Apuntes Homeostasis Celular 2013

Homeostasis celular Dra.
Cremer-
La vida constituye una nica funcin, que queda a cargo del organismo completo como un todo. Sin embargo, las partes constituyentes, las clulas, son autnomas. A su vez, la funcin de las partes autnomas encuentran sentido en su integracin con el organismo completo.
Claude Bernard
La homeostasis celular es esencial para el funcionamiento del organismo

Las clulas consideradas como sistemas complejos abiertos se autorregulan, autoorganizan e intercambian materia y energa con el medio que la rodea, por ello la composicin del medio interno debe mantenerse dentro de lmites muy estrechos, o rangos fisiolgicos, por ello el trmino homeostasis se extiende a sus mecanismos de control y regulacin precisa de las condiciones del citosol.
La membrana celular: el lmite funcional entre el compartimiento intracelular y extracelular

La membrana que rodea cada clula determina los compartimentos intracelular y extracelular, y cada compartimiento est definido por el volumen de agua y la masa de solutos que contiene. En un individuo adulto, de 70 kg de peso, el agua corporal total se estima equivalente a un 60-65% del peso corporal, que equivaldra a unos 40-45 litros. Este porcentaje cambia en funcin de la edad, sexo y estructura corporal, por ejemplo en un individuo obeso es del 50% porque el tejido adiposo contiene menos agua que el tejido magro, y en las mujeres tambin porque es ms abundante el tejido adiposo subcutneo. las clulas del cuerpo, y representa entre el 3040% del peso corporal. Este LIC se suele imaginar como una solucin diluida, pero la fraccin del citoplasma no ocupada por organelas es un sistema coloidal, y por esta razn se denomina citosol. El citosol tiene una alta concentracin de protenas que causa un fenmeno conocido como hacinamiento molecular que obstaculiza la difusin, esto puede generar diferencias de concentracin de los solutos entre diferentes partes de la clula. Los componentes principales del LIC son el catin potasio y los aniones proteinatos. El LEC est constituido por dos subcompartimientos principales, el intravascular que contiene el volumen plasmstico (5% de la masa corporal), y el extravascular que contiene al lquido intersticial (que representa cerca del 15%), ambos se encuentran separados entre s por el endotelio capilar. Existen subcompartimientos menores del LEC, la linfa y el lquido transcelular (13% de la masa corporal cada uno). El compartimiento denominado transcelular incluye los lquidos cefalorraqudeo, sinovial, intraocular, del sistema genitourinario y de espacios serosos (peritoneal, pleural y pericrdico). Los componentes principales del LEC son el catin sodio, y los aniones cloro y bicarbonato, la composicin de las subdivisiones plasma y lquido intersticial difieren slo por las protenas presentes en el plasma. Tanto el LEC como el LIC mantienen estables las concentraciones de sus componentes dentro de cada compartimiento, y la dismil constitucin repercute tanto en la composicin electroltica como en la
Fig.1 Distribucin e compartimientos lquidos
intercambio
de
agua
en
los
El volumen de agua corporal total puede ser cuantificado (ver Recuadro N1), y tambin el de sus dos compartimientos principales, el compartimiento del lquido intracelular (LIC) y el compartimiento del lquido extracelular (LEC). El LIC est constituido por la suma del volumen de agua existente en la totalidad de
Homeostasis celular Dra. Cremer-
composicin osmtica. Si se observa la Fig.2 se puede deducir que: - a pesar que el LIC y el LEC tienen distinta composicin poseen la misma osmolaridad (29010 mOsm/l). Cabe mencionar que la osmolaridad del plasma es slo 1 2 mOsm/l mayor que la del lquido intersticial, por la presencia de las protenas; pero esta diferencia no se observa entre el intersticio y el LIC (que tambin posee protenas). Gracias al constante gasto de energa de la bomba Na/K-ATPasa que transporta 3 Na+ hacia el exterior y 2 K+ al interior celular se evita que la osmolaridad del LIC exceda la del intersticio. - el plasma, el lquido intersticial y el LIC son isosmticos, ya que tanto el endotelio como la membrana celular son permeables al agua, permitiendo que se llegue al equilibrio osmtico.
- cada compartimiento mantiene su electroneutralidad, ya que la suma de los cationes es igual a la suma de los aniones dentro de cada uno de ellos, siendo la concentracin total de equivalentes de carga mayor en el LIC que en el LEC por la presencia de protenas. La estabilidad del volumen y composicin de estos compartimientos se mantiene por mecanismos sistmicos que garantizan la adecuada homeostasis hidroelectroltica del LEC, a pesar de las grandes modificaciones que diariamente se manifiestan en los ingresos y egresos de agua y solutos, y por mecanismos celulares que mantienen la homeostasis celular ante los cambios en el LEC.
300 mOsm/l
K+ 140 mOsm/l HPO-3 11 mOsm/l Mg++ 20 mOsm/l HCO310 mOsm/l Cl 4 mOsm/l Na+ 15 mOsm/l Ca++ 1 mOsm/l Protenas 16g/dl= 4mOsm/l Glucosa 10mg/dl=0.64mOsm/l Urea 4mOsm/l Otros Creatina, ATP, 99mOsm/l
301 mOsm/l
K+ HPO-3 Mg++ HCO3ClNa+ Ca++ Protenas Glucosa Urea Otros 4,2 mOsm/l 2 mOsm/l 0.8 mOsm/l 24 mOsm/l 102 mOsm/l 142 mOsm/l 1.5 mOsm/l 2g/dl= 1.2 mOsm/l 90mg/dl=5mOsm/l 15 mg/dl=4mOsm/l 20 mOsm/l
300 mOsm/l
K+ HPO-3 Mg++ HCO3ClNa+ Ca++ Protenas Glucosa Urea Otros 4 mOsm/l 2 mOsm/l 0.7 mOsm/l 27 mOsm/l 113 mOsm/l 148 mOsm/l 1.2 mmol/l 0.1g%=0.2 mOsm/l 90 mg/dl=5mOsm/l 4mOsm/l 20 mOsm/l
Fig.2: Composicin de los compartimientos lquidos
Recuadro N1
Cuantificacin del volumen y composicin de los compartimientos lquidos del organismo El principio bsico utilizado para medir indirectamente volmenes desconocidos es el mtodo de dilucin, basado en la Ley de conservacin de la masa. En base a dicha Ley es posible medir un volumen administrando una cantidad masa de una sustancia conocida que se distribuye en el compartimiento. Este mtodo se utiliza para estimar el volumen de los compartimientos lquidos, el volumen minuto cardaco y el volumen residual pulmonar, entre otros. Entonces, si se administra de sustancia de masa conocida (mg), y se toma la concentracin final que se logra en el volumen desconocido (mg/dl), se puede calcular el volumen en que se
diluy la sustancia (volumen de distribucin), y la frmula de trabajo es:

Vdistrib=cantidad indicador/concentracin alcanzada
determinar calculando la diferencia entre el volumen del LEC menos el volumen plasmtico; al igual que el LIC que se calcula como la diferencia entre el agua corporal total menos el LEC. La estimacin del volumen de los compartimientos lquidos es utilizado para calcular la dosis de un frmaco a administrar a un paciente, o de un anestsico. Actualmente existen otras tcnicas basadas en la bioimpedancia, que se funda en la capacidad que tiene el organismo para conducir una corriente elctrica y que sta presenta parmetros fsicos (resistencia y reactancia) que dependen del contenido en agua y de la conduccin inica en el organismo. Con el mtodo de dilucin tambin puede estimarse el contenido total de un in en los lquidos corporales, mediante el uso de radioistopos del in como sustancia marcadora. En la prctica mdica se puede estimar la composicin cuantitativa bsica de los iones de los lquidos orgnicos, principalmente plasmticos, mediante el Ionograma srico. A travs de l se determina esencialmente la concentracin de sodio, potasio y cloro, cuyos rangos fisiolgicos son: Sodio: 135-145 mEq/l Potasio: 3.5 5.0 mEq/l Cloro: 96 106 mEq/l
La medicin del volumen de un compartimiento utilizando esta tcnica proporciona una estimacin slo si se satisfacen ciertas condiciones respecto a la sustancia indicadora: que se distribuya uniformemente en el compartimiento, que no se intercambie con otro compartimiento, degrade, metabolice excrete durante el tiempo de medicin, que no sea txica. El agua corporal total puede conocerse por este mtodo utilizando agua marcada con tritio o con deuterio. Para la medida del LEC es necesario emplear marcadores que no atraviecen membranas celulares. Este volumen no puede ser medido con precisin ya que los lmites de este espacio estn mal definidos y pocas sustancias se mezclan con rapidez en l. Para la estimacin del volumen extracelular se utilizan sustancias como sacarosa, manitol, radiosodio, pero la estimacin ms exacta es con inulina marcada. El volumen plasmtico se mide generalmente utilizando el colorante Azul de Evans o albmina marcada radioactivamente. El volumen del lquido intersticial no se puede medir por esta tcnica, pero se puede
La osmolaridad es una propiedad coligativa de las soluciones que describe el nmero de partculas en solucin, considerando como partculas no slo los electrolitos sino tambin las molculas no cargadas, sin importar cmo se comportan respecto a la membrana e independiente de la naturaleza, tamao o carga elctrica de dichas partculas (ver Recuadro N2). O sea que, dos soluciones pueden tener la misma osmolaridad, pero estar constituidas por partculas totalmente distintas, y se las denomina isoosmolares, cuando una solucin tiene mayor osmolaridad que otra se dice que es hiperosmolar, y si es menor hipoosmolar. La osmolaridad de una solucin con un nico soluto puede estimarse por el producto entre la molaridad y el nmero de partculas que se obtiene de la disociacin del mismo. Esta disociacin de las molculas en general no es completa y por ello es necesario incorporar un factor de correccin,
denominado coeficiente de vant Hoff coeficiente osmtico (i), que es una constante de proporcionalidad dada por el nmero de iones en los que se disocia la molcula y su coeficiente de disociacin. Por ejemplo, para una molcula que no se disocia i vale 1 y la concentracin osmolar es igual a la concentracin molar; por ejemplo para la glucosa y la urea; cuando el soluto se disocia se generan iones que interaccionan con el medio y el valor de i resulta distinto para cada sustancia, por ejemplo para el cloruro de sodio (NaCl) 0,932; y para el fosfato monocido de sodio (Na2HPO4) que se disocia en 3 iones pero no totalmente i es 2,4. Cuando en una solucin existen dos o ms solutos que no reaccionan qumicamente entre s, la concentracin osmolar de la solucin puede ser estimada por la suma de las concentraciones osmolares de sus solutos.
En base a ello, la osmolaridad del plasma puede ser estimada de acuerdo a la siguiente frmula:
Osm plasmtica=2[Na+]+0.055[Glu]+ 0.36[urea]
Dado que la contribucin de la glucosa y la urea a la osmolaridad plasmtica es de slo 10 mOsm/l aproximadamente, la frmula puede reducirse a:
Osm plasmtica= 2[Na+]+10
o utilizando BUN (nitrgeno ureico):

Osm plasmtica = 2[Na+] +.[Glu]/18 + BUN/2,8
Existen otras frmulas de trabajo para calcular la osmolaridad plasmtica y urinaria:

