AMOXILINA

UNIVERSIDAD DE CHILE
FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS Y FARMACUTICAS

Departamento de Ciencias y Tecnologa Farmacutica
EVALUACIN DEL MEDIO DE DISOLUCIN SOBRE LAS CINTICAS DE

DISOLUCIN DE COMPRIMIDOS DE AMOXICILINA 500 MG
Memoria para optar al Ttulo de Qumico Farmacutico de la Universidad de Chile.

Juan Alejandro Castro Gutirrez
Profesora Patrocinante:
Directora de Tesis
Dra. Mara Nella Gai Hernndez
Dra. Mara Nella Gai Hernndez
Depto. de Ciencias y Tecnologa Farmacutica
Santiago, Chile
2008
Dios,concdeme
Serenidad
paraaceptarlascosas
quenopuedocambiar
Valor
paracambiar
aquellasquepuedo,
ySabidura
parareconocer
ladiferencia
entreestasdoscosas
Amimadre
AGRADECIMIENTOS
A la Profesora Mara Nella Gai por su gua, consejos, apoyo y paciencia, y por sobre
todo permitirme la oportunidad de realizar este trabajo bajo su tutela. Al Cuerpo Docente del
Laboratorio de Tecnologa Farmacutica por su disponibilidad frente a las consultas, dudas,
inquietudes y problemas que se fueron presentando a lo largo del desarrollo de este trabajo. Al
Equipo Tcnico del Laboratorio por su ayuda, colaboracin en las diversas tareas de la
investigacin y por hacer las jornadas de trabajo ms amenas.
A mi Madre por su constante apoyo y gua, sin importar las circunstancias. Por
animarme a seguir adelante sin importar los obstculos del camino. Por su formacin y por los
valores que me enseo y reforz ao tras ao, cosas que han hecho de mi el hombre que soy y el
futuro profesional en que me convertir.
A la mujer que llevo en mi corazn, Francisca, por su apoyo en el termin de mi carrera,
por su ayuda en el desarrollo de este estudio y por estar siempre cuando la necesite tanto en los
profesional como en lo sentimental.
A mis amigos particularmente: Maximiliano, Alejandra, Mariela y Viviana, quienes
fueron un apoyo constante a lo largo de la carrera, ya que siempre han estado para prestar ayuda
tanto en lo acadmico como en lo personal.
iii
NDICE
AGRADECIMIENTOS .............................................................................................................. iii

NDICE ........................................................................................................................................ iv
NDICE DE TABLAS Y FIGURAS ......................................................................................... vii
RESUMEN .................................................................................................................................. ix
SUMMARY .................................................................................................................................. x
1. INTRODUCCIN ............................................................................................................... 1
2. OBJETIVO ........................................................................................................................... 2
2.1. Objetivos generales........................................................................................................2
2.2.
3.
4.
5.
6.
Objetivos especficos.....................................................................................................2
HIPTESIS .......................................................................................................................... 3
METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN ................................................................. 4
4.1. Caracterizacin de los productos...................................................................................4
4.2.
Validacin de las metodologas analticas empleadas...................................................4
4.3.
Cinticas de Disolucin.................................................................................................4
4.4.
Evaluacin de los datos obtenidos.................................................................................4
MATERIALES ..................................................................................................................... 5
5.1. Materias..........................................................................................................................5
5.2.
Equipos..........................................................................................................................5
5.3.
Reactivos........................................................................................................................6
METODOLOGA ................................................................................................................ 8
6.1. Validaciones...................................................................................................................8
6.2.
Caracterizacin de los comprimidos............................................................................10
6.2.1.
Identificacin de amoxicilina...............................................................................10
6.2.2.
Valoracin............................................................................................................11
6.2.3.
Uniformidad de contenido (13)..............................................................................12
6.2.4.
Test de disolucin (13)...........................................................................................13
6.2.5.
Cinticas de disolucin........................................................................................14
6.3.
Desaireacin del agua para pruebas de disolucin.......................................................16

iv
6.4.
7.
Caracterizacindelosmediosdedisolucin...............................................................16
RESULTADOS .................................................................................................................. 18
7.1. Validacin de las metodologas...................................................................................18
7.1.1.
Cromatografa lquida de alta resolucin.............................................................18
7.1.1.1.
Exactitud y precisin........................................................................................18
7.1.1.2.
Especificidad....................................................................................................19
7.1.1.3.
Linealidad y rango...........................................................................................20
7.1.2.
Espectrofotmetro UV.........................................................................................21
7.1.2.1.
Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2........................................21
7.1.2.1.1.
7.1.2.1.2.
7.1.2.2.
Medio buffer pH 4,5.........................................................................................24
7.1.2.2.1.
7.1.2.2.2.
7.1.2.3.
Medio buffer pH 6,8.........................................................................................26
7.1.2.3.1.
7.1.2.3.2.
7.1.2.4.
Medio agua.......................................................................................................29
7.1.2.4.1.
7.1.2.4.2.
7.1.2.5.
Medio pH 2,5 y Fuerza Inica 0,100................................................................31
7.1.2.5.1.
7.1.2.5.2.
7.1.2.6.
Medio pH 7,1...................................................................................................34
7.1.2.6.1.
7.1.2.6.2.
7.1.2.7.
Medio pH 7,1 y fuerza inica 0,140.................................................................36
7.1.2.7.1.
7.1.2.7.2.
7.2.
Caracterizacin de los comprimidos............................................................................38

v
7.3.
Identificacin...............................................................................................................39
7.4.
Valoracin....................................................................................................................40
7.5.
Uniformidaddecontenido...........................................................................................41
7.6.
Pruebadedisolucin....................................................................................................41
7.7.
Cinticas.......................................................................................................................43
7.7.1.
Caractersticas de los medios en estudio..............................................................43
7.7.2.
Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2............................................44
7.7.3.
Medio buffer 4,5..................................................................................................45
7.7.4.
Medio buffer 6,8..................................................................................................46
7.7.5.
Medio agua...........................................................................................................47
7.7.6.
Medio pH 2,5 y fuerza inica 0,100.....................................................................48
7.7.7.
Medio buffer pH 7,1.............................................................................................49
7.7.8.
Medio buffer pH 7,1 y fuerza inica 0,139..........................................................50
7.7.9.
Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoval........................................51
7.7.10.
Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxipenil..................................51
7.7.11.
Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxicilina L.Ch........................52
7.7.12.
Factor de similitud...............................................................................................52
8. DISCUSIONES .................................................................................................................. 53
9. CONCLUSIONES.............................................................................................................. 55
10.
BIBLIOGRAFA............................................................................................................ 56
ABREVIATURAS...................................................................................................................... 58
vi
NDICE DE TABLAS Y FIGURAS

TABLA1:Caractersticasaevaluarsegntipodeprocedimientoanaltico...............................................8
TABLA2:Criteriosdeaceptacinparapruebadedisolucin................................................................14
TABLA3:Caractersticasdelosproductosenestudio...........................................................................39
TABLA4:Rfdelacromatografaencapafina.....................................................................................40
TABLA5:ExactitudyprecisinHPLC...................................................................................................18
TABLA6:LinealidadHPLC...................................................................................................................20
TABLA7:ExactitudyprecisinmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2..............................21
TABLA8:LinealidadespectrofotmetromediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2................23
TABLA9:ExactitudyprecisinmediobufferpH4,5............................................................................24
TABLA10:LinealidadmediobufferpH4,5..........................................................................................25
TABLA11:ExactitudyprecisinmediobufferpH6,8..........................................................................26
TABLA12:LinealidadmediobufferpH6,8..........................................................................................28
TABLA13:Exactitudyprecisinmedioagua......................................................................................29
TABLA14:Linealidadmedioagua......................................................................................................30
TABLA15:ExactitudyprecisinmediopH2,5yfuerzainica0,100....................................................31
TABLA16:LinealidadmediopH2,5yfuerzainica0,100....................................................................33
TABLA17:ExactitudyprecisinmediopH7,1....................................................................................34
TABLA18:LinealidadmediopH7,1....................................................................................................35
TABLA19:ExactitudyprecisinmediopH7,1yfuerzainica0,140....................................................36
TABLA20:LinealidadmediopH7,1yfuerzainica0,139....................................................................38
TABLA21:Valoracincomprimidos....................................................................................................40
TABLA22:PruebadisolucinS1..........................................................................................................41
TABLA23:PruebadisolucinAmoxipenil(Bag)................................................................................42
TABLA24:Caractersticasdelosmediosenestudio............................................................................43
TABLA25:PorcentajededisolucinenmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2.................44
TABLA26:Porcentajesdedisolucinenmediobuffer4,5...................................................................45
TABLA27:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH6,8.............................................................46
TABLA28:Porcentajesdedisolucinenmedioagua..........................................................................47
TABLA29:PorcentajesdedisolucinenmediopH2,5yfuerzainica0,100.......................................48
TABLA30:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH7,1.............................................................49
TABLA31:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH7,1yfuerzainica0,139.............................50
TABLA32:Factordesimilitud(referenciaAmoval).............................................................................52
FIGURA1:Amoxicilinatrihidrato(13).....................................................................................................2
FIGURA2:DegradacindeamoxicilinaenfuncindelpH(9).................................................................2
FIGURA3:CurvadesolubilidaddeamoxicilinaenfuncindelpH(9).....................................................2
FIGURA4:Solubilidadenfuncindelafuerzainica............................................................................2
FIGURA5:Esquemapaletaaparato2USP..........................................................................................13
vii
FIGURA6:IdentificacinporTLC........................................................................................................39
FIGURA7:LinealidadHPLC.................................................................................................................20
FIGURA8:CurvadecalibracinmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2............................22
FIGURA9:CurvadecalibracinmediobufferpH4,5..........................................................................25
FIGURA10:CurvadecalibracinmediobufferpH6,8........................................................................27
FIGURA11:Curvadecalibracinmedioagua.....................................................................................30
FIGURA12:CurvadecalibracinmediopH2,5yfuerzainica0,100..................................................32
FIGURA13:CurvadecalibracinmediobufferpH7,1........................................................................35
FIGURA14:CurvadecalibracinmediopH7,1yfuerzainica0,139..................................................37
FIGURA15:PerfildedisolucinmediofluidogstricosinenzimaspH1,2...........................................44
FIGURA16:Perfildedisolucinmediobuffer4,5...............................................................................45
FIGURA17:PerfildedisolucinmediobufferpH6,8..........................................................................46
FIGURA18:Perfildedisolucinmedioagua.......................................................................................47
FIGURA19:PerfildedisolucinmediopH2,5yfuerzainica0,100....................................................48
FIGURA20:PerfildedisolucinmediobufferpH7,1..........................................................................49
FIGURA21:PerfildedisolucinmediopH7,1yfuerzainica0,139....................................................50
FIGURA22:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoval.................................................51
FIGURA23:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoxipenil...........................................51
FIGURA24:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoxicilinaL.Ch....................................52
viii
RESUMEN
Los estudios de bioequivalencia in vitro se deben realizar en 3 medios de disolucin

