Frecuencia y alteraciones hematolgicas asociadas a Ehrlichia spp. en perros atendidos en consulta privada en el Municipio de Boca del Ro, Veracruz.
Tesis
que para obtener el Ttulo de
Mdico Veterinario Zootecnista
Presenta
Gumersinda Hernndez Ferruz
Asesores: M. en C. Alvaro E. Peniche Cardea ME. Miguel Canales Rubio
Julio 2006
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I.- Resumen
Hernndez Ferruz Gumersinda. 2006. 30 pp. Frecuencia y alteraciones hematolgicas asociadas a Ehrlichia ssp. en perros atendidos en consulta privada en el Municipio de Boca del Ro, Veracruz. Tesis de Licenciatura. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Veracruzana. Asesores: Peniche Cardea lvaro Enrique de Jess y Canales Rubio Miguel.
La ehrlichiosis canina o pancitopenia tropical es una enfermedad causada por una rickettsia intracelular obligada del gnero Ehrlichia. Por su carcter de enfermedad re-emergente, el objetivo del presente trabajo fue determinar la frecuencia y las alteraciones hematolgicas asociadas a Ehrlichia ssp. en perros domsticos, atendidos en consulta privada en el Municipio de Boca del Ro, Ver. Se muestrearon aleatoriamente 100 perros iguales o mayores a dos meses de edad con diagnstico presuntivo de ehrlichiosis canina, y con presencia de garrapatas. Se colectaron muestras para hemograma en tubos con EDTA, y se realiz frotis mediante puncin auricular con aguja fina. En animales trombocitopnicos se hizo serologa mediante el kit SNAP 3Dx de Laboratorios IDEXX. Las garrapatas se colectaron y clasificaron como Rhipicephalus sanguineus. Se identific un 15% de animales con mrulas en linfocitos y monocitos clasificndolos en la fase aguda de la infeccin. Se encontraron 38 casos con trombocitopenia de los cuales, el 12% fueron seropositivos y de stos, el 50% present anemia normoctica normocrmica. Nueve animales seropositivos fueron negativos a frotis y se clasificaron en la etapa subclnica de la enfermedad. Solamente se tuvieron tres perros en fase crnica positivos a frotis y a serologa de los cuales, dos presentaron epistaxis y uno petequias abdominales difusas. Se identificaron cinco colonias endmicas a ehrlichiosis canina dentro del Municipio de Boca del Ro, Ver. Se concluye que la poblacin canina de este Municipio es susceptible a la presencia de Ehrlichia canis, lo cual conlleva un riesgo para la salud pblica.
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NDICE
I. RESUMEN -------------------------------------------- 2 II. INTRODUCCIN------------------------------------- 4 III. ANTECEDENTES------------------------------------- 5 IV. JUSTIFICACIN------------------------------------- 6 V. OBJETIVOS------------------------------------------ 6 VI. HIPTESIS------------------------------------------- 6 VII. MATERIALES Y MTODOS-------------------------- 7 VIII. RESULTADOS Y DISCUSIN----------------------- 9 IX. CONCLUSIN---------------------------------------- 22 IX. BIBLIOGRAFA-------------------------------------- 23 X. ANEXO------------------------------------------------ 29
4 II. INTRODUCCIN
La ehrlichiosis canina o pancitopenia tropical canina es una enfermedad causada por una rickettsia intracelular obligada del gnero Ehrlichia ssp., la cual se transmite por medio de la garrapata parda del perro Rhipicephalus sanguineus (Quiroz, 2000; Greene, 2000). En 1945, Moshkovki designa el nombre del gnero en honor a Paul Ehrlich (Murray et al., 1997).
El agente causal es un microorganismo pleomrfico, cocoide Gram (-) aerbico, que se localiza dentro del citoplasma de clulas mononucleares. Posteriormente a su reproduccin por fisin binaria, se disgregan en cuerpos elementales individuales o bien, forman pequeos racimos llamados vacuolas o mrulas, los cuales infectan, lisan e invaden otras clulas (Greene, 2000).
A la fecha, se han reconocido varias especies de Ehrlichia que afectan a los perros: E. canis, E. ewiini, E. platys, E. equi y E. chaffeensis; sta ltima, considerada como el principal agente de la ehrlichiosis monoltica humana (Corner y Farris, 1989; Dawson y Ewing, 1992; Inokuma et al., 2004).
