Faculdade de Cincias da Universidade de Lisboa

Enzimologia

- ARTIGO DE REVISO -

Understanding allosteric and cooperative interactions in enzymes

Athel Cornish-Bowden 2013 FEBS Journal

A alosteria e cooperatividade so dois conceitos discutidos desde os primeiros estudos sobre enzimas. Desde as primeiras observaes de Henri no invertase e posteriores desenvolvimentos por Michaelis e seus colaboradores, muitas ideias gerais sobre inibio enzimtica tm sido discutidas ao longo dos anos. As observaes mais primordiais assumiam que o inibidor era estruturalmente semelhante a, pelo menos, um dos reagentes, para que pudesse interagir directamente com o centro activo do enzima. No entanto, a descoberta da inibio por feedback por Umbarger, Yates e Pardee, em 1956, anulou este pr-requisito, uma vez que mostrou que os inibidores podiam desempenhar papis fisiolgicos independentemente de serem ou no estruturalmente idnticos s molculas envolvidas na reaco. Outros conceitos foram surgindo com ao longo dos anos, nomeadamente o de activao alostrica, que mostra que um nico efector pode actuar em reaces opostas em direces opostas (como, por exemplo, o AMP na regulao coordenada da gliclise e da gluconeognese). Observaes como estas eram difceis de explicar em termos das ideias clssicas de catlise enzimtica. Surge, ento, a primeira explicao satisfatria com o conceito de centro alostrico, como sendo um local distinto do centro activo do enzima onde uma molcula reguladora se pode ligar. Em 1935, para explicar a cooperatividade da ligao do oxignio hemoglobina, Pauling diz que os locais de ligao tm que estar prximos o suficiente para que possam interagir electronicamente. No entanto, com a publicao da estrutura tridimensional da Hb, afasta-se esta ideia da proximidade dos centros e comea a dar-se grande nfase mobilidade conformacional como explicao de vrias propriedades dos enzimas. Surge, ento, a teoria do encaixe induzido proposta por Koshland, que permitiu explicar alosteria e cooperatividade como efeitos distncia: uma protena combina rigidez com flexibilidade de forma controlada e propositada, ou seja, uma mudana conformacional induzida pela ligao do substrato num local pode ser comunicada a outro que se encontre a vrios nanmetros de distncia. A regulao conformacional torna-se ento um ponto central na investigao da regulao enzimtica e, em 1965, Monod, Changeux e Wyman publicam o modelo simtrico ou concertado. No entanto, este modelo no capaz de explicar em concreto cooperatividade negativa e o conceito de simetria conformacional difcil de explicar em termos estruturais. Estas e outras crticas levaram generalizao do modelo do encaixe induzido, por Koshland, Nmethy e Filmer. Cristiana Gonalves da Costa Santos 1

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Surge o modelo sequencial, que permite postular a cooperatividade como uma propriedade de cada subunidade, ou seja, como uma alterao conformacional induzida pela ligao de ligandos a subunidades vizinhas. Apesar destes modelos terem quase 50 anos, continuam a ser essenciais no compreender da regulao enzimtica, sendo que o modelo simtrico de MWC , sem dvida, o mais citado e utilizado pelos bioqumicos. No entanto, no so capazes de explicar como que a ligao de um ligando ou a sua modificao levam aos consequentes efeitos alostricos a nvel atmico. Estudos futuros iro envolver modelos nos quais o encaixe induzido ou a simetria conformacional no sejam assumidos, mas sim derivem automaticamente do mecanismo. Interessa ainda referir que existem paralelos entre os modelos clssicos de cooperatividade e a natureza da evoluo, quer por seleco natural, quer por processos Lamarckianos. O modelo sequencial e, em particular, a teoria do encaixe induzido, assumem um processo Lamarckiano, nos quais o ligando d instrues protena sobre qual conformao esta dever adoptar, ao passo que, no modelo simtrico, o ligando que escolhe uma das conformaes pr-existentes.

Cristiana Gonalves da Costa Santos