Diego Ferreira M Silva Completo

1
DIEGO FERREIRA MUNIZ-DA-SILVA

Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758)
(SERPENTES: COLUBRIDAE)

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-
Graduao em Anatomia dos Animais Domsticos
e Silvestres da Faculdade de Medicina Veterinria
e Zootecnia da Universidade de So Paulo para
obteno do ttulo de Mestre em Cincias

Departamento:
Cirurgia

rea de concentrao:
Anatomia dos Animais Domsticos e Silvestres

Orientadora:
Prof. Dra. Selma Maria de Almeida Santos

So Paulo
2012

2

Autorizo a reproduo parcial ou total desta obra, para fins acadmicos, desde que citada a fonte.

DADOS INTERNACIONAIS DE CATALOGAO-NA-PUBLICAO

(Biblioteca Virginie Buff Dpice da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da
Universidade de So Paulo)

T.2584 Muniz-Da-Silva, Diego Ferreira
FMVZ Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758)
(SERPENTES: COLUBRIDAE) / Diego Ferreira Muniz-Da-Silva. -- 2012.
135 f. : il.

Dissertao (Mestrado) - Universidade de So Paulo. Faculdade de Medicina
Veterinria e Zootecnia. Departamento de Cirurgia, So Paulo, 2012.

Programa de Ps-Graduao: Anatomia dos Animais Domsticos e Silvestres.
rea de concentrao: Anatomia dos Animais Domsticos e Silvestres.

Orientador: Profa. Dra. Selma Maria de Almeida Santos.

1. Reproduo animal. 2. Combate. 3. Segmento sexual renal. 4. Ovulao
reflexa. 5. Hemipnis. I. Ttulo.

3

4

FOLHA DE AVALIAO

Nome: MUNIZ-DA-SILVA, Diego Ferreira

Ttulo: Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES:
COLUBRIDAE)

Dissertao apresentada ao Programa de Ps-
Graduao em Anatomia dos Animais Domsticos
e Silvestres da Faculdade de Medicina Veterinria
e Zootecnia da Universidade de So Paulo para
obteno do ttulo de Mestre em Cincias

Data: ____/____/______

Banca Examinadora

Prof. Dr. ____________________________________________________________________

Instituio: ___________________________Julgamento:_____________________________

Prof. Dr. ____________________________________________________________________


Prof. Dr. ____________________________________________________________________


5

Aos animais depositados em colees cientficas,
por permitirem a realizao de pesquisas como esta,
e na maioria das vezes, so vistos apenas como objetos
por pessoas que um dia foram crianas,
e nessa poca, eram apaixonados pela vida de cada animal, e no por um txon.
6

AGRADECIMENTOS

Dra. Selma Maria de Almeida Santos, por ter aceitado a minha orientao, mesmo
sabendo das dificuldades que encontraria em orientar uma pessoa completamente leiga em sua
linha de pesquisa, por ter me passado o conhecimento que hoje tenho sobre herpetologia, e
pela confiana e preocupao que teve comigo durante todo esse perodo.
Ao Dr. Marcovan Porto, por acreditar em mim, por ter me apresentado Dra. Selma e
ter vendido o meu peixe por um valor bem maior do que ele vale.
Aos Drs. Otavio Augusto Vuolo Marques e Fausto Erritto Barbo, por me cederem
dados fundamentais para a realizao dessa pesquisa, dados sem os quais muitos dos
resultados apresentados aqui no seriam possveis, e que por isso, so to responsveis por
essa realizao quanto eu e a Dra. Selma.
Professora Dra. Maria Anglica Miglino, por ter me permitido realizar esse trabalho
pelo Programa de Ps-Graduao em Anatomia dos Animais Domsticos e Silvestres da
Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da Universidade de So Paulo.
Ao Laboratrio de Ecologia e Evoluo do Instituto Butantan, e ao instituto, por ter
me acolhido durante esse perodo.
Aos funcionrios das colees herpetolgicas do Museu de Histria Natural Capo da
Imbuia (MHNCI); Museu Nacional, Universidade Federal do Rio de Janeiro (MNRJ); Museu
de Cincias Naturais da Pontifcia Universidade Catlica de Minas Gerais (PUC-MG); Museu
de Zoologia Joo Moojen, Universidade Federal de Viosa (MZUFV); Museu de Zoologia da
Universidade Estadual de Campinas (ZUEC); Museu de Cincias e Tecnologia da Pontifcia
Universidade Catlica do Rio Grande do Sul (MCP); Fundao Nacional Ezequiel Dias
(FUNED), em especial, os curadores, Dr. Julio Cesar de Moura Leite, Dr. Ronaldo Fernandes,
Dr. Paulo Passos, Dra. Luciana Barreto Nascimento, Dr. Renato Feio, Dr. Paulo Roberto
Manzani, Dra. Glucia Maria Funk Pontes, Dra. Giselle Cotta. Ao coordenador da Faculdade
de Medicina Veterinria do Centro Universitrio Serra dos rgos (UNIFESO), Prof. Andr
Vianna Martins e ao tcnico do Laboratrio de Anatomia Animal, Marcelo Caetano. A todos
vocs, muito obrigado, pelo emprstimo dos exemplares utilizados nessa pesquisa.
Ao Dr. Carlos Jared e Dr. Marta Antoniazzi, por me permitirem utilizar o laboratrio
para a obteno das fotomicrografias.
Ao Valdir Jos Germano, por me ajudar na tcnica de montagem dos hemepnes
utilizados nessa pesquisa.
Aos colegas do Grupo de Estudos de Reproduo de Squamata (GERES), Igor Stefan
Popovic Federsoni, Evandro Berti Galvo, Karina N. Kasperoviczus, Viviane Campos Garcia,
Kalena Barros da Silva, Patrcia Silva Marinho, Nathalie Sampo Bellini, Fernanda Magno
Amaral, e em especial Letcia Ruiz Sueiro, por ter me ajudado, me ensinando sobre a coleta
dos dados reprodutivos; ao Claudio Augusto Rojas, pela ajuda com a leitura de algumas das
lminas histolgicas; Maria Adelaida Hoyos Argez, Henrique Bartolomeu Braz e Vernica
Alberto Barros, pela grande ajuda com os testes estatsticos, Karina Maria Pereira da Silva,
por ter conseguido um artigo to importante, que eu no encontrava; ao Victor Frias Czank,
por ter se empenhado tanto, e por tido pacincia as inmeras vezes que eu pedi para que ele
modificasse os desenhos cientficos que compem esse trabalho, e; Lvia Cristina dos
Santos, por ter praticamente me coorientado, me ensinando tudo sobre o processamento
histolgico, confeco das lminas histolgicas, frmulas que foram utilizadas nesse trabalho,
criao de planilhas e testes estatsticos, e por se preocupar e se disponibilizar sempre em me
ajudar, mesmo estando longe.

7

Ao Coy (Srgio Serrano), por ter me fornecido um exemplar de Spilotes o qual pude
utilizar para preparao do sistema reprodutor masculino que ilustra essa dissertao.
Silvia Regina Travaglia Cardoso, por disponibilizar as caninanas para que eu fizesse
as fotografias que ilustram a capa dessa dissertao.
Ao John Andermann, Daniel Velho, Edelcio Muscat, Jos Milton Longo, Osvaldo
Parthey, Luciano Castanho e Gustavo Knuppe, pessoas que eu no conheo, e mesmo assim, se
disponibilizaram a me ajudar com fotografias, vdeos e informaes que foram muito teis para essa
dissertao.
Aos amigos Chris (Christopher Lang) e M. Teresa C. G. V.de Carvalho, pela grande ajuda
com o idioma ingls, o que me capacitou para que tudo isso fosse possvel, sem essa ajuda nada disso
teria se iniciado.
Aos colegas do Laboratrio de Ecologia e Evoluo do Instituto Butantan, Thas
Barreto Guedes, Cristian Alexandro Gomes, Jos Salvatore Leister Patan, Hugo Leonardo
Sioufi Silva, Natlia Ferreira Torello Viera, Adriano Tadeu Fellone, Darina Brumatti
Favorito, Dinah Lemos, Kelly Kishi, Vera Lcia Moraes Torres e Daniela Petrim de Arajo.
Aos funcionrios do Programa de Ps-Graduao em Anatomia dos Animais
Domsticos e Silvestres da Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia da Universidade
de So Paulo, em especial ao Maicon Silva, pela grande ajuda e informaes sobre a seleo
da ps-graduao, mesmo antes de eu vir pra So Paulo e conhec-lo, sem essa ajuda essa
etapa da minha vida no teria sido possvel; aos tcnicos Diogo Nader Palermo e Ronaldo
Agostinho da Silva pela ajuda nas tcnicas laboratoriais, e; Professora Dr. Paula Papa, pelo
grande aprendizado, pelos elogios e confiana que teve em mim.
Ao Ricardo Franciscon pela ajuda com o abstract desse trabalho.
minha grande amiga Eliana da Silva Gulo pela ajuda com o abstract, pelas
correes feitas a este trabalho, e principalmente, por estar sempre torcendo pelo meu
sucesso.
Aos meus amigos de So Paulo, pela convivncia e carinho de todos, em especial a
Vanessa Lima pelo companheirismo e amizade desde que chegamos a So Paulo para a
seleo na ps-graduao, ao amigo Carlos Eduardo Costa Silva (Cretino) pela amizade e
por ter sido uma pessoa que eu sempre pude contar com o apoio, em tudo, aqui em So Paulo,
e a Ellen Rose Ribeiro de Souza, por cuidar de mim e por ter sido a minha famlia aqui em
So Paulo durante todo esse tempo.
Ao amigo Ruan Felipe Vieira Medrano, por ter acreditado tanto em mim, e me
ajudado no incio dessa etapa, por ter conseguindo vrios artigos que eu no encontrava, me
ajudando sempre com o ingls, e principalmente pelo companheirismo.
Aos meus amigos da graduao, que sempre acreditaram e torceram por mim, em
especial a Canelo (Raquel Diniz Lessa Pessanha), Silvana Arajo, Luiza Barcelos e Bianca
Andriolo, amigas de quem sinto tantas saudades.
minha famlia, por todo amor recebido, em especial ao meu padrasto Sebastio da
Silva, por ter estado sempre me apoiando e ajudando em tudo, minha irm Giovana Ferreira
Muniz da Silva e ao meu irmo Giovane Ferreira Muniz da Silva por serem parte de mim e
por acreditarem tanto no meu sucesso, e ao meu sobrinho Gabriel Fernandes da Silva Mateus,
que tem medo de besouro, e que por isso, quando crescer, no ser Mdico dos Bichinhos
como o tio, e sim, Super-heri Com Medo de Besouro.
minha rainha, Arli Ferreira da Silva, mulher a quem devo tudo o que sou hoje, por
mesmo sem entender o que uma dissertao e um mestrado, ter me dado fora e me apoiado
(mesmo contra sua vontade) para que eu viesse para So Paulo realizar um sonho, e por ser
simplesmente, a melhor me do mundo.
Ao meu Paizo l de cima, a quem devo todas as oportunidades que tive em minha
vida e, por ter me mostrado desde que eu era criana, o quanto sua criao, em especial a
natureza e os animais, encantadora.
8

Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (FAPESP) e a
Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (CAPES), por tornar possvel,
financeiramente, a realizao dessa dissertao. E tambm, ao assessor da FAPESP, pelos
comentrios e sugestes sobre o relatrio cientfico, as quais me ajudaram muito a melhorar a
dissertao.
A todos que me ajudaram, independente de qual forma, que esto sempre torcendo por
mim, e que por ventura eu no tenha mencionado por esquecimento, minhas sinceras
desculpas e meu muito obrigado.

Com a grande ajuda de cada um de vocs, seja de forma direta ou indireta, a realizao
desse sonho foi possvel! Muito obrigado!

9

Mostrei minha obra prima s pessoas grandes
e perguntei se o meu desenho lhes fazia medo.
Responderam-me: Por que que um chapu faria medo? [...]

10

[...] Desenhei ento o interior da jibia,
a fim de que as pessoas grandes pudessem compreender.
Elas tm sempre necessidade de explicaes.
(Antoine de Saint-Exupry O Pequeno Prncipe)

A imaginao mais importante que o conhecimento.
O conhecimento limitado. A imaginao envolve o mundo. (Albert Einstein)

11

RESUMO

MUNIZ-DA-SILVA, D. F. Ciclo reprodutivo da caninana, Spilotes pullatus (Linnaeus,
1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE). [Reproductive cycle of tiger rat snake, Spilotes
pullatus (Linnaeus, 1758) (Serpentes: colubridae)]. 2012. 135 f. Dissertao (Mestrado em
Cincias) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de So Paulo, So
Paulo, 2012.

O ciclo reprodutivo de Spilotes pullatus na regio sudeste do Brasil descrito para machos e
fmeas a partir de anlises macroscpicas e microscpicas do aparelho reprodutor e rgos
acessrios envolvidos na reproduo ao longo do ano. Os machos da espcie apresentam o
ciclo sazonal com o incio da espermatognese no vero, e durante o outono ocorre a
espermiao. Os gametas so estocados ao longo dos ductos deferentes que possuem um
formato convoluto. Os testculos entram em regresso e durante o inverno e a primavera
apresentam-se inativos. No incomum encontrar machos de Spilotes com anomalia gonadal,
apresentando uma massa testicular funcional prximo aos testculos. A cpula ocorre durante
o inverno, principalmente na metade final da estao, os gametas estocados nos ductos
deferentes no so esgotados durante a estao de acasalamento de forma que durante todo o
ano os machos possuem espermatozides estocados nos ductos. Os rins, rgo reprodutor
acessrio em Squamata, no apresentam variao em tamanho ao longo das estaes em
nenhum dos sexos, mas mudanas microscpicas ocorrem no nfron dos machos na regio do
segmento sexual renal, essa estrutura encontra-se hipertrofiada durante a estao de
acasalamento. Combate pode ocorrer durante a primavera e os machos tendem a ficar com a
poro cranial do corpo na vertical durante o duelo, diferentemente da maioria dos outros
colubrdeos que mantm quase todo o corpo na horizontal. Durante o combate os machos
podem expor o hemipnis. As fmeas iniciam a vitelognese no outono quando os folculos
menores do que 10 mm comeam a receber depsito de vitelo. O forrageio das fmeas
diminui de acordo com o desenvolvimento folicular. No final do inverno os folculos
encontram-se pr-ovulatrios e no oviduto mdio observa-se uma hipertrofia das glndulas da
casca. As fmeas parecem apresentar um perodo de proestro de seis dias e em seguida o
estro. Os hemipnes da espcie so nicos, sem nenhum tipo de bifurcao, enquanto que a
fmea possui uma cloaca longa e com bolsas (vaginas) marcadamente bilobadas. Aps a
cpula, no final do inverno, ocorre a ovulao. Nessa espcie parece haver ovulao reflexa,
sendo a cpula o estmulo para que ocorra a ovulao. A primavera a estao onde as
fmeas encontram-se prenhas e realizam a ovipostura. As fmeas que no ovularam parecem
ter os folculos absorvidos pelo organismo. As caninanas produzem em mdia oito ovos que

12

podem estar distribudos igualmente ou no entre os ovrios. Os ovos postos na primavera so
incubados em mdia por 73 dias e a ecloso ocorre durante o vero.

Palavras-chave: Reproduo animal. Combate. Segmento sexual renal. Ovulao reflexa.
Hemipnis.

13

ABSTRACT

MUNIZ-DA-SILVA, D. F. Reproductive cycle of tiger rat snake, Spilotes pullatus
(Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE). [Ciclo reprodutivo da caninana,
Spilotes pullatus (Linnaeus, 1758) (SERPENTES: COLUBRIDAE)]. 2012. 135 f. Dissertao
(Mestrado em Cincias) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Universidade de
So Paulo, So Paulo, 2012.

The reproductive cycle of Spilotes pullatus in southeastern of Brazil is described for males
and females from macroscopic and microscopic analysis of the reproductive tract and
accessory organs involved in reproduction throughout the year. Males of the species exhibit a
seasonal cycle with the onset of spermatogenesis in the summer and during autumn
spermiation occurs. The gametes are stored along the vas deferens, which have a convoluted
shape. The testicles come in regression and during the winter and spring appear inactive. It is
not unusual to find male Spilotes with gonadal failure, with a testicular mass function next to
the testicles. Mating occurs during the winter, especially in the latter half of the season,
gametes stored in the vas deferens are not depleted during the breeding season so that
throughout the years, males have sperm stored in the vas. The kidneys, reproductive organ
accessory in Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but
microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney,
this structure is hypertrophied during the mating season. The kidneys, reproductive organ
accessory Squamatas not show variation in size throughout the seasons in either sex, but
microscopic changes occur in the nephron of male sexual segment in the region of the kidney,
this structure is hypertrophied during the mating season. Combat can occur during the spring
and the males tend to stay with the cranial portion of the body vertical during the duel, unlike
most other colubrids that keeps most of the body horizontally. During combat, males may
expose the hemipenis. The females begin the vitellogenesis on fall when the follicles smaller
than 10 mm start receiving tank calf. Female foraging decreases with the follicle
development. At the end of winter follicles are pre-ovulatory and in the medium oviduct there
is a hypertrophy of gland shell. Females appear to have a period of six days of proestrus and
then estrus. The specie hemipenes are unique, without any kind of bifurcation, while the
female has a long cloaca with pouch (or vaginal pouch) markedly bilobed. After mating in the
end of winter, ovulation occurs. In this species seems to be reflex ovulation, copulation being
the stimulus for ovulation to occur. Spring is the season when females are pregnant and do the
oviposition. Females that did not ovulate have to seem the follicles absorbed by the body. The

14

tiger rat snake produce an average of eight eggs that may or may not be distributed equally
between the ovaries. The eggs laid in spring are incubated in medium for 73 days and
hatching occurs during the summer.

Keywords: Animal breeding. Combat. Renal sexual segment. Reflex ovulation. Hemipenis.

15

LISTA DE FIGURAS

Figura 1 - Caninana (Spilotes pullatus)....................................................................... 27
Figura 2 - Distribuio geogrfica de Spilotes pullatus.............................................. 28
Figura 3 - Trs roedores compondo o contedo estomacal de um exemplar
preservado no Museu Nacional do Rio de Janeiro.....................................

29
Figura 4 - Caninana com regio do pescoo inflada. Comportamento tpico
mostrado em uma situao de ameaa.......................................................

30
Figura 5 - Nfron de macho de serpente..................................................................... 33
Figura 6 - Corte e cpula de colubrdeo. Macho em monta dorsal tateando o dorso
da fmea com a parte ventral do queixo e com a cloaca junto da
fmea..........................................................................................................

34
Figura 7 - Exemplar de Spilotes pullatus de coleo zoologia................................... 41
Figura 8 - Mensurao do eixo maior do testculo de Spilotes................................... 42
Figura 9 - Mensurao do eixo menor do testculo de Spilotes.................................. 42
Figura 10 - Mensurao do eixo menor do testculo de Spilotes.................................. 42
Figura 11 - Regio distal do ducto deferente de Spilotes............................................. 43
Figura 12 - Comprimento total do rim de Spilotes........................................................ 43
Figura 13 - Largura da regio cranial do rim de Spilotes.............................................. 43
Figura 14 - Mensurao do eixo maior do maior folculo de Spilotes.......................... 44
Figura 15 - Fmea de Spilotes com a musculatura uterina distendida, ps-
postura......................................................................................................

45
Figura 16 - Fmea de Spilotes com a musculatura uterina relachada........................... 45
Figura 17 - Regio do testculo de Spilotes coletada para anlise histolgica.............. 46
Figura 18 - Regio do ducto deferente de Spilotes coletada para anlise histolgica.. 46
Figura 19 - Regio do rim de Spilotes coletada para anlise histolgica...................... 46
Figura 20 - Regio caudal do oviduto de Spilotes coletada para anlise histolgica.... 47
Figura 21 - Regio cranial do oviduto de Spilotes coletada para anlise histolgica... 47

16

Figura 22 - Fotomicrografia do testculo de Spilotes mostrando as medidas aferidas
dos tbulos seminferos..............................................................................

48
Figura 23 - Fotomicrografia do rim de Spilotes macho mostrando as medidas
aferidas do segmento sexual renal..............................................................

49
Figura 24 - Fotomicrografia do tero glandular (anterior) de Spilotes mostrando a
medida aferidas da glndula da casca........................................................

49
Figura 25 - Fotomicrografia do rim de Spilotes fmea mostrando as medidas
aferidas do tbulo contorcido distal...........................................................

50
Figura 26 - Testculo de Spilotes pullatus com epiddimo evidenciado....................... 56
Figura 27 - Ductos eferentes e epiddimo de Spilotes pullatus..................................... 56
Figura 28 - Sistema reprodutor masculino de Spilotes pullatus.................................... 57
Figura 29 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos de volume
testicular de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro...................................

58
Figura 30 - Distribuio ao longo dos anos dos valores de dimetro do tbulo
seminfero de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro.................................

59
Figura 31 - Distribuio ao longo dos anos dos valores da espessura do epitlio
seminfero de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro.................................

60
Figura 32 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus durante o final do vero,
apresentando o epitlio bem espesso com numerosas espermatognias
prximo a lmina basal..............................................................................

61
Figura 33 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus no incio do outono,
apresentando o epitlio bem espesso..........................................................

61
Figura 34 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus no incio do outono,
apresentando o epitlio bem espesso e com espermtides em fase de
diferenciao..............................................................................................

61
Figura 35 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus durante o inverno, apresentando
o epitlio fino basicamente formado por espermatognias........................

62
Figura 36 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus durante o inverno, apresentando
o epitlio fino e com alguns espermatozides no lmen............................

62
Figura 37 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura da
regio caudal do ducto deferente de Spilotes pullatus do sudeste
brasileiro.....................................................................................................

63
Figura 38 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do
comprimento do rim masculino Spilotes pullatus do sudeste brasileiro....

64

17

Figura 39 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura
cranial do rim masculino de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro..........

65
Figura 40 - Nfron de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil durante o
outono, com segmento sexual renal hipertrofiado.....................................

66
Figura 41 - Nfron de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil durante o vero,
com segmento sexual renal hipotrofiado....................................................

66
Figura 42 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do dimetro do
segmento sexual renal de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro..............

66
Figura 43 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da espessura do
epitlio do segmento sexual renal de Spilotes pullatus do sudeste
brasileiro.....................................................................................................

67
Figura 44 - Testculo de Spilotes pullatus apresentando uma massa testicular cranial
ao testculo..................................................................................................

68
Figura 45 - Microscopia da massa testicular de Spilotes pullatus................................ 68
Figura 46 - Rim de Spilotes pullatus apresentando uma massa renal caudal ao rim.... 68
Figura 47 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus com 1.150mm de CRC
apresentando um epitlio germinativo em incio de atividade...................

69
Figura 48 - Ducto deferente de Spilotes pullatus com aspecto convoluto.................... 71
Figura 49 - Ducto deferente de Spilotes pullatus com aspecto sinuoso........................ 71
Figura 50 - Fotomicrografia do ducto deferente de um macho de Spilotes com ducto
no convoluto macroscopicamente, embora, com presena de
espermatozides no lmen mostrando que se trata de um indivduo
maduro sexualmente...................................................................................

71
Figura 51 - Hemipnis de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil...................... 72
Figura 52 - Face sulcada do hemipnis de Spilotes pullatus......................................... 74
Figura 53 - Face asulcada do hemipnis de Spilotes pullatus....................................... 74
Figura 54 - Infundbulo de Spilotes pullatus exteriorizado da cavidade celomtica,
mostrando o aspecto translcido e formato afunilado...............................

75
Figura 55 - Sistema reprodutor feminino de Spilotes pullatus...................................... 76
Figura 56 - Distribuio do maior folculo ou ovo de Spilotes pullatus do sudeste
brasileiro ao longo dos anos.......................................................................

77

18

Figura 57 - Ovrio de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil com folculos
secundrios pr-ovulatrios em final de inverno.......................................

78

Figura 58 - Ovrio de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil com folculos
primrios no vero (< 10mm) e cicatrizes de ovulao.............................

78
Figura 59 - Regio caudal do oviduto de Spilotes pullatus da regio sudeste do
Brasil com oviduto distendido na primavera.............................................

78
Figura 60 - Regio caudal do oviduto, com aspecto distendido, de um exemplar de
Spilotes pullatus com folculos pr-ovulatrios nos ovrios......................

79
Figura 61 - Oviduto mdio de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil, com
glndulas hipertrofiadas.............................................................................

80
Figura 62 - Oviduto mdio de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil, com
glndulas hipotrofiadas..............................................................................

80
Figura 63 - Dimetro da glndula da casca de Spilotes pullatus da regio sudeste do
Brasil, agrupados por fase vitelognica......................................................

80
Figura 64 - Glndulas submucosa na tuda do oviduto de Spilotes pullatus.................. 81
Figura 65 - Tbulos ciliados no infundbulo do oviduto de Spilotes pullatus.............. 81
Figura 66 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do
comprimento do rim feminino de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro.

82
Figura 67 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura
cranial do rim de fmeas de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro..........

83
Figura 68 - Distribuio ao longo dos anos dos valores do dimetro do tbulo
contorcido distal feminino de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro.......

84
Figura 69 - Distribuio ao longo dos anos dos valores da espessura do epitlio do
tbulo contorcido distal feminino de Spilotes pullatus do sudeste
brasileiro.....................................................................................................

84
Figura 70 - Relao entre comprimento rostro-cloacal da fmea e nmero de ovos
ou folculos pr-ovulatrios em Spilotes pullatus......................................

86
Figura 71 - Relao entre comprimento rostro-cloacal da fmea e comprimento de
ovos ou folculos pr-ovulatrios em Spilotes pullatus.............................

86
Figura 72 - Folculo secundrio de Spilotes pullatus apresentando um formato
esferide....................................................................................................

87
Figura 73 - Ovos de Spilotes pullatus com formato esferide...................................... 87

19

Figura 74 - Sistema reprodutor feminino de Spilotes pullatus com folculos pr-
ovulatrios nos ovrios distribudos em linha com leve inclinao e de
forma simtrica, quatro em cada ovrio.....................................................

88
Figura 75 - Disposio dos folculos pr-ovulatrios de Spilotes pullatus
distribudos em linha com leve inclinao em relao ao plano
horizontal do animal dentro da cavidade celomtica.................................

88
Figura 76 - Bolsas de Spilotes pullatus envolvendo o intestino dentro da cavidade
celomtica...................................................................................................

89
Figura 77 - Bolsas de Spilotes pullatus na cavidade celomtica, intestino
arrebatido....................................................................................................

89
Figura 78 - Bolsas de Spilotes pullatus na cavidade celomtica, intestino arrebatido
e bolsas esticadas para visualizao da face medial...................................

89
Figura 79 - Bolsas de Spilotes pullatus. da regio sudeste do Brasil............................ 90
Figura 80 - Ritual de combate entre dois Spilotes pullatus machos na copa de uma
rvore durante a primavera.........................................................................

91
Figura 81 - Insero do hemipnis do macho na bolsa da fmea durante a cpula de
Spilotes pullatus.........................................................................................

93
Figura 82 - Poro caudal do oviduto de Spilotes pullatus com presena de
espermatozides no lmen da bolsa...........................................................

93
Figura 83 - Smen de Spilotes pullatus na cloaca de uma fmea da espcie que
apresentava folculos pr-ovulatrios nos ovrios.....................................

95
Figura 84 - Smen de Spilotes pullatus e esfregao do smen encontrado na cloaca
de uma fmea da espcie que apresentava folculos pr-ovulatrios nos
ovrios........................................................................................................

