Bioqumica - 1 -

COLEGIO MARISTA SANTA MARA OURENSE PRCTICAS DE BIOLOGA -2 BACHILLERATO

PRACTICA 5

BIOQUMICA

OBJETIVOS:
1. Determinar la presencia o ausencia de glcidos en una disolucin
2. Determinar si un glcido presenta o no libre el grupo aldehdo (no cclico) o hemiacetal
(cclicos).
3. Investigar la presencia de lpidos o de prtidos en una disolucin.

MATERIAL:
RECONOCIMIENTO DE GLCIDOS
REACCIN DEL TIMOL
* Disolucin alcohlica de timol (etanol * timol al 5% )
* Sulfrico concentrado
* Disolucin problema y testigo
* Bureta con pinza y soporte
* Vaso de precipitados
* Tubos de ensayo y gradilla
* Pinzas de madera
* Mechero Bunsen
REACCIN DE FEHLING
* Soluciones A y B de Fehling
* Disoluciones de sacarosa y glucosa sin rotular
* Tubos de ensayo
* Pinza de madera con mango
* Mechero Bunsen
* Pipetas


REACCIN DE FEHLING

Los glcidos monosacridos los podemos encontrar presentando su grupo aldehdo
libre, en los acclicos; o bien, no libre, hemiacetales, en los cclicos.
Los grupos citados reducen el Cu
++
del SO
4
Cu de la solucin B de Fehling a Cu
+
en
forma de Cu
a
, que da un precipitado de color caracterstico.


PROCEDIMIENTO

1. Mezclar en un tubo de ensayo 1 cc. de solucin A de Fehling con 1 cc. de B. No
utilizar la misma pipeta para cada solucin.

2. Aadir a la mezcla 2 cc. de disolucin problema.

3. Hervir, cuidando de aplicar lateralmente la llama, no en el fondo del tubo,
mantenindolo inclinado y con la boca orientada hacia donde no haya nadie. Agita
suavemente mientras calienta, y si entra en ebullicin rpida, aprtalo de la llama.

4. Si en la disolucin existe azcar y ste es reductor, se producir un precipitado de
color caracterstico de Cu
2
O que, con tiempo, ir sedimentando en el fondo del tubo.

5. Una vez producida la reaccin limpiad el tubo de ensayo rpidamente.





Bioqumica - 2 -
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OBSERVACIONES:




a) De qu color ha salido el precipitado?. Por qu?







b) Es reductor la glucosa? Y la sacarosa?. Razona la respuesta







c)
1
Estable en NaOH Por qu se denomina reduccin este cambio? Cul es la
sustancia reductora? Cul se educe o oxida?


REACCIN CON POLISACRIDOS: ALMIDN


El almidn formado por una mezcla de dos molculas: amilosa y amilopeptina se tien
con una solucin de I (yodo) de color negro o marrn pardusca.

PROCEDIMIENTO


1. Verter unas gotas con la pipeta sobre un trozo de pan o de harina.


a) Qu reaccin observas?. Coloracin que aparece.





1
La Solucin A de Fehling contiene: NaOH y Tartrato de Na y K. La B SO4Cu. Al mezclar las dos se forma un
complejo entre el tartrico y el Cu que impide que el NaOH precipite al Cu en forma de Cu(OH)2. La glucosa reduce
este complejo pasando el Cu a CU2O.

H H H H
| | | |
HOOC-C-C-COOH HOOH-C--C-COOH
| | | |
OHOH O O
Cu
CIDO TARTRICO COMPLEJO TARTRICO-Cu


Bioqumica - 3 -
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MATERIAL:
LPIDOS
RECONOCIMIENTO DE GRASAS
TINCIN CON SUDN III
* Sudn III
* Disolvente (gasolina)
* Aceite de oliva, leche, agua destilada
* Pipeta
* Tubos de ensayo y gradilla
* Cuentagotas

SUDN III


Es un colorante especfico de las grasas.

PROCEDIMIENTO

1. Colocar 2 cc. de aceite en un tubo de ensayo, verter otros 2 cc. de agua y dejar
reposar.

2. A los 4 5 minutos aadir Sudn III y agitar; dejar reposar.

3. Colocar 2 cc. de leche en un tubo de ensayo, verter 10 cc. de agua y 5 gotas de
Sudn III y agitar. Dejar reposar.

OBSERVACIONES:






a) En el punto 1 del procedimiento, qu ocurre? Por qu?




b) De qu color se tien el aceite?.




c) Qu observas en la leche?






d) Qu se tie, al igual que en el aceite en la leche?.





Bioqumica - 4 -
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MATERIAL: DETECCIN DE LA PRESENCIA DE PROTENAS
REACCIN DE BIURET

* Disolucin de ovoalbmina, * Disolucin de SO
4
Cu al 0,5%, * Disolucin de NaOH al 10%,
Pipetas, * Tubos de ensayo, * Gradillas

REACCIN DE BIURET

Esta reaccin sirve para identificar protenas y pptidos, pero no aminocidos; al
mezclar una protena con un lcali concentrado y algunas gotas de SO
4
Cu se produce un color
caracterstico., debido al grupo -CO.NH- (enlace peptdico). El Cu del sulfato cprico forma un
complejo, en medio alcalino, con los N del enlace peptdico de los que el H es desplazado. Este
complejo toma la coloracin caracterstica.


Este complejo es
bivalente negativo =
porque quedan sin
saturar una valencia
del Na y otra del C

x2Na

Otras dos de otro
carbono y otro N
son neutralizadas
por los dos Na



La prueba se denomina BIURET debido a que la urea calentada por encima de su
punto de fusin se descompone en amonaco y cido cinico, CNOH, el cual junto con otra
molcula de urea forma biuret: NH
2
.CO.NH.CO.NH
2
, sustancia que con el sulfato de cobre en
medio bsico da la coloracin caracterstica.


PROCEDIMIENTO

1. Depositamos 1 cc. de disolucin de ovoalbmina en un tubo de ensayo y le
aadimos un volumen igual de NaOH al 10%.

2. Agitamos bien para que se mezclen a fondo.

3. Depositamos, a continuacin, gota a gota, mediante una pipeta, una disolucin de
sulfato de cobre del 0,5% hasta que se produzca la reaccin.

OBSERVACIONES:




a) Localiza las valencias que quedan sin saturar?.

b) De qu color da la reaccin al formarse el Biuret?.

c) Qu sustancias se pueden identificar con este procedimiento?.

d) Por qu se produce la coloracin?.

NO OLVIDES al terminar la prctica RECOGER y LIMPIAR todo el material utilizado

Fecha y sello del profesor: