LA VANILLA Y LOS HONGOS FORMADORES DE MICORRIZAS

Nancy F. Ordoez* Mara C. Dez**(*) Joel T. Otero***

Resumen: La vainilla extrada naturalmente de los frutos curados de la orqudea Vanilla planifolia, es un compuesto aromatizante y saborizante ampliamente usado alrededor del mundo, sin embargo, hoy en da cerca del 90% del aroma de vainilla proviene de origen sinttico. El gnero Vanilla se distribuye tropicalmente, la mayora de ellas en Amricas y el cultivo de la vainilla se encuentra restringido a pocos paises. Naturalmente las orqudeas, se encuentran asociadas con hongos formadores de micorriza pertenecientes a la forma-gnero Rhizoctonia. En Vanilla se ha registrado la asociacin con la formagnero Rhizoctonia especficamente con el grupo Ceratobasidium propuesto adems como posible controlador de hongos patgenos. El cultivo de la vainilla con gran importancia econmica para varias industrias, debe contar con un mnimo conocimiento sobre el papel que juegan estas asociaciones ya sea en el mbito de la nutricin, o en la proteccin contra patgenos, para de esta forma lograr un crecimiento y vigor adecuado de las plantas y generar un mercado competitivo. Palabras Claves: Vanilla, Micorrizas, Endfitos, Orchidaceae, Nutricin, Colombia.

Origen de la esencia de vainilla

La vainilla es un compuesto aromatizante y saborizante ampliamente utilizado en la industria farmacutica, alimenticia y cosmtica alrededor del mundo (Buccellato 2011, Frenkel et al. 2011). En la actualidad generan entre 60 y 80 millones de dlares para los pases productores (Soto-Arenas & Dressler 2010). La esencia de vainilla es la mezcla de sustancias aromticas cuyo compuesto
* ** Univeridad Nacional de Colombia sede Medelln Calle 59A No 63-20 Ncleo El Volador Bloque 20. Medelln-Colombia. fiorela.oc@gmail.com Universidad Nacional de Colombia Sede Medelln. mcdiez@unal.edu.co jtoteroo@unal.edu.co ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

*** Univeridad Nacional de Colombia Sede Palmira. 56

dominante es la vainillina (4-hydroxy-3-methoxybenzaldehyde) que puede ser de sntesis qumica o de origen natural (Walton et al. 2003). A traves de procesos biotecnolgicos la vainilla puede ser sintetizada por microorganismos, enzimas o clulas en cultivo. Las dos fuentes ms comunes de la vainillina sinttica son: la lignina-vainillina, un subproducto de la industria del papel, que es tratada qumicamente para semejarse al sabor de la esencia de vainilla y la etil-vainillina, un derivado del alquitrn de hulla (Labuda 2011). Mientras que la esencia de vainilla natural se obtiene a partir del extracto de los frutos curados de la planta Vanilla planifolia Jacks (Orchidaceae). Cabe anotar que desde el momento de la floracin hasta el proceso de curado transcurre un periodo de aprox. 18 meses. Ver figura 1. Hoy en da, cerca del 90% del aroma de vainilla que se utiliza en todo el mundo proviene de origen sinttico, y slo un 10% es de origen natural; sin embargo, la vainilla sinttica an no se asemeja completamente y es poco competitiva con el perfil de sabor y aroma de vainilla natural.

Distribucin del gnero

El gnero Vanilla con 110 especies y de distribucin pantropical (entre los 27 de latitud norte y sur) pertenece a la familia Orchidaceae (Soto-Arenas & Dressler 2010). La mayora de ellas se encuentran en Amrica tropical, seguido por el sudeste de Asia y Nueva Guinea, frica, las islas del Ocano Indico y el Pacfico (Minoo et al. 2007, Bory et al. 2007) Ver Figura 2. V. planifolia, la especie de mayor importancia comercial, se distribuye desde Mxico hasta el sur de Suramrica (Grisoni et al. 2007, Minoo et al. 2007); tambin aparece en muchas referencias como V. fragrans. Otra especie menos conocida es la vainilla de las Indias Occidentales V. pompona Schiede que tambin tiene potencial en la extraccin de vainilla comercial pero en muy baja cantidad (Soto-Arenas & Dressler 2010). No todas las especies de Vanilla son aromticas, pues solo se reconocen unas 35 especies con esta caracterstica, la mayora de ellas con origen en Amrica tropical (Soto-Arenas 2003). En Colombia se ha reportado la presencia de especies del gnero Vanilla en casi todo el territorio nacional (Choc biogeogrfico, regin de la amazona, Costa Pacfica y Atlntica) y especficamente se reporta la presencia de V. planifolia en 12 lugares mediante el registro de muestras de herbario (Ordoez et al., 2011).

