INTRODUO O contnuo avano das cincias agrcolas deve-se ininterrupta experimentao que ocorre nas mais diversas regies

s da Terra. A cada momento - testam-se novas variedades - comparam-se mtodos de cultivo - mensura-se a eficcia de novos pesticidas etc. Para ensaios produzam respostas inteligveis, mister que sejam planejados, conduzidos e interpretados consoante os princpios da Estatstica Experimental. O que um experimento? Em vez de fornecer qualquer definio formal logo de incio, comearemos nosso curso por um exemplo. Exemplo 1.1. A aflatoxina uma substncia altamente cancergena e venenosa, produzida pelo fungo Aspergillus flavus, que se desenvolve em amendoim, milho, arroz e outros gros, quando armazenados em condies de alta umidade. Sabe-se que a aflatoxina bem mais nociva a animais monogstricos (principalmente aves) do que a ruminantes. Este fato leva a indagar: por que os ruminantes mostram-se mais resistentes aflatoxicose? A pergunta est ampla demais - a resistncia poderia dever-se aos microorganismos do rume (o maior dos quatro compartimentos gstricos do ruminante), - absoro mais lenta da toxina, - a alguma peculiaridade metablica dos ruminantes etc. A passagem da aflatoxina pelo rume diminui sua nocividade? Ensaio com 9 vacas em lactao (Wechsler et al., 1980) - cnula no abomaso. - alimento injetado diretamente no abomaso - Testemunha: pasta de arroz isenta de aflatoxina ministrada por via oral e abomasal.

- Dosagem oral: pasta de arroz contendo aflatoxina ministrada por via oral e pasta isenta por via abomasal. - Dosagem abomasal: pasta de arroz isenta por via oral e pasta de arroz contendo aflatoxina por via abomasal. Cada tratamento foi aplicado a trs vacas escolhidas ao acaso Resultado - dosagem oral, quando comparada testemunha, aumentou o nvel sangneo de enzimas indicativas de dano heptico. - a dosagem abomasal provocou uma intoxicao bem mais grave que a dosagem oral. Conclui-se deste experimento que, de fato, o rume contribui para a maior resistncia que os ruminantes apresentam aflatoxicose. Como? trs hipteses a) os microorganismos ruminais inativam parcialmente a aflatoxina; b) os microorganismos a modificam, tornando-a menos nociva; c) devido ao grande volume do retculo-rume, a toxina grandemente diluda e liberada mais lentamente para a absoro do que em animais monogstricos. Observe, todavia, que o experimento que acabamos de discutir no capaz de responder a estas novas questes. As respostas s sero obtidas mediante novos experimentos, cada vez mais especficos.

Pontos dignos de nota Podemos agora, com base neste experimento, ressaltar algumas caractersticas:

1. Formulao de hiptese testvel: a passagem da aflatoxina pelo rume diminui sua nocividade? 2. Controle das variveis experimentais, sob forma de tratamentos: o modo de ministrar a aflatoxina. 3. Comparaes entre tratamentos, organizadas de forma a testar a hiptese. 4. Uniformizao das variveis no experimentais: manejo e alimentao idnticos para todas vacas, visando minimizar a interferncia de variveis no experimentais nos resultados.

