1 BIOLOGA MOLECULAR I (parte I) Los cidos nucleicos juegan un papel importante en la regulacin de la informacin gentica, la cual est contenida

en ese DNA transmisible de una descendencia a otra. Griffit, en 1928, describi que la transformacin era un hecho inherente a una sustancia qumica que para el momento histrico no se conoca. El acido desoxirribonucleico (DNA) es la base qumica de la herencia. Contiene la informacin gentica; esto fue demostrado en 1944 por Avery, Mc Leod y McCarty quienes observaron que la determinacin gentica de la cpsula del neumococo poda ser transmitida a otro neumococo de un tipo de cpsula diferente introduciendo DNA purificado del primero al segundo. Esto ha servido para investigaciones tanto a nivel animal, humano y en vegetales (como es el caso de los vegetales transgnicos). La importancia mdica radica en conocer esta informacin ya detectada en el genoma humano, ya que esta informacin se tiene y se ha determinado cul es la secuencia gentica de los humanos. ltimamente se ha hecho el descubrimiento de que los genes de la longevidad estn ubicados en el cromosoma 4. Es importante mencionar que cada una de nuestras clulas contiene la informacin gentica de todo nuestro cuerpo, es decir, una clula de la piel contiene informacin gentica de lo que debe llevar el cerebro, hgado, rin, etc; lo que ha pasado es que cada una de las clulas se ha especializado.

Cientficos japoneses y estadounidenses emplean vacas clonadas para producir anticuerpos humanos. Puede ser la solucin para asegurar el suministro de gammaglobulinas, pero es necesario desactivar los anticuerpos propios de la vaca y evitar y evitar la transmisin de virus animales. Una variante gentica presente en ms de uno de cada 10 estadounidenses de raza negra aumenta el riesgo de anomalas del ritmo cardaco, llamadas arritmias. Trasplantes de piel modificada genticamente pueden incorporar a la sangre protenas contra enfermedades. La aplicacin de pequeos trasplantes de piel que se hayan modificado genticamente para la incorporacin de una determinada molcula, generalmente una protena, son capaces de transferir a la sangre informacin para curar determinadas enfermedades. Esta utilizacin de la piel como bioreactor est an en una fase muy experimental Alimentos transgnicos (fitoesteroles): se manipulan las clulas de las plantas y se producen alimentos mucho ms grandes, y no se sabe si esto traer trastornos en un futuro para los humanos.

Nota clnica: ya conociendo la secuencia en humanos de DNA de algunos elementos, se ha tomado dicho DNA para ser introducido en bacterias u otros animales, logrando entonces reproducir esa sustancia determinada. Un ejemplo tpico es la Insulina humana, a la cual se le logr determinar exactamente cul era su secuencia de DNA, dicha secuencia se sintetiza en el laboratorio y se mete en un vector (parecido a un virus) que se inyecta a una Escherichia coli (una bacteria) que la recibe y la incorpora a su genoma (a su propio DNA), una vez que ocurre esto, se activa, y entonces la bacteria comienza a sintetizar insulina; a sta se le han indicado los elementos (o switchers) que logran activar y prcticamente esta bacteria se dedica a producir insulina recombinante humana, es decir, es una secuencia de DNA que logr inyectarse, la bacteria lo acept y produce insulina, la cual es exactamente igual a la humana.

Cuadro: Tenemos Factores anticoagulantes, como el Activador tisular de plasmingeno (TPA), que logra activar a la Plasmina, enzima involucrada en la disolucin del cogulo; sta se utiliza en el infarto al miocardio y en esos ataques trombticos que puedan afectar al corazn, cerebro y tejido perifrico, si se hace en las primeras horas se inyecta este factor tisular activador de plasmingeno que logra alisar y romper el cogulo. Otros ejemplos son Factores de coagulacin como el Factor VIII. El Factor estimulante de colonias es el que logra estimular la produccin de glbulos blancos en aquellos pacientes que estn sometidos a terapias contra el cncer, que al suprimrseles los glbulos blancos se le proporciona este factor especfico humano recultivado en bacterias. La Eritropoyetina recombinante humana se usa en pacientes con insuficiencia renal crnica, recordemos que esta hormona se produce especficamente en los riones, y cuando existe esta patologa renal una de las caractersticas que presenta el paciente es anemia. Factores de crecimiento, Factores hormonales (para el enanismo). Interfern e Interleuquinas para las defensas. Anticuerpos monoclonales, Superxido dismutasa, Vacunas, etc. Es decir, podemos sintetizar. *De este cuadro saldr una pregunta.