Breve recuento histrico

La historia de la vainilla en el mundo comenz con su descubrimiento por la cultura Maya en Mesoamrica, quienes desarrollaron los primeros mtodos de
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curado del fruto a partir de poblaciones naturales. Los frutos curados se mezclaban con resina de copal para perfumar los templos y los frutos verdes tenan varios usos medicinales (Bythrow 2005). Las propiedades medicinales se siguen explorando y acreditando en la actualidad (Bythrow 2005, Hgsater et al. 2005), entre las cuales se destacan su capacidad antioxidante (Burri 1989) y antimicrobial (Choo 2006, Fitzgerald et al. 2004, Walton et al. 2003) y mostrar actividad anti-metastsico e inhibir la carcinognesis qumica, dismuniyendo la invasividad de clulas cancerosas (Lirdprapamongkol et al. 2005) Luego, este conocimiento pas a los indgenas mexicanos de la cultura Azteca, quienes utilizaban la vainilla en una bebida sagrada conocida como chocolatl preparada con cacao, vainilla y miel. Entre ellos la vainilla lleg a ser tan importante que serva como moneda para transacciones, de hecho, los pueblos que conquistaban le deban pagar tributo al emperador Azteca con frutos de vainilla (Bythrow 2005). En el siglo XVI los conquistadores espaoles llevaron la vainilla a su pas quines dominaban la comercializacin de este producto a partir de la extraccin y el cultivo en Mxico. Desde Espaa se dispers a toda Europa, principalmente a los jardines botnicos donde se desarrollaron estudios sobre su horticultura (Peter 2004). Posteriormente, la vainilla fue introducida a las colonias francesas, inglesas y holandesas a finales del siglo XVIII y principios del siglo XIX en sitios como Reunin, Java, India, Tahit y las islas Seichelles, entre otros. Inicialmente los intentos por producir frutos de vainilla fuera de su lugar de origen fracasaron, debido a la carencia de los polinizadores naturales, las plantas florecan pero no fructificaban. En 1841 el esclavo Reuniosence Edmond Albius desarroll el mtodo de polinizacin manual, lo que permiti que se empezaran a extender los cultivos comerciales (Lucas 2011), gracias tambin a la facilidad de propagacin vegetativa de la especie (Damirn 2004). Despus de este desarrollo, los franceses comenzaron a cultivar Vanilla en muchas de sus islas, y lideraron su comercializacin a partir de zonas de produccin en el ocano ndico que continan siendo importantes en la actualidad (Smith 1992).

Produccin
El cultivo y produccin de esta orqudea tropical se encuentra restringida a pocos pases. Es una planta con una demanda especial de condiciones climticas y del suelo. De acuerdo con las estadsticas de la FAO (2012), hasta hace algunos aos Madagascar, era el principal pas productor de vainilla natural, pero est perdiendo su liderazgo frente a Indonesia en registros para el ao 2010. Se destaca el surgimiento de nuevas zonas de produccin en pases que no tenan la tradicin del cultivo como China y varios pases de frica. Aunque Mxico, fue el primer pas productor de frutos de vainilla, perdi hace mucho tiempo el liderazgo; sin
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Figura 1. Arriba izquierda: Flores. Arriba derecha: Frutos inmaduros. Abajo: Frutos curados de Vanilla planifolia.

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Figura 2. Mapa de distribucin del gnero Vanilla en el mundo.

Figura 3. Corte transversal de races terrestre de V. planifolia donde se observan pelotones en diferentes estados de formacin en clulas ubicadas en la corteza de la raz.

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embargo an tiene cultivos en la zona de Papantla (Veracruz), sobre el golfo de Mxico y an se encuentra dentro de los 10 pases productores (Tabla1).
Tabla 1. Pases importantes en la produccin de vainilla en el mundo ao 2010.

