LABORATORIO DE BIOLOGA CELULAR 4576

USO CORRECTO DEL MICROSCOPIO PTICO DE CAMPO CLARO, ENFOCANDO LA LETRA E Y RESPETANDO NORMAS DE BIOSEGURIDAD DENTRO DEL LABORATORIO

INTEGRANTES: CARLOS ANDRS AGUIRRE FLORES JOHANNA BRIGITTE GARCIA PONCE

TUTOR: ING. KARINA PONCE

Objetivos: Seguir normas del laboratorio de docencia de la ESPE, para el buen uso del microscopio ptico de campo claro. Reconocer cada una de las partes del microscopio en base a la observacin de las mismas y bibliografa investigada. Manipular correctamente el microscopio siguiendo normas universales. Identificar las funciones del microscopio, enfocando la letra e desde un recorte de peridico, con fundamento confiable. Identificar correctamente los pasos para hacer uso de un microscopio ptico de campo claro. Seleccionar con criterio protocolos, equipos y materiales dentro del laboratorio. Manipular materiales del laboratorio, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente. Discutir en forma grupal y con criterio, los resultados obtenidos. Limpiar el microscopio de forma correcta, respetando normas de bioseguridad y el medio ambiente. Realizar limpieza de los mesones del laboratorio de docencia de la ESPE, respetando normas de bioseguridad. Mantener correctamente el cuaderno de laboratorio con investigacin cientfica actualizada de la prctica y sus resultados.

Introduccin: La realizacin de la prctica busca fomentar el correcto uso del microscopio reconociendo sus partes, utilizando los pasos adecuados para su uso y aplicndolos bajo las normas de bioseguridad y medio ambiente previamente mencionadas por la docente. En la prctica se puede observar a travs de la letra e las diferencias que existen en la visin dada por el microscopio y la visin que da los ojos del ser humano con respecto a la misma. Metodologa: Muestras: Ninguna. Equipos: Microscopios. Materiales de proteccin personal: Mandil. Reactivos: Ninguno. Materiales e insumos: Placas portaobjetos, tijeras, recorte de la letra e, papel de limpieza para microscopios, algodn, alcohol antisptico. Organismos: Ninguno. Procedimiento: Observacin y manipulacin del microscopio ptico de campo claro 1. Cortar una pequea letra e (minscula) de un pedazo de peridico y colocarla en el centro de una placa portaobjetos. 2. Anotar en la bitcora del microscopio ptico correspondiente, los datos sugeridos segn las normas del laboratorio de docencia de la ESPE, verificando antes el nmero del microscopio. 3. Conectar el microscopio en los enchufes 110v y encenderlo. 4. Colocar la placa porta objetos en la pinza porta placas, ubicando la letra e, justo en el orificio medio de la platina y donde coincide la luz que emite el microscopio. 5. Ubicar el objetivo de menor aumento, haciendo girar el revlver. Si la anterior persona que us el microscopio lo utiliz de forma correcta, el lente objetivo en posicin ser el de menor aumento. 6. Manipular el macromtrico de tal forma que suba la platina lo ms cerca del lente objetivo, siempre mirando directamente (sin mirar por los oculares) para que no se tope la placa, porque podra romperse y/o daarse el lente.

7. Mirando por los oculares, bajar lentamente la platina con el macromtrico hasta observar la muestra, en este caso, la letra e. 8. Girar el micromtrico para perfeccionar el enfoque. La letra e se observar en su totalidad, de forma invertida, y con detalles de tinta de la misma. 9. Identificar las funciones de manejo del condensador, apertura de diafragma, luz emitida desde la fuente, lentes oculares del microscopio y platina, haciendo uso de estos y observando los cambios en la observacin. 10. Una vez enfocada correctamente la muestra, cambiar al siguiente aumento del lente objetivo, manipulando el revlver, ahora se observar parte de la letra e, ya no de una forma completa. 11. Manipular solo el micromtrico para mejorar el enfoque. 12. Procurar que una parte teida de la letra e quede en el centro, manipulando la platina hacia la derecha o izquierda segn el caso. 13. Proceder a cambiar al lente objetivo del siguiente aumento y manipular solo el micromtrico para mejorar el enfoque, ahora se observar solo una pequea parte de la letra e y adems detalles de tinta de la misma. Si la perdi en el campo, mueva la platina hacia los lados y si necesita ms luz manipular nuevamente, apertura de diafragma y luz del microscopio. 14. Bajar la platina y retirar la placa portaobjetos utilizada, proceder a apagar el microscopio y desconectarlo. 15. Bajar totalmente la platina y manipular el revlver para dejar el objetivo de menor aumento. 16. Limpiar correctamente cada uno de los objetivos del microscopio y oculares con papel especial. Adems limpiar la platina y cualquier otra parte del microscopio que lo requiera. 17. Proceder a ponerle el protector y dejarlo hacia atrs de la mesa, siempre lejos de los lavabos. 18. Anotar los datos requeridos en la bitcora y dejarla cerca del microscopio correspondiente. 19. Anotar cada uno de los resultados obtenidos en las observaciones con los diferentes objetivos: 4x, 10x y 40x.