95
Figura 85 - Cpula ex situ de Spilotes pullatus............................................................. 97
Figura 86 - Cpula ex situ de Spilotes pullatus no hemisfrio norte. Note o corpo da
fmea distendido na regio cloacal em razo da penetrao do
hemipnis intumescido...............................................................................

98
Figura 87 - Prenhez ex situ no hemisfrio norte de Spilotes pullatus. Note o corpo
da fmea distendido no tero caudal (em primeiro plano na fotografia)
em razo dos ovos no oviduto....................................................................

98
Figura 88 - Primeira postura durante a estao reprodutiva ex situ de uma fmea
Spilotes pullatus no hemisfrio norte.........................................................

99
Figura 89 - Segunda postura durante a estao reprodutiva ex situ de uma fmea
Spilotes pullatus no hemisfrio norte.........................................................

99

20

Figura 90 - Incubao de ovos de duas ninhadas da mesma fmea de Spilotes
pullatus.......................................................................................................

99
Figura 91 - Ecloso de ovos de Spilotes....................................................................... 99
Figura 92 - Filhote de Spilotes pullatus saindo do ovo................................................. 99
Figura 93 - Filhotes de Spilotes pullatus recm nascidos em cativeiro no hemisfrio
norte............................................................................................................

99
Figura 94 - Distribuio ao longo do ano de Spilotes pullatus capturadas na regio
sudeste do Brasil, mostrando a atividade padro da espcie......................

100
Figura 95 - Proporo de machos de Spilotes pullatus com contedo alimentar no
sistema digestrio capturados na regio sudeste do Brasil ao longo das
estaes.......................................................................................................

101
Figura 96 - Proporo de fmeas de Spilotes pullatus com contedo alimentar no
sistema digestrio capturados na regio sudeste do Brasil ao longo das
estaes.......................................................................................................

101
Figura 97 - Esquematizao do ciclo reprodutivo de Spilotes pullatus ao longo das
estaes.......................................................................................................

103

LISTA DE QUADROS

Quadro 1 - Relao entre CRC, aspecto do ducto deferente e situao sexual com
base em analise histolgica de Spilotes pullatus machos.........................

70
Quadro 2 - Ritual de combate e cpula observados In situ em Spilotes pullatus.......

92
Quadro 3 - Perodo de cpula de Spilotes pullatus estimada a partir de analise de
fmeas dissecadas.....................................................................................

94
Quadro 4 - Estao de postura, incubao e ecloso dos ovos de Spilotes pullatus
capturadas prenhes na regio sudeste do Brasil.......................................

96
Quadro 5 - Estao de cpula, postura e incubao dos ovos ex situ de Spilotes
pullatus......................................................................................................

97
Quadro 6 -

Possvel classificao de ciclos reprodutivos de serpentes em relao
ao estro das fmeas...................................................................................

118

21

LISTA DE TABELAS

Tabela 1 - Tamanho do eixo maior do maior folculo secundrio/ovo de fmeas
Spilotes pullatus em estado avanado do ciclo.........................................

85

22

LISTA DE ABREVIATURAS

abt abertura da cloaca
bap bulbo apical
blt bulbo lateral
bs bolsa (vagina)
bsld bolsa direita
bsle bolsa esquerda
CC comprimento caudal
ci clula intersticial de Leydig
cil clio
clc clice
cm clula miide
cmc camada muscular circular
cml camada muscular longitudinal
co cicatriz de ovulao
CRC comprimento rostro-cloacal
cs clula de sertoli
csc crista do sulco
dct ducto da glndula
dd ducto deferente
ddd ducto deferente direito
dde ducto deferente esquerdo
def ductos eferentes
ep epitlio
epd epiddimo
eps epitlio seminfero
esp espinhos
f folculo primrio
f folculo secundrio
gld glndula
Glm glomrulo
gsb glndula submucosa
if infundbulo
in intestino
it interstcio testicular
jnb juno das bolsas
L lmen
lbd lobo dorsal
lbv lobo ventral
mm milmetro
mr massa renal

23

mt massa testicular
ov oviduto
rm rim
rmd rim direito
rme rim esquerdo
sc espermatcito
sce sulco espermtico
sd espermtide
sg espermatognia
sptz espermatozide
SSD sexual size dimorphism
SSR segmento sexual renal
ta tecido adiposo
tb tuba
tcd tbulo contorcido distal
tcp tbulo contorcido proximal
td testculo direito
te testculo esquerdo
ts tbulo seminfero
ut tero
uta tero aglandular
utg tero glandular
vs vaso sanguneo
m micrometro

24

SUMRIO

1 INTRODUO.................................................................................................................... 27
2 REVISO DE LITERATURA............................................................................................ 32
2.1 MACHOS............................................................................................................................ 32
2.2 FMEAS............................................................................................................................. 34
2.3 CPULA............................................................................................................................. 36
2.4 PADRO DE ATIVIDADE............................................................................................... 36
2.5 CLASSIFICAO DO CICLO.......................................................................................... 37
3 MATERIAIS E MTODOS................................................................................................ 40
3.1 PADRO DE ATIVIDADE............................................................................................... 40
3.1.1 Atividade alimentar........................................................................................................ 40
3.2 AMOSTRA PARA CICLO REPRODUTIVO................................................................... 41
3.2.1 Dados macroscpicos de ambos os sexos...................................................................... 41
3.2.2 Dados macroscpicos dos machos................................................................................. 42
3.2.3 Dados macroscpicos das fmeas.................................................................................. 44
3.2.4 Coleta de tecidos para anlises histolgicas................................................................. 45
3.2.5 Dados para anlises histolgicas................................................................................... 48
3.3 ESTAO DE ACASALAMENTO, COMBATE ENTRE MACHOS E OVIPOSTURA 50
3.4 MATURIDADE SEXUAL.................................................................................................. 51
3.5 FECUNDIDADE................................................................................................................. 51
3.6 ESTAES ANUAIS......................................................................................................... 51
3.7 MORFOLOGIA DOS HEMIPNES.................................................................................. 52
3.8 ANLISES ESTATSTICAS............................................................................................. 52
3.8.1 Dimorfismo sexual.......................................................................................................... 53
3.8.2. Padro de atividade....................................................................................................... 53
3.8.3. Dados reprodutivos........................................................................................................ 53
4 RESULTADOS..................................................................................................................... 56
4.1 SISTEMA REPRODUTOR MASCULINO........................................................................ 56
4.2 ANLISE MACROSCPICA DOS TESTCULOS.......................................................... 58
4.3 ANLISE MICROSCPICA DOS TESTCULOS........................................................... 59

25

4.4 ANLISE MACROSCPICA DO DUCTO DEFERENTE.............................................. 63
4.5 ANLISE MICROSCPICA DO DUCTO DEFERENTE................................................ 64
4.6 ANLISE MACROSCPICA DO RIM MASCULINO................................................... 64
4.7 ANLISE MICROSCPICA DO RIM MASCULINO..................................................... 65
4.8 ANOMALIA EM RGOS REPRODUTIVOS E ACESSRIOS................................... 67
4.9 MATURIDADE SEXUAL DOS MACHOS...................................................................... 69
4.10 MORFOLOGIA DOS HEMIPNES................................................................................ 71
4.11 SISTEMA REPRODUTOR FEMININO.......................................................................... 75
4.12 ANLISE MACROSCPICA DOS OVRIOS.............................................................. 77
4.13 HIPERTROFIA DAS GLNDULAS DA CASCA.......................................................... 79
4.14 GLNDULAS SUBMUCOSA DA TUBA DO OVIDUTO............................................ 81
4.15 TBULOS DO INFUNDBULO...................................................................................... 81
4.16 ANLISE MACROSCPICA DO RIM FEMININO..................................................... 82
4.17 ANLISE MICROSCPICA DO RIM FEMININO....................................................... 83
4.18 MATURIDADE SEXUAL DAS FMEAS...................................................................... 85
4.19 FECUNDIDADE............................................................................................................... 86
4.20 MORFOLOGIA DAS BOLSAS....................................................................................... 88
4.21 INTERAES SOCIAIS.................................................................................................. 91
4.21.1 Ritual de combate e cpula In situ.............................................................................. 91
4.21.2 Incubao e ecloso dos ovos In situ........................................................................... 96
4.21.3 Cpula, incubao e ecloso dos ovos ex situ............................................................. 96
4.22 PADRO DE ATIVIDADE............................................................................................. 100
4.22.1 Padro de atividade alimentar.................................................................................... 100
4.23 DIMORFISMO SEXUAL................................................................................................ 102
4.24 CICLO REPRODUTIVO.................................................................................................. 103
5 DISCUSSO......................................................................................................................... 105
6 CONCLUSO....................................................................................................................... 124
REFERNCIAS....................................................................................................................... 126

26

No Incio, Eurnome, a Deusa de Todas as coisas, ergueu-se
nua do Caos, mas, no encontrando nenhum lugar firme onde
pudesse descansar os ps, separou o mar do cu. Assim,
comeou a saltar e danar por sobre as ondas que criara at
que encontrou do lado norte do mundo, um vento forte.
Eurnome gostou do vento. Achou o seu frescor agradvel e
decidiu comear por ele a obra da criao. Apanhou, ento, o
fludo companheiro e, com as mos enrgicas esfregou-o at
que se tornasse slido. O vento se transformou em uma
serpente, Ofio, que se estendeu aos ps de sua criadora. Com
frio, Eurnome voltou a danar para se aquecer cada vez mais
frentica. Ao v-la danando Ofon, ficou excitada, enrolou-se
naqueles membros divInos com a Inteno de copular com ela
para gerar todas as coisas que hoje existem. Eurnome, ento,
assumiu a forma de uma pomba, sentou-se sobre as guas do
mar e ps um ovo, o Ovo Universal, e permaneceu chocando-o
por cima das ondas durante algum tempo. Ao seu comando,
Ofon enrolou-se sete vezes em torno desse ovo, completando a
Incubao. Quando a casca rompeu, para fora se arremessaram
todas as coisas que existem, seus filhos: saram o sol, a lua, os
planetas, os outros astros, a Terra, com suas montanhas e rios,
suas rvores e plantas e todas as criaturas vivas.
(Mito grego da criao Pelasgo)
27

Figura 1 - Caninana (Spilotes pullatus)
1 INTRODUO

O gnero Spilotes (Wagler, 1830) pertence famlia Colubridae e composto de
apenas uma espcie, Spilotes pullatus, que no Brasil conhecida popularmente por caninana
(SAVAGE, 2002), nome que em tupi significa que tem a cabea pequena e que bem
caracteriza o tamanho minsculo da cabea do animal em relao espessura do pescoo,
quando intumescido (AMARAL, 1929) (Figura 1).

Essa serpente possui ampla distribuio geogrfica, habita reas da Amrica Central e
Amrica do Sul, podendo ser encontrada desde Tamaulipas, no Mxico, at o Paraguai,
ocorrendo tambm no extremo nordeste da Argentina (SAVAGE, 2002) (Figura 2).

Foto: Diego Muniz, 2012
28

So reconhecidas cinco subspcies, dessas, trs ocorrem no Brasil: Spilotes pullatus
pullatus (Linnaeus, 1758), Spilotes pullatus anomalepis (Bocourt, 1888) e Spilotes pullatus
maculatus (Amaral, 1929) (PETERS; OREJAS-MIRANDA, 1970).
A caninana um dos maiores colubrdeos encontrados na Amrica do Sul, podendo
atingir mais de 240 centmetros (cm) de comprimento. A colorao predominantemente
negra na cabea e no dorso, com faixas e manchas amarelas. J o ventre, amarelado com
manchas pretas. (AMARAL, 1929; BOOS, 2001; PONTES; ROCHA, 2008). A cabea
pouco distinta do pescoo, exceto quando o pescoo encontra-se inflado (AMARAL, 1929).
Seus olhos so relativamente grandes, negros e com pupilas redondas. A dentio glifa. A
escama cloacal inteira ou dividida e as subcaudais so duplas (PONTES; ROCHA, 2008).
Essa serpente possui hbitos diurno, terrestre e arbreo (VANZOLINI et al., 1980;
SAZINA; HADDAD, 1992; MARQUES, 1998; BOOS, 2001; MARQUES; SAZIMA, 2004;
PONTES; ROCHA 2008).
um colubrdeo que caa sua presa de forma ativa em abrigos ou ninhos, tanto no
cho como em copas de rvores, e em perodos de repouso utiliza apenas o substrato arbreo
(MARQUES, 1998). Em relao presa, a dieta bem variada, alimentam-se de ovos, aves,
roedores e morcegos (MARTINS; OLIVEIRA, 1998; BOOS, 2001), sendo as presas
Foto: Diego Muniz, 2011 (criada com imagem do Google Earth,
adaptado com dados de literatura)
Figura 2 - Distribuio geogrfica de Spilotes pullatus. A
mancha vermelha no mapa indica os locais de ocorrncia da
espcie no globo
29

Figura 3 - Trs roedores compondo o contedo estomacal de um exemplar
preservado no Museu Nacional do Rio de Janeiro
basicamente endotrmicas, diferente da maioria das espcies neotropicais da subfamlia
Colubrinae, que geralmente se alimentam de anfbios anuros e/ou lagartos (MARTINS;
OLIVEIRA, 1998) (Figura 3). A presa contida por constrio ou pressionada contra um
objeto para segura-l no lugar, depois engolida rapidamente, muitas vezes, ainda viva
(BACON, 1978).

Quando se sente ameaada a caninana infla o pescoo e vibra a cauda e, quando
capturada, pode morder (PONTES; ROCHA, 2008). De todas as serpentes neotropicais, a
representante desse gnero a que se mostra com maior capacidade de expanso do pescoo.
Essa capacidade de inflar o pescoo se deve a grande extenso e elasticidade da membrana
que liga as extremidades dos anis traqueais, que quando recebem o ar vindo dos pulmes sob
presso na glote fechada, distendida, e junto com ela os tecidos perifricos e tegumentos do
pescoo resultando no aspecto caracterstico da caninana quando se encontra ameaada
(AMARAL, 1929) (Figura 4).

30

A Spilotes pullatus uma serpente que pelo grande porte, beleza e peculiaridades,
desperta ateno de muitos admiradores de rpteis, possui ampla distribuio geogrfica, e
ainda assim, no se tem dado muita ateno a todo o processo reprodutivo dessa espcie.
O conhecimento das estratgias reprodutivas de uma espcie o passo inicial para o
melhoramento gentico que est intimamente ligado a economia, tanto de espcies de
importncia pecuria como de animais de companhia, sejam esses domsticos ou exticos. O
conhecimento da fisiologia reprodutiva ainda, a informao bsica para a preservao de
uma espcie de baixa densidade populacional bem como para o controle populacional de
espcies de alta densidade, tanto em seu habitat como em populaes de cativeiros, seja em
zoolgicos, criadouros conservacionistas ou comerciais.
A caninana por ser uma serpente de grande porte e possuir coloraes vivas, com um
fascinante contraste entre as cores amarela e preta, comumente encontrada como animal de
estimao. A maioria dos rpteis que abastecem esse comrcio so de duas origens: o trfico
de animais silvestres e de criatrios sem nenhum acompanhamento e conhecimento
reprodutivo, visto que virtualmente desconhecido o ciclo reprodutivo dessa espcie.
O conhecimento e a caracterizao da biologia reprodutiva dessa espcie, com anlises
histolgicas e morfolgicas do sistema reprodutor de machos e fmeas, em diferentes pocas
do ano, junto com dados de literatura, e dados de animais mantidos em cativeiro, permitiram a
compreenso do ciclo reprodutivo anual, e comportamentos reprodutivos de machos e fmeas
de caninanas, alcanando o objetivo de elucidar os principais eventos reprodutivos da espcie
Spilotes pullatus.
Foto: Daniel Velho, 2007
Figura 4 - Caninana com regio do pescoo inflada. Comportamento tpico
mostrado em uma situao de ameaa
31

A serpente era o animal mais esperto que o SENHOR Deus
havia feito. Ela perguntou mulher: verdade que Deus
mandou que vocs no comessem as frutas de nenhuma rvore
do jardim?
A mulher respondeu: Podemos comer as frutas de qualquer
rvore, menos a fruta da rvore que fica no meio do jardim.
Deus nos disse que no devemos comer dessa fruta, nem tocar
nela. Se fizermos isso, morreremos.
Mas a cobra afirmou: Vocs no morrero coisa nenhuma!
Deus disse isso porque sabe que, quando vocs comerem a
fruta dessa rvore, os seus olhos se abriro, e vocs sero
como Deus, conhecendo o bem e o mal.
A mulher viu que a rvore era bonita e que as suas frutas eram
boas de se comer. E ela pensou como seria bom ter
entendimento. A apanhou uma fruta e comeu; e deu ao seu
marido, e ele tambm comeu.
Nesse momento os olhos dos dois se abriram, e eles
perceberam que estavam nus. Ento costuraram umas folhas
de figueira para usar como tangas.
Naquele dia, quando soprava o vento suave da tarde, o homem
e a sua mulher ouviram a voz do SENHOR Deus, que estava
passeando pelo jardim. Ento se esconderam dele, no meio das
rvores.
Mas o SENHOR Deus chamou o homem e perguntou: Onde
que voc est?
O homem respondeu: Eu ouvi a tua voz, quando estavas
passeando pelo jardim, e fiquei com medo porque estava nu.
Por isso me escondi.
A Deus perguntou: E quem foi que lhe disse que voc estava
nu? Por acaso voc comeu a fruta da rvore que eu o proibi de
comer?
(Gnesis 3)

32

2 REVISO DE LITERATURA

2.1 MACHOS

O sistema reprodutor masculino dos Squamata formado por um par de testculos, que
esto alojados na cavidade celomtica, o direito encontra-se cranial ao esquerdo dentro da
cavidade. Cada testculo formado por tbulos seminferos, clulas intersticiais e vasos
sanguneos, que esto envoltos por uma bainha de tecido conjuntivo (DeNARDO, 2006). Os
tbulos seminferos se ligam a rede testis, que transporta os espermatozides para os ductos
eferentes, que por sua vez, se liga ao epiddimo, este, d vazo para o ducto deferente, que por
fim, se conecta com a cloaca (TRAUTH; SEVER, 2011). As serpentes possuem um par de
rgos copulatrio chamados de hemipnis. Esses rgos so bolsas membranosas, tubulares,
que se localizam na base da cauda e se comunicam com cloaca (DOWLING; SAVAGE,
1960).
Em serpentes, o perodo do ciclo reprodutivo masculino normalmente refletido pelo
aumento do tamanho testicular, devido atividade espermatognica na fase ativa dos
testculos (SCHUETT et al., 2002; KROHMER et al., 2004). Poucos estudos, com espcies de
serpentes tropicais, tm avaliado o ciclo reprodutivo masculino por meio de estudos
histolgicos, e para um conhecimento adequado do ciclo dos machos, necessria uma srie
de investigaes do sistema urogenital, com anlise histolgica dos testculos sendo
primordial (MATHIES, 2011).
Durante a estao de acasalamento observa-se nos rins a hipertrofia do segmento
sexual renal (SSR) (ALDRIDGE et al., 2009), uma poro especializada do nfron, localizada
na regio terminal ou pr-terminal (tbulo contorcido distal) e presente em todos os machos
de Squamata (FOX, 1977) (Figura 5). Embora essa estrutura esteja presente nos machos, ela
j foi encontrada desenvolvida em fmeas, em pelo menos uma espcie (ScIncella laterale)
(SEVER; HOPKINS, 2005). Sabe-se que essa poro do nfron andrgeno dependente com
desenvolvimento ontogentico (KROHMER et al., 2004) e com hipertrofia sazonal (FOX,
1977). Apesar da presena dessa estrutura nos rins de todos os Squamata, a funo do
segmento sexual renal permanece ainda desconhecida (ALDRIDGE et al., 2011).

33

Os ductos deferentes dos Squamata o local onde ocorre a estocagem de esperma nos
machos (SHINE, 1977a; SAINT-GIRONS, 1982; CLESSON et al., 2002; ALMEIDA-
SANTOS et al., 2004), e em viperdeos, tem se demonstrado tambm, uma atividade secretora
do ducto deferente (SIEGEL et al., 2009). Uma pesquisa recente sugere que tambm ocorra
uma atividade secretora por parte dos ductos dos colubrdeos (TRAUTH; SEVER, 2011).
Outros estudos, realizados com o smen coletado dos ductos deferentes, revelam a existncia
de atividade de peptidases com variaes sazonais, sugerindo que as aes modulatrias
dessas peptidases, nos peptdeos susceptveis, so integradas aos eventos do ciclo reprodutivo
do macho, e tambm na viabilidade dos espermatozides (MARINHO et al., 2008;
MARINHO et al., 2009). O ducto deferente uma estrutura com funes bem alm do
transporte de espermatozides e, no entanto, um componente do sistema reprodutor
masculino pouco avaliado histologicamente em pesquisas de biologia reprodutiva.
Em algumas espcies de serpentes, os machos, alm de apresentarem mudanas
histolgicas durante a poca reprodutiva, apresentam tambm peculiaridades
Fonte: Sever et al. (2002). Como descrito originalmente
por Gampert (1866), copiado por Regaud e Policard
(1903) e redesenhado por T. J. Ryan. Terminologia segue Bishop
(1959)

Figura 5 - Nfron de macho de serpente
34

comportamentais nesse perodo, o caso do ritual de combate entre machos. O ritual de
combate envolve uma interao entre dois machos, que aparentemente uma competio por
dominncia (CARPENTER, 1977). Em geral o ritual consiste em contato corporal entre os
machos, eles exercem presso, empurrando ou entrelaando, com o objetivo de empurrar a
cabea do oponente para baixo, o que parece ser tentativas de dominar o adversrio
fisicamente (CARPENTER, 1977). Colubrdeos, durante os rituais de combate, tendem a
assumir uma postura horizontal com as regies do tronco e da cauda entrelaadas, com
alguma elevao oblqua ou pouco vertical da cabea e pescoo (CARPENTER, 1977). O
combate, quando observado, normalmente ocorre na poca de acasalamento da espcie.
Durante a batalha, experincia agonstica e tamanho do corpo do macho so fatores
importantes para a dominncia e o sucesso no acasalamento. (SCHUETT, 1997).
A corte e o acasalamento um comportamento envolvendo aes realizadas pelo
macho e pela fmea. O macho que executa a maioria das aes. Ele alinha-se a fmea
colocando a cloaca junto dela. Em colubrdeos observa-se o macho em monta dorsal na
fmea com alinhamento paralelo (Figura 6). O macho realiza algumas ondulaes tateando
com o queixo o dorso da fmea (CARPENTER, 1977).

2.2 FMEAS

O sistema reprodutivo feminino formado por dois ovidutos pareados, sendo o
oviduto direito mais longo do que o esquerdo (PERKINS; PALMER, 1996). Os ovidutos
podem ser divididos em vrias regies por meio da funo e estrutura dessas regies
Desenho: Diego Muniz, 2011. Baseado na ilustrao de CARPENTER, 1977
Figura 6 - Corte e cpula de colubrdeo. Macho em monta dorsal tateando o dorso da fmea
com a parte ventral do queixo e com a cloaca junto da fmea
35

(GIRLING, 2002). A terminologia utilizada ampla, e basicamente essas regies podem ser
denominadas de: infundbulo, tuba, istmo, tero e vagina ou bolsa (URIBE et al., 1998;
GIRLING, 2002; SIEGEL et al., 2011a; b). O tero pode ainda ser dividido em duas pores,
a poro glandular, onde esto presentes as glndulas endometriais, e a poro aglandular,
regio caudal do oviduto, onde no se encontram glndulas. A tuba pode ser caracterizada
como infundbulo (SIEGEL et al., 2011a).
Os ovidutos funcionam como um canal para os ovos, entre a ovulao e a ovipostura,
o local onde ocorre a fecundao, formao da casca dos ovos, e em algumas espcies, local
de estocagem de esperma (GIRLING, 2002). A regio do oviduto mdio (tero glandular) a
responsvel pela formao da casca do ovo, que formada, em parte, por fibras proticas
secretadas por essas glndulas (PALMER et al., 1993). Essas glndulas se desenvolvem
durante o perodo de crescimento folicular e vitelognese, antes da ovulao (GIRLING,
2002).
O ciclo reprodutivo das fmeas composto de vrios eventos que muitas das vezes
ocorrem em perodos distintos. Os principais eventos so a vitelognese, o estro, a ovulao e
a oviposio.
A vitelognese o nome que se d transformao dos ocitos em folculos, nos
rpteis. A vitelognese pode ser classificada, de acordo com a fase, em primria, a fase de
quiescncia folicular, onde o crescimento dos folculos lento, ou em secundria, onde h um
rpido desenvolvimento folicular, devido ao depsito de vitelo nos folculos (ALDRIDGE,
1979). Em algumas espcies a cpula parece ser um estmulo para que a vitelognese se
inicie, os folculos primrios comecem a receber o vitelo para se transformarem em
secundrio (BLANCHARD; BLANCHARD, 1941; BONA-GALLO; LICHT, 1983). Esse
vitelo depositado nos folculos durante a vitelognese o que garante o desenvolvimento do
embrio, e esse depsito de vitelo (vitelognese secundria) pode ocorrer em apenas um
perodo restrito do ano ou ao longo de todo o ano (PIZZATTO et al., 2007).
A maioria, seno todos os colubrdeos de regies temperadas produzem apenas uma
ninhada por ano e alguns podem ter um intervalo de um ano, ou at mais, entre os ciclos
reprodutivos (ALDRIDGE et al., 2009). A vitelognese na maioria das serpentes da mata
atlntica, da regio sudeste do Brasil, restrita a estao das chuvas. Na regio sudeste do
Brasil existe espcies com ocorrncia de reproduo sazonal assim como serpentes com
reproduo contnua (MARQUES, 1998).
A fecundidade das serpentes analisada atravs da massa, comprimento ou idade das
fmeas, relacionando o tamanho da ninhada, o tamanho dos filhotes, ou massa relativa da
36

ninhada (SEIGEL; FORD, 1987). A fecundidade de uma espcie pode ser avaliada por meio
de estudos de campo, observaes em cativeiro, ou por dissecaes das fmeas preservadas
em colees cientficas (PIZZATTO et al., 2007). A fecundidade pode variar de acordo com
os hbitos e modos reprodutivos das espcies. Em espcies arborcolas a fecundidade parece
ser menor do que em espcies terrestres, e a fecundidade em espcies vivparas parece ser
maior do que a de espcies ovparas (MARQUES, 1998).

2.3 CPULA

Serpentes so animais que vivem solitrios, e durante a poca de acasalamento os
machos localizam as fmeas, que se encontram dispersas pelo ambiente (PIZZATTO et al.,
2007), atravs de trilhas de feromnios deixadas por elas (GUILLINGHAM, 1987). A estao
de acasalamento representa o perodo em que as fmeas normalmente esto em estro.
(ALDRIDGE et al., 2009). O papel dos hormnios ovarianos no controle do comportamento
sexual pode ser diferente em fmeas de espcies em que o acasalamento ocorre quando os
folculos esto vitelognicos, das de fmeas em que a cpula ocorre quando os folculos esto
pr-vitelognicos (MENDONA; CREWS, 2001). O controle do estro, nas diferentes
estaes do ano, no tem sido pesquisado (ALDRIDGE, et al., 2009).
Em algumas espcies o perodo de acasalamento pode ser influenciado pela
temperatura. O perodo de cpula, da primavera, em Thamnophis sirtalis parietalis
controlado pela temperatura. Ao expor os animais em uma temperatura baixa, de
aproximadamente 5C, por pelo menos quatro meses, e em seguida transferir para uma
temperatura de 25C, os animais, ambos machos e fmeas, apresentam comportamentos
reprodutivos (acasalamento) (ALEKSIUK; GREGORY, 1974).

