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CONCEPTOS GENERALES DE ENZIMAS Enzimas Sustancias orgnicas especializadas compuestas por polmeros de aminocidos (protenas), que actan como

catalizadores en el metabolismo de los seres vivos. Con su accin, regulan la velocidad de muchas reacciones qumicas implicadas en este proceso. l nombre de enzima, que !ue propuesto en "#$% por el !isilogo alemn &ilhelm '(hne ("#)%*"+,,), deriva de la !rase griega en zym, que signi!ica -en !ermento-. Efecto de la temperatura sobre la velocidad de reaccin: Energa de activacin .as enzimas controlan la velocidad de una reaccin qumica / estas son generalmente sensibles a la temperatura. n el caso de las reacciones biomoleculares, un aumento de ",0 C incrementa su velocidad entre ",1 / 1 veces. 2ara e3plicar este hecho se postul que al acrecentar la temperatura aumenta la !raccin de mol4culas capaces de tener una energa su!iciente para alcanzar un -estado activado- que luego se trans!orme en producto de la reaccin por !ormacin o ruptura de enlaces qumicos. Se admite que las nicas mol4culas que reaccionan son aquellas que al chocar llevan consigo una energa ma/or que un cierto valor mnimo. 5 este valor de energa necesaria se lo denomina energa de activacin / es un !actor de suma importancia para determinar la magnitud de la velocidad de reaccin. 5unque un aumento de la temperatura puede acelerar una reaccin, las enzimas son inestables cuando se calientan. Catalizadores: 2ara que una reaccin qumica tenga lugar se debe superar el valor de la energa de activacin. 6na vez vencida esa barrera el sistema evoluciona de !orma tal que llegar al estado !inal de la reaccin. .a velocidad de reaccin podra incrementarse de dos maneras7 aumentando la concentracin del -comple8o activado- o eventualmente disminu/endo la energa de activacin. ste ltimo mecanismo es el que se pone de mani!iesto cuando se emplea determinadas sustancias llamadas catalizadores. stas sustancias aceleran las reacciones qumicas disminu/endo la energa libre de activacin, se combinan con los reactivos para producir un estrato de transicin de menor energa que el estado de transicin de la reaccin no catalizada. Cuando los productos de la reaccin se !orman, se regenera el catalizador al estado libre. Catalizadores biolgicos - Enzimas: .as reacciones qumicas en sistemas biolgicos raramente ocurren en ausencia de un catalizador. stos catalizadores se denominan enzimas / son en su totalidad mol4culas de naturaleza proteica (aunque ha habido estudios acerca de enzimas de naturaleza glucosdica). s razonable pensar en la necesidad que tienen los seres vivos de poseer estos catalizadores, /a que las

!unciones vitales de cualquier c4lula seran imposibles de mantener si las reacciones que ocurren en ella !ueran e3tremadamente lentas. 5dems de incrementar la velocidad las enzimas e3hiben una elevada especi!icidad / en algunos casos pueden ser reguladas por di!erentes metabolitos, aumentando / otras veces disminu/endo, de acuerdo a las necesidades del momento, su actividad. 9odas estas propiedades pueden ser cumplidas por mol4culas altamente comple8as, que al ser mol4culas orgnicas (macromol4culas) comparten caractersticas con las protenas no enzimticas / di!ieren de los catalizadores inorgnicos7 a) Son termolbiles / su actividad depende en ciertos casos del p: del medio. b) l reconocimiento de la enzima con el reactivo a procesar (denominado sustrato) es altamente espec!ico. c) 9ienen gran e!iciencia, es decir, trans!orman un gran nmero de mol4culas de sustrato por unidad de tiempo. d) stn su8etas a una gran variedad de controles celulares, gen4ticos / alost4ricos . Como todos los catalizadores las enzimas aceleran notablemente la velocidad de una reaccin qumica / cumplen con las siguientes caractersticas7 ") Son e!ectivas en peque;as cantidades <) =o su!ren modi!icaciones qumicas irreversibles durante la catlisis. s decir que luego de la reaccin enzimtica, las mol4culas de enzimas que reaccionaron son indistinguibles de las que no lo han hecho, (la estructura de la mol4cula se mantiene, al principio / !inal de la reaccin, e3actamente igual). )) =o a!ectan la posicin de equilibrio de la reaccin que catalizan. l estado inicial / !inal de la reaccin es el mismo, solo que se llega al equilibrio mucho ms rpidamente. Como norma, las enzimas no atacan a las c4lulas vivas. Sin embargo, tan pronto muere una c4lula, 4sta es digerida por enzimas que rompen sus protenas. .a resistencia de las c4lulas vivas se debe a la incapacidad de las enzimas de atravesar la membrana celular mientras las c4lulas tienen vida. Cuando la c4lula muere, su membrana se hace permeable / la enzima puede penetrar en la c4lula / destruir las protenas en su interior. 5lgunas c4lulas contienen tambi4n enzimas inhibidoras, denominadas antienzimas, que evitan la accin de una enzima sobre un sustrato. Nomenclatura y clasificacin 6na !orma general de denominar a las enzimas es a;adir el su!i8o - asa- al nombre del sustrato. 5s, la ureasa es la enzima que cataliza la hidrlisis de la urea !ormando amonaco / di3ido de carbono. Sin embargo con el descubrimiento de nuevas enzimas esta nomenclatura resulta a veces con!usa. 5ctualmente se ha adoptado ciertas recomendaciones de la >nternacional