5. Repeties: trs animais por tratamento. 6. Casualizao: cada tratamento foi aplicado a trs vacas sorteadas dentre as nove disponveis. 7. Mensurao das respostas aos tratamentos, ou seja, coleta dos dados. 8. Anlise estatstica dos dados, para verificar se as diferenas observadas entre tratamentos so confiveis, isto , se pouco provvel que estas diferenas sejam devidas a mero acaso. 9. Concluses: o rume diminui a nocividade da aflatoxina. 10. Novas questes: como o rume provoca este efeito? Talvez j possamos arriscar uma definio formal de "experimento": Experimento um estudo que visa responder a questes cientficas, mediante minimizao da interferncia de variveis que no interessam ao pesquisador, conjugada a estrito controle das variveis experimentais. Atingem-se estes objetivos por meio de formulao cuidadosa de tratamentos, cujos resultados so comparados com auxlio de tcnicas estatsticas. Questionrio 1. Por que, no experimento de aflatoxina, as vacas do grupo testemunha tambm foram canuladas e receberam pasta de arroz por via oral e abomasal? 2. Neste experimento, poder-se-ia prescindir do grupo testemunha? Por qu? 3. J que as diferenas observadas foram grandes, a mera comparao entre as mdias dos tratamentos no teria sido suficiente para formular as concluses? Por que foi necessria uma anlise estatstica completa? 4. Costuma-se dizer que, para cada pergunta respondida num experimento, surgem vrias novas. Por que ocorre este fenmeno? Quais as suas implicaes?

Primeira caracterstica dum bom experimento: questo relevante Um experimento que s fornece respostas j sabidas e esperadas intil e constitui desperdcio de recursos, por melhor que tenha sido planejado e conduzido. Portanto, a questo que o experimento visa responder deve estar claramente definida, possuir relevncia e ser suficientemente especfica para que possa ser testada.

Segunda caracterstica dum bom experimento: preciso erro experimental. aleatrias, ao acaso Os valores observados - estimativas dos valores reais Menor o erro experimental- mais preciso. Exemplo 1.2. Compararam duas variedades de feijo duas localidades distintas, cinco repeties, distribudas aleatoriamente pela rea experimental. Na localidade A, o solo era mais homogneo e houve menor infestao de ervas daninhas; em conseqncia, a preciso em A deveria ser maior, como de fato ocorreu. A seguir mostram-se os dados de colheita de gros (em g/parcela):

Localidade A Var.1 Var.2 933 827 883 996 933 914,4 1150 1205 1058 1065 1169 1129, 4

Localidade B Var.1 Var.2 594 476 494 735 562 572,2 504 871 973 565 979 778,4

Mdia

mdia aritmtica - produtividade na localidade A superior da B, - que a variedade 1 mostrou-se inferior 2. - valores obtidos na localidade A esto menos dispersos, - o que indica que o ensaio conduzido na localidade A goza de maior preciso. A preciso de qualquer experimento depende de trs fatores bsicos: A) Variabilidade intrnseca ao material, s condies e tcnica experimental. B) Nmero de repeties. - quanto maior o nmero de repeties, maior ser a probabilidade de detectar diferenas reais entre tratamentos e menor ser a probabilidade de considerar como reais diferenas meramente devidas ao acaso. - muitas repeties podero encarecer o experimento alm do suportvel. - o benefcio adicional devido a um aumento das repeties torna-se cada vez menor, medida que cresce o nmero destas. Delineamento experimental. Por delineamento entendemos a maneira organizada pela qual se aplicam os tratamentos. Exemplo 1.3. - Testar quatro raes para vacas leiteiras, dispondo de doze animais

a) sortear trs vacas para cada tratamento e fornecer a rao durante trs meses, medindo a produo de leite durante este perodo - inteiramente casualizado - preciso relativamente baixa, - no controla as diferenas entre vacas, devidas a fatores genticos, estgios de lactao etc. b) dividir as vacas em trs grupos de alta, mdia e baixa produo, distribuir os tratamentos aleatoriamente dentro de cada grupo, - blocos completos casualizados - preciso superior, pois permite separar os efeitos de tratamentos dos causados pelo nvel produtivo dos animais. c) preciso poderia ser aumentada - delineamentos mais refinadosquadrados latinos. Terceira caracterstica dum bom experimento: ausncia de vis Vis um erro sistemtico que distorce as estimativas das diferenas entre tratamentos, no importando o nmero de repeties Erro experimental aleatrio vis atua sistematicamente sobre determinadas parcelas ou tratamentos. Exemplo 1.4. - ensaio realizado em vasos localizados numa estufa, visando verificar se a adubao foliar com micronutrientes eficaz em acelerar o desenvolvimento de mudas de caf. 1 - Testemunha (pulverizao com gua); 2 - Zn; 3 - Cu; e 4 - Cu + Zn Medem-se as massas da parte area e das razes. Usar-se-o 10 vasos por tratamento (10 repeties). Suponha que, para facilidade de operao, os vasos de cada tratamento sejam organizados por fileira:

