UNIVERSIDAD DE CUNDINAMARCA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS INGENIERA AGRONMICA PROPIEDADES DE LAS MEMBRANAS: EFECTO DE LA TEMPERATURA

Vctor Manuel Casas Rodrguez Camilo Gonzlez Ruz Johanna Ximena Martnez Moreno John Alexander Moreno Barbosa

Fusagasug febrero 06

2013

2. INTRODUCCION En este laboratorio se puede observar el efecto de la temperatura sobre las propiedades de la membrana de la remolacha (beta vulgaris L.), que se evidenciar en diferentes ambientes como lo son: el hielo, el calor y la temperatura ambiente, para as poder observar la permeabilidad de la membrana y sus diferentes comportamientos.

3. OBJETIVOS Explicar y analizar los cambios experimentados por la membrana celular debido a cambios en la temperatura. Analizar como la polaridad del agua influye en los cambios presentados en la membrana.

4. BREVE REVISION DE LITERATURA

El transporte de los solutos a travs de las membranas depende de varios factores, entre los que se destacan su polaridad y tamao. Las sustancias apolares difunden libremente a travs de la bicapa lipdica, mientras que las polares encuentran una importante barrera en la porcin hidrofbica constituida por las colas de los cidos grasos. (Ctedra de Biologa Facultad de
Agronoma y Agroindustrias, UNSE)

El agua pese a que es una molcula polar, es una de las sustancias que ms fcilmente atraviesa las membranas celulares , a travs de poros denominados acuoporinas . (Ctedra de Biologa Facultad de Agronoma y
Agroindustrias, UNSE)

4.1. FLUIDEZ DE LA MEMBRANA Las membranas son estructuras dinmicas donde los componentes pueden desplazarse en todas las direcciones sobre el plano de la bicapa. Esto se denomina mosaico fluido. (Membrana plasmtica - Ingrid Romer Hernn Sala Gabriela
Gmez Silvia Mrquez)

Fig. 1 - Movimientos de los fosfolpidos en una bicapa lipldica 4.2. MOVILIDAD DE LOS COMPONENTES DE LAS MEMBRANAS Existen tres tipos de movimientos posibles en las membranas:

rotacin (sobre su propio eje) traslacin (o difusin lateral) sobre el plano de la membrana. flip-flop

El movimiento de flip-flop es el intercambio de fosfolpidos de una monocapa (o hemimembrana) a la otra; est sumamente restringido, debido a la dificultad que posee la cabeza polar para atravesar el medio hidrofbico de la matriz de la membrana. De all que no sea un movimiento que ocurra de manera espontnea sino que est mediado por enzimas denominadas flipasas. Tanto los movimientos de difusin lateral como el de rotacin se llevan a cabo sobre la misma hemimembrana de la bicapa lipdica. (Membrana plasmtica Ingrid Romer Hernn Sala Gabriela Gmez Silvia Mrquez)

4.3. FACTORES QUE AUMENTAN LA FLUIDEZ DE LAS MEMBRANAS -cidos grasos insaturados -Baja concentracin de colesterol -Altas temperaturas -Colas hidrocarbonadas cortas (dificultan el empaquetamiento)

Factores que favorecen la viscosidad Alto grado de saturacin y mayor longitud de las colas hidrocarbonadas. Menor temperatura del medio

Factores que favorecen la fluidez Alto de grado de insaturacin y menor longitud de las colas hidrocarbonadas. Mayor temperatura del medio

Fig. 2 - Esquema de los fosfolpidos de membrana en estado viscoso y fludo. 4.4. EFECTO DE LA TEMPERATURA SOBRE LA FLUIDEZ El ascenso de la temperatura aumenta la energa cintica entre las molculas y, por lo tanto, el movimiento de las colas hidrocarbonadas. Esto lleva a una disminucin de las interacciones atractivas entre las mismos y a un aumento de los movimientos de rotacin y de difusin lateral. Por el contrario, una disminucin de la temperatura vuelve ms rgida a la membrana ya empaqueta las colas hidrofbicas de los fosfolpidos e impide sus movimientos. Si la temperatura desciende significativamente, la membrana puede llegar a cristalizarse, con la prdida consiguiente de muchas funciones vitales de la membrana. (Membrana
plasmtica - Ingrid Romer Hernn Sala Gabriela Gmez Silvia Mrquez)