Resultado: Resultados primarios: Enfoque de la letra e en el microscopio ptico de campo claro respetando normas de bioseguridad. Clculos matemticos y estadsticos: Ninguno. Reporte de resultados: Observacin de la letra e con los diferentes lentes objetivos del microscopio ptico de campo claro, 4x, 10x y 40x.

Grficos:

Con la visin del microscopio en 4x, se pudo notar que el tamao de la letra e. La letra e se puede observar al revs.

Letra e 4x La visin de la letra e es ms precisa y cercana donde se observa su textura y la impresin de la tinta en el papel.

Letra e 10x La visin de la letra e fue ms cercana, donde ya no se observa completamente la letra y se observa los filamentos del papel.

Letra e 40x Discusin: Una propiedad importante de los objetivos es que normalmente invierten la imagen en todo sentido (de derecha a izquierda y de arriba abajo) y, como el ocular no puede reinvertirla, nosotros la observamos completamente al revs. (Gonzlez, 2012) Se observ la imagen de la letra e al revs .

El poder resolutivo aumenta a medida que disminuye la distancia que separa dichos puntos. Es decir, si dos puntos distan 1cm uno del otro y se lo ve borroso tendr menor poder resolutivo que alguien que los distingue por separado o que distingue perfectamente puntos que distan de 0,5cm entre si. (Gonzlez, 2012) Durante la prctica se pudo notar que mediante el uso de macromtrico y micromtrico la resolucin de la placa aument y la observacin de ella mejor.

Conclusin: Se pudo comprender el funcionamiento de las partes del microscopio mediante la utilizacin adecuada respetando las normas de bioseguridad y medio ambiente de cada una de ellas. Concluimos que el microscopio permite observar objetos que no se pueden ver a simple vista agrandando la imagen de ellos para si identificar su contenido. Cuestionario: Cul es el manejo de las bitcoras de los equipos de laboratorio?

Control de las personas que utilizan los equipos y las novedades durante su uso. Cules son las partes y funciones del microscopio ptico de campo claro? Parte mecnica Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en l se encuentra la fuente de iluminacin. Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se encuentra un orificio que permite el paso de la luz. Sobre la platina hay un sistema de pinza o similar, para sujetar el portaobjetos con la preparacin, y unas escalas que ayudan a conocer qu parte de la muestra se est observando. La platina presenta 2 tornillos, generalmente situados en la parte inferior de la misma, que permiten desplazar la preparacin sobre la platina, en sentido longitudinal y transversal respectivamente. Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte de oculares y objetivos. Revlver porta objetivos: estructura giratoria que contiene los objetivos.

Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el microscopio para trasladarlo de lugar. Tornillo macromtrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la platina verticalmente de forma perceptible.