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

1 2

Suponha ainda que uma das fileiras receba mais sol que a outra. A diferena de desempenho entre os tratamentos ser devida a diferenas reais entre eles ou a diferenas entre fileiras? 4 1 2 3 3 2 1 4

Preciso versus vis Em qualquer experimento, procura-se estimar determinadas quantidades os efeitos dos tratamentos -, cujos valores reais se desconhecem. A. Baixa preciso sem As estimativas diferem bastante (baixa preciso), mas os erros so aleatrios, nosistemticos (ausncia de vis). Um experimento com estas caractersticas no ideal, devido baixa preciso, mas pelo menos no padece de vis.

.. . . . . . . . .
vis B. Baixa preciso com vis

. . . .. . . . . .
C. Alta preciso sem

Como no grfico anterior, a preciso baixa. Aqui, porm, ao invs de se distribuir aleatoriamente ao redor do valor real, as estimativas mostram clara tendncia em se situar no quadrante superior direito. Este experimento inaceitvel, pois sofre de vis e baixa preciso.

. . . .... .. .
vis

Esta situao considerada ideal. As estimativas distribuem-se aleatoriamente em torno do valor real e esto bem prximas entre si.

D.

Alta

preciso

com Como no grfico anterior, as estimativas constituem uma nuvem densa. Todavia, as estimativas tendem para o quadrante inferior esquerdo e afastam-se do valor real, que no ser estimado corretamente. Este pronunciado vis torna o experimento inaceitvel, no obstante a alta preciso.

. .. .. . . .. .
vis

A baixa preciso um defeito menos grave que a presena de vis. Ao aumentar o nmero de repeties, eleva-se a preciso, porm no se altera o vis. Para remov-lo, deveremos reformular o experimento. Quarta caracterstica dum bom experimento: clculo da preciso Como o erro experimental quase inevitvel, estimamos o efeito de cada tratamento vrias vezes - permite calcular a preciso das estimativas. Quinta caracterstica dum bom experimento: generalizabilidade - aplicar os resultados soluo de problemas reais - quanto mais prximas da realidade forem as condies de um experimento, tanto mais fcil e direta ser a generalizao dos resultados. - Experimentos de "cincia bsica" realizam-se em condies mais controladas que os de "cincia aplicada" Sexta caracterstica dum bom experimento: exeqibilidade De nada vale um planejamento minucioso que produza um experimento to complexo que se torne inexeqvel - dinheiro, material, mo-de-obra e tempo disponveis. Questionrio 1. Discuta as diferenas entre vis e impreciso e as maneiras de controllos. Um bom controle de vis incompatvel com o controle da impreciso?

2. Que conflito pode ocorrer entre a necessidade de manter a preciso dum experimento em nveis aceitveis e a de tornar os dados aplicveis a uma larga gama de aplicaes? 3. Que problemas costumam afetar a aplicabilidade de experimentos agrcolas? Comparados com experimentos bioqumicos, apresentam maior ou menor generalizabilidade? 4. O delineamento inteiramente casualizado descrito no Exemplo 1.3, pode provocar srio vis. Na verdade, este risco, mais que a baixa preciso, torna outros delineamentos preferveis. Como poderia ocorrer este vis e que prejuzos traria? 5. Num certo experimento, visou-se determinar a eficcia de injees de gonadotrofina em antecipar a puberdade de ratas. Para tanto, selecionou-se um lote bem uniforme de ratas com a mesma idade, que foram aleatoriamente divididas em dois grupos. O grupo A recebeu injees de gonadotrofina, enquanto que o grupo B (controle) no recebeu nada. As ratas foram alojadas em gaiolas individuais e mantidas sob as mesmas condies de alimentao, temperatura e fotoperodo. Determinou-se a puberdade pela abertura vaginal. Existe uma falha grave na concepo deste experimento; qual ?

