Procedimientos asociados a un urocultivo Recoleccin de la muestra: Se pedir al paciente que recolecte una muestra limpia de orina que se lleva

a a cabo recogiendo la orina a mitad de chorro. Este mtodo se usa para evitar que los grmenes del pene o la vagina ingresen a una muestra de orina. Es preferible la recoleccin de la muestra una vez la orina haya estado de dos a tres horas en la vejiga. El paciente deber llevar a cabo los siguientes pasos para llevar a cabo la recoleccin de la muestra: - El paciente se lava las manos con jabn y agua caliente - El paciente retira cuidadosamente la tapa del contenedor y la deja con la superficie interna hacia arriba - El paciente limpia el rea alrededor de su pene o vagina. - El paciente empieza a orinar en el inodoro u orinal. Pasados varios segundos el paciente ubica el contenedor en el chorro y recolecta una muestra de esta orina a mitad de chorro sin detener el flujo. No se debe poner en contacto el rea genital con el borde del contenedor durante la recoleccin de la muestra. No debe incluirse papel higinico, pelo, heces o sangre menstrual en la muestra. - El paciente termina de orinar en el inodoro u orinal. - El paciente tapa cuidadosamente el contenedor y lava sus manos. Para recolectar la muestra de orina de bebes se utiliza una bolsa plstica especial con una tira adhesiva en un extremo hecha para encajar en el rea genital del bebe. Una vez lavada el rea con agua y jabn la bolsa debe ser abierta y colocada sobre el rea genital del bebe; para los nios se puede colocar todo el pene dentro de la bolsa y para las nias la bolsa debe ser colocada sobre los labios. Un paal puede ser puesto sobre la bolsa. l bebe deber ser revisado con frecuencia hasta que la orina se haya acumulado, entonces se vierte en un recipiente estril y debe ser devuelta al mdico/laboratorio. La muestra puede ser tomada insertando un catter a travs de la uretra hacia el interior de la vejiga. Esto debe ser realizado por una persona entrenada en el consultorio mdico o en el hospital. Una vez la orina ha pasado a travs del tubo se utiliza una jeringa para remover una muestra. La muestra no puede ser tomada directamente de la bolsa que recoleccin del catter porque en la orina que ha permanecido fuera del cuerpo durante mucho tiempo puede darse el crecimiento de bacterias. La orina es recolectada en un contenedor estril y el catter es removido De manera poco frecuente es posible que se decida recolectar la muestra de orina a travs de una aguja insertada a travs de la piel del abdomen bajo hacia el interior de la vejiga. Este mtodo se conoce como aspiracin suprapbica. La orina tambin puede ser recolectada mediante citoscopia, que consiste en la recoleccin de orina de la vejiga a travs de la insercin de un citoscopio o a travs de nefrostoma, que es un procedimiento quirrgico que permite la insercin de un tubo en el rin que permita la recoleccin de orina directamente del rin.

Transporte: La orina debe ser transportada al laboratorio despus de su recoleccin o si esto no es posible durante las dos horas posteriores a la recoleccin, la orina debe ser refrigerada hasta por 24 horas, tanto durante el periodo en el que se almacene como durante su transporte. No se debe congelar. Si la refrigeracin no es posible y su transporte se retrasa, la orina debe ser recolectada en tubos de transporte con preservativos como cido bricoglicerol congelado y seco o cido brico-formato de sodio. Etiquetado de muestras: La muestra debe ser marcada con la informacin demogrfica del paciente y el tiempo de recoleccin de la muestra. Es til informar el mtodo de recoleccin de la muestra al laboratorio. Solicitud de la prueba: El examen se solicita para determinar la presencia de bacterias u otros microorganismos en la orina y su posible identificacin. El mdico o la persona que solicite la prueba puede solicitar o no coloracin de Gram, puede solicitar un conteo de colonias sin identificacin preliminar o puede solicitar la omisin de pruebas de susceptibilidad a antibiticos (antibiogramas) en casos de infecciones del tracto urinario no complicadas. Cultivo: Los procedimientos que se deben llevar a cabo para la realizacin del cultivo son como siguen: - Se mezcla bien la muestra de orina - Se selecciona un asa calibrada. Aro calibrado de 0,001 ml para muestras de orina limpia o muestras recolectadas a travs de catteres. Aro calibrado de 0,01 ml para muestras recolectadas a travs de aspiracin suprapbica, citoscopia o nefrostoma. - Sumergir el asa en la muestra bien mezcalda de orina y sembrar en agar sangre, agar MacConkey (u otro medio selectivo/diferencial para bacterias gram negativas como Eosina azul de metileno) y en agar sangre anaerobio (muestras recolectadas a travs de aspiracin suprapbica, citoscopia o nefrostoma) cuando el mdico lo solicite. - Se incuba el medio a 35C durante 18 a 24 horas. El agar sangre se incuba ya sea en anaerobiosis o con una atmsfera ambiente, el agar MacConkey se incuba con una atmsfera ambiente. Segn se solicite el cultivo puede acompaarse de examen directo de la muestra a travs de coloracin de Gram o de otras pruebas como antibiograma y parcial de orina.