establecidos en la gua tcnica respectiva que simulan las condiciones de pH que se espera
encontrar desde el estmago hasta la parte media del yeyuno. Segn literatura estas condiciones
no serian las ms cercanas a las determinadas in vivo.
Este trabajo consisti en la evaluacin de 3 medios experimentales en comparacin con
los medios oficiales. Para esto se evaluaron los perfiles de disolucin de un frmaco de clase 1
segn el Sistema de Clasificacin Biofarmacutica. Los medios experimentales fueron diseados
ajustando dos factores fundamentales como son el pH y fuerza inica para as asemejarse ms a
las condiciones fisiolgicas.
La amoxicilina trihidrato fue el frmaco elegido para este estudio ya que es un
antibitico de amplio espectro muy empleado por la comunidad mdica. Se eligieron 3 productos
de distintos laboratorios: Amoval, Amoxipenil, Amoxicilina L. Ch., tomando como referencia el
producto Amoval.
Antes de comenzar con el anlisis de los medios, se realiz la validacin de la
metodologa para los controles oficiales de la USP 30 y cuantificacin de perfiles de disolucin
de los comprimidos a utilizados, mediante los criterios estipulados en la USP 30, ICH Q2B y de
la gua tcnica G-BIOF 02.
La valoracin y uniformidad de contenido fueron realizadas a travs de la tcnica de
cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC). Todos los comprimidos en estudio estuvieron
dentro de los rangos estipulados. El test de disolucin junto con los perfiles de disolucin, fueron
cuantificados a travs de espectrofotometra UV-VIS. El producto Amoxipenil no paso el test de
disolucin, no as el resto de los productos analizados.
Los perfiles de disolucin de todos los medios en estudio, fueron comparados a travs de
un modelo independiente, factor de similitud (f2). Ninguno de los productos comparados resulto
ser equivalente con el de referencia. Encontrndose diferencias entre los medios experimentales
y los oficiales.
ix
SUMMARY
The in vitro bioequivalence studies must be done in 3 dissolution media set in the
respective technical guide to simulate the conditions of pH which is expected to find from the
stomach until the middle of the jejunum. According to literature these conditions would not be
the closest to those identified in vivo.
This work involved the evaluation of 3 experimental media compared with the officials.
For this is evaluated the profiles of dissolution of a drug class 1 according to the
Biopharmaceutics Classification System. The experimental solutions were designed by adjusting
two fundamental factors such as pH and ionic strength so as to resemble more physiological
conditions.
Amoxycillin trihydrate was chosen for this study because it is a broad-spectrum
antibiotic very used by the medical community. Three products were chosen from different
laboratories: Amoval, Amoxipenil, Amoxicilina L. Ch., taking Amoval as reference product.
Before starting with the solutions analysis were conducted to validate the methodology
for official controls of the USP 30 and quantification of profiles of dissolution of the tablets used
to, using the criteria set in the USP 30, ICH Q2B and technical guide G-BIOF 02.
Assay and uniformity of content were made through the technique of high-performance
liquid chromatography (HPLC). All tablets in the study were within the ranges set. Test of
dissolution
along
with
the
profiles
of
dissolution,
were
quantified
by
UV-VIS
spectrophotometer. The product Amoxipenil not pass the test of dissolution, but not the rest of
the products tested.
The dissolution profiles of all media in the study were compared using a model
independent factor of similarity (f2). None of the products compared turned out to be equivalent
with the reference. Differences were found between the experimental and officials media.
xi
1. INTRODUCCIN
El proceso de absorcin es influido por muchos factores biolgicos y fisicoqumicos; de

estos ltimos, los ms importantes, que afectan tanto a la extensin como a la velocidad de
absorcin, son lipofilicidad y solubilidad del frmaco, y su velocidad de liberacin desde la
forma farmacutica (7).
La combinacin de frmaco y excipientes conjuntamente con las tecnologas empleadas
para la obtencin de formas farmacuticas slidas, contribuyen a que la liberacin de los
principios activos a veces no sea tan rpida o completa como se espera
(12)
, afectando as a su
biodisponibilidad, definida como la fraccin de la dosis de un medicamento que alcanza el sitio

de accin y que se relaciona tanto con la cuanta como con la velocidad a la que ocurre este
proceso (7, 10).
Chile est entrando en el proceso de exigir estudios de bioequivalencia para los
productos comercializados en el pas, para as garantizar su intercambiabilidad. Dentro de estos
medicamentos, existen 27 que pueden optar a una bioexencin
(11)
, prerrogativa de la autoridad
regulatoria para eximir de la obligacin de tener que presentar estudios in vivo para el
establecimiento de la equivalencia teraputica, la cual puede demostrarse mediante estudios in
vitro
(10)
. La disolucin in vitro es la prueba fisicoqumica ms usada para estimar la liberacin
del principio activo y puede ser empleada tanto para evaluar variabilidad interlotes, como para
predecir biodisponibilidad y establecer bioequivalencia (1).
Dentro de la lista de los 27 frmacos que pueden optar a bioexencin, solo existen 3
antibiticos, frmacos de alta importancia en el tratamiento de diversas infecciones:
Amoxicilina: aminopenicilina de amplio espectro (3, 14)
Cloxacilina sdica: penicilina resistente a -lactamasas (3).
Eritromicina: Macrolido utilizado como alternativa en caso de alergia las penicilinas (3).

FIGURA1:Amoxicilinatrihidrato(13)
La amoxicilina es un antibitico betalactamico de amplio uso en la prctica mdica,

odontolgica y veterinaria
(9)
. Es una penicilina semisinttica, sensible a penicilinasa, de
administracin oral dado que a diferencia de otras penicilinas resiste mejor el medio cido (3, 14).
De accin bactericida, inhibe la divisin celular y el crecimiento, produce lisis y elongacin de
las bacterias sensibles, en particular en las de rpida divisin (3). Posee una unin a protenas del
20% y vida media de 60 a 75 minutos
(2, 3)
. A diferencia de la cloxacilina, puede atravesar la
barrera cefalorraqudea, alcanzando concentraciones de 5 10% de la concentracin plasmtica.

Otra diferencia es que para infecciones causadas por cocos, bacilos, anaerobios, enterobacterias
y pseudomonas posee una concentracin mnima inhibitoria, en la mayora de los casos, menor a
la de la cloxacilina. El uso de la eritromicina est restringido a un escaso nmero de infecciones,
siendo su uso principal como alternativa a las penicilinas, especialmente en pacientes alrgicos a
ellas (3).
Es una molcula anfotrica
(14)
, posee tres pKa: 2,4; 7,4 y 9,6.
(2)
. Estudios previos han
establecido que la degradacin tienen un orden cintico de primer orden y la curva de

solubilidad en funcin del pH tiene forma de U, aumentando su solubilidad hacia pH cido y
neutro y que la fuerza inica del medio no afecta su solubilidad (14). Pertenece a la clase I (alta
solubilidad y permeabilidad) en el Sistema de Clasificacin Biofarmacutica, justificndose as
la realizacin de bioequivalencia por medio de perfiles de disolucin (9).
FIGURA2:Degradacindeamoxicilinaenfuncindel
pH(9)
FIGURA 3: Curva de solubilidad de amoxicilina en

funcindelpH(9)
FIGURA4:Solubilidadenfuncindelafuerzainica
Con estos ensayos in vitro se introduce la duda de si los medios que se proponen en la
literatura oficial, son realmente los ms representativos para simular la situacin que ocurre in
vivo. La disolucin del medicamento para su posterior absorcin depende de varios factores y
no solo del pH del medio, es por eso que en algunos ensayos de disolucin, los resultados in
vitro difieren considerablemente de los resultados obtenidos in vivo
(1, 8)
. En consecuencia,
una evaluacin de distintos medios que se asemejen a las condiciones fisiolgicas, comparados
con los medios de disolucin descritos en las farmacopeas, sobre las caractersticas de disolucin
de estos productos que pueden optar a la bioexencin, es necesaria y puede generar informacin
relevante para apoyar los ensayos para establecer la bioequivalencia in vitro.
2. OBJETIVO
2.1. Objetivos generales

Evaluar la influencia de la composicin del medio de disolucin sobre comprimidos de
Amoxicilina
2.2. Objetivos especficos
Validar la metodologa analtica ocupada para los ensayos.
Evaluar 3 productos de Amoxicilina 500 mg comprimidos, elaborados por diferentes

laboratorios, con las normas y requisitos que establece la USP 30.
Comparar las cinticas de disolucin obtenidas con los medios estipulados tanto en la Gua
Tcnica G-BIOF 02
(6)
y la Norma Chilena
(10)
con medios fisiolgicamente ms cercanos a
los medios gastrointestinales.
Establecer las diferencias y semejanzas de los productos de los diferentes laboratorios en los
medios en estudio.
3. HIPTESIS
La composicin de los medios de disolucin puede afectar la forma en la que se libera y

disuelve el principio activo desde una forma farmacutica slida. Por lo tanto, medios diseados
que se acerquen ms a las condiciones fisiolgicas arrojaran resultados distintos a los obtenidos
con los medios especificados en normas regulatorias para estos estudios (10).
4. METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
4.1. Caracterizacin de los productos
Descripcin del producto: color, forma. Caractersticas del comprimido: recubrimiento,

ranurado, etc.
Segn USP 30 se establecer: identificacin, valoracin, uniformidad de contenido y

ensayo de disolucin.
4.2. Validacin de las metodologas analticas empleadas
Se establecer: linealidad, exactitud y precisin segn lo establecido en la Gua ICH-Q2A