Unidades experimentais e unidades de amostragem Exemplo 1.5. ensaio com cana-de-acar, que visa determinar se a produtividade (medida como produo de massa verde por rea) seria afetada pela adubao potssica. Os tratamentos foram os seguintes: Tratament K2O (kg/ha) o A 0 B 40 C 80

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|----------------- 30 m --------------- bbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbb bbbb b------------------------------------------b b------------------------------------------b b------------------------------------------b b------------------------------------------b b------------------------------------------b b------------------------------------------b b------------------------------------------b bbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbb bbbb Smbolos: = limite da parcela; colhida

|| -----------------30 m ---------------| || bbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbb bbbb || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || b-----------------------------------------b || bbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbbb bbbb bb faixa de bordadura; -linha

Divide-se a rea experimental em sub-reas regulares, chamadas parcelas, e cada uma delas recebe um tratamento. Ao longo de todo o permetro da parcela deixa-se uma faixa sem ser colhida no experimento, denominada bordadura. A bordadura visa minimizar a possibilidade de que o tratamento aplicado a uma determinada parcela afete as parcelas vizinhas. Cada parcela tinha uma rea total de (30)(8) = 240 m . Cada faixa de bordadura tinha 1 m de largura, ou seja, 0,5 m numa parcela e 0,5 m na parcela limtrofe. A rea de bordadura de cada parcela era: (2)(0,5)(30) + (2)(0,5)(8) = 38 m .

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Por conseguinte, a rea til de cada parcela foi: 240 - 38 = 202 m. Note que, embora se tenham colhido vrias touceiras de cana por parcela, todas as touceiras duma parcela receberam o mesmo tratamento. Cada parcela recebeu, pois, um tratamento a ela destinado por sorteio. Assim, podemos dizer que cada parcela de 240 m constituiu uma unidade experimental. Unidade experimental a menor diviso do material experimental que poderia receber qualquer tratamento. O nmero de repeties o nmero de unidades experimentais que recebem o mesmo tratamento. Unidade amostral a menor diviso do material que se mede em separado. A unidade experimental e amostral podem ou no coincidir. Questionrio 1. Para cada um dos experimentos abaixo descritos, identifique as unidades de amostragem, as unidades experimentais, o nmero de repeties e o dado a ser usado na anlise estatstica. A. Ensaio de competio entre variedades de milho. Testaram- se 5 variedades, usando-se um total de 15 parcelas, com uma variedade por parcela. Colheram-se as espigas de cada parcela, que foram pesadas em conjunto. B. O mesmo que A, porm neste caso pesaram-se as espigas individualmente. Haveria diferena entre A e B no tocante interpretao dos resultados? C. Teste de raes para galinhas poedeiras: 4 raes foram fornecidas a 80 galinhas. As aves ficaram alojadas aos pares em gaiolas. Mediu-se a massa de ovos produzida durante 28 dias por gaiola e o ganho de peso de cada galinha durante o mesmo perodo. D. O mesmo que C, porm com gaiolas individuais. Como seria afetada a preciso do experimento?