Osm plasm: (Na + K) x 2 + Glucemia/18 + urea/6 Osm urin: ( Na + K ) x 2 + urea/6
Esto permite visualizar que el sodio es el factor determinante de la osmolaridad del plasma; excepto en tejidos patologas en las que la glucosa la urea pueden influir.
Recuadro N2
La qumica de los solutos y su significado fisiolgico Los solutos poseen distintos tipos de enlaces qumicos, aquellos que no permiten su ruptura como en la glucosa, y los ms dbiles que permiten la disociacin de las molculas, como en el cloruro de sodio, que da iones Na+ y Cl-. Los primeros son llamados compuestos no electrolticos y los segundos se conocen como electrolitos y conducen corriente elctrica. Para expresar la concentracin de los solutos existen distintas formas, y es fundamental comprender su nomenclatura, importancia y significado fisiolgico: -miligramos por decilitro (mg/dl): expresa el peso por unidad de volumen, pero no permite una comparacin fisiolgica, ya que para un mismo valor de concentracin de dos sustancias el nmero de molculas en solucin puede ser distinto. -milimoles por litro (mmol/l): expresa el nmero de molculas por unidad de volumen (siendo 1 mol el equivalente al nmero de Avogadro de molculas- 6,02.1023), pero no brinda informacin directa del nmero de partculas osmticamente activas en la solucin. -miliosmoles por litro (mOsm/l u mOsM): expresa el nmero de partculas osmticamente activas por unidad de volumen. Puede expresarse por litro de solucin (concentracin osmolar) o por kg de solvente (concentracin osmolal). Para soluciones diluidas, como los lquidos corporales, el valor numrico de las concentraciones osmolar y osmolal es semejante. -miliequivalentes por litro (mEq/l): expresa el nmero de cargas elctricas por unidad de volumen.
Por ejemplo, para una sustancia no disociable como el sodio, que contiene el mismo nmero de molculas que de partculas y es monovalente (Na+), las expresiones 2.3mg/l, 1mmol/l, 1mEq/l 1mOsm/l son valores que representan la misma concentracin, pero en el caso del calcio que es una sola partcula divalente (Ca++) y contribuye con dos cargas, 1mOsm/l es igual que 2mEq/l. Qu importancia funcional tiene conocer la diferencia? Si se compara el efecto de un mol de dos sustancias que no se disocian al colocarlas en una solucin, se observa que producirn el mismo resultado osmtico, pero si una de ellas se disocia tendr mucho mayor efecto osmtico, aunque el nmero de molculas original fue igual (1 mol); porque el nmero de partculas es el factor determinante del efecto osmtico. Este efecto osmtico est directamente relacionado con la distribucin de agua en el organismo, pues el agua se distribuir por smosis desde el compartimiento de mayor concentracin de agua, o sea menor concentracin de solutos, hacia en de menor concentracin de agua mayor de solutos. Por ello, la expresin de la concentracin de los componentes de los compartimientos lquidos en mEq/l no es exactamente igual ni cuantitativamente ni fisiolgicamente a la expresin en mOsm/l.
La presin osmtica de una solucin () es otro modo de expresar la concentracin de partculas osmticamente. Dado que tambin es una propiedad coligativa, es mayor
cuanto ms partculas disueltas posea la solucin por unidad de volumen. La presin osmtica para soluciones muy diluidas puede definirse por la ecuacin
de Boyle-van`t Hoff Ley de van`t Hoff quien defini que las molculas de soluto se comportan termodinmicamente como molculas de gas y aplic la Ley universal de los gases ideales al concepto de , siendo: = RT. [solutos]
(T: temperatura en K, R: constante molar de los gases, [solutos]: diferencia de concentracin de solutos no permeantes)
Esta frmula es aplicable a aquellos solutos que tienen muy baja permeabilidad en la membrana, ya que si los solutos tambin se mueven siguiendo su propio gradiente y atraviezan la membrana, disminuira y por ende, cesara el flujo de agua. Por su parte, las protenas plasmticas son la causa principal de la diferencia de presin osmtica efectiva y se la denomina presin onctica. Idealmente, y acorde a van`t Hoff, la es proporcional a la concentracin de los solutos, independientemente de su naturaleza; pero existen casos en los que esta naturaleza qumica del soluto tiene relevancia en la generacin de porque el soluto no puede atravezar la membrana, tiene carga elctrica grupos ionizables y su carga depende del pH. En los casos en que coexisten protenas ionizadas y iones que neutralizan sus cargas para mantener la electroneutralidad se genera una presin denomina presin coloidosmtica (onctica + osmtica). Tanto el LEC como el LIC tienen una =6,7atm. En el plasma y el lquido intersticial el Na+ y Cl- ejercen el 80% de la presin osmtica, y en el espacio intracelular casi el 50% de la presin osmtica la realiza el K+ y las protenas intracelulares. Como el flujo de agua tambin esta influenciado por la presin hidrosttica (Ph), entonces Q= A.Lp.(Ph-) Cmo se maneja la entre el LIC y el LEC si a travs de la membrana plasmtica no se genera una presin hidrosttica que se oponga? La presin osmtica se desarrolla inevitablemente a travs de la membrana celular animal, ya que las clulas contienen macromolculas aninicas polivalentes, protenas y fosfatos orgnicos, impermeables a la membrana. Bajo estas condiciones el agua tender a ingresar a la clula siguiendo este gradiente, y tendr a hincharse sin poder desarrollar una fuerte presin hidrosttica que se oponga al paso de agua debido a las caractersticas elsticas, y esto llevara a la lisis celular.
dando a entender que la presin osmtica es directamente proporcional a la concentracin molar del soluto, el que genera una diferencia de potencial qumico que se convierte en la fuerza de empuje para la smosis. Por ello, el movimiento de agua a travs de una membrana por smosis ser desde la solucin hipoosmtica o con menor presin osmtica hacia la solucin hiperosmtica con mayor presin osmtica. Para tener una estimacin de la real hay que tener en cuenta el factor que representa la fraccin de partculas que son rechazadas o reflejadas por la membrana. Esto se calcula incorporando el coeficiente de reflexin de Staverman (), entonces = RT. . [solutos] El coeficiente de reflexin vara entre las membranas y se ubica entre 0, para un soluto que es permeable y 1 para uno completamente impermeable. Por ejemplo, para muchas membranas el valor de para la urea es casi 0, mientras que para una protena es prximo a 1. Si =0 entonces el agua y el soluto atraviezan la membrana por igual y no se desarrolla presin osmtica, por ello este concepto es fisiolgicamente importante ya que ayuda a determinar si un soluto causar movimiento de agua a travs de la membrana o no, con sus consecuencias en los cambios de volumen celular. Entonces, el flujo de agua a travs de una membrana depende de la diferencia de presin osmtica (), y se expresa Q= - A.Lp.
(Q: flujo de agua, Lp: coeficiente de conductividad hidrulica de la membrana coeficiente de filtracin, A: rea, signo -:explica que el agua fluye desde el lado hipoosmtico hacia el hiperosmtico)
Este problema es evitado gracias a la combinacin de la baja permeabilidad al sodio de la membrana plasmtica y a la activa expulsin de este in por la bomba Na/KATPasa, que hace a la membrana plasmtica funcionalmente impermeable al sodio (ver Recuadro N3). Este balance de los movimentos inicos a travs de la membrana, por el cual la bomba Na/K-ATPasa equipara la presin generada por los aniones impermeables, es conocido como el concepto de bombeo y fuga (pump and leak). Distinto es el flujo de agua a travs del endotelio capilar, donde la estructura del mismo permite la existencia de una diferencia de presin hidrosttica, entonces hay que tener en cuenta tanto la Ph que favorece el pasaje de agua hacia el compartimiento intersticial y el gradiente de presin onctica de las protenas
plasmticas que se opone al mismo. El balance entre estas dos presiones, llamadas fuerzas de Starling, determina el intercambio de agua entre el plasma y el lquido intersticial y es el determinante de la distribucin estable del volumen entre ambos subcompartimentos del LEC. Un evento de importancia fisiolgica y clnica relacionado al compartimiento intravascular es que la homeostasis celular requiere de una adecuada perfusin tisular, y sta se logra gracias a la existencia de un volumen circulante efectivo, contenido en el espacio intravascular, entonces un cambio en el volumen de este compartimento tiene repercusin en todos los dems compartimientos. Por ello, en la prctica mdica el compartimiento intravascular, que es fcilmente accesible, es explorado y modificado segn las necesidades orgnicas.
Recuadro N3
La membrana celular como lmite funcional y el intercambio de sustancias entre el citoplasma y el lquido extracelular La membrana plasmtica es una barrera con permeabilidad selectiva que regula el intercambio de sustancias entre el citoplasma y el medio extracelular. Debido a las caractersticas fsicoqumicas de la membrana celular los compuestos liposolubles o de pequeo tamao sin carga pueden atravesarla fcilmente, mientras que es impermeable a la mayor parte de las molculas hidrosolubles, de gran tamao y de iones por ello requiere de transporte mediado por protenas de membrana donde cada protena est destinada al transporte de un tipo particular de molcula por lo que es un transporte que presenta especificidad y puede dividirse en dos grandes grupos, mediada por transportadores mediada por canales. segn se realice a favor en contra del gradiente de concentracin. En el Transporte Pasivo se pueden encontrar distintos mecanismos, si se da directamente a travs de la membrana se denomina Difusin simple, si se requiere un canal para su transporte es Difusin pasiva y si es mediado por un transportador es una Difusin facilitada uniporte pero siempre el movimiento se realiza siguiendo el gradiente electroqumico.
La Difusin simple se realiza directamente a travs de la bicapa fosfolipdica y la difusin libre de especies disueltas sin carga elctrica neta es funcin de la diferencia de concentracin C y se expresa por la Primera Ley de Fick Los mecanismos de transporte a travs de la membrana pueden clasificarse pasivos y activos Flujo (J) = D.A.(C/e)
D: coeficiente de difusin de la sustancia, A: rea donde se produce la difusin, e: espesor de la interfase (membrana) Las molculas pequeas no polares (O2, CO2) penetran fcilmente en la bicapa lipdica y por lo tanto difunden con rapidez. Las molculas polares no cargadas tambin difunden rpidamente si su tamao es reducido como etanol y urea. En el caso particular del agua la difusin simple se denomina smosis, y sus molculas pueden desplazarse pasando a travs de brechas que se forman cuando las cadenas de cidos grasos se mueven momentneamente. En la Difusin pasiva las protenas que facilitan el transporte son canales inicos y acuaporinas (AQP), por ello la tasa de difusin aumenta proporcionalmente a la concentracin de la sustancia (semejante a la difusin simple. Los canales son protenas integrales que crean poros hidroflicos que comunican ambos lados de la membrana y su principal funcin es permitir el flujo de iones. Hodgkin y Huxley en 1952 por medio de estudios electrofisiolgicos propusieron su existencia, por ello obtuvieron el Premio Nobel en 1963, y as dedujeron que las corrientes inicas eran consecuencia del flujo a travs de miles de canales. Los avances de las tcnicas de registros electrofisiolgicos permitieron tener acceso a canales individuales y registrar el flujo de corriente que pasa por ellos en vivo en la clula, por la tcnica de Patch-clamp. A travs de estos estudios se observ que muchos canales oscilan entre dos niveles de conduccin: estado cerrado (no hay flujo de corriente) y estado abierto, y se determin que cada canal se abre y cierra con una amplitud determinada (conductancia) y frecuencia que le es caracterstica (cintica del canal). As, los canales se pueden definir por su conductancia y especificidad, tanto para la especie inica (selectividad) como para la capacidad de responder a seales especficas que modulan la cintica del mismo. Con la Biologa molecular se pudieron realizar estudios de estructura-funcin de los canales, siendo la secuencia de aminocidos del receptor de acetilcolina (canal de sodio) la primera en ser publicada en 1982, estos estudios permitieron determinar que la selectividad es dada por el tamao y radio de hidratacin del ion y al interior del canal por el "filtro de selectividad", zona estrecha donde se dan interacciones electroestticas que determinan el paso de un solo tipo de ion.
Segn las caractersticas estructurales se pueden dividir en canales sin compuerta y con compuerta, y funcionalmente en canales voltajedependiente (se abren cierran ante la modificacin del Vm), canal ligando-dependiente (se abren cierran en presencia de sustancias ligandos externos (neurotransmisores, hormonas) internos (segundos mensajeros), canales mecanodependientes (responden a cambios mecnicos como el estiramiento de la membrana o de presin).
Para entender el funcionamiento de los canales inicos se aplica la Ley de Ohm, ya que un canal inico es un conductor unitario que atraviesa la membrana, y la conductancia total de la clula es la suma de todas estas conductancias unitarias en paralelo, y es una medida de cuantos canales estn abiertos, cuantos iones estn pasando por ellos en ese momento, y con que facilidad pasan los iones a travs de ellos. En una clasificacin sencilla desde este punto de vista se pueden definir los canales ohmicos (que dejan pasar un solo ion y la conductancia es independiente del potencial) y canales rectificadores (la conductancia es variable en funcin del potencial). Todos los canales inicos pueden ser modulados alterando su cintica, por ejemplo por fosforilacin seales reguladoras. Las AQP fueron descubiertas por Peter Agre, quien en 2003 recibi el Premio Nobel de Qumica por haberlas identificado, y hasta el momento han sido descriptas once AQP (0 al 10), las cuales comparten similitudes estructurales y se relacionan con una diversidad de enfermedades. AQP1 es la ms abundante en la mayor parte de los epitelios y capilares. AQP2 se expresa por la ADH en los tbulos distales y colectores renales. AQP3 y AQP4 en la membrana basolateral de las clulas principales facilitan la resorcin de agua desde el tbulo colector pero no por ADH.
AQP6 colocalizada con H-ATPasa en las clulas intercaladas renales secretoras de cido, es activada a pH cido e inhibida por alcalinizacin y participa en la secrecin de H+. AQP5 est localizada en la membrana apical de clulas epiteliales en glndulas como submucosas respiratorias, lacrimales, salivares y sudorparas; su rol fisiolgico consiste en regular el flujo de agua hacia la luz glandular. En la Difusin facilitada los transportadores se combinan temporalmente con la molcula de soluto y sufren un cambio conformacional reversible que les permite transportar el soluto de un lado al otro de la membrana (translocacin), despus queda libre para unirse a una nueva molcula, son ejemplos el transporte de glucosa por los GLUT1, el transporte de urea por UT, el transporte de cationes orgnicos por OCT. Este transporte es saturable y ello se evidencia porque la tasa de difusin se aproxima a un mximo, denominado Vmax, al aumentar la concentracin de la sustancia. Este tipo de transporte ha sido denominado uniporte o monotransporte ya que transfieren un solo tipo de sustancia a travs de la membrana a favor de su gradiente de concentracin. El Transporte activo utiliza energa como fuerza impulsora para transportar las sustancias en contra de su gradiente, y se clasifica dependiendo el origen de esta energa en Transporte activo primario y Transporte activo secuandario.
Presentan formas de monotransporte, cotransporte y contratransporte, y las mismas caractersticas de especificidad y saturabilidad que la difusin facilitada mediada por transportadores. Los ejemplos ms comunes de bombas de la membrana plasmtica son las Na/K- ATPasas, CaATPasas, H/K-ATPasa y H-ATPasa. Este tipo de bombas tambin se encuentran en compartimientos intracelulares como el retculo endoplasmtico liso de las clulas musculares donde bombean Ca++ o en los lisosomas donde bombean H+ hacia el interior, tambin pueden obtener energa de reacciones de xido-reduccin para crear gradientes como los complejos de las cadenas de transporte de electrones de las mitocondrias. La bomba Na/K-ATPasa est presente en todas las membranas plasmticas de las clulas animales, es un complejo proteico formado por cuatro subunidades, y su funcin es expulsar 3 iones Na+ al LEC e introducir 2 iones K+ al citosol, estas transferencias se hallan acopladas y no pueden realizarse una independientemente de la otra. Por lo menos un tercio de la energa que consume una clula se destina para impulsar esta bomba, en las clulas nerviosas, donde la actividad elctrica es sumamente importante, este valor asciende al 60%.
El Transporte activo primario utiliza la hidrlisis del ATP en forma directa para proveer la energa libre para el transporte contra el gradiente electroqumico, son las llamadas bombas ATPasa.
La bomba Na/K-ATPasa es electrognica, contrarresta el efecto Donnan colaborando en la regulacin del volumen celular y en los tejidos excitables reestablece el potencial de membrana despus de la despolarizacin. Muchas de las vas intracelulares de sealizacin activadas por hormonas modifican el estado de fosforilacin de la bomba y su ubicacin hace a la funcin celular, as en las clulas epiteliales se hallan ubicadas en la membrana basolateral para participar del transporte. El Transporte activo secundario utiliza la energa potencial acumulada por un transporte activo 1 que genera un gradiente, principalmente
bombas de sodio protones, acoplando el transportador especfico contra el gradiente. Dependiendo de la orientacin del transporte acoplado se pueden dividir en: -cotransportadores o simportadores cuando los flujos de las sustancias son en la misma direccin, ya sea hacia adentro fuera de la clula. -contratransportadores, intercambiadores antitransportadores cuando los flujos de las sustancias tienen direcciones opuestas.
En el caso de los transportadores electrognicos existe un valor de potencial de membrana en el cual el transportador se detiene; este valor se llama potencial de inversin (Ei). Por ejemplo, el intercambiador Na/Ca funcionando en el modo directo saca un Ca2+ de la clula y entra tres Na+. Cuando la membrana se despolariza, si se sobrepasa el valor del potencial de inversin, el intercambiador puede revertir su direccin sacando Na+ y entrando Ca2+; este ltimo es el modo reverso de funcionamiento del intercambiador. Este intercambiador es muy importante en clulas contrctiles ya que es uno de los mecanismos que est involucrado en regular la concentracin de calcio durante la contraccin. Si por la constitucin o propiedades la sustancia a transportar debe realizarse un pasaje a travs de la membrana a mayor escala, con gran gasto de energa y movilizacin de estructuras propias de la membrana celular y del citoesqueleto, se denomina Transporte en masa y puede dividirse en endocitosis y exocitosis.
Los principales cotransportadores son: Na/glucosa (1:1 y tambin 2:1) se localizan en la mayora de las clulas Na/aa (1:1) se localizan en la mayora de las clulas Na/CO3H (1:1 y 1:2 y 1:3-electrognico) Na/K/Cl (1:1:2) Na/Cl (1:1) hay uno dependiente del K+ (K/Cl) y uno independiente Los principales contratransportadores son: Na/Ca (3:1-electrognico y 3:2). Existen tres isoformas NCX1 que se halla en msculo cardaco, msculo liso y rin, y NCX2 y NCX3 en cerebro y msculo esqueltico. Na/H (1:1) Na/Cl/CO3H (1:1:2) Cl/CO3H (1:1) En la Endocitosis una extensin de la membrana rodea progresivamente al material que ser internalizado, formando una vescula endoctica. Se distinguen 3 tipos de endocitosis: -fagocitosis: ingestin de partculas de gran tamao, como microorganismos, restos celulares y otras clulas, por medio de vesculas llamadas fagosomas, slo se da en clulas tipo macrfagos. -pinocitosis: incorporacin de fludos y de partculas disueltas por medio de pequeas vesculas -endocitosis mediada por receptor: es selectiva pues las molculas a incorporar son reconocidas por receptores especficos ubicados en la membrana plasmtica, estos complejos ligando-
Acorde a la estequiometra del transporte puede ser electroneutro si el nmero de cargas elctricas desplazadas se compensa y electrognico si hay movimiento neto de cargas.
receptor confluyen a determinadas zonas de la membrana donde son endocitados. Las vesculas presentan en su cara citoslica un revestimiento de clatrina que seala el sitio de la invaginacin. Esta se fusionar con un conjunto de vesculas llamadas endosomas, donde se clasifican las molculas endocitadas y se las separa de los receptores. Un ejemplo importante de este proceso es la captacin de colesterol por las clulas, las LDL se unen a receptores ubicados en la superficie celular y los complejos LDL-receptor son internalizados. En la Exocitosis el material contenido en vesculas de secrecin es vertido al medio extracelular por fusin con la membrana. Por ejemplo la liberacin de protenas de exportacin y
de neurotransmisores. En este caso, hay ganancia de membrana, mientras que en la endocitosis hay prdida de membrana.
En este contexto, donde la homeostasis celular depende de las concentraciones y de la calidad de solutos del LEC, es ms correcto fisiolgicamente referirse a las soluciones en trminos de tonicidad. Este trmino describe el efecto que producir una solucin sobre el volumen celular. Esta expresin es comparativa, no tiene unidades, y deviene del efecto sobre la turgencia de la membrana celular. Una solucin hipertnica es aquella cuya osmolaridad efectiva deshidrata las clulas, si no se modifica su volumen la solucin es isotnica y si lo aumenta es hipotnica. Entonces, una solucin puede ser isosmtica con respecto al plasma pero ser anisotnica, ser isotnica pero hiper hipoosmolar, todo depende la permeabilidad de la membrana al soluto, o sea de su coeficiente de reflexin de Staverman. Por ello puede decirse que la tonicidad de una solucin depende de la concentracin que tiene de solutos no difusibles.
continuar hasta que las presiones osmticas eficaces en ambos compartimientos se hayan igualado. Inversamente, si disminuye la concentracin de sodio en el intersticio pasar agua hacia el LIC. En cambio, una deplecin del volumen del LEC, sin cambio de concentracin de los iones, no producir salida de agua libre del LIC, ya que ste interviene en caso de prdidas que supongan un cambio de concentracin del lquido intersticial, sin ser casi afectado por los cambios de volumen en condiciones isotnicas. Por otro lado, una prdida de volumen con aumento de osmolaridad extracelular causa un flujo de agua desde la clula hasta el LEC para restablecer el equilibrio osmtico, y ambos compartimientos experimentan una deplecin de volumen; mientras que un descenso de la osmolaridad por hiperhidratacin causa un flujo de agua hacia el interior de la clula, as ambos compartimientos experimentan una expansin de volumen. En el caso que se ingiere agua en exceso, ingresa un soluto que se distribuye en todos los compartimientos como la urea, aumenta la retencin de agua que se distribuye en ambos compartimientos LEC y LIC y sus respectivos volmenes cambian en forma proporcional (un incremento similar en porcentaje, en relacin sera 2/3 del exceso de agua ira al LIC y 1/3 al LEC). En contraste, si el soluto que se incorpora al cuerpo est restringido a un solo
Entonces, si aumenta la presin osmtica eficaz (se vuelve hipertnico) el lquido intersticial por un aumento de la concentracin de sodio, habr paso neto de agua del LIC al LEC, este paso de agua
compartimiento, el agua se retiene en dicho compartimiento, por ejemplo cuando se ingiere NaCl sin agua ste esta confinado al LEC (recordar que la membrana plasmtica en funcionalmente impermeable al Na), el LEC se vuelve hipertnico y ello activa el movimiento de agua desde el LIC hacia el LEC generando modificaciones en el volumen celular. Esto se debe a que el agua se mueve libremente a travs de los compartimientos y su balance afecta tanto al LEC como al LIC. Por ello, la osmolaridad de ambos compartimientos en estado de equilibrio (steady state) es siempre igual. Al alterarse la osmolaridad de un compartiemiento el movimiento de agua tiende constantemente a preservar la osmolaridad en ambos. Como ya se expres, los solutos que actan como determinante principal de la osmolaridad en cada compartimiento son distintos, el sodio en el lquido intersticial, las
protenas y el sodio en el plasma y el potasio en el lquido intracelular, y as alterando el contenido de Na del LEC se modifica slo el volumen del LEC. Para evitar los efectos no deseados del movimiento de agua que afecten la homeostasis celular ante cambios en la tonicidad del LEC se activan en paralelo mecanismos sistmicos y mecanismos celulares. Los mecanismos sistmicos de control y regulacin de la osmolaridad limitan la expansin contraccin del volumen del LEC y as protegen las variables hemodinmicas (con variaciones del 1% al 2% se inician acciones compensadoras que influyen sobre efectores que modifican el contenido de Na y/o agua del LEC). Los mecanismos celulares son aquellos que regulan el volumen celular ante el cambio de tonicidad.
En la clula, cuya membrana es muy permeable al agua, selectivamente permeable a iones como el sodio, cloro y potasio e impermeable a las protenas intracelulares, se produce a nivel transmembrana el equilibrio Gibbs-Donnan efecto Donnan. Este equilibrio hace referencia a la redistribucin de iones negativos y positivos entre dos compartimientos debido a la existencia de un ion no difusible, como las
protenas que a pH fisiolgico se comportan como aniones, a fin de mantener la electroneutralidad de los compartimientos. El equilibrio Gibbs-Donnan se puede expresar como el producto de las concentraciones de los iones difusibles de un lado de la membrana es igual al producto de los iones difusibles del otro lado, as [Cl-i].[Na+i]=[Cl-e].[Na+e]
