos De Qumica
2012/2013

Cromatografia de adsoro
Realizado por:
Carlos Alberto Pato Silva Alves n 44352 Csar Augusto Pifre Reis n 44355 Diogo Correia Dos Santos n 44205

Professor: Maria Manuela Rocha

Data da realizao da atividade: 9/11/2012 Data e entrega do relatrio: 30/11/2012

Lisboa, Novembro de 2012

Fundamentos de Qumica - Cromatografia por adsoro Faculdade de Cincias da Universidade de Lisboa

ndice
Objetivo ................................................................................................................................................... 0 Resumo.................................................................................................................................................... 2 Fundamentos tericos essenciais ........................................................................................................... 2 Material ................................................................................................................................................... 6 Reagentes ................................................................................................................................................ 6 Caractersticas dos reagentes e equipamento ........................................................................................ 7 Procedimento .......................................................................................................................................... 8 Parte A. Cromatografia em camada fina ......................................................................................... 8 Parte B. Cromatografia em coluna .................................................................................................. 8 Esquema de montagem (Cromatografia em coluna) .............................................................................. 9 Resultados ............................................................................................................................................. 10 Parte A. Cromatografia em camada fina ....................................................................................... 10 Parte B. Cromatografia em coluna ................................................................................................ 10 Tratamento dos Resultados .................................................................................................................. 13 Parte A. Cromatografia em camada fina ....................................................................................... 13 Parte B. Cromatografia em coluna ................................................................................................ 14 Discusso/Concluso ............................................................................................................................. 15 Crtica .................................................................................................................................................... 16 Bibliografia ............................................................................................................................................ 17

Objetivo
Separao de uma mistura de corantes (alaranjado de metilo e azul de metileno) por cromatografia de adsoro em coluna e em camada fina.

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Resumo
Nesta atividade laboratorial pretendeu-se realizar a separao de uma mistura de dois corantes sendo um o alaranjado de metilo e o outro o azul de metileno. Para este efeito recorreu-se tcnica da cromatografia por adsoro em coluna e em camada fina. Com a cromatografia em camada fina (CCF) procedeu-se separao de uma mistura de corantes Nesta atividade laboratorial utilizou-se a tcnica de cromatografia de adsoro em camada fina e em coluna para separar uma mistura de dois corantes. Na cromatografia em camada fina, utilizou-se uma amostra da, e mais duas amostras, uma de cada corante, que funcionam como amostras de controlo para efeitos de comparao. Na cromatografia em coluna, aplicou-se uma determinada quantidade da mistura de azul-de-metileno com alaranjado de metilo numa coluna previamente preparada e preenchida com a fase estacionria, alumina, e procedeu-se eluio dos corantes usando dois eluentes diferentes, o azul com o etanol e o alaranjado com a amnia. As solues dos corantes eludos foram colocadas em tubos de ensaio com 1mL. Ambas as tcnicas de cromatografia foram eficientes na separao dos dois corantes.

Fundamentos tericos essenciais

A cromatografia serve para separar componentes de duas misturas e todas as suas tcnicas baseiam-se na diferente distribuio dos dois componentes por duas fases, uma

