Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria

Espectroscopia de Ressonncia Magn

Espectroscopia de Ressonncia Magn

tica Nuclear
tica Nuclear

RMN
RMN
Fundamentos e princ
Fundamentos e princ

pios b
pios b

sicos de an
sicos de an

lise estrutural por RMN

lise estrutural por RMN
1 1
H e
H e
13 13
C
C
Faculdade de Farmcia da Universidade do Porto Faculdade de Farmcia da Universidade do Porto - - Abril, 2003 Abril, 2003
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Sum
Sum

rio
rio
Espectroscopia de ressonncia magn Espectroscopia de ressonncia magn tica nuclear (RMN). Princ tica nuclear (RMN). Princ pios b pios b sicos. sicos.
- - RMN de RMN de
1 1
H H
- - o o spin spin nuclear e o efeito nele provocado pelas ondas de r nuclear e o efeito nele provocado pelas ondas de r dio dio
- - n n cleos de cleos de alguns tomos que possuem caractersticas magnticas alguns tomos que possuem caractersticas magnticas
- - o uso do espectro RMN para analisar a estrutura molecular o uso do espectro RMN para analisar a estrutura molecular
- - o desvio qumico o desvio qumico
- - grupos funcionais e desvio qumico grupos funcionais e desvio qumico
- - integra integra o o versus versus n n de hidrog de hidrog nios que do origem a um pico de RMN nios que do origem a um pico de RMN
- - multiplicidade dos sinais de RMN. desdobramento multiplicidade dos sinais de RMN. desdobramento spin spin- -spin spin
- - o efeito dos hidrognios vizinhos o efeito dos hidrognios vizinhos no no- -equivalentes equivalentes
- - curva de curva de Karplus Karplus. constante de acoplamento . constante de acoplamento vs vs ngulo diedro ngulo diedro
- - regra n+1 regra n+1
- - desdobramento desdobramento spin spin- -spin spin de grupos alquilo comuns de grupos alquilo comuns
- - RMN de RMN de
13 13
C C
- - utilizao se um istopo de baixa abundncia natural utilizao se um istopo de baixa abundncia natural
- - ausncia de acoplamento ausncia de acoplamento carbono carbono- -carbono carbono
- - total total proton proton decoupling decoupling. desacoplamento . desacoplamento de hidrognio de hidrognio
- - tcnicas especiais de RMN (DEPT tcnicas especiais de RMN (DEPT
13 13
C e RMN C e RMN- -2D) 2D)
- - FID / Transformadas de FID / Transformadas de Fourier Fourier (FT) (FT)
- - DEPT DEPT
13 13
C RMN ( C RMN (Distortionless Distortionless Enhanced Enhanced Polarization Polarization Transfer Transfer) )
- - RMN RMN- -2D (bidimensional) 2D (bidimensional)
- - RMN de Correlao: COSY e HETECOR RMN de Correlao: COSY e HETECOR
- - IRM IRM imagiologia imagiologia de ressonncia magntica de ressonncia magntica
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
a espectroscopia de RMN utiliza como fonte de excita a espectroscopia de RMN utiliza como fonte de excita o uma radia o uma radia o o
electromagn electromagn tica da regio da radiofrequncias (on tica da regio da radiofrequncias (ondas r das r dio) dio) =100 mm =100 mm 1m 1m
Pores do espectro da radiao electromagntica Pores do espectro da radiao electromagntica
E = E = h h = c/ = c/ = 1/ = 1/
E = 10 E = 10
- -6 6
Kcal/ Kcal/mol mol
as ondas de r as ondas de r dio produzem altera dio produzem altera es no alinhamento do es no alinhamento do spin spin magn magn tico tico
nuclear nuclear em n em n cleos sujeitos a um campo magn cleos sujeitos a um campo magn tico tico
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Ncleos de alguns tomos que possuem caractersticas magnticas Ncleos de alguns tomos que possuem caractersticas magnticas
- - ncleos com nmero mpar de protes (exemplos: ncleos com nmero mpar de protes (exemplos:
1 1
H, H,
14 14
N, N,
19 19
F e F e
31 31
P) P)
- - ncleos com nmero mpar de neutres (exemplos: ncleos com nmero mpar de neutres (exemplos:
13 13
C) C)
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria

Os ncleos de
Os ncleos de
1 1
H
H
e de
e de
13 13
C
C
e a sua ressonncia magntica,
e a sua ressonncia magntica,
constituem uma
constituem uma
das mais importantes ferramentas em Qumica Orgnica.
das mais importantes ferramentas em Qumica Orgnica.