Regin Indonesia Madagascar China Mxico Turqua Tonga Comoras Polinesia Francesa Uganda Malawi

Produccin (T) 2400 1900 1300 395 270 200 66 60 30 20

Datos FAO (revisado Abril-2012) (T: Toneladas)

Aunque hasta el momento, los estudios realizados del gnero Vanilla se encuentran centrados hacia la parte de produccin y manejo en cultivo bajo condiciones de invernadero (Dignum et al. 2001, Fouch & Jouve 1999; Soto Arenas 2006, Odoux & Grisoni 2011) y manejo de los frutos curados (Dignum et al. 2001, Odoux 2011) se deberan considerar aspectos bsicos de su biologa, entre los que se incluye, interacciones que se presentan con otros organismos como las micorrizas y aspectos nutricionales. En Colombia, no se tienen investigaciones para este gnero, a pesar, que se tienen registros de la presencia de V. planifolia en los bosques de la regin del Choc (Ledezma et al. 2006, Misas 2005), en la Costa Atlntica, la regin de Urab, los valles interandinos y los bosques de la cuenca Amaznica, siendo hasta el momento un cultivo de tipo experimental.

Micorrizas de orqudeas
Las orqudeas al igual que el 80-92% de las plantas superiores forman asociaciones simbiticas de tipo micorrizas (del griego mycos: hongo rrihos: raz) (Wang &Qiu 2006). En el caso de la familia Orchidaceae, es un requerimiento fundamental por lo menos en los primeros estadios de la planta para el establecimiento en diferentes sustratos. En las semillas, es determinante para iniciar los procesos de germinacin, debido a que son extremadamente pequeas (0,4 1,25 mm
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de largo y 0,08-0,27 mm de ancho), carecen de endospermo, de cotiledones y presentan un embrin muy pequeo (Arditti 1992, Dressler 1981). Las semillas contienen pocas cantidades de protenas, lpidos, azcares y granos de almidn (Smith & Read 1997); sin embargo, estas pocas reservas no son suficientes para iniciar los procesos de germinacin por s solas. Los pelotones son las estructuras caractersticas de este tipo de micorriza, son estructuras miceliares que ocupan el espacio intracelular causando el desplazamiento de los organelos (Breddy 1991) y por lo general slo se ubican en la corteza de las races ( ver figura 3). Los pelotones intracelulares tienen un periodo de vida limitado en la interaccin con la micorriza, estudios en microscopia electrnica han revelado que durante la lisis (algunas veces llamada digestin) la hifa se convierte en una estructura desorganizada y sus paredes empiezan a adelgazarse formado finalmente una masa irregular y es en este momento donde se produce la trasferencia de nutrientes (Harley & Williamson 1971). Como consecuencia de estos procesos: colonizacin, lisis y transferencia de nutrientes, sumado a la capacidad de la mayora de las plantas de realizar fotosntesis se produce el crecimiento vegetal permitiendo un suministro continuo de nutrientes (Arditti 1992, Smith & Read 1997), estrategia que ha sido llamada mixotrofa (Sellose & Roy 2008). Estudios previos reportan que en orqudeas epfitas se encuentran una intensidad de colonizacin baja, comparado con las especies terrestres (Otero et al. 2002). As mismo, se han demostrado que en las races areas de las especies epfitas, generalmente, las zonas de colonizacin se localizan justo en las zonas donde la raz hace contacto con el rbol hospedero (Rasmussen 2002, Hadley & Williamson 1971, Porras-Alfaro & Bayman 2007). Sin embargo, estos estudios se han enfocado, principalmente, en orqudeas de zonas templadas a pesar que, el 90% de las especies de orqudeas epfitas se registran en las zonas tropicales y sub tropicales (Bayman et al. 2002). Muchos de los hongos endfitos conocidos de la micorriza orquidioide pertenecen a la clase Basidiomycetes, y por lo general se ha reportado la asociacin con la forma-genero Rhizoctonia (Ceratobasidiales, Exidiales, Tulasnellales) (Shen et al. 1998, Warcup & Talbot 1967, 1980, Otero et al. 2002, 2004, 2005). Sin embargo, Kottke et al.(2009) registra la existencia de un nuevo grupo Atractiellomicetes encontrado en 32 especies de 103 orquideas terrestre y epifitas evaluadas (31%). Rhizoctonia es un patgeno de distribucin mundial que ocasiona prdidas en la mayora de las plantas anuales y perennes incluyendo casi todos los cultivos horitcolas que se desarrollan dentro o sobre el suelo. Entre las enfermedades comnmente causadas por este patgeno est el llamado damping-off o marchitamiento de las plntulas y la podredumbre de las races. En contraste, para la familia Orchidaceae, la forma-gnero Rhizoctonia se ha reportado como el
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agente formador de micorrizas (Shen et al. 1998), y hasta el momento los hongos asociados a orqudeas presentan muy bajos indices de patogenicidad para el resto de los cultivos (Mosquera-Espinosa et al. 2010). La forma - gnero Rhizoctonia, forma en medios de cultivo un micelio estril blanco en colonias jvenes (1-10 das) y se torna amarillo o de color caf claro en colonias de ms de 20 das. El micelio consta de clulas largas y produce ramificaciones que crecen en ngulo recto respecto a la hifa principal (Shen et al. 1998, Warcup & Talbot 1967, 1980). Sin embargo, el micelio generalmente no presenta caracteres diferenciales suficientes que permitan la identificacin a nivel especfico (Shen et al. 1998). Las red de hifas o micelio externo tiene acceso a abundantes fuentes de carbono en el suelo que pueden ser asimilados y transportados a la orqudea. El hongo formador de micorriza puede obtener un suministro continuo de fotosintatos a partir de la asociacin existente con otras plantas del sistema, gracias a estas Redes Comunes de Micorrizas (Selosse et al. 2006), de esta forma pueden ser entregados nutrientes a las orqudeas gracias a la actividad fotosinttica de otras plantas que se encuentran a su alrededor y a la conexin existente con otro tipo de micorrizas (Smith & Read 1997, Selosse et al. 2006). Hasta el momento no se registran reportes de este tipo de conexiones para zonas tropicales del nuevo mundo, y slo se reporta un estudio realizado en Tailandia donde se encontr que todas las orqudeas estudiadas presentanban asociaciones con hongos ectomicorrizales tales como: Thelephoraceae, Russulaceae y Sebacidiales (Roy et al. 2009), propias de bosques de Dipterocarpaceae.