Desde el punto de vista clnico, los signos comnmente encontrados en los pacientes afectados son anorexia, prdida de peso, fiebre, mucosas plidas, epistaxis, hemorragias retinales, edema de miembros, hepatomegalia, esplenomegalia y trastornos del S.N.C.; como hallazgos de laboratorio, destacan cuadros anmicos asociados con la trombocitopenia (Harrus et al., 1997; Dagnone et al., 2003); sin embargo tambin puede afectar al perro subclnicamente (Milonakis et al., 2005). En algunas ocasiones, la enfermedad puede provocar una coagulacin intravascular diseminada que pone en riesgo la vida del paciente (Merchan y Palker, 1998).
En el mbito de la salud pblica, la ehrlichiosis canina es conocida como una importante zoonosis, como lo muestran los trabajos realizados por Dawson et al. (1991); Unver et al. (2001) y Trapp et al. (2006).
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III. ANTECEDENTES
La ehrlichiosis canina es una enfermedad cosmopolita y ha sido reportada en diferentes pases como una enfermedad emergente; en Japn, Suto et al. (2001), confirma por lesiones patolgicas, serologa y por Reaccin en Cadena de Polimerasa (PCR) el primer caso en un perro pekins de once aos de edad procedente de Indonesia.
En una investigacin desarrollada en Tailandia por Suksawat et al. (2001) en 49 perros que presentaban fiebre, anemia o trombocitopenia, identificaron que el 3% de ellos, result con elevados ttulos de anticuerpos a E. canis.
En Zimbawe, en un estudio realizado a 105 perros en el Hospital Veterinario de Harare, Matthewman et al. (1993) demostraron una seropositividad del 52% a Ehrlichia spp. mediante inmunofluorescencia indirecta.
En Italia Buonavoglia et al. (1995), muestrean 423 perros reportando el 20% de seroprevalencia a E. canis; asimismo, refieren que de 25 animales con signos clnicos sugestivos a ehrlichiosis, 23 (92%) tuvieron niveles importantes de anticuerpos contra dicho agente.
En Amrica del Norte, Keefe et al. (1982) menciona en un estudio realizado en 2,077 perros del ejrcito de U.S.A., un 11% (233 casos) de seropositividad a E. canis. Por su parte Stokham et al. (1992) en Missouri, diagnostican la ehrlichiosis granuloctica canina en 37 perros determinando serolgicamente ttulos contra dicho agente en el 84% de los casos.
En un estudio realizado en Brasil por Dagnone et al. (2003), se seleccionaron 129 perros para determinar la frecuencia de ehrlichiosis canina asociada con anemia, trombocitopenia y presencia de garrapatas; del total, 68 animales tuvieron fases evolutivas de R. sanguineus, 61 padecan trombocitopenia; el 21% de los animales anmicos, tuvo ehrlichiosis.
A nivel nacional, en Yucatn se realiz un estudio en 120 perros procedentes de cuatro clnicas veterinarias particulares mediante frotis sanguneo y exmenes serolgicos se diagnostic un 5% y 44% de casos positivos a E. canis, respectivamente (Rodrguez-Vivas et al., 2005).
En Veracruz, Reyes (2004) en el Municipio de Boca del Ro, report por identificacin de mrulas en 25 frotis sanguneos el 2.9% de casos positivos a E. canis durante el perodo 1999-2002.
6 Por su parte, Ortega (2005) en un estudio realizado en 100 perros atendidos en una clnica veterinaria de la ciudad de Cardel, Ver., encontr, a travs del diagnstico de frotis sanguneo un 5% de pacientes afectados con Ehrlichia ssp.
IV. JUSTIFICACIN
Debido a que la ehrlichiosis canina es una enfermedad emergente en pases con climas templados y tropicales como lo mencionan Suto et al. (2001), y ante la falta de estudios que determinen su presencia en el Municipio de Boca del Ro, Ver., el presente trabajo pretende aportar informacin que permita conocer su frecuencia en esta localidad, en animales con signologa clnica o diagnstico presuntivo, con la finalidad de coadyuvar en el fortalecimiento de este indicador epidemiolgico a nivel estatal y nacional.
V. OBJETIVOS
a.) General
Determinar la frecuencia y alteraciones hematolgicas asociadas a Ehrlichia ssp. en perros domsticos, atendidos en consulta privada en el Municipio de Boca del Ro, Ver.
a.) Especficos
I. Determinar la frecuencia de la ehrlichiosis canina en animales con signologa clnica asociada a la enfermedad. II. Identificar las principales alteraciones hematolgicas en los animales afectados. III. Identificar la presencia o ausencia de trombocitopenia en los animales de estudio.
VI. HIPTESIS
La poblacin canina del Municipio de Boca del Ro, Ver., se encuentra afectada por Ehrlichia spp.