Os ncleos de
Os ncleos de
14 14
N
N
e
e
31 31
P
P
so teis como sondas para o estudo biolgico e
so teis como sondas para o estudo biolgico e
bioqumico de
bioqumico de
aminocidos
aminocidos
, protenas e sistemas
, protenas e sistemas
enzimticos
enzimticos
.
.
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Os ncleos magneticamente activos possuem Os ncleos magneticamente activos possuem spin spin e comportam e comportam- -se como pequenas barras magnticas se como pequenas barras magnticas
orientando, na ausncia de um campo magntico, os seus plos N/S orientando, na ausncia de um campo magntico, os seus plos N/S aleatoriamente no espao aleatoriamente no espao (A) (A). .
quando sujeitos a um campo magntico H quando sujeitos a um campo magntico H
0 0
do espectrmetro de RMN, os ncleos alinham os seus do espectrmetro de RMN, os ncleos alinham os seus polos polos
magnticos no mesmo sentido ( magnticos no mesmo sentido ( ) e no sentido contrrio ( ) e no sentido contrrio ( ) aos do campo H ) aos do campo H
0 0
em igual probabilidade em igual probabilidade (B) (B). .
energia de energia de < <
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
a irradia a irradia o, cont o, cont nua ou pulsada, dos n nua ou pulsada, dos n cleos com uma radiofrequncia de energia vari cleos com uma radiofrequncia de energia vari vel, vel, E = E = h h , ,
leva leva absor absor o dessa energia pelos n o dessa energia pelos n cleos cleos , invertendo o seu , invertendo o seu spin spin magn magn tico para o estado tico para o estado . .
este fen este fen meno designa meno designa- -se por ressonncia e se por ressonncia e a energia absorvida pelos n a energia absorvida pelos n cleos, ou emitida ap cleos, ou emitida ap s a s a
sua relaxa sua relaxa o para o estado fundamental, que origina o sinal RMN o para o estado fundamental, que origina o sinal RMN . .
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
O uso do espectro de RMN para analisar a estrutura molecular O uso do espectro de RMN para analisar a estrutura molecular
"A posio de um sinal de RMN depende do ambiente electrnico do "A posio de um sinal de RMN depende do ambiente electrnico do ncleo" ncleo"
Increasing Increasing field field strength strength ( (radiofrequency radiofrequency constant constant) )
Decreasing Decreasing radiofrequency radiofrequency ( (H H
0 0
constant constant) )
- - um proto livre no perturbado por electres um proto livre no perturbado por electres
- - um proto ligado perturbado pelos electres que o rodeiam um proto ligado perturbado pelos electres que o rodeiam
" "Uma vez que cada hidrognio quimicamente diferente tem um ambi Uma vez que cada hidrognio quimicamente diferente tem um ambiente ente
electrnico nico, ele tem uma ressonncia caracterstica" electrnico nico, ele tem uma ressonncia caracterstica"
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
"Hidrognios quimicamente equivalentes originam picos na mesma p "Hidrognios quimicamente equivalentes originam picos na mesma posio" osio"
O desvio qumico descreve a posio do pico de RMN O desvio qumico descreve a posio do pico de RMN
- - a posio das absores de RMN de um composto medem a posio das absores de RMN de um composto medem- -se relativamente a um padro interno (CH se relativamente a um padro interno (CH
3 3
) )
4 4
Si Si
O desvio qumico O desvio qumico
= distncia do pico do (CH = distncia do pico do (CH
3 3
) )
4 4
Si ( Si (Hertz Hertz)/frequncia do espectrmetro ( )/frequncia do espectrmetro (MHz MHz) ) ppm ppm
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Os grupos funcionais tm desvios qumicos caractersticos Os grupos funcionais tm desvios qumicos caractersticos
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Um hidrognio prximo de um grupo ou tomo Um hidrognio prximo de um grupo ou tomo retirador retirador de electres (halognio ou de electres (halognio ou
oxignio) desviado para menor campo devido desproteco prov oxignio) desviado para menor campo devido desproteco provocada pela ocada pela
electronegatividade do tomo. electronegatividade do tomo.
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria

Se o
Se o
desvio qumico
desvio qumico
d informaes sobre o ambiente electrnico de um
d informaes sobre o ambiente electrnico de um
determinado tipo de protes,
determinado tipo de protes,

A
A
integrao
integrao
revela o nmero de protes responsvel por um pico
revela o nmero de protes responsvel por um pico
de RMN.
de RMN.
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
A A integrao integrao revela o revela o n n de hidrognios responsvel por um pico de RMN de hidrognios responsvel por um pico de RMN
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria

Alm do
Alm do
desvio qumico
desvio qumico
e da
e da
integrao
integrao
,
,

a forma dos sinais (

a forma dos sinais (
multiplicidade
multiplicidade
)
)

oferece toda a informao sobre a vizinhana dos protes em est

oferece toda a informao sobre a vizinhana dos protes em est
udo.
udo.
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Multiplicidade dos sinais de RMN
Desdobramento spin-spin. O efeito dos hidrognios vizinhos no equivalentes
- 4 absores (4 tipos de hidrognios)
- multipletos: - um tripleto (6 H)
- um quarteto (4 H)
- dois dupletos (1 H)
regra n+1
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Um hidrognio situado num carbono adjacente ao carbono que possu Um hidrognio situado num carbono adjacente ao carbono que possui o hidrognio i o hidrognio
em anlise, desdobra o sinal deste ltimo num em anlise, desdobra o sinal deste ltimo num dupleto dupleto
H H
a a
exibe um exibe um dupleto dupleto (1:1) (1:1)
H H
b b
exibe um exibe um dupleto dupleto (1:1) (1:1)
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
H H
a a
integrao integrao = 1 = 1
H H
b b
integrao integrao = 1 = 1
Constante de acoplamento Constante de acoplamento ( (J J
ab ab
=7Hz) =7Hz)
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Curva de Karplus
Constante de acoplamento vs ngulo diedro
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
H
d
exibe um tripleto (1:2:1)
H
d
integrao = 6
Constante de acoplamento (J
cd
=8Hz)
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
H H
c c
exibe um quarteto exibe um quarteto (1:3:3:1) (1:3:3:1)
H H
c c
integrao integrao = 4 = 4
Constante de acoplamento Constante de acoplamento ( (J J
cd cd
=8Hz) =8Hz)
NOTAS: NOTAS:
- - os ncleos de hidrognio separados por mais do que dois tomos d os ncleos de hidrognio separados por mais do que dois tomos de carbono no exibem geralmente e carbono no exibem geralmente
desdobramento desdobramento spin spin- -spin spin
- - os sinais de RMN de ncleos com desvio qumico equivalente no e os sinais de RMN de ncleos com desvio qumico equivalente no exibem desdobramento xibem desdobramento spin spin- -spin spin
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Exemplo: Exemplo:
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Regra n + 1 Regra n + 1 para o desdobramento para o desdobramento spin spin- -spin spin
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Desdobramento Desdobramento spin spin- -spin spin de grupos alquilo comuns de grupos alquilo comuns
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Espectroscopia de Ressonncia Magn
Espectroscopia de Ressonncia Magn

tica Nuclear de Carbono 13

tica Nuclear de Carbono 13
13 13
C RMN
C RMN
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Ressonncia Magntica Nuclear de Carbono 13 ( Ressonncia Magntica Nuclear de Carbono 13 (
13 13
C RMN) C RMN)
Utiliza um istopo de baixa abundncia natural Utiliza um istopo de baixa abundncia natural
13 13
C (1.11%) C (1.11%)
- - espectro com sinais mais fracos que os de hidrognio: espectro com sinais mais fracos que os de hidrognio:
- - baixa abundncia do baixa abundncia do
13 13
C C
- - fraca ressonncia do fraca ressonncia do
13 13
C C
- - desvio qumico determinado relativamente a um padro interno (CH desvio qumico determinado relativamente a um padro interno (CH
3 3
) )
4 4
Si Si
- - regio alargada de desvio qumico (200 regio alargada de desvio qumico (200 ppm ppm) )
- - ausncia de acoplamento ausncia de acoplamento carbono carbono- -carbono carbono
- - presena de acoplamento presena de acoplamento carbono carbono- -hidrognio hidrognio
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
Total Total Proton Proton Decoupling Decoupling
O desacoplamento de hidrognio origina linhas isoladas O desacoplamento de hidrognio origina linhas isoladas
"Cada carbono magneticamente diferente d origem apenas a um s "Cada carbono magneticamente diferente d origem apenas a um s pico pico
no espectro de no espectro de
13 13
C RMN" C RMN"
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Exemplo Exemplo: : Metilciclo Metilciclo- -hexano hexano
Num espectro de Num espectro de
13 13
C no possvel a integrao C no possvel a integrao
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Tcnicas especiais de RMN (DEPT Tcnicas especiais de RMN (DEPT
13 13
C e RMN C e RMN- -2D) 2D)
FID FID / Transformadas de / Transformadas de Fourier Fourier ( (FT FT) )
Aco de Formao em Espectroscopia e Aco de Formao em Espectroscopia e Espectrometria Espectrometria
DEPT DEPT
13 13
C RMN ( C RMN (D Distortionless istortionless E Enhanced nhanced P Polarization olarization T Transfer ransfer) )
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RMN-2D (bidimensional)
RMN de Correlao: COSY e HETECOR
COSY correlation spectroscopy
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HETECOR heteronuclear correlation spectroscopy
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I RM I RM imagiologia imagiologia de ressonncia magntica de ressonncia magntica
a espectroscopia de IRM baseia a espectroscopia de IRM baseia- -se na anlise dos protes das molculas da gua ligada aos tecid se na anlise dos protes das molculas da gua ligada aos tecidos os
os tempos de relaxao os tempos de relaxao T T
1 1
e e T T
2 2
dos protes variam com o diferente tipo de tecidos dos protes variam com o diferente tipo de tecidos