2.4 PADRO DE ATIVIDADE

Atividades como combate, corte, cpula e outras atividades (e. g., a caa), em algumas
espcies, so mais freqentes em determinados meses. Segundo Marques et al. (2001) a
37

atividade das serpentes no decorrer do dia o principal fator que provoca diferena na
abundncia de coleta desses animais ao longo do ano (MARQUES et al., 2001).
O padro de atividade de serpentes que habitam reas temperadas intimamente
influenciado pelas variaes climticas, sendo a temperatura o principal fator (GREGORY,
1984). Em regies tropicais a temperatura tem uma ligao menor com a atividade das
serpentes quando comparadas s serpentes de reas temperadas. Nesses animais de regies
tropicais a umidade, que concentrada em certos perodos do ano, juntamente com a
disponibilidade de alimentos e a poca de reproduo, influencia a atividade desses rpteis
(MARQUES et al., 2001).
comum picos de atividade no final da estao mida e incio da estao seca em
serpentes do cerrado, esse pico pode estar relacionado poca em que ocorre o acasalamento
(OLIVEIRA, 2001). A reproduo em Sibynomorphus mikanii e S. neuwiedii o fator
principal que influencia o pico de atividade das serpentes dessas espcies (ROJAS, 2009).
A caninana possui padres de atividade menores nos perodos de poucas chuvas e
menor temperatura, sendo mais frequentemente avistada na estao das chuvas (MARQUES
et al., 2001).

2.5 CLASSIFICAO DO CICLO

A reproduo dos rpteis em geral influenciada tanto por fatores endgenos como
por fatores exgenos (FITCH, 1982). As espcies de serpentes neotropicais possuem uma
enorme variedade de estratgias reprodutivas (SEIGEL; FORD, 1987). Para facilitar o
entendimento do ciclo das diferentes espcies, tem se proposto classificar as espcies de
acordo com o ciclo reprodutivo. Varias classificaes so sugeridas (VOLSE, 1944;
CREWS, 1984; CREWS, 1999; TSAI; TU, 2000). Em uma classificao mais recente, a
gametognese do indivduo pode ser classificada quanto ao perodo de ocorrncia, em: cclica
descontnua, onde existe um perodo de quiescncia reprodutiva, das gnadas ou rgos
acessrios, durante o ano; cclica contnua, no existe um perodo de quiescncia reprodutiva,
apenas uma reduo da atividade reprodutiva, das gnadas ou rgos acessrios, em um
determinado perodo do ano, ou; acclica, onde a atividade reprodutiva das gnadas e rgos
reprodutivos contnua ao longo de todo o ano. De acordo com a ciclicidade da
gametognese dos indivduos, a populao pode ser classificada em: sazonal, quando a
38

gametognese dos indivduos de uma populao sincronizada, ou seja, todos os animais
produzem gametas durante o mesmo perodo restrito do ano, ou; assazonal onde no existe
uma sincronia na produo de gameta da populao, cada indivduo realiza a gametognese
em um perodo restrito do ano, mas esse perodo no o mesmo para todos os indivduos, ou
ainda os animais de gametognese acclica, que todos os indivduos produziram gametas o
ano todo (MATHIES, 2011).
Muitas espcies de serpentes possuem o perodo de cpula (estro) distinto do perodo
da fecundao, sendo assim, fmeas que esto sem copular com machos em um perodo at
mesmo de meses, podem apresentar-se prenhas. Isso s possvel porque elas armazenam os
espermatozides depositados pelos machos, na poca do acasalamento, em regies especficas
do sistema reprodutor at o momento da ovulao, quando ento, ocorrer fecundao
(SCHUETT, 1992). Vrios machos de serpentes podem tambm acasalar com as fmeas e
mesmo estando com os testculos inativos (em fase em que no h a formao de gametas)
serem capazes de fertilizar sua parceira. Isso ocorre quando o macho possui a fase de
atividade testicular (testculos produzindo espermatozides) em um perodo distinto a fase de
estro das fmeas (poca do ciclo em que as fmeas esto receptivas aos machos). Nesse caso,
os machos produzem seus gametas e estes so armazenados em vias genitais, como por
exemplo, os ductos deferentes (CLESSON et al., 2002). Quanto a poca em que ocorre a
gametognese Aldridge et al. (2009), propem a classificao em: pr-ovulatria, quando a
gametognese ocorre imediatamente antes do perodo da ovulao, ou; ps-ovulatria, nesse
caso, a gametognese ocorre no perodo aps a ovulao. Esses autores sugeriram essa
classificao por concordarem com, Tsai e Tu (2000), que apontam que quando se usa o
termo -nupcial, como proposto por Volse (1944), se faz uma ligao do perodo da
gametognese com a cpula, e algumas espcies possuem duas pocas de cpula, tornando o
termo nupcial complicado. Aldridge et al. (2009), ento sugeriram o termo pr- e ps-
ovulatrio, por ser um termo que no relaciona o perodo da gametognese com a cpula, nem
com a vitelognese ou a ovulao, sendo, portanto, um termo mais correto.

39

Deus disse a Moiss: Faa uma cobra de metal e pregue
num poste. Quem for mordido dever olhar para ela e assim
ficar curado.
Ento Moiss fez uma cobra de bronze e pregou num poste.
Quando algum era mordido por uma cobra, olhava para a
cobra de bronze e ficava curado.
(Nmeros 21).

40

3 MATERIAIS E MTODOS


O padro de atividade sazonal ao longo do ano foi determinado atravs do
levantamento de dados de entrada de Spilotes oriundas da regio sudeste do Brasil doadas na
recepo de serpentes do Laboratrio de Herpetologia do Instituto Butantan correspondente a
um perodo de 15 anos (1995-2009). Essas informaes foram obtidas dos livros tombos do
instituto. Obteve-se uma amostra de 284 indivduos. O objetivo desse levantamento foi
verificar se o padro de atividade anual, tanto de adultos quanto de espcimes imaturos,
mantm alguma relao com a reproduo. Os registros continham informaes que permitiu
a identificao de indivduos adultos, 269 exemplares, e imaturos, 15 animais, no entanto a
falta de sexagem dos animais impediu a relao entre machos e fmeas. A essa amostra foram
adicionados dados de oito animais imaturos observados nas colees visitadas, totalizando
uma amostra com 292 indivduos.
Por meio dessas informaes foi possvel desenvolver um histograma visando mostrar
a diferena de atividade dessa espcie ao longo do ano.

3.1.1 Atividade alimentar

Para determinar a influncia do forrageio no padro de atividade da espcie, foram
utilizado dados referentes ao contedo estomacal e/ou intestinal de uma amostra de 146
indivduos tombados na coleo do Instituto Butantan. A amostra formada por 103 Spilotes
do gnero masculino e 43 do gnero feminino, compondo um total de 146 indviduos dos
quais 42 apresentam contedo no sistema digestrio.

41

3.2 AMOSTRA PARA CICLO REPRODUTIVO

A pesquisa foi realizada com base em anlises de espcimes fixados e preservados
(Figura 7) nas seguintes colees herpetolgicas do Brasil: Museu de Histria Natural Capo
da Imbuia (MHNCI); Museu Nacional, Universidade Federal do Rio de Janeiro (MNRJ);
Museu de Cincias Naturais da Pontifcia Universidade Catlica de Minas Gerais (PUC-MG);
Museu de Zoologia Joo Moojen, Universidade Federal de Viosa (MZUFV); Museu de
Zoologia da Universidade Estadual de Campinas (ZUEC); Museu de Cincias e Tecnologia
da Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul (MCP); Fundao Nacional
Ezequiel Dias (FUNED); Instituto Butantan (IB) e; Laboratrio de Anatomia Animal da
Faculdade de Medicina Veterinria do Centro Universitrio Serra dos rgos (UNIFESO).

Foram analisados exemplares de S. pullatus oriundos da regio sudeste
independentemente da subespcie, pois de acordo com Savage (2002), a grande variao de
colorao individual em S. pullatus, torna duvidosa a diviso em raas geogrficas nesse
txon.

3.2.1 Dados macroscpicos de ambos os sexos

Medidas de comprimento rostro-cloacal (CRC) e comprimento caudal (CC) foram
aferidos em todos os espcimes (ambos machos e fmeas) utilizando fita mtrica com o
Figura 7 - Exemplar de Spilotes pullatus de coleo zoolgica
42

Legenda: Vista ventral. Intestino
(in); testculo (te) e; tecido adiposo
(ta). Foto: Diego Muniz, 2012
Figura 8 - Mensurao do eixo
maior (a) do testculo de Spilotes
menor (b) do testculo de Spilotes
menor (c) do testculo de Spilotes
auxlio de barbante, o que facilita a medida de animais fixados que tenham grande
comprimento rostro-cloacal. Essas medidas so importantes para identificar se h dimorfismo
sexual no tamanho dos animais e comprimento da cauda, sendo o CRC tambm um dado
importante para eliminar o crescimento alomtrico dos rgos envolvidos na reproduo.
Aps as mensuraes exteriores, com uma tesoura cirrgica foi realizada uma inciso
contnua no plano mediano, na regio ventral dos animais, para coleta de dados do sistema
reprodutor e rgos relacionados reproduo. A inciso iniciou-se na antepenltima escama
ventral, com o objetivo de preservar a escama cloacal, e seguiu-se cranialmente at a altura
das gnadas. Nesse intervalo de espao, os rgos foram desprendidos do peritnio e
exteriorizados da cavidade pleuroperitoneal para facilitar as mensuraes.
Todas as medidas foram aferidas com um paqumetro digital Digimess com preciso
de 0,01 milmetro. As fotografias foram obtidas com uma cmera fotogrfica Canon EOS
Rebel XS. As fotografias foram editadas com o auxilio do programa de edio de imagens
CorelDraw Graphics Suite X5.

3.2.2 Dados macroscpicos dos machos

Os dados registrados para as Spilotes do gnero masculino foram:
1) Comprimento do eixo maior (a) dos testculos (Figura 8) e dos dois menores eixos (b e
c) dos testculos (Figuras 9 e 10 respectivamente). Tais medidas foram utilizadas para
calcular o volume total da gnada masculina, que possui um formato elipsoidal,
atravs da formula do volume da elipside:
.

43

Legenda: Vista ventral. Ducto deferente direito (ddd);
ducto deferente esquerdo (dde); intestino (in); tecido
adiposo (ta) e; seta apontando a regio distal do ducto
deferente. Foto: Diego Muniz, 2011
Figura 11 - Regio distal do ducto deferente de Spilotes
Os dados de volume dos testculos foram utilizados para analisar a possvel hipertrofia
sazonal da gnada.
2) Largura da regio distal ocupada pelo ducto deferente (Figura 11). Esse dado permitiu
analisar se h variao na largura dos ductos ao longo do ano, indicando a poca de
estocagem de espermatozides. A relao dessa medida com a maturidade e
imaturidade dos machos tambm foi analisada.

3) Comprimento total dos rins (Figura 12) e largura da regio cranial desses rgos
(Figura 13). Medidas que permitiram analisar o rgo quanto a variaes de tamanho
ao longo das estaes. Variaes relacionadas hipertrofia do segmento sexual renal
durante o ciclo reprodutivo (FOX, 1977).

caudal cranial
Legenda: Vista dorsal. Rim direito (rmd) e; rim
esquerdo (rme). Foto: Diego Muniz, 2011
caudal cranial
caudal cranial
Legenda: Vista dorsal. Rim direito (rmd) e; rim
esquerdo (rme). Foto: Diego Muniz, 2011
Figura 12 - Comprimento total do rim de Spilotes Figura 13 - Largura da regio cranial do rim de
Spilotes
44

As medidas utilizadas para as anlises foram referentes aos tecidos e rgos do lado direito do
animal, embora tomadas medidas de ambos os lados a fim de comparao, minimizando o
possvel erro de mensurao.

3.2.3 Dados macroscpicos das fmeas

Para as Spilotes do gnero feminino foram registrados os seguintes dados:
1) Comprimento do eixo maior do maior folculo ou ovo (Figura 14). O que permitiu
analisar o crescimento dos folculos ao longo do ano. Informao necessria para
determinar a poca do ano em que as fmeas encontram-se vitelognicas, com
folculos em estagio de vitelognese secundria (folculos secundrios);

2) Nmero de folculos em vitelognese secundaria (folculos secundrios) e nmero de
ovos no oviduto. Dado utilizado para identificar a poca do ano em que o ciclo
reprodutivo das fmeas se completa alm de tambm fornecer dados da fecundidade;
3) Aspecto do tero (distendido ou relaxado) (Figuras 15 e 16). Dado importante para
identificar fmeas ps-postura;

Legenda: Vista ventral. Folculo primrio (f); intestino (in);
oviduto (ov) e; tecido adiposo (ta). Foto: Diego Muniz, 2011
caudal cranial
Figura 14 - Mensurao do eixo maior do maior folculo de
Spilotes
45

4) Comprimento total dos rins e largura da regio cranial dos mesmos. Dado utilizado
para comparao com as medidas dos machos. Assim como nos machos, utilizaram-se
apenas os dados dos rgos direitos.
Como nomenclatura anatmica, utilizou a diviso do oviduto em: infundbulo, tuba,
tero (poro glandular e poro aglandular) e bolsa, de acordo com Uribe et al. (1998);
Girling (2002) e; Siegel et al. (2011a;b).

3.2.4 Coleta de tecidos para anlises histolgicas

Aps aferidas as mensuraes dos rgos, foram coletadas amostras de
aproximadamente um centmetro de comprimento dos rgos do sistema reprodutor e dos rins
para anlise histolgica. As amostras dos tecidos so coletadas apenas dos rgos ipsilaterais
a fim de preservar o sistema urogenital contralateral e, por convenincia, escolheu-se os
rgos direitos para que se padronizassem as amostras.
Nos machos foram coletadas amostras de tecido do testculo, poro cranial da gnada
(Figura 17); ducto deferente, poro mais caudal prximo a cloaca (Figura 18); e rim, poro
mais cranial do rgo (Figura 19).

Legenda: Vista ventral. Intestino (in); tero (ut);
rim (rm) e; bolsa direita (blsd). Diego Muniz,
2011
Legenda: Vista ventral. Intestino (in); tero (ut) e;
bolsa direita (blsd); bolsa esquerda (blse). Diego
Muniz, 2011
cranial caudal cranial caudal
blsd
Figura 15 - Fmea de Spilotes com a musculatura
uterina distendida, ps-postura
Figura 16 - Fmea de Spilotes com a musculatura
uterina relaxada
46

As amostras de tecidos coletados das fmeas so provenientes do oviduto em cinco
alturas distintas: bolsa (vagina), regio cranial; tero posterior, regio caudal (Figura 20);
tero anterior; tuba e; infundbulo (Figura 21); e em algumas fmeas tambm foram coletados
Figura 17 - Regio do testculo de
Spilotes coletada para anlise
histolgica
Figura 18 - Regio do ducto deferente
de Spilotes coletada para anlise
histolgica
cranial caudal
caudal cranial
Figura 19 - Regio do rim de Spilotes
coletada para anlise histolgica
cranial caudal
Legenda: Vista ventral. Intestino (in);
testculo direito (ted); testculo
esquerdo (tee); tecido adiposo (ta) e;
rea do crculo mostrando a regio
coletada para anlise histolgica. Foto:
Diego Muniz, 2011
Legenda: Vista ventral. Ducto deferente
direito (ddd); ducto deferente esquerdo
(dde); intestino (in) e; rea do crculo
mostrando a regio coletada para
anlise histolgica. Foto: Diego Muniz,
2011
Legenda: Regio do rim de Spilotes
coletada para anlise histolgica. Vista
dorsal. Intestino (in); rim direito
(rmd); rim esquerdo (rme) e; rea do
crculo mostrando a regio coletada
para anlise histolgica. Foto: Diego
Muniz, 2011
47

folculos ovarianos. Alm desses tecidos, tambm foi coletado tecido do rim, em sua poro
mais cranial, para que se possa comparar com o observado nos machos.

Os tecidos foram desidratados em uma soluo crescente de etanol: 70% por uma
hora; 80% por uma hora; 90% por uma hora; 100% por uma hora; 100% por mais uma hora; e
finalizando com 100% novamente por uma hora. Em seguida as amostras foram diafanizadas
com xilol por uma hora, aps esse tempo o xilol era trocado e o processo continuava por mais
uma hora. A incluso foi realizada com parafina por uma hora, em seguida trocava-se a
parafina e as peas foram ento mantidas overnight. Para finalizar o processo, a parafina era
novamente trocada e os tecidos mantidos nesta por mais uma hora antes de serem emblocados
em parafina. Os blocos foram trimados e obtiveram-se cortes transversais de quatro a cinco
micrmetros de espessura para confeco das lminas. Os cortes foram corados pelo mtodo
de colorao bsica, hematoxilina-eosina (H/E) (JUNQUEIRA et al., 1979) para anlise
morfolgica dos tecidos; observao do ciclo espermatognico nos tbulos seminferos, nas
lminas de testculo; para discernir a presena de espermatozides nos ductos deferentes, em
lminas dos ductos; e para identificar a presena do seguimento sexual renal nas lminas de
rins. Nas lminas de tecido do sistema reprodutor feminino foi analisada a presena de
glndulas e espermatozides.

Legenda: Vista ventral. Intestino (in); tero
aglandular (uta); bolsa direita (blsd); bolsa
esquerda (blse) e; rea dos crculos mostrando as
regies coletadas para anlise histolgica. Foto:
Diego Muniz, 2011
Legenda: Vista ventral. Folculo primrio (f);
infundbulo (if); intestino (in); tecido adiposo (ta);
tero glandular (utg); tuba (tb) e; rea dos
crculos mostrando as regies coletadas para
anlise histolgica. Foto: Diego Muniz, 2011
cranial caudal
caudal cranial
Figura 20 - Regio caudal do oviduto de Spilotes
Figura 21 - Regio cranial do oviduto de Spilotes
48

3.2.5 Dados para anlises histolgicas

Com o auxilio de um microscpio ocular e o software Image Pro Express, foram
obtidas dez medidas por animal, de cada varivel, a fim de se obter uma mdia de cada
varivel para cada animal. Para as anlises estatsticas trabalhou-se com as mdias das
variveis.

Para as Spilotes do gnero masculino foram registrados as seguintes variveis
considerando-se apenas os animais sexualmente maduros:

1. Dimetro do tbulo seminfero (Figura 22). Dado utilizado para observao do
aumento do tbulo seminfero ao longo das estaes;
2. Altura do epitlio seminfero (Figura 22). Para observar a poca do ano em que ocorre
a espermatognese;

3. Dimetro do tbulo contorcido distal, na poro do segmento sexual renal (Figura 23)
e;
4. Altura do epitlio da regio do segmento sexual renal (Figura 23).
Legenda: Corte transversal. Dimetro do tbulo seminfero (a);
altura do epitlio seminfero(b); espermatozides (sptz) e; lmen
(L). Hetatoxilina-eosina, 20x
Figura 22 - Fotomicrografia do testculo de Spilotes mostrando
as medidas aferidas dos tbulos seminferos
49

Para as Spilotes do gnero feminino foram registrados as seguintes variveis:
1. Dimetro das glndulas da casca encontradas no tero glandular (Figura 24);

Legenda: Corte transversal. Dimetro do segmento sexual renal
(a); altura do epitlio do segmento sexual renal (b); segmento
sexual renal (SSR); tbulo contorcido proximal (Tcp) e; glomrulo
(Glm). Hetatoxilina-eosina, 20x
Legenda: Corte transversal. Dimetro da glndula da casca (a);
camada muscular circular (cmc); camada muscular longitudinal
(cml); epitlio (ep); glndula (gld) e; lmen (L). Hetatoxilina-
eosina, 20x
Figura 23 - Fotomicrografia do rim de macho de Spilotes
mostrando as medidas aferidas do segmento sexual renal
Figura 24 - Fotomicrografia do tero glandular (anterior) de
Spilotes mostrando a medida aferidas da glndula da casca
50

Legenda: Corte transversal. Dimetro do tbulo contorcido distal
(a); altura do epitlio do tbulo contorcido distal (b); tbulo
contorcido distal (Tcd); tbulo contorcido proximal (Tcp) e;
glomrulo (Glm). Hetatoxilina-eosina, 20x
Figura 25 - Fotomicrografia do rim de Spilotes fmea mostrando
as medidas aferidas do tbulo contorcido distal
2. Dimetro do tbulo contorcido distal (Figura 25);
3. Altura do epitlio do tbulo contorcido distal (Figura 25).

3.3 ESTAO DE ACASALAMENTO, COMBATE ENTRE MACHOS E OVIPOSTURA

Dados da poca de cpula, combate entre machos e ovipostura foram obtidos da
literatura, observaes In situ e de indivduos em cativeiro que tenham sido recentemente
capturados. S foram includas nos dados as observaes em que se registraram o local exato
e data exata da cpula, combate ou ovipostura. Alm desses dados, a presena de
espermatozides na bolsa ser tambm um dado considervel para poca de cpula, bem
como ovidutos flcidos para ovipostura.
A fim de comparao, dados reprodutivos de animais ex situ foram obtidos de
criadores de rpteis, e analisados separadamente dos dados dos animais In situ.

51

3.4 MATURIDADE SEXUAL

Fmeas foram consideradas maduras quando apresentavam ovos nos ovidutos e/ou;
folculos secundrios e/ou corpo albicans nos ovrios e/ou; oviduto flcido (pos-postura)
e/ou; presena de espermatozides no oviduto e/ou na bolsa (vagina). O tamanho mnimo de
folculos em vitelognese secundria observado foi de 10 mm (cf. SHINE, 1978), esse
tamanho foi estabelecido a partir da anlise da distribuio por ms dos tamanhos do eixo
maior do maior folculo de cada fmea. O comprimento com o qual as fmeas atingem a
maturidade sexual foi estimado a partir do CRC da menor fmeas madura.
Foi determinante para a condio de macho sexualmente maduro, a presena de
espermtides e/ou espermatozides nos testculos e/ou presena de espermatozides nos
ductos deferentes. O comprimento com o qual os machos atingem a maturidade sexual foi
estimado a partir da anlise do CRC do menor macho em primeiro ciclo espermatognico.

3.5 FECUNDIDADE

A fecundidade foi estimada com base no nmero de ovos nos ovidutos ou nmero de
folculos pr-ovulatrios nos ovrios.

3.6 ESTAES

Considerou-se o ano dividido em estaes. O vero correspondendo os dias entre 22
de dezembro a 19 de maro; o outono abrangendo os dias entre 20 de maro a 19 de junho; o
inverno incluindo os dias entre 20 de junho a 21 de setembro; e a primavera, os dias entre 22
de setembro a 21 de dezembro (de acordo com o Centro de Previso de Tempo e Estudos
Climticos do Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais CEPETEC/INPE).
O ano foi tambm dividido em duas grandes estaes. A estao das chuvas, que na
regio sudeste concentra-se entre os meses de outubro a maro, perodo em que ocorre mais
52

de 80% do total anual de chuvas. E a estao da seca nos meses entre abril a setembro, nesse
perodo o trimestre mais seco ocorre nos meses de junho-julho-agosto (ALVES et al., 2002).

3.7 MORFOLOGIA DOS HEMIPNES

Para a descrio anatmica dos hemipnes foram utilizados quatro rgos copulatrios
de animais fixados. O mtodo utilizado para inverter os hemipnes seguiu Hussam (1999).
Um dos hemipnes foi retirado da base da cauda atravs de uma inciso ventral no plano
mediano. O rgo foi submerso em uma soluo de KOH a 3% at apresentar-se clareado e
flexvel (aproximadamente quatro dias). O rgo ento foi invertido manualmente utilizando-
se um par de pinas. Depois de invertido o rgo foi preenchido com uma soluo de agar-
agar.
A terminologia utilizada foi proposta por Dowling e Savage (1960) e Keogh (1999).

3.8 ANLISES ESTATSTICAS

Antes das anlises estatsticas todas as amostras foram testadas quanto distribuio
dos dados pelos testes de normalidade Kolmogorov-Smirnov, Lilliefors, e Shapiro-Wilk. Para
verificar a homogeneidade entre as varincias os dados foram submetidos ao teste de Levene.
As amostras que apresentaram normalidade nos trs testes e homogeneidade entre as
varincias foram ento analisadas estatisticamente.
O nvel de significncia para todos os testes foi fixado em igual a cinco por cento
(0,05).
As anlises estatsticas foram feitas com auxilio dos softwares Statistica 8
(STATSOFT, 2009) e BioEstat 5.0 (AYRES et al., 2007). Os grficos foram elaborados nos
softwares Microsoft Office Excel 2007 e Statistica 8 (STATSOFT, 2009) e editados no
CorelDraw Graphics Suite X5.

53

3.8.1 Dimorfismo sexual

Para avaliar a diferena em termos de dimorfismo sexual de tamanho, utilizaram-se os
dados de CRC e CC, nos quais foi realizada anlise de varincia (ANOVA) um critrio. Afim
de comparao com o resultado da anlise estatstica, tambm foi calculado o ndice de
Dimorfismo Sexual de tamanho corporal (SSD - sexual size dimorphism) utilizando-se a
frmula proposta por Gibbons e Lovich (1990) e adaptada para serpentes por Shine (1994):
SSD= 1 (mdia do CRC dos adultos do sexo de maior tamanho) (mdia do CRC dos
adultos do sexo de menor tamanho), sendo, por conveno, resultados negativos
representando machos maiores que fmeas e valores positivos, fmeas maiores que machos.

3.8.2. Padro de atividade

Os dados de padro de atividade foram analisados utilizando o teste Qui-quadrado. J
os dados referentes ao padro de atividade alimentar dos animais (forrageio) foram analisados
pelo teste Qui-quadrado de Tendncia.

3.8.3. Dados reprodutivos

Todos os dados referentes aos rgos e tecidos das serpentes foram submetidos a teste
de Correlao de Pearson com os dados de CRC, a fim de identificar correlao das medidas
desses rgos e tecidos com o tamanho do animal.
Os dados macroscpicos: valores de volume testicular, largura da regio distal do
ducto deferente, comprimento do rim e largura da regio cranial do rim (em ambos os sexos),
apresentaram correlao com o CRC (p < 0,05). J dos dados microscpicos apenas os valores
de dimetro da regio do segmento sexual renal e altura do epitlio do segmento sexual renal
apresentaram correlao com o CRC (p < 0,05).
Com base nesses resultados, essas amostras foram testadas estatisticamente por
anlises de covarincia (ANCOVA), tendo como covarivel o CRC. Os grficos para essas
54

amostras foram elaborados a partir dos resduos da regresso linear entre cada uma das
variveis e o CRC, com isso evitou-se o efeito do tamanho do corpo na anlise de variao
dessas medidas ao longo das estaes.
A amostra de volume testicular apresentou-se normal no teste Kolmogorov-Smirnov
(p > 20), porm, anormal nos testes Lilliefors (p < 0,5) e Shapiro-Wilk (W=0,79313; p=
0,00008). Essa mesma amostra mostrou varincias no homogneas no teste de Levene (F=
3,404395 e p= 0,033887). A amostra de comprimento do rim dos machos tambm mostrou
varincias no homogneas pelo teste de Levene (F= 3,761354; p= 0,023438). Por esse
motivo, nessas duas amostras foi feita a transformao dos dados utilizando-se a
transformao Box-cox.
As demais amostras, por no apresentarem correlao com o CRC, foram testadas por
anlise de varincia (ANOVA) um critrio. Sendo submetidas a posteriori ao teste de post
hoc Tukey em casos de significncia estatstica.
Os dados referentes aos folculos e ovos das fmeas no apresentam normalidade na
amostra em virtude da grande variao do tamanho dos folculos, por esse motivo para esses
dados utilizou-se o teste no paramtrico Kruskal-Wallis.
Os dados de fecundidade (relaes entre CRC e nmero e comprimento de ovos)
foram analisados por meio de regresso linear simples com os dados brutos bem como
transformados atravs de Box-cox.