Micorrizas en Vainilla
El nico estudio, hasta el momento, en zonas tropicales en cuanto a asociaciones micorricicas de Vanilla se reporta en Puerto Rico (Porras-Alfaro & Bayman 2007). En este estudio la evaluacin en los porcentajes de colonizacin muestra que las races de suelo presentaban una alta tasa de colonizacin comparado con las races areas adheridas a la corteza de rboles (Figura 4B). Una caracterstica peculiar de las plantas de vainilla es que se han encontrado plantas vivas con ausencia total de races terrestres, demostrando que son facultativas o que no dependen enteramente de la asociacin con micorrizas para su supervivencia. Los micosimbiontes obtenidos en este estudio corresponden a la forma-gnero Rhizoctonia (Ceratobasidium, Thanatephorus y Tulasnella), en la evaluacin de las races se detectaron mltiples hongos en un mismo fragmento de raz, o en ocasiones en un mismo pelotn, esto posiblemente sugiere que diferentes grupos de hongos micorrizales cumplen diferentes funciones dentro de la planta.

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Uno de los principales motivos para el estudio de las micorrizas en vainilla, es la posibilidad que las micorrizas puedan proteger a las plantas del ataque de patgenos (Azcn-Aguilar & Barea, 1996). Por ejemplo, existen evidencias de que otros tipos de micorrizas pueden proteger a la planta de un ataque de patgenos donde la asociacion de hongos hipovirulentos del grupo Rhizoctonia (P .e Ceratobasidum) ha resultado ser exitoso en el biocontrol de una variedad de patgenos, incluyendo Fusarium (Gonzlez et al. 2006). Existen algunos mecanismos de accin para el biocontrol de patgenos, entre ellos se encuentran: i) inhibicin directa del crecimiento de patgeno, ii) competencia por nutrientes o espacio, iii) aumento en las defensas de la planta a travs de la produccin de factores de crecimiento o resistencia sistmica inducida y mejora en el estados nutricional haciendo a la planta menos suceptible al ataque de patgenos (Bayman et al. 2011). En muchas reas de cultivo, la vainilla es propagada a travs de esquejes de una misma planta, haciendo a los cultivos ms susceptible a cualquier patgeno que pueda afectar a ese genotipo en particular. La experimentacin con plantas de vainilla y diversas cepas de hongos hipovirulentos del grupo Rhizoctonia como Ceratobasidium, puede mejorar las condiciones adaptativas de las plantas frente a serios problemas como la prdida de la vigorosidad de las plantas debido al ataque de patgenos como Fusarium y Colletotrichum.

