Anda di halaman 1dari 9

ISOLASI DNA SEDERHANA Disusun untuk memenuhi tugas Matakuliah Genetika I yang dibimbing oleh Prof. Dr.

Aloysius Duran Corebima, M.Pd dan Prof.Dr. Hj Siti ubaidah, M.Pd

!a"oran Praktikum #lasikal

$leh% $ffering H #elom"ok Proyek &' (Hari )umat* +li,abeth Marlynda Shierly Sai henta,a 2ian3a Ardjaka &--./'/-/01' &--./'/-/01/

UNIVERSITAS NEGERI MALANG FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM JURUSAN BIOLOGI MARET 2012

A. TUJUAN Ada"un tujuan dalam "raktikum ini antara lain untuk mengetahui% &. Hubungan antara jenis buah ber"engaruh "ada ketebalan dan kualitas D4A '. Hubungan antara jenis deterjen ber"engaruh "ada ketebalan dan kualitas D4A B. RUMUSAN MASALAH Ada"un rumusan masalah dalam "raktikum ini antara lain % &. 2agaimanakah "engaruh antara jenis buah dengan ketebalan dan kualitas D4A 5 '. 2agaimanakah kualitas D4A5 C. DASAR TEORI D4A (Deo6yribose 4u3leid A3id* adalah molekul yang mengkode semua informasi yang dibutuhkan untuk "roses metabolisme dalam setia" organisme ()amilah, '--1*. D4A tersusun atas . kom"onen utama yaitu gula deoksiribosa, basa nitrogen, dan fosfat. D4A da"at ditemukan "ada inti sel, mitokondria, dan kloro"las ("ada tumbuhan*. D4A yang menyusun kromosom meru"akan nukleotida rangka" yang tersusun heliks ganda, dimana basa nitrogen dan kedua benang "olinukleotida saling ber"asangan dalam "asangan yang teta" melalui ikatan hidrogen dan antara nukleotida yang satu dengan nukleotida yang lain dihubungkan dengan ikatan fosfat. Isolasi D4A meru"akan suatu teknik "emisahan D4A, baik D4A yang berasal dari inti sel, mitokondria mau"un kloro"las ("ada tumbuhan*. Proses isolasi D4A dia7ali dengan "roses ekstraksi D4A. Hal ini bertujuan untuk memisahkan D4A dengan "artikel lain yang tidak diinginkan. Proses ini harus dilakukan dengan hati8hati, sehingga tidak menyebabkan kerusakan "ada D4A. 9ntuk mengeluarkan D4A dari sel, da"at dilakukan dengan meme3ahkan dinding sel, membran "lasma dan membran inti baik dengan 3ara mekanik mau"un se3ara kimia7i. )ika dengan 3ara mekanik bisa dilakukan dengan memblender atau menggerus dengan menggunakan mortar dan "istil. "engaruh antara jenis deterjen dengan ketebalan dan

!angkah kedua adalah melarutkan dan meme3ahkan li"id terutama "enyusun membran sel. Dalam taha" ini kita menggunakan deterjen. Penambahan detergen dalam isolasi D4A ini dilakukan karena deterjen da"at menyebabkan rusaknya membran sel, melalui ikatan yang dibentuk melalui sisi hidrofobik detergen dengan "rotein dan lemak "ada membran membentuk senya7a li"id "rotein kom"leks (Ma3hfud, '--0*. )enis detergen yang digunakan dan kandungan deterjen yang ada dalam deterjen juga ber"engaruh "ada hasil dari isolasi D4A. !angkah ketiga kita mendegradasi "rotein8"rotein yang terda"at di dalam sel. #emudian untuk menjaga stabilitas reaksi, kita menambahkan garam da"ur sebagai buffer. Garam memegang "eranan "enting, yaitu untuk menghilangkan "rotein dan karbohidrat karena garam da"at menyebabkan keduanya ter"resi"itasi dan bersama8sama dengan detergen, keduanya berfungsi se"erti halnya lysing buffer (Dollard, &::/*. !angkah terakhir yaitu mengekstrak D4A dengan menggunakan alkohol. Alkohol yang diberikan "ada keadaan dingin akan mengangkat D4A ke atas "ermukaan ekstrak sel. D. ALAT DAN BAHAN Alat % &. ;abung reaksi '. 2eaker glass .. Pi"et /. Corong 1. 2lender 0. #ain saring 2ahan % &. 2uah (srikaya, tomat, belimbing, "ir* '. Detergen (rinso bubuk, atta3k bubuk, bukrim, sunlight 3air* .. A<uades /. +tanol =-> dingin 1. #ertas saring