nzime Comission, que pretende sistemetizar la nomenclatura / clasi!icacin de las di!erentes enzimas conocidas. ste sistema divide a las enzimas en seis clases que a su vez pueden tener di!erentes subclases.

Cofactores 5lgunas enzimas dependen para su actividad cataltica adems de la estructura proteica, de otras mol4culas de naturaleza no proteica. stas estructuras reciben el nombre de cofactores. stos son resistentes al calor mientras que las protenas generalmente no lo son. l comple8o enzima ? co!actor recibe el nombre de holoenzima. 5 la !raccin proteica aislada del co!actor que es inactiva se la denomina apoenzima. .os co!actorespueden ser simpemente iones metlicos o en algunos casos mol4culas orgnicas comple8as. stas ltimas el nombre de coenzimas. Holoenzima = Apoenzima + Coenzima n ciertos casos las coenzimas estn estrechamente unidas a la mol4cula de la enzima / reciben el nombre del grupo prost4tico. 6n e8emplo clsico lo constitu/e el grupo hemo del citocromo C, unido covalentemente a la protena. ntre los co!actores que requieren las enzimas para su !uncionamiento estn las coenzimas7 =5@2: A : (nicotinamida adenina dinucletido !os!ato reducido), =5@ (nicotinamida adenina dinucleotido), B5@ (!lavina adenina dinucletido), pirido3al, biotina, tiamina, cido tetra hidro!lico , cobalamina. Centro activo de una enzima Ca se haba mencionado que la porcin de la mol4cula en la enzima que se una al o a los sustratos es una zona relativamente peque;a de la misma. sta zona , responsable de la actividad cataltica, que !avorece la orientacin de los grupos qumicos (que reaccionan para dar los productos de la reaccin) recibe el nombre de centro activo. .os grupos responsables de la actividad cataltica propiamente dicho se los denomina sitios catalticos. n algunos casos esos grupos pueden corresponder a los grupos prost4ticos de los cuales /a se ha hablado.

actores !ue influyen en la velocidad de las reacciones enzim"ticas

Temperatura7 6n aumento en la temperatura provoca un aumento de la velocidad de reaccin hasta cierta temperatura ptima, /a que despu4s de apro3imadamente D1, C se comienza a producir la desnaturalizacin t4rmica. .as enzimas de muchos mam!eros tienen una temperatura ptima de )% , C, por encima de esa temperatura comienzan a inactivarse / se destru/en Sin embargo e3isten especies de bacterias / algas que habitan en !uentes de aguas termales / en el otro e3tremo ciertas bacterias rticas tienen temperaturas ptimas cercanas a ,, C. !ecto @el p: Sobre .a 5ctividad nzimtica7 l p: no a!ecta la actividad enzimtica directamente sino que modi!ica la concentracin de protones. .os protones adems de alterar la estructura de la enzima / el substrato, pueden participar tambi4n en la reaccin como substrato o producto. n esos casos, la concentracin de protones a!ecta directamente la velocidad de la reaccin. Cualquier cambio brusco de p:, sabiendo que las enzimas son protenas, puede alterar el carcter inico de los grupos amino / carbo3ilo en la super!icie proteica, a!ectando as las propiedades catalticas de una enzima. 5 p: alto o ba8o se puede producir la desnaturalizacin de la enzima / en consecuencia su inactivacin . Enzimas (p: ptimo): 2epsina (",1) E 9ripsina (%,%)E Catalasa (%,$)E 5rginasa (+,%)E Fibonucleasa (%,#) #n$ibicin Enzim"tica .a actividad enzimtica puede ser disminuida o eliminada por la accin de ciertas sustancias a las cuales se les conoce con el nombre de inhibidores enzimticos. .as distintas !ormas de interaccin se traducen en varios tipos de inhibicin per!ectamente di!erenciables e3perimentalmente. .os dos tipos ms comunes son la competitiva / la no competitiva. Competitiva7 el inhibidor compite con el substrato por la unin con el centro activo de la enzima. 6n e8emplo clsico lo constitu/e la inhibicin del malonato sobre la enzima succinato deshidrogenasa que cataliza la eliminacin de dos tomos de hidrgeno de los tomos de carbono metil4nico del succinato. =o competitiva7 el inhibidor !orma un enlace covalente con las enzimas cerca del centro activo sin modi!icarla irreversiblemente. 6n e8emplo son los gases nerviosos, como el !luoro!os!ato de di isopropilo (@B2) que !orma un comple8o con la enzima acetilcolinesterasa. .os animales envenenados con este gas quedan paralizados, debido a la imposibilidad de transmitir adecuadamente los impulsos nerviosos.