7 VII. MATERIALES Y MTODOS
El presente estudio se realiz durante el perodo julio-diciembre del 2005 en el Municipio de Boca del Ro, Ver., el cual limita al Norte con el Municipio de Veracruz, al Sur con el Municipio de Alvarado, al Este con el Golfo de Mxico, y al Oeste con el Municipio de Medelln.*
La poblacin en estudio estuvo conformada por la totalidad de los casos clnicos o con diagnstico presuntivo de ehrlichiosis canina, atendidos en una clnica veterinaria privada en el Municipio de Boca del Ro, Ver.
Como criterio de inclusin, se consider todo aquel animal igual o mayor a dos meses de edad sin importar raza ni sexo, y el no haber sido tratados con tetraciclinas, doxiciclinas o dipriopinato de imidocarb cuando menos los ltimos dos meses. Al momento de la consulta, se verific la presencia de garrapatas adultas, las cuales se colectaron y guardaron en bolsas de plstico con sello hermtico para su posterior clasificacin taxonmica mediante el empleo de la clave descrita por Mehrlon et al. (1993).
Para los estudios hematolgicos, se colect una muestra sangunea de la vena ceflica en tubos vacutainer de 10 ml con EDTA, se identificaron con nmero progresivo y se transportaron en una hielera de poliuretano con refrigerantes comerciales, hasta su procesamiento en el laboratorio de Anlisis Clnicos Gainza, S.A., en el Municipio de Veracruz.
Para la observacin de mrulas en frotis sanguneo, se hizo previa antisepsia, una puncin con aguja de insulina en la cara interna del pabelln auricular del perro, como lo menciona Bush (1999) y Lpez et al. (1999). Los frotis fueron identificados con el mismo nmero del tubo vacutainer, par su tincin con Giemsa modificado en apego a lo descrito por Rodrguez y Cob (2003).
Se realiz una encuesta con preguntas abiertas y cerradas, con la finalidad de conocer algunos aspectos relacionados con el cuidado y medicina preventiva del animal (Anexo).
Para el estudio serolgico, se emple un estuche de diagnstico comercial (SNAP 3Dx) del Laboratorio IDEXX, U.S.A., el cual incluye antgenos especficos para Ehrlichia canis, Dirofilaria immitis y Borrelia burgdorferi; para la deteccin de ehrlichiosis canina, el kit tiene una sensibilidad del 99% y una especificidad del 100%, con un nivel de confianza del 95%.
* www.inegi.org.mx
8 La informacin recopilada de las encuestas as como sus resultados del laboratorio se capturaron en hojas de trabajo de campo y se procesaron mediante un programa de cmputo en una base de datos; posteriormente, se analizaron por estadstica descriptiva para su interpretacin (Daniel, 2002).
La frecuencia de animales positivos se expres en porcentaje y se obtuvo dividiendo el nmero de casos positivos entre el total de muestras analizadas multiplicando esta fraccin por cien (Thrusfield, 1990).
9 VIII. RESULTADOS Y DISCUSIN
La poblacin en estudio muestreada de manera aleatoria consisti en 52 machos y 48 hembras.
En lo concerniente a la variable raza, la poblacin se clasific en animales puros y criollos, cuya participacin fue del 84% y 16%, respectivamente; entre las principales razas puras destacaron la Doberman (18%), la Labrador Retriever (11%) y la Pastor Belga Malinois (10%).
Por edad, la poblacin se clasific en cuatro grupos: a) cachorros: de 4 meses a 1 ao: b) jvenes: de 1 a 3 aos; c) adultos: 3 a 7 aos, y d) senectos: de 7 en adelante (grfica 1).
20 36 37 7 Cachorros J venes Adultos Senectos
Grfica 1. Clasificacin de la poblacin en estudio por grupo de edad (%).
A la inspeccin clnica, el total de la poblacin muestreada present garrapatas adultas ingurgitadas as como estadios evolutivos principalmente ninfas. De acuerdo con la clasificacin taxonmica sealada por Mehrlon et al. (1993), los ixdidos encontrados se identificaron en base a las caractersticas y estructuras morfolgicas entre las que destacan el escudo, el gnatosoma hexagonal, el surco anal y la ausencia de escudo ornamentado, como hembras y machos de la especie Rhipicephalus sanguineus.
