Anda di halaman 1dari 4

Isolasi Senyawa Flavonoid dari Launaea procumbens Roxb.

dengan Metode HPTLC Flavonoid merupakan salah satu kelas yang paling karakteristik dari senyawa pada tumbuhan tingkat tinggi. Tugas terpenting dalam paradigma ini adalah skrining senyawa pada tanaman. Studi kromatografi senyawa berfungsi untuk menjadi sumber yang sangat berguna dan dapat diandalkan dalam proses skrining senyawa bioaktif dalam tanaman. Menurut informasi etnobotani, telah dilaporkan bahwa tanaman Launaea procumbens memiliki potensi antikanker. Launaea procumbens adalah ramuan abadi polimorfik dengan akar bantalan tunas (sehingga tanaman sering tumbuh dalam kelompok), berbunga hingga 20-40 cm tinggi, dengan daun roset basal dan dengan (satu sampai) beberapa , bukan minggu , procumbent untuk menaik - tegak, berdaun ke berdaun berbunga batang , tanaman penuaan dengan kayu (dan sering bercabang) mulia; rosulate inovasi berdaun di node yang lebih rendah sering batang hadir . Oleh karena itu dalam penelitian ini, upaya telah dilakukan untuk mengidentifikasi senyawa flavonoid Launaea dengan menggunakan TLC dan metode derivatisasi kimia. Selanjutnya, isolasi senyawa yang sama dilakukan dengan metode HPTLC menggunakan pelarut standar yaitu etil asetat : Asam formiat : asam asetat glasial : air (12.1 : 1.3 : 1.1 : 2.8) . Konfirmasi isolasi dilakukan dengan spektroskopi inframerah diikuti oleh Ultraviolet - Spektroskopi Visible. BAHAN DAN METODE : 1. Pembuatan Simplisia Daun dari tanaman dipisahkan , dicuci di bawah air keran mengalir dan dikeringkan pada 45 C dalam oven. Daun kering kemudian dihomogenisasi menjadi bubuk halus dan disimpan dalam wadah kedap udara untuk penyimpanan. 2. Proses Ekstraksi Ekstrak dilakukan dengan cara maserasi menggunakan pelarut metanol. Proses dilakukan dengan cara 10 gram serbuk simplisia dilarutkan dalam 100 ml pelarut. Kemudian larutan dipanaskan pada suhu 55C selama 5 menit dan selanjutnya disegel dengan stopper kaca dan disimpan di rotary shaker selama 24 jam. Setelah 24 jam larutan dibuat menjadi ekstrak kental menggunakan rotavapor pada suhu 45C untuk digunakan lebih lanjut.

3. Skrining Flavonoid Proses awal dilakukan dengan uji kualitatif dasar flavonoid dengan cara 0,5 ml ekstrak dicampur dengan 2 ml H2SO4 dan beberapa magnesium. Selanjutnya, ekstrak tersebut dilakukan pengujian dengan metode kromatografi lapis tipis. Pelarut yang digunakan adalah etil asetat, asam asetat glasial, asam formiat dan aqua destilata dengan perbandingan ( 12.1 : 1.3 : 1.1 : 2.8 ) . Dalam prosedur Skrining TLC, strip tipis 3 x 10 cm TLC Silica Plate (TLC Silica gel 60 F254, Merck), diambil dan diresapi dengan penurunan ekstrak. Lempeng tersebut kemudian dikeringkan dan disimpan untuk pembangunan di ruang kromatografi yang mengandung 10 ml dari sistem pelarut disiapkan. Setelah didapatkan hasil lempeng diperiksa di bawah Chamber UV pada 366 nm. Senyawa flavonoid yang didapatkan dikonfirmasi oleh derivatisasi kimia, di mana lempeng dikembangkan disemprot dengan larutan etanol 1 % dari AlCl3. 4. Preparatif HPTLC dari Ekstrak Hasil yang didapat dari TLC dilanjutkan dengan meode HPTLC. Sebelum sampel digunakan, 20 x 10 cm HPTLC plate ( HPTLC Silica gel 60 F254, Merck ) diaktifkan pada 110 C selama 30 menit. 2000l ekstrak ini kemudian ditetapkan sebagai band tunggal mm Panjang 180 pada pelat HPTLC diaktifkan. Lempeng kemudian berkembang dengan 10 ml pelarut sistem standar, pelarut yang digunakan adalah etil asetat, asam asetat glasial, asam formiat dan aqua destilata dengan perbandingan ( 12.1 : 1.3 : 1.1 : 2.8 ). Selanjutnya hasil tersebut diperiksa di bawah Chamber UV pada 366 nm . 5. Isolasi Senyawa Flavoind Lempeng yang telah didapat kemudian dilihat hasilnya dan diisolasi. Lempeng itu disimpan di Kamar UV pada 366 nm dan band flavonoid ditandai pada timbangan. Area yang dipilih kemudian tergores keluar bersama dengan silika , dengan pisau bedah yang tajam dan dikumpulkan dalam tabung eppendorf. Senyawa flavonoid kemudian dielusi dari gel silika dengan metanol dan zat yang dikumpulkan. Zat dipekatkan dengan penguapan metanol pada suhu kamar dan volume akhir disimpan 1/3 yang asli dan ditandai sebagai FRC 1 [ 20-21 ] . FRC 1 kemudian co dikromatografi dengan ekstrak kasar untuk konfirmasi band pada Rf yang sama . Isolasi Konstituante flavonoid dari Launaea proumbens Roxb . oleh preparatif