Examinacin de los medios de cultivo Si no hay crecimiento 24 horas despus se reincuban las placas. Si no hay crecimiento a las 48 horas las placas se descartan. Si hay crecimiento se debe determinar: - En qu medio(s) se present el crecimiento?: 1. Si solo hubo crecimiento en agar sangre esto descarta bacilos gram negativos entricos, las colonias pueden pertenecer a cocos o bacilos gram positivos, diplococos gram negativos o bacterias gram negativas que no crecen en agar MacConkey. Debe realizarse coloracin de gram 2. Si hay crecimiento en agar sangre y MacConkey lo ms posible es que las colonias pertenezcan a enterobacterias o Pseudomonas. Si hay ms de un tipo de colonias en agar sangre debe realizarse coloracin de gram. - Cuntos tipos de colonias crecieron? 1. El crecimiento de un solo tipo de colonias, si no se considera un contaminante, puede ser indicativo de la presencia de un patgeno. 2. El crecimiento de tres o ms microorganismos debe ser considerado como contaminacin de la prueba. - Cul es el conteo de colonias para cada microorganismo? 1. En trminos generales, un conteo de >100,000 cfu/ml es indicativo de infeccin del tracto urinario (ITU), excepto si el microorganismo se considera un contaminante comn. 2. Entre 10,000-100,000 cfu/ml puede indicar una infeccin, especialmente si hay un solo microorganismo aislado que se considere patgeno. 3. Conteos <10,000 cfu/ml no se consideran como indicativos de ITU, a menos que se de la persistencia del microorganismo en urocultivos seriados, especialmente si el paciente tiene sntomas de ITU. - El crecimiento corresponde a un microorganismo potencialmente patgeno o a un contaminante? 1. Algunos microorganismos considerados potencialmente patgenos para el tracto urinario y comnmente aislados en la orina son: Escherichia coli, Proteus sp., Enterobacter sp., Klebsiella sp., Citrobacter sp., Serratia sp., Enterococcus sp., Streptococcus del grupo D, Staphylococcus saprophyticus, Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa y otras sp., Corinebacterium jekeium, Acinetobacter sp., levaduras. 2. Algunos microorganismos contaminantes usualmente aislados de la orina son: Diphteroides, Staphylococcus coagualasa negativos diferentes a Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus alfa hemolticos y no hemolticos, Lactobacillus sp., Bacillus sp., Neisseria sp., no patognica.

Identificacin del microorganismo El uso de coloracin de gram y pruebas bioqumicas es frecuente para la identificacin sobre todo en laboratorios estudiantiles. El centro clnico utilizar cualquiera de las siguientes tcnicas para la identificacin del patgeno: Coloracin de Gram (si es necesario), pruebas de cribado rpidas, paneles de indentifiacin (ej: MicroScan, Vitek). Reporte de resultados Se debe correlacionar toda la informacin y determinar si tiene sentido. El reporte final de resultados incluye conteo de colonias, identificacin del microorganismo y resultados de otras pruebas solicitadas cuando sea el caso. Despus de 24 horas posteriores al reporte de resultados, cuando sea conveniente las placas son reincubadas. Despus de 48 horas las placas se descartan si se han finalizados los procedimientos con los microorganismos aislados.

1. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/spanish/ency/article/007487.htm 2. http://www.nlm.nih.gov/medlineplus/ency/article/003751.htm

3. 4. 5. 6.

http://www.webmd.com/a-to-z-guides/urine-culture http://www.healthline.com/health/urine-culture http://labtestsonline.org/understanding/analytes/urine-culture/tab/test http://www.asmpress.org/asmpress/files/CCLIBRARYFILES/FILENAME/000 0000150/03.12.pdf 7. http://webmedia.unmc.edu/alliedhealth/honeycutt/CLS418/UrineCultures.pdf 8. http://www.cigna.com/healthwellness/hw/medical-tests/urine-culture-hw5973