Como el sodio es funcionalmente impermeable a la membrana, el Cl- es el anin que compensa esta distribucin, por ello la concentracin de Cl- es mayor en el LEC y la concentracin de K+ en el interior celular resulta mayor que en el LEC.
El efecto Donnan genera electroneutralidad a expensas de un desequilibrio osmtico, pues la concentracin de partculas es mayor en el LIC que en el LEC, por lo tanto el gradiente de presin osmtica que desarrolla genera la tendencia a la entrada de agua a la clula (a la que se opone la bomba Na/K ATPasa). A nivel de la membrana plasmtica el efecto Donnan contribuye entonces en un pequeo porcentaje a la generacin de una diferencia de potencial elctrico de transmembrana Esta separacin y asimetra de las cargas a ambos lados de la membrana genera un campo elctrico (potencial de membrana) que tiene una profunda influencia en el movimiento de los iones.
Como resultado del equilibrio GibbsDonnan cada compartimiento tiene igual nmero de cargas positivas y negativas, pero el compartimiento que contiene el ion no difusible tiene, con respecto al otro compartimiento, un mayor nmero de partculas; ello genera un gradiente osmtico.
La distribucin asimtrica de iones difusibles afecta tambin a H+ y OH-, por esta razn la concentracin de protones intracelulares es mayor, generando una diferencia de pH de aproximadamente 0,09 unidades entre el LIC y el LEC.
Homeostasis del volumen celular
Bajo condiciones fisiolgicas las clulas estn protegidas ante cambios de la osmolaridad, ya que existen tanto mecanismos sistmicos de regulacin que mantienen la tonicidad y volumen del LEC como mecanismos propios celulares. En condiciones de equilibrio estable los niveles de solutos del LIC estn constantemente mantenidos por un preciso balance entre los eflujos e influjos a travs de la membrana con gasto energtico y por la produccin y remocin de metabolitos orgnicos. Si bien, la composicin inica de cada tipo celular vara acorde a la funcin que cumple, existen mecanismos generales que participan en la mantencin de este balance. Normalmente en la clula la bomba Na/K-ATPasa reduce el Na+ del LIC y mantiene su gradiente electroqumico asegurando la actividad del cotransporte Na/glucosa y Na/aminocidos que ingresan a la
clula, y de los intercambiadores Na/H y Na/Ca que permiten la salida H+ y de Ca++ hacia el LEC y la bomba Ca/H-ATPasa colabora con la mantencin de una baja concentracin de Ca++ intracelular. Tambin se mantiene la fuga lenta de K+, Cl- y osmolitos orgnicos dependientes del Vm y el gradiente. Por lo tanto, el contenido intracelular de K+, Cl-, osmolitos orgnicos y la carga neta de los aniones indifusibles determinan el volumen celular.
Puede definirse que el volumen celular est determinado por el contenido intracelular de compuestos osmticamente activos y por la tonicidad extracelular. Bajo condiciones normales el volumen celular es mayormente perturbado por cambios en el la funcin metabolismo celular que modifican la osmolaridad del LIC, por ejemplo durante el transporte transepitelial, la acumulacin de nutrientes y desechos metablicos, la activacin de mecanismos regulatorios nerviosos, hormonales locales que modifican la bioqumica celular; cambios en el LEC como en las clulas del epitelio intestinal y de los capilares intestinales expuestas a una baja en la osmolaridad despus de la ingesta de agua comida hipotnica. En situaciones fisiopatolgicas se perturba el volumen celular como en la hipoxia en la hiponatremia en casos de disfuncin hormonal renal donde aumenta el volumen celular; en la hipernatremia despus de una excesiva ingesta de sodio prdida de agua, en la hiperglucemia por el contrario se genera deshidratacin celular. En estas situaciones fisipatolgicas que llevan a la anisotona del medio interno usualmente se desarrollan mecanismos graduales que preservan el volumen celular. Los cambios generados por perturbaciones en el volumen celular pueden originar cambios mecnicos/qumicos en la bicapa lipdica amontonamiento de macromolculas (cidos nucleicos, protenas y polisacridos) que interfieren con el funcionamiento celular y concentracin de iones especficos. En este sentido, son de importancia las cavolas, microdominios de la membrana esenciales para la eficiente transduccin celular pues receptores y transportadores se encuentran ubicados en este dominio, y se ha demostrado que cambios en el volumen celular afectan su funcionalidad. Como la membrana celular no soporta diferencias de presin hidrosttica el nico modo que tiene una clula de contrarrestar las perturbaciones en el volumen, aunque persista la condicin anisotnica (los eritrocitos y linfocitos constituyen una excepcin ya que no poseen los mecanismos mecanismos de regulacin de volumen) es igualar la concentracin de partculas osmticamente
activas del citosol con las del medio, o sea modificando la osmolaridad del LIC. As, las clulas que aumentaron su volumen por modificaciones osmticas del LEC hipotnico, generar un eflujo neto de Cl-, K+ y agua para reducir su contenido de osmolitos, reduciendo as su volumen al original, proceso denominado disminucin regulatoria del volumen (DRV). Este mecanismo que realiza un ajuste compensatorio en los electrolitos intracelulares tiene una magnitud limitada, porque las modificaciones en la concentracin de los electrolitos puede modificar la funcin celular, por ejemplo el cambio en la concentracin intracelular de K+ altera el potencial de membrana; por ello la respuesta se completa con un mecanismo mediado por osmolitos orgnicos. Los osmolitos orgnicos son sustancias simples que normalmente se encuentran en alta concentracin en el citosol y su concentracin puede variar mucho sin afectar la estructura celular ni las reacciones metablicas, por ello son llamados osmolitos compatibles, por ejemplo azcares (glucosa, sacarosa), polialcoholes (manitol, mioinositol, sorbitol), aminocidos (taurina, glutamato, alanita, serina), metilaminas (betana, glicerolfosforilcolina) y otros compuestos como urea, creatina, fosfocreatina. Si la clula disminuy su volumen por prdida osmtica de agua ante un LEC hipertnico se inicia un proceso de ganancia neta de Cl-, K+, osmolitos orgnicos y agua, aumentando as su volumen hacia el nivel original. por un proceso llamado aumento regulatorio del volumen (ARV).
En ambos casos, cuando se restablecerse la tonicidad del medio la clula activar los mecanismos necesarios para mantener su volumen ante la nueva situacin, por ejemplo si se produjo un ARV con aumento de osmolitos porque el medio se haba vuelto hipertnico, al volver el medio a isotonicidad, ste resultar hiposmtico para la clula e ingresa agua y aumenta su volumen, as se activarn los mecanismos de prdida de osmolitos (como en el DRV) para regresar paulatinamente al volumen original. El set point punto a partir del cual se activan los procesos reguladores del volumen es aquel volumen (por su aumento disminucin) que activa mecanismos de transporte asociados al ARV al DRV. Dependiendo del tipo celular y del momento del ciclo celular la variacin del volumen a la que comienzan a activarse estos mecanismos es entre el 3.5 y 10% de variacin y este set point puede ser modificado por mensajeros qumicos que llegan a la clula. Si bien, el cambio del volumen celular no genera modificaciones en todas las protenas de membrana debido al reservorio de membrana en forma de invaginaciones microvilli; el citoesqueleto en general se reorganiza ante cambios del volumen posiblemente ejerciendo un efecto protectivo sobre la membrana, reforzndola, y participando de la regulacin del volumen. Las perturbaciones en el volumen son sensadas por distintos mecanismos, y existe evidencia que vincula a las integrinas como sensor primario de los cambios de volumen, ellas son capaces de activar tirosin-kinasas unidas a receptores y tirosin-kinasas citoslicas, en especial de la familia SRC. Las quinasas median la fosforilacin y activacin de transportadores de membrana responsables de los ajustes rpidos y tambin activan factores de transcripcin que actan sobre el ADN responsables de las respuestas lentas (ver ms adelante Mecanismos de transduccin celular). En algunos tipos celulares se demostrado tambin, ante cambios en volumen, la activacin de receptores factores de crecimiento (GFR), resultando activacin de vas PI-3K. ha el de en
Parece ser que la activacin de GFR y de integrinas acta cooperativamente en la sealizacin de los cambios del volumen celular como parte de una unidad sensora de volumen, y sus cascadas de sealizacin convergen. Por otro lado, existe una familia de canales de activacin transitoria TRP (transient receptor potencial channels) que funcionan como sensores polimodales, captando gran variedad de estmulos qumicos y fsicos, que interactan con vas de sealizacin celular como tirosinquinasas, protenas scaffolding y el citoesqueleto, que por su ubicuidad y estructura se le asignan funciones como sensor mecnico, aunque algunos pueden ser activados por estmulos osmticos, y podran activar respuestas celulares regulatorias del volumen. Disminucin regulatoria de volumen (DRV) Se cree que el hinchamiento celular ante un medio hipotnico activa canales mecanosensibles presentes en la membrana, en aquellas reas en las que se desarrolla mayor tensin (teniendo en cuenta que el exceso de membrana funcionara como un buffer ante el desarrollo de tensin en la bicapa). Fase rpida: se produce por salida de K+ y Cl-, por canales independientes para cada in pero paralelamente, resultando electroneutra. El resultado neto es la salida de osmolitos orgnicos, Cl- y K+ y la formacin de bicarbonato intracelular que se degrada rpidamente. Los canales denominados VARCs (volumen anion regulated channels) estn involucrados en esta respuesta. Se han encontrado en cavolas y son regulados por integrinas acopladas a las vas Rhoquinasas, miosina y F-actina, ya que su disrupcin los estimula. VARC incluye distintos subtipos de canales, aquellos que permiten el pasaje de Clante un aumento de volumen (tambin permeable a HCO3-) generando una corriente rectificadora de cloro que permite la prdida de este anin y agua; y canales que permiten el eflujo de osmolitos orgnicos taurina y mioinositol VSOAC (volume-sensitive organic osmolyte anion channel) activados va integrinas y regulados por ATP como feed-
back entre la regulacin del volumen celular y el metabolismo celular. A su vez, el incremento de la actividad PLC por el aumento del volumen, con el consiguiente aumento del IP3, calcio intracelular y activacin de la Ca/CaM potenciaran a los VARC. Los canales TRPV (transient receptor potencial vanilloid) son activados por la produccin de cido epoxieicosatrienoico (EET) como resultado de la PLA2 y el AA de las cavolas que es estimulada por el aumento del volumen. Estos canales permiten corrientes transitorias de cationes, sobretodo aquellos subtipo TRPV4. Estos canales estn normalmente inhibidos por los niveles de PIP2, y ante un aumento del volumen celular se estimula la PLC que conlleva una cada del PIP2, quedando activados. Los Canales de K+ sensibles a calcio son activados por nun aumento transitorio del calcio resultado de la activacin de receptores purinrgicos P2Y1 ya que en muchas clulas (como las de mcula densa y cardiomiocitos) el estrs mecnico induce liberacin de ATP que es liberado a travs de canales y ste podra actuar como un mensajero autcrino activando los receptores purinrgicos. Se ha vinculado a la integrina 1, y su cascada de activacin con Src va MAPK, con la activacin de canales de K+, Kv1 y Kv4, canales de K+ activados por Ca++ y VRAC. Estos canales de K+ que intervienen en la respuesta DRV son de distintos subtipos, los denominados de conductancia intermedia (IK), los denominados de gran conductancia maxi (BK) y los activados por calcio. En el caso de los IK el citoesqueleto, a travs de la unin de actina a filamina, podra activarlos ante el aumento de volumen; en este proceso parece que el ATP liberado al LEC contribuye tambin a su activacin conjuntamente con aumento del calcio intracelular. Una serie de protenquinasas y fosfatasas regulan estos canales, como PKC que potencian su accin, la cada de PIP2 los activa por falta de inhibicin, el AA junto a sus metabolitos como HETE tambin activa los canales BK. El hinchamiento celular induce tambin liberacin de taurina, por mecanismos distintos del transportador TauT dependiente
de sodio, la activacin de PLA2 protenquinasas Src, FAK, y Ca/CaM potencian su salida por canales que an se desconocen, y que tambin son permeables a otros osmolitos orgnicos como sorbitol, colina y sucrosa. Participan tambin en la DRV los cotransportadores K/Cl (KCC) electroneutros (junto a intercambiadores H/K y Cl/HCO-3) que tienen una funcin importante en la regulacin del volumen celular, como as tambin en el transporte transepitelial, relajacin del msculo liso vascular, regulacin del pH intracelular, amortiguamiento del K+ en el cerebro.
KCC1 es ubicuo y participa de la regulacin del volumen celular en la hipotonicidad, KCC2 es cerebral y participa en el amortiguamiento del K+ del LEC y regulacin del Cl- intracelular, KCC3 y KCC4 pueden ubicarse en los epitelios en la membrana basolateral, con funciones en el transporte transepitelial, principalmente KCC3 todos los segmentos de la nefrona. Todos los subtipos de KCC son activados tras el aumento del volumen celular, pero en forma indirecta, ya que normalmente KCC es inhibida tnicamente por la quinasa WNK y el aumento de volumen inhibe a WNK y as se activa KCC (que tiene efecto opuesto sobre NKCC), Ser/Thrfosfatasas son sus mayores reguladores ya que su activacin estimula KCC y su inhibicin las atenan. Fase lenta: cambios en la transcripcin gnica producen una disminucin de la sntesis de osmolitos orgnicos y de los transportadores
de membrana capaces de incorporarlos en cotransporte con Na+. Aumento regulatorio de volumen (ARV). Se ha demostrado que la disminucin del volumen en clulas epiteliales incrementa el contenido de F-actina cercano a la membrana, esta reorganizacin de actina tiene relacin con distintas protenas como cortactina, dinamina que son fosforiladas y translocadas cerca de la membrana y conforman complejos con las integrinas y receptores de factores de crecimiento. Fase rpida: se produce por ingreso de Na+, K+ y Cl-, el Na+ que puede penetrar rpidamente a la clula por el gradiente de concentracin y como resultado hay una ganancia neta de Cl- y K+ en el LIC, ya que el Na+ que entra es bombeado por la Na/KATPasa. Por un lado, la disminucin de volumen induce aumento de PIP2 que inhibe los canales TRPV. Por otro se activan una serie de transportadores. El intercambiador Na/H NHE (Na-Hexchanger) es central y tiene varios subtipos, NHE1 presente en todas las clulas, NHE2 y 3 isoformas apicales de clulas epiteliales, NHE4 ubicados en la membran basolateral de clulas de rin y estmago, NHE5 en neuronas, NHE6 y 7 principalmente intracelulares, NH8 en la membrana apical de clulas renales participando del intercambio Na/H cuando hay sobrecarga cida. NHE1 es activado ante disminucin del volumen e inhibido ante su aumento, como parte de un mecanismo homeosttico. Es parte de un complejo macromolecular relacionado con el citoesqueleto, posiblemente ubicado en cavolas y activado por integrinas a travs de una va de Rhoquinasa y por las protenas que unen actina (ERM), aunque el mecanismo an debe ser dilucidado. Los sitios que posee NHE1 son fosforilados para su modulacin por seales intracelulares como Ca/CaM que fosforilara un sitio de autoinhibicin, adems podra activarse por un incremento en la afinidad al H+ en un sitio alostrico en contacto con el LIC, por ello tambin es activado por cambios en el pH intracelular. Los cotransportadores Na-K-2Cl (NKCC) son ubicuos y tiene distintos subtipos,
NKCC1 sirve de plataforma a variadas protenas scaffold reguladoras del estrs osmtico celular como MAPK y SPAK y en las clulas epiteliales esta ubicado en la membrana basolateral; NKCC2 es expresado en la membrana apical de las clulas del asa ascendente fina de Henle, regula la reabsorcin de iones y sobre l acta el diurtico furosemide. NKCC1 es activada por la interaccin de WNK y ste20K ante una disminucin del volumen celular, WNK1 al ser activado en muchos tipos celulares es rpidamente translocado de la membrana hacia trans-Golgi y as posiblemente regula la insercin de NKCC1. Tambin actina tiene un rol importante en la activacin de NKCC1 ya que su reorganizacin ante cambios en el volumen induce cambios en el cotransportador. El intercambiador sodio/calcio NCX es tambin activado ante la disminucin de volumen y es estimulado por PIP2. Respuesta lenta: las integrinas con la deshidratacin celular y la prdida de turgencia activan la cascada de MAPK y as se modifica la expresin de genes involucrados en la sntesis de transportadores y enzimas de la sntesis de osmolitos, los denominados elementos sensibles a la tonicidad TonEBP (Tonicity-responsible enhancer binding protein), principalmente relacionado con el transportador de taurina, y la sntesis de glicerol.
Tambin participan en el restablecimiento del volumen compuestos orgnicos como sacarosa, manitol, urea y creatinina que son transportados por
cotransporte con Na+. En el caso de los aminocidos se ha observado tambin la protelisis de protenas osmticamente inactivas.
activaran por disminucin del volumen celular, posiblemente por cambios conformacionales del citoesqueleto, entonces WNK3 inhibiendo las fosfatasas, aumentara el estado de fosforilacin de ambos cotransportadores. Por su su lado, WNK4 actuara a travs de la fosforilacin de una PASK (ProlineAlanine-Kinasa) que fosforila el NH2 terminal de ambos cotransportadores, como resultado se estimula NKCC1 y se inhibe KCC1, generando un flujo neto de Na+, K+ y Cl- hacia el LIC y as se produce el ARV. En cambio, WNK3 y WNK4 se inactivaran por hinchazn celular en medio hipotnico, esto llevara a falta de inhibicin de las fosfatasas y un aumento de la defosforilacin, que activa a KCC1 e inactiva a NKCC1, generando un flujo de Cl- y K+ hacia fuera de la clula, iniciando la DRV. Sin embargo, esta hiptesis de una kinasa-una fosfatasa, en la que la fosforilacin activa y la defosforilacin inhibe el sistema de transportadores es muy simplista. la existencia de sistemas de sealizacin recprocos de proteinquiinasas que dependen del volumen celular y regulan transportadores y canales es mas cercana a los ultimos hallazgos, con la incorporacion de las familias de Ste20quinasas. Adaptacin a cambios de volumen a largo plazo La exposicin a medios hipertnicos durante mucho tiempo resulta en una alteracin de la transcripcin de genes relacionados con osmolitos como metilaminas, polialcoholes como sorbitol e inositol, aminocidos y sus derivados. Estos osmolitos son particularmente importantes en la mdula renal, donde la osmolaridad del LEC se eleva entre 4 y 5 veces. Las clulas de los tbulos renales que conviven con concentraciones extremadamente altas de ClNa y urea estaran expuestas a reacomodamiento del citoesqueleto, inhibicin de la replicacin del ADN, dao en protenas y ADN por aumento de ROS, sin embargo pueden adaptarse incrementando la expresin de protenas heat shock y acumulando osmolitos como sorbitol, mioinositol, botaina, taurina y glicerofosfocolina.
El cambio en el contenido de osmolitos orgnicos como taurina es importante para restablecer el volumen despus de perturbaciones osmticas. El contenido de taurina es resultado del balance entre entrada por la actividad del carrier TauT dependiente de Na/Cl y la liberacin pasiva a travs de canales VSOAC. El transportador TauT es regulado tanto a nivel post-transcripcional por cambios agudos en el volumen, como a nivel de su expresin por alteraciones osmticas a largo plazo. Regulacin de los mecanismos Como se ha expresado anteriormente el volumen celular es mantenido por un mecanismo que rpidamente aumenta disminuye el intercambio inico. La entrada de Cl- es mediada por un cotransportador Na/K/2Cl (NKCC1) y la salida de Cl- es mediada por un cotransportador K/Cl (KCC1), por lo tanto la respuesta celular ante medios anisotnicos se da por la coordinacin de la actividad de ambos transportadores. An no se conocen ntimamente los mecanismos que hacen posible el acoplamiento de la funcin de los cotransportadores KCC1 y NKCC1, pero se ha propuesto que la familia de kinasas WNK participaran de esta regulacin. Conociendo que la fosforilacin activa a NKCC1 e inhibe a KCC1, mientras que la defosforilacin opera a la inversa, y que en el ser humano los subtipos WNK3 y WNK4 se
En el caso de la urea concentraciones de la misma por encima de 300 mM causa muerte celular, como difunde rpidamente no genera hipertonicidad, sin embargo desnaturaliza protenas y cidos nucleicos, y este efecto es contrarrestado en las clulas renales por metilaminas, betana y GPC. Las protenas heat shock (HSP) constitutivas participan en el ensamble de protenas, eliminacin de protenas perdidas y estabilizacin de nuevas protenas en varios compartimientos celulares, pero las HSP generadas ante estresores actan como molculas chaperonas que corrigen y limitan los daos a las protenas, previniendo la apoptosis, stas son muy abundantes en las clulas de la mdula renal para prevenir los daos provocados por la urea. La hemooxigenasa tambin participa de estas tareas de proteccin como antioxidante y antiapopttico, inducida por altas concentraciones de ClNa y urea La acumulacin de osmolitos orgnicos en estos casos es dependiente del incremento en la expresin del cotransportador
Na/mioinositol (SMIT), el cotransportador NaCl-betaina (BGT) y TauT y de aldolasa reductasa que cataliza la conversin de glucosa a sorbitol. Estos osmolitos una vez transportados sintetizados quedan en la clula dada su baja permeabilidad. SMIT esta ubicado en la membrana basolateral de las clulas tubulares, y el estrs producido por aumento de sales (pero no urea) incrementa su transcripcin y as aumenta el influjo de mioinositol a las mismas. BGT acumula botaina en las clulas y tambin slo el estrs de sales activa su transcripcin. La regulacin transcripcional de estas protenas son facilitadas por los TonEBP activados por una MAPK que hace que sea translocado al ncleo durante el estrs hipertnico, a su vez tambin se aumenta la expresin de HSP70. La hipertonicidad induce tambin la expresin de integrinas, que estaran involucradas en la activacin de TonEBP, ya que las clulas renales que no la expresan son incapaces de sobrevivir en medios hipertnicos.
Homeostasis del pH celular
Si bien el organismo cuenta con varios sistemas que intervienen en el mantenimiento del balance cido-base, como los amortiguadores de los lquidos corporales, la ventilacin y la regulacin renal, la clula necesita mecanismos propios reguladores del pH intracelular (pHi). La razn de la importancia de mantener el pHi es que cambios en l afectan el estado de ionizacin de todos los cidos y bases dbiles, por ello todas las clulas (excepto eritrocitos) poseen mecanismos para regular el pHi. Muchas protenas son sensibles al pHi y sufren cambios conformacionales ante una modificacin del mismo, por ejemplo reduccin de la eficiencia de los elementos contrctiles ante cada del pHi muy importante en el miocardio, ya que la isquemia lleva a la acidez del pHi y ello resulta en una cada del 40 a 50% del poder contrctil. Otras funciones afectadas por cambios de pHi estn relacionadas con su efecto
permisivo para la accin de factores de crecimiento sobre la divisin celular y diferenciacin, un incremento rpido en el pHi encamina a las clulas de fase Go/Gl a S, este efecto se observa tambin sobre la migracin celular y quimiotaxismo. El pHi tiene efecto sobre protenas que forman los canales inicos, acuaporinas y enzimas que poseen residuos histidina sensibles a H+ en sus sitios activos y pueden alterar su estructura, cintica e interacciones, variable crtica para determinar la coordinacin bioqumica celular y dentro de cada organela, cambios del orden de 0.2 puntos alteran la trasncripcin gnica, la sntesis de ADN y protenas y decrece la tasa metablica determinando el cese de las funciones celulares. En el caso de los canales inicos tienen una conductividad dependiente del pHi, en particular los canales de K+ de las clulas excitables, ya que la acidificacin del LIC
bloquea la conductancia de estos canales y genera una despolarizacin de la membrana, tambin tiene efecto sobre el canal rectificador de potasio Kir1.1 (ROMK) que se cierra en respuesta a pHi < 7.0, actuando como mecanismo de feedback acoplando la retencin de K+ durante la acidosis metablica; existen otros canales de K+ en los que la acidificacin del LIC en cambio los abre, los TREK-1 que poseen una regin sensible a H+ en su carboxilo terminal, con la subsecuente salida de potasio e hiperpolarizacin, como la que ocurre durante la isquemia cerebral cardaca. Lo mismo ocurre sobre uniones gap que modifican su conductancia ante cambios en el pHi. Por ello la fina regulacin del pHi es condicin para el normal funcionamiento y supervivencia celular. El valor del pHi cuantificado por mediciones es mayor al esperado si se considera que los H+ tienden a entrar a la clula pasivamente siguiendo su gradiente electroqumico, como tambin los cidos dbiles como el NH4+, imponiendo una ganacia de carga cida crnica a la clula junto a las reacciones del metabolismo celular, adems la salida de bases dbiles como el lactato o el acetato y del ion HCO3-; haran pensar en un valor de pHi muy cido de 6.4; valor citotxico y lejos del medido en la mayora de las clulas de 7.2. Este hecho muestra que existen mecanismos que remueven constantemente cidos desde el citosol. Los mecansimos ms poderosos para mantener el pHi entre 7,1 y 7.2 se encuentran en el citosol y son sus propios buffers intracelulares. El poder de amortiguacin total de la clula es la suma de los poderes de amortiguacin de todos los sistemas buffers individuales citoslicos. Acorde a la definicin de Brnsteds los buffers son cidos dbiles que incluyen amonio (NH4-), cido carbnico (H2CO3), fosfato monobsico (H2PO4-) con sus correspondientes bases dbiles conjugadas. Los buffers citoslicos pueden ser divididos en dos clases: buffers intrnsecos que son sistemas buffers cerrados donde ningn miembro del par amortiguador puede escapar agregarse, el fosfato inorgnico y las protenas pertenecen a este grupo, y los buffers