55

As grgonas se chamavam Esteno, Eurale, e Medusa, e
houve um tempo em que eram belas. Mas, uma noite,
Medusa deitou-se com Poseidon, e Atenas, enfurecida
porque haviam copulado num de seus templos, converteu-
a num mostro alado com olhos brilhantes, dentes
enormes, uma lngua protuberante, garras afiadas e
cabelos transformados em serpentes. E foi amaldioada a
petrificar o homem que a contemplasse. Quando
fInalmente Medusa foi decapitada por Perseu e de seu
cadver saram os filhos de Poseidon, Crisaor e Pgaso,
Atena cravou a cabea da morta em sua gide, embora
alguns digam que a gide era a prpria pele da Medusa,
esfolada por Atena.
(Mito grego sobre os filhos do deus do mar, Poseidon)

56

Figura 26 - Testculo de Spilotes pullatus com epiddimo evidenciado
4 RESULTADOS

4.1 SISTEMA REPRODUTOR MASCULINO

Os machos de Spilotes pullatus possuem dois testculos contralaterais. O testculo
direito cranial ao esquerdo. Cada testculo ligado a um epiddimo que pode ser visto
macroscopicamente na borda medial da gnada (Figura 26) e microscopicamente por fora da
camada muscular que envolve o testculo (Figura 27). Cada epiddimo d origem a um ducto
deferente que liga o testculo a regio cloacal fazendo um trajeto ipsilateral a gnada. Os
ductos deferentes possuem um aspecto sinuoso ou convoluto em todo o trajeto.
Os rins so rgos relacionados reproduo. So rgos pares, e cada um formado
por vrios lobos. O rim direito maior e cranial ao esquerdo. Cada rim ligado regio
cloacal por um ureter ipsilateral que se abre na papila urinria.
Os machos de caninana possui um par de rgos copulatrios, os hemipnes.
O sistema reprodutor masculino pode ser observado, completo, na Figura 28.

Legenda: Corte transversal. Epiddimo
(epd); ductos eferente (def); tbulos
seminferos (ts) e; vaso sanguineo (vs).
Hematoxilina-eosina
cranial caudal
Figura 27 - Ductos eferentes e epiddimo
de Spilotes pullatus ( direita)
57

Foto: Diego Muniz, 2012 e; desenho: Victor Czank, 2012
Figura 28 - Sistema reprodutor masculino de Spilotes pullatus

cranial
caudal
58

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho ( ); menor macho (00). Meses
entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os meses entre abril e setembro, estao da
seca. Caixas representam os animais agrupados por estao. Linha superior e inferior da caixa (desvio
padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valore mximo e mnimo). n= 27
Figura 29 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos de volume testicular de Spilotes
pullatus do sudeste brasileiro
4.2 ANLISE MACROSCPICA DOS TESTCULOS

O testculo de Spilotes pullatus apresenta um aumento significativo em seu volume
durante o vero (F= 3,593, p= 0,028). Esse aumento se d principalmente entre a transio da
estao chuvosa para a seca, final do vero e incio do outono. A variao sazonal no volume
testicular de Spilotes ocorre em funo da fisiologia do rgo, sem influncia do crescimento
alomtrico, possvel observar que o maior animal no apresenta o maior volume testicular
bem como o menor macho no apresenta o menor volume deste rgo (Figura 29).

V
o
l
u
m
e

T
e
s
t
i
c
u
l
a
r

(
R
e
s
d
u
o
)

59

Figura 30 - Distribuio ao longo dos anos dos valores de dimetro do tbulo seminfero de Spilotes pullatus
do sudeste brasileiro
Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho ( ); menor macho ( ). Meses
4.3 ANLISE MICROSCPICA DOS TESTCULOS

As anlises histolgicas mostram que no h diferena significativa no dimetro dos
tbulos seminferos ao longo das estaes (F= 1,644; p= 0,212) (Figura 30).

Embora o dimetro do tbulo seminfero no varie sazonalmente, a espessura mdia
do epitlio seminfero difere significativamente entre as quatro estaes, (F= 6,272; p=
0,004). Comparaes a posteriori entre pares de mdias, realizadas recorrendo ao teste de
post hoc Tukey, revelaram que no outono o epitlio seminfero mais espesso do que no
inverno (p= 0,016) e na primavera (p= 0,015), mas no mais espesso do que no vero (p=
0,834) (Figura 31).
D
i
m
e
t
r
o

d
o

T
b
u
l
o

S
e
m
i
n
f
e
r
o

(
m
)

61

Figura 34 - Tbulo seminfero de
Spilotes pullatus no incio do
outono, apresentando o epitlio
bem espesso e com espermtides
em fase de diferenciao
Spilotes pullatus no incio do
outono, apresentando o epitlio
bem espesso
Figura 32 - Tbulo seminfero
de Spilotes pullatus durante o
final do vero, apresentando o
epitlio bem espesso com
numerosas espermatognias
prximo a lmina basal
Legenda: Corte transversal.
Epitlio seminfero (eps);
interstcio testicular (it); lmen
(L) e; vaso sanguineo (vs).
Hematoxilina-eosina
Epitlio seminfero (eps);
interstcio testicular (it) e; lmen
(L). Hematoxilina-eosina
Clula intersticial de Leydig (ci);
clula miide (cm); clula de
sertoli (cs); lmen (L);
espermatcito (sc); espermtide
(sd); espermatognia (sg) e;
espermatozide (sptz).
Hematoxilina-eosina

62

Spilotes pullatus durante o inverno,
apresentando o epitlio fino
basicamente formado por
espermatognias
Spilotes pullatus durante o inverno,
apresentando o epitlio fino e com
alguns espermatozides no lmen
Legenda: Corte transversal. Epitlio
seminfero (eps); interstcio testicular
(it); lmen (L); espermatognia (sg)
e; vaso sanguineo (vs).
Hematoxilina-eosina
Legenda: Corte transversal. Epitlio
seminfero (eps); interstcio testicular
(it); lmen (L); espermatozide
(sptz); espermatognia (sg) e; vaso
sanguineo (vs). Hematoxilina-eosina
O outono a estao do ano onde os testculos comeam a liberar os espermatozides
no lmen dos tbulos seminferos. Durante essa estao observa-se um grande nmero de
espermatozides nos testculos e ao final dessa estao finaliza-se a espermatognese.
O epitlio seminfero menos espesso no inverno, os testculos apresentam-se em fase
quiescente. O epitlio durante esse perodo formado basicamente por espermatognias
(Figura 35), e em alguns indivduos possvel observar no lmen dos tbulos seminferos, os
ltimos espermatozides produzidos durante o ciclo testicular (Figura 36).

63

No h muita diferena entre a espessura do epitlio germinativo no inverno e na
primavera, os testculos ainda apresentam-se inativos, embora no final da primavera j seja
possvel observar, em alguns indivduos, um numero maior de espermatognias no epitlio,
pois na prxima estao inicia-se a espermatognese.

4.4 ANLISE MACROSCPICA DO DUCTO DEFERENTE

A largura da regio distal ocupada pelo ducto deferente no possui uma variao
sazonal significativa (F= 1,436; p= 0,254). Tal evento indica a estocagem de espermatozides
nos ductos deferentes durante todo o ano, o que foi comprovado nas anlises histolgicas dos
ductos deferentes (Figura 37).

L
a
r
g
u
r
a

d
a

R
e
g
i
o

D
i
s
t
a
l

d
o

D
u
c
t
o

D
e
f
e
r
e
n
t
e

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho (00); menor macho ( ).
Meses entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os meses entre abril e setembro,
estao da seca. Caixas representam os animais agrupados por estao. Linha superior e inferior da
caixa (desvio padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valore mximo e mnimo). n= 31
Figura 37 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura da regio caudal do
ducto deferente de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
64

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho (00); menor macho (00).
4.5 ANLISE MICROSCPICA DO DUCTO DEFERENTE

As anlises histolgicas da regio caudal ocupada pelo ducto deferente mostram
estocagem de espermatozides, em Spilotes da regio sudeste do Brasil, durante todo o ano.

4.6 ANLISE MACROSCPICA DO RIM MASCULINO

No foram observadas mudanas macroscpicas em relao ao tamanho dos rins de
Spilotes pullatus. Tanto o comprimento renal (F= 0,194; p= 0,898) como a largura da regio
cranial (F= 0,373; p= 0,772) mantm-se estveis durante todas as estaes (Figuras 38 e 39
respectivamente).

C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
o

R
i
m

(
R
e
s
d
u
o
)

Figura 38 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do comprimento do rim
masculino de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
65

4.7 ANLISE MICROSCPICA DO RIM MASCULINO

As anlises histolgicas mostram que h diferena significativa no dimetro do
segmento sexual renal de Spilotes ao longo das estaes (F= 4,085; p= 0,024). O inverno a
estao onde o dimetro dessa estrutura encontra-se maior (Figuras 40 e 42), enquanto que o
vero o perodo do ano em que o dimetro do segmento sexual renal encontra-se regredido
(Figuras 41 e 42). Observando os indivduos da primavera notamos que nessa estao h uma
variao maior entre o dimetro, sendo essa a estao que apresenta o maior desvio padro
(Figura 42).

L
a
r
g
u
r
a

C
r
a
n
i
a
l

d
o

R
i
m

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho (00); menor macho (00).
Meses entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os meses entre abril e
setembro, estao da seca. Caixas representam os animais agrupados por estao. Linha superior e
inferior da caixa (desvio padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valore mximo e
mnimo). n= 29
Figura 39 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura cranial do rim de
Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
66

D
i
m
e
t
r
o

d
o

S
e
g
m
e
n
t
o

S
e
x
u
a
l

R
e
n
a
l

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Compare o dimetro do SSR ao dimetro
do tbulo contorcido proximal. Corte transversal.
Segmento sexual renal (SSR) e; tbulo contorcido
proximal (tcp). Hematoxilina-eosina
Legenda: Compare o dimetro do SSR ao dimetro
do tbulo contorcido proximal. Corte transversal.
Segmento sexual renal (SSR) e; tbulo contorcido
proximal (tcp). Hematoxilina-eosina
Figura 40 - Nfron de Spilotes pullatus da regio
sudeste do Brasil durante o outono, com segmento
sexual renal hipertrofiado
Figura 41 - Nfron de Spilotes pullatus da regio
sudeste do Brasil durante o vero, com segmento
sexual renal hipotrofiado
Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho (00); menor macho (00). Meses
entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os meses entre abril e setembro, estao
da seca. Caixas representam os animais agrupados por estao. Linha superior e inferior da caixa
(desvio padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valore mximo e mnimo). n= 22
Figura 42 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do dimetro do segmento
sexual renal de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
67

A espessura do epitlio do segmento sexual renal no apresentou uma diferena
significativa entre as estaes (F= 2,484; p= 0,100). Entretanto observa-se uma tendncia de
aumento da espessura do epitlio durante o outono e o inverno (Figura 43).

4.8 ANOMALIA EM RGOS REPRODUTIVOS E ACESSRIOS

Observou-se em alguns espcimes a presena de um dos testculos com uma
pequena massa testicular ligada ao rgo (Figura 44). Tambm havia alguns animais da
amostra, em que essa massa no tinha ligao direta com o testculo, havendo um intervalo
entre a massa e o testculo. Anlise histolgica desse tecido mostra que ele funcional e
apresenta o mesmo estgio de produo de gametas dos testculos (Figura 45). Sempre que
observada, essa massa se encontrava cranial ao testculo.
Uma massa de tecido renal sem ligao direta com o rgo, tambm foi observada
em alguns animais. Sempre que observada essa massa se encontrava caudal ao rim (Figura
46).
E
s
p
e
s
s
u
r
a

d
o

E
p
i
t
l
i
o

d
o

S
e
g
m
e
n
t
o

S
e
x
u
a
l

R
e
n
a
l

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior macho (00); menor macho (00). Meses
Figura 43 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da espessura do epitlio do
segmento sexual renal de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
68

Figura 44 - Testculo de Spilotes
pullatus apresentando uma massa
testicular cranial ao testculo
Figura 45 - Microscopia da massa
testicular de Spilotes pullatus.
Note a presena de
espermatozides no lmen dos
tbulos seminferos
Figura 46 - Rim de Spilotes
pullatus apresentando uma massa
renal caudal ao rim
cranial caudal
cranial caudal
(in); massa testicular (mt) e;
testculo esquerdo (te). Foto:
Diego Muniz, 2011
Interstcio testicular (it); lmen
(L) e; tbulo seminfero (te).
Hematoxilina-eosina
Legenda: Vista dorsal. Massa
renal (mr) e; rim (rm)
69

Legenda: Corte transversal. Epitlio seminfero (eps); interstcio testicular (it) e;
lmen (L). Hematoxilina-eosina
Figura 47 - Tbulo seminfero de Spilotes pullatus com 1.150mm de CRC
apresentando um epitlio germinativo em incio de atividade
4.9 MATURIDADE SEXUAL DOS MACHOS

O menor macho dos indivduos analisados histologicamente possui 1.150mm de CRC
e no possui espermatozides no sistema reprodutor, porm apresenta o epitlio germinativo
em incio de ciclo (Figura 47), indicando ser seu primeiro ciclo espermatognico. possvel
observar machos maiores do que o macho citado acima que j se encontram maduros
sexualmente. No entanto, machos consideravelmente maiores, ainda encontram-se imaturos e
outros machos tambm com grande CRC podem estar em uma fase de transio, tornando-se
maduros e realizando o primeiro ciclo espermatgenico (Quadro 1).

70

* em uma amostra total de 34 espcimes;
primeira espermatognese do espcime

Os ductos deferentes de Spilotes pullatus podem apresentar um aspecto convoluto
(Figura 48) ou sinuoso (Figura 49). Dos trinta e quatro machos amostrados, dois esto
maduros e no possuem espermatozides nos ductos por se tratar do incio do primeiro ciclo
espermatognico desses espcimes, mas apresentam os ductos deferentes convolutos (Quadro
1) Trs machos maduros e estocando espermatozides apresentam os ductos no convolutos,
apenas com formato sinuoso (Quadro 1 e Figuras 49 e 50). Os outros vinte e seis machos
maduros que no esto em seu primeiro ciclo espermatognico, estocam espermatozides e
apresentam os ductos deferentes convolutos. Todos os machos imaturos da amostra no
estocam espermatozides nos ductos deferentes e apresentam o ducto deferente
macroscopicamente com aspecto sinuoso (Quadro 1).
Ordem Crescente
de Tamanho*
CRC (mm) Aspecto do
Duc.
Deferente
Situao Sexual Estao
1 1150 Convoluto Maduro Primavera
2 1160 Convoluto Maduro Vero
3 1230 Sinuoso Maduro Vero
4 1245 Sinuoso Imaturo Primavera
5 1260 Convoluto Maduro Vero
6 1310 Sinuoso Maduro Primavera
12 1395 Sinuoso Imaturo Vero
14 1400 Sinuoso Imaturo Primavera
18 1470 Sinuoso Imaturo Outono
21 1500 Convoluto Maduro Primavera
34 1910 Convoluto Maduro Outono
Quadro 1 - Relao entre CRC, aspecto do ducto deferente e situao sexual com base em analise
histolgica de Spilotes pullatus machos
71

Figura 50 - Fotomicrografia do ducto deferente de
um macho de Spilotes com ducto no convoluto
macroscopicamente, embora, com presena de
espermatozides (sptz) no lmen mostrando que
se trata de um indivduo maduro sexualmente
Figura 49 - Ducto deferente de Spilotes pullatus
com aspecto sinuoso

Legenda: Vista lateral. Ducto deferente (dd);
intestino (in) e; rim (rm). Foto: Diego Muniz,
2011

Legenda: Corte transversal. Hematoxilina-eosina

4.10 MORFOLOGIA DOS HEMIPNES

As Spilotes machos possuem um par de rgos copulatrio, os hemipnes (Figura
51), que ficam recolhidos na base da cauda. O hemipnis quando invertido, exteriorizado da
base da cauda atravs de uma abertura ventrolateral, localizada na margem lateral do lbio
caudal da abertura cloacal.
Figura 48 - Ducto deferente de Spilotes pullatus
com aspecto convoluto
sptz
Legenda: Vista lateral. Ducto deferente (dd);
intestino (in) e; rim (rm). Foto: Diego Muniz,
2011
72

Desenho: Victor Czank, 2012
Figura 51 - Hemipnis de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil

73

O hemipnis quando invertido e intumescido, de forma artificialmente, possui:
a)gduas faces; b) duas bordas; c) uma base, e; d) um lobo apical.

a) As duas faces so basicamente diferenciadas pela presena do sulco espermtico,
sendo a ventral que possui o sulco chamada de face sulcada (Figura 52) e a oposta de face
asulcada (Figura 53). O sulco nico e permanece assim em todo o trajeto. O trajeto do
sulco inicia-se na base do hemipnis no plano mediano do rgo com uma leve
sinuosidade ao nvel do lobo apical. O sulco margeado em suas duas bordas por uma
crista que inicia bem demarcada na base do hemipnis e vai se tornando menos marcada
medida que o sulco se aproxima do pice do hemipnis (Figura 52);

b) As bordas laterais so as regies entre as duas faces. As duas bordas se unem no
pice do hemipnis formando uma ponta no pice do rgo (Figuras 52 e 53);

c) A base a regio mais proximal e est ligada ao corpo do animal. Ela possui a poro
proximal nua e a poro distal com espinhos grandes e densos. Esses espinhos esto
presentes em toda a face asulcada e nas bordas laterais (Figura 53), na face sulcada eles
esto ausentes prximo a borda do sulco espermtico (plano mediano) (Figura 52);

d) O lobo apical simples (nico), no apresenta bifurcao, possui um formato
bulboso, sendo trs bulbos, um em cada borda lateral e um no pice, o que faz o lobo
apical ter um formato de cabea de seta. Ele marcadamente diferenciado da base por
uma depresso que forma uma cintura entre ele e a base. A regio proximal do lobo
apical, a que se continua com a base, apresenta espinhos grandes e densos nas bordas
laterais, na face asulcada os espinhos vo diminuindo medida que se aproxima ao plano
mediano do rgo (Figura 53), e na face sulcada os espinhos so ausentes prximo a
borda do sulco espermtico (plano mediano) (Figura 52). A regio de transio entre a
regio proximal e distal do lobo apical um local onde se observa a mudana de espinhos
para clices, esses clices so do tipo espinhudo (traduo livre de calyces spInulate) e
esto presentes principalmente nas bordas laterais, e diminuem medida que se aproxima
do pice. As faces sulcada e asulcada da regio distal do lobo apical apresentam pequenos
clices com recortes em curvas (traduo livre de scalloped) que tendem a diminuir at
sumirem, medida que se aproxima do plano mediano (Figura 52 e 53).

74

Legenda: Vista ventral. Sulco espermtico (sce); espinhos (esp); crista do sulco
(csc); clice (clc); bulbo lateral (blt) e; bulbo apical (bap)
Legenda: Vista dorsal. Espinhos (esp); clice (clc); bulbo lateral (blt) e; bulbo
apical (bap)
Figura 53 - Face asulcada do hemipnis de Spilotes pullatus
Figura 52 - Face sulcada do hemipnis de Spilotes pullatus.

Proximal Distal
Proximal Distal
75

Figura 54 - Infundbulo de Spilotes pullatus exteriorizado da cavidade
celomtica, mostrando o aspecto translcido e formato afunilado
4.11 SISTEMA REPRODUTOR FEMININO

As fmeas de Spilotes pullatus possuem dois ovrios, contralaterais quando esto
quiescentes, e, ambos medianos quando esto ativos, com folculos em vitelognese. O ovrio
direito cranial ao esquerdo. Cada ovrio possui um ligamento que os comunica com o
oviduto ipsilateral, o mesovrio.
As fmeas possuem dois ovidutos funcionais. Cada um deles pode ser dividido em:
infundbulo, tuba, tero glandular, tero aglandular e bolsa (vagina). Essa ltima poro pode
ser uma extenso da cloaca.
Os infundbulos so pregueados e translcidos. Possuem um formato afunilado e com
um stio que comunica o lmen do oviduto com a cavidade celomtica (Figura 54).

O tero glandular normalmente pregueado e se torna intensamente pregueado na fase
final do ciclo ovariano.
O tero aglandular tem um formato mais cilndrico, e pode se apresentar distendido e
menos espesso do que o habitualmente, aps a ovipostura.
A bolsa a juno do oviduto com a cloaca.
O sistema reprodutor feminino de Spilotes pode ser observado completo na Figura 55.
cranial caudal
76

Foto: Diego Muniz, 2012 e; desenho: Victor Czank, 2012.
Figura 55 - Sistema reprodutor feminino de Spilotes pullatus

cranial
caudal
77

Legenda: Folculo primrio ( ); folculo secundrio ( ); ovo ( ); oviduto distendido representando
fmea ps-postura ( ); cicatriz de ovulao ( ) ; seta aponta a menor fmea madura e pontilhado
mostra fmea com mltipla ninhada. Meses entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os
meses entre abril e setembro, estao da seca. n= 32

Figura 56 - Distribuio do maior folculo ou ovo de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro ao longo dos anos

4.12 ANLISE MACROSCPICA DOS OVRIOS

Durante o vero, segunda metade da estao chuvosa, os folculos ovarianos de
Spilotes pullatus encontram-se menores do que 10 (dez) milmetros (folculos primrios)
(Figura 56). O depsito de vitelo nos folculos inicia durante o outono e na estao seguinte
(inverno) os folculos j apresentam um tamanho significativamente maior (H= 16,202; p=
0,001) sendo o final do inverno e incio da primavera (transio da estao seca para chuvosa)
o perodo de concentrao de fmeas com folculos pr-ovulatrios (Figuras 56 e 57). Durante
a primavera as fmeas j apresentam ovos nos ovidutos, algumas ainda encontram-se com
folculos secundrios, porm, menores do que os das fmeas de final de inverno. As fmeas
que possuem apenas folculos primrios apresentam cicatriz de ovulao (Figuras 56 e 58) nos
ovrios e/ou ovidutos distenditos (Figuras 56 e 59). Durante o vero pode-se observar
algumas fmeas tambm com cicatrizes de ovulao (Figuras 56).

E
i
x
o

m
a
i
o
r

d
o

m
a
i
o
r

f
o
l
c
u
l
o

o
u

o
v
o

(
m
)

78

Figura 58 - Ovrio de Spilotes
pullatus da regio sudeste do
Brasil com folculos primrios
no vero (< 10mm) e cicatrizes
de ovulao

Figura 57 - Ovrio de Spilotes
pullatus da regio sudeste do
Brasil com folculos
secundrios pr-ovulatrios em
final de inverno
Figura 59 - Regio caudal do
oviduto de Spilotes pullatus da
regio sudeste do Brasil com
oviduto distendido na
primavera
cranial caudal
cranial caudal
cranial caudal
Legenda: Vista ventral.
Oviduto (ov); folculo primrio
(f); folculo secundrio (f);
tecido adiposo (ta) e; intestino
(in)
Legenda: Vista ventral. Cicatriz
de ovulao (co); folculo
primrio (f) e; intestino (in)
Oviduto (ov) distendido; rim
(rm); bolsa (bs) e; intestino
(in)
79

Uma fmea do incio do ms de setembro apresenta folculos pr-ovulatrios e
tambm os ovidutos posteriores distendidos (Figuras 56 e 60). As anlises histolgicas dessa
fmea mostraram presena de espermatozides na bolsa (vagina).

4.13 HIPERTROFIA DAS GLNDULAS DA CASCA

As fmeas de Spilotes pullatus que apresentam folculos pr-ovulatrios, apresentam
um dimetro significativamente maior (F= 51,911; p= 0,00018) das glndulas da casca
presentes no endomtrio do oviduto mdio (Figura 61 e 63) em relao s fmeas que
encontram-se apenas com folculos primrios nos ovrios, estas ltimas apresentam as
glndulas hipotrofiadas (Figura 62 e 63).

Legenda: Vista ventral. Bolsa (bs); oviduto (ov) e; rim (rm)
caudal cranial
Figura 60 - Regio caudal do oviduto, com aspecto distendido, de um exemplar de Spilotes pullatus
com folculos pr-ovulatrios nos ovrios
80

Legenda: Caixas representam os animais agrupados por fase vitelognica; linha superior e inferior da
caixa (desvio padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valores mximos e mnimos). n= 9
Legenda: Corte transversal. Camada muscular
circular (cmc); camada muscular longitudinal
(cml); epitlio (ep); glndulas (gld) e; lmen (L).
Hematoxilina-eosina
Legenda: Corte transversal. Camada muscular
circular (cmc); camada muscular longitudinal
(cml); epitlio (ep); glndulas (gld); vaso
sanguineo (vs) e; lmen (L). Hematoxilina-eosina
D
i
m
e
t
r
o

d
a

G
l
n
d
u
l
a

d
a

C
a
s
c
a

(
m
)

Figura 61 - Oviduto mdio de Spilotes pullatus da
regio sudeste do Brasil, com glndulas
hipertrofiadas
Figura 62 - Oviduto mdio de Spilotes pullatus da
regio sudeste do Brasil, com glndulas
hipotrofiadas
Figura 63 - Dimetro da glndula da casca de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil,
agrupados por fase vitelognica
81

4.14 GLNDULAS SUBMUCOSA DA TUBA DO OVIDUTO

Foram observadas gldulas na submucosa da regio da tuba em algumas fmeas no
final da primavera e vero. As glndulas so excrinas do tipo acinosa simples, com o ducto
abrindo no lmen do oviduto (Figura 64).

4.15 TBULOS DO INFUNDBULO

Tbulos formados por clulas ciliadas foram observados na regio do infundbulo
(Figura 65).

Legenda: Corte transversal. Ducto da glndula (dct); glndula submucosa (gsb) e; lmen (L). Hematoxilina-eosina
Legenda: Corte transversal. Clio (cil); ducto (dct) e; lmen (L). Hematoxilina-eosina
Figura 64 - Glndulas submucosa na tuda do oviduto de Spilotes pullatus
Figura 65 - Tbulos ciliados no infundbulo do oviduto de Spilotes pullatus

82

4.16 ANLISE MACROSCPICA DO RIM FEMININO

Assim como nos machos, no foram observadas mudanas macroscpicas em relao
ao tamanho dos rins de Spilotes pullatus. As medidas de comprimento renal (F= 0,072; p=
0,973) e largura da regio cranial do rim (F= 1,300; p= 0,327) mantm-se durante todas as
estaes (Figuras 66 e 67 respectivamente).

C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
o

R
i
m

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior fmea (00); menor fmea (00). Meses
Figura 66 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos do comprimento do rim feminino
de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
83

4.17 ANLISE MICROSCPICA DO RIM FEMININO

Anlises histolgicas dos rins das fmeas mostram que no h diferena significativa
no dimetro do tbulo contorcido distal (regio do nfron onde se encontra o segmento sexual
nos machos) de Spilotes ao longo das estaes (F= 2,339; p= 0,124) (Figura 68). A espessura
do epitlio do tbulo contorcido distal tambm no apresentou diferena significativa entre as
estaes (F= 2,936; p= 0,0764) (Figura 69).