3 DNA Esta es la secuencia: en el DNA contenemos la informacin, sta puede replicarse y transmitirse a la descendencia refirindose a la replicacin completa del DNA cuando se prepara a una clula que se divide en dos clulas exactamente iguales. Pero tambin pudisemos transcribir parte de ese DNA y convertirlo en una informacin que va a fluir hasta la sntesis de una protena. Esa primera parte de sintetizar RNA a partir de DNA se denomina Transcripcin, es decir, una parte de la informacin contenida en el DNA (probablemente un gen) sencillamente se transcribe hasta un RNA en el que lleg la informacin para que luego en el citoplasma (especficamente en los ribosomas) dicha informacin se traduzca en una protena, esto se denomina Traduccin, realmente es una traduccin del cdigo gentico que hemos tenido, y esa informacin contenida en una secuencia de nucletidos se convierte en una secuencia de aminocidos que da origen a una protena que cumple una funcin importante. Luego las protenas pudieran ser adicionalmente procesadas y dan origen a la protena definitiva que va a cumplir una funcin, ya sea una enzima, un regulador, un modulador, una hormona, etc, depende de las necesidades metablicas.

DNA: Naturaleza quimica En su estructura presenta 4 unidades monomricas: Dos bases pricas: Desoxiadenilato y Desoxiguanilato Dos bases pirimidnicas: Desoxitimidilato y Desoxicitidilato Estas bases se unen secuencialmente formando tiras de polmeros por medio de enlaces 3,5 fosfodiester, y la orientacin de lectura de la polaridad ser 5,3: siempre que vamos a leer el DNA tenemos que empezar por la estructura donde est orientada la cabeza 5, de modo que se lee 5,3, y de esa manera tambin se leer esa informacin gentica en el momento en que se haga la traduccin, la duplicacin y la transcripcin.

Polielectrolito negativo. Polaridad: de 5 OH o fosfato a 3 OH o fosfato (53) Adems de esa unin que tiene en su estructura exterior, debemos saber que el DNA se encuentra como una doble tira, nunca se encuentra en una sola secuencia, tiene dos secuencias que corren una al lado de la otra pero en direcciones contrarias, mientras una corre 5,3 la otra corre en direccin opuesta, son dos tiras enfrentadas una al frente de la otra. (Imagen) La unin que permite hacerse entre las dos tiras son enlaces de hidrgeno (Imagen), lo cuales se orientan de la siguiente manera: donde se encuentre una Desoxiadenina, l se pega con un doble enlace de hidrgeno a una Desoxitimidina, y