extrnsecos que son sistemas buffers abiertos en los que una de las partes del par puede atravezar la membrana como el CO2/HCO3-, butirato/cido butrico, NH3/NH4-. El sistema CO2/HCO3 otorga alrededor del 60% del poder amortiguador, el CO2 es un cido voltil y cambia libremente segn las condiciones y el HCO3- esta presente en las clulas a concentraciones significativas, la prdida de bicarbonato celular es compensada por la hidratacin de CO2 y la generacin de H+; as la importancia del bicarbonato celular depende de la capacidad amortiguadora y la actividad de la anhidrasa carbnica celular. La respuesta a alteraciones agudas del pHi son mediadas principalmente por el poder amortiguador intracelular, y si las alteraciones son a largo plazo participan los mecanismos alcalinizantes expulsores de cido y acidificantes cargadores de cidos. As, la concentracin de H+ intracelular es directamente proporcional de la diferencia entre la actividad de los expulsores de cidos y cargadores de cido e inversamente proporcional al poder amortiguador total.
Mecanismos alcalinizantes del LIC Expulsores de cidos Son transportadores que eliminan activamente H+ y acumulan bases dbiles como HCO3- alcalinizando el pHi. Intercambiadores Na/H (NHE) Es un acuerdo general que todas las clulas poseen intercambiadores Na/H NHE (Na-H Exchangers). Durante la expulsin de H+ una gran cantidad de Na+ entra a la clula y stos iones son eliminados por la bomba Na/K ATPasa.
Son por definicin un transporte activo secundario que cataliza el intercambio reversible y electroneutro de un Na+ hacia el interior celular por un H+ intracelular, como ya fueran descriptos anteriormente en su funcin como reguladores del volumen celular. Al estar acoplado a la regulacin del volumen celular un aumento del Na+ intracelular determinar una disminucin de la actividad del NHE, y como consecuencia una acidificacin del pHi. El NHE se activara por un incremento en la afinidad al H+ en un sitio alostrico en contacto con el LIC, as el aumento de H+ activa al intercambiador alcanzando su mximo rendimiento a un pHi de 6,0 y tornndose prcticamente inactivo a pHi > 7,4. Tiene en su cara citoplasmtica al menos dos sitios de unin para H+ que funcionan separadamente, uno que al ser ocupado induce un cambio conformacional que activa al transportador como fue descripto, y el otro media la expulsin del H+ despus de ser activado. Se han descripto 9 isoformas de NHE que se diferencian por sus funciones y su localizacin en los diversos tejidos. NHE1 es el principal regulador del pHi, ubicuo en las membranas celulares y en la basolateral de los epitelios. Los subtipos NH6-9 se encuentran regulando el pH de las organelas, en endosomas, Golgi, RER; mientras que NH2-4 se encuentran en el sistema digestivo y renal interviniendo en funciones absortivas y secretoras en las que estn involucradas H+. La accin de NHE1 puede ser regulada por hormonas como insulina, adrenalina, vasopresina, endotelina y factores de crecimiento, mediante fosforilacin. La anhidrasa carbnica (AC) tambin se acopla a su sitio de unin del receptor incrementando su actividad para una ms eficaz remocin de protones. Los factores de crecimiento modulan NHE1 modificando su afinidad por H+, y as alcalinizando el LIC, ya que como se ha explicado el pHi es un mediador de la respuesta celular a determinados estmulos que promueven la proliferacin celular, y es la va de Ras que permite a los transportadores de
cidos y bases responder a diversas hormonas y factores de crecimiento. As, existe una serie de sistemas de transduccin de seales tienen relacin con la maquinaria que regula el pHi, y esto es importante en algunas patologas como el cncer. En las clulas cancerosas el efecto del ras oncogen modifica el valor del pHi alcalinizandolo 0.7 al modificar el funcionamiento del intercambiador NHE y con elevacin del HCO3- al modificar la cintica del intercambiador Na/HCO3, el beneficio de estos cambios para las clulas cancerosas es que se adaptan mejor a vivir en el ambiente cido que tiene un tumor slido.
Por lo tanto, puede decirse que NHE adems de regular el pHi y del volumen celular, tambin participa de la respuesta a la accin de factores de crecimiento y en el transporte transepitelial (ver ms adelanten Transporte transepitelial) principalmente en el sistema digestivo y renal. Bombas de protones Las bombas de protones usan la hidrlisis de ATP para remover eficientemente H+, ya sea que estn ubicadas en la membrana celular, como lo es en muchos epitelios, como en estructuras subcelulares (H+ATPasa electrognica), y en ambos casos remueven protones del citosol. Estas bombas son electrognicas, pero en general estn acopladas en paralelo a canales aninicos en sentido cotraparalelo a canales de K+ para contrarrestar este efecto. Aunque es menos relevante, la bomba K/H-ATPasa electroneutra es importante en los procesos de secrecin cida de epitelios como
el gstrico y el renal, pero su funcin en la regulacin del pHi an no est muy esclarecida. Dependiendo de la funcin celular los distintos mecanismos de regulacin del pHi cobran importancia, por ejemplo en la clula muscular esqueltica en actividad el cotransporte lactato/H+ es el ms significativo, ya que posee la mayor capacidad para remover H+, por encima de los mecanismos del NHE y los sistemas dependientes de bicarbonato. Cotransportadores Na/HCO3 (NBC) El cotransportador electrognico Na/HCO3 transporta ambos iones acoplados hacia el interior celular, y puede actuar con una estequimetra 1:2, en cuyo caso opera como un expulsor de cido, aunque su importancia en la regulacin del pHi es escasa Intercambiadores Na/Cl/HCO3 (NCBE) Estos intercambiadores Na/Cl/HCO3 transportan Na+ y bicarbonato hacia el interior celular intercambindolo por Cl-, y tienen una estequiometra 1:1:2, alcalinizando el interior celular. Han sido identificados en neuronas, endotelio, riones, clulas pancreticas , y sus propiedades funcionales ante una cada del pHi dependen del gradiente del Cl-, Na+ y bicarbonato, si bien la energa disponible a travs del influjo de Na+ es suficiente para el intercambio Cl-/bicarbonato. Mecanismos acidificantes del LIC Cargadores de cido Son mecanismos que mediante la prdida de bases dbiles y la entrada de H+ disminuyen el pHi, e incluyen tres mecanismos. Cotransportadores Na/HCO3 (NBC) El cotransportador electrognico Na/HCO3 puede actuar con una estequimetra 1:3 y as acta como cargador de cido. NBC funciona en las clulas del tbulo proximal renal con direccin neta de transporte hacia fuera, en estas clulas es importante en el transporte transepitelial de cidos (ver ms adelante Transporte transepitelial) Intercambiadores Cl/HCO3 (AE) Los intercambiadores Cl/HCO3, independientes de Na+, son un transporte
electroneutro con una estequiometra 1:1 que extrae HCO3- intracelular en intercambio por Cl- extracelular, y promueve la recuperacin del pHi tras una sobrecarga alcalina. Este mecanismo est regulado por el gradiente de Cl- y se activa slo si el pHi se eleva lo suficiente como para alterar la relacin Cl- intra y extracelular, si el gradiente de Cl- se revierte al remover el Cl- del LEC este intercambiador eliminar equivalentes cidos. AE participa tambin en la regulacin del volumen celular (a excepcin del eritrocito) y presenta 3 isoformas, el AE1 es el que se encuentra en los eritrocitos y en rin, el AE2 es el ms ampliamente distribuido y el AE3 que se ubica en cerebro, retina y corazn. Intercambiadores Cl/OH (CHE) Estos intercambiadores expulsan OHen intercambio con Cl-. Interrelacin pH extracelular y pH intracelular La clula puede estar expuesta a cambios en el pH del LEC de distintos orgenes, y estos cambios repercuten en su pHi, a su vez los mecanismos buffers del LIC colaboran con la amortiguacin de los cambios de pH en el LEC. Cuando se produce un aumento significativo de los H+ en el LEC (por ejemplo en una acidosis metablica) el 50% del tamponamiento de estos protones ocurre en el interior celular, si bien la velocidad de difusin de los H+ es lenta y por ende la neutralizacin intracelular es tarda es cuantitativamente importante. En una acidosis metablica se produce una cada en la extrusin de cido porque se inhiben los transportadores expulsores de cido y hay un incremento en la actividad de los cargadores de cidos, cambiando la relacin cintica entre ambos. As, la disminucin del pH del LEC tender a acumular cidos dentro de la clula causando as una acidosis intracelular e induciendo una prdida de K+ del LIC, ya que es liberado al actuar las protenas celulares fosfatos como amortiguadores. Por el contrario, cuando aumenta el bicarbonato del LEC (como en una alcalosis metablica) aproximadamente un 30% de ste es tamponado en el LIC, el dficit de protones
en el LEC determina una salida de H+ en intercambio con Na+ generando una alcalosis intracelular.
una situacin en la que aumenta la PCO2 extracelular, este CO2 difunde rpida y fcilmente a la clula, en el citosol CO2 puede combinarse con H2O y formar H2CO3 y en su mayora (pero no la totalidad) se disocia lentamente en HCO3 y H+.
En las alteraciones que conllevan cambios en la PCO2 (ya sea la acidosis alcalosis respiratoria) el 99% del CO2 es amortiguado en el interior de las clulas. Si consideramos a una acidosis respiratoria como
La mayora de las clulas contienen abundante anhidrasa carbnica, que acelera la acidificacin celular y as se produce una cada aguda en el pHi. La mayora de los protones formados en esta reaccin son amortiguados por buffers distintos del bicarbonato, como par NH3/NH4. En el caso de cada de la PCO2 (por una alcalosis respiratoria) el dficit de protones del LEC es suplido por H+ del LIC, en intercambio por Na+, generando una alcalosis intracelular con prdida de bicarbonato.
Potencial de membrana
Si se mide con un voltmetro la diferencia de potencial elctrico que existe entre el lado interno y externo de la membrana de un clula modelo se obtiene un valor de
aproximado de -65 mV, llamado potencial de membrana (Vm). Este potencial est presente en todas las clulas, aunque con diversidad de valores (entre -50 y -90 mV aproximadamente).
POTENCIAL DE MEMBRANA EN REPOSO
LIC
+ + + + +
- 65 mV Vm
LEC
Cmo se genera el potencial de membrana? La permeabilidad selectiva de la membrana (funcionalmente impermeable al sodio y ms permeable al potasio) y la existencia de una diferencia en la distribucin inica entre el LIC y el LEC permite la existencia de un gradiente qumico que permite
que el K+ difunda por canales de flujo pasivo hacia el LEC. Cuando el K+ fluye hacia fuera de la clula transporta sus cargas positivas hacia el exterior, quedando los aniones no difusibles (principalmente proteinatos) del lado interno de la membrana, ello crea un estado de
electropositividad en el lado exterior y de electronegatividad en el interior. Los aniones proteinatos quedan adosados ya que la membrana acta como un condensador plano dielctrico, formado principalmente por los lpidos que evitan que las cargas negativas y positivas se unan (ver Recuadro N4). Este es el principal mecanismo que da origen a la diferencia de potencial elctrico entre el lado interior y exterior de la membrana plasmtica. Como los iones tienen carga elctrica, y su movimiento est influido tanto por el gradiente qumico como por el campo elctrico generado de un lado y otro de la membrana, su movimento es resultado de una diferencia de gradiente electro-qumico. En el caso del K+ el gradiente elctrico conduce a la atraccin del K+ hacia el interior celular, por lo tanto es influido en sentido opuesto al gradiente qumico, en el momento que ambos gradientes se igualan hay una situacin de equilibrio y el flujo de K+ en ambas direcciones es equivalente, siendo la difusin neta de K+ igual a cero. Para una membrana modelo, con slo canales del flujo pasivo de potasio, el valor del potencial de membrana en el cual el flujo neto es igual a cero se denomina potencial de equilibrio del in (Vin). Para el K+ el potencial de equilibrio (VK) es -80 mV. El potencial de equilibrio de un in se puede calcular con la ecuacin de Nernst, cuya frmula de trabajo es Vin= - 61mV . log [Ci]/[Ce]
C: concentraciones intra y extracelulares
nmero que le otorga en una permeabilidad distinta para cada in. Cuando una membrana es permeable a varios iones, el potencial de membrana depende de tres factores: la polaridad de la carga elctrica de cada in; la permeabilidad de la membrana a cada in y las concentraciones de los respectivos iones en el interior y en el exterior celular. La ecuacin de Goldman-HodgkinKatz proporciona la herramienta para calcular el Vm cuando estn implicados dos iones positivos monovalentes, Na+ y K+, y un ion negativo Cl-:
Vm = -61 log PK+ [K+i] + PNa+ [Na+i] + PCl- [Cl-e] PK+[K+e] + PNa+ [Na+e] + PCl- [Cl-i]
donde PK+, PNa+ y PCl- son las permeabilidades, y calcula el Vm considerando que no hay ninguna bomba electrognica funcionando. Por lo tanto, el potencial de membrana de una clula tendr relacin con el potencial electroqumico de cada in que participa y de las conductancias a cada in (que depende de la permeabilidad que tiene la membrana) y si bien tanto el potasio como el sodio son permeables, el potasio es aproximadamente 18 veces ms que el Na+, por lo tanto, es la difusin de K+ quien ms incidencia tiene en la generacin del potencial de membrana.
En el caso del Na+, como su concentracin es ms elevada en el LEC tiende a difundir hacia en interior de la clula, lo cual crea una fuerza elctrica positiva en el interior y sta bloquea la posterior difusin neta de iones Na+; y en este caso el potencial de equilibrio es de aproximadamente 61mV. Si la clula slo presenta canales de K+ su potencial de membrana es igual al potencial de equilibrio del potasio, pero una membrana celular posee canales de difusin pasiva selectivos para muchos iones, principalmente K+, pero tambin para Na+ y Cl-., en distinto
A un valor terico de potencial de membrana de -65 mV, y teniendo en cuenta la direccin del gradiente electroqumico de cada in, la resultante da una constante entrada de Na+ y salida de K+ de la clula.
Esta fuerza impulsora (i) se puede obtener mediante la diferencia entre el potencial de membrana y el potencial de equilibrio del in i=VmVin para cationes si i da valores negativos de fuerza impulsora indica que tender a entrar a la clula, y con valores positivos que tender a salir; mientras que para aniones los valores negativos de fuerza impulsora sealan que tender a salir y los positivos que tender a entrar la clula. Cuanto ms lejos se encuentre el potencial de equilibrio del in respecto al potencial de membrana, mayor ser la fuerza impulsora; y esta desaparecer si el Vm es igual al Vin. Por ejemplo, para el Cl- la membrana tiene una permeabilidad elevada pero su potencial electroqumico es de -65 mV, muy cercano al potencial de membrana, por lo tanto su flujo neto es cero y no tiene gran influencia en la generacin de la diferencia de potencial de membrana. La existencia del potencial de membrana en reposo se debe a que se alcanza un punto de equilibrio entre el proceso de difusin pasiva de los iones potasio, sodio y la bomba Na/K-ATPasa, para ello se requiere que la clula disponga de suficiente energa, pues
en caso contrario la bomba se detiene y la difusin pasiva distribuira los iones a ambos lados de la membrana, en la proporcin que corresponde al equilibrio de Donnan.
Fuerza impulsora Vm -EK+= + - 65 - ( -80)= +15 mV
K
Na
Vm - ENa += - 65 - (62)= - 127 mV Vm - ECl -= - 65 - (- 65)= 0 mV LIC
Cl -
+ + + + + + + + +
K+
Na+
E Na += 62 mV
ClECl -= -65 mV LEC
El efecto Donnan tambin colabora en un pequeo porcentaje en la generacin del potencial de membrana, como as tambin la bomba Na/K-ATPasa que es electrognica y genera un potencial elctrico negativo del lado interno de la membrana, dando un adicional de negatividad de aproximadamente -4 mv. La bomba a la vez genera y mantiene el potencial de membrana al conservar el gradiente de K+ y Na+.
Recuadro N4
Modelo biofsico de Circuito equivalente de la membrana biolgica Una membrana biolgica que no posee canales dependientes de voltaje tiene un comportamiento semejante al de un circuito elctrico simple, en el que hay un condensador y una resistencia. Las membranas son condensadores formados por dos placas paralelas con una distancia aislante que separa ambas caras, con las cargas elctricas negativas que existen por su lado interno en situacin de reposo, y poseen una alta capacidad de almacenar cargas que determina su capacitancia. La resistencia representa la oposicin de la membrana al paso de cargas a travs de ella y es una consecuencia directa de sus dimensiones moleculares que limita el nmero de iones que fluyen y la velocidad a la que pasan a travs de ella. En una clula no excitable las cargas que pasan a travs de la membrana son principalmente iones potasio, que salen por los canales de difusin, y la resistencia ser menor cuanto ms canales de potasio abiertos haya en la membrana. En este modelo R representa la resistencia a la corriente de iones en los canales inicos, C es la capacidad de la membrana por unidad de rea y Er es la diferencia de potencial entre el interior y el exterior de la membrana (potencial de la membrana V). Segn la Ley de Ohm la corriente elctrica i en ese circuito ser i = V/R; como el recproco de R es la conductancia se puede expresar como i = gV As, por ejemplo para el in sodio hay un gradiente de concentracin y un gradiente elctrico
que favorece su entrada a la clula; elctricamente se puede resumir esta situacin en un circuito con una pila representada por el potencial de equilibrio del Na+ (VNa+) orientada con el positivo hacia adentro y el negativo hacia afuera, una resistencia (RNa+) que tiene cierta conductancia (gNa+) como la inversa de la resistencia (g=1/R), que es ms fcil de asimilar con permeabilidad pues a mayor permeabilidad mayor conductancia; y un potencial de membrana (Vm). La corriente de Na+ (iNa+) que puede ser calculada por la Ley de Ohm es proporcional a la conductancia al Na+ y a la diferencia que haya entre el potencial de equilibrio del Na+ y el potencial de membrana. La corriente de sodio (iNa+) tiende a descargar el capacitor, o sea la membrana, y eventualmente hacer que se invierta su polarizacin, pero esto no ocurre porque otros iones mantienen la polarizacin de la membrana.
De esta forma se pueden representarse las condiciones de los iones que participan en el potencial de membrana
Excitabilidad
La excitabilidad es la facultad de entrar en accin bajo la influencia de un estmulo, las clulas del organismo que poseen esta propiedad conforman los tejidos excitables, ya que si bien todas las clulas poseen una diferencia de potencial entre ambos lados de la membrana denominada potencial de membrana (Vm), slo las clulas excitables tienen la capacidad de responder a un estmulo cambiando la polaridad de la membrana. As, las membranas de los tejidos excitables, neuronas y msculos, responden a estmulos generando potenciales de accin (ver Recuadro N4).
Un potencial de accin puede definirse como un cambio rpido y reversible de la polaridad de la membrana ante un estmulo, siempre de la misma intensidad, con capacidad de autopropagarse para actuar como una seal de transmisin. La conductibilidad es otra propiedad de los tejidos excitables, pues el llamado impulso puede propagarse a otras zonas de la clula a clulas vecinas, ya que la membrana celular se comporta como un conductor de corrientes de pequea intensidad.
Recuadro N4
La neurona como modelo de clula excitable: unidades estructurales y funcionales que generan, conducen y transmiten seales elctricas Cada neurona posee una relacin estructura-funcin que le permite recibir seales qumicas (en dendritas principalmente), integrar la informacin (en el soma), generar potenciales de accin (en el cono axnico), conducir la seal elctrica (por el axn) y transmitirla a la clula vecina (en la terminal axnica). Existen muchos tipos de neuronas, cada una posee una estructura (largo del axn, cantidad de dendritas, etc) y una ultraestructura
Homeostasis celular Dra. Cremer
(tipo de canales inicos, maquinaria de sntesis de neurotransmisor) que depende de la funcin que cumple en el sistema nervioso.
Cajal defini que las neuronas eran clulas independientes, esa evidencia la obtuvo de las investigaciones realizadas con la tcnica modificada por Camillio Golgi (mtodo de la reazione nera -reaccin negra- de 1873) de tincin cromoargntica especfica para tejido nervioso. Golgi, investigador contemporneo de Cajal, estableci en sus estudios las clulas nerviosas poseen solamente un axn, el que emite colaterales que dan lugar a un plexo axnico; y describi que las dendritas terminaban libremente. Sugiri que existen dos clases principales de clulas nerviosas: tipo I o clulas cuyo axn despus de emitir colaterales entran en la sustancia blanca (clulas de proyeccin) y tipo II o clulas cuyo axn permanece dentro de la corteza (interneuronas). A pesar de sus propias observaciones, Golgi fue el defensor ms destacado de la Teora reticular, que propona que las colaterales axnicas se anastomosaban y formaban una red muy extendida, y sugiri que el sistema nervioso consista en una rete nervosa diffusa (red nerviosa difusa) confirmando la Teora reticular de Gerlach. Golgi mantuvo esta idea, incluso en la conferencia que pronunci cuando recibi el Premio Nobel de Medicina y Fisiologa, que comparti con Cajal, en 1906 por sus contribucines al conocimiento de la estructura del sistema nervioso; a pesar de defender ambos dos teoras diferentes.
As, las neuronas pueden clasificarse funcionalmente en sensoriales, que llevan la informacin al sistema, motoras que inervan los efectores, e interneuronas, responsables de la modificacin, facilitacin o inhibicin, coordinacin e integracin, entre la entrada sensorial y la salida motora. Morfolgicamente esta neuronas presentan diferencias ya que las sensoriales, como las de la retina y el epitelio olfatorio tienen dos procesos una dendrita y un axn, son neuronas bipolares; mientras que otras neuronas tienen los dos procesos fundidos que en ocasiones parecen uno, las llamadas seudounipolares, como las de los ganglios de la raz dorsal. Por su parte, las interneuronas y motoneuronas son neuronas multipolares que se caracterizan por poseer un axn y mltiples dendritas. Santiago Ramn y Cajal, mdico investigador espaol (1852-1934), siempre interesado por correlacionar estructura y funcin, aport una interpretacin funcional de las estructuras que observaba con su microscopio que lo condujo a desarrollar la Teora Neuronal. De esta forma cambi el paradigma imperante en la poca, ya que demostr la independencia morfolgica y funcional de las neuronas, pues hasta ese momento se afirmaba que entre las clulas nerviosas exista una relacin de continuidad formando una red donde las seales nerviosas se podan conducir sin interrupciones.
En las primeras preparaciones histolgicas (cerebelo de gallina) teida con el mtodo de Golgi, Cajal hizo las trascendentales observaciones de que todas las dendritas y colaterales axnicas de la clula nerviosa terminan libremente, formaban una arborizacin libre (sin anastomosis) y varicosa (dilatacin o ensanchamiento axnico) afirmando que "cada clula nerviosa es un cantn fisiolgico absolutamente autnomo" que se comunican entre s por contacto o contigidad, no por continuidad.
Adems, describi por primera vez la existencia de espinas dendrticas, las cuales, desde entonces hasta nuestros das, han sido objeto de una intensa investigacin. Cajal propuso que las espinas dendrticas servan para conectar los axones con las dendritas y que representaban un aspecto morfolgico fundamental que "conviene conocer porque acaso andando el tiempo alcancen trascendencia fisiolgica" (Cajal, 1890), ya que para l eran elementos clave para la relacin estructura y funcin de las neuronas.
Pero en su poca no existan instrumentos que permitan la comprobacin fisiolgica de estos dos principios que denomin Ley de la polarizacin dinmica del impulso nervioso, que explica la conduccin unidireccional de la seal nerviosa y Principio de especificidad de las conexiones.
Actualmente se sabe que las espinas dendrticas representan el principal sitio postsinptico en donde se establecen las sinapsis excitadoras, son elementos clave en la plasticidad del cerebro y sus alteraciones constituyen el correlato anatomopatolgico ms consistente en diversos tipos de deficiencias mentales. Para Cajal estaba claro que la corriente nerviosa tena que seguir una direccin determinada; de las dendritas al cuerpo neuronal y de ste al axn, que a su vez, transmite el impulso a otras dendritas de otras clulas; y que las neuronas no se comunican en forma indiscriminada conformando redes azarosas, sino hacen contacto con neuronas dianas en lugares especiales de contacto.
Los avances tecnolgicos han permitido determinar que los puntos de contacto que describi Cajal corresponden a las sinapsis, que fueron confirmados mediante el microscopio electrnico sesenta aos ms tarde y los registros electrofisiolgicos han confirmado la Ley de polarizacin y el Principio de especificidad. Gran inters tuvo tambin su Teora del neurotropismo, para explicar cmo los axones de las neuronas en desarrollo embrionario emigran hacia una direccin determinada atrados por sustancias neurotrpicas, y que hoy conocemos como factores de crecimiento; y su hiptesis que el aprendizaje hace que clulas nerviosas existentes emitan o hagan crecer nuevas prolongaciones para reforzar sus conexiones con otras clulas nerviosas, as que sea posible comunicarse con ellas ms eficazmente.
Potenciales locales y generacin del potencial de accin