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Estudos no-experimentais So aqueles onde nem todas as exigncias experimentais so respeitadas, devido a limitaes inerentes ao material estudado. Podem-se classificar os estudos no-experimentais em comparativos e nocomparativos. Nos estudos no-comparativos, examina-se uma determinada situao, procurando extrair dos dados respostas a determinadas questes. No existem tratamentos propriamente ditos. Exemplo 1.8. Trindade et al. (1990) coletaram 568 amostras de forrageiras nativas em 70 propriedades rurais do Rio Grande do Sul, nas quais determinaram o teor de zinco e enxofre. Com base neste levantamento, os autores recomendam, para a regio estudada, a suplementao da mistura mineral de bovinos e ovinos com estes elementos. Nos estudos comparativos no-experimentais, comparam-se grupos de unidades experimentais, embora, em rigor, no se possa afirmar que existam tratamentos, pois o controle das variveis bastante imperfeito, sujeitando os dados a vieses. Exemplo 1.9. Pimenta Filho e Lobo (1990) estudaram a mudana gentica no peso a um ano de idade em sete rebanhos Nelore, mediante trs mtodos de estimao. Num dos rebanhos aplicava-se o controle ponderal a todos os animais, e os trs mtodos concordaram entre si, levando a estimativas prximas ao ganho gentico esperado de 1,68 kg/ano. Nos demais rebanhos, o controle ponderal foi seletivo, isto , nem todos os animais foram controlados, e ocorreu considervel discordncia entre os mtodos, possivelmente devida a vieses oriundos na coleta de dados. Este exemplo ilustra a dificuldade de conseguir dados confiveis em estudos genticos. Questionrio 1. Para cada um dos casos abaixo relacionados, diga se se trata de um experimento, estudo comparativo ou estudo no-comparativo, justificando sua resposta. A. Inventrio florestal duma mata ciliar. B. Competio de hbridos de milho. C. Resposta da cebolinha a nveis crescentes de calagem.

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D. Incidncia de mastite bovina em rebanhos ordenhados manual e mecanicamente. 2. Discuta as vantagens e desvantagens de experimentos em relao a estudos comparativos e no-comparativos. Que tipo de controle pode-se exercer nestes estudos sobre as seis caractersticas bsicas dum bom experimento? Mensurao dos dados experimentais A. Variveis categricas sem ordenao So variveis, cujos valores se enquadram em categorias, sem que exista qualquer ordenao entre estes valores. O caso mais simples o de variveis com somente duas categorias, denominadas variveis dicotmicas. Eis alguns exemplos: Varivel Prenhez Uso de semente certificada Categorias Cheia / vazia Sim / no

H, porm, variveis que possuem mais de duas categorias: Varivel Categorias Tipo de parto Normal / distocia / aborto Colorao da flor Branca / vermelha / azul / roxa Observe - e isto essencial - que em nenhuma destas variveis as classes podem ser ordenadas. Assim, "cheia" no maior ou menor que "vazia"; nem tampouco vem "branca" necessariamente antes de "vermelha". B. Variveis categricas ordenadas

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Varivel Qualidade da l Qualidade do caf C. Variveis numricas discretas

Categorias (em ordem crescente) Corrente, Boa, Especial, Supra Rio, Riado, Duro, Mole

Os valores destas variveis podem ser quantificados e posicionados numa escala numrica, ficando eqidistantes; no existe nenhum outro valor intermedirio. So variveis geralmente relacionadas com a contagem de algum objeto ou fenmeno. Escalas de preferncia. 9 - gostei muitssimo; 8 - gostei muito; 7 - gostei regularmente; 6 - gostei ligeiramente; 5 - fiquei indiferente; 4 - desgostei ligeiramente; 3 - desgostei regularmente; 2 - desgostei muito; e 1 - desgostei muitssimo.

D. Variveis numricas contnuas Podem assumir, pelo menos em tese, qualquer valor numa escala numrica, dentro de uma amplitude aceitvel ou possvel. Questionrio 1. Classifique as seguintes variveis, conforme a escala de mensurao: A) Intervalo entre partos (em dias); B) Nmero de espiguetas por rcemo; C) Nmero de sementes germinadas por lote; E) pH do plasma sangneo; F) Grau de infestao por Phytophtora infestans (alto, mdio e baixo); G) Densidade aparente do solo (em g/cm); H) ndice de condio fsica de bovinos (varia de 0 = muito magro a 5 = muito gordo, de 0,5 em 0,5 ponto).

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