REBIOL. Vol. 28, N 2: julio-diciembre, 2008 Organo oficial de la Facultad de Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional de Trujillo.

Trujillo-Per

ARTCULO/ARTICLE

Efecto de la luz y la temperatura en la germinacin de esporas de Pteris vittata (Pteridaceae)

Effect of the light and the temperature on Pteris vittata (Pteridaceae) spores germination
Narda Alarcn-Rojas* y Freddy Pelez-Pelez
Departamento de Ciencias Biolgicas. Universidad Nacional de Trujillo. Trujillo. Per. *Autor a quien dirigir la correspondecia: risol_17@hotmail.com

RESUMEN
Pteris vittata L. (Pteridaceae), es un helecho nativo de Asia y adventicio en Amrica tropical y subtropical, es usado como una planta ornamental, pero tiene una gran capacidad para acumular arsnico, por lo que es indicado en estudios de fitorremediacin. Se determin el efecto de la luz y la temperatura en la germinacin de esporas de P. vittata, utilizando cuatro tratamientos (I: 10 +2 C / 9W; II: 10 +2 C / 20W; III: 30 +2 C / 9W y IV: 30 +2 C / 20W); con cuatro repeticiones cada uno. Las esporas que fueron sembradas en papel filtro y regadas con agua destilada. Considerndose como indicador de geminacin la aparicin de la primera clula protlica. Se registraron el porcentaje de germinacin y tiempo de duracin. Los resultados obtenidos no muestran diferencia significativa entre los tratamientos, las esporas germinan en todos los tratamientos con un nivel mayor al 70%; pero la diferencia radica en el nmero de das de inicio de la germinacin, siendo de dos das en el caso de los tratamientos con temperatura alta (30 + 2C), y de 17 das para los tratamientos con bajas temperatura (10 + 2C). Palabras clave: Pteris vittata, luz, temperatura, germinacin, esporas

ABSTRACT
Pteris vittata L. (Pteridaceae) is a fern native to Asia, and adventitious in tropical and subtropical America, which is used as an ornamental plant but has a great capacity to accumulate arsenic, which is indicated in studies of phytoremediation. We determined the effect of light and temperature on germination of spores of P. vittata, using four treatments (I: 10 +2 C / 9W; II: 10 +2 C / 20W; III: 30 +2 C / 9W AND IV; 30 +2 C / 20W), with four replicates each. Spores were sown on filter paper and irrigated with distilled water. Onset of the first cell protlica it was considered as germination indicator and its percentaje per day was recorded. The results show no significant difference between treatments, the spores germinate in all treatments with a level greater than 70%, but the difference lies in the number of days of initiation of germination, being two days in the case of treatment with high temperature (30 + 2 C) and 17 days for treatments with low temperature (10 + 2 C). Key words: Pteris vittata, light, temperature, germination, spores INTRODUCCIN

Los helechos forman parte de un grupo de plantas vasculares que reciben el nombre de pteridofitas, estn presentes en diferentes ecosistemas, tanto acuticos como terrestres, manifestndose en una gran diversidad de especies y de formas de vida. La mayor diversidad y