Si bien se define a los potenciales de accin como la respuesta de las clulas excitables ante un estmulo, los estmulos que recibe la neurona en su zona receptiva dendrtica genera potenciales locales. Los potenciales locales se propagan pasivamente a lo largo de la membrana dendrtica (y del soma) en todas direcciones por conduccin electrotnica. Este cambio local en el Vm en respuesta a un estmulo depende de las propiedades pasivas de la membrana, pues su amplitud de muy pocos mV y depende de la intensidad del estmulo (no tienen umbral de descarga y siempre se desarrollan ante el estmulo) y ello determina que sea una respuesta graduada.
La amplitud del potencial local depende de la resistencia de la membrana al flujo de corriente, a mayor resistencia mayor amplitud (mientras no se activen canales voltaje-dependientes). Esta resistencia depende de la densidad y conductividad de los canales pasivos y del tamao del soma de la clula excitable, a menor rea de membrana, menor nmero de canales por donde pueden fluir iones pasivamente, mayor resistencia de entrada y mayor amplitud; o lo opuesto si existen muchos canales en la membrana para la difusin pasiva de potasio en la vecindad del lugar de estimulacin, salen muchas cargas positivas compensando las que han entrado en el punto de estimulacin, por lo tanto disminuye la amplitud. Por otro lado, en estos potenciales locales que se propagan electrotnicamente se produce una cada de la amplitud a medida que se aumenta la distancia respecto al sitio de estimulacin, este efecto se debe a que el citoplasma del interior de la dendrita ofrece resistencia al flujo longitudinal (resistencia axial) de la corriente elctrica, ya que en su pequea seccin se generan gran nmero de colisiones. As, a menor dimetro hay mayor resistencia y por lo tanto la despolarizacin decae a menor distancia (constante espacio), o en el caso opuesto a mayor dimetro los iones positivos pueden moverse con ms facilidad a lo largo de la fibra, en vez de salir de la misma, por lo que llegarn ms lejos, y mantendrn la despolarizacin a una distancia ms grande, por lo tanto la constante de espacio ser mayor. La duracin de la despolarizacin local generada por el estmulo (constante tiempo) depende principalmente de la capacitancia de la membrana, ya que a mayor capacitancia se enlentece la respuesta de voltaje y tarda ms en recuperar el valor del Vm. Estos potenciales locales que se producen en la neurona en la zona de recepcin (dendritas y soma) pueden ser potenciales post-sinpticos excitatorios (PPSE) (causan despolarizacin) o
potenciales post-sinpticos inhibitorios (PPSI) (causan hiperpolarizacin).
Un PPSE aislado es incapaz de inducir un potencial de accin, deben sumarse varios PPSE temporal y/o espacialmente para inducir un potencial de accin. Como los potenciales locales generados en las dendritas son conducidos slo electrotnicamente (o sea por intercambio de cargas punto a punto en la membrana), y no tienen perodos refractarios, pueden ser sumados. La sumacin puede ser temporal, dependiendo de la constante tiempo (dos potenciales locales provenientes de dos estmulos seguidos pueden generar un potencial local de mayor amplitud) y espacial, dependiendo de la constante espacio (dos potenciales locales provenientes de dos estmulos cercanos se acoplan para generar un potencial local de mayor amplitud).
La sumacin temporal depende de la cantidad de impulsos que la neurona presinptica transmite por la unidad de tiempo (frecuencia) y la sumacin espacial tiene relacin con el nmero de sinapsis cercanas que se activan al mismo tiempo.
As, un estmulo puede generar una elevacin inicial en el Vm al abrir canales de Na+ ligando dependientes en las sinapsis, si el flujo de Na+ que entra a la clula supera el flujo pasivo de K+ que sale de ella, induce una pequea despolarizacin que genera potenciales locales, que sumados podrn modificar el Vm en varios mV, alrededor de 30 mV, y generar un potencial de accin. Entonces, si bien se define al potencial de accin como la repuesta de las clulas excitables ante un estmulo, no todos los estmulos pueden generarlos, slo aquellos que generan potenciales locales que sumados generen un cambio en la polaridad de la membrana suficiente como para activar los canales voltajedependientes en el cono axnico. El valor de Vm a partir del cual comienzan a abrirse canales voltajedependientes se denomina potencial umbral nivel de despolarizacin, los estmulos que generan potenciales locales por debajo de ese valor se denominan subumbrales y no generarn PA.
Esta capacidad de sumacin de los potenciales locales PPSE y PPSI es la base de la integracin de la informacin en el soma de la neurona. Cabe recordar que las dendritas como zona receptora poseen principalmente canales ligando-dependientes asociados a las sinapsis, mientras que el soma presenta canales ligando-dependientes y tambin un pequeo nmero de canales voltajedependientes, stos aumentan en nmero y se concentran especialmente en el cono axnico, fundando las bases ultraestructurales de las diferencias entre potenciales locales postsinpticos y potenciales de accin.
La generacin y forma (amplitud y duracin) de los potenciales de accin dependen del subtipo de canales voltajedependientes que posee la membrana, y responden a la funcin que cumple la clula excitable. En algunos casos las membranas son autoexcitables, como en el nodo sinusal del corazn en grupos de neuronas del sistema nervioso central y clulas
musculares lisas del tubo digestivo, en estos casos el Vm se encuentra muy cercano al umbral y por distintos mecanismos inicos que permiten la acumulacin de K+ en el LIC el ingreso constante y con mayor intensidad de Na+, se genera una despolarizacin llega al umbral sin estmulo. As, se puede determinar que cuanto ms cercanos el Vm y el potencial umbral ms excitable es la clula. Por otro lado, cambios en las concentraciones inicas del LIC y el LEC
que afecten el Vm tambin modificarn la excitabilidad de la membrana. Por ejemplo, con una concentracin de potasio plasmtico de 2,5 mEq/L, si se considera que el potasio es el in ms importante para determinar el Vm, aplicando la Ecuacin de Nernst se obtiene un EK de -109 mV, por lo tanto las clulas excitables estarn hiperpolarizadas pues el Vm estar ms alejado que lo habitual del potencial umbral, la excitabilidad ser menor y se requerirn estmulos mayores para generar potenciales de accin.
El potencial de accin es un cambio rpido y reversible de la polaridad de la membrana ante un estmulo, siempre de la misma intensidad. En las clulas excitables estimuladas, una vez alcanzado el potencial umbral, se abren rpidamente los canales voltaje-dependientes de Na+, durante el primer mseg, generando el potencial de accin. A valores de potencial de reposo la compuerta de activacin est bloqueando el canal y la de inactivacin abierta, el canal est en estado cerrado. La compuerta de activacin se abre con el Vm entre -70 y 50 mV, quedando el canal en estado abierto.
Con la rpida apertura de los canales de Na+ voltaje-dependientes se inicia la fase de despolarizacin, que permite un aumento rpido pero transitorio en la permeabilidad al Na+, generando un gran incremento en la conductancia al sodio (gNa). Los canales de Na+ voltajedependientes poseen dos compuertas, una ms prxima al exterior del canal (compuerta de activacin) que tiene una carga positiva en el extremo, y cuanto ms negativo sea el interior celular ms cerrada se encuentra la compuerta, slo se abre cuando el interior celular se hace positivo; y otra del lado interior (compuerta de inactivacin).
Como el Vm est muy alejado del potencial de equilibrio del Na+ (VNa), ste entra a la clula a favor de su gradiente, acercndose al VNa; as el Vm alcanza valores positivos, entre +20 y +50 mV dependiendo del tipo de clula. La cantidad de iones Na+ que atraviezan la membrana no modifica sustancialmente su concentracin en el LIC, slo genera cambios en la polaridad de la membrana adyacente que hace que ms canales de Na+ voltaje-dependientes se abran, produciendo una autorregeneracin del potencial de accin en cada punto de la membrana adyacente, como un crculo de retroalimentacin positiva que abre ms canales de Na+ voltaje-dependientes; este proceso se conoce como ciclo de Hodgkin. El estado de inactivacin se produce cuando la compuerta de inactivacin ocluye el canal, y sta no volver a abrirse hasta que el Vm se aproxime a su nivel original de reposo, recin all vuelve al estado cerrado. La inactivacin ocurre por un mecanismo automtico pues la compuerta de inactivacin se mueve porque se movi la compuerta de activacin. En el momento en que el flujo de Na+ decae por la inactivacin de sus canales se produce el potencial de inversin. La amplitud del potencial de accin depender entonces de la gNa+ y de la apertura tarda de los canales voltajedependientes de K+, que se activaron al mismo momento que los canales voltajedependientes de Na+, pero que se terminan de abrir unos 2,5 mseg despus.
Por lo tanto, el cambio en la gK se opone a la entrada de sodio y hace que el potencial de accin no llegue al potencial de equilibrio del Na+, determinado su amplitud. La amplitud del potencial de accin puede variar de un tipo neuronal a otro, pero siempre tiene la misma amplitud en la neurona una vez que se pasa el umbral y aunque el estmulo aumente su intensidad. La apertura de los canales de K+ voltaje-dependientes provoca un aumento en la permeabilidad al potasio, y dado que en ese momento el Vm se encuentra muy alejado del VK, se produce un flujo neto hacia fuera de K+, mecanismo que genera la fase de repolarizacin, pues el K+ tiende a salir tanto por gradiente de concentracin como por gradiente elctrico, y en 2 mseg se restablece el potencial de reposo. Los canales voltaje-dependientes de K+ poseen dos estados, abierto y cerrado, en el potencial de reposo la compuerta del canal de K+ est cerrada, al iniciarse la despolarizacin se inicia un lento cambio de conformacin que abre la compuerta varios mseg despus.
Estos canales, en muchos casos como en las neuronas motoras, permanecen abiertos ms tiempo y por ello se da la fase de hiperpolarizacin post-potencial hiperpolarizante, ya que no vuelve exactamente al valor del potencial de reposo si no que se hace an ms negativo. En otras clulas, como las del msculo esqueltico, la pendiente de descenso del PA es menos pronunciada y llega al potencial de reposo con cierto retraso.
relatico (PRR) durante el cual puede llegar a desencadenarse otro potencial de accin si el estmulo es supraumbral. El PRA ocupa aproximadamente 2/3 del potencial de accin y coincide con la despolarizacin en la que los canales de sodio voltaje-dependiente estn abiertos y el primer tercio de la repolarizacin en la que los canales se inactivan y no se puede reiniciar un ciclo de Hodgkin, de all la refractariedad. Los gradientes de Na+ y K+ se restablecen despus de los potenciales de accin, ya que los iones Na+ que difundieron al interior de la clula durante la despolarizacin y los iones K+ que difundieron al exterior son paulatinamente intercambiados por la bomba Na/K ATPasa, y dado que es un proceso activo la neurona utiliza un gran porcentaje del ATP que produce en este proceso. El potencial de accin es una respuesta estereotipada, cumple con la ley del todo o nada, ello quiere decir que si supera el umbral se dispara alcanzado siempre la misma una amplitud y duracin en la neurona. Los valores del potencial umbral (-60 a -40 mV) y del potencial de inversin son muy variables dependiendo el tipo de neurona y la funcin que cumpla. Durante el potencial de accin pueden determinarse dos perodos, el refractario absoluto (PRA) que es el tiempo durante el cual la membrana no responde a un nuevo estmulo, y el perodo refractario Durante la ltima etapa de la fase de repolarizacin y la fase de hiperpolarizacin, se da el PRR, en l hay una corriente saliente de K+ y por lo tanto hay que sobrepasar esta corriente para generar una despolarizacin suficiente que supere el umbral de activacin de los canales de Na+, y eso slo se logra con un estmulo despolarizante de gran magnitud.
Recuadro N5
Canales voltaje-dependientes
Los canales inicos regulados por voltaje voltaje-dependientes tienen propiedades que permiten a las clulas excitables generar potenciales de accin, pues se abren en respuesta a cambios en el potencial de membrana. Adems, presentan especificidad inica, el tiempo que se mantienen abiertos tambin es dependiente del voltaje, la corriente inica que generan es del todo o nada y poseen un estado refractario durante el cual no pueden responder a nuevos cambios de voltaje.Los canales de Na+, K+ y Ca2+ voltaje-dependientes se abren cuando la membrana se despolariza y todos ellos han sido clonados, encontrndose en todos una estructura primaria, secundaria y terciaria similar. Para que el canal pueda responder a las alteraciones del potencial de membrana debe contener dentro de su campo elctrico (es decir dentro de la membrana) residuos de aminocidos que estn cargados o que se
comporten como un dipolo, esta regin es el sensor de voltaje, cuando el potencial cambia, el campo elctrico causa una fuerza en el sensor que lo modifica y abre el canal. Canales de Na+ voltaje-dependientes Existe un nico tipo de canal de Na+ voltaje-dependiente en la neurona, con distintos subtipos I.1I.6, pero en otros tejidos excitables como msculo y corazn se han identificado otros tipos de canal denominados 1, PN1, h1 con caractersticas estructurales similares. Los canales de Na+ voltaje-dependiente neuronales han sido encontrados en distintas zonas de la neurona. En el soma y algunos axones los subtipos I.1, I.2 y I.3; en el cono axnico (sitio de menor umbral de toda la neurona) los subtipo I.2 y I.6, estos ltimos contribuyen a la capacidad de generar mayor frecuencia de potenciales de accin; y se encuentran tambin I.6 en los nodos de Ranvier. Recientemente se han hallado I.6, I.2 en algunas dendritas y en poca densidad en el internodo de Ranvier. Ubicacin Cerebro Msculo esqueltico Ganglios simpticos Corazn Ganglio dorsal Clasificacin I.1 I.6 1 PN1 h1 PN3/SNS
Una vez activado el canal, la duracin de la apertura esta controlada por distintos mecanismos segn el tipo de canal.
Cada uno de estos subtipos de canales tiene una cintica particular que hace a la funcin de la neurona, ya que tienen distinta sensibilidad a los cambios de voltaje su tiempo de apertura y cierre son distintos. La tetrodotoxina (TTX) cuando se agrega del lado externo de la membrana de una clula excitable reduce el PA o ste desaparece. Como TTX acta cuando se la agrega del lado extracelular, y no cuando se la agrega al LIC, actuara sobre la compuerta de activacin que se encuentra ms cercana al lado externo de la membrana, y ayuda a la identificacin de los subtipos de canales voltaje-dependientes de Na+ hallados en los tejidos excitables.
Sensible TTX Si Si Si No No
Canales de K+ voltaje-dependientes Los canales de K+ voltaje-dependientes son estructural y funcionalmente diversos, y juegan un rol muy importante determinando las caractersticas de la espiga, modulando el potencial de reposo, el umbral, y la hiperpolarizacin. Los canales de potasio voltajedependientes se pueden clasificar segn las subunidades que rodean al poro. La mayora pertenece al grupo de canales de 6 regiones de transmembrana y un poro (Kv), que se expresan en los tejidos excitables. Los canales Kv (tambin llamados KCNQ) son importantes en el control de la excitabilidad neuronal y presentan varios subtipos. Kv1 se encuentra en el axn, principalmente en los dominios yuxtaparanodales, son muy sensibles al cambio de potencial con una rpida activacin y lento cierre, limita la hiperexcitabilidad y ayuda a
mantener la fidelidad de la propagacin de la frecuencia del potencial de accin. Kv2 se encuentra en el soma y dendritas y nodos, y su cintica es regulada por la fosforilacin-defosforilacin inducida por mensajeros qumicos. Kv3 es el ms comn en las neuronas, por su cintica modula el periodo refractario definiendo el patrn de frecuencia de disparo del potencial de accin, se encuentran en abundancia en el cono axnico de interneuronas hipocampales de rpida descarga, tambin en el nodo y yuxtaparanodo del axn generando una corriente rpida de potasio, en el soma y terminales presinpticas. Kv4 se encuentra en soma y dendritas, y en msculo cardaco, est involucrado en reforzar las corrientes transitorias de potasio, y es regulado por PKA y ERK que lo bloquean. Kv7.2 y Kv7.3 se encuentran en soma y dendritas, y Kv7.1 es responsable de la corriente lenta de potasio IKs en el corazn, esta corriente es crtica en la repolarizacin cardaca
y el upregulation de estos canales es importante durante la estimulacin simptica para acelerar la repolarizacin. Tambin estn los canales voltajedependientes de potasio con 4 segmentos transmembrana y dos poros, llamados canales rectificadores de entrada lentos (CLK), que modulan la despolarizacin en repuesta a descargas rpidas, stos se encuentran en corazn, cerebro, espina dorsal. Otros tipos de canales voltaje dependientes de potasio incluyen de alta conductividad activados por Ca2+ (llamados maxi-K BK big-K), stos estn presentes en algunas neuronas cercanos al cono axonal y participan en la regulacin de la frecuencia de descarga del potencial de accin. Son activados por la despolarizacin y los niveles de calcio intracelular reducen el nivel de despolarizacin necesario para su apertura. Estos canales pueden formar complejos con los canales de calcio tipo L, tipo N y tipo P/Q. Canales de Ca+2 voltaje-dependientes Son la va ms importante para la entrada de Ca2+ en las clulas excitables, iniciando una variedad de procesos intracelulares entre los que se incluyen la liberacin de neurotransmisores, la expresin gnica, la modulacin de la excitabilidad de la membrana y el crecimiento de neuritas. Se han clasificado segn el voltaje necesario para desencadenar el paso de la corriente de Ca+2 en tres grupos, activados por alto voltaje (tipos L, N, P y Q), activados por voltaje intermedio (tipo R) y activados por bajo voltaje (tipo T). Los canales de calcio voltajedependientes tipo P parecen ser los ms ampliamente distribuidos en el sistema nervioso central de mamferos, y tambin se han descripto en retina, hipfisis, clulas cromafines y se los ha relacionado con la modulacin de la actividad neuronal y liberacin de neurotransmisores. El canal de calcio voltaje-dependiente tipo N participan en la excitabilidad de membrana, crecimiento axonal, migracin neuronal y salida de neurotransmisores. El canal de calcio voltaje-dependiente tipo L expresado en el sistema nervioso posee
Existen canales de potasio que no dependen directamente del voltaje, pero son muy importantes en el funcionamiento de tejidos excitables y secretores ya que modifican la excitabilidad de la membrana. Entre ellos estn los canales rectificadores de entrada rpida (Kirs) tambin llamados canales rectificadores de corriente interna rectificadores de entrada rpidos (Inward rectifierCRCI) que determinan potenciales en reposo en la mayora de la clulas, porque se encuentran abiertos en una situacin de equilibrio. Entre ellos se encuentran tambin los canales de potasio sensibles a ATP (Kir 6.1 y Kir 6.2) y as integran el estado metablico con la excitabilidad de la membrana, se encuentran por ejemplo en las clulas del pncreas. En este grupo est tambin el canal de potasio asociado al receptor colinrgico muscarnico (Kir3.1 y Kir3.4), que son regulados por la estimulacin del receptor M2 asociado a protenaG en el corazn.
sitios de fosforilacin para la PKA y PKC, han sido encontrados en los somas de neuronas de ganglios espinales, pero no existe evidencia clara sobre su expresin en membranas axonales; constituyen la principal va de entrada de iones Ca2+ en las clulas de los msculos cardaco, esqueltico y liso, y contribuyen de forma significativa a controlar la liberacin de neurotransmisores y el mecanismo de acoplamiento excitacin-contraccin. Los canales de calcio voltajedependientes tipo T han sido descriptos en neuronas sensoriales y msculo cardaco, liso y esqueltico; tienen funcin relacionada principalmente con la actividad rtmica (marcapasos) y la entrada de Ca2+ a potenciales negativos, se inactivan durante la despolarizacin y se cierran durante la repolarizacin ms lentamente que los canales L y N. Los canales voltaje dependientes de calcio tipo Q y R se hallan en neuronas granulares de cerebelo, en hipocampo y en clulas cromafines, tienen una cintica de inactivacin ms rpida y se ha sugerido que jugaran un papel predominante en la neurotransmisin glutamatrgica
Codificacin de la seal
Dado que la amplitud y duracin de los potenciales de accin no vara; la codificacin del mensaje llevado por un potencial de accin est dada por un cambio en la frecuencia de descarga, denominado cdigo de frecuencia. La frecuencia de descarga de los potenciales de accin en el cono axonal tiene directa relacin con los periodos refractarios, ya que durante los mismos la excitabilidad de la membrana esta modificada.
canales de sodio voltaje-dependientes que se abren rpidamente y por corto tiempo pues su umbral de activacin es cercano a 65 mV, y pasan a estado cerrado rpidamente resultando en un PRA, ms corto. Estos cambios en la excitabilidad de la membrana determinan la mxima frecuencia a la que se puede descargar un potencial de accin, ya que cuanto ms tiempo dure el PRA, porque los canales de Na+ voltaje-dependientes son de un subtipo con inactivacin larga, menos potenciales de accin se dispararn por unidad de tiempo. As, se puede establecer la codificacin neural, ya que existe una relacin intensidad de estmulo, amplitud del potencial local y frecuencia de descarga de potencial de accin, pues a mayor intensidad de los estmulos, se genera un potencial local de mayor amplitud que permitir superar el umbral en el cono axnico y se disparn potenciales de accin a mayor frecuencia de descarga.
mV 60 40 20 0 -20 -40 -60 -80 -100 -120
Frecuencia (unidad/tiempo)
Amplitud (mV)
Duracin (mseg)
Tiempo
Muchas neuronas pueden tener una frecuencia de disparo alta porque poseen
Homeostasis energtica celular