Quiroz (2000), seala que los climas tropicales-hmedos como el que caracteriza al Municipio de Boca del Ro, Ver., favorecen la presencia y el desarrollo de esta especie la cual est demostrado por Simpson et al. (1991), que se comporta como un vector biolgico potencial en la transmisin de enfermedades infecciosas y hemoparasitarias en
10 perros; sin embargo, Murphy et al. (1998), reportan tambin a Amblyomma americanum y a Dermacentor variabilis como vectores transmisores de este tipo de enfermedades. Es importante sealar, que la primera especie s est reportada en Mxico, y la segunda es endmica del este de los Estados Unidos (Georgi y Georgi, 1994).
Derivado de la encuesta, se observ que el 53% de los perros muestreados habitan en el patio de las casas, el 35% dentro de stas y el 12% en los jardines de las mismas; al respecto, Inokuma et al. (1999) y Bulla et al. (2004), refieren que los perros que habitan en el exterior de las casas-habitacin, tienen mayor probabilidad de contacto con Rhipicephalus sanguineus, situacin que podra ocasionar cualquiera de las enfermedades transmitidas por este vector.
Por otra parte, el 52% de los propietarios manifest acostumbrar llevar a sus mascotas de paseo a lugares como parques, jardines y en algunas ocasiones, a terrenos baldos, lo cual tambin conlleva a favorecer el contacto con garrapatas.
En relacin a la frecuencia de baos para el control de ectoparsitos, las encuestas sealaron que el 62% de las personas baa a sus mascotas cada siete das, el 17% cada quince, el 11% cada veinte y el 10% cada treinta das. En este sentido, cabe reflexionar que Rhipicephalus sanguineus requiere de tres hospederos para completar su ciclo biolgico, el cual se desarrolla en 63 das como lo menciona Quiroz (2000), y que el tiempo de nutricin de las fases evolutivas de la garrapata en el perro es de seis das (Soulsby, 1987). Ante esto, y para evitar el perodo de ecdisis de la garrapata en el perro, los baos para su control deben aplicarse cada siete das en los animales infestados (Soulsby, 1987; Georgi y Georgi, 1994).
Al analizar los resultados, se observa que el 37% de los propietarios de las mascotas, no controlan esta problemtica al baar a sus animales fuera del rango semanal. Al respecto, Mil (2005) y Ortega (2005), refieren tambin en sus respectivos trabajos, una mala aplicacin del bao ixodicida al sealar que ms del 70% de los dueos aplican stos despus de siete das.
Lo anterior, permite suponer que al desconocer el ciclo biolgico de Riphicephalus sanguineus, las medidas encaminadas para su control no permiten llevarlo a cabo de manera eficiente ya que las hembras llegan a ovopositar cada vez hasta 4000 huevos, situacin que propicia eventos de constante reinfestacin, aunado a que la supervivencia de la ninfa en el medio ambiente sin alimentarse es de ms de seis meses, y en el caso de la garrapata adulta, de ms de 19 meses (Soulsby, 1987; Quiroz, 2000).
11 Para el control de garrapatas el 35% de los dueos usa pipetas de aplicacin pour-on, el 29% emplea jabones ixodicidas y el 4% no utiliza ningn producto; es importante mencionar, que el 32% de los dueos las controla mediante la inyeccin subcutnea de Ivermectinas durante la visita al consultorio veterinario.
Es necesario destacar la concientizacin de los dueos para mantener a sus mascotas libres de ectoparsitos y as evitar los riesgos de salud que esto conlleva, ya que slo el 4% de ellos no previene las infestaciones.
Sin embargo, en lo que concierne al control de estos ectoparsitos en las casas-habitacin existe una gran diferencia, ya que el 76% de los encuestados seal no hacer nada ante su presencia, y el 24% manifest emplear insecticidas de uso comercial y compuestos organofosforados. Al reflexionar sobre estos resultados y al destacar de la encuesta que el 65% de los perros habitaban en patios y jardines donde las condiciones de humedad favorecen el desarrollo de las garrapatas, se evidencia la necesidad que el Mdico Veterinario dedicado a la clnica de pequeas especies asesore a los propietarios sobre el control de las garrapatas no solamente en el animal, sino que tambin es muy importante realizarlo en el entorno del perro, ya que de no trabajar en este sentido, se propicia el encuentro de hospederos situacin que conlleva a constantes reinfestaciones.
El 22% de los perros muestreados provino del Fraccionamiento Costa de Oro, el 20% de la cabecera municipal de Boca del Ro, el 6% del Fraccionamiento La Tampiquera, el 4% de la Unidad Habitacional El Morro y el 48% restante, de otras colonias.
Los resultados de los hemogramas permitieron identificar la presencia de varios tipos de anemia as como casos de trombocitopenia. En la grfica 2 se aprecia la frecuencia de casos de animales con y sin anemia detectados durante el estudio.