D. PROSEDUR KERJA

#ulit buah diku"as, di"otong ke3il

Memblender buah dan air se3uku"nya (semua buah diblender satu "ersatu % srikaya, belimbing, tomat, "ir*

Menyaring dengan kain saring dan 3orong, lalu menyaring kembali dengan kertas saring

Menuangkan hasil saringan "ada beaker glass Mengambil kurang lebih .- ml sari buah Menambahkan detergen . sendok teh (semua detergen dimasukkan ke dalam beaker glass satu "er satu % rinso, atta3k, bukrim, sunlight * Mengaduk larutan tersebut selama &- menit, tidak boleh sam"ai berbuih Menambahkan garam da"ur se3uku"nya, kemudian diaduk Menyaring&1 ml sari buah, memasukkan dalam tabung reaksi

Menambahkan 1 ml alkohol absolut =-> melalui dinding tabung

Menunggu 18&- menit, mengamati ke3e"atan bentuk D4A (7arna dan ketebalan*

Men3atat 7aktu a7al terbentuknya benang benang D4A dan membandingkan ketebalan la"isan D4A yang terbentuk "ada masing masing jenis buah

C. DATA HASIL PENGAMATAN Nama Bahan S)'%a*a + ?Sunlight ?2u #rim ?Atta3k ?@inso T,ma" + ?Sunlight ?2u #rim ?Atta3k ?@inso Be&'m#'n- + ?Sunlight ?2u #rim ?Atta3k ?@inso P') + ?Sunlight ?2u #rim ?Atta3k ?@inso D. ANALISIS DATA 2erdasarkan hasil "engamatan, kami menda"atkan data bah7a "adat alikout buah srikaya sebagai objek isolasi D4A, 3in3in D4A "aling tebal yaitu -,A 3m dengan ke3e"atan "embentukan D4A ???? (3e"at* ditemukan "ada tabung reaksi yang berisi larutan rinso, sedangkan isolasi D4A yang memiliki ketebalan D4A "aling rendah yaitu -,& 3m dida"atkan "ada tabung reaksi yang berisi larutan sunlight 3air dengan ke3e"atan "embentukan D4A ? (lambat*. Pada larutan bukrim, ke3e"atan "embentukan D4A ?? (agak lambat* dengan ketebalan ? ?? ??? ???? ???? ? ??? ?? ??? ?? ???? ? ? ???? ?? ??? -,& 3m -,= 3m -,& 3m -,A 3m -,1 3m -,A 3m -,' 3m -,/ 3m &,'1 3m -,/ 3m -,= 3m ',1 3m 8 A mm ' mm . mm Putih keruh Putih kebiruan Putih keruh Putih keruh Putih Putih Putih Putih kekuningan Putih keruh Putih keruh Putih keruh Putih telur 8 Putih kehijauan kuning keruh #uning agak keruh Ke e!a"an Pem#en"$%an DNA Ke"e#a&an 'n 'n DNA (a)na