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fase mvel e uma estacionria, podendo a mvel estar no estado lquido ou gasoso, e a fase estacionria no estado slido ou lquido. As diferentes formas de cromatografia podem ser classificadas considerando-se diversos critrios, como pela forma fsica do sistema cromatogrfico, por exemplo, em coluna, planar, em camada fina, entre outras; pela fase mvel usada, em que pode ser lquida, gasosa ou supercrtica (com vapor pressurizado); pela fase estacionria utilizada, e podem ser slidas, lquidas ou quimicamente ligadas (quando os seus mecanismos de separao diferem das slidas ou lquidas); ou ainda pelo modo de separao, e a dividemse em quatro grupos, de adsoro, partio, troca inica ou de excluso. Para fases de estados diferentes existem tcnicas diferentes. Na atividade que realizmos a tcnica utilizada foi a de cromatografia de adsoro: em coluna e em camada fina, pois as fases mveis encontravam-se no estado lquido e as fases estacionrias no estado slido (poroso). A fase mvel eluda na superfcie da fase estacionria ou pelos seus interstcios. O tipo de cromatografia que se utilizou baseia-se na capacidade de adsoro e na solubilidade. Na cromatografia em coluna o adsorvente (fase estacionria) no estado slido colocado numa coluna de vidro na vertical, e a mistura a separar colocada no topo da coluna. A fase mvel (o eluente) e elui ao longo da coluna, arrastando consigo os componentes da mistura com velocidades muito diferentes pela ao da gravidade, podendo esta tcnica denominar-se tambm por cromatografia em coluna por gravidade. A separao dos compostos dar-se- consoante as interaes entre os componentes da mistura, o adsorvente e o eluente. Na cromatografia em camada fina, a fase estacionria, no nosso caso, a slica gel, suportada numa superfcie plana que colocada numa cmara de eluio contendo previamente um eluente adequado sendo esse o etanol. A difuso do solvente na placa arrasta os componentes da mistura com velocidades diferentes, pela razo explicitada mais adiante. A adsoro um fenmeno espontneo que ocorre todas as vezes que um slido exposto a um gs ou a um lquido. Consiste na reteno, superfcie do slido de partculas do gs ou do lquido, devido existncia de foras intermoleculares, e quanto mais fortes
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forem mais forte as foras adsortivas. A intensidade destas foras tambm varia consoante a natureza do slido (adsorvente), da substncia adsorvida e do fluido em contacto com o adsorvente. Tendo em conta o que foi dito, na cromatografia em coluna, a velocidade da eluio dos componentes de uma mistura pode ser diferente de acordo com a afinidade de determinado componente com o adsorvente e com o eluente. Componentes mais polares exercem foras adsortivas mais intensas sobre o adsorvente do que as menos polares ou apolares, consequentemente a velocidade da eluio ser menor. Quanto maior a solubilidade de um componente no eluente maior ser a velocidade.

Fator de reteno
O fator de reteno (Rf) calculado na cromatografia em camada fina, e definido como sendo o quociente entre a distncia percorrida por um determinado composto e a distncia percorrida pelo solvente. O seu valor dar uma ideia da intensidade das foras adsortivas exercidas por um composto sobre o adsorvente.

Rf=

Cuidados a ter em ambas as tcnicas de cromatografia

Na realizao da cromatografia em camada fina devem-se ter em conta alguns aspetos: A cmara de eluio deve ser fechada aps a introduo do eluente para que este no evapore; Os pontos de aplicao dos componentes no devem ficar mergulhados no eluente, pois poder-se-o diluir neste.

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Na realizao da cromatografia em coluna devem-se ter, tambm, em ateno alguns aspetos, entre os quais: No deixar a coluna secar, de modo a que a alumina no crie fendas, tendo um
impacto direto na eluio dos corantes.

A altura de alumina na coluna no deve ser desnecessariamente muito alta, nem muito baixa para haver uma separao eficiente dos corantes. A distribuio da alumina na coluna deve ser o mais homognea possvel, evitando a existncia de bolhas de ar.

Frmulas de estrutura dos Corantes

Figura 1. Frmula de estrutura do alaranjado de metilo

Figura 2. Frmula de estrutura do azul de metileno

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Material
1 Tina cromatogrfica; Capilares; Coluna com placa porosa; Pipetas de Pasteur; 1 Pipeta graduada de 2,000 0,005 mL; Tubos de ensaio e suporte; 3 Copos de 100 mL; Funil; Placas cromatogrficas de slica para cromatografia em camada fina;

Reagentes
Alumina; Etanol; Soluo de azul de metileno e alaranjado de metilo e respetiva mistura; Amnia concentrada; gua destilada;

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Caractersticas dos reagentes e equipamento

Reagentes

Alaranjado de metilo: C14H14N3NaO3S M: 327,34 g/mol Txico R 25

Azul de Metileno: C16H18ClN3S * x H2O (x=2-3) M: 319.86 g/mol (anidro) Nocivo R 22

Alumina (xido de alumnio): C16H18ClN3S * x H2O (x=2-3) M: 319.86 g/mol (anidro) Nocivo R 22

Amonaco: NH3 M: 17,03 g/mol = 0,905kg/L R: 34-50 S: 26-36/37/39-45-61

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Procedimento
Parte A. Cromatografia em camada fina
1. Numa placa cromatogrfica de 3x7 cm, trace a lpis uma linha paralela a um dos topos e a uma distncia deste cerca de 0,5 cm, tendo o cuidado de no danificar a slica. 2. Com a ajuda de um capilar coloque cuidadosamente uma pequena gota de soluo mistura e, de cada um dos lados, uma gota de cada uma das solues de alaranjado de metilo e de azul de metileno (as gotas devero ficar bem separadas). 3. Seque as gotas com um secador. 4. Introduza a placa na cmara cromatogrfica contendo a soluo eluente (copo com um pouco de etanol), tendo o cuidado de verificar que os pontos de aplicao das amostras no fiquem no incio, mergulhados no eluente. Tape a cmara. 5. Quando o eluente subir cerca de 1 cm do topo, retire-a da cmara e seque-a.

