PRODUCCIN DE BIOETANOL A PARTIR DELA FERMENTACIN ALCOHLICA DE JARABESGLUCOSADOS DERIVADOS DE CSCARAS DENARANJA Y PIA Lesly P.

Tejeda, Candelaria Tejada, ngel Villabona, Mario R. Alvear, Carlos R. Castillo, Daniela L. Henao, Wilfredo Marimn,Natali Madariaga, Arnulfo Tarn Universidad de Cartagena, Cartagena de Indias, (Colombia) Resumen El objetivo de este trabajo fue obtener bioetanol a partir de cscaras de naranja (Citrus sinensis) y pia (Anans sativus) . Se determin el contenido de azcares reductores de los materiales lignocelulsicos.Mediante un pretratamiento fsico se redujo el tamao de las muestras y, la remocin de lignina se realizcon hidrxido de sodio y sulfato de calcio. La hidrlisis cida se llev a cabo con cido sulfrico al 5%a 125C y 15 psi para obtener un jarabe azucarado. Este jarabe fue fermentado con Saccharomyces cere-visiae en un reactor con agitacin durante 7 horas. El etanol obtenido fue separado por microdestilacin. Se determin el contenido de etanol por cromatografa de gases y se encontr, nalmente, que con lascscaras de naranja se obtuvo mayor contenido de etanol, 8.4 mg/g, que con las cscaras de pia, 1.0 mg/g. Introduccin Las tcnicas actuales de produccin de etanol apartir de cereales y caa de azcar presentan elproblema de la seguridad alimentaria. De igualforma, la produccin de etanol carburante por medio de estas materias primas no ha llenadolas expectativas con respecto a la disminucinde gases invernaderos y de aumento en la pro-duccin de energa con respecto a la gastada. Por otro lado, segn Uyazn & Gil (2003), enel mundo se producen aproximadamente 1600 m i l l o n e s d e t o n e l a d a s p o r a o d e r e s i d u o s slidos, los cuales generan graves problemas,no slo por el deterioro progresivo del medioambiente, sino tambin desde el punto de vista econmico puesto que los costos de recolec cin, transporte y disposicin nal son cada vez mayores.En el caso de Colombia, las cifras del Ministerio de Ambiente, Vivienda y Desarrollo Territorialindican que en un da el pas produce 27300 tone -ladas de basura de las cuales el 65% son residuosorgnicos. Por estas razones, se est impulsandoel estudio de la produccin de bioetanol de ter-cera generacin, el cual es producido a partir debiomasa lignocelulsica residual, compuesta deacuerdo con Olsson & Hahn-Hiigerdl (1996) por

dos polmeros de carbohidratos, la celulosa (35-50%) y la hemicelulosa (15-25%), y un polmerofenlico, la lignina (20-25%). El bioetanol de tercera generacin se puede ob-tener a partir de jarabes glucosados producidosen la hidrlisis de residuos lignocelulsicos.Una de las principales fuentes de la cual se puede obtener jarabe glucosado son las cscaras de frutas que en su gran mayora son considera -das biomasas desvalorizadas. En las industriasde la Costa Caribe colombiana, frutas como la naranja y la pia, tienen gran in uencia en el mercado, pero sus cscaras son desechadas, desaprovechando el valor que stas tienen yadems que el uso de este subproducto agrcola se limita a la alimentacin de ganado bovino.Segn Rincn, et al . (2005), las cscaras de naranja representan aproximadamente del 45 al 60% del peso de la fruta. El bioetanol obtenidopor fermentacin de estas materias primas que contienen hidratos de carbono, se adapta par-ticularmente bien para sustituir a la gasolinaen los motores de encendido por chispa. La produccin de etanol combustible a partir dematerial lignocelulsico se ha convertido en unaalternativa interesante en la utilizacin de este tipo de residuos que podran abrir nuevos mer -cados para su revalorizacin. En la produccinde bioetanol partir de material lignocelulsico tienen lugar varios procesos fsicos, qumicos y biolgicos como son: reduccin de tamao,remocin de lignina, hidrlisis cida, fermen-tacin y destilacin, segn lo reportan Teubner, et al. (1999).El tema del etanol lignocelulsico ha sido in -vestigado ampliamente a nivel internacional. En Japn, Sugimoto, et al. (2008) han desa -rrollado un proceso para el pretratamiento dela biomasa lignocelulsica con ozono para elrompimiento de las molculas de lignocelulosa,con buenos resultados. En Espaa en el Centrode investigaciones Energticas, Medioambientales y Tecnolgicas, CIEMAT, Oliva (2003) se optimiz la explosin por vapor de bioma -s a d e m a d e r a c h o p o sobre K l u y v e r o m y c e s marxianus en un proceso de sacari cacin y fermentacin simultneas, con distintos tra tamientos de destoxi cacin: neutralizacin, evaporacin, procesos de oxidacin avanzaday aplicacin de zeolitas. En Suecia, Lindstedt (2003) reporta el montaje de una planta piloto