(5)
4.3. Cinticas de Disolucin
Durante la disolucin de los comprimidos en los distintos medios se irn tomando muestras
para establecer la cintica del proceso.
4.4. Evaluacin de los datos obtenidos
Se compararn las curvas obtenidas en las cinticas y se establecern las similitudes y

diferencias encontradas entre los distintos laboratorios y medios. Se utilizar el factor de
similitud f2 como medida de comparacin.
5. MATERIALES
5.1. Materias
Material de vidrio clase A de uso comn en el laboratorio
Micropipeta Labopette, Hirschmann Laborgerate, 100 1000 L
Filtros:
Papel filtro: Advantec, grado n 5A, tamao 9,0cm
Membrana GV (Durapore) EM PVDF; 0,22 m de poro, 13 mm de dimetro, hidroflica,

branca, lisa, 100/CX. Millipore
Porta filtro Sweenex Millipore
Jeringas plsticas de 10mL
Mortero y pistilo
Cubetas de cuarzo, cualidad 2, tipo 1, material Q, de 1 cm.
Parafilm M, Laboratory film, Pechiney Plastic Packaging
Termmetro
Cronmetro
5.2. Equipos
Equipo de disolucin USP, aparato 2, Hanson Research Corp.:
Cromatgrafo HPLC
9 Bomba Merk-Hitachi, modelo L-6200
9 Detector UV Vis: Merck-Hitachi, modelo L-4250
9 Interface Merck-Hitachi, modelo D-6000A
9 Muestreador Merck-Hitachi, modelo LaChrom L-7250
9 Software para integracin HMS versin 4.0
Columna Symmetry C18, 4,6 x 250 mm, 5m, Waters
Balanza analtica Denwer Instrument
Estufa Memmert
Espectrofotmetro Spectronic Genesys 5, Miltonroy Company
pH metro Model PH5J-3I
Bidestilador de cuarzo
Bomba de vacio Millipore, modelo XX5522050, N de serie 0295
Bao termorregulador Bchi, Laboratoriums Technik AG.
5.3. Reactivos
Estndar secundario de Trihidrato de Amoxicilina

9 N de anlisis:
11041
9 Valoracin
98,6% base seca
9 Contenido de agua:
12,9%
9 Vencimiento:
02/2010
cido Clorhdrico p.a., Merck (10 N)
Solucin Titrisol NaOH 0,5N Merck
Metanol p.a. Merck
Cloroformo p.a. Merck
Agua destilada (produccin propia de la Facultad)
Agua desaireada
Piridina p.a. Merck
Hidrxido de potasio p.a. Merck ( 85,0%)
Fosfato monobsico de potasio p.a. Merck ( 99,5%)
Acetato de sodio p.a. Winkler (99,5%)
cido actico glacial p.a. Merck
Cloruro de sodio p.a. Merck ( 99,5%)
Cloruro de potasio p.a. Merck (99,5%)
Fenolftalena, Mallinckrodt
6
Hidrxido de Sodio en lentejas p.a. Merck (> 99%)
Acetonitrilo HPLC Merck
6. METODOLOGA
6.1. Validaciones
Segn lo establecido por la ICH (5), los parmetros a determinar segn el tipo de anlisis
son:
TABLA1:Caractersticasaevaluarsegntipodeprocedimientoanaltico
Tipo de procedimiento analtico
Identificacin
Ensayo
Disolucin (solamente medicin)
Contenido/ Potencia
Repetitividad
Especificidad
Linealidad
Rango
Exactitud
Precisin
Significa que esta caracterstica analtica no es normalmente evaluado
Significa que esta caracterstica analtica es normalmente evaluado
Exactitud: es la expresin de la cercana entre el valor aceptado como verdadero y el valor

encontrado (5). Se establece usando un mnimo 3 concentraciones (representativas del rango
de trabajo) midindolas por triplicado. El resultado se informa como el porcentaje de
recuperacin
(4)
y debe encontrarse dentro del rango 95 105% y un coeficiente de
variacin igual o menor al 2%(6).
Precisin: es la expresin de la cercana entre una serie de mediciones obtenidas de una

misma muestra homognea. La cual se expresa mediante desviacin estndar y/o
coeficiente de variacin de una serie de mediciones. Para el caso de esta investigacin se
determinar la repetitividad, que es la expresin de la precisin bajo las mismas condiciones
de operacin en un corto periodo de tiempo, determinndose as la precisin intra-ensayo (5).

La determinacin se realiza con un mnimo de 3 concentraciones, midindose por triplicado
cada una de ella. La eleccin de las muestra debe asegurar la representacin del rango de
trabajo
(4)
. Como criterio de aceptacin el coeficiente de variacin debe ser no mayor al
(6)
2% .
Especificidad: es la habilidad de inequvocamente evaluar el analito presente de

componente que pueden ser esperados en la muestra
(5)
. Se procede a comparar los
(4)
resultados de la muestra con los de un patrn .
Linealidad: es la habilidad de obtener resultados directamente proporcionales a la

concentracin (cantidad) de analito en la muestra
(5)
. Se debe evaluar por lo menos dentro
del rango del procedimiento analtico a validar. La determinacin se realiza directamente de

la droga, por dilucin de una solucin estndar. Realizando la evaluacin de la linealidad
mediante una regresin lineal entre la concentracin de las muestras y las lecturas del
equipo correspondiente, utilizndose como parmetro el coeficiente de correlacin (r) o el
coeficiente de determinacin (r)
menos 5 concentraciones
(4)
(4, 6)
. Para establecer la linealidad se deben tomar a lo
. Se aceptar la linealidad si el coeficiente de determinacin es
mayor o igual a 0,98 (6). Adicionalmente, se calcularn los factores de respuesta.
Rango: es el intervalo entre la mayor y menor concentracin del analito en la muestra donde
se ha demostrado precisin, exactitud y linealidad
(5)
. Se determina segn las
concentraciones que demuestren un grado aceptable de linealidad, exactitud y precisin en

los extremos del rango especificado del procedimiento analtico. El rango a demostrar
depender del estudio que se desee realizar, siendo los siguientes los extremos mnimos a
evaluar (4):
o Ensayos de productos terminados: normalmente desde un 80 a un 120% de la
concentracin de la muestra.
o Test de disolucin: 20% del rango en estudio.
6.2. Caracterizacin de los comprimidos

6.2.1. Identificacin de amoxicilina
Objetivo: Este ensayo est destinado a asegurar la identidad del analito en la muestra,
normalmente mediante la comparacin de una propiedad entre sta y una referencia estndar (5).
Mtodo analtico: Segn lo descrito en la USP 30 para la identificacin de amoxicilina en
comprimidos se emple cromatografa en capa fina.
Soluciones: Las soluciones deben ser usadas dentro de los 10 minutos desde su preparacin (13).
Solucin de Referencia:
Pesar una cantidad tal de amoxicilina estndar para obtener una

solucin final que contenga aproximadamente 4 mg/mL en cido
clorhdrico 0,1N.
Soluciones de Prueba:
A una porcin de tabletas pulverizadas de cada laboratorio agregar

cido clorhdrico 0,1N para obtener una solucin que contenga
aproximadamente 4 mg/mL.
Sistema cromatogrfico:
Fase mvil:
Mezcla de metanol, cloroformo, agua y piridina (90:80:30:10) (13)
Fase estacionaria:
Placa recubierta con capa de gel de slice (13).
Volumen de Aplicacin:
Aproximadamente 10 gotas, aplicadas con pipeta pasteur.
Procedimiento: La aplicacin de las muestras se realiz en una lnea paralela al borde inferior
(aproximadamente a 2 cm.). Tanto la solucin de estndar como de los productos en estudio,
deben ser preparadas con el mismo disolvente y a la misma concentracin estimada. La placa
debe secarse con ayuda de una corriente de aire tibio entre las aplicaciones. Para revelar la
10
ubicacin de las muestras se emplea una solucin de ninhidrina en alcohol que contenga 3
mg/mL y secado a 110 durante 15 minutos (13).
Mediante inspeccin visual se procedi a verificar que las muestras concordasen con el
estndar y como parmetro objetivo se calcul la contante Rf, definida como el cociente entre la
distancia recorrida desde el origen por la muestra y la distancia recorrida desde el origen por el
frente de la fase mvil.
6.2.2. Valoracin
La determinacin de la cantidad de Amoxicilina por comprimido se deber realizar por
HPLC.
Soluciones
Buffer fosfato pH 5:
Para la preparacin se deben disolver 13.6 g de fosfato monobsico

de potasio en 2000 mL de agua y ajustar con una solucin de
hidrxido de potasio al 45% (p/p) a pH 5.0 0.1 (13)
Solucin de Referencia:
Se pes una cantidad tal de amoxicilina estndar para obtener una

solucin final que contenga aproximadamente 1 mg/mL de buffer
fosfato (13).
Soluciones de Prueba:
A una porcin de 10 tabletas pulverizadas de cada laboratorio

exactamente pesada se agreg buffer fosfato para obtener una
solucin que contenga aproximadamente 1 mg/mL.
Sistema cromatogrfico (13).

Fase mvil:
Buffer fosfato y acetonitrilo en una proporcin 96/4 (mezcla filtrada por

filtros dimetro 0,22 m.
Fase estacionaria:
Columna C18.
Flujo de la fase mvil: 1,5 mL/minuto.