Parte B. Cromatografia em coluna

1. Num copo de 100 mL prepare uma papa etanlica, utilizando alumina e etanol e verta-a para uma coluna de vidro com placa porosa, em posio vertical, com a ajuda de um funil. Deposite a mistura gradualmente na coluna deixando simultaneamente o etanol fluir muito lentamente atravs dela. Se for necessrio, adicione mais etanol no topo da coluna. Nunca deixe secar. O enchimento da coluna deve ser mais homogneo possvel, sem apresentar bolhas de ar. A altura final deve ser de aproximadamente 8 cm. 2. Verta cuidadosamente a soluo mistura (1 mL), tendo o cuidado de no perturbar a superfcie da fase estacionria. 3. Passe etanol atravs da coluna, tendo em conta o cuidado de a no deixar secar (revelao do cromatograma). Eluir desta forma o azul de metileno. Recolha o eluente contendo este corante numa srie de tubos e em volumes aproximadamente iguais ( 1 mL), at a soluo sair incolor.

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4. Elua em seguida o alaranjado de metilo com gua destilada contendo umas gotas de amnia concentrada (1 a 2 gotas por 100 mL de gua), como descrito em 3.

Esquema de montagem (Cromatografia em coluna)

Figura 3. Esquema de montagem da cromatografia em coluna

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Resultados
Parte A. Cromatografia em camada fina

Distncia percorrida pelo eluente Distncia percorrida pelo alaranjado (controlo) Distncia percorrida pelo alaranjado da mistura

Figura 4. Cromatograma da CCF

Parte B. Cromatografia em coluna

Azul de metileno

Figura 5. Volumes de Azul de metileno extrado

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Tabela 1. Quantificao da intensidade da cor do azul de metileno (0-5)

Nmero da amostra Intensidade da Cor Produto

1 2 3 4 5 6

2 3 4 5 4 2

Azul de Metileno

Alaranjado de metilo

Figura 6. Volumes de Alaranjado de metilo eludos

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Tabela 2. Quantificao da intensidade da cor do alaranjado de metilo (0-5)

Nmero da amostra Intensidade da Cor Produto

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28

0,1 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,8 1 1,2 1,5 1,8 2 2,5 2,5 2,5 2,8 3 3,2 3,5 3,5 3,8 4 4,3 4,3 4,6 4,8 3

Alaranjado de metilo

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Tratamento dos Resultados

Parte A. Cromatografia em camada fina

Tabela 3. Distncia percorrida pelas manchas e respetivos fatores de reteno.

Distncia percorrida / cm Azul de metileno Alaranjado de metilo Mistura

Rf
0 0,92 0,93

0 5,5 5,6

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Parte B. Cromatografia em coluna

Cromatogramas

Intensidade da cor azul de metileno

6 Intensidade de cor 5 4 3 2 1 0 0 2 4 Extrao 6 8 intensidade

Grfico 1. Cromatograma do azul de metileno

Intensidade da cor do alaranjado de metilo

5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 0 4 8 12 16 20 24 28 Intensidade da cor

Intensidade

Extrao

Grfico 1. Cromatograma do alaranjado de metilo

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Discusso/Concluso
Ambas as cromatografias permitiram uma separao eficiente dos corantes. No entanto, na cromatografia em coluna possvel recolher os corantes separados, ao contrrio da CCF, que apenas permite classificar qualitativamente os componentes da mistura. Na cromatografia em camada fina, foi visvel a separao dos dois corantes, tendo o alaranjado de metilo sido eludo, e as duas manchas percorreram aproximadamente a mesma distncia na placa de slica, enquanto que a mancha do azul de metileno no se moveu (Fig. 4). A distncia percorrida pela mancha do alaranjado de metilo da mistura foi igual percorrida pela mancha da amostra de controlo. Na marcao das linhas na placa usado um lpis em vez de uma caneta pois os pigmentos da tinta poder-se-iam diluir no etanol e misturar-se com os componentes a separar, induzindo em erro na leitura do cromatograma, se a cor da caneta for azul, ou impossibilitando a medio das distncias percorridas pelas manchas. A cmara cromatogrfica deve estar devidamente fechada para manter a atmosfera saturada e prevenir a constante evaporao do eluente de modo a ser possvel identificar a frente. Na cromatografia em coluna, o alaranjado de metilo elui muito mais lentamente do que o azul de metileno, sendo esta a explicao para um maior nmero de extraes comparativamente com as do azul. Este facto deve-se s foras adsortivas entre as fases mvel e estacionria, que so muito maiores entre o alaranjado de metilo e a alumina. medida que os componentes da mistura eram separados formaram-se bandas mveis, correspondendo cada uma ao corante em eluio. Observou-se que, dependendo da fase estacionria, o eluente elui um determinado corante. Ou seja, na cromatografia em camada fina, o etanol elui o alaranjado de metilo, enquanto que, na cromatografia em coluna o etanol elui o azul de metileno. Se a alumina for mais polar do que a slica (a diferena de eletronegatividades maior entre o alumnio e o oxignio), e o alaranjado de metilo mais polar do que o azul de metileno, ento uma possvel explicao desta observao prender-se- com as interaes entre as molculas dos corantes e as duas fases estacionrias. Como a slica mais apolar do que a alumina, assim como o azul de metileno mais apolar do que o alaranjado de metilo, ento
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as foras adsortivas entre o azul e a slica sero mais fortes do que as entre o alaranjado e a slica, logo o etanol apenas conseguir eluir o alaranjado. Em relao cromatografia em coluna, entre o alaranjado e a alumina que existiro foras adsortivas mais fortes, e por isso, o etanol ir eluir apenas o azul de metileno, sendo necessria a substituio do eluente por um de maior polaridade, que ser a amnia. E desta forma, os dois corantes no so eludos ao mesmo tempo. O alaranjado de metilo eludo mais lentamente tambm devido fora das interaes intermoleculares que exerce entre a alumina.

Crtica
No cromatograma da CCF (Fig. 4), observa-se uma linha de azul de metileno ao longo da placa. Este efeito poder ter tido como causa o facto de as amostras no terem sido devidamente secas com o secador. Na cromatografia em coluna, quer na extrao do azul de metileno, quer na do alaranjado de metilo, notou-se a presena de alguma alumina em suspenso nos primeiros 3mL recolhidos (Fig. 6 e 5). Esta ocorrncia no facilitou a comparao entre os volumes extrados, visto que esta s se encontrava presente em alguns tubos de ensaio, alterando de alguma forma a perceo da cor das solues. A anlise da intensidade da cor das extraes do azul de metileno foi a mais dificultada devido ao reduzido nmero de amostras, sendo os primeiros mL com alumina igualmente essenciais para a elaborao do cromatograma. Na quantificao da intensidade das cores das extraes do alaranjado de metilo, tambm houve algumas dificuldades, pois como estas so relativamente numerosas, algumas apresentavam uma cor idntica ou muito semelhante. O cromatograma correspondente s extraes do azul, tem a forma esperada (Fig. 7.) (Grfico 1.), mas o mesmo no acontece com o do alaranjado de metilo (Grfico 2.). Durante a extrao, a eluio do alaranjado foi forada, isto , devido ao entupimento do filtro, tentou-se forar o corrimento do eluente, aumentando a presso no topo da coluna para que este flusse com mais velocidade. Deste modo, as ltimas extraes foram as com maior concentrao do corante e no das menos concentradas.
Figura 7. Forma esperada da curva do cromatograma

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Bibliografia

1 http://www.ebah.com.br/content/ABAAAAVn0AA/fundamentos-adsorcao

(consultado em 22/11/2012)
2 http://educacao.uol.com.br/disciplinas/quimica/adsorcao-diferentes-interacoes-

entre-moleculas.htm (consultado em 24/11/2012)

3 http://www.infopedia.pt/$adsorcao (consultado em 22/11/2012) 4 http://pt.wikipedia.org/wiki/Cromatografia (consultado em 22/11/2012)

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