para obtener etanol a partir de residuos de lamadera. Se desarroll una hidrlisis cida con c i d o s u l f r i c o y d i x i d o d e a z u f r e e n d o s e t a p a s s e g u i d a d e u n a e t a p a p a r a h i d r l i s i s enzimtica. En Estados Unidos, Zhang, et al . (2007) usaron cido fosfrico concentrado como solvente no voltil para la celulosa, unsolvente orgnico altamente voltil (acetona) y agua. Durante el fraccionamiento se logrseparar cido actico, lignina, hemicelulosay celulosa amorfa, la cual fue hidrolizada aglucosa y fermentada hasta etanol. En Mxico,Garca, et al . (2005) en la Universidad de Que -rtaro, investigaron la hidrlisis de derivadosde la industria papelera, residuos agrcolas, y municipales con nes de obtener etanol. Como resultados han logrado el diseo y montaje deun reactor para la hidrlisis de estos residuos. En Venezuela, Aguilar & Canizales (2005) de laUniversidad Veracruzana lograron la obtencin de azcares fermentables a partir de residuos l i g n o c e l u l s i c o s d e l a i n d u s t r i a c e r v e c e r a mediante hidrlisis cida y desarrollaron unmodelo cintico. En la Universidad de Zuila (Venezuela), Ferrer, et al . (2002) han estudiado la cintica de la hidrlisis cida del bagacillo decaa para obtener azcares reductores. El mejor resultado se consigui con cido sulfrico al 6% y 4 horas de reaccin. Adicionalmente, han realizado la hidrlisis cida de la pulpa de cafcon cido sulfrico. A nivel nacional se destaca que en Bogot, Urbaneja, et al . (1997), en la Universidad Nacional de Colombia, se realiz a escala pi -loto la hidrlisis cida del bagazo de la caade azcar con cido sulfrico, se analizaronv a r i a b l e s c o m o p o r c e n t a j e d e s l i d o s e n e l bagazo, temperatura y tiempo de reaccin y se obtuvieron los mejores resultados a 50C y bajos porcentajes de slidos. En Medelln, en la Universidad EAFIT, Meja et al. (2007) reportan la hidrlisis cida y enzimtica a re si-duos del mango comn, se obtuvieron mejoresresultados con la hidrlisis cida usando cido sulfrico en proporcin de 0.5%. En la Univer

sidad Nacional de Colombia, Monsalve, et al . (2006) obtuvieron etanol a partir de cscaras de banano y almidn de yuca mediante hidrlisiscida con cido sulfrico y fermentacin con Saccharomyces cerevisiae y Zymomonas mo -bilis . Se obtuvieron concentraciones cercanasal 8% de etanol. Metodologa Materias primas usadas La naranja (Citrus sinensis) e s u n a e s p e c i e subtropical y en Colombia se destina exclusi-vamente al mercado en fresco. En la ciudad deCartagena de Indias (Colombia), las cscaras denaranja son desechadas en grandes cantidadesen hoteles, restaurantes y ventas estacionarias de jugos. A su vez, en el departamento de Bo -lvar (Colombia), existen dos despulpadoras de frutas y una industria de vino de naranja, quedentro de los residuos que generan, se incluyen las cscaras de naranja. Por su parte la pia (Anans sativus) es el fruto tropical mejor posicionado ya que su comercializacin se orienta a los principales pases desarrollados. La com-posicin en porcentaje de una pia tpica de lavariedad Cayena lisa es: Pulpa (33%), corazn(6%), cscara (41%) y corona (20%). Al igualq u e l a s cscaras de naranja, las cscaras de pia son desechadas en hoteles, restaurantes ydespulpadoras de frutas. Caracterizacin del material L a s m a t e r i a s p r i m a s f u e r o n c a r a c t e r i z a d a s para determinar el porcentaje de humedad yde azucares reductores presentes; para ello se realiz el mtodo bsico reportado por Acosta(2007) para la humedad y mtodo volumtricode Fehling para la determinacin de hidratos de carbono. Eliminacin de Lignina La cscaras de pia y naranja se redujeron a un tamao de partcula aproximado de 2.0 mm, teniendo presente la separacin de los restos de pulpa. Se pesaron muestras de 50 gr y se realiz la eliminacin de lignina, sumer giendo las muestras en una solucin de NaOH 0 . 1 N d u r a n t e 1 5 minutos. Posteriormente se adicion sulfato de calcio y se dej en repo -