11
Detector:
230 m.
Volumen de inyeccin: 10 L de las soluciones a analizar

Criterio de aceptacin: los comprimidos de amoxicilina contienen no menos de 90.0% y no ms
de 120.0% de la cantidad declara de Amoxicilina (C16H19N3O5S)
6.2.3. Uniformidad de contenido (13)
Segn lo establecido en la USP 30, la uniformidad de unidades de dosificacin para los
productos en estudio se realiza a travs de uniformidad de contenido por tratarse de tabletas
recubiertas (recubrimiento no pelicular), contener ms de 25 mg de amoxicilina y ser esta ms
del 25% del peso total. Se realiza mediante la valoracin individual de 10 unidades. Para
determinar el valor de aceptacin (AV) se utiliza la siguiente frmula:
AV= (M- ) +k*s
Donde:
M: valor de referencia el cual toma valores segn el .
Si
<98,5%, M=98,5
Si
>101,5%, M=101,5
Si
esta entre 98,5 y 101,5%, M=
Promedio de los contenidos individuales expresados como porcentaje de la cantidad

evaluada.
k:
Constante de aceptabilidad, la cual toma valor de 2,4 cuando n=10, siendo n el numero
de muestra.
s:
Desviacin estndar.
Como criterio de aceptacin AV < 15
12
6.2.4. Test de disolucin (13)

Medio: agua desaireada (ver 6.3); 900 mL 1% medidos entre 20 y 25C
Aparato 2:
75 rpm.
Tiempo:
30 minutos 2%
Tolerancia (Q): 75%

Especificaciones: El aparato 2 es aquel que cuenta con una
paleta como elemento agitador. Tanto el equipo de
disolucin como las paletas deben cumplir con los requisitos
estipulados en la USP 30. Tanto el aspa como el eje pueden
estar cubiertos de un material inerte, como es el caso del
equipo utilizado en este estudio. La distancia entre el fondo
interno del vaso y el aspa debe ser de 25 2 mm (para
realizar esta operacin el equipo cuenta con un dispositivo
metlico con el cual las paletas quedan dentro de esta
margen). La temperatura que debe mantener el medio al
interior de los vasos es de 37 0.5 C, al igual que el medio
FIGURA5:Esquemapaletaaparato2USP
de reposicin. El control de la temperatura se debe realizar

de forma manual. Una vez estabilizadas las condiciones del
equipo y el medio, se procede a agregar 1 unidad de dosificacin por vaso, con el espacio de
tiempo necesario para, posteriormente, poder tomar las muestras dentro del tiempo establecido.
La muestra se debe obtener de una zona intermedia entre la superficie del medio de disolucin y
la parte superior del aspa rotatoria, que no est a menos de 1 cm de la pared del vaso.
13
Una vez obtenida la muestra, filtrarla, descartando aproximadamente los 2 primeros mL

con el fin de ambientar el filtro y el embudo. Luego se procede a leerlas en espectrofotmetro a
230 m, realizando diluciones, si es necesario, con el mismo medio de disolucin para que las
lecturas estn dentro del rango de trabajo. Posteriormente se interpolan las mediciones en la
curva de calibracin correspondiente con el fin de obtener la cantidad de miligramos disueltos de
amoxicilina.
Los datos obtenidos se deben analizar segn los criterios establecidos en la Tabla de
Aceptacin. Se debe continuar efectuando las 3 etapas a menos que los resultados se ajusten a S1
o a S2 :
TABLA2:Criteriosdeaceptacinparapruebadedisolucin
Cantidad
Etapa
Criterio de Aceptacin
probada
S1
Ninguna unidad es menor de Q + 5%
S2
El promedio de 12 unidades (S1+ S2) es igual o mayor a Q, y ninguna unidad es menor de Q

15%
12
S3
El promedio de 24 unidades (S1+ S2+ S3) es igual o mayor a Q, no ms de 2 unidades son

menores de Q 15%, y ninguna unidad es menor de Q 25%
6.2.5. Cinticas de disolucin

Medios:
Fluido gstrico simulado sin enzimas, pH 1,2: pesar 4 g de cloruro de sodio, disolver con
agua desaireada, agregar 14 mL de cido clorhdrico 10N y llevar a 2 litros. La solucin
resultante deber tener un pH de 1,2 (10, 13)
Buffer acetato pH 4,5: pesar 22 g de acetato de sodio, disolver con agua desaireada, agregar
12 mL de cido actico glacial y llevar a 4 litros. La solucin resultante deber tener un pH
de 4,5 (6, 10, 13).
Buffer fosfato pH 6,8: pesar 27,2 g de fosfato monobsico de potasio y 3,6 g de hidrxido de
sodio, agregar agua desaireada hasta completar 4 litros. La solucin resultante deber tener
un pH de 6,8 (6, 10, 13).
Agua: medio compuesto slo de agua desaireada (ver 6.3)

14
Medio pH 2,5: pesar 19,2 g de cloruro de sodio y 5 g de cloruro de potasio, disolver con
agua desaireada, agregar 1,6 mL de cido clorhdrico 10N y llevar a 4 litros. La solucin
resultante deber tener un pH de 2,5 y una fuerza inica de 0,100 (8).
Buffer fosfato pH 7,1: pesar 20 g de fosfato monobsico de potasio y 3,6 g de hidrxido de

sodio, agregar agua desaireada hasta completar 4 litros. La solucin resultante deber tener
un pH de 7,1 (8).
Buffer fosfato pH 7,1: pesar 20 g de fosfato monobsico de potasio, 4 g de hidrxido de

sodio y 12,5 g de cloruro de sodio, agregar agua desaireada hasta completar 4 litros. La
solucin resultante deber tener un pH de 7,1 y una fuerza inica de 0,139 (8).
Volumen: 900 mL 1% (vlido para todos los medios anteriores)

Para todas las soluciones ajustar el pH de tal forma que tenga una aproximacin de 0,05
unidades respecto del pH deseado.
Aparato 2:
50 1 rpm.
El equipo debe cumplir con las mismas exigencias que en el test de disolucin en lo
concerniente a dimensiones, temperatura y recoleccin de las muestras.
Para establecer las cinticas de disolucin en los distintos medios, se deben analizar 12
comprimidos de cada laboratorio, en cada medio. El tiempo de muestreo se establece realizando
cinticas de pruebas con 1 comprimido de cada laboratorio. Al cabo de los tiempos especificados
se procede a extraer una muestra de 10 mL, reemplazando la alcuota extrada para el anlisis
con el mismo volumen del medio de disolucin nuevo a 37 C. Filtrar y leer las muestras en
espectrofotmetro a 230 m, si es necesario realizar diluciones con el medio de disolucin
respectivo con el objetivo de trabajar dentro del rango de la curva de calibracin.
Tratamiento de los datos: para establecer la cantidad y porcentajes de disolucin los datos se
ingresan en una tabla diseada para dicho efecto. Para comparar las diferentes condiciones
experimentales se ocupar un mtodo modelo independiente, factor de similitud (f2):
15
Donde
n:
nmero de muestras
Rt:
porcentaje promedio de lo disuelto del producto de referencia al tiempo t
Et :
porcentaje promedio de lo disuelto del producto a comparar al tiempo t
El producto que se considerar como referencia para este estudio es Amoval del
Laboratorio Saval. Para el clculo del factor de similitud se considera mximo un valor sobre el
85% disuelto y se considerar que dos perfiles de disolucin son similares y por tanto los
productos son equivalentes teraputicos cuando f2 sea mayor o igual a 50.
6.3. Desaireacin del agua para pruebas de disolucin

Se debe eliminar el aire del medio de disolucin, mediante la ebullicin sostenida del
agua durante 30 minutos y envasndola en un envase cerrado hermticamente hasta su
utilizacin para preparar los medios de disolucin. El objetivo de este procedimiento es eliminar
todas las posibles burbujas de aire las que influirn en el pH, tipo de flujo y tensin superficial
de la solucin, con una repercusin directa en la disolucin de la forma farmacutica en estudio
6.4. Caracterizacin de los medios de disolucin

Con el objetivo de evaluar la influencia del medio de disolucin en los perfiles de los
productos, se establecieron como parmetros a evaluar pH y fuerza inica (I) de las soluciones
utilizadas. El pH fue determinado a travs de un pHmetro, mientras que la fuerza inica fue
establecida mediante la siguiente ecuacin:
16
Donde:
C:
Molaridad de cada in.
Z:
Valencia
de
cada
in
17
7. RESULTADOS
7.1. Validacin de las metodologas

7.1.1. Cromatografa lquida de alta resolucin
7.1.1.1. Exactitud y precisin
A partir de una solucin madre se prepararon 3 concentraciones por triplicado, de tal
forma que fueran representativas dentro del rango de trabajo. Cada una de estas 9 muestras se
midi tres veces en el equipo HPLC.
TABLA3:ExactitudyprecisinHPLC
Conc.
Conc. Real
rea
[mg/mL]
Promedio
0,6129
2367140
0,6129
2315435
9013
0,4
0,6116
99,8%
0,6129
2295975
5153
0,2
0,6067
99,0%
Promedio
2326183
Promedio
100,2%
SD
36780
SD
1,5%
CV
1,58
CV
1,50
Conc. Real
rea
[mg/mL]
Promedio
0,9631
3680814
8939
0,2
0,9545
99,1%
0,9631
3653661
7320
0,2
0,9477
98,4%
0,9631
3673281
5195
0,1
0,9526
98,9%
Promedio
3669252
Promedio
98,8%
SD
14018
SD
0,4%
CV
0,4
CV
0,4
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
5395
0,2
0,6245
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
101,9%
Porcentaje de
recuperacin
18
Conc.
Conc. Real
rea
[mg/mL]
Promedio
1,3133
5141289
23826
0,5
1,3213
100,6%
1,3133
5108941
5862
0,1
1,3132
100,0%
5455
0,1
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
1,3133
5137887
1,3205
100,5%
Promedio
5129372
Promedio
100,4%
SD
17776
SD
0,3%
CV
0,3
CV
0,3
Exactitud: el porcentaje de recuperacin no excedi los lmites establecidos para la

prueba y el coeficiente de variacin de los dichos porcentajes no excedi a 1,5.
Precisin: el coeficiente de variacin no excedi el lmite establecido (2%)
7.1.1.2. Especificidad
Dado que la composicin de la matriz de los comprimidos es desconocida (por el hecho
que la fabricacin de stos es externa al laboratorio) no se puede recrear con exactitud el efecto
que tendra sta sobre la seal de la amoxicilina.
En los cromatogramas tanto del estndar como de las muestras, slo se observ una
nica seal, concordando el tiempo de retencin de estndar y muestras. Por esto, se determin
que a 230 m no exista interferencia de la matriz en el anlisis.
19
7.1.1.3. Linealidad y rango