Tornillo micromtrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de la muestra, una vez que se ha realizado el enfoque con el macromtrico. Tambin desplaza verticalmente la platina, pero de forma prcticamente imperceptible. Es el nico tornillo de enfoque que se utiliza, una vez realizado el primer enfoque, al ir cambiando a objetivos de mayor aumento. Parte ptica Oculares: son los sistemas de lentes ms cercanos al ojo del observador, situados en la parte superior del microscopio. Son cilindros huecos provistos de lentes convergentes cuyo aumento se resea en la parte superior de los mismos (normalmente 10X en los microscopios que se utilizarn en esta prctica). Dependiendo de que exista uno o dos oculares, los microscopios pueden se mono o binoculares. Objetivos: son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la parte inferior del tubo, mediante el revlver. En esta estructura se pueden acoplar varios objetivos (ordenados de forma creciente segn sus aumentos, en el sentido de las agujas el reloj). Un anillo coloreado es distintivo de los aumentos de cada objetivo, que tambin van reseados en el lateral del mismo. Algunos objetivos no enfocan bien la preparacin al aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersin (normalmente van marcados con un anillo rojo). Estos objetivos de inmersin no se utilizarn normalmente en estas prcticas. Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los concentra sobre la preparacin, de manera que proporciona mayor o menos contraste. Se regula en altura mediante un tornillo (letra J de la figura). Fuente de iluminacin: en los microscopios a utilizar, el aparato de iluminacin est constituido por una lmpara halgena de bajo voltaje (12V) situada en el pie del microscopio. La luz procedente de la bombilla pasa por un reflector que enva los rayos luminosos hacia la platina. Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminacin. Abrindolo o cerrndolo permite graduar la intensidad de la luz. Transformador: ya que el voltaje de la bombilla es menor que el de la red, es necesario para enchufar el microscopio. Algunos modelos ya lo llevan incorporado en el pie del microscopio. Adems, el transformador dispone de un potencimetro para regular la intensidad de la luz. Cmo se manipula el microscopio? o Verificar el estado del equipo antes de su uso y llenar la bitcora. (Granda, 2011) o Encender mediante el botn ubicado en la parte posterior o lateral. (Granda, 2011) o Colocar la muestra a observar. (Granda, 2011)

o o

Enfocar con el lente de 4x para posterior enfocar con el de 10x y aumentar la capacidad segn lo necesitado. (Granda, 2011) Ajustar la distancia del ojo, la intensidad de la luz y el diafragma. (Granda, 2011)

Qu tipo de muestras se pueden observar en los microscopios pticos de campo claro?

Cualquier tipo de muestras a observar que sean finas. Con que aumentos de lente objetivo cuenta el microscopio ptico?

Cuenta con 4x, 10x, 40x, 100x. Por qu es necesario enfocar primero con un aumento menor antes de los aumentos mayores?

Porque el macromtrico utilizado para enfocar solamente se usa en los lentes menores de 4x y 10x Por qu se invierten las imgenes al observar las muestras en el microscopio?

Los lentes convexos que permiten modificar el tamao de las imgenes que las atraviesa invierten naturalmente su disposicin de tal manera que la nueva imagen se forma invertida comparada con la original. Cmo se debe transportar un microscopio de un lado a otro?

Sostenindolo desde la base y el pie. Cul es la manera correcta de limpiar los lentes objetivos y dems partes de un microscopio?

La limpieza se realiza con alcohol y algodn donde en los objetivos de 4x a 40x no importa su orden pero al finalizar la limpieza de estos se debe limpiar el objetivo de 100x ya que este puede tener aceite de inmersin y al finalizar utilizar paos de limpieza con el mismo orden. De igual manera se utiliza alcohol para limpiar las otras partes del microscopio. Cundo se utiliza el objetivo de 100x con aceite de inmersin?

El aceite de inmersin es utilizado para aumentar la resolucin del lente de 100x ya que caractersticas similares y evita la prdida de luz. Bibliografa: Brown, A. 2007. Microbiological applications. Laboratory Manual in general microbiology. Editorial interamericana Mc. Graw Hill. Eighth edition. U. S. A. Pp: 1 9. Espe. 2012. Manual de laboratorio de biotecnologa docencia. Quito-Ecuador.

Gonzlez, C. (3 de Mayo de 2012). Gabinete de Botnica del CNBA. Recuperado el 30 de Septiembre de 2013, de http://www.botanica.cnba.uba.ar/ Granda, S. (Agosto de 2011). Edu Virtual. Recuperado el 30 de Septiembre de 2013, de http://evirtual2.espe.edu.ec Karp, G. Biologa celular y molecular. 2005. Editorial interamericana Mc. Graw Hill. Cuarta edicin. Mxico. Pp: 789 792.