La actividad celular est regulada de modo tal que la clula pueda mantenerse a s misma en un estado estacionario, en el que slo genera aquellas molculas que requiere para desarrollarse en forma adecuada bajo las condiciones normales. Las actividades metablicas celulares se controlan de un modo integrado teniendo en cuenta las reacciones se estn produciendo en otras partes de la clula. Mediante la coordinacin de cundo y cmo se realizan estas reacciones la clula se asegura que no se produzca una deplecin de sus reservas energticas por la acumulacin de molculas que no se requieren en ese momento. La compleja red de reacciones en la clula est regulada y coordinada con precisin. El metabolismo puede controlarse de varias maneras a travs de la regulacin de la actividad enzimtica. Las cantidades de enzimas y su actividad estn controladas a nivel gnico, cintico y neuro-endcrino. La compartimentacin de la clula tambin colabora con el control de las reacciones metablicas al limitar el contacto de los reactantes y el destino de determinadas molculas, por ejemplo los cidos grasos transportados al interior de la mitocondria se degradan rpidamente, a diferencia de los cidos grasos del citosol, que son esterificados o excretados. Las interacciones alostricas tambin participan de la regulacin metablica ya que los puntos de control son generalmente reacciones irreversibles (etapa limitante) y es normalmente regulada alostricamente, por ejemplo la fosfofructokinasa de la gluclisis; adems muchas enzimas estn controlados por modificacin covalente, como la actividad de la glucgeno fosforilasa que aumenta mediante la fosforilacin. Tambin en el metabolismo celular la inhibicin de una enzima por retroalimentacin por uno de los productos finales de la va es una forma de regulacin, este tipo de inhibicin puede funcionar casi instantneamente y es revertida cuando caen los niveles del producto, por ejemplo en el metabolismo proteico cuando el aumento de homosiderina inhibe el paso de aspartato a aspartil fosfato. Las enzimas tambin estn sujetas a regulacin positiva al ser estimuladas por un producto en una rama del laberinto metablico que estimula la actividad de una enzima en otra va, por ejemplo la acumulacin de ADP activa a varias enzimas que participan en la oxidacin de los azcares.
Conexiones claves del metabolismo celular: Glucosa-6-fosfato, Piruvato y Acetil-CoA Los factores que regulan el flujo de molculas en el metabolismo celular poseen tres puntos claves: la glucosa-6-fosfato, el piruvato y el acetil-CoA. La glucosa que entra en la clula se fosforila rpidamente a glucosa-6-fosfato, la cual puede almacenarse como glucgeno, degradarse va piruvato o convertirse en ribosa-5-fosfato. Cuando la glucosa-6-fosfato y el ATP abundan se forma glucgeno. Por el contrario, cuando se requiere ATP o esqueletos carbonados para la biosntesis, la glucosa-6fosfato se degrada por la va glucoltica. El tercer destino principal de la glucosa-6-fosfato es transformarse, a travs de la va de las pentosas fosfato, y suministrar NADPH para las biosntesis reductoras, y ribosa-5-fosfato para la sntesis de nucletidos. La glucosa-6fosfato puede formarse por movilizacin del glucgeno o puede sintetizarse por la va gluconeognica a partir de piruvato y aminocidos gluconeognicos. Tanto el hgado como el rin se distinguen por tener glucosa6-fosfatasa, que posibilita la liberacin de glucosa hacia la sangre. El piruvato deriva fundamentalmente de la glucosa-6-fosfato, del lactato y de la alanina. La reduccin del piruvato catalizada por la lactato deshidrogenasa genera NAD+, el cual permite que la gluclisis pueda proseguir de modo transitorio en condiciones anaerbicas. El lactato que se forma en los tejidos activos se oxida a piruvato,
principalmente en el hgado. Otra reaccin es la transaminacin del piruvato a alanina; de modo recproco, se pueden convertir aminocidos en piruvato. As, la transaminacin constituye la principal conexin entre el metabolismo de aminocidos y de azcares. Un tercer destino del piruvato es su carboxilacin a oxalacetato en el interior de la mitocondria. Esta reaccin y la posterior conversin del oxalacetato en fosfoenolpiruvato evita una etapa irreversible de la gluclisis y permite sintetizar glucosa a partir de piruvato. La carboxilacin del piruvato es tambin importante para reponer los intermediarios del ciclo del cido ctrico. Cuando este ciclo es insuficiente debido a la escasez de oxalacetato, la sntesis de este compuesto se ve favorecida por la activacin de la piruvato-carboxilasa, gracias a la accin del acetil-CoA. Por otro lado, cuando el ciclo del cido ctrico queda inhibido por la abundancia de ATP, el oxalacetato, sintetizado a partir del piruvato, se desva hacia la va gluconeognica. El cuarto destino del piruvato es su descarboxilacin
oxidativa a acetil-CoA. Esta reaccin irreversible, llevada a cabo en el interior de la mitocondria, es decisiva en el metabolismo pues compromete los tomos de carbono de los azcares y aminocidos hacia su oxidacin en el ciclo del cido ctrico o hacia la sntesis de lpidos. Las principales fuentes de acetil-CoA son la descarboxilacin oxidativa del piruvato y la beta-oxidacin de los cidos grasos, tambin puede derivar de aminocidos cetognicos. El destino del acetil-CoA es muy restringido, el fragmento acetilo puede oxidarse completamente a CO2 en el ciclo del cido ctrico; otro proceso es que 3 molculas de acetil-CoA formen 3-hidroxi-3metilglutaril-CoA precursor del colesterol y cuerpos cetnicos, que son formas de transporte de acetilos entre el hgado y algunos tejidos perifricos y el tercer destino importante del acetil-CoA es por medio de su salida al citosol en forma de citrato para sintetizar cidos grasos.
Integracin del metabolismo intermedio: AMPK como regulador metablico La energa celular no es constante y vara de acuerdo a las condiciones fisiolgicas, por ello el metabolismo celular debe estar estrictamente regulado y coordinado para atender a las necesidades de la clula. Existe una enzima denominada proten quinasa activada por AMP (AMPK) cuya actividad es estimulada por AMP e inhibida por un alto contenido de ATP, o sea que est modulada alostricamente por la relacin ATP/AMP. AMPK regula la carga de energa de la clula, es una especie de sensor metablico capaz de monitorear los niveles de ATP y acoplar las vas anablicas y catablicas. As, AMPK activada bajo condiciones de baja carga energtica (altos niveles de AMP) inhibe costosos procesos anablicos de sntesis proteica y sntesis de lpidos y promueve los eventos catablicos de gluclisis y oxidacin de cidos grasos. Estos efectos son importantes para la regulacin de eventos metablicos en el hgado, msculo esqueltico, tejido adiposo y pncreas (donde inhibe la liberacin de insulina), y adems tiene un efecto directo sobre los centros hipotalmicos que estimula el apetito, sobre neuronas sensoras de glucosa (glucostatos).
La AMPK est constituida por distintas subunidades con sitios para la actividad quinasa, sitios de unin con AMP, y otro para unirse al glucgeno. Todas estas estructuras le otorgan particulares funciones y regulaciones, por ejemplo en msculo, un alto contenido de glucgeno reprime la actividad de la AMPK posiblemente a travs de su sitio de unin.
Cuando AMPK es activada en msculo fosforila a la glucgeno sintetasa en su sitio inhibitorio, y activa la glucgeno fosforilasa y la gluclisis reduciendo las reservas de glucgeno, y tambin activa la oxidacin de cidos grasos y captacin de glucosa. En tejido adiposo la AMPK inhibe la lipognesis y liplisis, y en hgado aumenta la oxidacin de cidos grasos. Tambin controla la biognesis de mitocondrias e inhibe las enzimas involucradas en la sntesis de colesterol. AMPK inhibe la sntesis proteica en mltiples niveles, tambin inhibe el crecimiento celular y proliferacin. Esta enzima media efectos metablicos de distintas hormonas vinculadas al metabolismo como leptina, grelina, adiponectina, glucocorticoides e insulina. AMPK puede ser regulada por quinasas activadas por Ca/CaM como parte del mecanismo de accin de trombina, bradiquinina y T3, as estos mensajeros median la oxidacin de cidos grasos. En el caso de mediar la respuesta a insulina fosforila y co-activa el sistema de mediadores que permiten la trasnlocacin de las vesculas y el reclutamiento de GLUT4. A su vez, la actividad de AMPK aumenta la sensibilidad a la insulina al suprimir la fosforilacin inhibitoria de los receptores de insulina por JNK, evitando as el desarrollo de
resistencia a la insulina, y activa tambin la transcripcin de GLUT4. Tambin AMPK activa la hexoquinasa II, y su transcripcin.
El estrs y el ejercicio son inductores poderosos de la actividad de la AMPK en el msculo esqueltico. Por otro lado, AMPK est relacionada con el tratamiento de patologas metablicas como diabetes tipo II, obesidad y sndrome metablico; y se ha demostrado que frmacos utilizados en los tratamientos como Metformina y tiazolidinedionas (TZD) ejercen sus efectos directa indirectamente activando AMPK en hgado y msculo.
Especializaciones metablicas de las clulas Cada clula especializada en una funcin presenta un metabolismo adaptado a la misma. As, cada tejido tiene un perfil metablico caracterstico. El hgado en general no utiliza glucosa como combustible, utiliza cidos grasos y alfacetocidos; es sitio de sntesis de cidos grasos, triacilgliceroles y cuerpos cetnicos, y la principal fuente de glucosa exportable por su capacidad de glucogenlisis y gluconeognesis. El tejido adiposo utiliza cidos grasos como combustible y recoge los sintetizados en hgado para sntesis de triacilglicridos; necesita de glucosa para sntesis de glicerol-3fosfato y est especializado en la reesterificacin de los cidos grasos que almacena como triacilgliceroles en el citosol, y en la movilizacin de estos lpidos para satisfacer la demanda energtica de las clulas de otros rganos. El tejido muscular esqueltico est muy especializado en la generacin de ATP a partir de creatina fosfato, glucosa, glucgeno, cidos grasos y cuerpos cetnicos; sufre degradacin de protenas y de aminocidos ramificados; el cerebro en cambio utiliza preferentemente glucosa, y en su ausencia se adapta a utilizar cuerpos cetnicos, pero no puede usar cidos grasos.
El rin utiliza glucosa, cidos grasos y cuerpos cetnicos, y realiza gluconeognesis en caso de ayunas; mientras que el intestino usa preferentemente glutamina como
combustible y cidos grasos de cadena corta producidos por la flora bacteriana y los eritrocitos solamente utilizan glucosa como fuente de energa.
Desechos del metabolismo celular: los radicales libres y las especies reactivas del oxgeno (ROS) Se considera radical libre a cualquier molcula que contenga uno o ms electrones sin parear, estos electrones desapareados le confieren una enorme reactividad qumica que le conduce a interactuar rpidamente con otras molculas. Son generados por reacciones redox que ocurren como consecuencia del metabolismo celular normal ante situaciones especiales como resultado del estrs oxidativo. En condiciones normales, las clulas metabolizan la mayor parte del oxgeno (el 95%) hasta agua, sin formacin de intermediarios txicos; el restante 5% se forman intermediarios altamente txicos, dos de los cuales son literalmente radicales libres (el anin superxido e hidroxilo), y el tercer producto es perxido de hidrgeno. Las ROS han sido estudiadas como productos txicos del metabolismo oxidativo, mediadores en la respuesta de defensa, aceleradores de la muerte celular, pero tambin actuaran como seales celulares sobre otras molculas como receptores, transportadores y factores de transcripcin. Las mitocondrias constituyen la principal fuente de ROS y en situaciones en las que existe mayor actividad metablica (etapas del crecimiento, desarrollos activos o procesos inflamatorios) ocurre una mayor demanda tisular de O2 y parte de l se metaboliza generndose multitud de sustancias oxidantes. Otra fuente gran fuente de ROS est constituida por el metabolismo de las clulas defensivas. Los polimorfonucleares, los monocitos sensibilizados, los macrfagos y los eosinfilos, para que puedan cumplir su misin, estn dotados de diversas enzimas lticas (proteasas, lipasas, nucleasas) y de vas metablicas que generan varias especies qumicamente agresivas como perxido de hidrgeno, radicales superxido e hidroxilo, y probablemente oxgeno singlete, cuyo fin ltimo es lesionar y destruir elementos extraos. En condiciones normales estas especies reactivas son producidas y utilizadas en compartimentos como los lisosomas pero en los estados inflamatorios aumenta la produccin de radicales libres que puede terminar desequilibrando la defensa antioxidante celular.
En el hombre se han descrito como los principales radicales libres al anin superxido (O2.-), hidroxilo (OH-.) y peroxilo (ROO.). Son molculas muy reactivas y pueden causar dao directo e irreversible, e incluso muerte celular. Generalmente, los componentes celulares ms daados son los cidos grasos insaturados de las membranas celulares, algunas protenas como las enzimas transportadoras de iones y el ADN. De todos los radicales libres el OHresulta el ms daino, dado que su presencia es capaz de destruir enzimas proteolticas, de provocar la ruptura de polisacridos y de causar peroxidacin lipdica de la membrana produciendo dao estructural y funcional al
alterar su permeabilidad con aumento en la permeabilidad al calcio, que finalmente conlleva un incremento en el calcio intracelular. Por su parte el H2O2 es liposoluble y la peroxidacin lipdica es un proceso autopropagado que involucra la formacin de metabolitos que reaccionan con O2 y forman radicales perxidos, y estos radicales pueden remover hidrgenos desde cidos grasos insaturados. La peroxidacin lipdica enzimtica involucra las COX y lipooxigenanas, aldehdos secundarios llamados isoketals, e isoprostanos que pueden mediar dao celular inducido por ROS. La acumulacin de productos polares provenientes de peroxidaciones lipdicas en el interior de la bicapa induce cambios en sus propiedades fsicas afectando el estado de receptores, transportadores y canales; las
enzimas citoslicas tambin pueden afectadas por la peroxidain lipdica.
ser
Los radicales libres tambin pueden tener relacin con enfermedades tales como ateroesclerosis y patologas del hgado, rin y pulmones. En el caso de la ateroesclerosis, por ejemplo, los radicales libres pueden oxidar lipoprotenas de baja densidad que transportan colesterol, conocidas como LDL, su oxidacin facilita la formacin de depsitos grasos o placas ateroesclerticas, que obturan los vasos sanguneos. La clula por su parte contiene potentes y eficientes sistemas antioxidantes, como dismutasas, catalasas, peroxidasas; uno de los ms potentes antioxidantes solubles es la glutatin, y como por mecanismos no enzimticos las vitaminas E y C principalmente.
La destruccin de protenas celulares: parte vital de la homeostasis celular La degradacin de protenas en el interior celular desempea importantes funciones, ya sea por la modulacin de los niveles intracelulares de protenas especficas como por la eliminacin de protenas aberrantes, por ello son mecanismos vitales en la homeostasis celular. Actualmente se sabe que en la degradacin de determinadas protenas se encuentra el punto de control de diversos procesos biolgicos, algunos tan fundamentales como la progresin del ciclo celular. Existen evidencias de protenas degradadas en las mitocondrias, en el lumen del retculo endoplsmico y en endosomas; sin embargo, los dos sistemas principales de protelisis se encuentran en el citosol y en los lisosomas. La mayora de las protenas se renuevan al cabo de unos das, incluso en las clulas que raramente se dividen, como neuronas. Tienen periodos de semivida de slo 20 minutos, mientras que otras, en la misma clula, pueden subsistir das o semanas. Le corresponde a la clula sealar las protenas destinadas a ser destruidas, y se han encontrado distintas seales proteolticas, como las secuencias PEST, en un gran nmero de protenas de corta vida media. Estas regiones se caracterizan por ser ricas en residuos de prolina (P), glutamato/aspartato (E/D), serina (S) y treonina (T) flanqueadas por aminocidos bsicos. Las secuencias PEST se encuentran en enzimas claves del control metablico, en factores de transcripcin, en protenas quinasas, fosfatasas y en ciclinas. Durante aos se dio por supuesto que la degradacin de las protenas se realizaba en los lisosomas, pero en su inmensa mayora, las protenas se etiquetan primero con ubiquitina, molcula que puede unirse a protenas diana, que quedan as marcadas para su destruccin y el proteasoma, una gran molcula de forma cilndrica que contiene muchas proteasas, reconoce y une las protenas ubiquitinizadas y las destruye en su interior. A primera vista, la destruccin continua de los constituyentes de la clula parece un derroche energtico pero es esencial para numerosas funciones. La degradacin de una enzima importante o una protena reguladora, por ejemplo, es un mecanismo habitual que las clulas utilizan para frenar o suspender una reaccin qumica. Por otra parte, muchos procesos celulares se activan con la degradacin de una protena inhibidora clave.
La degradacin de protenas desempea un papel crucial en la regulacin general del metabolismo celular, y de todo el sistema ya que por ejemplo, en el estado de desnutricin o de enfermedad, la va de los
proteosomas se activa en los msculos, proporcionando aminocidos que pueden convertirse en glucosa requerida para la combustin energtica
Recuadro N6
Importancia de la homeostasis celular Un ejemplo Ante un evento isqumico cerebral, de manera inmediata, el contenido energtico de las neuronas desciende y en consecuencia cesan tambin todas las reacciones y los mecanismos dependientes de ATP, entre los que se encuentran las bombas y transportadores de iones. Con el descenso de ATP la neurona va perdiendo su capacidad de restablecer el gradiente de K+ y sufre despolarizaciones que resultan finalmente en la despolarizacin anxica con entrada masiva de Ca++ y el consiguiente incremento de su concentracin intracelular. Otros flujos relevantes son la entrada de Na+ y agua, y el posterior desarrollo de edema celular. Otro mecanismo que contribuye al incremento de la concentracin de Ca++ intracelular es la acidosis inducida por la isquemia. Ante la imposibilidad de metabolizar la glucosa por va aerbica normal, se activa su degradacin por va anaerbica. Como resultado se genera cido lctico que se acumula y el pH llega a valores de 6,5. Esta acidosis desplaza al Ca++ de su unin a protenas intracelulares y hace aumentar su concentracin intracelular. A estos fenmenos de permeabilidad alterada de la membrana celular le sigue la liberacin masiva de neurotransmisores al espacio extracelular. La liberacin por exocitosis de los neurotransmisores activan por ejemplo la adenilato ciclasa unida a la membrana y hace que los niveles de AMPc y la permeabilidad de la membrana de las clulas gliales aumenten. Estas clulas captan Na+, Cl- y agua, y de esta forma contribuyen an ms al edema. El incremento de Ca++ activa numerosas enzimas catablicas que contribuyen a la muerte celular por necrosis, como consecuencia de la prdida de la homeostasis celular secundaria a la anoxia y la interrupcin brusca del aporte de nutrientes. Morfolgicamente, la clula necrtica se identifica porque ha perdido la integridad de la membrana y mantiene la membrana nuclear. Habitualmente, afecta a un gran nmero de clulas especialmente del ncleo del infarto. stas se hinchan a medida que captan agua ya que no funcionan los mecanismos reguladores de volumen, y al final terminan por romperse y vierten todo el material celular al tejido circundante. Durante la isquemia, la apoptosis se desencadena como respuesta a diferentes estmulos, como aumento de Ca++, radicales libres, dficit de factor de crecimiento y neurotrofinas, liberacin de citocromo c durante el dao mitocondrial, entre otros. La clula sufre entonces una serie de cambios morfolgicos y bioqumicos que finalizan con la degradacin del ADN y de la infraestructura celular. Respondiendo al estrs celular la mitocondria libera protenas apoptognicas como citocromo c, activador de caspasas y factor inductor de apoptosis, y forman el apoptosoma que cataliza la activacin de caspasa, ejecutor que origina la fragmentacin del ADN mediante la activacin de la endonucleasa. La neurona apopttica presenta caractersticas morfolgicas definidas que la diferencian de la neurona necrtica, ya que el citoplasma se encoge, la cromatina se condensa y aparecen los cuerpos apoptticos. Este fenmeno se produce principalmente en la penumbra isqumica, donde an se mantiene la integridad celular y existe energa disponible para el proceso apopttico como mecanismo de autodestruccin para evitar el vertido al medio extracelular del contenido intracelular potencialmente peligroso.
Intercambio de informacin entre el medio extra e intracelular: Comunicacin celular