L
a
r
g
u
r
a

C
r
a
n
i
a
l

d
o

R
i
m

(
R
e
s
d
u
o
)

Legenda: Pontos representam o valor de cada indivduo. Maior fmea (00); menor fmea (00).
Meses entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os meses entre abril e
setembro, estao da seca. Caixas representam os animais agrupados por estao. Linha superior
e inferior da caixa (desvio padro); linha central da caixa (mdia) e; hastes (valore mximo e
mnimo). n= 15
Figura 67 - Distribuio ao longo dos anos dos valores dos resduos da largura cranial do rim
feminino de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
84

Figura 69 - Distribuio ao longo dos anos dos valores da espessura do epitlio do tbulo contorcido
distal de fmeas de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro

E
s
p
e
s
s
u
r
a

d
o

E
p
i
t
l
i
o

d
o

T
b
u
l
o

C
o
n
t
o
r
c
i
d
o

D
i
s
t
a
l

(
m
)

D
i
m
e
t
r
o

d
o

T
b
u
l
o

C
o
n
t
o
r
c
i
d
o

D
i
s
t
a
l

(
m
)

Figura 68 - Distribuio ao longo dos anos dos valores do dimetro do tbulo contorcido distal de
fmeas de Spilotes pullatus do sudeste brasileiro
85

- no observado
* apenas de um ovrio, o outro havia sido removido
4.18 MATURIDADE SEXUAL DAS FMEAS

A menor fmea madura encontra-se em estado avanado do ciclo (com folculos pr-
ovulatrio nos ovrios ou ovos nos ovidutos) apresenta 1.280mm de CRC e possui cinco ovos
no oviduto. De todas as fmeas com ovos no oviduto ou folculo em estado avanado de
depsito de vitelo, esta menor fmea a que apresenta o maior ovo, mas uma menor
quantidade de ovos nos ovidutos. (Tabela 1 e Figura 56).

Tabela 1 - Tamanho do eixo maior do maior folculo secundrio/ovo de fmeas Spilotes pullatus em
estado avanado do ciclo
CRC (mm) Maior Folculo
Secundrio

(mm)
Maior ovo (mm) Nmero de ovos
ou folculo pr-
ovulatrio
1280 - 59,23 5
1290 45,47 - 6
1340 22,95 - 9
1360 32,92 - 8
1395 47,18 8
1430 42,94 - 10
1460 47,48 - 9
1480 - 44,69 11
1470 - 58,00 10
1520 36,55 - 9
1520 36,91 - 8
1540 42,42 - 9
1550 42,63 - 5*
1565 48,74 - 10

86

Legenda: Folculo secundrio ( ); ovo ( ) e linha representa a tendncia. n= 13
Figura 70 - Relao entre comprimento rostro-cloacal da fmea e nmero de ovos
ou folculos pr-ovulatrios em Spilotes pullatus
Legenda: Folculo secundrio ( ); ovo ( ) e linha representa a tendncia. n= 14
Figura 71 - Relao entre comprimento rostro-cloacal da fmea e comprimento
de ovos ou folculos pr-ovulatrios em Spilotes pullatus
4.19 FECUNDIDADE

O tamanho da ninhada (nmero de ovos ou folculos pr-ovulatrios) positivamente
e significativamente relacionado com o CRC da fmea quando analisados os dados brutos (F=
10,975; p= 0,006 e; n= 13) assim como os dados transformados por Box-cox (F=5,080;
p=0,045 e; n=13) (Figura 70)

O tamanho dos ovos (comprimento do eixo maior) no apresenta relao significativa
com o CRC das fmeas quando analisados os dados brutos (F=0,004; p= 0,947 e; n=14) bem
como quando os dados so transformados atravs de Box-cox (F= 0,035; p= 0,853 e; n= 14)
(Figura 71).

N
m
e
r
o

d
e

o
v
o
s

o
u

F
o
l
c
u
l
o
s

p
r
-
o
v
u
l
a
t
r
i
o
s

CRC (mm)
CRC (mm)
C
o
m
p
r
i
m
e
n
t
o

d
o

o
v
o

o
u

F
o
l
c
u
l
o

p
r
-
o
v
u
l
a
t
r
i
o

87

Figura 72 - Folculo
secundrio de Spilotes
pullatus apresentando
um formato esferide
Legenda: Folculo
primrio (f) e;
folculo secundrio
(f). Foto: Diego
Muniz, 2012
Os folculos ovarianos e os ovos de Spilotes pullatus possuem um formato esferide
(Figuras 72 e 73). O eixo maior dos ovos mede em mdia 53,97mm ( 8,06) de comprimento.
Os folculos pr-ovulatrios possuem em mdia 41,10mm ( 4,67) de comprimento do eixo
maior, esto dispostos em linha nos ovrios com uma leve inclinao de aproximadamente
15 em relao ao plano horizontal do animal, o que faz com que a poro cranial de cada
folculo, h exceo do primeiro folculo do ovrio direito, sobrepe a poro caudal do
folculo mais caudal a ele (Figuras 72 e 75). As fmeas apresentam uma mdia de 8,82 (
1,81) ovos nos ovidutos ou folculos pr-ovulatrios nos ovrios. Os folculos podem ser
encontrados distribudos de forma simtrica, com o mesmo nmero de folculos em cada
ovrio (Figura 74) ou de forma assimtrica podendo ter uma diferena de um a dois folculos
entre os ovrios, sendo quase sempre o ovrio esquerdo com o maior nmero.

Figura 73 - Ovos de
Spilotes pullatus com
formato esferide

cranial caudal
Foto: Edelcio Muscat, 2009
88

4.20 MORFOLOGIA DAS BOLSAS

Em Spilotes a bolsa bem demarcada por ter um dimetro maior do que o oviduto. A
bolsa direita maior e cranial a bolsa esquerda (Figuras 76, 77, 78 e 79). Cada bolsa encontra-
se laterodorsal ao intestino e apresenta dois lobos, um dorsal e um ventral. Esses lobos so
bem demarcados por estarem separados por um sulco mediano. Esse sulco se origina devido
dobra formada pela posio dos dois lobos da bolsa envolvendo o intestino (sequncia das
Figuras 76, 77 e 78). A bolsa se fusiona a contralateral no plano mediano, dorsal ao intestino
(Figuras 77, 78 e 79).
Legenda: Vista ventral. Folculos secundrios (f); oviduto (ov) e;
intestino (in). Foto: Diego Muniz, 2011
Legenda: Corte sagital mediano, vista lateral esquerda. Desenho: Diego Muniz, 2012
cranial
caudal
Figura 74 - Sistema reprodutor feminino de Spilotes pullatus com
folculos pr-ovulatrios nos ovrios distribudos em linha com leve
inclinao e de forma simtrica, quatro em cada ovrio
Figura 75 - Disposio dos folculos pr-ovulatrios de Spilotes pullatus distribudos em linha com leve
inclinao em relao ao plano horizontal do animal dentro da cavidade celomtica
89

Figura 76 - Bolsas de Spilotes
pullatus envolvendo o intestino
dentro da cavidade celomtica
pullatus na cavidade
celomtica, intestino arrebatido
pullatus na cavidade
celomtica, intestino arrebatido
e bolsas esticadas para
visualizao da face medial
Abertura da cloaca (abt);
intestino (in); lobo ventral (lbv)
e; oviduto (ov)
Intestino (in); juno das bolsas
(jnb); lobo ventral (lbv); lobo
dorsal (lbd); oviduto (ov) e, rim
(rm)
Abertura da cloaca (abt);
juno das bolsas (jnb); lobo
ventral (lbv); lobo dorsal
(lbd); oviduto (ov) e, sulco
medial (slc)

cranial caudal
cranial caudal
cranial caudal
90

Desenho: Victor Czank, 2012

Figura 79 - Bolsas de Spilotes pullatus da regio sudeste do Brasil

91

4.21 INTERAES SOCIAIS

Foram observadas algumas interaes sociais entre indivduos de Spilotes pullatus que
so descritas a seguir.

4.21.1 Ritual de combate e cpula In situ

Em Spilotes pullatus foi observado ritual de combate entre machos durante o perodo
da primavera e tais interaes duram em mdia uma hora (Quadro 2).
Em um dos casos, foi observado combate entre dois machos nas margens de um rio.
Os machos se entrelaavam tentando manter a poro cranial do corpo ereta sempre acima do
oponente, em dados momentos, percebia-se a utilizao da poro final da cauda na tentativa
de imobilizar o oponente, em algumas ocasies era possvel observar o hemipnis exposto, de
um dos indivduos, na tentativa de segurar o adversrio que sempre tentava fuga. O combate
ocorreu no substrato arbreo e em parte no terrestre. Durante o combate os colubrdeos
chegaram a cair do galho da rvore dentro do rio (Figura 80).

Desenho: Diego Muniz, 2011. Elaborado a partir do vdeo gravado por Jos Milton Longo
na margem do rio Sucuri, Costa Rica, MT
Figura 80 - Ritual de combate entre dois Spilotes pullatus machos na copa de uma rvore
durante a primavera
92

x observado;
- no observado
* houve exposio de hemipnis
Quadro2 - Ritual de combate e cpula observados In situ em Spilotes pullatus
Estao
Data

N de
Indivduos
Combate Cpula Durao Local Fonte

Inverno
16/08/2008
2 - X - Morretes PR Gustavo
Knuppe, com.
pess.

Inverno
27/08/2006

2 - X - Araariguama -
SP
Ana Maria
Delgado,
com. pess.

Inverno
Setembro
2 - X - Sete Barras - SP Luciano
Castanho,
com. pess.

Inverno
17/09/2010
2 - X - Paranagu PR Osvaldo
Parthey, com.
pess.

Primavera
12/10/2000
3 X X - Ilha do Cardoso
SP
Ligia Pizzato,
com. pess.

Primavera
Out/2001
3 X X - Ilha do Cardoso
SP
Ligia Pizzato,
com. pess.

Primavera
13/12/2007
2 X* - 1h Costa Rica
MS

Jos Milton
Longo,
com. pess.

Em outro relato observa-se um espcime de Spilotes pullatus prximo ao meio fio da
calada, onde um segundo indivduo se aproximou. Os dois emparelharam as cabeas e um
terceiro exemplar da espcie se aproxima quando os outros dois encontram-se em corte. Um
dos colubrdeos (provavelmente o macho) interrompe a atividade de corte com a parceira para
perseguir o terceiro espcime, que foge. O perseguidor volta para a corte e ento o terceiro
animal, que havia sido perseguido, volta a se aproximar dos dois Spilotes em corte e
novamente perseguido e ento finalmente afugentado pelo perseguidor. O casal permanece
em cpula e um tempo depois observado ainda em cpula em um limoeiro prximo ao local
inicial da interao.
93

Figura 82 - Smen de Spilotes coletado da cloaca de
uma fmea
Em outra ocasio tambm foram avistadas trs caninanas agrupadas, duas
delas mantinham a cabea erguida, se afrontando. Passado um tempo foi observado duas delas
em cpula.
Durante a cpula o macho expe um dos hemipnes, e com o rgo semi-intumescido,
penetra a cloaca da fmea. Durante a cpula, a regio cloacal do macho fica em uma posio
oposta a da fmea. O hemipnis introduzido at a juno das duas bolsas. Aps a penetrao
concluda, o rgo completa a ereo. O hemipnis intumescido na cloaca da fmea causa
uma dilatao da regio cloacal, gerando um atrito que ajuda a manter o rgo no interior da
cloaca da fmea. O smen encaminhado, atravs do hemopnis do macho, ao interior da
cloaca da fmea e depositado na regio da juno das bolsas. O volume de smen
armazenado nas bolsas e aos poucos vo dando vazo em direo ao oviducto (Figura 81).

O smen de Spilotes tem um aspecto viscoso, opalescente, consistente e denso. O
volume ejaculado pode chegar a mais de 2mL (Figura 82).

Legenda: Corte horizontal. Desenho: Diego Muniz, 2012
Figura 81 - Insero do hemipnis do macho na bolsa da fmea durante a cpula de
Spilotes pullatus
94

analisado histolgicamente;
analisado macroscpicamente;
x observado;
No observado
- no analisado

O perodo de cpula da caninana corresponde, principalmente, ao inverno e incio da
primavera, durante a transio da estao seca para a chuvosa (Quadros 2 e 3).
Cinco fmeas em estado avanado de depsito de vitelo nos folculos, fmeas com
folculos pr-ovulatrios, foram analisadas histologicamente, das quais trs apresentam
espermatozides na bolsa e na poro caudal do oviduto (Figura 83 e Quadro 3).
Uma fmea entregue ao laboratrio de herpetologia do Instituto Butantan, abatida
junto com um macho no municpio de Araariguama-SP durante o inverno, apresentava um
grande volume de smen na cloaca (Figura 84 e Quadro 3) e continha nos ovrios folculos
pr-ovulatrios.

Quadro 3 - Perodo de cpula de Spilotes pullatus estimada a partir de analise de fmeas dissecadas
Estao
Data
Sptz na Bolsa Sptz na poro caudal do
oviduto

Smen na
cloaca
Inverno
23/07/1987

X X -

Inverno
24/08/2006
X X -

Inverno
27/08/2006
- - X

Inverno
05/09/2005
X X -

Inverno
Setembro
-

Primavera
Novenbro
-

95

Legenda: Corte transversal. Epitlio (ep); lmen (lu) e
espermatozides (sptz). Hematoxilina-eosina.
Figura 83 - Poro caudal do oviduto de Spilotes pullatus com
presena de espermatozides no lmen da bolsa

cranial caudal
Figura 84 - Smen de Spilotes pullatus e esfregao do smen encontrado na cloaca de uma fmea da espcie
que apresentava folculos pr-ovulatrios nos ovrios
96

4.21.2 Incubao e ecloso dos ovos In situ

Os registros de postura de animais In situ informam que as Spilotes pullatus da regio
sudeste depositam seus ovos na primavera. O perodo de incubao dos ovos dura
aproximadamente 73 dias, a ecloso dos ovos ocorre durante o vero (Quadro 4).

Quadro 4 - Estao de postura, incubao e ecloso dos ovos de Spilotes pullatus capturadas prenhes na
regio sudeste do Brasil
Ovipostura
(Estao - Ms)

Nmero
de ovos
Incubao
(dias)
Ecloso
(Estao - Ms)
Fonte
Primavera Out - 75 Vero Dez ZUEC - UNICAMP
Primavera Out - 72* Vero Jan Marques, 1998
Primavera Dez 7 72 Vero Fev Abe e Fernandes, 1977
Primavera Nov 12 115** Vero Mar Hauzman, 2005

4.21.3 Cpula, incubao e ecloso dos ovos ex situ

Registros de espcimes mantidos em cativeiro por longo tempo (mais de um ano)
mostram ocorrncia de cpula no outono (Figura 85), ovipostura ocorrendo no inverno e
nascimento dos filhotes no vero (Quadro 5). Quanto aos animais mantidos h pouco tempo
(menos de um ms) em cativeiro a cpula observada no inverno, sendo a ovipostura na
primavera e recrutamento dos filhotes no vero (Quadro 5). A durao da cpula em mdia
de trs horas (Quadro 5).

* Perodo aproximado. Ovipostura em final de outubro e ecloso em segunda quinzena de janeiro;
** Um ovo eclodiu, os outros foram dissecados cinco dias depois e apenas um embrio estava desenvolvido
97

Animal mantido junto com um macho e mais uma fmea durante todo o ano;
Fmea capturada em So Paulo e mantida em cativeiro sozinha por 20 dias. Um macho capturado no
Esprito Santo foi alocado junto com ela e 8 dias aps ocorreu a cpula;
Fmea mantida em cativeiro com o macho em menos de um ms;
4
Estao boreal;
Primeira observao;
Segunda observao do mesmo animal;
* 75 dias depois da postura um ovo foi descartado por se encontrar atrsico;
** 73 dias depois da postura dois ovos foram descartados por estarem atrsicos

Quadro 5 - Estao de cpula, postura e incubao dos ovos ex situ de Spilotes pullatus
Cpula
(Estao
data)
Durao
da
Cpula
Ovipostura
(Estao -
Ms)

Nmer
o de
ovos
Incuba
o (dias)
Ecloso
(Estao -
Ms)
Fonte
Outono
2,3 e
4/06/2009

- Inverno
07/09/2009

7*

104
Vero
Dezembro
Edelcio
Muscat,
com. pess.
Outono
2,3 e
4/06/2009

- Inverno
10/09/2009

10**

99
Vero
Dezembro
Edelcio
Muscat,
com. pess.
Inverno
10/07/2003
2h42min - - - - Duarte e
Aalbuquerque
, 2006

Inverno
22/08/2001

3h12min Primavera
11/11/2001

10

62
Vero
Janeiro
Secchiero e
Feliz, 2005
Inverno
4
e
primavera
4

5/03/2011
20/04/2011

-
-

Primavera
4
20/04/2011
8/06/2011

7
8

78
82

Vero
Julho
Agosto

John
Andermann,
com pess.

Foto: Edelcio Muscat, 2009
Figura 85 - Cpula ex situ de Spilotes pullatus
98

A reproduo de Spilotes pullatus mantidas em cativeiro no hemisfrio norte, foi
realizada com sucesso quando se controlou as influncias ambientais. Aps um pouco da
diminuio natural da temperatura e do ciclo de luz durante os meses de dezembro e janeiro,
foi aumentada de forma artificialmente a temperatura, ciclo de luz, e umidade, para estimular
o acasalamento. A corte foi observada em 28 de fevereiro e a cpula de fato no dia cinco de
maro (Figura 86). A ovulao foi observada aps a cpula e a prenhez (Figura 87) teve um
perodo curto. Em 31 de maro a fmea fez a ecdise pr-postura (pre-lay shed) e os ovos
foram postos vinte dias depois, em abril (Figura 88). Logo aps a postura o casal copulou
novamente. Em junho houve uma segunda postura (Figura 89). Os ovos das duas ninhadas
foram incubados a uma temperatura de 26C (Figura 90) e a ecloso ocorreu aps, em mdia,
80 dias (Quadro 5 e Figuras 91, 92 e 93).

Figura 86 Cpula de Spilotes
pullatus, ex situ de no hemisfrio
norte
Figura 87 - Prenhez de Spilotes
pullatus, ex situ no hemisfrio
norte

Legenda: Note o corpo da fmea
distendido na regio cloacal,
permitindo a visualizao do
espao entre as escamas, em razo
da introduo do hemipnis
intumescido. Foto: John
Andermann, 2011
Legenda: Note o corpo da
fmea distendido no tero
caudal (em primeiro plano na
fotografia), permitindo a
visualizao do espao entre as
escamas, em razo dos ovos no
oviduto. Foto: John Andermann,
2011
99

Figura 90 - Ecloso de ovos de Spilotes

Figura 93 - Filhotes de Spilotes pullatus recm
nascidos em cativeiro no hemisfrio norte

Foto: John Andermann, 2011

Figura 92 - Filhote de Spilotes pullatus saindo
do ovo
Figura 90 - Incubao de ovos de duas ninhadas
da mesma fmea de Spilotes pullatus
Figura 88 - Primeira postura durante a estao
reprodutiva ex situ de uma fmea Spilotes pullatus no
hemisfrio norte
Figura 89 - Segunda postura durante a estao
reprodutiva ex situ de uma fmea Spilotes pullatus no
hemisfrio norte




100


Existe uma diferena na frequncia da atividade dos indivduos adultos de Spilotes em
relao s quatro estaes do ano (x = 16,13; gl= 3; p= 0,001). Os adultos so mais ativos no
incio do ano, durante o vero e outono. Assim como os adultos, a atividade dos indivduos
juvenis se concentra principalmente no vero e outono, tendo o pico de atividade no vero (x
= 14,04; gl= 3; p= 0,003) (Figura 94).

4.22.1 Padro de atividade alimentar

A atividade de forrageio de Spilotes pullatus machos constante ao longo das estaes
(x= 0,009; gl= 1; A= -0,46; p= 0,925) no havendo uma tendncia para que os machos se
alimentem mais em determinada estao do ano (Figura 95)
Durante todas as estaes, a proporo de machos com contedo alimentar no sistema
digestrio menor do que a de machos sem contedo alimentar (Figura 95).
Figura 94 - Distribuio ao longo do ano de Spilotes pullatus capturadas na
regio sudeste do Brasil, mostrando a atividade padro da espcie
N
m
e
r
o

d
e

A
n
i
m
a
i
s

Legenda: Caixas brancas representam os adultos e caixas coloridas representam
os juvenis. Meses entre outubro e maro compreendem a estao das chuvas e os
meses entre abril e setembro, estao da seca. Adultos n= 269 e juvenis n= 23
101

Legenda: Poro cheia da coluna representa a porcentagem de animais com contedo
alimentar e a poro vazia representa a porcentagem de animais sem contedo.
Nmero de indivduos da estao no topo da coluna. Primavera e vero compreendem
a estao das chuvas e outono e inverno, estao da seca. n= 32
Figura 96 - Proporo de fmeas de Spilotes pullatus com contedo alimentar no
sistema digestrio capturados na regio sudeste do Brasil ao longo das estaes

As fmeas dessa espcie se alimentam mais no vero e existe uma tendncia
decrescente, a medida que as estaes vo passando, o forrageio das fmeas diminui (x=8,93;
gl= 1; A= -9,75 ; p= 0,003), havendo uma tendncia para que na primavera as fmeas
diminuem ao mximo a atividade alimentar (Figura 96). Oito fmeas com folculos pr-
ovulatrios ou ovos no sistema reprodutor tiveram seu sistema digestrio analisado e destas
apenas uma apresentava contedo alimentar.

Legenda: Poro cheia da coluna representa a porcentagem de animais com contedo
alimentar e a poro vazia representa a porcentagem de animais sem contedo.
Nmero de indivduos da estao no topo da coluna. Primavera e vero compreendem
a estao das chuvas e outono e inverno, estao da seca. n= 71
P
o
r
c
e
n
t
a
g
e
m

d
e

A
n
i
m
a
i
s

P
o
r
c
e
n
t
a
g
e
m

d
e

A
n
i
m
a
i
s

Figura 95 - Proporo de machos de Spilotes pullatus com contedo alimentar no
sistema digestrio capturados na regio sudeste do Brasil ao longo das estaes
102

Durante o vero possvel encontrar mais de 60% das fmeas portando algum
contedo alimentar no estmago ou intestino, porcentagem essa maior do que a dos machos
(compare as Figuras 95 e 96).

4.23 DIMORFISMO SEXUAL

Os machos da espcie Spilotes pullatus apresentam um CRC mdio de 1.481,19mm (
171,36), as fmeas apresentam um CRC mdio de 1.413,26mm ( 172,27), o teste estatstico
aponta que no existe um dimorfismo sexual de tamanho corporal nessa espcie (F= 0,126;
p= 0,722; n=52 fmeas e 112 machos). Para o clculo de ndice de Dimorfismo Sexual as
fmeas apresentam-se menores do que os machos (SSD= -0,032).
Em relao cauda dos dois gneros observa-se dimorfismo em tamanho (F= 5,959;
p= 0,015; n= 52 fmeas e 112 machos), sendo os machos portadores de caudas mais longas.
Os machos possuem a cauda com um comprimento mdio de 486,73mm ( 65,51) e as
fmeas um comprimento mdio de 453,65mm ( 49,83).