12 0 20 40 60 80 Sin anemia Con anemia
Grfica 2. Casos de animales con y sin anemia en la poblacin estudiada.
El diagnstico de anemia se establece a travs de una interpretacin conjunta de historia clnica, del examen fsico del paciente y de los hallazgos provenientes del hemograma (McKenzie, 2000). Con base en el ndice eritroctico citado por Barger (2002) las anemias se clasificaron por el Volumen Corpuscular Medio (CMV) en microcticas, normocticas y macrocticas, y por la Concentracin Media de Hemoglobina (CMHC) en hipocrmicas, normocrmica e hipercrmicas (Tabla 1).
Tabla 1. Clasificacin de los tipos de anemias encontrados en base al ndice eritroctico (%).
13 La principal anemia identificada fue la normoctica normocrmica que se presenta como resultado de hemorragias, hemlisis o de infecciones bacterianas, rickettsiales, virales y/o parasitarias, neoplasias malignas, deficiencia de hierro o vitamina B (Mckenzie, 2000); esta anemia no es considerada grave, a menos que haya una fuente adicional de prdida de sangre o destruccin de glbulos rojos (Barger, 2002).
Dentro de la anemia normoctica se presentaron pocos casos de tipo hipercrmica e hipocrmica (Tabla 1). La anemia normoctica hipercmicas se establece por deficiencias de cido flico o enfermedades hepticas, o en casos hemlisis intravascular (Barger, 2002).
En 6% de los casos analizados, se present anemia normoctica hipocrmica, la cual se hace evidente ante la falta de hierro, en intoxicaciones por plomo o en problemas de talasemia (McKenzie, 2000).
La anemia microctica hipocrmica se observ en menor frecuencia que las anteriores; sta, es resultado de desrdenes endocrinos y se presenta durante la leucemia felina y en la ehrlichiasis canina (McKenzie, 2000).
La clasificacin de las anemias en regenerativas y no regenerativas, es de suma importancia en el diagnstico de laboratorio (Neiger et al., 2002). Las primeras, se asocian a una eritropoyesis activa, caracterizada por un incremento del nmero de reticulocitos y de hemates nucleados aunado a eventos de anisocitosis y policromasia en la sangre perifrica. Por su parte, las anemias no regenerativas ocurren por falta de una respuesta eritropoytica eficaz de la mdula sea (Barger, 2002).
Las alteraciones hematolgicas en infecciones por Ehrlichia canis incluyen anemias que suelen ser no regenerativas (Matthewman et al., 1993; Bichard et al., 1996; Goldman et al., 1998).
De acuerdo a lo sealado por Barger (2002), se precis como trombocitopenia todo aquel resultado con un rango de <160,000 plaquetas/mm. En este sentido, los resultados obtenidos se muestran en la grfica 3.
14 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 Sin Trombocitopenia Con trombocitopenia
Grfica 3. Casos de animales con y sin trombocitopenia en la poblacin estudiada.
Rikihisa (1991), menciona cinco mecanismos fisiopatolgicos que ocasionan trombocitopenia: a) disminucin en la produccin de plaquetas; b) defectos en la produccin de trombocitos; c) distribucin anormal de stos; d) acelerada destruccin o utilizacin de plaquetas, y e) excesiva prdida de sangre.
Entre las principales causas que contribuyen al establecimiento de este hallazgo hematolgico, McKenzie (2000) cita a las enfermedades linfoproliferativas como tumor de mdula sea, deterioro de la produccin de plaquetas y esplenomegalia por secuestro esplnico; Bush (1999) refiere a las infecciones bacterianas, parasitarias, rickettsiales y virales; Barger (2002), menciona a las intoxicaciones con algunos compuestos qumicos en raticidas, hemorragias severas o casos de esplenomegalia y Grinden, et al. (1991), Harrus, et al. (1999), Bulla et al. (2004) y Brandao et al. (2006), afirman que la trombocitopenia debe considerarse como el trastorno ms frecuente y que puede variar en magnitud, en las diferentes etapas de la ehrlichiosis canina.
De los animales afectados con trombocitopenia, el 87% de los casos correspondieron a animales de raza pura (5/38) y el 13% a perros criollos (33/38).
15 Del total de la poblacin en estudio, solamente en 15 casos se pudieron observar mrulas en linfocitos y monocitos mediante frotis sanguneo; por sexo, 12 fueron en machos; por raza, 14 en animales puros y por edad, 9 en animales jvenes. Estos resultados concuerdan con lo expresado por Harrus et al. (1999), quienes sealan que no existe predisposicin de raza, sexo ni edad para infectarse de ehrlichiosis canina.