las partes son autnomas pero estn en relacin con el todo a travs del intercambio de informacin,
Claude Bernard
Un organismo fue definido como un sistema complejo abierto en estado estacionario, cuyas propiedades tienen relacin con su caracterstica de poseer mecanismos homeostticos de alta capacidad comunicacional, comnmente conformados por circuitos de informacin, que se sustentan en el control para la toma de decisiones y en la regulacin para ajustar los sistemas en funcin de un objetivo especfico. Esta comunicacin en el organismo se realiza de distintas formas, y la seal que recibe cada clula permite que el cuerpo funcione como un todo, de forma integrada. La comunicacin entre clulas (llamada celular intercelular) opera de distintas formas, dependiendo de la funcin que cumple cada tipo celular, y puede dividirse en dos grandes grupos segn la forma en que es transmitida la informacin, comunicacin por contacto directo.y comunicacin por mensajeros Comunicacin por contacto directo En este tipo de comunicacin la seal informacin es transmitida directamente de una clula a otra sin intermediarios, tambin es llamada comunicacin yuxtacrina. Puede ser de dos tipos, comunicacin por uniones de hendidura comunicacin por reconocimiento. -Comunicacin por uniones de hendidura uniones gap: la seal (iones, ATP y 2 mensajeros) pasa de clula a clula a travs de uniones comunicantes (nexus o gap) donde los conexones permiten el intercambio, as las clulas responden de forma rpida y coordinada, como en el msculo liso, msculo cardaco y sinapsis elctricas. Los conexones son complejos proteicos que forman poros entre las dos clulas, y pueden ser regulados. La fosforilacin del extremo carboxilo provoca su cierre, tambin pueden cerrarse cuando la concentracin intracelular de calcio se eleva o desciende el pH intracelular. Estos conexones tienen autonoma funcional, lo que permite el cierre de las uniones en una clula daada
aislndola eficazmente extensin de la lesin.
previniendo
la
-Comunicacin por reconocimiento: la seal es transmitida por protenas de membrana, y las clulas deben ponerse en contacto para que la seal llegue a la clula blanco que posee receptores. Participan de esta forma de comunicacin protenas como selectinas, caderinas e integrinas, por ejemplo selectinas en la unin de los leucocitos al endotelio vascular durante la respuesta inflamatoria, caderinas durante el desarrollo embrionario e integrinas como mecanismos de sealizacin que regulan la proliferacin y migracin de las clulas.
Tambin protenas de membrana que participan en el reonocimiento celular forman parte de las formas de comunicacin por contacto, por ejemplo los linfocitos T CD4 en reposo naive son activados cuando reconocen el antgeno peptdico para el que son especficos, que est unido a una molcula del Sistema Mayor de Histocompatibilidad (MHC) en la superficie de la clula presentadora de antgeno. El reconocimiento del complejo MHC-pptido antignico (MHC-p) se realiza a travs del receptor de las clulas T (TCR), la seal de unin es transmitida al interior de la clula por otras protenas y amplificada completando la llamada sinapsis inmunitaria cuyo resultado es la proliferacin de los LT. El TCR es un complejo con cadenas de las inmunoglobulinas que tienen capacidad de transducir seales al interior de la clula por tirosnquinasas tipo Src, Syk y Tec. As, la activacin de las clulas T es un proceso
mediado por el contacto directo con las clulas presentadoras de antgenos
Recuadro N7
Protenas de adhesin de superficie y la comunicacin Los fenmenos de adhesin clula-clula y de adhesin clula-matriz extracelular son vitales para procesos como la morfognesis tisular y la cicatrizacin de heridas. Tanto en la motilidad, diferenciacin y ciclo celular, e incluso la supervivencia de la propia clula necesita anclarse al medio donde se encuentra, depende de este tipo de mecanismo. Se establece una comunicacin a travs de protenas de adhesin de superficie celular, tales como cadherinas, inmunoglobulinas, selectinas e integrinas. mecanotransduccin, ya que los dominios citoslicos de las protenas de adhesin pueden activar vas de sealizacin que afectan a la fisiologa celular. Por lo tanto, existe un flujo de informacin desde el exterior celular que se transmite al citoplasma por las protenas de adhesin, similar al que se da en los receptores clsicos de membrana. Las integrinas son una familia de molculas de adhesin, glicoprotenas integrales de membrana, que conectan la matriz extracelular con protenas de sealizacin intracelular y con el citoesqueleto. Los receptores de integrina estn conformados por 2 subunidades con dominio de transmembrana, no son protenas de sealizacin per se, son complejos de protenas con funciones estructurales con importantes roles en el crecimiento celular y transduccin mecanosensorial celular. Las integrinas llevan informacin del exterior al interior celular, al interaccionar con ligandos de otra clula, y tambin puede llevar informacin del interior al exterior celular, por seales intracelulares que determinan el aumento de afinidad de los receptores por los ligandos, como una forma rpida de regular las funciones adhesivas en respuesta a estmulos fisiolgicos; por lo tanto, constituyen una va bidireccional de comunicacin. Estas protenas al unirse a otras protenas de la clula vecina generan fenmenos de
desarrollo; defectos en estas vas de sealizacin provocan cncer y defectos en la morfologa y/o el nmero de estructuras u rganos diferenciados.
Cuando una clula se desplaza debe modificar su patrn de adhesin, es decir, debe romper los lazos con las clulas a las que est unida en el tejido y crear nuevos, por ejemplo durante el desarrollo embrionario; en este proceso son importantes las cadherinas y el recambio constante de las integrinas.
Otras seales importantes durante el desarrollo embriolgico dependen de la relacin clula-clula, por ejemplo el receptor Notch que controla la diferenciacin entre dos destinos celulares alternativos; posee receptores tipo TKR que funcionan a la vez como ligando y como receptor y transducen seales tanto a la clula sealizadora como a la clula diana en una sealizacin bidireccional. Tras la unin a la clula vecina, el receptor Notch se dimeriza y autofosforila, as libera parte del dominio intracelular hacia el citosol, ste se transloca al ncleo donde acta como activador transcripcional; y parte del dominio extracelular queda anclado a la clula vecina; estos receptores se denominan con protelisis intramembrana regulada (RIP).
Estas molculas de adhesin pueden cumplir su funcin interaccionando con otras cascadas de sealizacin que se dan en la clula; por ejemplo, las cadherinas pueden relacionarse con los receptores de factores de crecimiento, ello permite que la va de transduccin que potencia el crecimiento celular se vea modulada por la adhesividad. Otro ejemplo es la relacin entre las molculas de adhesin, el citoesqueleto y la va Wnt, que necesita a la -catenina para afectar la expresin gnica. Las molculas Wnt se secretan en los tejidos y afectan a la diferenciacin, proliferacin y homeostasis de las clulas de las clulas vecinas, son necesarias para la formacin de lmites entre estructuras celulares durante el
Comunicacin por mensajeros La informacin es transferida por seales mensajeros qumicos, dependiendo de la distancia recorrida se divide en comunicacin a distancia y comunicacin local. Comunicacin a distancia: puede ser comunicacin endcrina cuando las clulas vierten su mensajero (hormona) al torrente sanguneo y neuroendcrina cuando el mensajero es producido por una neurona y secretado a la circulacin (neurohormona). Actualmente, se define como hormona (y neurohormona) a aquellos compuestos qumicos secretados en mnimas concentraciones al torrente sanguneo por clulas especficas (pueden ser glndulas endcrinas clsicas conjuntos de clulas) que se unen a receptores especficos en territorios distantes al lugar de origen, donde producen una respuesta biolgica. Muchas de las hormonas secretadas por las clulas endcrinas son inactivas (precursoras) y requieren transformarse en otra molcula para tener actividad biolgica, por ejemplo la tiroxina (T4) secretada por la glndula tiroides requiere perder un iodo y transformarse en tri-iodotironina (T3).
Son ejemplos de comunicacin local autcrina los mensajeros que se liberan en clulas en crecimiento del embrin para perpetuar su proliferacin, y de comunicacin parcrina la respuesta inflamatoria donde histamina, adenosina y prostaglandinas modifican el funcionamiento de clulas vecinas, en el islote de Langerhans para la regulacin de la secrecin de insulina y glucagn por parte de somatostatina.
Un tipo particular de comunicacin parcrina es la denominada comunicacin neurcrina sinapsis, comunicacin qumica entre neuronas entre neurona y msculo a travs de neurotransmisores. Un neurotransmisor se define como una sustancia que liberada al espacio sinptico que tiene la capacidad de generar un cambio en el potencial de membrana de la clula postsinptica y posee mecanismos de eliminacin propios. En este tipo de comunicacin tambin se liberan mensajeros llamados neuromoduladores, como neuropptido Y, que en general no tienen la capacidad de generar potenciales postsinpticos pero modulan la accin de los neurotransmisores.
Comunicacin local: puede ser autcrina si el mensajero liberado acta sobre la misma clula que lo produce y parcrina cuando se da entre clulas relativamente cercanas, y no hay participacin de la va sangunea, sus mensajeros son llamados mediadores locales que llegan por difusin en el lquido intersticial hasta las clulas vecinas.
Clasificacin de los mensajeros Los mensajeros que se liberan en la comunicacin entre clulas se pueden clasificar aplicando distintos criterios. Clasificarlos segn el tipo de comunicacin en la que participan, como se menciona en la seccin anterior en hormonas, neurohormonas, neurotransmisores, neuromoduladores, mediadores locales (autacoides, del griego autos-propio y akos-alivio, sustancia formada metablicamente por un grupo de clulas que altera la funcin de otras clulas a nivel local). Con esta clasificacin se pueden encontrar mensajeros que participan en ms de un tipo de comunicacin, por ejemplo adrenalina participa como hormona y como neurotransmisor. Otra forma clsica de clasificacin es aplicando un criterio fsico-qumico, y dividirlos en dos grandes grupos, mensajeros hidroflicos y lipoflicos. En este caso se puede inferir su comportamiento respecto a la membrana, forma de sntesis, almacenamiento, liberacin y ubicacin del receptor.
hormonas tiroideas liposolubles
son
aminas
iodadas
- aminocidos: mensajeros que son se generan a partir de aminocidos, principalmente neurotransmisores como glutamato, GABA y glicina
Mensajeros hidroflicos Se almacenan en grnulos de paredes similares a la membrana celular, se liberan por exocitosis, en general no requieren transportadores en el plasma ya que son hidrosolubles, no atraviesan la membrana y por ello utilizan receptores de membrana en las clulas blanco, y su vida media es relativamente corta (minutos a horas). Qumicamente este mensajeros se dividen en: grupo de
- pptidos y protenas: son los ms abundantes y verstiles, su tamao vara ampliamente desde tripptidos como la hormona liberadora de tirotropina, pptidos pequeos como los opioides, polipptidos como las citoquinas y grandes protenas, como prolactina.
- aminas bigenas: tambin llamadas monoaminas, compuestos que contienen nitrgeno unido a dos hidrgenos (-NH2) y cuyo precursor es el aminocido tirosina para las catecolaminas como adrenalina y dopamina, y triptofano para las indolaminas como serotonina e histamina. La acetilcolina deriva de la colina, que es una amina cuaternaria saturada, y el Acetil CoA. Existen aminas que comparten el origen qumico pero tienen caractersticas qumicas que las diferencian, como las
- nucletidos y nuclesidos: pueden ser purnicos como adenosn trifosfato (ATP) pirimdicos como uridn trifosfato (UTP), actan como mensajeros autcrinos, parcrinos, neurotransmisores y neuro moduladores. El ATP y/o ADP es producido como mensajero intracelular en las sinapsis, empaquetado en grnulos secretores y liberado
en respuesta a potenciales de accin; tambin se libera desde plaquetas clulas daadas para actuar a travs de receptores. En algunos casos el ATP liberado es rpidamente descompuesto por 5-nucleo tidasas dando adenosina, principalmente en el miocardio y endotelio en condiciones de hipoxia. La adenosina tambin es sintetizada por la degradacin de AMPc liberado al LEC, y acta sobre receptores especficos.
derivados de la accin de la fosfolipasa A2 (PLA2) sobre el cido araquidnico (AA omega-6), el cido eicosapentaenoico (EPA omega-3) docosahexaenoico (DHA) que provienen tanto del cido graso esencial linoleico como linolnico.
Mensajeros lipoflicos Estos mensajeros se liberan a medida que son sintetizados, o se almacenan anclados a protenas especficas, y requieren de protenas transportadoras en plasma, atraviesan la membrana celular ya que son liposolubles y en general utilizan receptores intracelulares, aunque algunos de ellos los presenta tambin en la membrana, su efecto es ms lento y su vida media ms larga (horas a semanas). Qumicamente estos mensajeros pueden ser de origen lipdico gases.
El AA es en s mismo un lpido bioactivo, interviene en vas de sealizacin celular activando MAPK (mitogen-activated protein kinase), ERK, JNK, y puede directamente modular mecanismos de transporte de K+ y osmolitos orgnicos. En una clula en reposo el nivel de AA libre es baja porque los cidos grasos liberados de los glicerofosfolpidos por PLA2 son rpidamente reincorporados a los fosfolpidos por una aciltransferasa, o convertidos en cidos grasos hidroxilados. El AA puede dar distintos eicosanoides segn el tipo celular, ya que presenta dos vas de metabolizacin, por un lado las lipooxigenasas (LOX) principalmente en clulas inflamatorias que produce cidos hidroperoxi-eicosatetraenoicos (HPETES) que se convierten en derivados hidrxidos (HETES), lipoxinas (LX) y leucotrienos (LT); y por otro las ciclooxigenasas COXI (constitutiva en casi todos los tejidos) y COXII (inducida por ligandos extracelulares principalmente en clulas inflamatorias e inmunes) que genera prostaglandinas (PGA, PGE y PGF), prostaciclina (PTC) y tromboxano (TBX), y epxidos por citocromo P-450, isoprostanos no enzimticos. Prostaglandinas y tromboxanos actan va receptores acoplados a GTP, y sus 2 mensajeros incluyen calcio, AMPc/PKA, y MAPK; los leucotrienos LTB4, LTC4, LTD4 y LTE4 son potentes sustancias involucradas en quimiotaxismo de clulas de defensa, adherencia y agregacin, vaso y broncoconstriccin.
Mensajeros de origen lipdico: - derivados del colesterol: llamados esteroides, se producen en general en glndulas de origen mesodrmico, son ejemplos la progesterona, testosterona, estradiol, cortisol, aldosterona. - derivados de lpidos de membrana: llamados eicosanoides, son molculas de 20C (del griego eikos-20) que cumplen importantes funciones como mensajeros locales en procesos inflamatorios y neuroqumicos. Son
Los eicosanoides derivados de AA son mucho ms pro-inflamatorios que los derivados de EPA, y es un sistema altamente reactivo resultando a veces en una inflamacin indeseada, como ocurre con la enfermedad coronaria y respuestas alrgicas; por lo tanto es importante mantener un equilibrio entre los dos tipos de eicosanoides a partir de sus precursores dietarios
La activacin del endotelio por las fuerzas de cizallamiento, o por la unin mensajeros como bradiquinina (BK) o acetilcolina (Aco) a sus receptores, se traduce en una corriente de entrada de calcio que estimula la ONsintetasa constitutiva (cONS). El ON formado acta como mensajero difundiendo a las clulas vecinas de msculo liso estimulando en ellas la forma soluble de la enzima guanilatociclasa (sGC), lo que produce un aumento de guanosintrifosfato cclico (GMPc) que media la relajacin de la clula muscular, y as se produce la vasodilatacin mediada por ON.
La respuesta celular a los mensajeros Las enzimas COX y LOX pueden metabolizar el DHA generando un grupo de sustancias llamadas docosanoides, entre las que se encuentran resolvinas, docosatrienos y neuroprotectinas que actan como mensajeros locales, antagonizan los efectos de los otros eicosanoides y participan en la regulacin del trfico de leucocitos y de la expresin de citoquinas. Todos estos derivados de lpidos de membrana son componentes de vas de transduccin de seales que pueden abandonar la clula donde fueron sintetizados y participan como mensajeros locales al acoplarse a receptores de membrana en las clulas vecinas. - gases: el principal representante es el xido ntrico (ON), que se sintetiza a partir del aminocido L-arginina por accin de la enzima ONsintetasa, y requiere de la presencia de calmodulina (CaM) y de otros cofactores como FAD y NADPH. La respuesta de un organismo a un mensajero qumico debe ser abordada desde tres aspectos: funcin, mecanismo de accin y respuesta biolgica. La funcin se refiere al propsito del mensajero, por ejemplo la funcin de la insulina es la regulacin de la glucemia, el mecanismo de accin a nivel celular se refiere a cmo el mensajero interacta con la clula blanco y todos los eventos intracelulares subsiguientes que decodifican el mensaje de la molcula seal, en el caso de la insulina su unin a los receptores IRS de membrana y todos los eventos intracelulares que produce, y la respuesta biolgica es la manifestacin medible que produce el mensajero sobre la clula blanco, para la insulina sera la activacin e inhibicin de enzimas especficas en el hepatocito, la exposicin de GLUT, etc.
La respuesta celular a las seales de los mensajeros puede variar desde activacin enzimtica, modificacin del citoesqueleto, de la transcripcin, y depende de la funcin celular y la especificidad de la sealizacin celular. Los diferentes tipos celulares poseen tienen distintos conjuntos de protenas, receptores de membrana y sistemas de sealizacin intracelular con enzimas amplificadoras diferentes, por ello a pesar que los componentes del sistema de comunicacin celular parecen escazos para la gran variedad de tipos y funciones celulares del organismo, la combinacin e interaccin de dichos componentes permiten un gran abanico de respuestas (ver Recuadro N8). Por lo tanto, la respuesta celular depende del mensajero que lleva la seal, el receptor que la capta a nivel celular y su mecanismos de transduccin, y las influencias mutuas entre vas de sealizacin activadas por los distintos mensajeros antes, durante y despus de la unin del ligando. Los receptores y la respuesta celular Por lo menos existe un receptor especfico para cada mensajero, y en muchos casos existen varios subtipos de receptores para un solo mensajero, por ejemplo para dopamina existen por lo menos con cinco receptores dopaminrgicos distintos (D1 a D5), algunos excitatorios y otros inhibitorios dependiendo de su mecanismo de transduccin. Adems, el nmero y el tipo de receptores que expresa una clula puede cambiar de acuerdo a las circunstancias, por ejemplo el tipo de receptores para una hormona en un tejido dado puede variar conforme a la edad, como los receptores para adrenalina en el hgado de la rata en la etapa fetal son B2-adrenrgico y conforme crece y madura, el receptor expresado cambia expresando tanto receptores B2 como B1adrenrgicos, y en la rata adulta slo se expresan receptores B1-adrenrgicos. Por todo ello, se puede decir que la respuesta celular depende del subtipo de receptor que se expresa, ya que el mismo mensajero puede generar dos respuestas celulares opuestas a travs de dos tipos de receptores. Por otro lado, las clulas no expresan la totalidad de los receptores en sus
membranas, sino que van haciendo una expresin selectiva de aquellos receptores que necesitarn para realizar dar la respuesta biolgica adecuada. Se ha encontrado evidencia que en algunas clulas se produce la mxima respuesta a un mensajero dado cuando slo se han activado 1% del total de receptores que existen en su membrana; evidentemente, en este caso el nmero de receptores est en exceso y una disminucin de 10 a 20% del total de receptores difcilmente afectar la respuesta celular. La unin mensajero-receptor adems de ser especfica, es reversible y saturable
El sitio de reconocimiento del mensajero en el receptor tiene alta selectividad, pero tambin tiene cierta flexibilidad, por ello es correcto hablar de afinidad. La afinidad puede definirse como una medida de la facilidad de interaccin entre el receptor y el mensajero, y est en directa relacin con la constante de asociacin y disociacin (KD), ya que una alta afinidad del receptor por su ligando es reflejada por una constante de asociacin mucho mayor que la de disociacin. La afinidad es una medida de la facilidad de acoplamiento entre el mensajero y el receptor; y la actividad es la capacidad del mensajero para producir el efecto. La elevada afinidad del receptor por su ligando permite su interaccin a pesar que el ligando este presente en concentraciones muy bajas, sin embargo en algunas enfermedades las concentraciones del mensajero pueden aumentar tanto que llegan a observarse efectos que sta ejerce interactuando con receptores con menor afinidad. La afinidad puede modificarse por
otros mensajeros externos e internos, y por fosforilaciones. La mayora de las sustancias que se recetan y que actan sobre los sistemas de comunicacin celular han sido diseadas para tener una altsima selectividad por un solo receptor; muchas veces mayor que la del mensajero natural. Sin embargo, hay algunos compuestos que pueden interaccionar en concentraciones similares con varios tipos de receptores; y casi siempre tienen acciones indeseables. A un compuesto que es capaz de unirse con el receptor y producir una respuesta en la clula, o sea, un efecto, se la llama agonista. Existen sustancias que teniendo afinidad por el receptor no presentan actividad, no producen efecto en la clula, ellos son denominados antagonistas; al asociarse con el receptor ocupa el sitio que pudiera ocupar el mensajero natural u otro agonista; y as antagoniza el acoplamiento mensajero-receptor y bloquea el efecto. Esto deja entrever que el simple acoplamiento con el receptor es insuficiente para desencadenar la respuesta de la clula; ya que para ello es necesario activar al receptor, posiblemente induciendo un cambio en su estructura, que permita que el receptor interacte con el siguiente elemento en la transmisin del mensaje. Tambin se deduce que existen estructuras qumicas en los mensajeros que determinan su afinidad y posiblemente otras que definen su actividad, estableciendo una relacin estructura-funcin de la molcula del mensajero y su relacin con el receptor. El nmero de receptores de una clula puede variar en grado considerable, y de esta manera modificar la respuesta al mensajero. Por ejemplo, como medio de proteccin de las clulas cuando stas permanecen expuestas de forma continua a un ligando, generan un proceso denominado desensibilizacin, as la intensidad de la respuesta biolgica del mensajero disminuye por la exposicin prolongada al mismo. Ello se ejemplifica en medicina cuando a un paciente en tratamiento prolongado con un medicamento se le debe aumentar la dosis para mantener el efecto deseado.
Hay mltiples mecanismos que participan en la regulacin del nmero de receptores y de su activacin, estos conceptos denominados regulacin homloga y regulacin heterloga son de gran importancia para entender cmo se regula la comunicacin intercelular, y cmo distintos sistemas de comunicacin pueden interactuar.
La regulacin homloga se da cuando el mensajero regula sus propios receptores, puede ser una regulacin por disminucin o down-regulation donde se produce la disminucin del nmero de receptores en la membrana, ya que las protenquinasas activadas por su propia sealizacin favorece la internalizacin de los receptores; algunos se degradan y otros son reciclados nuevamente a la membrana (mecanismo aplicable a la desensibilizacin). El efecto opuesto se produce cuando la concentracin del mensajero disminuye y la clula en un intento por captar la informacin transportada, para mantener la respuesta biolgica adecuada, aumenta el nmero de receptores expuestos en la membrana, fenmeno que se llama regulacin por aumento up-regulation. La regulacin heterloga se da cuando la accin de un mensajero modifica la respuesta celular a otro mensajero. En la regulacin heterloga a pesar que el nmero de receptores para el mensajero permanece constante, la respuesta celular est muy disminuida, ello se debe a la accin de la cascada de sealizacin activada por el otro mensajero genera seales celulares que ocasionan un acoplamiento defectuoso entre el receptor y su mecanismo de transduccin.
Para que la informacin sea comunicada adecuadamente entre las clulas es fundamental la limitacin en forma temporal (y espacial) de la transmisin de la seal, los mecanismos de inactivacin de los mensajeros son fundamentales para ello, estos mecanismos implican la simple dilucin en el espacio intersticial e intravascular, o procesos como la recaptacin por transportadores, modificacin enzimtica la metabolizacin en el hgado. Cross-talk La clula recibe mensajes de muchas fuentes y debe integrar esta informacin para generar una respuesta apropiada; a travs de la intercomunicacin entre las vas de sealizacin la clula es capaz de unir informacin. As, algunas protenas de sealizacin actan como integradoras por poseer varios sitios posibles de fosforilacion cada uno a ser fosforilado por una proteinquinasa diferente y as la informacin recibida de distintas fuentes se integra y se genera una unica seal de salida.
Por otro lado, la ramificacin de las vas sealizacin generando grandes redes, y la evidencia que pueden influirse entre s, son procesos importantes para regular y coordinar la respuesta de la clula al mensaje que le llega. La respuesta biolgica de un mensajero particular en una clula determinada depende no slo de su propio mecanismo de transduccin sino de todas las seales, protG y efectores que se expresan en ese momento, ya que las mismas estn bajo la accin de influencias estimulatorias y/o inhibitoras de otras vas activadas por otras mensajeros, en un fenmeno denominado cross-talk.
Recuadro N8
Mecanismos de accin a nivel celular de los mensajeros qumicos Los receptores de mensajeros qumicos La clasificacin de los receptores se establece en funcin de su localizacin celular y de los mecanismos involucrados en la transduccin de la seal. Dos grandes grupos de receptores se pueden definir segn su ubicacin, receptores de membrana para los mensajeros hidrosolubles, ya que en ese caso la membrana representa una barrera para el flujo de informacin, y receptores intracelulares para los mensajeros liposolubles. Receptores de membrana Los receptores que se encuentran en la membrana plasmtica tienen diferentes caractersticas tanto estructurales como funcionales, y segn el tipo de receptor ser el mecanismo de transduccin de la seal a nivel celular; ste puede ser simple cuando los receptores son canales inicos, ms complejos cuando transforman la seal en eventos intracelulares metablicos y cambios en la expresin gnica. Entonces, se puede dividir a los receptores de membrana en: - 1) receptores ionotrpicos - 2) receptores metabotrpicos - 3) receptores enzimticos Existen otros tipos de receptores de membrana que son los acoplados a molculas de adhesin, pero no entran en esta clasificacin porque no son de mensajeros qumicos sino mecanismo de comunicacin por contacto directo. 1) receptores ionotrpicos: son protenas integrales de membrana y estn formados por varias subunidades que forman el canal inico, en ellos la transduccin de la seal es de qumica a elctrica a travs del intercambio inico, por ejemplo el receptor colinrgico nicotnico de acetilcolina, el receptor GABA A del cido gamma amino butrico.
La relacin existente entre la activacin del receptor y la apertura del canal produce una latencia muy corta entre ambas dando una rpida respuesta; del mismo modo la disociacin del ligando de su receptor provoca el cierre inmediato del canal. Muchos de estos receptores tienen sitios accesorios, tanto intracelulares como extracelulares, para diversas sustancias que modulan la actividad del receptor. 2) receptores metabotrpicos acoplados a ProtG este grupo de receptores (GPCR) transfiere la seal por medio de una protena transductora, la protena G (ProtG); y por su estructura tambin se los llama receptores de siete dominios de transmembrana, cuyo extremo amino terminal queda ubicado en el exterior de la clula y el carboxilo terminal en el interior. Los GPCR poseen diversas conformaciones para poder acoplarse a los distintos mensajeros, por ejemplo aminas, nucletidos, eicosanoides, esfingolpidos y pptidos se unen en su mayora al core centro del receptor, mientras que las glicoprotenas de mayor tamao interactan con un largo loop externo para poder tomar contacto con el core del receptor, y mensajeros pequeos como GABA se unen al segmento Nterminal e interaccionan con los dominios de transmembrana.
estado de reposo estn ensambladas con el sitio de unin ocupado por GDP. Al acoplarse el complejo mensajeroreceptor con la ProtG se produce un cambio estructural que genera la unin de GTP a la subunidad , que se separa de las subunidades , as puede interactuar en el plano membranal citoplasmtico quedando expuesto en ella el sitio de unin para la enzima amplificadora (como la adenilato ciclasa fosfolipasas) quien es activada por un perodo prolongado convirtiendo muchas molculas precursoras en 2 mensajeros; de forma similar el complejo ahora puede activar canales inicos u otros efectores.
Los 2 mensajeros son molculas de transmisin de la informacin intracelular, no actan directamente sino que son reconocidos con gran afinidad y especificidad por molculas receptoras intracelulares que seran sus efectores, cada 2mensajero activa una de estas molculas, en general una protenquinasa, que a la vez puede fosforilar muchas molculas efectoras, activndolas inhibindolas, generando la propagacin de la seal por una cascada de amplificacin. Existen distintas formas de activacin de estos receptores, como es el caso de proteasas como la trombina, que al unirse clivan el segmento Nterminal dando por resultado un pptido que es liberado y se une a las plaquetas estimulando la adhesin plaquetaria y los restantes segmentos interactan entre ellos para generar una seal intracelular. Pero, en general, las rutas de transmisin de informacin de los GPCR comparten una secuencia de procesos donde el mensajero qumico 1 mensajero se une su receptor y provoca un cambio conformacional que induce el acoplamiento con la ProtG (puede activar a varias ProtG mientras est ligado). La mayora de las ProtG son heterotrmeros presentan una subunidad con el sitio de unin GTP/GDP y subunidades que en El proceso finaliza cuando la subunidad por su actividad GTPasa hidroliza el GTP a GDP; las subunidades vuelven a unirse y de esta manera cesa la activacin de la enzima amplificadora. Su actividad es modulada por una superfamilia de protenas reguladoras de la sealizacin de las protG (RGS) que se unen a las subunidades activadas y rpidamente las desactivan. En una clula se expresan muchos subtipos de ProtG, pero cuando los GPCR son activados por sus ligandos pueden reconocer y activar muchas ProtG pero de un nico subtipo. El acople a cada subtipo de ProtG da un efecto particular sobre una va de sealizacin intracelular. No se producen en general sealizaciones intracelulares lineales en la transduccin, sino el encendido de redes de transduccin.
convierten el ATP en AMPc en presencia de iones Mg++.
El AMPc generado regula la actividad de la proteinquinasa A (PKA) al unirse a la subunidad regulatoria, ello libera las subunidades catalticas y se inicia una cascada de fosforilaciones que determinan las respuestas celulares especficas en cada tipo celular.
De forma histrica las ProtG trimricas se han clasificado en Gs si estimulan la actividad de la adenilato ciclasa (AC), Gi si la inhiben y Gq/o si activan distintas isoformas de fosfolipasa C (PLC). Existen casos particulares de ProtG asociadas a la transduccin de seales externas, como la Gt o transducina que media la seal lumnica y la Golf que media la seal olfatoria. Existen tambin ProtG pequeas monomricas que estn representadas por la protena proto-oncognica Ras, implicada en la gnesis de numerosas formas de cncer cuando la protena contiene mutaciones especficas. Las Ras son reguladores centrales de la transduccin de seales celulares en procesos que llevan al crecimiento o a la diferenciacin celular, principalmente relacionados con receptores tirosnquinasas TKR. Los GPCR tienen entonces distintos mecanismos de transduccin de las seales externas, dependiendo a quin se ensamble la ProtG, siendo los sistemas ms comunes: - ProtGs/Gi acoplada a adenilatociclasa (AC) - ProtGq acoplada a fosfolipasa (PLC) - ProtG acoplada a canales inicos Sistema de la adenilato ciclasa Distintos neurotrasmisores, hormonas y autacoides actan a travs de este sistema, donde la ProtGs activa la AC y la ProtGi la inactiva, disminuyendo indirectamente la concentracin del 2mensajero AMPc. Las AC son enzimas unidas al lado interno de la membrana citoplasmtica y
El AMPc se transforma en 5-AMP por la enzima fosfodiesterasa, este AMP no es activo y se suspende la seal intracelular, las subunidades de PKA se reasocian, con la subsecuente inhibicin de su actividad y las enzimas que haban sido fosforiladas durante las cascada de amplificacin son defosforiladas por fosfatasas; regresando as a la actividad basal; todo este complejo proceso se lleva a cabo en segundos. La PKA puede fosforilar a protenas citoslicas que son sus sustratos especficos, y al activarse fosforilan a otras protenas, por ejemplo en el hepatocito al activarse la PKA fosforila una quinasa, quien fosforila a su vez a la fosforilasa encargada de la glucgenolisis, mientras que la enzima glucgeno sintetasa es inhibida al ser fosforilada, as el glucagn al aumentar los niveles de AMPc coordina la actividad enzimtica celular para dar una respuesta celular que lleva a la liberacin de glucosa por el hgado. La PKA tambin puede fosforilar protenas especficas denominadas protenas ligadoras del elemento de respuesta al AMPc (CREB) y modulador del elemento de respuesta al AMPc (CREM), dicha fosforilacin les permite interactuar con secuencias especficas del ADN denominadas elementos de respuesta al AMPc (CRE) para modular la transcripcin gentica, de manera inhibidora activadora.
(CaM), el complejo Ca/CAM puede acoplarse (envolverlas) a una gran cantidad de protenas diana como las protenquinasas dependientes de Ca/CaM, quienes activan otras enzimas de sealizacin intracelular. El aumento del calcio intracelular tambin puede activar otros canales de membrana para el ingreso de ms calcio y los sistemas de secrecin desarrollando el acoplamiento estmulo-secrecin.
Por otra parte, la AC puede ser regulada por el complejo calcio/calmodulina (Ca/CaM) generado por otra va de sealizacin, en este caso es estimulada y as se se activa la red de transduccin en la clula. Sistema de las fosfolipasas Este sistema es activado principalmente por la ProtGq (Gq, G11, G14) que activan distintos tipos de fosfolipasas PLC, PLD y PLA. La fosfolipasa C (PLC) es la principal enzima amplificadora que especficamente acta sobre el fosfolpido de membrana fosfatidilinositol bifosfato (PIP2), que se encuentra en la cara interna de la membrana y produce un aumento en el recambio de fosfoinositoles generando inositol 1,4,5- trisfosfato (IP3) y diacilglicerol (DAG) como 2 mensajeros. Dos isoformas de PLC son activadas en respuesta a ligandos extracelulares, PLC activada por ProtGq acoplada a receptores de eicosanoides como prostaglandinas PGF2, PGE2, prostaciclinas; y PLC que es activada principalmente por receptores de factores de crecimiento acoplados a tirosnquinasa.
El DAG permanece en la membrana y puede activar una protenquinasa C (PKC), conjuntamente con el aumento del calcio libre, y tambin protenas con actividad GTPasa relacionadas con Rac, llamadas quimerinas. Existe una familia de PKC implicadas en las vas de transduccin de seales iniciadas por distintas hormonas, factores de crecimiento y neurotransmisores, y su activacin induce la fosforilacin de protenas a travs de quinasas dependientes de calcio.
El IP3 es una molcula hidroflica que, liberada por la fosfoinositidasa, difunde al citosol donde se une a receptores localizados en el retculo endoplsmico, estos receptores conforman un canal que se abre permitiendo la salida de calcio. El aumento del calcio libre en el citosol es considerado como 2mensajero (en realidad 3 mensajero) pues interacta con diversas protenas transductoras que son activadas por este in. La ms conocida de estas protenas es la calmodulina
La fosfolipasa D (PLD) estimula la hidrlisis de la fosfatidilcolina (PC) de la membrana, ello induce la liberacin del cido fosfatdico (PA), que a su vez es convertido a DAG, y as produce la activacin de PKC. Esta fosfolipasa no es activada por los GPCR ni por TKR, sino por efectores de otros sistemas de sealizacin, por ello esta fosfolipasa responde indirectamente a los ligandos extracelulares.
El PA puede activar enzimas como PI4fosfato5-quinasa para dar PIP2 que es sustrato de la PLC, generando circuito de regulacin y tambin est involucrada en la activacin de serinatreoninaquinasas (Ser/ThrK) Raf. La fosfolipasa A2 (PLA2) tambin hidroliza la PC y, como ya se cit anteriormente, existen dos isoformas cPLA2 relacionada con factores de crecimiento, que posee sitios de fosforilacin de MAPK que determina su translocacin a distintas organelas y al ncleo, que asegura su actividad, principalmente respecto al remodelamiento de la membrana, proteccin contra dao oxidativo y regulacin del volumen celular,.y sPLA2 activada por productos de HETE acoplados a estmulos externos y calcio, que puede anclarse a la membrana en las cavolas acopladas a glicosilfosfatidilinositol (GPI). El producto ms importante de la accin de la PLA2 es el AA, y lisofosfatidilcolina (LPC). Como ya se mencionara el AA puede actuar como mensajero intracelular activando la formacin de GMP cclico (GMPc), como precursor de los eicosanoides. Otro producto de la activacin de PLA2 incluye la generacin de factor activador de plaquetas (PAF) por accin sobre la PC, ste puede ser liberado y actuar sobre GPCR de clulas vecinas activando las vas de PLC y PLA2 para participar en la respuesta inflamatoria y otros procesos. Por lo tanto, los productos de este sistema de transduccin celular acoplado a la PLC interactan entre s en las redes de sealizacin, y a su vez pueden abandonar las clulas y actuar como ligandos extracelulares de GPCR en clulas vecinas. Protena G acoplada a canales inico Se ha identificado un grupo de ProtG que al ser activadas por el receptor se acoplan directamente, en general a travs del complejo , a canales inicos de la membrana plasmtica modificando su estado de apertura. El ejemplo ms reconocido es el del receptor colinrgico M2, en el nodo sinusal, que esta acoplado a una ProtGi/o que estimula canales de potasio especiales denominados GIRK.
3) receptores con actividad enzimtica: este tipo de receptores inciden principalmente sobre la transcripcin gnica y participan de funciones tales como el control de la divisin celular, crecimiento y diferenciacin celular, inflamacin y reparacin tisular; las respuestas en ellos son lentas (del orden de horas) pues requieren de muchos pasos de transduccin intracelular para llevar a cambios en la expresin de los genes. Los receptores asociados con enzimas tambin median reconfiguraciones rpidas y directas del citoesqueleto y controlan el modo en que las clulas se mueven y cambian de forma, a menudo en estas alteraciones de la arquitectura celular las seales extracelulares no son de mensajeros libres sino de protenas unidas a la membrana como las integrinas. Las alteraciones del crecimiento, la proliferacin, la diferenciacin, la supervivencia y la migracin celular constituyen la base del cancer y las anormalidades de la sealizacin a travs de receptores asociados a enzimas desempean un papel importante en esta enfermedad. La mayor parte de estos receptores de membrana estn constituidos por una sola cadena y poseen en general tres dominios, uno extracelular que une al ligando, uno de transmembrana y uno intracelular con actividad enzimtica, en general actividad quinasa. Se los puede clasificar en receptores catalticos y receptores acoplados a enzimas itinerantes. Receptores catalticos: son aquellos que poseen en su propia estructura actividad enzimtica y pueden ser divididos en receptores con actividad tirosinquinasa (TKR), receptores con actividad serin-treonin quinasa (Ser/ThrK) y receptores con actividad guanilato ciclasa (GCR) -TKR como estn constituidos por una alfa hlice simple no pueden transmitir la informacin con un cambio de conformacin, por ello tienen como estrategia la dimerizacin ante la unin del mensajero, dos receptores se aproximan y el contacto entre las colas intracelulares de los dos monmeros activa su funcin de quinasa. Como resultado una fosforila las cadenas laterales de tirosina a la otra, generando una autofosforilacin. Los receptores del factor de crecimiento epidrmico (EGF) y el factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) son de este tipo, monomricos, mientras no estn unidos al ligando, pero los activados por insulina son dimricos.
importante ya que sus mutaciones generan una divisin celular inadecuada y contribuyen a la iniciacin del cancer, est representada por la va de una pequea protena denominada proto-oncogen Ras anclada a la membrana plasmtica, ella es activada por los TKR promoviendo una cascada de fosforilacin de una serie de protenquinasas que transportan la seal desde la membrana hasta el ncleo denominada cascada de MAPquinasa (MAPK), sta fosforila protenas reguladoras de genes y producen un cambio de patrones en la expresin genica. Las MAPK son mediadores de una gran variedad de seales mitognicas y estresoras de la membrana y son reguladas por protenas scaffold y la MAPKfosfatasa.
Esta fosforilacin provoca el ensamblaje de un complejo de sealizacin intracelular sobre la cola del receptor, ya que las tirosinas fosforiladas actan como sitios de unin que son reconocidos por mltiples protenas que poseen dominios SH2, las que al unirse al receptor se activan. Entre las protenas de sealizacin que se acoplan estn una PLC que fosforilada conduce a un aumento en el sistema de fosfoinostidos, una enzima fosfatidilinositol 3-quinasa (PI-3K).que fosforila los inositoles de la membrana convirtindolos en sitios de acoplamiento para otras protenas como la proteinquinasa B (PKB), una protenfosfatasa1C (PTP1C), como as tambin miembros de la familia SRC de la tirosinaquinasa (PTKs). La generacin de seales intracelulares a partir de la activacin de los TRK depende de molculas adaptadoras como la GRB2 , sin actividad enzimtica, que se une a los receptores autofosforilados por SH2 ; adems participan en esta cascada de sealizacin protenas andamio scaffolds como sitios de acoplamiento para otras protenas permitiendo que se mantengan vinculadas espacialmente entre s en la secuencia de activacin, logrando una coordinacin de mltiples vas de sealizacin.
Para finalizar con la activacin del receptor, la clula contiene tirosnfosfatasas que eliminan los fosfatos y en algunos casos los receptores activados son endociados y destruidos en lisosomas. -receptores Ser/ThrK al ser activados por el ligando fosforilan residuos de serina y/o treonina. Estos receptores utilizan vas de sealizacin en general diferentes a las vas de los receptores TKR ya que fosforilan y activan en forma directa protenas reguladoras de genes llamadas SMAD. Estos receptores son los principales mediadores de TGF (factor de crecimiento de transformacin beta), tambin incluye las activinas, inhibinas y las protenas morfognicas del hueso (BMP).
Pero la principal va de sealizacin de este grupo que se dirige al ncleo, y es muy
genes llamadas STAT, que luego migran hacia el ncleo donde estimulan la transcripcin. Las Src quinasas son tambin una familia de tirosinquinasas citoslicas, que a su vez se divide en nueve subfamilias SRC, Fyn, Lck, entre otras, que regulan mltiples procesos celulares. Tambin existen Ser/Thrquinasas como las Stequinasas y WKN (with-no-lysinekinase family). Stequinasas son una familia con un rol importante en el control de procesos celulares como proliferacin y respuesta al estrs, se subdividen en dos subfamilias GCK (germinal center kinasas) y PAK (p21 activated kinasa). Las WKN son una familia que tienen relacin con la regulacin de las protenas de transporte generando su up downregulation; canales y transportadores regulados por esta familia de quinasas son los cotransportadores catin/Cl-, canal de K+ de la mdula renal (ROMK1); canales de Na+ del epitelio, canales TRVP. Otro grupo de receptores que se acoplan a enzimas itinerantes est representado por los receptores de prolactina (PRL) y de la hormona de crecimiento (GH). - receptores con GC constituyen una subfamilia de receptores de amplia distribucin en el organismo y que se dividen a su vez en GC particuladas (GCp), que estn asociadas a la membrana plasmtica y reconocen diferentes pptidos, y GC solubles (GCs) que se encuentran inmersas en el citoplasma y son el nico receptor conocido del ON. En las GCp el dominio extracelular puede ejercer la funcin de receptor del ligando y en el otro extremo de la cadena expresa el sitio con actividad GC. Existen distintos grupos de GCp, las sensibles al pptido atrial natriurtico (PAN), las sensibles al pptido cerebral natriurtico (PCN) y las especficas de rganos sensoriales. En este sistema de sealizacin el GMPc producido a partir del GTP acta como 2 mensajero, y activa una protenquinasa G (PKG) que fosforila protenas celulares. Los niveles de GMPc se regulan a nivel intracelular por las fosfodiesterasas, que lo degradan rpidamente. Receptores acoplados a enzimas itinerantes: son aquellos receptores que intrnsecamente no poseen actividad cataltica pero pueden ensamblarse a protenquinasas itinerantes en estado latente. Un grupo de estos receptores estn acoplados a tirosinquinasas citoslicas, esta clase de receptores incluye todos los receptores de las citoquinas, glicoprotenas de superficie de linfocitos T y receptor de antgenos de las clula T (TCR), que pueden acoplarse a la quinasa Janus (JAK) y activar protenas citoplasmticas reguladoras de Receptores intracelulares de mensajeros qumicos Cuando el mensajero puede atravezar la membrana, como los esteroides y las hormonas tiroideas, presenta receptores intracelulares. El receptor intracelular, al igual que el de membrana, est sujeto a modificaciones qumicas por diversas fosforilaciones y otras modificaciones covalentes. Este mecanismo de sealizacin celular tiene una latencia de minutos a horas durante el cual no se observa ningn efecto. Pueden dividirse en receptores citoslicos y receptores nucleares.
Receptores citoslicos Los receptores intracelulares citoslicos reconocen al mensajero, lo fijan y pasan a su configuracin activa. Se ha demostrado que muchos de los receptores de este grupo forman, en ausencia del mensajero, un gran complejo con algunas protenas que reciben el nombre de chaperoninas; que se van disociando una vez que llega el mensajero.
Receptores nucleares En el caso de los receptores intracelulares nucleares, como para las hormonas tiroideas, la unin al receptor induce a un cambio conformacional que mejora su afinidad para secuencias especficas en el DNA y esta reaccin, a su vez induce cambios en la expresin de los genes que finalmente genera la sntesis de protena y la respuesta celular.
El complejo hormona-receptor es translocado al ncleo y se ha propuesto que algunas de las chaperoninas pueden participan en dicha migracin. Una vez en el ncleo, el complejo se fija al ADN en puntos concretos en los que interactan con secuencias especficas, la regin promotora de los genes que se van a transcribir, en algunos casos se produce un bloqueo de la transcripcin y en otros la activacin, y un mismo mensajero puede tener efecto positivo sobre la transcripcin de unos genes y negativo sobre otros.
Los receptores nucleares han sido clasificados en dos categoras, Grupo I que comprende a los receptores para estrgenos, hormonas tiroideas, cido retinoico y vitamina D, y que reconocen los flancos 5 y 3 de los elementos de respuesta del DNA; y Grupo II que comprende a los receptores para andrgenos, progestgenos, glucocorticoides y mineralocorticoides, que reconoce el flanco 5 del DNA. La activacin de los elementos de respuesta induce que la enzima RNA polimerasa ocupe el sitio de iniciacin para que sintetice el RNAm. Recientemente se ha demostrado que algunos sistemas celulares tienen receptores de membrana para los mensajeros esteroideos; por ejemplo el espermatozoide tiene receptores de membrana para progesterona, los progestgenos pueden unirse a la membrana y regular Prot.Gi y as disminuye los niveles de AMPc.
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La homeostasis celular es esencial para el funcionamiento del organismo