104

Diz a lenda que uma ndia tapuia pariu um casal de
gmeos na forma de duas serpentes escuras. A ndia os
batizou de Honorato e de Maria. Percebendo a
impossibilidade de viverem na terra entre humanos, ela
ento os lanou no rio. As duas serpentes criaram-se nas
profundezas do Rio Amazonas. O povo chamava-as de
Cobra-Norato e Maria-CanInana. Elas tInham ndoles bem
diferentes: Cobra-Norato era forte, bom e dadivoso em suas
aes; Maria-CanInana, ao contrrio, violenta e m,
alagava embarcaes, matava nufragos e feria animais
dentro da gua. Cobra-Norato, de vez em quando,
transformava-se na imagem de um homem de terno branco,
que ajudava na colheita de frutas, danava com as moas e
agradava os velhos. Aborrecido de tanto ver Maria-
CanInana promovendo Incontveis atos de maldade, ele a
matou e passou a viver isolado pelos rios e igaraps, mas
sempre praticando boas aes [..].
(Cobra-Norato e Maria-Caninana - Lenda indgena na
regio amaznica)

105

5 DISCUSSO

Para se avaliar o ciclo reprodutivo de uma espcie preciso saber quais indivduos
esto sexualmente maduros. Para isso essencial que a amostra no seja constituda de
indivduos imaturos que inviabilizariam a descrio da gametognese. O menor macho de
Spilotes pullatus analisado apresentava 1.150mm de comprimento rostro-cloacal (CRC), e
estava em seu primeiro ciclo espermatognico. No foi analisado nenhum macho menor na
amostra, portanto possvel que exista machos que entrem em seu primeiro ciclo
espermatognico com o CRC um pouco menor do que o que foi analisado. A menor fmea
avaliada possui 1.280mm de CRC, e a exemplo dos machos tambm se encontrava madura, e
em fase final do ciclo reprodutivo, j apresentando ovos nos ovidutos. Como essa fmea
encontra-se em fase final do ciclo, bem provvel que ela tenha atingido a maturidade sexual
com um CRC um pouco menor. Portanto, caninanas de ambos os sexos parece atingirem a
maturidade sexual por volta dos 1.000mm de comprimento rostro-cloacal. No entanto, a
maturidade sexual determinada atravs do comprimento do animal no parece ser muito
fidedigna em caninanas. Alguns machos de Spilotes possuem um comprimento rostro-cloacal
consideravelmente grande (e. g. 1.500mm) e ainda assim podem estar imaturos, o que
demonstra a importncia de anlises histolgicas para se caracterizar o indivduo como
maduro ou imaturo.
Os machos maduros de Squamata apresentam um aumento do comprimento e massa
dos testculos durante a fase ativa das gnadas devido a grande atividade espermatognica
nesse perodo (SCHUETT et al., 2002; KROMER, et al., 2004). Os machos de Spilotes
pullatus que habitam a regio sudeste do Brasil apresentam um aumento do volume desses
rgos durante o vero, principalmente no final da estao. A atividade de diviso celular
iniciada no vero faz com que ao final dessa estao o epitlio germinativo encontre-se com
grande nmero de clulas. Esse evento reflete no volume testicular, que durante esse perodo
encontra-se maior. No final do vero e durante o outono comea a espermiognese e esse
fenmeno leva ao aumento da espessura do epitlio seminfero, uma vez que varias linhagens
de clulas germinativas compem o epitlio nessa fase. No inverno o epitlio seminfero
finaliza o ciclo, os ltimos espermatozides so formados e ento cessa a produo de
gametas. Os testculos permanecem inativos at o final da primavera. Quando se inicia outro
vero, j possvel observar a multiplicao de espermatognias novamente, iniciando um
novo ciclo. Este tipo de produo de gameta onde o individuo possui um perodo do ano de
106

quiescncia reprodutiva classificado, de acordo com Mathies (2011), como sendo cclica
descontnua. De acordo com o mesmo trabalho, quando existe uma sincronia do ciclo da
populao, ou seja, o perodo de produo de gametas e de quiescncia reprodutiva de todos
os indivduos da populao ocorrendo no mesmo perodo, a reproduo da populao pode ser
classificada como sazonal. Em se tratando de machos de Spilotes, existe uma sincronia da
populao em relao atividade testicular, que ocorre no vero e outono, e uma sincronia no
perodo de quiescncia reprodutiva, compreendendo o inverno e a primavera. O que classifica
a reproduo desse colubrdeo como sendo, alm de cclica descontnua, sazonal.
H um tipo de anomalia testcular que no incomum encontrar em alguns espcimes
de Spilotes. Alguns machos possuem um dos testculos com um pequeno lobo, esse lobo
compartilha da mesma tnica albugnea do testculo, e por isso se trata de um testculo
lobulado. Outra anomalia parecida e um pouco mais incomum existncia de uma massa
testicular prximo ao testculo, mas sem ligao direta com o rgo, essa massa testicular
possui sua prpria tnica albugnea, portanto sugere-se que no seja um lobo do rgo, e sim
uma estrutura individual. Essa massa testicular, bem como o lobo, formada de tecido
testicular funcional, apresentam o ciclo de produo de gametas exatamente igual ao ciclo
testicular do indivduo. comum observar tambm nos rins de machos uma massa de tecido
sem ligao direta com o rgo. Fox (1965) descreve os dois testculos de duas espcies de
Leptotyphlops e Typhlops, como sendo normalmente lobulados em todos os espcimes, sendo
encontrado de quatro a seis lobos, e at possuindo lobos com espaamento entre eles. Ele
considerou os testculos lobulados mesmo quando essa massa continha sua prpria tnica
albugnea, pois, segundo ele, como eles dividem um nico epiddimo isso os torna um nico
rgo. Werner e Drook (1967) observaram o mesmo fenmeno tambm em Leptotyphlops,
mas consideraram o testculo como tendo varias partes ou vrios corpos e no como lobulado.
Nenhum dos autores cita a presena desse fenmeno em tecido renal.
Embora a produo de gametas em caninanas ocorra apenas em um determinado
perodo do ano, como foi discutido, possvel encontrar espermatozides nos ductos
deferentes das Spilotes ao longo de todo o ano. Os espermatozides liberados no lmen dos
tbulos seminferos, durante a estao de espermatognese, so encaminhados para o
epiddimo atravs dos tbulos eferentes e seguem para o ducto deferente onde permanecem
estocados. O processo de estocagem de esperma mais estudado em fmeas (FOX, 1956;
SCHUETT, 1992), mas sabe-se que tambm ocorre em machos (SHINE, 1977a; SAINT-
GIRONS, 1982; CLESSON et al., 2002; ALMEIDA-SANTOS et al., 2004). Alm da funo
de estocagem de esperma, estudos recentes mostram atividade secretora do ducto deferente
107

em viperdeo (SIEGEL et al., 2009) e sugerem que tambm ocorra em colubrdeos
(TRAUTH; SEVER, 2011), essa ao secretora pode ser o que possibilita a estocagem no
ducto. Almeida-Santos et al. (2004) observa ductos convolutos em viperdeos e registra que
esse formato aumenta a rea do canal o que permite a estocagem de um maior volume de
esperma. O ducto deferente das Spilotes pode apresentar-se apenas sinuoso ou ainda
completamente convoluto. Os animais imaturos apresentam sempre os ductos com formato
sinuoso, j os animais maduros em sua maioria apresentam os ductos convolutos, o que
realmente aumenta a rea de estocagem, mas possvel encontrar animais adultos maduros
estocando espermatozides e com ductos apenas sinuosos. Nesse ultimo caso, quando
observados, esses animais so encontrados nas estaes logo aps a poca de cpula.
possvel que animais que tiveram vrias parceiras durante a estao de acasalamento tenham
utilizado um maior volume de gametas e por isso apresentem os ductos sinuosos embora
ainda estoquem um pouco de espermatozides, isso demonstra que os gametas no so
totalmente esgotados dos ductos durante a estao reprodutiva. Esse padro de machos
maduros que aps a poca de cpula apresentam ductos sinuosos no corresponde a maioria.
Comumente o que se observa so ductos convolutos, desta forma provavelmente machos
podem estocar esperma durante todo o ano, independente dos ductos deferentes estarem-se
convolutos ou apenas sinuosos.
Alm dos testculos existe outro rgo que produz uma secreo envolvida com a
reproduo, o rim. Por isso o estudo desse rgo, em especial o segmento sexual renal, deve
ser relacionado com os demais componentes do ciclo reprodutivo (FOX, 1977; SEVER et al.,
2002; SEVER et al., 2007). No se observa mudanas macroscpicas no tamanho dos rins,
das caninanas, em funo da atividade do segmento sexual renal. Esse padro observado na
maioria das serpentes, embora algumas espcies possam mostrar uma variao macroscpica
do rgo (FOX, 1977; SEVER et al., 2007; ROJAS, 2009).
Alm de anlises macroscpicas dos rins, importante observar, se o segmento sexual
renal apresenta uma hipertrofia sazonal, e antes disso, deve-se verificar se essa estrutura, o
segmento sexual renal, apresenta uma correlao com o comprimento do animal. O segmento
sexual renal das espcies estudadas por Aldridge et al. (2011) no apresentou correlao com
o comprimento do animal. Em Spilotes pullatus tanto o dimetro como a espessura do epitlio
do segmento sexual renal dos machos apresenta uma correlao com o comprimento do
animal, existe um crescimento alomtrico. A relao do tamanho do corpo com o dimetro e
espessura do epitlio do segmento sexual renal tambm foi observada por Mathies et al.
(2010) em Boiga irregularis. Esses autores relatam que o segmento sexual renal aumenta em
108

relao ao crescimento do animal at que os animais atinjam cerca de 1.300 mm de
comprimento, e ento, nesse perodo, o segmento atinge a maturao.
Embora machos de caninana no apresentem mudanas renais macroscpicas, quando
se trata de mudanas histolgicas, o segmento sexual renal de Spilotes mostra uma hipertrofia
sazonal. O dimetro dessa estrutura encontra-se maior durante o inverno, mas no ocorre uma
regresso total durante as outras estaes do ano. Exatamente como observado para a maioria
das serpentes (BONS; SAINT-GIRONS, 1962; FOX, 1977; ALDRIDGE; DUVALL, 2002;
ALDRIDGE et al., 2009). J em machos adultos, de lagartos e anfisbendeos, durante a fase
de quiescncia do segmento sexual renal, ocorre uma regresso total, o que torna difcil de
diferenciar a poro do segmento dos outros tbulos urinferos (FOX, 1977; SEVER et al.,
2002). Segundo Krohmer et al. (2009), o segmento sexual renal possui desenvolvimento
ontogentico. E o que se observa em machos imaturos de Spilotes, o segmento sexual renal
no desenvolvido nesses indivduos e por esse motivo difcil de ser observado. O nfron
das fmeas (maduras ou imaturas) se assemelha ao dos machos imaturos, uma vez que as
femas no apresentaram nenhuma poro renal hipertrofiada em funo do ciclo reprodutivo.
O segmento sexual renal no mesmo comum em fmeas, mas pode ser encontrado
desenvolvido no gnero feminino em pelo menos uma espcie de lagarto, ScIncella laterale
(SEVER; HOPKINS, 2005).
O segmento sexual renal andrgeno dependente (KROHMER et al., 2004) e na
maioria das espcies de serpentes a hipertrofia do segmento corresponde estao de
acasalamento (ALDRIDGE et al., 2009). Em machos de caninana, essa hipertrofia
observada no inverno e realmente corresponde a estao de cpula dessa espcie, e ainda
pode-se observar que durante a estao seguinte, primavera, encontra-se uma maior variao
individual no dimetro do segmento sexual renal dos machos, alguns com o segmento
hipertrofiado e outros hipotrofiado. Esse evento provavelmente esteja associado a animais
que copularam e animais que no copularam. Os machos que acasalaram no inverno
provavelmente so os que apresentam o segmento sexual renal j hipotrofiado na estao
seguinte (primavera), uma vez que o produto (secreo) dos rins foi utilizado durante a
cpula, enquanto que os machos que apresentam esse segmento ainda hipertrofiado na
primavera, provavelmente no acasalaram no inverno e por no utilizarem o produto do
segmento sexual renal, ainda exista essa hipertrofia.
O perodo de acasalamento das caninanas compreende principalmente o final do
inverno e no incio da primavera ainda se observa algumas cpulas. Embora, In situ, a estao
de cpula das Spilotes seja o perodo final do inverno, animais mantidos em cativeiro ao
109

longo do ano podem apresentar a estao de cpula prematura, ocorrendo no final do outono.
Isso pode estar relacionado facilidade de alimentao e encontro do parceiro nessas
condies. Anderson (1965) relata um comportamento de corte em Nerodia sipedon fora da
poca de acasalamento da espcie. Segundo Aldridge et al. (2009), pode-se observar
comportamentos de corte fora da estao normal de cpula e no necessariamente refletir um
perodo normal de acasalamento. Embora o observado ex situ em Spilotes pullatus tenha
ocorrido de fato cpula, e no apenas corte. Dessa forma, o inverno parece ser a estao de
cpula das Spilotes independentemente da regio onde elas habitam. Caninanas mantidas em
cativeiro no hemisfrio norte apresentaram a estao de acasalamento nos meses de maro e
abril o que corresponde ao final do inverno e incio de primavera boreal. A ovipostura ocorre
nos meses de abril e junho, primavera boreal. Embora os meses em que se observaram os
eventos reprodutivos no correspondam aos meses observados nos animais do hemisfrio sul,
as estaes em que os eventos ocorrem so as mesmas correspondentes as estaes austrais.
importante ressaltar que devido ao eixo de rotao da Terra ser inclinado, o hemisfrio norte e
sul encontra-se em posies diferentes em relao ao Sol, o que faz com que as estaes
sejam inversas nos hemisfrios (MOURO, 1998). A inclinao no eixo de rotao terrestre
garante que, em determinadas pocas do ano, um dos hemisfrios sempre recebe mais luz
solar durante o perodo de rotao de aproximadamente 24 horas, enquanto que no outro,
ocorre justamente o inverso (LANGHI; NARDI, 2007). As influncias estacionais ambientais
provavelmente sejam os maiores fatores relacionados estao de cpula das Spilotes. Por
esse motivo a cpula observada durante o final do inverno, independente dos meses do ano,
seja inverno austral (hemisfrio sul) ou boreal (hemisfrio norte).
Em Thamnophis a exposio a baixas temperaturas e a perodos de escurido
essencial para o desenvolvimento da receptividade sexual (BONA-GALO; LICTH, 1983).
Embora o estudo com durao de quatro anos realizado por Whittier et al. (1987a), tenha
mostrado que no primeiro ano a temperatura e o fotoperodo teve influncia no acasalamento
dessa mesma espcie, j nos anos seguinte apenas a temperatura influenciou a cpula. Eles
concluram assim como Aleksiuk e Gregory (1974), que a estao de acasalamento
controlada apenas pela temperatura e no pelo fotoperodo. Assim, mais estudos, envolvendo
a inter-relao entre ciclos reprodutivos e o fotoperodo, poderiam ser realizados.
Durante a cpula em serpentes o macho insere o hemipnis na cloaca da fmea.
Embora em algumas espcies a bolsa (vagina) tem formato compatvel com a insero do
hemipnis (LUDWING; RAHN, 1943; ALMEIDA-SANTOS, 2005), e tem sido proposto que
o rgo copulatrio seja introduzido na bolsa durante a cpula (ALDRIDGE, 1992). O
110

mesmo no foi observado para Spilotes, o encaixe do hemipnis na bolsa da fmea no parece
ser possvel. A bolsa marcadamente bilobada diferentemente dos hemipnes que so nicos
(simples), no parecendo ser compatveis de encaixe. A morfologia do hemipnis dos machos
sugere que a introduo desse rgo ocorra apenas a nvel cloacal. Uma vez que a cloaca da
fmea longa e seria possvel abrigar perfeitamente a forma do hemipnis. Provavelmente o
smen depositado na abertura de cada lobo da bolsa, e a funo dessa estrutura seja a de
receber o grande volume de smen depositado pelo macho durante a cpula para ento aos
poucos ser encaminhado a cada oviduto.
Outros trabalhos propem que a insero do hemipnis ocorra apenas a nvel cloacal.
Pope (1941) descreve o hemipnis de Liophis como sendo nico e tendo um perfeito encaixe
com a cloaca longa da fmea. Blackburn (1998) sugere que, em Squamata, comumente o
hemipnis restrito cloaca.
A cpula em serpentes pode ter um perodo longo, durando at 28 horas
(HAMMERSON, 1978; ANTONIO, 1980). Em Spilotes pullatus dura em mdia trs horas.
Esse longo perodo de cpula em serpentes parece estar envolvido com o mecanismo de
ereo do hemipnis, que em serpentes, foi recentemente explicado. O relaxamento do corpo
cavernoso do hemipnis, de serpentes, se d pelo mesmo mecanismo observado em outros
vertebrados. Uma potente neurotoxina que bloqueia os potenciais de ao nos nervos
envolvida no processo, a tetrodoxina. Essa neurotoxina liga-se aos poros dos canais de sdio,
existentes nas membranas das clulas nervosas, levando ao relaxamento do corpo cavernoso
(ver CAPEL et al., 2011). Dessa forma, a longa durao da cpula em serpentes, parece estar
envolvida com a descoberta da presena de um canal de sdio resistente a tetrodoxina, no
corpo cavernoso dos hemipnes desse taxon. Esse canal de sdio diferenciado, resistente a
tetrodoxina, pode ser responsvel pela resposta lenta do msculo liso aps a estimulao do
nervo, e parece explicar a durao longa da cpula em serpentes (para detalhes ver CAPEL,
et al., 2011).
Antes da cpula, em Spilotes, os machos cortejam as fmeas. Em animais mantidos em
cativeiro observa-se que o cortejo comea ocorrendo seis dias antes de a cpula acontecer. H
muito tempo tem se observado uma longa durao de corte e cpula em serpentes. Ruthven
(1912) observou o comportamento de corte de cinco machos em uma fmea de Thamnophis
em cativeiro. Este autor registrou que a fmea foi cortejada por todos os machos durante cinco
dias antes da cpula, que teve a durao de duas horas e quinze minutos. Fmeas que so
atrativas e no receptivas aos machos tem sido observadas por outros autores (e.g.
WHITTIER; TOKARZ, 1992; ALDRIDGE et al., 2005). Esse perodo longo de corte
111

observado em Spilotes bem como em outras serpentes ex sito, onde se observa fmeas
atrativas aos machos, mas no receptivas, provavelmente compreende o perodo de proestro
observados em espcies de mamferos. O proestro a fase que antecede o estro no ciclo estral
dos mamferos, essa fase caracterizada, assim como o estro, por altos nveis de estrognio.
No entanto, diferente do estro, fase em que as fmeas aceitam a cpula, durante o proestro as
fmeas de mamferos so atrativas para os machos, mas no so receptivas, e, no aceitam a
cpula (para detalhes ver HEAPE, 1900). A condio de cativeiro talvez facilite a observao
dessa fase de proestro em serpentes, uma vez que as fmeas ex situ, mantidas juntamente com
os machos em uma rea limitada durante todo o perodo, no tem como escaparem da corte
dos machos na nesta fase, j na natureza essas fmeas em proestro, que esto atrativas, mas
no receptivas aos machos, so podem se esquivar da corte.
O comportamento reprodutivo em serpentes envolve a corte, cpula, e em algumas
espcies, combate entre os machos (CARPENTER, 1977). Das 2.700 espcies de serpentes
somente para 6% tem se registrado combate entre machos (SHUETT et al., 2001). Durante o
final da poca de cpula (incio da primavera) foi observado combate entre machos de
caninanas, e em dois dos trs relatos havia uma fmea por perto. O ritual de combate das
Spilotes parece consistir em atingir com a cabea uma posio superior cabea do oponente,
mostrando ser maior e superior ao adversrio, o que provavelmente impressionaria a fmea.
Durante o ritual os machos se entrelaam, realizando uma toro entre seus corpos. O
entrelaamento dos corpos parece ser conseqncia da tentativa de alcanar o objetivo do
combate. possvel perceber que ao entrelaar o concorrente o macho consegue segurar o
oponente e encurtar o corpo do mesmo de forma que ele no possa ter a cabea em uma
posio superior a sua, o que leva o macho, que est em desvantagem, muitas vezes recuar.
Dessa forma, desfazendo, em parte, o entrelaamento, ele aumenta a rea livre do corpo. Com
o corpo esticado (e no entrelaado), ele aumenta o alcance e consegue sobrepor sua cabea a
cabea do oponente. Esse objetivo de manter a cabea superior pode ser uma tentativa de se
mostrar um macho maior. Schuett (1997) demonstrou que o tamanho dos machos
importante para o sucesso no combate e prioridade para o acasalamento. Carpenter (1977)
descreve o combate para colubrdeos como sendo praticamente horizontal com os animais
elevando, raramente, apenas a cabea e parte do pescoo cima do cho, com exceo de
algumas espcies do velho mundo como Elaphe longissima e Ptyas mucosa que levantam a
regio cranial do corpo e tenta fora a cabea do oponente para baixo. Almeida-Santos e
Marques (2002) demonstram que Chironius no se enquadra nesse padro geral descrito para
colubrdeos por Carpenter (1977), segundo os autores, a espcie apresenta um ritual de
112

combate em que os machos tendem a manter a poro cranial do corpo elevado na vertical.
Essa postura de elevao da poro cranial do corpo tpica de viperdeos e nota-se, alm da
posio vertical, uma tentativa de empurrar a cabea do oponente para baixo (CARPENTER,
1977). As espcies de colubrdeo citadas por Carpenter (1977) e a estudada por Almeida-
Santos e Marques (2002), assim como Spilotes pullatus, so espcies semi-arborcolas, o que
sugere que os colubrdeos que utilizem esse substrato apresentem um ritual de combate
adotando a elevao da poro cranial do corpo, semelhante aos viperdeos, e no de forma
horizontal como outros colubrdeos. Embora haja uma semelhana na postura do ritual de
combate de Spilotes com o dos viperdeos, o combate completamente diferente. Em
viperdeos, como citado, observa-se os machos tentando empurrar a cabea do oponente
contra o cho (CARPENTER, 1977), o que leva a acreditar que o objetivo da competio
conter fora a cabea do rival, j em caninanas o objetivo do combate parece ser manter a
cabea em altura superior a do oponente, para se mostrar maior. O combate em Spilotes tem
durao aproximada de uma hora, apesar do longo tempo do ritual, o combate inofensivo
para os participantes, no resulta em qualquer tipo de prejuzo fsico, alm do gasto energtico
para os machos envolvidos.
Em dois dos casos de combate observados, havia trs animais, dois dos quais
participavam do ritual e ao final do combate, o provvel vencedor copulou com o terceiro
animal. O que leva a acreditar, que o motivo do combate foi o acesso a fmea que estava nas
cercanias. O comportamento de combate em serpentes normalmente ocorre durante a estao
de acasalamento e principalmente relacionado cpula (CAPULA; LUISELLI, 1997;
SCHUETT et al., 2001; ALMEIDA-SANTOS; MARQUES, 2002), como nesses dois relatos
observados em caninanas. No entanto, uma observao de combate entre machos de Spilotes
ocorreu na primavera, no final da estao, o que no corresponde mais a poca de cpula da
espcie. Assim, o motivo inicial para o combate, pode ser alguma forma de dominncia ou
territorialismo (MARQUES et al., 2009). Nesse caso s havia dois indivduos e os mesmos
estavam combatendo, algumas vezes os machos utilizavam a cauda na tentativa de conter o
oponente. Nesse relato foi observado exposio do hemipnis de um dos animais. Almeida-
Santos et al., (1998) tambm observou em Micrurus frontalis um comportamento agonstico.
Embora comportamento homossexual ocorra em serpentes, nem sempre essa conduta pode ser
considerada um caso desse tipo de comportamento. Em alguns casos esse procedimento pode
estar relacionado interaes de subordinao e dominncia (TRYON; MURPHY, 1982). Em
caninanas, parece que a ao de expor o hemipnis, durante o combate, no se trata de
comportamento homossexual ou interaes de subordinao e dominncia, como observados
113

por Tryon e Murphy (1982). A exposio do rgo copulatrio com tentativa de introduzi-lo
no outro macho, parece ter sido uma estratgia de conteno, com o objetivo de prender o
corpo do rival impedindo que ele pudesse se locomover a frente, e com isso ganhar
comprimento, para alcanar com sua cabea a posio mais elevada, mostrando ser maior e
superior. A utilizao do hemipnis, portanto, parece ter tido a mesma funo da utilizao da
cauda, a de conteno. Se o macho conseguisse introduzir o rgo copulatrio no outro e o
intumescer, a conteno seria bem mais eficiente, uma vez que a cauda desliza com facilidade
e o hemipnis intumescido na cloaca manteria o oponente preso.
O combate entre machos normalmente est presente nas espcies que apresentam
dimorfismo sexual de tamanho, sendo os machos maiores do que as fmeas (SHINE, 1994).
Spilotes no apresenta dimorfismo sexual de tamanho, ambos, machos e fmeas, apresentam
um comprimento (CRC) semelhante. No entanto, quando analisados por meio do clculo de
ndice de Dimorfismo Sexual, o resultado mostra machos maiores do que fmeas. Segundo
Marques e Muriel (2007) a maioria dos trabalhos tem mostrado que em colubrdeos
neotropicais as fmeas so maiores do que os machos (e. g. FOWLER; SALOMO, 1994;
MARQUES, 1996; OLIVEIRA, 2001; PIZZATTO; MARQUES, 2002), mas na subfamlia
Colubrinae isso parece no ser o padro (e. g. SHINE, 1994).
Como discutido anteriormente, a gametognese das Spilotes machos ocorre no vero e
outono e a cpula em final de inverno. Sendo assim, os machos ao acasalarem esto com os
testculos inativos, os espermatozides transmitidos para o trato reprodutivo da fmea so
gametas que se encontram estocados no ducto deferente. A gametognese das caninanas
fmeas tem incio no outono, a poca em que a espermatognese nos machos est sendo
finalizada exatamente o perodo em que os folculos ovarianos das fmeas comeam a
receber vitelo. No inverno o tamanho dos folculos aumenta consideravelmente, o que
coincide com a estao de acasalamento da espcie. Blanchard e Blanchard (1941) discutem
que a inseminao estimulou a vitelognese na espcie estudada por eles (Thamnophis s.
sirtalis). Bona-Gallo e Licht (1983) estudaram a influncia da temperatura e da inseminao
na iniciao da vitelognese em outra subespcie de Thamnophis sirtalis e perceberam que
apenas as fmeas que haviam acasalado iniciaram a vitelognese. Os autores concluram que a
inseminao parece ser um pr-requisito para a iniciao da vitelognese. Mendona e Crews,
(1990) tambm afirmam que o acasalamento induz a recrudescncia ovariana em
Thamnophis. Em Spilotes, embora a estao de acasalamento coincida com o aumento dos
folculos, o estmulo da inseminao no parece iniciar a vitelognese. De cinco fmeas
analisadas histologicamente que continham folculos pr-ovulatrios, trs haviam sido
114

inseminadas e duas no apresentavam espermatozides no sistema reprodutor. Isso indica que
mesmo fmeas que no foram inseminadas iniciam a vitelognese e os folculos chegam a um
tamanho considervel, exatamente como em fmeas inseminadas. Uma fmea sacrificada
durante a cpula foi necropsiada e j apresentava folculos pr-ovulatrios nos ovrios, o que
sugere que a inseminao no induz o inicio da vitelognese nas Spilotes, mas sim que o estro
das fmeas corresponde fase final do ciclo ovariano. E, portanto, fmeas com folculos pr-
ovulatrios, coincidentemente, encontram-se em estro e so atrativas e receptivas aos machos.
Whittier e Crews (1986) e Whittier et al. (1987b) afirmam que a corte e o acasalamento no
foi requisito para o inicio da vitelognese em Thamnophis estudadas por eles (mesma espcie
estudada pelos autores citados a cima). Aldridge et al. (2009) propem uma hiptese
alternativa para esses achados, sugerindo, que apenas fmeas em inicio de vitelognese so
atrativas para os machos e receptivas copula. Essa alternativa proposta por Aldridge et al.
(2009) pode fazer sentido, mas talvez no exista uma ligao direta entre a vitelognese e
fmeas receptivas, como ele relaciona. Em Spilotes as fmeas receptivas so as que
apresentam o estgio final da vitelognese, e se em Thamnophis o que se observa so fmeas
receptivas no incio da vitelognese, pode-se simplesmente concluir que as espcies de
serpentes apresentam o estro em diferentes perodos, e no parece ser a vitelognese que
influencia o estro nessas fmeas, bem como no parece ser a cpula que influencia o incio da
vitelognese.
Sugere-se, que todas as fmeas maduras sexualmente de Spilotes pullatus iniciem o
desenvolvimento folicular e desenvolvam folculos pr-ovulatrios durante a estao
reprodutiva (inverno), pois todas as fmeas no final de inverno apresentam os folculos pr-
ovulatrios. Na primavera algumas fmeas apresentam os ovos nos ovidutos, as que no
apresentam ovos, so fmeas que possuem folculo em estgio inicial (vitelognese primria)
e apresenta o oviduto distendido e/ou cicatriz de ovulao nos ovrios, o que indica que essas
fmeas ovularam e fizeram ovipostura durante a estao. Todas essas fmeas da populao
ciclando no mesmo perodo permite classificar o ciclo das caninanas fmeas como sazonal de
acordo com a classificao de Mathies (2011), e ainda sugere que Spilotes possui um ciclo
anual. Existem algumas fmeas na primavera que no apresentam nem ovos nem sinais de que
fizeram ovipostura, e ainda apresentam folculos grandes na primavera, mas os folculos so
menores do que os das fmeas com folculos pr-ovulatrios no final do inverno. Isso pode
indicar que essas fmeas, por no ovularem no inverno, podem ter entrado em um estgio de
involuo folicular, ou seja, esses folculos seriam absorvidos pelo organismo da fmea, e por
isso essas fmeas apresentam folculos intermedirios entre pr-ovulatrio e primrios. Dessa
115

forma, sugere-se que em Spilotes a cpula seja responsvel pela induo da ovulao nas
fmeas, e que, portanto as caninanas que no copularam no final do inverno teriam seus
folculos absorvidos durante a primavera. Isso caracterizaria as caninanas, como animais de
ovulao reflexa.
bem conhecido para varias espcies de mamferos (e. g. gatos, ferrets, ursos, lhamas
e coellhos) que a cpula o estmulo primordial para que ocorra a ovulao, o que chamado
de ovulao reflexa (para reviso, ver KAUFFMAN; RISSMAN, 2006). Esse fenmeno
pouco estudado em rpteis, foi sugerido na espcie de serpente Boiga irregularis por Mathies
et al., (2004) e demonstrado na espcie de quelnio Caretta caretta por Manire et al., (2008).
Em espcies com ovulao reflexa, vrios estmulos so importantes para que ocorra a
ovulao, mas o principal o estmulo da vagina e da crvix durante o coito (KAUFFMAN;
RISSMAN, 2006).
Os hemipnes de caninanas possuem numerosos espinhos, principalmente na poro
mdia do rgo. Esses espinhos nos hemipnes podem ser formados de uma matriz de
colgeno altamente calcificada, como o observado em Crotalus (CAPEL et al., 2011). Talvez
a presena de espinhos no corpo dos hemipnes de Spilotes possua uma funo estimulatria a
nvel cloacal para induzir a ovulao na fmea. Em algumas espcies de mamferos em que as
fmeas possuem ovulao reflexa, uma das funes que tem sido proposta para os espinhos
penianos dos machos a de estmulo para ovulao (e.g. ZARROW; CLARK, 1968). Nesse
caso, os espinhos dos hemipnes das Spilotes pode no ter apenas a funo de ancoragem do
hemipnis na cloaca da fmea durante a cpula, como sugerido por Pope (1941) e Ludwig e
Rahn (1943). O hemipnis introduzido em uma condio de meio intumescido e depois de
introduzido ocorre a intumescncia completa do rgo (EDGREN, 1953). Os machos de
caninana possuem um hemipnis robusto e com um dimetro grande, o prprio rgo
intumescido causa uma dilatao na regio da cloaca da fmea de Spilotes como o observado
tambm em por Edgren (1953) em Heterodon platyrhIno. Essa prpria dilatao, por si s,
provavelmente cause um atrito no interior da cloaca da fmea, mantendo-o ancorado durante a
cpula. Portanto, conclui-se que os espinhos so teis, porem, dispensveis para est funo.
Sugere-se que esses espinhos nos rgos copulatrios de Spilotes tenham tambm uma funo
estimulatria. Pope (1941) relata ainda que a parede interna da cloaca da fmea, de espcies
cujo macho possui espinhos nos hemipnes, espessa, e que a parede da cloaca de fmeas, de
espcies em que os machos no possuem espinhos no rgo copulatrio, fina. Essa regio da
cloaca em Spilotes pullatus apresenta-se realmente bem espessa e pode estar relacionada a
uma rea rica em receptores que captariam os estmulos relacionados ovulao reflexa.
116