so por 3 horas de acuerdo a lo reportado por Hoyos & Prez (2005). Por ltimo, se separ e l m a t e r i a l p a r t i c u l a d o d e l a s o l u c i n p o r decantacin. Hidrlisis La hidrlisis cida se llev a cabo, adicionando 50 ml de cido sulfrico al 5% por cada 100 gramos de cscara de fruta, a una temperaturade 125C y 15 psi, regulada por medio de unautoclave, durante 15 minutos, como lo repor tan Sun & Cheng (2002). Luego los jarabes obtenidos se separaron de los componentes que precipitaron, por centrifugacin. Se deter -min el contenido de azcares en los jarabesobtenidos. Fermentacin Despus de la hidrlisis, se ajust el pH a 4,5 5,0 con NaOH 5 N, y como nutrientes s e u t i l i z 0 , 2 5 % d e f o s f a t o ( N H 4 ) 3 P O 4 , nitrgeno y se inocul con 0,1 % P/V de le -vadura activa seca comercial (Saccharomycesc e r e v i s i a e ) disuelta en un poco del jarabe como lo reportan Cuadrado & Vlez (2006). La fermentacin se realiz en erlenmeyers de 250 ml, con un volumen efectivo de trabajode aproximadamente 50 ml en anaerobiosisa 3 0 C y 2 0 0 r p m , e n a g i t a d o r e s o r b i t a l e s Nouva II, por 5 horas, segn Ruz & Arias (1997), controlando el pH y la temperatura d e l a f e r m e n t a c i n alcohlica. Se tomaron muestras cada 90 minutos durante 7 horas y posteriormente a las 24 horas. Destilacin simple El proceso se llev a cabo calentando hasta 100C en un bao mara la solucin contenida en un picnmetro conectado a un condensa -dor. El proceso completo se describe en la grfica 1

Resultados y discusin La caracterizacin de las cscaras de pia y na-ranja se reporta en la tabla 1. De acuerdo con las determinaciones realizadas, la cascara de naranja presentaron menor contenido de humedad y mayor contenido de azcares reductores, por lo tanto se explica que durante la hidrlisis cida se obtuviera un jarabe glucosado con mayor contenido de azcares, 80 g/l comparado con las cscaras de piaque alcanzaron una concentracin de 45 g/l. En el estudio de la hidrlisis cida con cscarasde banano, Monsalve, et al . (2006), bajo las mismas condiciones de estudio se reportaron jarabes con contenido de azcares de 20 g/l, en comparacin, las cscaras de pia y naranjaofrecen mejor resultado.Durante la fermentacin de los jarabes glucosa-dos se realiz la determinacin de los porcentajesde etanol por cromatografa de gases a diferentesintervalos de tiempo, como se muestra en la gr ca 2. Se observa una mayor produccin de etanol para las cscaras de naranja con respecto alas cscaras de pia en un tiempo de 24 horas. Lafermentacin de las cscaras de pia se completen 5 horas aproximadamente.

Grafica 2 seguimiento de la dermentacion

L a d e t e r m i n a c i n f i n a l d e e t a n o l y m e t a n o l obtenido se muestra en la Tabla 2. El contenido de etanol fue considerablemente mayor que conlas cscaras de pia. Adicionalmente, con las cscaras de naranja, no se obtuvo metanol, lo cual es ventajoso porque disminuye los costos de separacin. Al realizar el balance de masa, se estableci que la produccin de etanol a partir de cscarasde frutas es de poco rendimiento debido a quese requieren grandes pesos de estos residuos. A partir de las cscaras de naranja se obtuvo 8,4mg de etanol por cada gramo de cscaras y a partir de las de pia, 1,0 mg de etanol por cada gramo de cscaras. Conclusiones Se pudo observar que las cscaras de naranja son las de mejor comportamiento; poseen unmayor porcentaje de azcares reductores y por consiguiente sus jarabes glucosados produjeronmayor contenido de etanol.E l r e n d i m i e n t o e n l a o b t e n c i n d e e t a n o l a partir de cscaras de pia y naranja es bajo, sin embargo, teniendo en cuenta que las cscaras son un residuo no aprovechado y de alta pro-duccin en los sectores hotelero e industrial, agran escala puede constituirse en una alternativade inters.