abundancia de los helechos se encuentra en las regiones clido-hmedas montaosas. Actualmente se calcula que pueden existir de 10 000 a 12 000 especies distribuidas en altitudes de 0 a 5 000 m.s.n.m. Los helechos presentan formas de vida parecidas a las de las fanergamas pero son menos conocidos. En asociacin con otros grupos de plantas forman comunidades vegetales cuya estructura y dinmica han sido estudiadas de manera integral slo hasta fechas recientes en nuestro pas. 1,2 Los helechos se caracterizan porque en su ciclo de vida tienen una alternancia de generaciones independientes y de vida libre. Una fase haploide (gametoftica), que se inicia con la formacin de la espora y una fase diploide (esporoftica) que se inicia con la formacin del cigoto, la que al llegar a la madurez tiene raz, tallo (rizoma) y hojas las que llevan esporangios en donde por un proceso meitico forman las esporas, culminando de esta forma su ciclo de vida. 1,2,3,4,5,6. Las esporas de los helechos son estructuras microscpicas unicelulares, con dimensiones comprendidas entre menos de 25 hasta 100 micrmetros, y su produccin puede ser inmensa, como es el caso de Pteridium aquilinum, en el cual una hoja puede producir aproximadamente 1 gramo (300 millones de esporas), en Dicksonia antarctica 750 millones. Pero a pesar de esta gran cantidad de esporas no todas llegan a producir esporofitos, siendo numerosos los factores que las limitan. La viabilidad de las esporas y la tasa de crecimiento de los gametofitos, son factores bsicos para un exitoso establecimiento de los helechos en un nuevo hbitat despus de la dispersin. Estos factores estn controlados por propiedades intrnsecas (genotipo, edad y latencia) y por factores extrnsecos (pH suelo, humedad, temperatura, luz y competidores). 1,3,7 siendo estos ltimos quienes juegan un papel determinante, en este sentido se ha sealado que la luz y la temperatura han sido los factores fsicos considerados ms importantes.8.9 Parte de la energa radiante tiene influencia conocida sobre el desarrollo de las plantas, a veces se usa el trmino luz para referirse a ese conjunto de radiaciones cuando en realidad se refiere al conjunto de radiaciones electromagnticas con efectos fisiolgicos (APHALO, 2001). Las plantas no se limitan solo a la captacin de energa a travs de la fotosntesis, estas poseen mecanismos diversos mediante los que detectan las variaciones cualitativas de intensidad, direccin y periodos de luz, produciendo respuestas adaptativas8. Las plantas en general desarrollan sus actividades biolgicas entre los extremos trmicos de 0 a 50 C, an cuando estos lmites varan de una especie a otra, el extremo inferior o mnimo por debajo del cul la vida para determinadas plantas no es posible y el superior o mximo por encima del cul la planta perece. El ptimo, es el ms favorable para la vida de la planta y en el que las posibilidades de supervivencia de cualquier poblacin de la especie son mayores; lo que tiene importancia son los lmites de tolerancia a la temperatura entre los cules una poblacin se mantiene y compite con xito.10 Hurel-Py (1944, 1950) menciona la importancia de la temperatura en el desarrollo de gametofitos de Asplenium sp. y de Gymnogramme calomelanos (Pityrogramma calomelanos). El efecto de la temperatura, luz y auxinas en el alargamiento de los prtalos de helechos ha sido estudiado por Miller y Miller 10 Se sabe que, en general, la germinacin puede ocurrir entre 15 y 30 C, aunque las temperaturas ptimas varan de acuerdo a las especies; por ejemplo, Dryopteris filix-mas germina mejor a 20 C, mientras que para varias especies de Notholaena, Pellaea y Cheilanthes las temperaturas ptimas para la germinacin varan entre 20 y 35 C. El porcentaje de germinacin de Platycerium alacome en la obscuridad aumenta entre 20 y 30 C, pero en la misma escala de temperaturas y en la oscuridad el porcentaje de germinacin de Pteridium aquilinum disminuye (Millerl968). Se ha encontrado ausencia de germinacin en Ceratopteris spp. a 12 C y germinacin ptima entre 22 y 30 C; en Matteuccia struthiopteris las esporas germinaron entre 11 y 27 C y concluyen que los gametofitos de taxa de zonas tropicales tienen un desarrollo ptimo a temperaturas ms altas que los taxa de zonas templadas. 8,9,10. Las ms altas temperaturas en las cules hay germinacin, oscilan entre 30 y 35 C; en el otro extremo algunas esporas son capaces de germinar a temperaturas tan bajas como 1 2 C en Pteridium aquilinum y 5 C en el caso de Cyathea spinulosa10.

P. vittata es un helecho nativo de Asa, actualmente se lo encuentra en muchas zonas, incluido Per. Se caracteriza por presentar tallo robusto y cortamente rastrero, con hojas que por lo general son monomrficas, de hasta 1,5 m o ms, lmina 1-pinnada, ms angosta en la base, foliolos alargados, cortamente pedunculados. Venas libres. Los soros se encuentran en una comisura marginal que se ubica al final de las venas; presentan esporas tetradricas globosas 11. Tambin es de gran importancia como bioacumulador de arsnico, habindose constatado que este metal ejerce influencia en la fisiologa de la planta, observado en pocas semanas un rpido crecimiento de las plantas que recibieron hasta 40 mg.L-1 de arsnico.12,13 En el presente estudio, se analiz el efecto que ejercen los factores luz y temperatura, sobre la germinacin de esporas de Pteris vittata en condiciones experimentales. MATERIAL Y MTODOS Se emplearon ejemplares frtiles de Pteris vittata L. que fueron recolectados en los alrededores de Punta Moreno (Provincia de Gran Chim, La Libertad, Per). Obtencin de Esporas. De las hojas frtiles de P. vittata se extrajeron foliolos que presentaban los soros maduros y colocados en un sobre de papel para la liberacin de las esporas, las que se separaron de los restos de los esporangios con ayuda de un pincel fino. Siembra de esporas. Se establecieron dos sistemas respecto a la temperatura, uno de ellos con temperatura de 10 + 2 C con las variantes de luz blanca de 9 W y 20 W (Sistema 1); y el otro sistema mantenido a 30 + 2 C, e iluminacin de 9 W y 20 W; en cada uno se sembraron 100 esporas.
L U Z TEMPERATURA 10 + 2 C 30 + 2 C TI T III T II T IV

9W 20 W

En todos los sistemas se consider un fotoperiodo de 12 horas luz/ 12 horas oscuridad. Tambin se sembr un blanco expuesto a condiciones de temperatura y luz ambiental. Toma de datos: Se realizaron observaciones diarias para la determinacin de germinacin, con ayuda de un microscopio binocular Leica C.M.E. Se utiliz como indicador de germinacin la observacin de la primera clula protlica, registrando el nmero de esporas. Adems se consider el tiempo (en das), desde la siembra al inicio y trmino de la germinacin. Anlisis estadstico: Los datos obtenidos se procesaron estadsticamente mediante: promedio, anlisis de varianza y comparacin de medias de Tukey, teniendo como hiptesis: Ho: Todos los tratamientos tienen el mismo efecto. Ha: Al menos un tratamiento tiene efecto diferente.