Adrinsen et al. (2003), reportan que las hembras tienden a infectarse ms que los machos; esta aseveracin, no coincide con el resultado obtenido cuando se evalu la variable sexo en los casos positivos a frotis sanguneo, ya que en el presente estudio, solamente se observaron mrulas en tres hembras.
Bichard (1996) y Husxoll et al. (1970), afirman que la ehrlichiosis se presenta de manera frecuente en las razas Pastor Alemn y Doberman Pinscher; en el presente estudio, el 24% (9/38) de los casos positivos a frotis fueron Pastor Alemn, situacin que confirma lo expresado por dichos autores. Ninguno de los animales afectados, fue Doberman Pinscher.
En un estudio realizado en el Municipio de Veracruz, Ver., Mil (2005) refiere que en 30 casos analizados, en el 100% de los frotis se encontraron mrulas; sin embargo, en la presente investigacin, stas no pudieron observarse en el 85% de los casos.
El encontrar vacuolas o mrulas en clulas mononucleares es un trabajo difcil que requiere paciencia, y se logra realizando frotis sanguneos delgados (Greene, 2000). Al respecto, Bulla et al. (2004), afirman que la sensibilidad de este mtodo diagnstico es baja, debido a que se encuentran mrulas en slo un 4% de los animales positivos aunque Rodrguez-Vivas et al. (2005) las observan slo en el 5% de 120 perros estudiados, y Tarello (2003) menciona porcentajes de variacin en neutrfilos del 0.5% al 11%.
Desde el punto de vista clnico, Greene (1999) y Sainz et al. (2005) establecen que es factible observar mrulas de manera transitoria durante la etapa aguda de la enfermedad, por lo que en muchos pacientes con ehrlichiosis stas no se logran identificar; no obstante que la posibilidad de observacin de dichos corpsculos de inclusin en las clulas mononucleares es un evento probabilstico, su presencia es definitiva para establecer un diagnstico de infeccin por Ehrlichia canis (Bichard, 1996).
16 Dentro de la biologa de la enfermedad, Iqbal et al. (1994) y Skotarczak (2003), sealan tres fases:
a) aguda: se inicia de 8 a 20 das post-infeccin. Las manifestaciones clnicas que se presentan son: fiebre, depresin, anorexia, prdida de peso, disnea y linfadenopata. Los hallazgos de laboratorio sealan trombocitopenia, leucopenia, anemia e hipergamaglobulinemia.
b) subclnica: es inmediata a la anterior y est asociada con la persistencia de la infeccin; los principales trastornos hematolgicos son trombocitopenia, leucopenia variable, anemia ligera y ausencia de signos clnicos.
c) crnica: ltima fase caracterizada por hemorragias petequiales, epistaxis y edema palpebral, emaciacin y shock hipotensivo. Los resultados de laboratorio incluyen trombocitopenia, leucopenia e hipergamaglobulinemia; generalmente, esta etapa es de pronstico desfavorable.
Smith (1975), menciona que la presencia de mrulas y de trombocitopenia son los hallazgos de laboratorio frecuentemente encontrados en la ehrlichiosis canina. Asimismo, Bulla et al. (2004) afirman que los niveles plaquetarios son un buen indicador y que la magnitud de la trombocitopenia aumenta la confiabilidad del diagnstico; por ello, el estudio serolgico se desarroll nicamente en animales con cuentas menores a 160,000 plaquetas/mm, los cuales fueron considerados como trombocitopnicos, en apego a lo expresado por Barger (2000). Los resultados se presentan en la grfica 4.
26 12 0 5 10 15 20 25 30 Negativos Positivos
Grfica 4. Nmero de casos seronegativos y seropositivos en animales trombocitopnicos.
17 Del total de animales trombocitopnicos, el 68% fueron seronegativos y el 32% seropositivos; de stos, 3 eran hembras (25%) y 9 machos (75%).
Por edad, el 67% de los animales seropositivos (8/12) se encontraron entre los 4 meses y 3 aos; en animales mayores de 3 aos, se obtuvo el nmero de casos y el porcentaje restante.
Stephenson y Ristic (1978) e Inokuma et al. (1999), afirman que el sexo y la edad no estn asociados con seropositividad, ya que reportan casos de ehrlichiosis canina en ambos sexos en animales de 3 meses hasta 13 aos; sin embargo, Rodrgruez-Vivas et al. (2005), reportan un OR=6.77 (CI=1.76-25.97) para animales de 2-4 aos (p=0.005), y un OR=4.24 (CI=1.04-17.21) para animales mayores de 4 aos (p=0.043), lo que indica un mayor grado de susceptibilidad en animales jvenes, situacin que tambin se observ en la presente investigacin.