No momento da ovulao preciso que os ovidutos j estejam preparados para a
produo dos ovos. A diferenciao e o crescimento das glndulas uterinas da casca do ovo
ocorrem durante o perodo de crescimento folicular e vitelognese, antecedendo a ovulao
(GIRLING, 2002). As fmeas de caninanas apresentam a hipertrofia das glndulas da casca
diretamente relacionada com a vitelognese. Fmeas com folculos pr-ovulatrios
apresentam as glndulas endometriais, presentes no oviduto mdio, hipertrofiadas. Logo aps
a ovulao, principalmente nas 24h subsequentes, as glndulas uterinas dos squamatas
ovparos secretam as fibras proticas que se depositam ao redor do ovo formando a casca
(PALMER et al., 1993). Uma vez que a cpula em caninanas ocorre quando os folculos
encontram-se pr-ovulatrios, possvel correlacionar a hipertrofia das glndulas ao perodo
de cpula das caninanas, assim como se relaciona a hipertrofia do segmento sexual renal do
macho ao perodo de cpula.
Outro tipo de glndula encontrada nos ovidutos de Spilotes pullatus, e que so
relacionadas com reproduo, so glndulas alveolares com ductos formados por clulas
ciliadas. Alguns trabalhos relatam que essas glndulas se comunicam com receptculos
seminais ou tbulos de estocagem de espermatozides (FOX, 1956; PERKINS; PALMER,
1996; ROJAS, 2009). Em Spilotes s foram observados os ductos ciliados e em nenhum
animal se observou espermatozides nesse local. Como essa espcie apresenta fertilizao
logo aps a cpula essas glndulas podem ter a funo de abrigarem os espermatozides
apenas durante a ovulao. Como um abrigo, para que esses gametas no estejam no lmen do
oviduto quando o primeiro folculo ovulado for em direo ao tero. Essa ao poderia
empurrar os espermatozides para o oviduto mdio. Uma vez que os espermatozides
encontram-se nos ductos dessas glndulas, e no no lmen, medida que cada folculo passar
no infundbulo em direo ao tero mdio, esses gametas podem sair dos ductos e tentarem a
fecundao de todos os folculos. Talvez apenas essas glndulas sejam suficientes para esta
funo, como essa espcie no necessita estocar os espermatozides por um longo tempo,
pode ser que no haja a necessidade de grandes receptculos.
Os folculos das caninanas que esto prximos de serem ovulados (pr-ovulatrios)
bem como os ovos possuem um formato esfereide. Esses folculos possuem em mdia
41,10mm ( 4,67), e os ovos medem em mdia 53,97mm ( 8,06) de eixo maior. Os folculos
pr-ovulatrios esto dispostos alinhados nos ovrios com uma leve inclinao em relao ao
plano horizontal do animal, de forma com que a poro caudal do folculo mais cranial
sobrepe regio cranial do mais caudal. Essa disposio ocupa menos espao dentro da
cavidade celomtica das fmeas, permitindo o desenvolvimento de um nmero maior de
117

folculos, o que importante para essa espcie, uma vez que a fecundidade baixa. O
tamanho do ovo no relacionado ao tamanho da fmea, fmeas menores podem apresentar
ovos de tamanhos maiores do que fmeas maiores, embora a quantidade de ovos nesse caso
seja menor. Sugere-se que o tamanho dos ovos possui uma relao inversa a quantidade dos
mesmos. A mdia de ovos postos pelas caninanas de 8,82 ( 1,81) ovos por postura.
Marques (1998) sugere que serpentes arborcolas apresentam menor fecundidade, bem como
serpentes ovparas, o que talvez justifique a baixa fecundidade da Spilotes em relao ao
grande tamanho corporal das fmeas.
A espcie possui uma baixa fecundidade, mas certas fmeas podem compensar o baixo
nvel de fecundidade produzindo mais de uma ninhada na mesma estao reprodutiva. Uma
fmea mantida em cativeiro no hemisfrio norte produziu uma primeira ninhada de sete
animais, logo aps a ovipostura a fmea apresentou estro (encontrava-se receptiva ao macho)
e permitiu a cpula. Posteriormente est fmea realizou uma segunda postura de oito ovos. Os
quinze ovos foram fertilizados e eclodiram. Tryon e Murphy (1982) alegam que em condies
timas de cativeiro (ciclos naturais de fotoperodo e temperatura) a produo de mais de uma
ninhada completamente possvel em certo nmero de espcies, e parece ser dependente de
disponibilidade de comida e tambm de machos no perodo certo do ano.
Uma das fmeas de caninanas In situ, dissecada para as anlises, apresentava folculos
pr-ovulatrios nos ovrios juntamente com a poro caudal do oviduto distendido. Essa
regio ovidutal distendida pode estar relacionada postura recente realizada pela fmea, uma
vez que o tamanho consideravelmente grande dos ovos de Spilotes causa uma distenso da
musculatura ovidutal. Pelo fato da fmea ao mesmo tempo apresentar caractersticas de uma
fmea ps-postura e apresentar folculos pr-ovulatrios nos ovrios, pode-se concluir que
mesmo as fmeas In situ de Spilotes pullatus podem apresentar mais de uma prenhez em uma
mesma estao de cpula. Anlises histolgicas do oviduto dessa fmea mostram a presena
de espermatozides na bolsa, indicando que a mesma havia copulado mesmo aps uma
prenhez. Tal fato sugere que as fmeas da espcie, que produzem uma segunda ninhada na
estao reprodutiva, apresentam estro aps a ovipostura e so receptivas aos machos.
Para outras espcies da subfamlia colubrinae j foram relatadas ocorrncia de
ninhadas mltiplas (PINTO et al., 2010; TRYON, 1984). Assim como a Spilotes, essas
espcies parece apresentarem uma taxa de fertilidade baixa (o nmero de ovos relatados em
cada ovipostura parecido com a mdia observada para Spilotes pullatus). Ninhadas mltiplas
podem ser comuns em espcies de colubrdeos. Essa estratgia parece estar associada ampla
disponibilidade de comida e boas condies ambientais durante o ano (BROWN; SHINE,
118

2002). Pinto e Marques (2010) mostram que embora a ocorrncia de ninhadas mltiplas
possa indicar um padro reprodutivo assazonal, foi possvel observar a ocorrncia de ninhadas
mltiplas nas duas espcies de colubrinae estudadas por eles e que apresentam reproduo
sazonal, e que, portanto, essa ninhada mltipla seria provavelmente observada somente
durante a estao chuvosa. O mesmo observado nas Spilotes, fmeas podem apresentar a
produo de mais de uma ninhada, mas durante apenas a estao reprodutiva.
Uma vez que a produo de ninhadas mltiplas pode ser comum em espcies de
colubrdeos (BROWN; SHINE, 2002), para diferenciar fmeas que apresenta mais de um
estro (produzem mais de uma ninhada) apenas dentro de um perodo no ano das fmeas que
apresenta mais de um estro ao longo de todo o ano (produzem ninhadas mltiplas ao longo de
todo o ano), propem-se a classificao dos ciclos reprodutivos das serpentes em: Ciclo
poliestral estacional, o que indicaria que as fmeas (poliestricas estacionais) podem
apresentar mais de um estro, desde que apenas dentro de uma estao de acasalamento
sazonal, produzindo mais de uma ninhada nesse perodo. Diferenciando das fmeas que
possuem ninhadas mltiplas ao longo de todo o ano (reproduo assazonal) que poderiam ser
classificadas como poliestricas (ciclo poliestral). E ainda o termo, monoestrica utilizado
para as fmeas que apresentem apenas um estro por estao de acasalamento (ciclo
monoestral) (a classificao sugerida aqui est sumarizada no Quadro 6).

Ciclo Reprodutivo
Quantidade de ninhadas (estro) Sazonal Contnuo
Uma ninhada (estro) Ciclo monoestral -
Mais de uma ninhada (estro) Ciclo poliestral estacional Ciclo poliestral

Brown e Shine (2002) relacionam a produo de mais de uma ninhada durante a
estao reprodutiva a disponibilidade de alimento ao longo do ano. Spilotes possui uma dieta
bem ampla, composta de pequenos mamferos, aves, ovos e morcegos (MARTINS;
OLIVEIRA, 1998; BOOS, 2001), o que demonstra que a disponibilidade de alimento
abundante para essa espcie.
Quadro 6 - Possvel classificao de ciclos reprodutivos de serpentes em relao ao estro das fmeas
119

Analisando a atividade alimentar (forrageiro) da espcie, observamos que macho de
caninanas tendem caar durante todo o ano, a alimentao continua por mais que a atividade
diminua um pouco no outono e inverno. Quando se trata das fmeas, essa atividade
diferenciada. Elas tendem forragear principalmente no vero aps a estao de oviposio
(primavera). Foi observada uma diminuio na frequncia de forrageio com o decorrer das
estaes (outono, inverno e primavera), sendo a primavera a estao onde praticamente no se
observa atividade de caa pelas fmeas. Shine (1977b) relata que em espcies vivparas a
diminuio da alimentao ocorre a partir do meio da prenhez devido sobrecarga de peso
que a fmea atinge em funo do desenvolvimento da ninhada. Em caninanas essa diminuio
na alimentao ocorre antes da prenhez, durante a vitelognese, uma vez que os folculos pr-
ovulatrios j apresentam um tamanho consideravelmente grande. medida que os folculos
vo aumentando de tamanho na cavidade celomtica da fmea eles ocupam um maior volume,
durante o inverno e primavera as fmeas apresentam os maiores folculos (folculos pr-
ovulatrios) e ovos, consequentemente o espao interno na cavidade celomtica diminui,
como o oviduto e os ovrios so paralelos ao intestino, em fase final de ciclo reprodutivo
existe uma dificuldade de passagem de contedo alimentar nessa regio, o que sugere ser um
dos motivos pelo qual as fmeas diminuem a atividade alimentar durante esse perodo.
A caninana um colubrdeo que caa de forma ativa, buscando sua presa em abrigos
ou ninhos, tanto no cho como em copas de rvores (MARQUES, 1998). Como essas fmeas
encontram-se mais pesadas durante a fase final do ciclo, em virtude dos grandes folculos e
ovos na cavidade celomtica, isso dificulta a locomoo o que leva a diminuio da caa de
forma ativa, sendo esse outro provvel motivo pelo qual as fmeas diminuem a atividade
alimentar durante essa fase.
J aps a estao de ovipostura, o nmero de fmeas se alimentando maior do que o
de machos, o que justifica, uma vez que as fmeas passaram um perodo sem se alimentarem
e a demanda de energia maior do que a dos machos que se alimentam continuamente.
Embora a maioria das fmeas tende a no se alimentar durante a fase final do ciclo
reprodutivo, isso no representa uma regra, existem fmeas In situ que mesmo em fase final
de ciclo se alimentam, o que sugere que sejam essas as fmeas que apresentem a produo de
mais de uma ninhada dentro da mesma estao reprodutiva. Algumas fmeas ex situ tambm
se alimentam durante a fase final do ciclo, e outras fmeas rejeitam o alimento, algumas
fmeas produzem mais de uma ninhada na mesma estao reprodutiva, e outras no. Isso
demonstra que no apenas a disponibilidade de comida e condies timas ambientais que
influenciam a produo de mais de uma ninhada na estao reprodutiva, existem fatores
120

individuais como a capacidade de caar e obter sucesso nesta atividade durante a prenhez,
bem como o prprio interesse em se alimentar e capacidade de digesto durante esse perodo.
A postura dos ovos de caninana ocorre no inicio da primavera, incio da estao
chuvosa. Durante esse perodo possvel encontrar fmeas com o oviduto distendido devido
ovipostura ou ainda cicatriz de ovulao nos ovrios. Outros colubrdeos da regio sudeste do
Brasil apresentam esse mesmo perodo do ano como poca de postura dos ovos, e. g.
Oxyrhopus guibei (PIZZATTO; MARQUES, 2002), Mastigodryas bifossatus (MARQUES;
MURIEL, 2007), Chironius flavolIneatus e C. quadricarInatus (PINTO et al., 2010). Esse
perodo representa temperatura e umidade timas para a incubao dos ovos e para o
desenvolvimento dos embries. Fmeas que pem seus ovos em temperatura tima para o
desenvolvimento dos embries produzem um maior nmero de filhotes normais (sem m
formao congnita) e aumenta sua contribuio para geraes futuras (VINEGAR, 1977).
Alem disso, filhotes nascidos em temperaturas mdias (tima) emergem dos ovos em menos
tempo do que filhotes incubados em altas ou baixas temperaturas. Os filhotes incubados em
temperaturas baixas tm mais dificuldades de se locomoverem, capturar e comer alimentos do
que os filhotes incubados em temperaturas mdias ou altas. A temperatura no influencia
apenas o perodo de incubao, mas tambm o desempenho dos filhotes necessrio para a
sobrevivncia (BURGER, 1991).
O tempo de incubao dos ovos de Spilotes pullatus dura em mdia 73 dias, e a
ecloso ocorre durante o vero. Os animais mantidos em cativeiro e que fizeram a ovipostura
durante o inverno (e no durante a primavera, como observado nos animais In situ) possuem
um perodo de incubao maior, em mdia 102 dias. Segundo Packard et al. (1983) e Gutzke
e Packard (1987) o perodo de incubao diretamente influenciado pela temperatura de
incubao, o que justificaria o longo perodo de incubao dos ovos das Spilotes cativas que
fizeram ovipostura no inverno, j que a temperatura dessa estao no seria a tima para a
incubao dos ovos desse colubrdeo.
Em algumas fmeas do final da primavera e do vero, estaes aps a o perodo
reprodutivo, foi possvel observar toda a regio da submucosa da tuba completamente
margeada por glndulas acinosas simples, essas glndulas desembocam seus ductos no lmen
do oviduto. Durante outras estaes e mesmo em algumas fmeas durante o vero ou
primavera, no foi observado qualquer tipo de glndula na tuba. Por essas glndulas serem
observadas em apenas algumas fmeas das estaes ps-postura e no em todas as fmeas
dessa estao, provavelmente seja um tipo de glndula que se desenvolva em um perodo
curto e por isso de difcil observao. Em tartarugas, Sharkar et al. (1995) observou que
121

durante um curto perodo, no pico do ciclo reprodutivo, da ovulao at oviposio, surgem
glndulas na submucosa na regio do infundbulo e istmo do oviduto. Mas o trabalho relata
que essas glndulas esto presentes durante toda a fase do ciclo nas outras regies do oviduto.
As glndulas observadas na tuba do oviduto de Spilotes, e que parece surgir apenas por um
curto perodo aps a estao de postura, no se parece com nenhum outro tipo de glndula
observada em outras pores do oviduto, sugerindo se tratar de uma glndula com outra
funo. Provavelmente a funo dessas glndulas no esteja relacionada com a produo dos
ovos, uma vez que elas s foram notadas em algumas fmeas aps a estao de ovipostura e
que apresentavam apenas folculos primrios nos ovidutos. Essas glndulas podem estar
envolvidas com algum tipo de secreo que ajudaria a recuperao dos ovidutos aps a
oviposio. Em varias descries de ovidutos de Squamata, o infundbulo e a tuba no so
diferenciados (ver reviso GIRLING, 2002). Em Spilotes sugere-se a diferenciao dessas
regies, uma vez que, mesmo que aparentemente por um perodo curto, h uma diferena
histolgica e provavelmente funcional dessas pores.
O padro de atividade de serpentes tropicais tem uma forte influncia de vrios
fatores, dentre eles a reproduo (MARQUES et al., 2000). A atividade anual das caninanas
tem certa relao com o ciclo reprodutivo da espcie, mas relao direta, apenas com
determinados eventos do ciclo. A espcie mostra uma atividade maior durante o vero e incio
do outono, tanto adultos como juvenis. O pico de atividade dos filhotes est relacionado
fatores reprodutivos (recrudescncia). Como a ecloso dos ovos ocorre durante o vero de se
esperar que durante essa estao e a estao seguinte, outono, se observe um maior nmero de
juvenis na populao. Outros trabalhos tambm tm mostrado o pico de atividade dos filhotes
durante a estao de ecloso dos ovos, e tambm a estao logo aps esse perodo (e.g.
SALOMO et al., 1995; ROJAS, 2009). J a maior atividade dos adultos, durante o vero e
incio do outono, no parece estar relacionada diretamente com a reproduo. Outro fator que
pode influenciar a atividade de certas espcies a disponibilidade de alimentos (MARQUES
et al., 2000). O trabalho de Marques et al., (2000) sobre atividade sazonal, relata que de
quatro espcies com base na mesma dieta, roedores, apenas uma no variava o padro de
atividade, as outras trs, dentre elas Spilotes pullatus, apresentavam uma sazonalidade na
atividade. Com isso, o trabalho conclui que a disponibilidade de presas por si s no
explicaria a atividade sazonal em Spilotes e nas outras duas espcies. Como discutido
anteriormente, os machos de caninanas caam durante todo o ano, j as fmeas tendem a se
alimentarem mais durante o perodo do vero e outono (perodo entre um ciclo reprodutivo e
outro), a atividade de caa dos machos juntamente com a das fmeas, durante esse perodo,
122

pode contribuir para esse pico de atividade dos adultos, durante essa poca. Essa sazonalidade
observada em caninanas, realmente no justificada somente com disponibilidade de presas,
mas pode estar relacionada ao maior perodo de forrageio da espcie, perodo esse em que
machos e fmeas encontram-se forrageando. Portanto o pico de atividade de Spilotes adultas
tem uma relao direta com o forrageio das fmeas e, o declnio de atividade, uma relao
direta com a fase vitelognica das fmeas, uma vez que, mesmo com disponibilidade de
presas o forrageio das fmeas tende a diminuir de acordo com o avano do desenvolvimento
folicular ovariano.
Os outros eventos do ciclo como, corte, cpula e ovipostura no influenciam no pico
da atividade sazonal dos adultos, mas pode ser observado um pequeno aumento na atividade
correspondendo poca desses eventos, que ocorrem no final do inverno e incio da
primavera.
Existem alguns trabalhos que sugerem a classificao dos ciclos reprodutivos de
serpentes. Aldridge et al. (2009) sugerem o termo pr-ovulatrio e ps-ovulatrio para
descrever a ocorrncia temporal da espermatognese, vitelognese, comportamento de
acasalamento e produo de hormnios em serpentes. Onde pr-ovulatrio seria o perodo em
que o evento ocorreria imediatamente antes da ovulao e ps-ovulatrio o perodo em que o
evento ocorreria depois da ovulao. As caninanas da regio sudeste do Brasil possui os
testculos ativos, realizando a espermatognese, durante o vero e outono, e os
espermatozides so estocados, ao longo dos ductos deferentes, durante todo o inverno,
quando os testculos encontram-se inativos, e ento ocorre a cpula e ovulao. A
espermatognese das caninanas pode ento ser classificada de acordo com a ocorrncia
temporal em, ps-ovulatria. A vitelognese seria classificada como pr-ovulatria, uma vez
que se inicia no final de outono e a ovulao ocorre no final do inverno. E a cpula tambm
considerada pr-ovulatria, j que a espcie copula e a ovulao ocorrer dentro de pouco
tempo depois.
Assim como os machos possuem um perodo de quiescncia na espermatogne
(inverno e primavera), e portanto so classificados como tendo gametognese cclica
descontnua, a gametognese da fmea tambm tem um perodo de quiescncia (primavera e
vero), e isso a classifica como cclica descontnua. Uma vez que esse ciclo sincronizado em
todas as fmeas da populao, logo, assim como os machos, o ciclo das caninanas fmeas
tambm sazonal (de acordo com a classificao sugerida por MATHIES, 2011).

123

H muitos anos atrs, o Rio Iguau corria livre, sem
corredeiras e nem cataratas. Ali era a morada do deus Mboi,
senhor da terra, um deus que tInha a forma de uma serpente e
era filho de Tup, o deus supremo. O cacique da tribo, o
guerreiro Igobi, tInha uma filha de nome Naipi, a ndia mais
bonita da tribo. Como era de costume consagrar a jovem mais
bonita da tribo ao deus serpente, Naipi foi consagrada Mboi
passando a viver somente para ele. Mas havia entre os ndios
da tribo um forte guerreiro, jovem e valente, chamado Tarob,
que se apaixonou por Naipi. Um dia foi anunciado a festa da
consagrao da jovem ndia. Enquanto o paj e os caciques
bebiam cauim, bebida feita de milho fermentado, e os
guerreiros danavam, Tarob raptou a formosa Naipi. Fugiu
com ela rio abaixo numa canoa que era rapidamente arrastada
pela correnteza das guas. Quando Mboi, o deus serpente,
ficou sabendo que Naipi tInha desaparecido, ficou muito bravo
e tomado pela fria, o deus Mboi penetrou nas entranhas da
terra e retorceu seu corpo de serpente, isso fez com que a terra
rachasse e naquele ponto se abriu uma extensa e terrvel
catarata. Na queda, de oitenta metros de altura, a pequena
canoa desapareceu para sempre. Naipi foi transformada em
uma das grandes rochas centrais das cachoeiras. Tarob virou
uma palmeira, a beira do abismo, InclInada sobre as gargantas
do rio. Bem debaixo de seus ps encontra-se a entrada da gruta
onde o deus serpente, permanece ali, vigiando Tarob
condenado a contemplar eternamente sua amada sem poder
toc-la.
(Lenda indgena caingangues que explica a origem das
Cataratas do Iguau)

124

6 CONCLUSO

As caninas, Spilotes pullatus, da regio sudeste do Brasil apresentam um ciclo
reprodutivo sazonal anual, com as fmeas podendo apresentar mais de um estro durante o
perodo de acasalamento (polistricas estacionais). Os machos possuem os testculos ativos,
produzindo gametas durante o vero e o outono. As fmeas iniciam a gametognese no
outono e finalizam no inverno. O final do inverno compreende o perodo de cpula da
espcie, que precede a ovulao das fmeas. Os espermatozides utilizados durante a cpula
so armazenados ao longo dos ductos deferentes dos machos, desde a espermiao, no
outono, at o final do inverno, na estao de cpula. Observa-se uma hipertrofia do segmento
sexual renal, nos machos, que se inicia no outono e permanece at o final do inverno,
coincidindo com a estao de acasalamento. Nessa espcie existe um ritual de combate entre
machos. Aps a estao de cpula os machos ainda apresentam espermatozides nos ductos,
de forma que machos maduros permanecem o ano todo com estocagem de gametas. As
fmeas realizam ovipostura durante a primavera, principalmente no incio da estao. No
vero os ovos eclodem, e principalmente o incio da estao compreende o perodo de
recrutamento dos filhotes, finalizando um ciclo reprodutivo e iniciando outro, com a
gametognese dos machos, ocorrendo nesse mesmo perodo.

125

No

No Incio havia apenas guas primordiais, e delas nasceu
Atum, o deus serpente. Atum masturbou-se e o seu smen ao
ser derramado pelas guas, deu origem a Shu, deus do ar, e
Tefnut, deusa da umidade. E depois, tudo passou a existir
[..] Diante de sua criao, Atum falou: Sou aquilo que
permanece; [..] o mundo voltar ao caos Inicial, e ento eu
me transformarei em serpente, que nenhum homem conhece,
que nenhum deus v! [..]
E ento Atum se tornou R, o deus sol, Senhor Supremo do
Egito.
(Mitologia egpcia que explica o surgimento do universo)

126

REFERNCIAS

ABE, A. S.; FERNANDES, W. Polymorphism in Spilotes pullatus anomalepis BOCOURT
(Reptilia, Serpentes: Colubridae). Journal of Herpetology, v. 11, n. 1, p. 98-100, 1977.

ALDRIDGE, R. D. Female reproductive cycles of the snakes Arizona elegans and Crotalus
viridis. Herpetologica, v. 35, p. 256-261, 1979.

ALDRIDGE, R. D. Oviductal anatomy and seasonal sperm storage in the southeastern
crowned snake (Tantilla coronata). Copeia, v. 1992, p. 11031106, 1992.

ALDRIDGE, R. D.; BUFALINO, A. P.; REEVES, A. Pheromone communication in the
watersnake, Nerodia sipedon: a mechanistic difference between semiaquatic and terrestrial
species. American Midland Naturalist, v. 154, p. 140-150, 2005.

ALDRIDGE, R. D.; GOLDBERG, S. R.; WISNIEWSKI, S. S.; BUFALINO, A. P.;
DILLMAN, C. B. The reproductive cycle and estrus in the colubrid snakes of temperate North
America. Contemporary Herpetology, v. 2009, n. 4, p. 131, 2009.

ALDRIDGE, R. D.; JELLEN, B. C., SIEGEL, D. S., WISNIEWSKI, S. S. The sexual
segment of the kidney. In: ALDRIDGE, R. D.; SEVER, D. M. Reproductive biology and
phylogeny of snakes. Florida: CRC Press, Boca Raton, 2011. p. 477-509. v. 9: JAMIESON,
B. G. M. (Ed).Reproductive biology and phylogeny series.

ALEKSIUK, M.; GREGORY, P. T. Regulation of seasonal mating behavior in Thamnophis
sirtalis parietalis. Copeia, v. 1974, p. 681-689, 1974.

ALMEIDA-SANTOS, S. M. Modelos reprodutivos em serpentes: estocagem de esperma e
placentao em Crotalus durissus e Bothrops jararaca (Serpentes: Viperidae). 2005. 204 f.
Tese (Doutorado em Anatomia) Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia,
Universidade de So Paulo, So Paulo, 2005.

ALMEIDA-SANTOS, S. M.; LAPORTA-FERREIRA, I. L.; ANTONIAZZI, M. M.; JARED,
C. Sperm storage in males of the snake Crotalus durissus terrificus (Crotalinae: Viperidae) in
southeastern Brazil. Comparative Biochemistry and Physiology, v. 139, p. 169-174, 2004.

ALMEIDA-SANTOS, S. M.; MARQUES, O. A. V. Male-male ritual combat in the colubrid
snake Chironius bicarInatus from the Atlantic Forest, southeastern Brazil. Amphibia-
Reptilia, v. 23, p. 528-533, 2002.

