Antibiograma

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Exames microbiolgicos
O diagnstico laboratorial das doenas infecciosas comea com a indicao clnica adequada do exame microbiolgico Necessrio conhecimento da epidemiologia e da fisiopatologia do processo infeccioso A suspeita clnica do processo infeccioso determinar o tipo de amostra a ser enviada ao laboratrio A coleta e o transporte da amostra so etapas crticas na execuo do exame microbiolgico O gerenciamento adequado destas etapas o suporte das boas prticas laboratoriais e deve respeitar as normas para o manuseio dos espcimes clnicos

Teste de sensibilidade antimicrobiana TSA

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Coleta do material
Meio de cultura adequado
Urina: frasco estril Lqor: gar chocolate Orofaringe: meio slido para transporte Sangue: meio automatizado (lacrado) Ponta de catter:

Coleta do material
Meio de cultura adequado
Urina: frasco estril Lqor: gar chocolate Orofaringe: meio slido para transporte Sangue: meio automatizado (lacrado) Ponta de catter:
Procedimento com a infeco relacionada a cateteres: Retirada do cateter Cortar a poro distal 5cm Enviar ao laboratrio
Em frasco estril Sem meio de cultura Sem conservantes

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Coleta de material biolgico

Lavar as mos lcool 70% Utilizar luvas

Coleta do material

Iodo (PVPI 10% ou tintura 1-2%) Utilizar material estril Encaminhar o exame de imediato Preencher os impressos com exatido 1 minuto lcool 70% Coleta

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Transporte de material biolgico

Ideal: processamento imediato aps a coleta
Evita erros em culturas quantitativas (ex. urina) Aumenta probabilidade de isolamento

Transporte de material biolgico

Se necessrio: transportar
Meio de transporte adequado Temperatura de transporte adequada Tempo limite de transporte adequado

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Transporte de material biolgico

Prover o laboratrio com as seguintes informaes
Localizao do paciente no hospital Doenas j definidas ou suspeitas Medicamentos em utilizao (++antimicrobianos) Bactrias anteriormente isoladas Suspeita microbiolgica com base na clnica Origem da amostra (tipo de material enviado)

Mtodos para o TSA

Disco-Difuso
Disco-difuso descrito em 1966, por Bauer e Kirby resultados qualitativos um dos mtodos mais simples discos impregnados com antimicrobianos incubao por 18 a 24 horas Os dimetros dos halos de inibio so mensurados

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Mtodos para o TSA

Disco-Difuso
Vantagens: * fcil execuo * reprodutibilidade * utilizao de reagentes de baixo custo * resultados de fcil interpretao clnica * no requer utilizao de equipamentos especiais Desvantagens: * falta de automao para realizao deste teste * qualitativo

Mtodos para o TSA

Macrodiluio em caldo
Bateria de tubos Meio de cultura lquido 1 a 2 ml Suspenso bacteriana padro 5 x 105 UFC Incubao de 18 a 24 h Turbidez para visualizar crescimento

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Mtodos para o TSA

Macrodiluio em caldo
Vantagens: * determinao de resultado quantitativo, a CIM * avaliao de um nmero substancial de bactrias Desvantagens: * quantidade de reagentes utilizada * espao necessrio para o armazenamento dos tubos * possibilidade de erros nas concentraes antimicrobianas * trabalho manual dispendioso na preparao do teste

Mtodos para o TSA

Microdiluio em caldo
Miniatura da tcnica de diluio placas de ELISA com 96 poos com fundo em U 1 placa testa 12 drogas com at 8 diluies Leitura visual Mesma interpretao

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Mtodos para o TSA

Microdiluio em caldo
Vantagens:
* economia de espao e de reagentes * reprodutibilidade (por poder repetir) * resultado quantitativo * placas pr-fabricadas e sistemas automatizados

Mtodos para o TSA

gar diluio
diluies com concentraes seriadas de um antimicrobiano meio de cultura na forma de gar placas de Petri individuais (cada placa representa uma nica concentrao) mltiplas placas (6 a 12 placas para um antimicrobiano) at 32 bactrias simultaneamente, quando se utiliza a placa de 90 x 60 mm incubao por 18 a 24 horas, a 35C CIM determinada como a concentrao que no permite o crescimento macroscpico

Desvantagens:
* alto custo * dificuldade em discernir o crescimento bacteriano * confuso com por bactrias contaminantes

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Mtodos para o TSA

gar diluio
Vantagens: * testa um grande nmero de amostras simultaneamente * custo relativamente baixo * permiti a determinao quantitativa da CIM * testar bactrias que no apresentam bom crescimento em caldo (N. gonorrhoeae; anaerbios) Desvantagens * muito trabalhoso * as placas de gar devem ser preparadas no dia em que sero usadas

Mtodos para o TSA

E-teste
fita plstica impregnada por concentraes crescentes de antimicrobiano escala das concentraes testadas difuso de um gradiente antimicrobiano no gar inculo da mesma maneira que no teste de disco-difuso (semeado por swab) CIM pelo ponto de interseo entre a fita e a zona de inibio (forma elptica)

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Mtodos para o TSA

E-teste E-teste

Mtodos para o TSA

Vantagens: * flexibilidade na escolha dos agentes antimicrobianos a serem testados * fcil execuo e fornecimento de um resultado quantitativo (CIM) * concordncia com os mtodos de gar-diluio e microdiluio em caldo Desvantagens: * alto custo das fitas * nmero limitado de antimicrobianos testados por placa

Vrios estudos demonstram que a CIM determinada pelo Etest apresenta concordncia com os mtodos de gardiluio e microdiluio em caldo

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Mtodos para o TSA

Mtodos automatizados
Vantagens: * maior rapidez na emisso dos resultados; * padronizao intra e interlaboratorial; * programas que auxiliam a interpretao dos resultados Desvantagens: * sistemas onerosos * no fornecem o resultado exato da CIM * alguns equipamentos no apresentam uma boa acurcia