Anda di halaman 1dari 4

Objetivos Aplicar la tcnica de cromatografa por adsorcin para la separacin de dos colorantes Comprobar la separacin con base en el perfil

il de elucin

Introduccin Cromatografa en columna: Se emplea para la separacin de mezclas o purificacin de sustancias a escala preparativa. Como fase e s t a c i o n a r i a s e u s a , g e n e r a l m e n t e , gel de slice o almina dentro de una columna. La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin. Dicho disolvente pasa a travs de la columna por efecto de la gravedad o bien por aplicacin de presin (cromatografa flash). La columna se prepara mezclando el soporte con disolvente y se rellena la columna poniendo en el fondo de sta un poco de algodn o lana de vidrio, para evitar que la slica o la almina queden retenidas en la columna y que el disolvente se engrasada hasta el nivel del soporte. A continuacin se introduce la muestra por la parte super ior de la columna y se eluye con el disolvente elegido, recogindose por lo general en tubos de ensayo. Una columna de cromatografa es un tubo de vidrio relleno con una sustancia slida de propiedades adsorbentes constituida por pequeas partculas: gel de slice y almina son las ms usadas. Este relleno es lo que se conoce en cromatografa como la fase estacionaria. A travs de la columna se har pasar una corriente de un disolvente o mezcla de disolventes denominada eluyente y/o fase mvil .La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y se coloca sobre el adsorbente, en la parte superior de la columna, quedando adsorbida por el mismo. A continuacin se p a s a u n f l u j o d e e l u y e n t e a travs de la columna. Los compuesto s constituyentes de la mezcla s o n arrastrados por el eluyente a su paso, hacindoles avanzar a lo largo de la columna. Sin embargo, no todos los compuestos avanzan a la misma velocidad , y esta es precisamente la clave de la cromatografa .Algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente ( fase estacionaria) y por lo tanto avanzarn ms despacio. Por el contrario, otros apenas son retenidos y avanzarn a mayor velocidad .En general se dice que la separacin en la cromatografa se basa en la afinidad diferencial de los distintos compuestos por la fase mvil o la fase estacionaria. El orden aproximado de elucin de compuestos y de polaridad es aproximadamente el que se indica:

AZUL DE METILENO

FLUORESCEINA

RESULTADOS

TABLA 1. Valores de absorbancia obtenidos para la separacin de fluorescena y azul de metileno Vol. de elucin 3 6 9 12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 A493 0.007 1.172 2.190 0.148 0.018 0.010 0.007 0.014 0.008 0.010 0.065 0.015 0.011 0.016 A668 0.042 0.047 0.016 0.008 0.007 0.005 0.006 0.008 0.012 0.009 0.039 0.011 0.032 0.126 Vol. De elucin 45 48 51 54 57 60 63 66 69 72 75 78 81 84 A493 0.028 0.038 0.043 0.037 0.029 0.021 0.013 0.010 0.005 0.005 0.001 0.002 0.001 A668 0.343 0.573 0.759 0.741 0.583 0.442 0.277 0.161 0.078 0.037 0.019 0.013 0.10

2.5 2 1.5 1 0.5 0 0 -0.5 20 40 60 80 100 A493 A668

GRAFICA 1. INTERPOLACION DE LAS ABSORBANCIAS, PARA LA ABSORBANCIA A493 EL BLANCO UTILIZADO FUE AGUA, Y PARA LA ABSORBANCIA A668 EL BLANCO UTILIZADO FUE ETANOL-CIDO

Discusin El perfil de elucin se grafic a partir de los datos de la tabla 1 y el resultado se observa en la figura 1., Dicho perfil se elabor para comprobar la separacin de la mezcla. La elucin resulto ser la esperada, ya que en la grafica 1 se observaron dos picos en el espectro de absorcin, y existe un considerable espacio entre ellos, los cuales corresponden a la mxima elucin de los colorantes involucrados. La separacin entre ambas curvas nos indica una separacin efectiva. Al observar un espacio grande entre las dos curvas, nos habla de una buena resolucin en la separacin efectuada. Esto tiene mucho que ver con la afinidad de las fases mviles con los solutos, ya que indica que la fluorescena tiene mucha ms afinidad por el agua que por la almina, lo cual se debe a su alta polaridad ya que si se observa su frmula podemos ver que tiene varios tomos de oxigeno los cuales causan una carga parcial en cada uno de ellos y esto es aprovechado por el agua para solvatarlo. En el caso del azul de metileno, podemos observar en su estructura que tambin tiene tomos electronegativos (nitrgeno en este caso) sin embargo podemos ver tambin que este posee cargas parciales positivas lo cual hace que sea ms afn por la almina ya que se encuentra en estado alcalino, lo que a su vez nos indica que posee cargas negativas, as ambas son atradas y esto es lo que facilita la unin del azul con la almina, por esta razn adicionamos alcohol acido, la cual tiene un exceso de protones, por lo cual se comienzo a eluir el azul de metileno, esto se explica por el hecho de que los protones del alcohol se unen a las cargas negativas de la almina y comienza a eluir con el alcohol cido.

Conclusin

* El mtodo fue efectivo para la separacin de los colorantes involucrados, la fluorescena es mucho ms afn al agua que a la almina bsica y el azul de metileno es ms afn por la almina bsica. * Se logro separar la mezcla de colorantes satisfactoriamente con la tcnica aplicada

Bibliografa http://es.scribd.com/doc/14174282/1-ESPECTRO-DE-ABSORCION http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Documento_de_apoyo:Analisi s_de_Mezclas_espectrofotometrico_2228.pdf

Anda mungkin juga menyukai