Los 12 animales seropositivos fueron de raza pura predominando la Golden y Labrador Retriever, as como la Pastor Alemn y Pastor Belga Malinois. En este sentido, los datos obtenidos coinciden con lo expresado por Inokuma et al. (1999) quienes citan a la raza Golden Retriever como una de las de mayor susceptibilidad junto con la Beagle y Pointer; asimismo, con lo publicado por Stephenson y Ristic (1978), quienes refieren prevalencias altas de ehrlichiosis canina en razas puras y cruzas de Pastor Alemn.
La presencia de animales trombocitopnicos seronegativos puede deberse a cualquiera de los cinco mecanismos fisiopatolgicos mencionados por Rikihisa (1991), ya que inmunolgicamente no reaccionaron ante el kit diagnstico.
Los tipos de anemias encontrados en animales seropositivos se muestran en la tabla 2.
Tabla 2. Clasificacin de los tipos de anemias encontrados en base al ndice eritroctico en animales seropositivos.
18 Como se aprecia en la tabla anterior, la anemia normoctica normocrmica fue la de mayor frecuencia (50%), la cual como sealan Goldman et al. (1998), Barger (2000) y Suto et al. (2001), puede estar presente en enfermedades rickettsiales como es el caso de la ehrlichiosis canina.
En lo concerniente a los casos de anemia normoctica hipercrmica detectados en animales seropositivos, stos pueden ser consecuencia de dos factores: a) una hemlisis intravascular (poco frecuente), y b) una hemlisis durante la toma y conservacin de la muestra (frecuente), lo cual causar una cada en el valor del hematocrito al permanecer toda la hemoglobina en la sangre, situacin que aumentar los niveles de la Concentracin Media de Hemoglobina Corpuscular dando como resultado cuentas errneamente altas (Bush, 1999; Meyer y Harvey, 1999).
La presencia de anemia normoctica hipocrmica, puede estar asociada a carencia crnica de hierro por prdida de sangre, enfermedad crnica inflamatoria, deficiencia diettica y de piridoxina, as como a una mala asimilacin y utilizacin de este mineral (Bush, 1999; McKenzie, 2000).
En apego a lo descrito por Harrus et al. (1998), los signos clnicos considerados al momento de la consulta para establecer un diagnstico presuntivo de ehrlichiosis canina fueron predominantemente anorexia, fiebre, mucosas plidas, prdida de peso progresiva, linfadenitis, edema de miembros posteriores, petequias, epistaxis, ataxia de marcha y esplenomegalia; en este sentido, los animales positivos a la presencia de mrulas en frotis y a serologa, manifestaron unos u otros. Es importante sealar, que slo se observ en dos perros epistaxis, y en uno petequias abdominales difusas.
En dos animales seropositivos que se encontraban en fase crnica de la enfermedad, se observ esplenomegalia marcada; al respecto, Harrus et al. (1998), mencionan que esta patologa se debe a que E. canis se aloja desde la fase subclnica hasta la fase crnica de la infeccin en este rgano, antes de ser eliminada.
Leiva et al. (2005), sealan que no debe descartarse la presencia de ehrlichiosis canina en los pacientes con problemas oculares como conjuntivitis, retinitis y edema corneal; ante esto, Harrus et al. (1999), aconsejan realizar en estos casos, las pruebas de laboratorio pertinentes para llegar al diagnstico definitivo. Durante el estudio, dos perros que presentaron conjuntivitis a la inspeccin clnica y con antecedentes de infestacin reciente por garrapatas, fueron diagnosticados por el laboratorio como positivos, debido a la presencia de mrulas en clulas mononucleares.
19 En base los signos clnicos identificados durante la consulta, en la tabla 3 se presentan las fases en que se encontraron los animales trombocitopnicos al momento de la consulta, en apego a lo descrito por Iqbal et al. (1994) y Skotarczak (2003).