TABLA4:LinealidadHPLC
Concentracin
Factor
rea
DS
CV
0,5253
2011835
4585
0,2
3829648
0,7004
2679455
12114
0,5
3825376
0,8756
3325591
4131
0,1
3798276
1,0507
4027618
8752
0,2
3833406
1,2258
4716728
11501
0,2
3847960
1,4009
5529234
28125
[mg/mL]
respuesta
0,5
3946960
Promedio
3846937
SD
51615
CV
1,3
FIGURA6:LinealidadHPLC
Mediante la regresin lineal de los datos se obtuvo la siguiente ecuacin de la recta:

rea = 3981296 [Conc. mg/mL] 119341
20
Con un coeficiente de correlacin: r = 0,99931. El coeficiente de variacin del factor

respuesta es de 1,3%. Por lo tanto el equipo es apto para realizar los anlisis en l (6).
Se determin que el rango de trabajo en este equipo es de 0,5253 a 1,4009 mg/mL.
7.1.2. Espectrofotmetro UV
7.1.2.1. Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2
7.1.2.1.1.
Exactitud y precisin
TABLA5:ExactitudyprecisinmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
Porcentaje de
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Promedio
recuperacin
[mg/mL]
0,0074
0,187
0,001
0,308
0,0073
99,0%
0,0074
0,187
0,001
0,308
0,0073
99,0%
0,0074
0,186
0,001
0,310
0,0072
98,5%
Promedio
0,187
Promedio
98,8%
SD
0,001
SD
0,3%
CV
0,31
CV
0,31
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0184
0,464
0,001
0,125
0,0182
98,8%
0,0184
0,462
0,001
0,125
0,0181
98,4%
0,0184
0,460
0,001
0,125
0,0180
98,1%
Promedio
0,462
Promedio
98,4%
SD
0,002
SD
0,4%
CV
0,36
CV
0,37
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
21

Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0294
0,748
0,001
0,134
0,0294
99,8%
0,0294
0,750
0,001
0,077
0,0294
100,1%
0,0294
0,748
0,001
0,077
0,0293
99,8%
Promedio
0,749
Promedio
99,9%
SD
0,001
SD
0,2%
CV
0,19
CV
0,19
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
Tanto los porcentajes de recuperacin como los distintos coeficientes de variacin se

encuentran dentro de los rangos establecidos para estos ensayos.
7.1.2.1.2.
Linealidad y rango
FIGURA7:CurvadecalibracinmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2
22

TABLA6:LinealidadespectrofotmetromediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0018
0,050
27,21
0,0037
0,099
26,93
0,0110
0,278
25,21
0,0147
0,380
25,85
0,0221
0,555
25,17
0,0257
0,657
25,53
0,0331
0,841
25,42
0,0368
0,941
25,60
Promedio
25,86
SD
0,78
CV
3%
La regresin lineal de los datos obtenidos da como resultado los siguientes parmetros:
Pendiente:
Interseccin eje Y:
Coef. de correlacin (r): 0,9999
Coef. de determinacin (r):
25,4015
0,0024
0,9998
Dado que el coeficiente de determinacin es mayor a 0,98 y el coeficiente de variacin

del factor respuesta es 3%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0018 a 0,0368 mg/mL)
23
7.1.2.2. Medio buffer pH 4,5

7.1.2.2.1.
TABLA7:ExactitudyprecisinmediobufferpH4,5
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0105
0,278
0,001
0,416
0,0106
101,0%
0,0105
0,278
0,001
0,360
0,0106
101,1%
0,001
0,209
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0105
0,277
0,0106
100,6%
Promedio
0,277
Promedio
100,9%
SD
0,001
SD
0,3%
CV
0,25
CV
0,26
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0210
0,559
0,001
0,103
0,0218
103,9%
0,0210
0,562
0,001
0,178
0,0219
104,4%
0,001
0,103
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0210
0,559
0,0218
103,7%
Promedio
0,560
Promedio
104,0%
SD
0,002
SD
0,3%
CV
0,32
CV
0,32
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0280
0,716
0,002
0,213
0,0281
100,2%
0,0280
0,716
0,001
0,081
0,0281
100,1%
0,0280
0,717
0,001
0,139
0,0281
100,3%
Promedio
0,716
Promedio
100,2%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,09
CV
0,09
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
24

7.1.2.2.2.
Linealidad y rango
FIGURA8:CurvadecalibracinmediobufferpH4,5
TABLA8:LinealidadmediobufferpH4,5
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0035
0,089
25,40
0,0070
0,189
26,97
0,0140
0,367
26,18
0,0175
0,459
26,20
0,0245
0,632
25,77
0,0315
0,801
25,40
0,0350
0,884
25,23
Promedio
25,88
SD
0,62
CV
2%
25
Pendiente:
Interseccin eje Y:
25,1024
0,0112
0,9998

del factor respuesta igual al 2%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0035 a 0,0350 mg/mL)
7.1.2.3. Medio buffer pH 6,8
7.1.2.3.1.
TABLA9:ExactitudyprecisinmediobufferpH6,8
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0117
0,315
0,001
0,183
0,0118
101,1%
0,0117
0,314
0,001
0,318
0,0118
100,9%
0,0117
0,315
0,001
0,366
0,0119
101,3%
Promedio
0,315
Promedio
101,1%
SD
0,001
SD
0,2%
CV
0,21
CV
0,21
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0234
0,632
0,000
0,000
0,0238
101,5%
0,0234
0,633
0,001
0,158
0,0238
101,7%
0,001
0,091
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0234
0,631
0,0237
101,4%
Promedio
0,632
Promedio
101,6%
SD
0,001
SD
0,1%
26
CV
0,13
CV
0,13
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0312
0,837
0,002
0,182
0,0315
100,9%
0,0312
0,838
0,001
0,119
0,0315
101,0%
0,001
0,138
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0312
0,838
0,0315
101,0%
Promedio
0,838
Promedio
101,0%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,06
CV
0,06

7.1.2.3.2.
Linealidad y rango
27

TABLA10:LinealidadmediobufferpH6,8
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0039
0,107
27,44
0,0078
0,204
26,16
0,0156
0,409
26,22
0,0195
0,525
26,93
0,0273
0,730
26,75
0,0351
0,924
26,33
0,0390
1,043
26,75
Promedio
26,66
SD
0,46
CV
2%
Pendiente:
Interseccin eje Y:
26,6085
0,0000
0,9997

del factor respuesta es igual al 2%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de
trabajo (0,0039 a 0,0390 mg/mL)
28
7.1.2.4. Medio agua

7.1.2.4.1.
TABLA11:Exactitudyprecisinmedioagua
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0116
0,317
0,003
0,912
0,0117
100,3%
0,0116
0,320
0,001
0,181
0,0118
101,3%
0,002
0,541
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0116
0,320
0,0118
101,4%
Promedio
0,319
Promedio
101,0%
SD
0,002
SD
0,6%
CV
0,58
CV
0,60
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0233
0,632
0,000
0,000
0,0237
101,9%
0,0233
0,631
0,001
0,183
0,0237
101,8%
0,001
0,183
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0233
0,632
0,0237
101,9%
Promedio
0,632
Promedio
101,9%
SD
0,000
SD
0,1%
CV
0,05
CV
0,05
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0311
0,836
0,004
0,431
0,0315
101,6%
0,0349
0,835
0,002
0,183
0,0315
90,2%
0,0349
0,835
0,002
0,277
0,0315
90,1%
Promedio
0,835
Promedio
94,0%
SD
0,001
SD
6,6%
CV
0,08
CV
7,00
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
29

7.1.2.4.2.
Linealidad y rango
FIGURA10:Curvadecalibracinmedioagua
TABLA12:Linealidadmedioagua
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0039
0,114
29,37
0,0078
0,210
27,05
0,0155
0,422
27,18
0,0194
0,514
26,48
0,0272
0,726
26,72
0,0349
0,930
26,62
0,0388
1,020
26,28
Promedio
27,10
SD
1,05
CV
4%
Pendiente:
Interseccin eje Y:
26,1519
0,0112
30
0,9998

del factor respuesta es de 4%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0039 a 0,0388 mg/mL)
7.1.2.5. Medio pH 2,5 y Fuerza Inica 0,100
7.1.2.5.1.
TABLA13:ExactitudyprecisinmediopH2,5yfuerzainica0,100
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0112
0,295
0,000
0,000
0,0111
99,5%
0,0112
0,294
0,001
0,196
0,0111
99,2%
0,0112
0,296
0,001
0,338
0,0112
99,8%
Promedio
0,295
Promedio
99,5%
SD
0,001
SD
0,3%
CV
0,28
CV
0,30
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0224
0,589
0,001
0,098
0,0227
101,6%
0,0224
0,588
0,002
0,295
0,0227
101,5%
0,0224
0,587
0,000
0,000
0,0227
101,3%
Promedio
0,588
Promedio
101,5%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,14
CV
0,15
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
31
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0298
0,776
0,001
0,149
0,0301
101,0%
0,0298
0,777
0,001
0,129
0,0302
101,1%
0,001
0,149
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0298
0,775
0,0301
100,8%
Promedio
0,776
Promedio
101,0%
SD
0,001
SD
0,2%
CV
0,16
CV
0,16