Si colocamos un soluto en un solvente, las molculas de soluto, debido a la energa cintica de las molculas presentes en la solucin, difundirn desde la zona donde se encuentran en mayor concentracin hacia la zona donde se hallan en menor concentracin. Al cabo de un tiempo toda la solucin presentar la misma concentracin de soluto. Para lograr esto no se requiere aporte externo de energa, sino que es suficiente con la energa cintica propia de las molculas. Si tenemos en cuenta que la temperatura de un medio es, de alguna manera, un ndice de la energa cintica de las molculas presentes en el mismo, es fcil deducir que a mayor temperatura, ms importante ser el fenmeno de difusin. (Membrana plasmtica - Ingrid Romer
Hernn Sala Gabriela Gmez Silvia Mrquez)

4.5. OTROS ASPECTOS SOBRE LA MEMBRANA CELULAR La fluidez de las membranas celulares es biolgicamente importante. Algunos procesos de transporte y actividades enzimticas pueden detenerse cuando la viscosidad de la membrana (parmetro inversamente relacionado con la fluidez) se incrementa ms all de un nivel crtico umbral. La fluidez de la bicapa depende tanto de su composicin como de la temperatura. Una menor longitud de las cadenas reduce la tendencia de las colas a interaccionar entre s y los dobles enlaces cis producen pliegues en las cadenas hidrocarbonadas que dificultan su empaquetamiento, de forma que las membranas permanecen fluidas a temperaturas ms bajas. (Universidad autnoma de la ciudad de Mxico - clula /Membranas
Biolgicas y Transporte - Gonzalo Vzquez Palacios)

La mayor parte de las membranas biolgicas se encuentran en un estado cristalino lquido; sin embargo, a temperaturas bajas, las fuerzas de Van der Waals1 entre las cadenas de hidrocarburos dispuestas una cerca de otra convierten las bicapas de fosfolpidos en un gel slido. Bacterias, levaduras y otros organismos cuyas temperaturas varan con la de su entorno controlan la composicin de cidos grasos de sus lpidos de membrana para mantener una fluidez relativamente constante. Si la temperatura disminuye sintetizan cidos grasos insaturados, de manera de evitar la prdida de fluidez de sus membranas por efecto de la disminucin de la temperatura. (Universidad autnoma de la ciudad de
Mxico - clula /Membranas Biolgicas y Transporte - Gonzalo Vzquez Palacios).

5. MATERIALES Y METODOS

5.1. Materiales -Media remolacha congelada -Media remolacha a temperatura ambiente -Agua -Pinzar -2 vasos de precipitados -Navaja -4 tubos de ensayo -Gradilla -Hielo en cubos -Pipeta -Mechero -Toallas de cocina -Cinta de enmascarar -Marcador

5.2 METODOLOGIA 1. Se parte por la mitad una remolacha, se deja una mitad en el congelador y la otra a temperatura ambiente, durante 8 das. 2. Se procede a hacer la diseccin del material vegetal congelado obteniendo tres pequeos trozos con una medida de 15 mm. 3. con el material vegetal no congelado se disecciona un delgado trozo con una medida de 15 mm. 4. se rotulan los 4 tubos de ensayo. 5. se coloca en el tubo nmero 1, 10 ml de agua y el trozo de remolacha congelada y se deja en la gradilla durante 30 min.

6. se procede de igual forma en los tubos 2, 3 y 4 agregando pedazos de remolacha no congelada Y aadiendo 10 ml de agua a cada tubo.

7. en el hielo dispuesto en el laboratorio se coloc el tubo nmero 2 a tratamiento de bao de hielo por 30 min.

8. el tubo nmero 4 se introdujo en el vaso de precipitado con agua caliente por 10 min y luego se coloco en la gradilla durante 20 min. 9. el tubo 3 se deja en la gradilla a tratamiento de temperatura ambiente por 30 min.

10. Nos dirigimos a analizar los colores que se obtuvieron en los 4 tratamientos diferentes identificando sus diferentes tonalidades.