La membrana celular: el lmite funcional entre el compartimiento intracelular y extracelular

Fig.1 Distribucin e compartimientos lquidos

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Fig.2: Composicin de los compartimientos lquidos

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diluy la sustancia (volumen de distribucin), y la frmula de trabajo es:

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o utilizando BUN (nitrgeno ureico):

Existen otras frmulas de trabajo para calcular la osmolaridad plasmtica y urinaria:

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Homeostasis del volumen celular

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Homeostasis del pH celular

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POTENCIAL DE MEMBRANA EN REPOSO

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Fuerza impulsora Vm -EK+= + - 65 - ( -80)= +15 mV

Vm - ENa += - 65 - (62)= - 127 mV Vm - ECl -= - 65 - (- 65)= 0 mV LIC

ClECl -= -65 mV LEC

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Potenciales locales y generacin del potencial de accin

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potenciales post-sinpticos inhibitorios (PPSI) (causan hiperpolarizacin).

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mV 60 40 20 0 -20 -40 -60 -80 -100 -120

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Homeostasis energtica celular

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enzimas citoslicas tambin pueden afectadas por la peroxidain lipdica.

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Intercambio de informacin entre el medio extra e intracelular: Comunicacin celular

aislndola eficazmente extensin de la lesin.

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mediado por el contacto directo con las clulas presentadoras de antgenos