7.1.2.5.2.
Linealidad y rango
FIGURA11:CurvadecalibracinmediopH2,5yfuerzainica0,100
32

TABLA14:LinealidadmediopH2,5yfuerzainica0,100
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0037
0,101
27,10
0,0075
0,207
27,77
0,0149
0,393
26,36
0,0186
0,485
26,02
0,0261
0,678
25,99
0,0335
0,860
25,64
0,0373
0,956
25,65
Promedio
26,36
SD
0,80
CV
3%
Pendiente:
Interseccin eje Y:
25,3265
0,0133
0,9998

del factor respuesta es de 3%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0037 a 0,0373 mg/mL)
33
7.1.2.6. Medio pH 7,1

7.1.2.6.1.
TABLA15:ExactitudyprecisinmediopH7,1
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0111
0,281
0,001
0,205
0,0110
99,0%
0,0111
0,282
0,001
0,355
0,0111
99,3%
0,001
0,409
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0111
0,282
0,0111
99,4%
Promedio
0,282
Promedio
99,3%
SD
0,001
SD
0,2%
CV
0,18
CV
0,19
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0223
0,543
0,001
0,184
0,0217
97,4%
0,0223
0,542
0,001
0,185
0,0216
97,2%
0,001
0,184
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0223
0,543
0,0217
97,4%
Promedio
0,543
Promedio
97,3%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,11
CV
0,11
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0297
0,738
0,001
0,136
0,0296
99,8%
0,0297
0,737
0,002
0,207
0,0296
99,7%
0,0297
0,738
0,001
0,078
0,0296
99,7%
Promedio
0,738
Promedio
99,7%
SD
0,000
SD
0,0%
CV
0,045
CV
0,05
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
34

7.1.2.6.2.
Linealidad y rango
TABLA16:LinealidadmediopH7,1
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0037
0,101
27,22
0,0074
0,194
26,15
0,0148
0,373
25,13
0,0186
0,472
25,44
0,0260
0,642
24,72
0,0334
0,830
24,86
0,0371
0,925
24,93
Promedio
25,49
SD
0,90
CV
4%
Pendiente:
Interseccin eje Y:
24,5672
0,0105
35
0,9998

en el factor respuesta de 4%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0037 a 0,0371 mg/mL)
7.1.2.7. Medio pH 7,1 y fuerza inica 0,140
7.1.2.7.1.
TABLA17:ExactitudyprecisinmediopH7,1yfuerzainica0,140
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0114
0,298
0,001
0,194
0,0114
100,0%
0,0114
0,298
0,001
0,336
0,0114
100,2%
0,0114
0,297
0,002
0,514
0,0114
99,9%
Promedio
0,298
Promedio
100,0%
SD
0,000
SD
0,1%
CV
0,11
CV
0,11
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0228
0,587
0,000
0,000
0,0227
99,5%
0,0228
0,588
0,002
0,260
0,0227
99,6%
0,0228
0,589
0,001
0,098
0,0228
99,8%
Promedio
0,588
Promedio
99,6%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,14
CV
0,14
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
Conc.
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
36
Conc.
Conc. Real
Absorbancia
[mg/mL]
Promedio
0,0304
0,788
0,001
0,073
0,0305
100,4%
0,0304
0,786
0,002
0,250
0,0305
100,2%
0,001
0,146
SD
CV
Estimada
[mg/mL]
Porcentaje de
recuperacin
0,0304
0,788
0,0306
100,5%
Promedio
0,787
Promedio
100,3%
SD
0,001
SD
0,1%
CV
0,14
CV
0,14

7.1.2.7.2.
Linealidad y rango
FIGURA13:CurvadecalibracinmediopH7,1yfuerzainica0,139
37

TABLA18:LinealidadmediopH7,1yfuerzainica0,139
Concentracin
Factor
Absorbancia
[mg/mL]
respuesta
0,0038
0,104
27,34
0,0076
0,199
26,15
0,0152
0,391
25,69
0,0190
0,499
26,21
0,0266
0,686
25,76
0,0342
0,877
25,61
0,0380
0,984
25,86
Promedio
26,09
SD
0,59
CV
2%
Pendiente:
Interseccin eje Y:
25,6132
0,0052
0,9998

del factor respuesta es 2%, se considera que el mtodo es lineal dentro del rango de trabajo
(0,0038 a 0,0380 mg/mL)
7.2. Caracterizacin de los comprimidos

El principio activo contenido en los comprimidos en estudio es amoxicilina trihidrato, y
se declaran 500mg de sta por unidad de dosificacin. Los pesos promedio de los comprimidos
fueron el resultado de la medicin individual de 10 unidades de cada laboratorio
respectivamente.
38
TABLA19:Caractersticasdelosproductosenestudio
Marca Registrada
Amoval
Amoxicilina L.Ch.
Laboratorio
Saval
Laboratorio Chile
Amoxipenil
Bago
21 Comprimidos recubiertos
Presentacin
Lote/Serie
033387
07010048
I5VA
Vencimiento
10/2011
01/2010
09/2008
Descripcin
Comprimidos ovalados,
ranurados, color blanco,
ranurados, color
ranurados, color rosado,
inodoro
amarillentos, olor a
inodoro
pltano
Peso DS [mg]
717,65 9,90
794,84 8,02
832,10 14,62
7.3. Identificacin
Se realizaron dos placas, en donde el orden de aplicacin de izquierda a derecha, en
ambas placas, fue: amoxicilina estndar (St), Amoxicilina L. Ch. (1), Amoval (2) y Amoxipenil
(3). En la primera placa (figura de la izquierda) la cantidad aplicada fue menor que en la
segunda. Al revelar las placas segn las condiciones expresadas en la USP 30 para la
amoxicilina, se determin que todas las seales de las muestras en estudio concordaban con las
obtenidas a partir de la solucin de referencia.
FIGURA14:IdentificacinporTLC
39
TABLA20:Rfdelacromatografaencapafina
Productos
Rf placa 1
Rf placa 2
Amoxicilina estndar
0,61
0,76
Amoxicilina L. Ch.
0,62
0,78
Amoval
0,58
0,76
Amoxipenil
0,58
0,75
Dados los Rf para cada una de las muestras se puede afirmar que los productos en
anlisis efectivamente contienen amoxicilina.
7.4. Valoracin
TABLA21:Valoracincomprimidos
Producto
Amoval
Amoxicilina L.Ch.
Amoxipenil
Muestra
rea
[mg]
Promedio
DS
CV
Porcentaje
obtenido
Muestra
295,13
4057410
50633
1,25%
102,5%
Contramuestra
274,10
3727457
27084
0,73%
101,4%
Muestra
323,83
3943032
4999
0,13%
100,6%
Contramuestra
321,35
3894970
60747
1,56%
100,1%
Muestra
353,87
4180064
44556
1,07%
102,2%
Contramuestra
345,12
3939534
55067
1,40%
98,7%
Los porcentajes obtenidos en la valoracin tanto de la muestra como en su contramuestra

cumplen con lo estipulado en la USP 30 para este producto.
40
7.5. Uniformidad de contenido

TABLA22:Uniformidaddecontenido
Producto
CV
AV
Amoval
0,77
1,84
Amoxicilina L.Ch.
0,32
0,77
Amoxipenil
2,42
5,81
Los tres productos cumplen con la uniformidad de contenido ya que en ninguno de los
casos el valor aceptado (AV) es mayor o igual 15.
7.6. Prueba de disolucin

Se midieron inicialmente 6 comprimidos de cada producto utilizando las condiciones
anteriormente establecidas:
TABLA23:PruebadisolucinS1
Amoxicilina
Amoval
Amoxipenil
100%
63%
93%
96%
71%
89%
93%
71%
87%
98%
65%
100%
93%
60%
98%
97%
76%
95%
L.Ch.
En la etapa S1, amoxipenil no cumple este anlisis y dado los valores dados se procede
pasar directamente a S3.
41
TABLA24:PruebadisolucinAmoxipenil(Bag)
N
Amoxipenil
1
63%
71%
71%
65%
60%
76%
68%
67%
66%
10
82%
11
65%
12
64%
13
70%
14
65%
15
69%
16
70%
17
68%
18
73%
19
67%
20
71%
21
68%
22
62%
23
68%
24
72%
Promedio
68%
Tanto el Laboratorio Saval como el Laboratorio Chile cumplen con la prueba de

disolucin en la etapa S1, ya que ninguna de las seis unidades analizadas de cada uno fue inferior
al 80%. Los comprimidos del Laboratorio Bag no pasaron la prueba de disolucin en la etapa
S3 ya que el promedio de las 24 unidades fue inferior al 75%.
42
7.7. Cinticas
Para la determinacin de tiempo de muestreo, se realizaron previamente cinticas de
pruebas en los tres medios oficiales en 1 unidad de cada producto en estudio. Se escogieron los
puntos de tal forma que se pudiese establecer comparaciones entre los productos en el mismo
medio y el efecto del medio en cada uno de los productos.
7.7.1. Caractersticas de los medios en estudio
Se registraron las caracterstica de 10 preparaciones (de 4 litros cada una) suficientes
para hacer los procedimientos necesarios por cada medio.
TABLA25:Caractersticasdelosmediosenestudio
pH
Medio
SD
promedio
CV
pH 1,2
1,21
0,01
1,07%
0,069
Buffer pH 4,5
4,50
0,02
0,43%
0,066
Buffer pH 6,8
6,79
0,02
0,27%
0,095
Agua
5,94
0,23
3,80%
0,000
pH 2,5/I = 0,100
2,50
0,01
0,51%
0,103
Buffer pH 7,1
7,08
0,02
0,28%
0,082
Buffer pH 7,1/I = 0,140
7,10
0,01
0,17%
0,139
43
7.7.2. Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2