6. Resultados y discusin

6.1. Resultados

Tubo

Temperatura

1 2 3 4

Congelada Bao de hielo Temperatura ambiente 70 C

Intensidad del color 1= menos int; 4 = ms intenso. 4 2 1 3

Como pudimos observar en los resultados obtenidos a travs del efecto de la temperatura en la remolacha (beta vulgaris L.) decimos que: En el primer tubo de ensayo que contena el trozo de remolacha congelado, fue el que presento mayor intensidad de color, ya que el hielo rompe fcilmente las membranas lo que genera el mayor dao a la membrana citoplasmtica, en relacin a las dems temperaturas y los diferentes tratamientos con remolacha no congelada, por lo tanto entre ms dao causado, mayor cantidad de pigmento (betacianina) que escapa provocando mayor coloracin en el tubo de ensayo. En temperatura de 70 grados en el tubo 4, la pigmentacin de la membrana se hace ms dbil debido a que el calor provoca mayor colisin de las molculas que la componen vindose obligadas a salir y mezclarse con el agua de un lugar de mayor concentracin a un

lugar de menor concentracin, adems que la betacianina que le da el color rojo a la remolacha es soluble en agua; en cambio en el bao de hielo y la temperatura ambiente al no sufrir un cambio brusco de temperatura, sus molculas no presentan mayor movimiento lo que genera que la permeabilidad de la membrana no se vea afectada en mayor proporcin y no hay un gran escape del pigmento, lo que se pudo evidenciar a travs de los tubos 2 y 3.

6.2. Discusin

Con respecto al efecto provocado por el resto de temperaturas, debemos sealar antes que tanto el fro como el calor provocan prdida de semipermeabilidad ya que modifican la microviscosidad o fluidez de las membranas, el calor la reduce mientras que el fro la aumenta (Azn y Taln., 2001). Lo anterior es cierto ya que la semipermeabilidad de una membrana permite que ciertas molculas o iones pasen a travs de ella por difusin. Por ejemplo el frio hace que la membrana se vuelva rgida y sucede un empaquetamiento de las colas hidrofbicas de los fosfolpidos que impide sus movimientos generando la cristalizacin de la membrana, estos cristales tan slo necesitan una temperatura de -2C a -3C para formarse, y nuestra temperatura era de 20C, con lo cual la formacin de los cristales es proporcional a la concentracin de pigmento, luego a mayor absorbancia, mayor rotura de las membranas. De igual manera en cuanto ms alta sea la temperatura, ms disminuir la fluidez de la membrana lo que conlleva menos resistencia y ms rotura.

7. Conclusiones: Los cambios de temperatura ejercen gran influencia sobre la permeabilidad de la membrana, se puede tener como punto de referencia que a temperatura ambiente el dao que sufre la membrana es mnimo o casi nulo pero en cambio en temperaturas extremas (calor, frio) es grande el dao y se evidencia a travs del escape de ms colorante. De acuerdo a la polaridad del agua podemos decir que es un compuesto soluble en agua tanto es as que el pigmento de la remolacha es polar y se diluy fcilmente con el agua.

cuanto ms alta o ms baja es la temperatura, ms disminuir la fluidez de la membrana lo que conlleva a menos resistencia y ms rotura.

8. Cuestionario - qu tratamiento mostro ms intensidad de color? El tratamiento que mostro ms intensidad de color fue el de la remolacha congelada. que indica la intensidad del color?

Indica el grado de dao que sufre la membrana, es decir, a mayor dao a la membrana, mayor cantidad de pigmento escapara de la clula cmo afectan las temperaturas altas a las membranas celulares?

Con alta temperatura la membrana se permeabiliza y se deshidrata perdiendo iones y llevndose molculas de agua.

-Qu les pasa a las clulas en temperaturas bajas? Si la temperatura es baja la membrana se impermeabiliza secuestrando iones con molculas de agua. Cmo se llama el pigmento rojo de la raz de remolacha y donde se encuentra almacenado?

El pigmento rojo de la raz de la remolacha se llama betacianina. se encuentra almacenado en el cromoplasto, los cromoplastos son un tipo de plastos, orgnulos propios de la clula vegetal, que almacenan los pigmentos a los que se deben los colores, anaranjados o rojos, de flores, races o frutos.

9. Bibliografa http://genomasur.com/lecturas/Guia04.htm AZCON-BIETO J., TALON, M. 2001. Fundamentos de fisiologa vegetal. Ed McGraw-Hill Interamericana. Madrid. http://faa.unse.edu.ar/document/apuntes/biol/Permembr.pdf