Perspectivas futuras
El manejo integral de los cultivos, en este caso vainilla, en el que hasta el momento no se ha tenido en cuenta aspectos fundamentales como el conocimiento de las relaciones que esta planta forma con microorganismos del suelo, ni el potencial de hongos antagonistas para el control de patgenos, y el papel que desempean en la nutricin; admas el desconocimiento en la diversidad de especies del gnero Vanilla y el potencial que stos presentan sobre todo en las caractersticas organolepticas del fruto, posiblemente ha desplazado a Colombia al ltimo lugar entre los pases potenciales en la produccin de este saborizante ampliamente usado en la industria. La implementacin de paquetes tecnolgicos en los que uno de los aspectos manejados adecuadamente sea la nutricin y las asociaciones que se presenten con microorganismo del suelo, especficamente organismos endfitos asociados a las races terrestres, ya que son ellos en gran medida los encargados de la translocacin de nutrientes, disponibilidad de ellos en el suelo, generacin de sustancias tiles en la defensa contra ataque de patgenos y herbvoros, tolerancia al estres da la posibilidad de poner en la vanguardia de la produccin a pases como Colombia que cuenta con unas condiciones climticas adecuadas.

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Es fundamental la financiacin de investigaciones es aspectos ecolgicos que debern producir resultados concretos en torno a un objetivo comn: crecimiento rpido y vigor de las plantas, preludio de la produccin de frutas de vainilla, adems, del efectivo conocimiento en el manejo adecuado e integrado del cultivo de la vainilla.

Agradecimientos
Los autores agradecen a la Universidad Nacional de Colombia sede Medelln y Palmira y al Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural por la financiacin de esta investigacin.

Bibliografa
ARDITTI, J. (1992). Fundaments of Orchids Biology. JhonWilley & Sons. Inc. USA. 691 p. AZCN-AGUILAR, C., & BAREA, J.M. (1996). Arbuscular mycorrhizas and biological control of soil-borne plant patrothogens an overview of the mechanisms involved. Mycorrhiza 6: 457-464. BAYMAN, P ., MOSQUERA-ESPINOSA, A.T. & PORRAS-ALFARO, A. (2011). Mycorhizal relationships of Vanilla and prospects for biocontrol of root rots. Pp. 266-280 in: D. Havkin-Frenkel & F. C. Belanger (eds)., Handbook of Vanilla Science and Technology. UK. Blackwell Publishing Ltd. BAYMAN, P ., OTERO, J.T. & ACKERMAN, J.D. (2002). Hidden Transactions: the curious relationships between orchids and fungi. American Orchid Society Bulletin 72(7): 536-537 BORY, S., GRISONI, M., DUVAL, M.F. & BESSE, P . (2007). Biodiversity and preservation of vanilla: present state of knowledge. Genetic Resources Crop Evolution (on line). BREDDY, N. (1991). Orchid Mycorrhiza and symbiotic raising techiniques. American Orchid Society Bulletin 60:556-569. BUCCELLATO, F. (2011). Vanilla in perfumery and beverage flavor. Pp. 235-240 in: D. Havkin-Frenkel & F. C. Belanger (eds)., Handbook of Vanilla Science and Technology. UK. Blackwell Publishing Ltd.

ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

65

BURRI, J., GRAF, M., LAMBELET, P . & LLIGER. J. (1989). Vanillin: more than a flavouring agent - a potent antioxidant. Journal of the Science of Food and Agriculture. 48:49-56 BYTHOW, J. D. (2005). Vanilla as a Medicinal Plant. Semin Int. Med. 3:129131 CHOO, J. H., RUKAYADI, Y. & HWANG, J. K. (2006). Inhibition of bacterial quorum sensing by vanilla extract. Letters in Applied Microbiology 42:637641. CORNELL, D. S. (1953). Vanilla, botany, history cultivation and economic importance. Economy Botany 7:291-358. MORENO F., & DEZ M.C. (2011). Cultivo de Vainilla: Contribuciones para el desarrollo de su cadena productiva en Colombia. Medelln-Colombia. DAMIRN, R. (2004). La vainilla y su cultivo. Veracruz Agrcola. Direccin General de Agricutura y Fitosanitaria, Gobierno del Estado de Veracruz, Mxico DIGNUM, M.J.W., KERLER, J. & VERPOORTE, R. (2001). Vanilla production: technological, chemical and a biosynthetic aspects. Food Reviews International 17(2): 199-219. DRESSLER, R. (1981). The Orchids Natural History and Classification. Smithsonian Institution. USA 332 p. FAO. Food and Agriculture Organization. (2012). FAOSTAT Website,http://faostat.fao.org/site/339/default.aspx, [consultado Abril de 2012]. FITZGERALD, D.J., STRATFORD, M., GASSON, M.J., UUCKERT, J., BOS, A. & NARBAD, A. (2004). Mode of Antimicrobial Action of Vanillin against Escherichia coli, Lactobacillus plantarum and Listeria innocua. J. Applied Microbiolology 97:104-113 FOUCH, J. G. & JOUVE, L. (1999). Vanilla planifolia: history, botany and culture in Reunion island. Agronomie 19: 689-703. FRENKEL, C., RANADINVE, A.S., TOCHIHUITL, J. & HAVKIN-FRENKEL. D. (2011). Curing of vanilla. Pp. 79-106 in: Havkin-Frenkel, D. & Belanger, F. C. (eds)., Handbook of Vanilla Science and Technology. UK. Blackwell Publishing Ltd. GONZLEZ, V., PORTAL, M.A., RUBIO, V. (2006). Review. Biology and Systematics of the form genus Rhizoctonia. Spanish Journal of Agricultural Research 4:55-79.
66 ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

GRISONI, M., BESE, P ., BORY, S., MOLES, M. DUVAL, M.F & KAHANA, R. (2007). Towards an international collection to maintain and characterize the endangered genetic resources of vanilla. In: Hummer Kim E. (ed.). Proceedings of the second international symposium on plant genetic resources of horticultural crops. ISHS. Louvain (Belgique) p. 83-90. International Horticultural Congress. 27, 2006-08-14/2006-08-18, Soul, Core HADLEY, G. & WILLIAMSON, B. (1971). Analysis of the post-infection growth stimulus in orchids mycorrhiza. New Phytologyst 70: 445-455. HGSATER, E., SOTO ARENAS, M.A., SALAZAR CHVEZ, G.A., JIMNEZ MACHORRO, R.L., LPEZ ROSAS, M.A. & DRESSLER, R.L. (2005). Orchids of Mexico. Productos Farmacuticos S.A. de C.V., Mexico City, Mexico. KOTTKE, I., SUREZ, J.P ., HERRERA, P ., CRUZ, D., BAUER, R., HAUG, I. & GARNICA, S. (2009). Atractiellomycetes belonging to the rust lineage (Pucciniomycotina) form mycorrhizae with terrestrial and epiphytic neotropical orchids. Proceedings of the Royal Society B :Biological Sciences :1-1 LADUDA, I. (2011). Biotchenology of vanillin: vanillin from microbial sources. Pp. 301-331 in: D. Havkin-Frenkel & Belanger F. C. (eds)., Handbook of Vanilla Science and Technology. UK. Blackwell Publishing Ltd. LEDEZMA, E., RAMREZ, G. & PINO-BENTEZ, N. (2006). Forest orchids of the Choco region. Lyonia 10 (1). 17-31. LIRDPRAPAMONGKOL K., SAKURAI, H., KAWASAKI, N., CHOO, M.K., SAITOH, Y., AOZUKA, Y., SINGHIRUNNUSORN, P ., RUCHIRAWAT, S., SVASTI, J. & SAIKI, I. (2005). Vanillin suppresses in vitro invasion and in vivo metastasis of mouse breast cancer cells. European Journal of Pharmaceutical Sciences 25 (1): 57-65 LUCAS, R. (2011). Vanillas debt to Reunion Island. In: Odoux, E. & M. Grisoni. 2011. Medicinal and Aromatic Plants- Indutrial Profiles. Volume. 47. Vanilla. CRC Press. USA. MINOO, D., JAYAKUMAR, V.N., VEENA, S.S., VIMALA, J., BASHA, A. SAJI, K.V., NORMAL BABU, K. & METER, K.V. (2007). Genetic variations and interrelationships in Vanilla planifolia and few related species as expressed by RAPD polymorphism. Genetic Resources and crop evolution (on line). MISAS, G. (2005). Orqudeas de la Serrana del Baud, Choc- Colombia. ConCreto.

ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

67

MOSQUERA-ESPINOSA A.T., BAYMAN, P . & OTERO, J.T. (2010). Ceratobasidium como hongo micorrzico de orqudeas en Colombia. Acta Agronmica 59: 316-326. ODOUX, E. (2011). Vainilla Curing. Chapter 11. In: Odoux, E. & M. Grisoni. 2011. Medicinal andAromaticPlants- IndutrialProfiles. Volume. 47. Vanilla. CRC Press. USA. ODOUX, E. & GRISONI, M. (2011). Medicinal and Aromatic Plants- Indutrial Profiles. Volume. 47. Vanilla. CRC Press. USA. OTERO, J. T., BAYMAN, P . & ACKERMAN, J. D. (2005). Variation in mycorrhizal performance in the epiphytic orchid Tolumnia variegata in vitro: The potential for natural selection. Evolution Ecology 19: 2943. OTERO, J.T., ACKERMAN, J. & BAYMAN, P . (2002). Diversity and host specificity of mycorrhizal fungi from tropical orchids. American Journal of Botany 89(11): 18521858. OTERO, J.T., ACKERMAN, J. & BAYMAN, P . (2004). Differences in mycorrhizal preferences between two tropical orchids. Molecular Ecology 13: 23932404. PETER, K.V. (2004). Handbook of herbs and species. Vol. 2. CRC Press, Woodhead Publishing Limited, Cambridge, England. PORRAS-ALFARO, A. & BAYMAN, P . (2007). Mycorrhizal fungi of Vanilla: diversity, specififity and effects on seed germination and plant growth. Mycologia 99(4) : 510-525. RASMUSSEN, H.N (1990). Cell differentation and mycorrhizal infection in Dactylorhizamajalis (Rchb. F.) Hunt &Summerrh. (Orchidaceae) during germination in vitro. New Phytologyst. 116:137-147. RASMUSSEN, H.N. (2002). Recent developments in the study of orchid mycorrhiza. Plant & Soil 244: 149-163. ROY, M., WATTHANA, S., STIER, A., RICHARD, F., VESSABUTR, S. & SELOSSE, M.A. (2009). Two mycoheterotrophic orchids from Thailand tropical dipterocarpaceae forest associate with a broad Diversity of ectomycorrhizal fungi. BCM Biology 7: 51. SELOSSE, M., RICHARD, F., HE, X. & SIMARD, S. (2006). Mycorrhizal Networks: des liaisons dangereuses?. Trends Ecolology and Evolution 21:621-628.

68

ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

SELOSSE, M. & ROY, M. (2008). Green plants that feed on fungi: facts and questions about mixotrophy. Trends in Plant Science. 14:64-70. SMITH, N.J.H, WILLIAMS, J.T., PLUCKNETT, D.L. & TALBOT, J.P . (1992). Tropical forests and their crops. Cornell University Press, Ithaca, New York, USA. SMITH, S & READ, D. (1997). Mycorrhizal simbiosis. 2da edicin. Academic Press. Cambridge. Pp 349-375. SNEH, B., BURPEE, L., & OGOSHI, A. (1998). Identification of Rhizoctonia species. The american Phytopatrhological Society. USA 135 p. SOTO-ARENAS, M.A. & DRESSLER, R. (2010). A revision of the mexican and american species of Vanilla Plumier Ex Miller with a characterization of their ITS region of the nuclear ribosomal DNA. Lankersteriana 9(3): 285354. SOTO-ARENAS, M.A. (2003). Vanilla. In: Pridgeon A. M.,P .J. Cribb,M.W. Chase, F.N. Rasmussen. (eds.) Genera orchidacearum: Orchidoideae. Oxford UniversityPress, USA. SOTO-ARENAS, M.A. (2006). La Vainilla: Retos y Perspectivas de su Cultivo. Biodiversitas 66: 1-8. WALTON, N.J., MAYER, M.J. & NARBAD, A. (2003). Molecules of interest Vanillin. Phytochemistry 63: 505-515. WANG, B. & QIU, Y.L. (2006). Phylogenetic distribution and evolution of mycorrhizas in land plants. Mycorrhiza. 16(5): 299-363. WARCUP , J.H. & TALBOT, P .H.B. (1967). Perfect estates of Rhizoctonias associated with orchids. New Phytologist 66: 631-641. WARCUP , J.H. & TALBOT, P .H.B. (1980). Perfect states of Rhizoctonias associated with orchids III. New Phytologist 86: 267-272.

ORQUIDEOLOGA XXIX(1), 2012

69