-,= 3m. Pada larutan atta3k, ke3e"atan "embentukan D4A ??? (agak 3e"at* dengan ketebalan D4A -,& 3m. Proses isolasi yang kedua ini menggunakan buah tomat sebagai objek isolasi D4A, 3in3in D4A "aling tebal diisolasi "aling tebal yaitu -,A 3m dengan ke3e"atan "embentukan D4A ? (lambat* ditemukan "ada tabung reaksi yang berisi larutan bu krim, sedangkan isolasi D4A yang memiliki ketebalan D4A "aling rendah yaitu -,' 3m dida"atkan "ada tabung reaksi yang berisi larutan atta3k dengan ke3e"atan "embentukan D4A ??? (agak 3e"at*. Pada larutan sunlight 3air, ke3e"atan "embentukan D4A ???? (agak 3e"at* dengan ketebalan -,1 3m. Pada larutan rinso, ke3e"atan "embentukan D4A ?? (agak lambat* dengan ketebalan D4A -,/ 3m. Proses isolasi yang ketiga ini menggunakan buah belimbing sebagai objek isolasi D4A, 3in3in D4A "aling tebal diisolasi "aling tebal yaitu ',1 3m dengan ke3e"atan "embentukan D4A ? (lambat* ditemukan "ada tabung reaksi yang berisi larutan rinso, sedangkan isolasi D4A yang memiliki ketebalan D4A "aling rendah yaitu -,/ 3m dida"atkan "ada tabung reaksi yang berisi larutan bukrim dengan ke3e"atan "embentukan D4A ?? (agak lambat*. Pada larutan sunlight 3air, ke3e"atan "embentukan D4A ??? (agak 3e"at* dengan ketebalan &,'1 3m. Pada larutan atta3k, ke3e"atan "embentukan D4A ???? (3e"at* dengan ketebalan D4A -,= 3m. E. PEMBAHASAN 2erdasarkan "raktikum yang telah dilakukan, F. DISKUSI &. A"a yang dimaksud dengan isolasi D4A5 Isolasi D4A adalah suatu teknik "emisahan D4A, baik D4A yang berasal dari inti sel, mitokondria mau"un kloro"las ("ada tumbuhan*. '. A"a fungsi dari "enambahan garam5 Bungsi dari "enambahan garam adalah sebagai larutan yang melisiskan sel dan sebagai buffer yang menjaga agar "H teta" seimbang, sehingga tidak terjadi

denaturasi sel, serta untuk memudahkan "emisahan benang8benang D4A sehingga lebih mudah diamati. .. A"a fungsi dari "enambahan alkohol5 Menga"a alkohol ditambahkan dalam keadaan dingin5 Bungsi dari "enambahan alkohol adalah untuk membersihkan D4A dari kotoran8 kotoran melalui ikatan yang dibentuk memlalui sisi hidrofobik deterjen dengan "rotein dan lemak "ada membrane membentuk senya7a li"id "rotein8 deterjen kom"leks yang hasilnya ,at organik berada di ba7ah sedangkan D4A akan terkoagulasi dan mem"erke3il berat jenis D4A sehingga da"at mun3ul ke "ermukaan larutan beru"a 3in3in D4A. Alkohol ditambahkan dalam keadaan dingin untuk mem"er3e"at "resi"itasi D4A. /. Menga"a "engadukan alikout setelah ditambahkan deterjen tidak boleh sam"ai berbuih5 #arena jika alikout diaduk sam"ai berbuih, maka yang tam"ak di "ermukaan adalah buih, bukan 3in3in D4A. 2erat jenis buih yang lebih ringan dari"ada berat jenis D4A menyebabkan "engamatan 3in3in D4A akan terganggu. 1. A"akah ke3e"atan "enggabungan D4A "ada masing8masing buah dan masing8 masing deterjen berbeda5 Menga"a5 2erbeda. Pada masing8masing buah yang digunakan ("ir, tomat, belimbing dan srikaya* memiliki kandungan daging buah dan kadar air yang berbeda8beda. Semakin banyak kadar air "ada suatu buah, maka makin 0. A"akah kesim"ulan dari "raktikum isolasi D4A5

G. KESIMPULAN Ada"un kesim"ulan yang da"at diambil dari "raktikum Cisolasi D4A sederhanaD ini adalah