4 viceversa. Igual se puede decir para el Desoxiguanilato y Desoxicitidilato, pero en este caso se unen con tres enlaces de hidrgeno. Esto significa que la concentracin que se tenga en el contenido total de Adenilato va a ser exactamente igual a la concentracin de Timidilato porque siempre se va a pegar una Adenina con una Timina (o viceversa), y la Guanina siempre se pega con Citosina (o viceversa). Esto lleva a la observacin de Chargaff, donde se dice que la concentracin de Desoxiadenilato es exactamente igual a la de Desoxitimidilato (dA = dT), e igualmente la concentracin de Desoxiguanilato es exactamente a igual a la de Desoxicitidilato (dG dC). DNA: Estructura El DNA existe en forma de dos tiras arrolladas complementarias entre s en forma de doble hlice conformada antiparalela; Cada extremo de DNA tiene una tira 5,3, entonces uno sirve de molde y el otro de antimolde, estn orientadas de esa manera. Pero adems, el DNA est enrollado sobre s mismo, esto le da mayor fortaleza a la tira. Por fuera estn los enlaces fosfodiester y por dentro los enlaces de hidrgeno que la mantienen unida formando una especie de espiral. Esa doble tira se van empaquetando progresivamente al unirse con protenas denominadas Histonas, stas se enrollan a su vez sobre ellas mismas y finalmente forman la cromatina que dar origen a los cromosomas, pero est sper empaquetado con las histonas. Prcticamente la secuencia del DNA que tiene cada una de nuestras clulas mide aproximadamente 1,72 1,70 metros, y debe estar contenido en el ncleo de una clula (en esos cromosomas), esto quiere decir que necesitamos una secuencia de empaquetamiento muy importante para poder caber ese hilo enrollado de dicha longitud en cada una de nuestras clulas. En las clulas eucariotas el DNA existe en 6 formas de estructuras helicoidales: A, B, C, D, E y Z. La forma B es la ms frecuente y fue descrita por Watson y Crick en 1954. La secuencia del DNA va a contener Hendiduras mayores y menores (Imagen), en los cuales intervienen protenas reguladores de la expresin gentica. Por eso la importancia de dichas hendiduras porque a travs de eso permite la interaccin de compuestos con la secuencia del DNA, y esos compuestos producen moduladores que pueden estimular o inhibir la sntesis del DNA, es decir, que pueden inhibir o estimular la replicacin pero tambin la transcripcin.

Tiene giro a la derecha de 3.4 nm con 10 pares de bases (pb) planares apiladas para semejar dos series de monedas colocadas lado a lado unidas por puentes de hidrgeno y por dos listones enrollados en giro a la derecha alrededor de dos pilas y que representa el esqueleto fosfodiester.

5 DNA Helicoidal El DNA es una fibra que se mantiene en solucin y forma un material viscoso. Altas temperaturas y soluciones con baja concentracin de sales lo desnaturalizan, separando las dos tiras e incrementando la absorbancia ptica de las bases pricas y pirimidnicas, produciendo la Hiprecromicidad de la desnaturalizacin con prdida de su viscosidad, ya no es tan gelatinoso, sino que se vuelve ms fluido, se pierde la viscosidad y adems se torna de un color diferente. Decimos entonces que el DNA est desnaturalizado. La Formamida desestabiliza los puentes de hidrgeno entre las bases disminuyendo la temperatura de fusin, es decir, la temperatura para lograr separar y se pueden conservar las secuencias de las tiras por separado. Informacin gentica Es todo el mensaje gentico codificado en sustancias qumicas (DNA, RNA protenas) que conserva, almacena, replica, transcribe, traduce y regula todas las caractersticas genotpicas y fenotpicas que heredarn de su progenitor una clula (u organismo) y su descendencia.

Informacin gentica: Ubicacin La informacin gentica se encuentra en: Ncleo: Cromosomas (DNA + Protenas), que en el caso humano son secuencias de DNA ms protenas histnicas; en el caso de clulas procariotas (bacterias) el DNA se encuentra libre en una zona nuclear, no hay un ncleo como tal porque las clulas procariotas no tienen divisiones de organelos, slo tienen una zona nuclear donde est el DNA, que es una sola secuencia circular que se encuentra desprovisto de protenas (desnudo). Nota clnica: por eso se puede sacar la cuenta de que una bacteria se puede reproducir mucho ms rpido que una clula eucariota, de hecho una bacteria se puede duplicar en 20 minutos, mientras que una clula eucariota en 8, 16 24 horas (etc), y esto es debido a que la clula eucariota tiene que desarmar toda la cromatina que tiene y exponerla para que se sintetice y luego debe reempaquetar, entonces la bacteria le gana; esto es importante, porque cuando hay una infeccin bacteriana se debe actuar rpidamente, cada 20 30 minutos si se tenan 20 clulas de bacterias, ya a la hora se vern multiplicadas por 2 por 3, de ah la aclaratoria de que las infecciones son emergencias, y si el paciente tiene una condicin de inmunosupresin por alguna enfermedad, pues corra porque si no se le morir el paciente con la infeccin. Citoplasma: Ribosoma (RNA + Protenas). Se encuentra el RNA y las protenas que tienen que ver con l, que son las que estn presentes en los ribosomas. Mitocondria: tienen la particularidad de que tienen su propio material de DNA , RNA y protenas. Esto es una evidencia de que en el comienzo de la vida las mitocondrias formaban elementos independientes que hicieron simbiosis al inicio con las clulas que no tenan esa energa y que posteriormente la clula logrn incorporar a su material gentico la informacin de la mitocondria pero conservando la propia caracterstica de la mitocondria, de tan manera que cuando se produce la clula tambin produce una mitocondria que tiene su propio material gentico con algunas diferencias al genoma que tiene la propia clula, es decir, es diferente

