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Laboratório ThoMSon, Instituto de Química, Universidade Estadual de Campinas
alinneambrosio@gmail.com
O fungo Moniliophthora perniciosa é o agente causador da doença vassoura-de-bruxa do cacaueiro. Em menos de uma
década essa doença levou o Brasil de exportador a importador de cacau, constituindo um problema complexo para a
região da Bahia, maior produtora de cacau do país. Os sintomas característicos da vassoura-de-bruxa são a hiperplasia
e hipertrofia das células dando lugar aos tecidos anômalos chamados de vassoura, superbrotamento e aparecimento
de frutos partenocárpicos. Esse fenômeno pode ser conseqüência de desbalanço hormonal. Análises do genoma de M.
perniciosa sugerem que o fungo poderia estar produzindo giberelina. Se esta hipótese for comprovada experimentalmente,
explicaria muito dos eventos que acontecem durante a interação M. perniciosa-cacaueiro. Assim sendo, este trabalho tem
o objetivo de estudar a possibilidade de M. perniciosa produzir giberelina; assim como o possível papel desse hormônio
na progressão da doença; possibilitando o desenvolvimento de novas estratégias para intervenção tecnológica e controle
da doença vassoura-de-bruxa. Análises de seqüências no banco de dados do genoma de M. perniciosa mostraram a
presença de seqüências semelhantes à cada um dos genes que constituem a via de síntese de giberelina descrita em
fungos. Foi detectado um gene com similaridade ao gene que codifica a enzima bifuncional copalil difosfato sintase-
ent-caureno sintase (CPS-KS), específica da via de síntese de giberelinas. Análises de seqüência mostram que este gene
em M. perniciosa codifica uma proteína de 613 aminoácidos, sendo menor do que as CPS-KS descritas em fungos
ascomicetos. Buscas em genomas publicados de basidiomicetos não permitiram a identificação desse gene. Análise do
genoma do fungo Moniliophthora roreri permitiram a detecção de duas seqüências com similaridade com CPS-KS de
tamanho aproximado ao gene de M. perniciosa. Análises filogenéticas desse gene não permitiram fazer inferências sobre
a sua herança em M. perniciosa já que não agrupa com proteínas de plantas nem de ascomicetos. Isso provavelmente
porque o gênero Moniliophthora é o primeiro dos basidiomicetos em que esse gene é detectado. Fragmentos de três
dos genes putativos para a via de síntese de giberelina (geranilgeranildifosfato sintase, CPS-KS e GA4 desaturase) foram
amplificados a partir do DNA genômico e comprovada a identidade por sequenciamento. Foi verificada a expressão dos
três genes em estudo em duas fases do ciclo de vida do fungo (biotrófica-like e necrotrófica) mediante PCR a partir de
amostras de cDNA. Foi detectada a presença de uma substância com massa molecular semelhante à giberelina comercial
GA3 em amostras de sobrenadante de cultura do fungo na fase biotrófica-like a través da análise por cromatografia
de camada fina acoplada a espectrometria de massas. O conjunto de dados obtidos sugere que o fungo M. perniciosa
poderia produzir giberelina na fase biotrófica do seu ciclo de vida.
Órgão Financiador: Capes.
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