RESULTADOS El tiempo de germinacin de las esporas de Pteris vittata difiere de acuerdo a los tratamientos y la prueba en blanco; es as que en los tratamiento I (10+2 C / 9W) y II (10+ 2 C / 20 W), las esporas empezaron a germinar a los 17 das despus de la siembra y en los tratamientos III ( 30+2 C / 9W) y IV (T 30+ 2C / 20 W), la germinacin se inici transcurridas 48 horas desde la siembra, y en la prueba en blanco la germinacin ocurri a los 11 das, en un periodo comprendido entre 4 y 7 das (Fig. 1). El porcentaje de germinacin de las esporas de P. vittata vara de 79.28% (tratamiento II, T 10+ 2C- 20 W) hasta un valor de 88.11% (tratamiento III, T 30+2 C - 9W). Pero estos valores estadsticamente no presentan diferencia significativa encontrando un p mayor a 0.5 (p = 0.6405), como se muestra en la tabla 1. Las letras minsculas indican la igualdad o la diferencia entre los tratamientos (Fig. 2).
Fig. 1: Das de Inicio y Trmino de germinacin de las esporas de Pteris vittata L. en los tratamientos I (10+ 2C / 9 W), II (10+ 2C / 20 W), III (30+ 2C / 9 W), IV (30+ 2C / 20 W) y Prueba en Blanco.

No. D E D I A S 17

21 17

21 15 11 9 7 2 2

II

III
TRATAMIENTOS

IV

blanco

Fig. 2: Porcentaje de germinacin de las esporas de Pteris vittata L. en los tratamientos I (10+ 2C / 9 W), II (10+ 2C / 20 W), III (30+ 2C / 9 W), IV (30+ 2C / 20 W) y Prueba en Blanco.

Tabla 1: Anlisis de varianza (ANOVA) para Porcentaje de Germinacin de Pteris vittata L de los Tratamientos I (10+ 2C / 9 W), II (10+ 2C / 20 W), III (30+ 2C / 9 W), IV (30+ 2C / 20 W) y Prueba en Blanco.

DISCUSIN Las fases del desarrollo de los helechos y otros vegetales, se ven influenciadas por la luz, la temperatura, la humedad, el pH, entre otros.3,7,10 El efecto de la luz sobre la induccin de la germinacin de esporas de helechos, ha sido estudiada extensivamente, establecindose que este factor promueve la germinacin de esporas por una respuesta de pigmentos denominados fitocromos9,14,15 La germinacin fitocromo dependiente puede ser fotoreversible anteponiendo una irradiacin con un espectro rojo lejano, y puede ser fotoirreversible irradiando brevemente con luz azul o UV. El primer ejemplo tpico de tales fenmenos fue encontrado en P. vittata por Sugai y Furuya (1967), quienes sostienen que al menos tres fotoreacciones participan en la germinacin de las esporas, dos de las cuales son controladas por el fitocromo. 3,16,17 Con respecto a la temperatura, este factor influye en los cambios que ocurren durante la germinacin, suceso que comprenden procesos metablicos y su efecto se expresa en la capacidad germinativa o en la velocidad de germinacin;4 asimismo las temperaturas elevadas pueden promover la expresin de hormonas germinativas.17 Es as que al evaluar la influencia de la luz y la temperatura en la germinacin de esporas de P. vittata, se obtuvo un porcentaje de germinacin que no present diferencias significativas entre los tratamientos, alcanzndose niveles entre 79,28 % (T II, 10 C y 20 W) hasta 88,11 % (T III; 30C y 9W). Esto demuestra que P. vittata, presenta gran plasticidad al efecto de la temperatura, por ser nativa se Asia, donde los niveles de ste factor son extremos.11; y en relacin a los reportes hechos para Dicksonia sellowiana, Cheilanthes feei, difiere que a temperaturas de 30 C, se presenta una inhibicin del proceso de germinacin. (17,18)

Pero a pesar de poca diferencia en el porcentaje de germinacin, el tiempo transcurrido desde la siembra hasta la germinacin es muy variable en los tratamientos, siendo de 2 y das para el caso de los tratamientos con la Temperatura de 30 + 2C (T III y T IV), y de 17 das al tratarse de tratamientos con temperatura de 10 + 2C (T I y T II), sin importar los niveles de luz. Esto conlleva corroborar lo sostenido por Francis (2002), quien afirma que la temperatura ejerce influencia sobre los efectos de la luz. Pues es la temperatura conjuntamente con el agua, son los factores encargados de elevar la permeabilidad de la membrana, provocando que la luz active al fitocromo, y este desencadene una serie de reacciones que estimulan la primera divisin mittica de la espora 16; CONCLUSIONES Los niveles de luz y la temperatura no ejercen efecto en el porcentaje de germinacin de las esporas de Pteris vittata. La temperatura alta, sin importar los niveles de luz, disminuye el tiempo de inicio de la germinacin de las esporas de P. vittata, y la temperatura baja, la retrasa.
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