Tabla 3. Animales trombocitopnicos positivos a frotis, serologa y fase de la enfermedad en la que se encontraban al momento de la consulta. Caso Frotis Serologa Fase * 1 - - Sc 2 - + Sc 3 + - A 4 + - A 5 - + Sc 6 - - Sc 7 + - A 8 - - Sc 9 + - Sc 10 - + Sc 11 - - Sc 12 + - A 13 + - A 14 - + Sc 15 - - Sc 16 - + Sc 17 - - Sc 18 + + C 19 - - Sc 20 - - Sc 21 - - Sc 22 + - A 23 - - Sc 24 + - A 25 - - Sc 26 - + Sc 27 - - Sc 28 + - A 29 - - Sc 30 - - Sc 31 - - Sc 32 + + C 33 - + Sc 34 - + Sc 35 - + Sc 36 - - Sc 37 + + C 38 - - Sc
* A = aguda Sc= subclnica C= crnica
20 Como se observa en la tabla 3, sta slo contempla 12 de los 15 animales positivos a presencia de mrulas en frotis sanguneo; esto es debido a que tres perros que fueron positivos a frotis al no ser trombocitopnicos, no se incluyeron en la relacin. Sin embargo, y de acuerdo a lo mencionado por Bichard (1996), la presencia de mrulas en las clulas mononucleares de estos animales, fue definitiva para establecer un diagnstico de infeccin aguda por Ehrlichia canis.
Sainz et al. (2005), mencionan que cuando Ehrlichia canis penetra en las clulas mononucleares su presencia en sangre se manifiesta durante la fase aguda de la enfermedad; sin embargo, Greene (2000) y Egenvall et al. (2000), reportan que las mrulas slo se observan hasta 30 das postinfeccin, coincidiendo este tiempo con la fase aguda del proceso. Ante estas aseveraciones, el 73% de los animales positivos a presencia de mrulas (11/15) se encontraba en esta etapa (Tabla 3).
En esta misma tabla se aprecia que el 100% de los casos positivos a frotis result negativo al momento del estudio serolgico; en este sentido, Skotarczak (2003) y Sainz et al. (2005) precisan que en la etapa aguda de la infeccin, existen ttulos bajos de Inmunoglobulinas G en sangre, los cuales no son suficientes para ser detectados por pruebas serolgicas. Por su parte, Lpez et al. (1999) afirman que la prueba serolgica puede ser negativa en la primera fase de la ehrlichiosis aunque existan signos clnicos, o que tambin esto es posible en los ltimos perodos de la fase crnica, ante una evidente inmunodepresin.
El 75% de los animales seropositivos (9/12) fue negativo a frotis y se clasificaron en la etapa subclnica de la infeccin (Tabla 3); esto se explica en base a lo publicado por Skotarczak (2003), quienes reiteran que los perros permanecen en esta etapa de 40 a 120 das post-infeccin manifestando durante la misma, una respuesta serolgica detectable, transitoria presencia de mrulas y ausencia de signos clnicos.
Del total de perros trombocitopnicos, slo tres fueron positivos a frotis y a serologa; ante la presencia de dos casos de epistaxis y uno de petequias en estos animales, se clasificaron dentro de la fase crnica de la enfermedad (Tabla 3). Estos resultados encuentran su sustento en las reflexiones planteadas por Lpez et al. (1999), quienes indican que un alto ttulo de anticuerpos en los perros afectados, puede ser causado por eventos de exposicin repetida (reinfecciones) frecuentes en la fase crnica, o por un gran nmero de rickettsias en sangre.
21 Los animales positivos a frotis y a serologa procedieron en su mayora de los fraccionamientos Costa de Oro, La Tampiquera y El Estero; sin embargo, tambin se encontraron casos de seropositividad en dos perros del Fraccionamiento Joyas de Mocambo, y en otros dos de la cabecera Municipal de Boca del Ro.
22 IX. CONCLUSIN
La presente investigacin permiti identificar que la poblacin canina del Municipio de Boca del Ro, Ver., es susceptible a la presencia de Ehrlichia canis, lo cual conlleva un riesgo inminente para la salud pblica.
23 X. BIBLIOGRAFA
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29
XI. ANEXO
30 Encuesta para conocer factores asociados a la presencia de Ehrlichia ssp. en el Municipio de Boca del Ro, Ver.
Caso No.______
Nombre del dueo_________________________________________
ESTUDIO RETROSPECTIVO DEL DISTEMPER CANINO EN ANIMALES LLEGADOS AL HOSPITAL UNIVERSITARIO DE VETERINARIA (Ciudad de Santa Cruz de La Sierra, Quinquenio 2002-2006)
ANTECEDENTES DE TESIS DE INVESTIGACION SOBRE LA PREVALENCIA DE OTODECTES CYNOTIS EN CANINOS DOMESTICOS CANIS LUPUS FAMILIARIS MEDIANTE DIAGNOSTICO DE LABORATORIO POR HISOPADOS OTICOS EN EL CENTRO POBLADO DE SAN ISIDRO