6 Organizacin en el ncleo eucariota Cromatina: DNA (carga -) ms Histonas, protenas policatinicas (carga +) unidas por interaccin electrosttica (enlaces salinos). Histonas: protenas muy catinicas ricas en Aa bsicos (estn cargadas positivamente). Lisina, Arginina (24,5 a 40,8%) y PM entre 11.000 a 21.000 d. se clasifican:

Las Histonas H2a y H2b son ricas en Lis, no se han conservado significativamente en el ncleo pero s las H3 y H4 que son ricas en Arg. La mayora de los Aa bsicos estn agrupados en el extremo amino terminal (los primeros 30 a 40 Aa); los Aa hidrofbicos estn en el extremo carboxilo terminal. Estas histonas pueden metilarse, acetilarse, fosforilarse, fosforribosilarse. Esto es importante porque esto permite la interaccin de regulacin que tienen que ver las histonas con el DNA, si logramos metilar podemos hacer que la unin entre la histona y el DNA sea mayor o menor, lo cual es importante porque si se quiere replicar a esta clula no va a lograrse si las histonas estn sumamente pegadas. Nucleosomas Cuando las histonas se empaquetan, forman a los denominados Nucleosomas. Poseen una disposicin regular en glbulos; posee aspecto de collar de cuentas. Cada unidad tiene un dimetro de aproximadamente 10 nm. Tienen 4 tipos de histonas que forman un octmero, es decir, tienen histonas (H2a)2, (H2b)2, (H3)2, y (H4)2. Eso forma un ncleo o core alrededor del cual el DNA (146 pb) se enrollan en 1,7 a 2 vueltas poco apretadas. Estn interconectados por secuencias espaciadoras que tienen de 15 a 100 pares de bases donde se fija la H1 que es ms bsica ya que el 40,8% de sus Aa son bsicos de fcil remocin con soluciones salinas; cuando se renen 6 a 7 nucleosomas + regiones espaciadoras forman a la Cromatina, y luego la unin de toda la cromatina forma a los cromosomas. Entonces tenemos Nucleosomas que contienen las histonas mencionadas, se unen con otros nucleosomas a travs de regiones espaciadoras que contienen H1, luego la reunin de 6 a 7 nucleosomas forman la cromatina y la cromatina va a formar los cromosomas. DNA Nucleosomas Cromatina Cromosomas Genoma Tenemos al nucleosoma, la regin espaciadora, se renen, forman la cromatina, la cromatina se empaqueta y forma finalmente al cromosoma.