ALMEIDA-SANTOS, S. M.; MARQUES, O. A. V.; PIZZATTO, L. Intra-sex synchrony and
inter-sex coordination in reproduction of the coral snake Micrurus corallinus (Elapidae).
Herpetological Journal, v. 16, p. 371-376, 2006.

ALMEIDA-SANTOS, S. M., ORSI, A. M. Ciclo Reprodutivo de Crotalus durissus e
Bothrops jararaca (Serpentes, Viperidae): morfologia e funo do oviduto. Revista
Brasileira de Reproduo Animal, v. 26, p. 109-112, 2002.

127

ALMEIDA-SANTOS, S. M.; SALOMO, M. G. Long-term sperm storage in the neotropical
rattlesnake Crotalus durissus terrificus (Viperidae: Crotalinae). Japanese Journal
Herpetology, v. 17, p. 46-52, 1997.

ALMEIDA-SANTOS, S. M.; SALOMO, M. G. Reproductive strategies in tropical
pitvipers, genus Bothrops (Serpentes: Viperidae: Crotalinae). In: SCHUETT, G; HGGREN;
GREENE, H. W. (Ed.): Biology of the Vipers. Carmel, Indiana: Biological Sciences Press,
2002. p. 445-462.

ALMEIDA-SANTOS, S. M. ; SHIDMIT, F. L.; BALESTRIN, R. L. Micrurus
frontalis (Coral Snakes) Male Combat. Herpetological Review, v. 29, p. 242-242, 1998.

ALVES, L. M.; MARENGO, J. A.; CASTRO, C. A. C. Incio das chuvas na regio Sudeste
do Brasil: anlise climatolgica. In: CONGRESSO BRASILEIRO DE METEOROLOGIA,
12., 2002, Foz do Iguau. Anais... Foz do Iguau: SBMET, 2002. 1 CD-ROM.

AMARAL, A. D. Estudo sobre ophidios neotrpicos XIX. Reviso do gnero Spilotes
Wagler, 1830. Memrias do Institudo Butantan, v. 4, p. 275-298, 1929.

ANDERSON, P. The reptiles of Missouri. Columbia; Missouri. U.S.A: University of
Missouri Press, 1965.

ANTONIO, F. B. Mating-behavior and reproduction of the eyelash viper (bothrops-schlegeli)
in captivity. Herpetologica, v. 36, p. 231233, 1980.

AYRES, M.; AYRES JUNIOR, M.; AYRES, D. L.; SANTOS-DOS-SANTOS. A. Bioestat
Aplicaes Estatsticas nas reas das cincias biomdicas. Belm, Par: Universidade
Federal do Par, 2007. (Software Estatstico).

BACON, P. R. Flora & fauna of the Caribbean: an introduction to the ecology of the
West Indies. Texas: Key Caribbean Publications, 1978. 319 p.

BLACKBURN, D. G. Structure, function, and evolution of the oviducts of squamate reptiles,
with special reference to viviparity and placentation. The Journal of Experimental Zoology,
v. 282, p. 560-617, 1998.

BLANCHARD, F. N.; BLANCHARD, F. C. Factors determining time of birth in the garter
snake Thamnophis sirtalis sirtalis (Linnaeus). Papers of the Michigan Academy of Science,
Arts and Letters, v. 26, p. 161-176, 1941.

BONA-GALLO, A.; LICHT, P. Effects of temperature on sexual receptivity and ovarian
recrudescence in the garter snake Thamnophis sirtalis parietalis. Herpetologica, Chicago, v.
39, p. 173-182, 1983.

BOOS, H. E. A. The snakes of Trinidad and Tobago. Texas: Texas A & M University
Press. College Station, 2001. 270 p.

BROWN, G. P.; SHINE, R. Reproductive ecology of a tropical natricine snake,
Tropidonophis mairii (Colubridae). Journal of Zoology. Lond. v. 258, p. 63-72, 2002.

128

BURGER, J. Effects of incubation temperature on behavior of hatchling pine snakes:
implications for reptilian distribution. Behavioral Ecology and Sociobiology, v. 28, n. 4, p.
297-303, 1991.

CAPEL, R. O.; MNICA, F. Z.; PORTO, M.; BARILLAS, S.; MUSCAR, M. N.;
TEIXEIRA, S. A.; ARRUDA, A. M. M.; PISSINATTI, L.; PISSINATTI, A.; SCHENKA,
A. A.; ANTUNES, E.; NAHOUM, C.; COGO, J. C.; OLIVEIRA, M. A. de; NUCCI, G. de.
Role of a novel tetrodotoxin-resistant sodium channel in the nitrergic relaxation of corpus
cavernosum from the South American rattlesnake Crotalus durissus terrificus. Journal of
Sexual Medicine, v. 8, p. 1616-1625, 2011.

CARPENTER, C. C. Communication and display of snake. American Zoology, v. 17, p.
217-223, 1977.

CLESSON, D.; BAUTISTA, A.; BALECKAITIS, D.; KROHMER, R. Reproductive biology
of male Eastern Garter Snakes (Thamnophis sirtalis sirtalis) from a Denning population in
Central Wisconsin. American Midland Naturalist, v. 147, p. 376-386, 2002.

CREWS, D. Gamete production, sex hormone secretion and mating behavior uncoupled.
Hormones and Behavior, v. 14, p. 2228, 1984.

CREWS, D. Reptilian Reproduction, Overview, pp. 254259. In: KNOBIL, E.; NEILL, J. D.
(Ed.). Encyclopedia of Reproduction. New York: Academic Press, 1999. v.4.

DENARDO, D. F. Reproductive biology. In: MADER, D. R. Reptile medicine and surgery,
2. Ed. California: Saunders Elsevier, 2006. p. 376-390.

DOWLING, H. G.; SAVAGE, J. M. A guide to the snake hemipenis: a survey of basic
structure and systematic characteristics. Zoologica, v. 45, p. 17-30, 1960.

DUARTE, M. R. Spilotes pullatus (Serpentes: Colubridae): biometry and polymorphism.
Memrias do Instituto Butantan, v. 62, p. 84, 2005.

DUARTE, M. R.; ALBUQUERQUE, C. E. Spilotes pullatus anomalepis (Serpentes:
Colubridae): Courthip and Mating. Memrias do Instituto Butantan, v. 63, p. 93, 2006.

EDGREN, R. A. Copulatory adjustment in snakes and its evolutionary implications. Copeia,
v. 1953, p. 162164, 1953.

FITCH, H. S. Reproductive cycles in lizards and snakes. Kansas: University of Kansas,
1970. p. 1-247. (Miscellaneous Publication, n. 52).

FITCH, H. S. Reproductive cycles in tropical reptiles. Occasional Papers of the Museum of
Natural History University of Kansas, v. 96, p. 1-53, 1982.

FOWLER, I. R.; SALOMO, M. G. A study of sexual dimorphism in six species from the
colubrid genus Philodryas. The snake, v. 26, p. 117-122, 1994.

FOX, H. The urogenital system of reptiles. In: GANS, C.; PARSONS, T. S. Biology of the
Reptilia, London: Academic Press, v. 6, p. 1-122, 1977.
129

FOX, W. A comparison of the male urogenital systems of blind snakes, Leptotyphlopidae and
Typhlopidae. Herpetologica, v. 21, p. 241-256, 1965.

FOX, W. Seminal receptacles of snakes. Anatomical Record Journal, v. 124, p. 519-539,
1956.

GIBBONS, J. W.; LOVICH, J. E. Sexual dimorphism in turtles with emphasis on the slider
turtle (Trachemys scripta). Herpetological Monographs, v. 4, p. 1-29, 1990.

GIRLING, J. E. The reptilian oviduct: a review of structure and function and directions for
future research. Journal of Experimental Zoology, v. 293, p. 141170, 2002.

GOLDBERG, S. R.; PARKER, W. S. Seasonal testicular histology of the colubrid snakes,
Masticophis taeniatus and Pituophis melanoleucus. Herpetologica, v. 31, p. 317-322, 1975.

GRAHAM, S. An integrative analysis of reproduction and stress in free-living male
cottonmouths, Agkistrodon piscivorus. 2006. 85p. Dissertao (Mestre em Cincias)
College of Arts and Sciences, Georgia State University. E.U.A., 2006.

GREGORY, P. T. Communal denning in snakes. In: SEIGEL, R. A.; HUNT L. E.; KNIGHT,
J. L.; MALARET, L.; ZUSCHLAG, N. L. Vertebrate Ecology and Systematics: a tribute to
Henry S. Fitch. Kansas: University of Kansas Press, 1984. p. 57-75.

GUILLINGHAM, J. C. Social behavior. In: SEIGEL, R. A.; COLLINS, J. T.; NOVAK, S. S.
(Ed.). Snakes, ecology and evolutionary biology. Nova Iorque: McMillan Publishing
Company, 1987. p. 184-209.

GUTZKE, W. H. N.; PACKARD, G. C. Influence of the hydric and thermal environments on
eggs and hatchlings of bull snakes Pituophis melanoleucus. Physiological Zoology, v. 60, p.
9-17, 1987.

HAMMERSON, G. A. Observations on reproduction, courtship, and aggressive-behavior of
striped racer, masticophis-lateraliseuryxanthus (reptilia, serpentes, colubridae). Journal of
herpetology, v. 12, p. 253255, 1978.

HAUZMAN, E.; COSTA, A. C. O. R.; SCARTOZZONI, R. R. Spilotes pullatus (Tiger
Ratsnake). Reproduction. Herpetological Review, v. 36, n. 3, p. 328, 2005.

HEAPE, W. The sexual season of mammals and the relation of the pro-oestrum to
menstruation. Quarterly Journal of Microscopical Science, (New Series), v. 44, p. 1-70,
1900.

JUNQUEIRA, L. C. U.; BIGNOLAS, G.; BRENTANI, R. Picrosirius staining plus
polarization microscopy, a specific method for collagen detection in tissue sections.
Histochemical Journal, v. 11, p. 447-455, 1979.

LANGHI, R.; NARDI, R. Ensino de astronomia: erros conceituais mais comuns
presentes em livros didticos de cincias. Caderno Brasileiro de Ensino de Fsica, v. 24, n.
1, p. 87-111, 2007.
130

LUDWIG, M; RAHN, H. Sperm storage and copulatory adjustment in the prairie rattlesnake.
Copeia, v. 1943, p. 15-18, 1943.

KAUFFMAN, A. S.; RISSMAN, E. F. Neuroendocrine control of mating-induced ovulation.
In: NEILL, J. D. (Ed). Knobil and Neills physiology of reproduction, 3. ed. Amsterdam:
Elsevier, p. 22832326, 2006.

KEOGH, J. S. Evolutionary implications of hemipenial morphology in the terrestrial
Australian elapid snakes. Zoological Journal of the Linnean Society, v. 125, p. 239-278,
1999.

KROMER, R. W.; MARTINEZ, D.; MASON, R. T. Development of the renal sexual
segment in inmature snakes: effect of sex steroid hormones. Comparative Biochemistry and
Physiology, v. 139, p. 55-64, 2004.

MANIRE, C. A.; BRYRD, L.; THERRIEN, C. L.; MARTIN, K. Mating-induced ovulation in
loggerhead sea turtles, Caretta caretta. Zoo Biology, v. 27, p. 213225, 2008.
MARINHO, C. E.; ALMEIDA-SANTOS, S. M.; CARNEIRO, S. M.; YAMASAKI, S. C.;
SILVEIRA, P. F. Peptidase activities in Crotalus durissus terrificus semen. Reproduction,
v. 136, p. 767-776, 2008.
MARINHO, C. E.; ALMEIDA-SANTOS, S. M.; YAMASAKI, S. C.; SILVEIRA, P.
F. Peptidase activities in the semen from the ductus deferens and uterus of the Neotropical
rattlesnake Crotalus durissus terrificus. Journal of Comparative Physiology B, v. 179, p.
635-642, 2009.

MARQUES, O. A. V. Composio faunstica, histria natural e ecologia de serpentes da
Mata Atlntica, na regio da Estao Ecolgica Juria-Itains, So Paulo, SP. 1998. 135
p. Tese (Doutorado em Zoologia) Instituto de Biocincias da Universidade de So Paulo,
So Paulo, 1998.

MARQUES, O. A. V. Reproduction, seasonal activity and growth of the coral snake,
Micrurus corallInus (Elapidae), in the southeastern Atlantic forest in Brazil. Amphibia-
Reptilia, v. 17, p. 277-285, 1996.

MARQUES, O. A.V.; ALMEIDA-SANTOS, S. M.; RODRIGUES, M. G. Activity patterns in
coralsnake, genus Micrurus (Elapidae), in south and southeastern Brazil. South American
Journal of Herpetology, v. 1, p. 114-120, 2006.

MARQUES, O.A.V.; ALMEIDA-SANTOS, S. M.; RODRIGUES, M. G.; CAMARGO, R.
Mating and reproductive cycle in the neotropical colubrid snake Chironius bicarInatus. South
American Journal of Herpetology, v. 4, n. 1, p. 78-80, 2009.

MARQUES, O. A. V.; ETEROVIC, A.; ENDO, W. Seasonal activity of snakes in the Atlantic
Forest in southeastern Brazil. Amphibia-Reptilia, v. 22, p. 103-111, 2000.

131

MARQUES, O, A. V.; ETEROVIC, A.; SAZIMA, I. Serpentes da Mata Atlntica. Guia
ilustrado para Serra do Mar. Holos Editora Ltda, Ribeiro Preto. Ribeiro Preto: Holos
Editora, 2001. 184 p.

MARQUES, O. A.V.; MURIEL, A. P. Reproductive biology and food habitats of the swamp
racer snake Mastigodryas bifossatus (Colubridae) from southeastern South America. Journal
of Herpetology, v. 17, p. 104-109, 2007.

MARQUES, O. A. V.; SAZIMA, I. Histria natural dos rpteis da Estao Ecolgica Juria-
Itains. In: MARQUES, O. A. V.; DULEBA, W. Estao Ecolgica Juria-Itains. Ambiente
Fsico, flora e fauna. So Paulo: Holos, 2004. p. 257-277.

MARTINS, M.; OLIVEIRA, M. E. Natural history of snakes in forests of the Manaus region,
Central Amazonia, Brazil. Herpetological Natural History, v. 6, p. 78-150, 1998.

MATHIES, T. Reproductive cycles of tropical snakes. In: ALDRIDGE, R. D.; SEVER, D. M.
Reproductive biology and phylogeny of snakes. Florida: CRC Press, Boca Raton, 2011. p.
511- 550. v. 9: JAMIESON, B. G. M. (Ed).Reproductive biology and phylogeny series.

MATHIES, T.; CRUZ, J. A.; LANCE, V. A.; SAVIDGE, J. A. Reproductive biology of male
brown treesnakes (Boiga irregularis) on Guam. Journal of Herpetology, v. 44, p. 209-221,
2010.

MATHIES, T.; FRANKLIN, E. A.; MILLER, L. A. Proximate cues for ovarian
recrudescence and ovulation in the brown treesnake (Boiga irregularis) under laboratory
conditions. Herpetology Review. v. 35, p. 4649, 2004.

MENDONA, M. T.; CREWS, D. Controlo f atractivity and receptivity in female red-sided
garder snakes. Hormones and Behavior, v. 40, p. 43-50, 2001.

MENDONA, M. T.; CREWS, D. Mating-induced ovarian recrudescence in the red-sided
garter snake. Journal of Comparative Physiology A, v. 166, p. 629932, 1990.

MOURO, R. R. F. Da Terra s galxias uma introduo astrofsica. Rio
de Janeiro: Vozes, 1998.

NILSON, G.; ANDREN, C. Function of renal sex secretion and male hierarchy in the Adder,
Vipera berus, during reproduction. Hormones and Behabior, v. 16, p. 404-413, 1982.

OLIVEIRA, J.L. Ecologia de trs espcies de dormideira, Sibynomorphus (Serpentes:
Colubridae). 2001. 60 p. Dissertao (Mestrado em Ecologia) Instituto de Biocincias da
USP, So Paulo, 2001.

PACKARD, M. J.; BOARDMAN, T. J.; MORRIS, K. A.; SHUMAN, R. D. Influence of
water exchanges by flexible-shelled eggs of painted turtles Chrysemys picata on metabolism
and growth and embryos. Physiological Zoology, v. 56, p. 217-230, 1983.

PALMER, B. D.; DEMARCO, V. G.; GUILLETTE, L. J. Oviductal morphology and eggshell
formation in the lizard Sceloporus woodi. Journal of Morphology, v. 217, p. 205217, 1993.

132

PERKINS, J. M.; PALMER, B. D. Histology and functional morphology of the oviduct of an
oviparous snake, Diadophis punctatus. Journal of Morphology, v. 277, p. 67-79, 1996.

PETERS, J. A.; OREJAS-MIRANDA, B. Catalogue of neotropical Squamata. U.S.
National Museum Bulletin. v. 297, pt. 1, p. 1-347, 1970.

PINTO, R. R.; MARQUES, O. A. V.; FERNANDES, R. Reproductive biology of Chironius
flavolIneatus and Chironius quadricarInatus, from the Brazilian Cerrado domain. Amphibia-
Reptilia, v. 31, p. 463-473, 2010.

PIZZATTO, L.; ALMEIDA-SANTOS, S. M.; MARQUES, O. A. V. Biologia reprodutiva de
serpentes brasileiras. In: NASCIMENTO, L. B.; OLIVEIRA, M. E. Herpetologia no Brasil
II. (Eds.). Belo Horizonte: Sociedade Brasileira de Herpetologia, 2007. p. 201-221.

PIZZATTO, L.; MARQUES, O. A. V. Reproductive biology of the false coral snake
Oxyrhopus guibei (Colubridae) from southeastern Brazil. Amphibia Reptilia, v. 23, p.
495504, 2002.

PONTES, A. L.; ROCHA, C. F. D. Serpentes da Serra do Mendanha, Rio de Janeiro, RJ:
ecologia e conservao. Rio de Janeiro: Technical Books. 2008. 147 p.

ROJAS, C. A. Modulao fisiolgica do ciclo reprodutivo, comportamento sexual e
atividade sazonal em Sibynomorphus mikanii e Sibynomorphus neuwiedii (dormideira).
2009. 115 p. Dissertao (Mestrado em Biotecnologia) - Instituto de Cincias Biomdicas da
Universidade de So Paulo, So Paulo, 2009.

RUTHVEN, A. G. On the breeding habits of Butler's garter snake. Biological Bulletin,
v. 24, p. 18-20, 1912.

SAINT-GIRONS, H. S. Reproductive cycles of male snakes and their relationships with
climate and female reproductive cycles. Herpetologica, v. 38, p. 5-16, 1982.

SAVAGE, J.M. The amphibians and reptiles of Costa Rica: a herpetofauna between two
continents, between two seas. Chicago: Chicago Press, 2002. 934 p.

SAZIMA, I.; HADDAD, C. F. B. Rpteis da Serra do Japi: notas sobre histria natural. In:
MORELLATO, L. C. P. Histria natural da Serra do Japi: Ecologia e preservao de uma
rea florestal no sudeste do Brasil. Campinas: UNICAMP e FAPESP, 1992. p. 212-236.

SCHUETT, G. W. Body size and agonistic experience affect dominance and mating success
in male copperheads. Animal Behavior, v. 54, p. 213-224, 1997.

SCHUETT, G. W. Is long-term sperm storage an important component of the reproductive
biology of temperate pitvipers? In: CAMPBELL, J. A.; BRODIE, E. D. Biology of Pitvipers.
Texas: Selva, 1992. p. 199-216.

SCHUETT, G. W.; CARLISLE, S. L.; HOLYCROSS, A. T.; OLEILE, J. K.; HARDY, D.
L.; VAN KIRK, E. A.; MURDOCH, W. J. Mating system of male Mojave rattlesnakes
(Crotalus scutulatus): seasonal timing of mating, agonistic behavior, spermatogenesis, sexual
segment of the kidney, and plasma sex steroids. In: SCHUETT, G. W.; HGGREN, M.;
133

DOUGLAS, M. E.; GREENE, H. W. Ed.). Biology of the vipers, Carmel Indiana: Eagle
Mountain, 2002. p. 515-532.

SCHUETT, G. W.; GERGUS, E. W. A.; KRAUS, F. Phylogenetic correlation between male-
male flighting and mode of prey subjugation in snakes. Acta Ethologica, v. 4, p. 31-49, 2001.

SEVER, D. M.; HOPKINS, W. A. Renal sexual segment of the ground skink, ScIncella
laterale (Reptilia, Squamata, Scincidae). Journal of Morphology, v. 266, p. 46-59, 2005.

SEVER, D. M.; SIEGEL, S. D.; BAGWILL, A.; ECKSTUT, E. M.; ALEXANDER, L.;
CAMUS, A.; MORGAN, C. Renal sexual segment of the cottonmouth snake Agkistrodon
piscivorous (Reptilia, Squamata, Viperidae). Journal of Morphology, v. 1, p. 1-14, 2007.

SEVER, D. M.; STEVENS, R. A.; RYAN, T. J.; HAMLETT, W. C. Ultrastructure of the
reproductive system of the black swamp snake (SemInatrix pygaea). III. Sexual segment of
the male kidney. Journal of Morphology, v. 252, p. 238-254, 2002.

SECCHIERO, G.; FELIZ, J. C. Nascimento de uma ninhada de caninanas (Spilotes pullatus)
no zoolgico de Cubato Parque Ecolgico Cotia-Par. In: CONGRESSO DA
SOCIEDADE PAULISTA DE ZOOLGICOS, 14., 2005, So Vicente. Anais... So
vincente: SPZOO, 2005. v. 1.

SHINE, R. Costs of reproduction in reptiles. Oecologia, v. 46, p. 92-100, 1980.

SHINE, R. Growth rates and sexual maturation in six species of Australian elapid
snakes. Herpetologica, v. 34, p. 73-79, 1978.

SHINE, R. Reproduction in australian elapid snakes I. Male reproductive cycles: testicular
cycles and mating seasons. Australian Journal of Zoology, v. 25, p. 647-653, 1977a.

SHINE, R. Reproduction in australian elapid snakes II. Female reproductive cycles.
Australian Journal of Zoology, v. 25, p. 655-666, 1977b.

SHINE, R. Sexual size dimorphism in snakes revisited. Copeia, v. 1994, n.2, p. 325-346,
1994.

SIEGEL. D. S.; FORD, N. B. Reproductive ecology. In: SEIGEL, D. S.; COLLINS, J. T.
Snakes: ecology and evolutionary biology. Nova Iorque: McMillan, 1987. p. 210-252.

SIEGEL. D. S.; MIRALLES, A.; CHABARRIA, R. E.; ALDRIDGE, R. D. Female
reproductive anatomy: cloaca, oviducto, and sperm storage. In: ALDRIDGE, R. D.; SEVER,
D. M. Reproductive biology and phylogeny of snakes, Florida: CRC Press, Boca Raton,
2011a. p. 347-409. v. 9: JAMIESON, B. G. M. (Ed).Reproductive biology and phylogeny
series.

SIEGEL. D. S.; MIRALLES, A.; TRAUTH, S. E.; ALDRIDGE, R. D. The phylogenetic
distribution and morphological variation of the pouch in female snakes. Acta Zoologica
(Stockholm) v. 00, p. 19, 2011b.

134

SILVA, M. V. Serpentes do Estado do Acre: riqueza, dieta, etno-conhecimento e acidentes
ofdicos. 2006. 81 p. Dissertao (Mestrado) - Universidade Federal do Acre, 2006.

STATSOFT, Inc. Statistica (data analysis software system). Version 8. 2009. (Software E
statstico).

TRAUTH, S. E.; SEVER, D. M. Male urogenital ducts and cloacal anatomy. In: ALDRIDGE,
R. D.; SEVER, D. M. Reproductive biology and phylogeny of snakes, Florida: CRC Press,
Boca Raton, 2011. p. 411-475. v. 9: JAMIESON, B. G. M. (Ed).Reproductive biology and
phylogeny series.

TRYON, B.W. Additional instances of multiple egg-clutch production in
snakes. Transactions of the Kansas Academy of Science, v. 87, p. 98-104, 1984.

TRYON, B. W.; MURPHY, J. B. Miscellaneous notes on the reproductive biology of reptiles.
5. Thirteen varieties of the genus Lampropeltis, species mexicana, triangulum and zonata.
Transactions of the Kansas Academy of Science, v. 85, n. 2, p. 96-119, 1982.

TSAI, T. S.; TU, M. C. Reproductive cycle of male Chinese green tree vipers, Trimeresurus s.
stejnegeri, in northern Taiwan. Journal of Herpetology, v. 34, p. 424430, 2000.

URIBE, M. C.; GONZALES-PORTER, G.; PALMER, B. D.; GUILLETTE, L. J. Cyclic
histological changes of the oviductal-cloacal junction in the viviparous snake Toluca lineata.
Journal of Morphology, v. 237, p. 91-100, 1998.

WERNER, Y. L.; DROOK, K. The multipartite testis of the snake Leptotyphlops phillipsi.
Copeia, v. 1967, p. 159-163, 1967.

WHITTIER, J. M., CREWS, D. Ovarian development in red-sided garter snakes, Thamnophis
sirtalis parietalis: relationship to mating. General and Comparative Endocrinology, v. 61,
p. 512, 1986.

WHITTIER, J. M; MASON, R. T.; CREWS, D. Plasma steroid levels of female red sided
garter snakes, Thamnophis sirtalis parietalis: Relationship to mating and gestation. General
and Comparative Endocrinology, v. 67, p. 33-43, 1987b.

WHITTIER, J. M.; MASON, R. T.; CREWS, D.; LICHT, P. Role of light and temperature in
the regulation of reproduction in red-sided garter snakes, Thamnophis sirtalis parietalis.
Canadian Journal of Zoology, v. 65, p. 20902096, 1987a.

WHITTIER, J. M.; TOKARZ, R. R. Physiological regulation of sexual behavior in female
reptiles. In: GANS, C.; CREWS, D. Biology of the Reptilia, Chicago: The University of
Chicago Press, v. 18, 1992. p. 24-69.

VANZOLINI, P. E.; RAMOS-COSTA, A. M. M.; VITT, L. J. Rpteis da caatinga. Rio de
Janeiro, Academia Brasileira de Cincias, 1980. 161p.

VINEGAR, A. Evolutionary implications of temperature induced anomalies of development
on snake embryos. Herpetologica, v. 30, p. 72-74, 1977.

135

VOLSE, H. Structure and seazonal variation of the male reprodutive organs of Vipera berus
(L). Spolia. Zoological Musei Hauniensis, Kopenhavn, v. 5, p. 1-172, 1944.

ZAHER, H. Hemipenial morphology of the South American Xenodontine snakes, with a
proposal for a monophyletic Xenodontinae and a reappraisal of colubroid hemipenes. Bulletin
of the American Museum of Natural History, v. 240, pp. 168, 1999.

ZAR, J. H. Biostatistical analysis. New Jersey: Prentice-H Hall, 1996. 875 p.

ZAR, J. H. Biostatiscal analysis. New Jersey: Prentice-Hall Inc., Englewood Cliffs, 1984.

ZARROW, M. X.; CLARK, J. H. Ovulation following vaginal stimulation in a spontaneous
ovulator and its implications. Journal of Endocrinology, v. 40, p. 343-52, 1968.

136

Caninana, Spilotes pullatus, Jorge Padilha, 2012. Desenho base a lpis cont

Diego Ferreira M Silva Completo

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Deskripsi Asli:

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Diego Ferreira M Silva Completo

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

1

DIEGO FERREIRA MUNIZ-DA-SILVA

Anda mungkin juga menyukai