En la siguiente figura se representan los perfiles de disolucin promedio de los tres
productos en estudio en el medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2
FIGURA15:PerfildedisolucinmediofluidogstricosinenzimaspH1,2
TABLA26:PorcentajededisolucinenmediofluidogstricosimuladosinenzimaspH1,2
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
3,54
0,69
19,5
0,19
0,06
34,2
9,95
1,18
11,8
29,92
5,06
16,9
0,54
0,08
15,1
44,21
6,59
14,9
73,70
4,15
5,6
1,52
oc21491
10,5
68,20
3,07
4,5
84,69
1,96
2,3
4,11
0,29
7,1
79,74
2,50
3,1
10
88,54
1,65
1,9
18,47
0,96
5,2
84,36
2,33
2,8
13
92,20
1,32
1,4
41,99
3,64
8,7
86,35
2,68
3,1
16
94,25
1,05
1,1
67,51
5,07
7,5
87,95
3,19
3,6
20
95,58
0,92
1,0
87,73
6,94
7,9
88,89
3,22
3,6
40
97,81
0,70
0,7
96,83
3,18
3,3
90,59
3,02
3,3
60
97,99
1,14
1,2
98,43
3,21
3,3
91,98
2,63
2,9
44
7.7.3. Medio buffer 4,5

productos en estudio en el medio buffer 4,5:
FIGURA16:Perfildedisolucinmediobuffer4,5
TABLA27:Porcentajesdedisolucinenmediobuffer4,5
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
4,08
0,65
15,89
0,15
0,02
15,62
3,77
0,62
16,41
18,93
3,60
19,01
0,22
0,04
16,57
18,09
2,76
15,25
38,23
3,56
9,31
0,77
0,05
6,86
30,61
3,05
9,98
49,62
4,24
8,54
2,47
0,12
4,91
40,58
4,16
10,24
10
53,31
3,95
7,42
6,76
0,62
9,11
43,71
3,63
8,31
13
56,35
3,40
6,04
14,42
1,24
8,63
48,00
3,11
6,47
16
60,46
3,56
5,89
23,78
2,26
9,48
50,74
3,00
5,91
20
63,98
3,63
5,68
30,15
2,69
8,94
53,03
2,82
5,31
40
75,17
3,32
4,42
48,52
2,12
4,36
63,71
1,86
2,92
60
81,43
4,43
5,45
59,18
2,66
4,50
72,38
1,12
1,55
80
87,03
4,65
5,34
66,28
2,45
3,69
76,82
1,26
1,65
130
94,71
5,00
5,28
73,97
2,09
2,82
80,99
1,20
1,48
45
7.7.4. Medio buffer 6,8

productos en estudio en el medio buffer 6,8:
FIGURA17:PerfildedisolucinmediobufferpH6,8
TABLA28:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH6,8
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
1,99
0,35
17,70
0,16
0,02
23,63
4,26
18,05
0,37
0,05
13,72
4,13
0,67
16,17
14,80
19,33
2,15
11,10
42,39
3,92
9,26
1,57
0,14
9,15
29,65
1,40
4,72
52,94
3,55
6,70
13,99
0,48
3,42
38,75
2,41
6,22
10
55,83
3,46
6,19
22,32
2,18
9,77
42,02
2,41
5,73
13
61,87
3,39
5,48
28,22
2,59
9,16
46,23
1,79
3,86
16
65,02
3,22
4,94
33,52
2,36
7,04
49,33
2,08
4,21
20
67,95
2,03
2,99
37,26
2,33
6,25
53,09
2,15
4,05
40
77,03
2,89
3,76
50,41
2,18
4,33
65,28
2,32
3,55
60
82,52
2,44
2,96
57,13
2,54
4,44
69,33
1,48
2,14
80
85,10
3,27
3,85
60,74
2,98
4,90
71,65
1,32
1,84
130
91,28
3,23
3,54
65,72
2,71
4,12
73,23
1,36
1,85
[min]
46
7.7.5. Medio agua

productos en estudio en el medio agua:
FIGURA18:Perfildedisolucinmedioagua
TABLA29:Porcentajesdedisolucinenmedioagua
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
0,96
0,20
20,70
0,26
0,05
20,13
5,38
0,90
16,76
18,60
2,96
15,93
0,33
0,07
20,07
21,17
1,65
7,77
40,53
3,45
8,52
1,23
0,10
8,27
32,08
3,10
9,66
50,31
4,73
9,40
7,26
0,57
7,91
39,42
3,54
8,97
10
54,54
5,24
9,61
14,25
1,20
8,42
42,18
3,39
8,04
13
57,68
4,63
8,03
22,88
2,02
8,84
46,20
3,60
7,79
16
61,30
5,04
8,23
26,99
2,62
9,71
49,34
3,49
7,08
20
64,89
4,60
7,09
33,22
2,99
9,01
53,04
3,33
6,27
40
74,23
3,79
5,11
51,49
4,03
7,83
66,51
2,64
3,97
60
81,08
4,23
5,21
61,79
5,11
8,27
75,44
1,92
2,54
80
86,76
4,07
4,69
68,09
4,53
6,65
79,12
2,25
2,85
130
91,86
3,63
3,95
78,95
4,00
5,07
82,58
2,11
2,55
47
7.7.6. Medio pH 2,5 y fuerza inica 0,100

productos en estudio en el medio pH 2,5 y fuerza inica 0,100
FIGURA19:PerfildedisolucinmediopH2,5yfuerzainica0,100
TABLA30:PorcentajesdedisolucinenmediopH2,5yfuerzainica0,100
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
0,28
0,07
26,89
0,22
0,04
15,97
4,70
0,91
19,36
9,95
1,47
14,82
0,34
0,07
21,11
20,06
3,16
15,73
27,47
2,74
9,97
0,77
0,07
8,47
29,75
2,73
9,16
57,23
5,48
9,58
4,58
0,34
7,47
39,53
3,14
7,94
10
62,23
5,58
8,96
10,42
0,79
7,55
43,63
3,04
6,96
13
68,35
5,10
7,47
23,90
2,11
8,85
46,72
2,70
5,77
16
71,58
5,74
8,02
32,61
2,67
8,18
51,89
2,47
4,76
20
77,51
5,24
6,76
41,70
3,83
9,18
55,80
2,62
4,70
40
88,92
3,63
4,09
63,43
3,93
6,19
70,72
2,26
3,19
60
93,29
4,94
5,29
74,24
5,87
7,90
76,81
1,87
2,43
80
97,49
3,75
3,84
80,02
5,30
6,62
78,39
2,17
2,76
130
100,97
3,26
3,22
86,50
4,53
5,24
81,38
2,20
2,70
48
7.7.7. Medio buffer pH 7,1

productos en estudio en el medio buffer pH 7,1
FIGURA20:PerfildedisolucinmediobufferpH7,1
TABLA31:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH7,1
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
1,08
0,20
18,74
0,45
0,06
12,67
3,34
0,51
15,16
19,43
2,78
14,31
0,55
0,10
18,17
14,97
2,11
14,08
51,09
4,67
9,13
0,72
0,06
8,81
25,42
1,14
4,48
63,45
4,08
6,44
2,20
0,14
6,50
39,95
3,65
9,14
10
67,48
4,21
6,24
6,32
0,36
5,68
43,38
3,69
8,52
13
71,12
2,84
3,99
14,00
1,33
9,46
49,05
2,80
5,71
16
73,45
2,52
3,43
19,48
1,77
9,10
54,30
3,26
6,00
20
77,19
2,64
3,43
28,71
2,29
7,97
60,27
3,45
5,72
40
87,51
3,04
3,47
51,35
1,57
3,06
72,03
3,12
4,33
60
92,22
2,25
2,44
62,95
2,15
3,42
76,37
2,37
3,11
80
93,15
3,53
3,79
69,53
3,48
5,01
78,07
2,26
2,90
130
96,86
3,03
3,13
81,32
3,54
4,35
80,63
2,33
2,89
49
7.7.8. Medio buffer pH 7,1 y fuerza inica 0,139

productos en estudio en el medio buffer pH 7,1 y fuerza inica 0,139
FIGURA21:PerfildedisolucinmediopH7,1yfuerzainica0,139
TABLA32:PorcentajesdedisolucinenmediobufferpH7,1yfuerzainica0,139
Tiempo
Amoval
Amoxipenil
Amoxicilina L.Ch.
[min]
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
% prom.
SD
CV
3,02
0,66
21,83
0,34
0,05
13,63
5,60
1,41
25,25
17,21
3,50
20,33
0,41
0,09
21,44
18,19
2,50
13,76
32,75
3,20
9,77
0,99
0,08
8,41
34,54
1,53
4,43
56,48
3,78
6,68
7,35
0,44
5,98
47,93
4,33
9,04
10
62,12
4,08
6,57
11,44
0,94
8,22
51,59
4,30
8,34
13
68,32
4,15
6,08
17,09
1,56
9,11
56,44
3,16
5,60
16
73,01
3,32
4,55
24,54
2,19
8,94
59,29
3,50
5,90
20
77,05
2,04
2,65
31,90
2,52
7,88
63,51
3,58
5,64
40
88,51
3,11
3,51
52,51
1,60
3,05
72,22
3,09
4,28
60
91,84
1,10
1,19
59,01
2,00
3,40
77,28
2,37
3,07
80
95,49
4,03
4,22
63,00
3,13
4,96
78,43
2,25
2,87
130
100,34
4,01
4,00
70,68
3,05
4,32
82,67
2,36
2,86
50
7.7.9. Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoval
FIGURA22:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoval
7.7.10. Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxipenil
FIGURA23:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoxipenil
51
7.7.11. Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxicilina L.Ch.
FIGURA24:PerfilesdedisolucinenlosdistintosmediosdeAmoxicilinaL.Ch.
7.7.12. Factor de similitud