7 HISTONAS: Funcin Plegar o empaquetar al DNA formando su estructura cromosmica final. En la transcripcin del DNA puede requerir modificacin qumica de sus Aa: Fosforilacin, metilacin, acetilacin, ADP-ribosilacin y/o fijacin covalente (slo las H2) a la ubiquitina (protena nuclear) para disminuir la carga catinica total, y aflojar con ello, la interaccin de las histonas con el DNA. Esto conducir a una exposicin mayor y selectiva del DNA para la transcripcin. Cuando hablamos de transcripcin nos estamos refiriendo NO a toda la secuencia del DNA, sino a una secuencia en particular que se denomina Gen, ese gen es el que va a exponerse, es con el que la interaccin con la histona se hace ms flexible: se abre y permite la transcripcin. Cuando hablamos de duplicacin o replicacin es TODO el DNA. HISTONAS Posibles funciones de las histonas modificadas: La acetilacin de histonas H3 y H4 se relaciona con la activacin o desactivacin de la transcripcin de los genes. La acetilacin de las histonas centrales est vinculada con el ensamble cromosmico durante la replicacin del DNA. La Fosforilacin de la histona H1 se vincula con la condensacin de los cromosomas durante el ciclo de replicacin. La ADP-Ribosilacin de las histonas se relaciona con la reparacin del DNA. La metilacin de las histonas est relacionada con la activacin y la represin de la transcripcin de genes. Tipos de cromatina segn su actividad: I. Cromatina activa (eucromatina): contiene genes activos para la transcripcin cuya estructura nucleosmica de empaquetamiento parece estar alterada o ausente en las regiones sumamente activas que favorecen la transcripcin, prcticamente se encuentra muy floja la unin con la histona, o se encuentra desunida a la histona. Contiene grandes regiones sensibles a la digestin de la DNAasa I, es decir, que logran separar las histonas y el mismo DNA lo separan y lo mantienen aparte para que pueda ser transcrito o pueda ser replicado. Cromatina Inactiva (heterocromatina): es generalmente inactiva para la transcripcin y est empaquetada ms densamente durante la interfase. Existen dos tipos de heterocromatina: a. Constitutiva: siempre est condensada y por lo tanto inactiva, se halla en regiones cercanas al centrmero del cromosoma y en los extremos cromosmicos (telmeros), ellas se desempaquetan solamente cuando va a haber replicacin. b. Facultativa: en ocasiones est condensada, pero otras veces, es transcripta activamente y, por consiguiente no condensanda, apareciendo como eucromatina. Genoma humano Est constituido por 3,5x109 pares de bases de DNA que est subdividido en 23 cromosomas. Es haploide. Los cromosomas no son homogneos. El 13 y 21 tienen menos genes. Y de hecho, cada cromosoma tiene una informacin especfica que no es exactamente a lo que tiene el otro cromosoma, ya mencionamos que en el cromosoma 4 est el gen de la longevidad.

II.

8 Para el ao 2001 se culmin el proyecto genoma, lograron secuenciar toda la secuencia del DNA de los 23 pares de cromosomas, lo cual significa que sabemos dnde tenemos ubicado cada uno de nuestros genes, slo que hasta este momento no se conoce toda la informacin de qu hace cada gen. Cada genoma posee 3 mil millones de nucletidos. Slo el 1,5% forman secuencia de genes, de ellos aproximadamente 35.000 codifican protenas esenciales, esto rompe un paradigma que anteriormente se conoca: nosotros conocemos hoy por hoy ms de 100 mil protenas humanas diferentes, y uno de los paradigmas que se deca antes en la medicina gentica era que cada gen daba una protena (o que cada protena provena de un gen), por lo tanto anteriormente se deca que tenamos ms de 100 mil genes diferentes, pero la realidad demostr que s es cierto que existen ms de 100 mil protenas, pero que no existen ms all de 30 a 35 mil genes codificadores. Hoy en da se dice que un gen puede producir ms de una protena (puede codificar una secuencia de protenas), ms adelante veremos que ese gen contiene intrones y exones, los cuales permiten la separacin y rearreglo de este gen, lo cual puede dar origen a una protena diferente, o esta protena o secuencia que se est sintetizando en forma nativa inicial puede ser cortada en diferentes partes y da origen a diferentes protenas con diferentes funciones, as encontramos que ese gen puede dar origen a ms de una protena (que en promedio son 3 protenas por gen). Esto es una gran ventaja, si un gen genera normalmente 3 protenas esto hace que se optimice el recurso de produccin, entonces cuando miramos que solamente el 1,5 % posee genes, pero qu hace el resto del material gentico? Interviene en la regulacin de la transcripcin, en la conservacin de la estructura y diferenciacin de la especie. Ms adelante veremos que nosotros en esa estructura gentica contenemos genes que ya no est activos en nosotros pero que estn presentes en bacterias, plantas, animales pero que han sido adaptados a nosotros. Entonces, el resto (el otro 98,5%) tienen probable papel en los mecanismos regulatorios del metabolismo celular. La complejidad de la especie no est en relacin con el nmero de genes.