6. Konfirmasi Isolasi Flavonoid Konfirmasi lebih lanjut dari isolasi flavonoid dilakukan dengan menganalisis FRC 1 dalam spektrofotometer UV -Visible untuk puncak tunggal dan Inframerah HASIL DAN PEMBAHASAN Proses Kromatografi Lapis Tipis ( TLC ) menegaskan kemungkinan adanya flavonoid dengan mengungkapkan band neon yang pada derivatisasi lanjut memberikan fluoresensi kuning pada gelombang panjang ( 360nm ) dan membentuk zona berwarna kuning bila dipanaskan pada 100 C selama 5-10 menit. Preparatif HPTLC Ekstrak : Ekstrak kasar mengungkapkan coklat , dua biru , band neon biru terang cahaya dan pita cokelat muda di Rf = 0,15 , 0,20 , 0,45 , 0,33 dan 0,82 cm masing-masing di bawah scanner TLC di 356nm. Yang jelas, band neon terang dianggap kemungkinan flavonoid di Rf = 0,33 cm dan dipilih untuk isolasi . Isolasi Senyawa flavonoid : Kromatografi penyaringan FRC 1 oleh HPTLC mengungkapkan tajam , satu band yang neon , biru yang dinilai flavonoid hanya pada Rf = 0,33 cm di bawah 366Nm. Konfirmasi Isolasi Flavonoid : Spektrum perbandingan ekstrak kasar di TLC scanner mengungkapkan penyerapan maksimum band pada panjang gelombang 365 - 370Nm, maka analisis spektrum FRC 1 dilakukan dengan spektrofotometer UV - Vis dalam kisaran 200 - 800nm . Fraksi , FRC 1 menunjukkan adanya puncak tunggal dalam spektrum lengkap pada sekitar 370 - 380nm. Ini menyelesaikan perkiraan konfirmasi sejati isolasi senyawa . Selanjutnya analisis spektrum FRC 1 di IR Spektrometri, mengungkapkan band yang kuat dan diselesaikan dengan baik yang selanjutnya menegaskan pemisahan. Juga kehadiran band di 3195.74cm - 1 menunjukkan kemungkinan adanya alkena bebas (= CH) peregangan memiliki wilayah 3100-3010 wavenumbers (cm - 1) . Kehadiran band di 3423.47cm - 1 menunjukkan kemungkinan adanya fenol atau alkohol ( - OH ) stretch memiliki wilayah 3650-3300 wavenumbers (cm - 1). Kehadiran band di 1652.32cm - 1 menunjukkan kemungkinan adanya senyawa aromatik ( C = C peregangan ) memiliki wilayah ~ 1600 wavenumbers (cm - 1) . KESIMPULAN Dari latihan prosedural di atas, dapat disimpulkan bahwa jelas tanaman Launaea procumbens mengandung flavonoid.

TUGAS ISOLASI DAN STANDARISASI BAHAN ALAM

Oleh : ALFINA FAIZAH RINDA AYU HERAWATI SARI R. DJAHILAPE (1041311169) (1041311182) (1041311184)

PROGRAM STUDI S1 FARMASI SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI SEMARANG 2013