TABLA33:Factordesimilitud(referenciaAmoval)
Amoval - Amoxipenil
Amoval - Amoxicilina
L.Ch.
Medio
f2
Cumple
f2
Cumple
Fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2
11,40
NO
54,76
SI
Buffer pH 4,5
24,01
NO
52,85
SI
Buffer pH 6,8
26,42
NO
43,82
NO
Agua
26,80
NO
51,64
SI
pH 2,5 y fuerza inica 0,100
22,97
NO
39,11
NO
Buffer pH 7,1
16,90
NO
36,53
NO
Buffer pH 7,1 y fuerza inica 0,139
26,04
NO
51,32
SI
52
8. DISCUSIONES
Amoval logr en todos los medio superar el 85% de disolucin en el tiempo que dur el
ensayo. A medida que se elev el pH del medio la velocidad de la disolucin fue disminuyendo,
hasta el pH 6,8. Despus de este punto la velocidad comenz a subir nuevamente. Este hecho se
explicara por la solubilidad del principio activo, debido a los pKa que posee la molcula. No se
observ diferencia en los dos medios pH 7,1 de diferente fuerza inica.
El Amoxipenil result no ser similar al producto de referencia en ninguno de los medios,
tanto oficiales como experimentales. Cabe hacer notar que en el medio cido experimental (pH
2,5) el valor de f2 aument casi al doble que en obtenido en medio fluido gstrico simulado sin
enzimas pH 1,2, por lo que se podra suponer que en otros productos, de darse esta diferencia,
esto podra significar el cumplimiento o no de los parmetros establecidos. En los medios pH 7,1
de distintas fuerzas inicas se observ, que al aumentar la fuerza inica, disminuy la disolucin
del producto. Segn un estudio de 1978, la solubilidad de la amoxicilina es independiente de la
fuerza inica del medio, de ser as el efecto observado podra ser atribuible a la matriz. Tanto en
la valoracin como en la uniformidad de contenido este producto cumpli con los criterios de
aceptacin, no cumpli el test de disolucin y en las cinticas de disolucin (salvo medio fluido
gstrico simulado sin enzimas pH 1,2) fue el producto que alcanz menores porcentajes. De esto
se puede deducir que los bajos porcentajes de principio activo obtenidos en las diversas pruebas
de disolucin se deberan a que la matriz no libera en forma adecuada del frmaco.
Amoxicilina L.Ch., de los dos productos en comparacin result asemejarse ms al de
referencia. Cumpli tanto en medio fluido gstrico simulado sin enzimas como en el buffer 4,5,
no as en el medio buffer 6,8. En los medios experimentales cumpli en agua y buffer pH 7,1 y
fuerza inica 0,139. La diferencia en los resultados de los dos medios cidos se debera que a
medida que aumenta el pH hacia pH 5 la solubilidad disminuye. Al igual que en Amoval los
medios pH 7,1 no presentaron mayor diferencia entre s.
53
En lneas generales, se observ que para los productos estudiados no existi diferencia
significativa entre realizar las cinticas en medio buffer 4,5 y agua. No ocurre lo mismo en los
otros pHs que se encuentran en los extremos del estudio. Las diferencias encontradas se pueden
explicar por la curva de solubilidad en funcin del pH que tiene el principio activo. Al ser una
curva en forma de U, en la base se encuentran los pHs de los medio buffer 4,5 y agua, por lo
que la diferencia de solubilidad no es importante entre ambos. En cambio en los medios cidos,
el hecho de subir el pH del medio oficial a 2,5 signific un brusco cambio en los perfiles de
disolucin obtenidos, en el caso de Amoxicilina L.Ch. implico pasar de cumplir con el criterio f2
a no cumplirlo. En el otro extremo de la curva, cerca de los pHs neutros, con un pequeo
incremento en el pH del medio oficial (0,3 unidades) se observ que el porcentaje de disolucin
al final del ensayo fue mayor en los pHs 7,1.
En el medio pH 7,1 de menor fuerza inica, se obtuvieron valor de f2 menores que los
encontrados para el medio buffer 6,8. En cambio en el medio experimenta 7,1 de fuerza inica
0,139 los valores resultantes de f2 fueron mayores, incluso esto implico la diferencia entre no
cumplir a cumplir con el criterio de aceptacin en el caso de Amoval Amoxicilina L.Ch.
Tanto pH como la fuerza inica de los medios fluido gstrico simulado sin enzimas pH
1,2 como en buffer pH 6,8 se encuentran bajos con respecto a los rangos que se esperara
encontrar in vivo, para el caso del principio activo en estudio conlleva a diferencia en los perfiles
de disolucin como ya se mencion anteriormente. En el caso de otros frmacos, esto podra o
no afectar sus perfiles de disolucin.
El comportamiento tanto de la matriz como del principio activo vara de acuerdo a las
condiciones del medio de disolucin, por lo que emplear medios que no se asemejen a las
condiciones fisiolgicas puede llevar a resultados errneos, tanto de aceptacin o rechazo.
54
9. CONCLUSIONES
Todos los equipos empleados en el estudio, en el proceso de validacin cumplieron

satisfactoriamente con todos los parmetros establecidos para el tipo de anlisis que realizaron.
Todos los productos en estudio cumplieron satisfactoriamente con los controles
especificados en la USP 30, salvo amoxipenil, quien no cumpli con el test de disolucin.
Ninguno de los dos productos que se compararon con el de referencia resultaron ser
equivalentes teraputicos con este. Amoxipenil no super 50 en f2 ni en los medios oficiales ni
experimentales. Amoxicilina L.Ch. cumple en los primeros medios oficiales (fluido gstrico
simulado sin enzimas pH 1,2 y buffer 4,5), y en los medios experimentales solo cumple en el
buffer 7,1 y fuerza inica 0,139.
Los parmetros pH y fuerza inica de los medios fluido gstrico simulado sin enzimas
pH 1,2 y buffer pH 6,8, se encuentran bajo lo esperado en fluidos in vivo.
Los valores resultantes de f2 de los medios experimentales difieren de los medios
oficiales, estas diferencias tanto en este estudio como en el de otros principios activos puede
significar aprobar o rechazar la equivalencia teraputica.
55
10. BIBLIOGRAFA
1. CARRION Recio, Dayam, GONZALEZ Delgado, Carlos Alberto, OLIVERA Ruano,

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de 29.11.05
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vitro. Publicada en el Diario Oficial de 29.11.05
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United States Pharmacopeial Convention, EEUU, 2007.
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Dissolution Behavior of Amino Penicillins as a Function of pH. Journal of Pharmaceutical
Sciences. 67 (8): 1059-1066. Agosto 1978.
57
ABREVIATURAS
p.a.:
pro anlisis.
SD:
desviacin estndar
CV:
coeficiente de variacin (expresado en porcentaje)
AV:
Valor de aceptacin
prom.: promedio
conc.: concentracin
58

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UNIVERSIDAD DE CHILE

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS Y FARMACUTICAS

EVALUACIN DEL MEDIO DE DISOLUCIN SOBRE LAS CINTICAS DE

Memoria para optar al Ttulo de Qumico Farmacutico de la Universidad de Chile.

Dra. Mara Nella Gai Hernndez

Dra. Mara Nella Gai Hernndez

Depto. de Ciencias y Tecnologa Farmacutica

AGRADECIMIENTOS .............................................................................................................. iii

Validacin de las metodologas analticas empleadas...................................................4

Evaluacin de los datos obtenidos.................................................................................4

Caracterizacin de los comprimidos............................................................................10

Uniformidad de contenido (13)..............................................................................12

Test de disolucin (13)...........................................................................................13

Desaireacin del agua para pruebas de disolucin.......................................................16

Cromatografa lquida de alta resolucin.............................................................18

Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2........................................21

Medio buffer pH 4,5.........................................................................................24

Medio buffer pH 6,8.........................................................................................26

Medio pH 2,5 y Fuerza Inica 0,100................................................................31

Medio pH 7,1 y fuerza inica 0,140.................................................................36

Caracterizacin de los comprimidos............................................................................38

Caractersticas de los medios en estudio..............................................................43

Medio fluido gstrico simulado sin enzimas pH 1,2............................................44

Medio buffer 4,5..................................................................................................45

Medio buffer 6,8..................................................................................................46

Medio pH 2,5 y fuerza inica 0,100.....................................................................48

Medio buffer pH 7,1.............................................................................................49

Medio buffer pH 7,1 y fuerza inica 0,139..........................................................50

Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoval........................................51

Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxipenil..................................51

Comparacin de los perfiles de disolucin de Amoxicilina L.Ch........................52

NDICE DE TABLAS Y FIGURAS

Los estudios de bioequivalencia in vitro se deben realizar en 3 medios de disolucin

El proceso de absorcin es influido por muchos factores biolgicos y fisicoqumicos; de

biodisponibilidad, definida como la fraccin de la dosis de un medicamento que alcanza el sitio

. La disolucin in vitro es la prueba fisicoqumica ms usada para estimar la liberacin

Amoxicilina: aminopenicilina de amplio espectro (3, 14)

Cloxacilina sdica: penicilina resistente a -lactamasas (3).

La amoxicilina es un antibitico betalactamico de amplio uso en la prctica mdica,

. Es una penicilina semisinttica, sensible a penicilinasa, de

. A diferencia de la cloxacilina, puede atravesar la

barrera cefalorraqudea, alcanzando concentraciones de 5 10% de la concentracin plasmtica.

, posee tres pKa: 2,4; 7,4 y 9,6.

. Estudios previos han

establecido que la degradacin tienen un orden cintico de primer orden y la curva de

FIGURA 3: Curva de solubilidad de amoxicilina en

2.1. Objetivos generales

Validar la metodologa analtica ocupada para los ensayos.

Evaluar 3 productos de Amoxicilina 500 mg comprimidos, elaborados por diferentes

con medios fisiolgicamente ms cercanos a

los medios gastrointestinales.

La composicin de los medios de disolucin puede afectar la forma en la que se libera y

4.1. Caracterizacin de los productos

Descripcin del producto: color, forma. Caractersticas del comprimido: recubrimiento,

Segn USP 30 se establecer: identificacin, valoracin, uniformidad de contenido y

4.2. Validacin de las metodologas analticas empleadas

Se establecer: linealidad, exactitud y precisin segn lo establecido en la Gua ICH-Q2A

4.3. Cinticas de Disolucin

4.4. Evaluacin de los datos obtenidos

Se compararn las curvas obtenidas en las cinticas y se establecern las similitudes y

Material de vidrio clase A de uso comn en el laboratorio

Micropipeta Labopette, Hirschmann Laborgerate, 100 1000 L

Papel filtro: Advantec, grado n 5A, tamao 9,0cm

Membrana GV (Durapore) EM PVDF; 0,22 m de poro, 13 mm de dimetro, hidroflica,