%eacciones catalizadas por enzimas

.as enzimas son protenas elaboradas por las c4lulas a partir de aminocidos. Cada enzima es una mol4cula especializada que cataliza nicamente un tipo espec!ico de reaccin qumica. n !racciones de segundo, se catalizan numerosas secuencias de reacciones enzimticas con un rendimiento del cien por cien sin !ormacin de subproductos. .as enzimas catalizan los millares de reacciones qumicas, conocidas colectivamente como metabolismo intermediario de las c4lulas. Funcionamiento de una enzima

l poder cataltico de las enzimas ha sido e3plotado por los humanos durante miles de a;os. l producto !inal se !orma por un nmero de pasos de reaccin que son catalizados por un sistema de enzimas espec!ico. l sistema enzimtico est localizado generalmente dentro de la c4lula viviente (microorganismo, c4lula vegetal o animal). .a actividad cataltica de la c4lula completa o parte de ella, se emplea de la misma !orma que la de las enzimas aisladas. l grado de especi!idad de una enzima con respecto a la reaccin catalizada o a la !uncin de los reactivos, depende de su !uncin biolgica. l sitio activo de una enzima es una regin tridimensional !ormada por unos pocos aminocidos, orientados en la direccin apropiada para permanecer biolgicamente activos / ligarse con el respectivo sustrato. 5n no se han aclarado completamente los mecanismos de enlace / la accin cataltica en el sitio activo, pero el concepto bsico de !ormacin de un comple8o enzima ? sustrato es el !undamento de las ecuaciones de velocidad de muchas reacciones enzimticas. Sitio activo de una enzima

5lgunas enzimas necesitan un componente qumico inorgnico para su actividad denominado co!actor, o una mol4cula orgnica comple8a, llamada coenzimaE algunas requieren co!actor / coenzima. Brecuentemente el co!actor est ligado con la porcin proteica de la enzima, en cu/o caso recibe el nombre de grupo prost4tico.

Ciertas enzimas e3isten en !ormas mltiples, llamadas isoenzimasE su !orma cambia durante el desarrollo del organismo / segn el te8ido del cual hacen parte. .as enzimas reguladoras o alost4ricas son estimuladas o inhibidas por la unin con alguna mol4cula, el e!ector o modulador, generalmente un producto metablico, cu/a concentracin en la c4lula es crtica. 2ara la modelizacin de reacciones o administracin de procesos, se pre!iere el uso de enzimas sencillas puri!icadas, pero en algunos casos esta simpli!icacin conlleva a di!icultades prcticas (estabilidad primaria de la enzima / costos de puri!icacin). 2or esta razn, el uso de c4lulas completas o partes de ellas que contienen un sistema apropiado de enzimas, puede ser venta8oso especialmente cuando se involucran reacciones comple8as. 2or otro lado, los problemas concernientes a la biomasa residual / al tratamiento de aguas de desecho involucrados en la produccin de enzimas a gran escala, as como los costos de la separacin / puri!icacin de la enzima, pueden volverse prohibitivos. .a ba8a actividad espec!ica de las c4lulas completas / una selectividad potencialmente ba8a son !recuentemente compensadas por el ba8o costo / la simplicidad de uso. Es extremadamente complicado el modelamiento matemtico de la capacidad meta lica de los microorganismos para la determinacin cuantitativa de la proliferacin, crecimiento, formacin de producto, mantenimiento celular y enve!ecimiento" #or otra parte el tratamiento cin$tico de las reacciones con enzimas es relativamente simple"

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