Genoma humano El DNA entre humanos es igual en un 99,9%; es decir nosotros somos iguales, tanto raza blanca como raza negra, ya que esas diferencias de ser negro o blanco es solo ese 0,1% de diferencia las cuales son a causa de las adaptaciones de los individuos al medio ambiente. Ms de 200 genes humanos ocurren en las bacterias. La gran similitud en el genoma de humanos, moscas, gusanos y bacterias provee evidencia para el origen comn de la vida; aunque existen pequeas diferencias entre humanos y no humanos. Cada gen puede codificar 3 protenas diferentes, contenido en un RNAm.

9 Comparacin de genomas

Las bacterias (escherichia coli) tiene un solo cromosoma y tiene aproximadamente 4.405 genes y de esos solo 200 se parecen al de los humanos. Los humanos somos un elemento aparentemente mayor en la escala de la evolucin, hemos evolucionado pero tenemos elementos cercanos a los otros que nos han provisto de esa informacin, nacimos todos aparentemente de una clula (todos los elementos vivientes ya sea animales o vegetales) y nos fuimos adaptando cada quien a su entorno, a su medio ambiente. Elemento de agua pasaron a la tierra y elementos de tierra pasaron al agua como las ballenas que son mamferos mas no peces pero viven en los ocanos, actualmente hay peces que se estn adaptando a la tierra, pueden pasar horas en tierra y luego regresarse al mar, y todos estos cambios son mecanismos de adaptacin que cuando son favorables, son recogidos genticamente y trasmitidos a la descendencia. En el caso de los ratones, tenemos ms o menos el mismo nmero de genes, claro sus cromosomas son un tanto diferentes y el total de DNA es diferente, pero genes que logran transmitir protenas son 30.000-35.000 (contienen menos genes por que han evolucionado menos que nosotros)

Comparacin de genomas Los humanos hemos recogido genes de todos los grupos anteriores de la escala, por eso estamos en la parte ms alta de la escala gentica. En el caso de los monos, tenemos igual 30.000-35.000 genes y somos casi 98% iguales. En ratones 70% En gusanos 23% De las moscas tenemos 60% Entre nosotros somos 0,1 a 0,2% diferentes. NO EXISTE RAZAS, decir raza blanca, negra es un error histrico y gentico. Replicacin o duplicacin del DNA

10 Debe suceder previamente al momento en que se separe la clula, finalmente en la mitosis sera separado completamente. Fue demostrada por Meselson y Stahl, 1957. Segn Watson y Crick ocurre en forma semi conservativa: cada una de las tiras madres sirve de molde para la sntesis de una tira hija que ir a la clula hija recin formada. La tira original (doble tira) se separa y se le adhiere a ella otra fibra anti paralela, si haba una timina se le agrega una adenina y si haba una citosina se le agrega una guanina y as sucesivamente de tal manera que al final se tiene 2 secuencias de DNA exactamente iguales a la original, por eso se dice que es una replicacin semi conservativa. Es de alta fidelidad para conservar la estabilidad del genoma.

Replicacin del DNA: FASES 1. Identificacin del origen de la replicacin. 2. Disociacin del DNA para proporcionar la tira molde. 3. Formacin de la horquilla de replicacin. 4. Inicio de la sntesis y elongacin. 5. Formacin de burbujas de replicacin 6. Reconstruccin de la estructura cromatnica. (cuando termina la replicacin) Replicacin DNA: IDENTIFICACION DEL ORIGEN Protenas enlazadoras identifican una secuencia especfica de DNA formando un complejo con 15-20 (pb) pares de enlaces. Estas protenas enlazadoras recorren el DNA hasta donde exactamente existe el sitio de origen y lo identifican y se pegan a l. Separacin de tiras de DNA en un lugar adyacente a la secuencia rica en adenina y timina, denomina secuencias autonmicas replicantes. Es en adenina (desoxiadenilato) y timina (desoxitimidinato) porque es ms fcil separarlo porque solo hay doble enlaces de hidrogeno. En E.coli chacol existe una protena especfica que identifica el E.coli c, esta protena identifica el sitio de inicio. Una vez identificado el sitio se va a disociar el DNA. Replicacin DNA: DISOCIACION PARA PROPORCIONAR LA TIRA MOLDE. Interaccin protena-protena y protena-DNA Accin de la HELICASA: se produce una escisin (separacin) procesada del DNA con requerimiento de ATP. Luego unas protenas ligadoras de tira nica estabilizan el complejo para que las tiras no vuelvan a unirse. Entonces se marca el sitio con una protena se identifica se separa un poco el DNA se mete una helicasa que separa como una tijera a la tira de DNA se pega a esa tira de DNA una protena ligadora de tira nica para que no se vuelvan a enrrollar (se mantengan separadas) = eso consume ATP en el caso de las HELICASAS despus de eso viene la accin de una primasa Replicacin del DNA: HOQUILLA DE REPLICACION, SINTESIS Y ELONGACION. Primasa es una enzima RNA polimerasa DNA dependiente, ella secuencia, agrega secuencias de RNA tomando como molde a DNA (polimerisa); sintetiza un fragmento corto de RNA denominado RNA cebador (tiene aproximadamente entre 10 a 200 pares bases). La primasa es una holoenzima la cual es capaz de reconocer y unirse al DNA en sitios de iniciacin especficos que son estructuras de 10 o ms restos ricos en bases pirimidinicas (Timina, Citocina). Tales sitios de iniciacin estn separados ampliamente en el DNA patrn. Luego de que actu esa polimerasa acta la enzima DNA Polimerasas III (denominada DNA polimerasa en clulas eucariotas) agrega DNA a continuacin del RNA cebador y forma el fragmento de OKAZAKI (RNA cebador

11 + la siguiente secuencia de DNA que se ha sintetizado por la DNA polimerasa III o DNA polimerasa en eucariotas) que tiene de 1000 a 2000 bases (procariotas) o 200 bases (eucariotas). Si se pregunta quien sintetiza al fragmento de OKAZAKI se dira que lo sintetiza la primasa o la RNA polimerasa DNA dependiente mas la DNA polimerasa. El RNA cebador lo sintetiza la polimerasa. DNA polimerasas: Procariotas

La DNA polimerasa I, la II y la II en clulas procariotas, en la bacteria E.coli La DNA polimerasa I tiene una actividad de exonucleasa de 35 y de 53, es la enzima reparadora de DNA por excelencia. La replicacin, la sntesis del DNA, la sntesis del RNA cebador se da en direccin 53 y la reparacin se puede hacer as o viceversa. La tasa de polimeracin de la polimerasa I se ubica aprox 16 a 20 nucletidos por segundo, es ms lenta por que recorre hacia adelante y hacia atrs. La tasa de la polimerasa III se ubica 250 a 1.000 nucletidos por segundo. Es ms rpida ya que solo tiene actividad exonucleasa de 3 5 ya que de 53 es la actividad que ella normalmente realiza, no es reparadora. La polimerasa II tiene una actividad tambin reparadora, no tiene actividad exonucleasa 53 por lo tanto no polimerisa, tambin es reparadora. Su velocidad de polimerizacin es de 40.

DNA polimerasa: eucariotas

POLIMERASA Pol FUNCION Contiene primasa Inicia sntesis de DNA, ya que en el caso de los humanos se une tanto la que produce el RNA cebador como la que produce la secuencia del DNA contenida en esa primasa. Repara Replica DNA mitocondrial Alarga las cadenas lideres y los fragmentos de OKASAKI Repara CORRECCION DE PRUEBAS (hacia delante y hacia atrs)

Pol Pol Pol Pol

+ + +