Estudos realizados
Humanos
Avaliao do Padro de Uso Intoxicao alcolica, efeitos fisiolgicos, desempenho psicomotor e estado de humor
Camundongos
Screening Farmacolgico Efeitos agudos e crnicos na atividade locomotora Concentrao sangunea de etanol Histopatologia dos principais tecidos corporais
Padro de Uso
Sesso de Avaliao
Intoxicao Alcolica, Efeitos Fisiolgicos, Desempenho Psicomotor e Estado de Humor
TESTE / ATIVIDADE Alcoolemia VAMS & EASS FC & PA Metabolismo de repouso 30 Metabolismo de repouso 5 Ergoespirometria mxima Tempo de reao visual Coordenao motora Digit span (Dir e Ind) & TBC Teste de cancelamento & DSST POMS Alimentao
BASAL X X X X X X X X X X X
0 X X
15 X X
30 X X X X
60 X X X X
90 X X X
120 X X X X
150 X X X
X X X X
X X X
X X X X X
Principais resultados
Alcoolemia
0,12
0,09
g/dl
0,06
* *
0,03
120'
150'
Figura 1: Alcoolemia em gramas por decilitro (mg/dl), aps a ingesto de 0,6 ou 1,0 g/kg de lcool com bebida energtica ou gua (3,57 ml/kg). * maior na sesso lcool-energtico [(30: t=3,38; p=0,01) (120: t=2,37; p=0,04)]; avaliao ergoespiromtrica mxima em cicloergmetro; ----- limite legal para algum ser considerado embriagado pelo Cdigo Brasileiro de Trnsito.
Efeitos percebidos
Aps ingesto de lcool:
Boca seca e prejuzos na coordenao motora maior que nas
demais sesses aos 120 minutos Cefalia (30 e 90 min), fraqueza (120 min), distrbios na viso e na fala (90 min), foi maior que na sesso energtico e no diferiu significativamente da sesso lcool-energtico.
Desempenho Psicomotor
Coordenao motora Tempo de reao visual Teste de cancelamento e substituio de dgitos Recordatrio de nmeros Recordatrio de histrias Teste dos blocos de Corsi A ingesto de lcool provocou prejuzo no desempenho, de forma dose-dependente e a dose de bebida energtica utilizada NO reduziu este efeito, apresentando em alguns momentos, tendncia de maior prejuzo.
Estado de Humor
A situao experimental gerou estresse e fadiga nos
Avaliao Fisiolgica
Freqncia Cardaca
Aumento de mesma magnitude nas duas sesses com lcool
Consumo de Oxignio
Em repouso: aumento 60min aps ingesto da mistura Em esforo: maior no grupo 0,6 g/kg na sesso energtico
Concluses
A porcentagem de usurios de BE com bebidas alcolicas relevante, sendo utilizadas preferencialmente as bebidas destiladas. Os usurios habituais relatam trs objetivos principais com o uso:
aumentar e prolongar os efeitos excitatrios do lcool,
Os dados obtidos demonstram que o propagado efeito ametista das bebidas energticas bastante discreto, ao menos nas doses de lcool e de BE utilizadas. O adequado julgamento da intoxicao alcolica pode ser prejudicado pela ingesto de BE.
Efeitos em Camundongos
Estudos com administrao aguda Estudos com administrao crnica
Screening Farmacolgico
Alcoolemia - Aguda
Alcoolemia - Crnica
Histopatolgico
A administrao de bebida energtica, isoladamente ou em combinao com lcool, no alterou significativamente a atividade das enzimas hepticas, o peso dos principais rgos, assim como no reduziu as alteraes histopatlogicas observadas, em relao ao grupo controle.
Metodologia
1 injeo i.p. Salina Salina Cafena (3,5mg/kg) taurina (43,0mg/kg) sacarose (1,2g/kg) Cafena (3,5mg/kg) taurina (43,0mg/kg) sacarose 1,2g/kg) 2 injeo i.p. Salina Etanol (2,2g/kg) Salina
Etanol (2,2g/kg)
Metodologia
1 injeo i.p. Salina Salina Inositol (2,1mg/kg) glucoronolactona(25,7mg/kg) vitaminas do complexo B* Inositol (2,1mg/kg) glucoronolactona(25,7mg/kg) vitaminas do complexo B* 2 injeo i.p. Salina Etanol (2,2g/kg) Salina
Etanol (2,2g/kg)
*B3 0,8 mg/kg; B5 0,3 mg/kg; B2 0,07 mg/kg; B6 0,09 mg/kg e B12 0,014 mcg/kg
fase de tratamento
desafios
48 h
48 h
48 h
48 h
Testes de 15 min
Resultados
Componentes + salina
Efeito dos componentes das bebidas energticas administrados isoladamente
3000
Componentes + etanol
Efeito dos componentes das bebidas energticas sobre o efeito do etanol
3000
Atividade Locomotora
Atividade Locomotora
# * $
2500
2500
2000
2000
1500 1000
1500 1000
500
500
Figura 1: Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos no teste agudo e aps 7 e 14 dias de tratamento. * atividade locomotora dos dias 7 e 14 maior do que do dia 1 # difere dos grupos salina, cafena e EtOH na mesma ocasio $ grupo EtOH+TR difere do grupo salina na mesma ocasio
Desafio Salina
3000
Desafio Etanol
3000
2500
2500
Atividade Locomotora
2000
Atividade Locomotora
2000
# * $ &
1500
1500
1000
1000
500
500
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de salina. Todos os animais apresentaram nveis de atividade similares (p>0,05).
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de 2,2 g/kg de etanol 15% p/v. # difere dos grupos pr-tratados com salina e cafena. $ difere dos grupos pr-tratados com taurina. & difere dos grupos pr-tratados com salina e sacarose.
2500
Atividade Locomotora
* #
2000
1500
1000
500
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de 2,2 g/kg de etanol + 3,5 mg/kg de cafena + 43 mg/kg de taurina. * difere dos grupos pr-tratados com salina e cafena # difere do grupo pr-tratado com sacarose
Resultados
Componentes + salina
Componentes + etanol
Atividade Locomotora
Atividade Locomotora
2000
2000
*
1500
1500
1000
1000
500
500
Figura 1: Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao das substncias, no 1. dia de teste e aps 7 e 14 dias de tratamento. * atividade locomotora dos dias 7 e 14 difere do dia 1 # grupo EtOH difere do grupo salina na mesma ocasio
Desafio Salina
3000
Atividade Locomotora
2500 2000
Atividade Locomotora
2500
*
2000
1500
1500 1000
1000 500
500 0
IN GLUC VIT B EtOH EtOH+IN EtOH+GLUC EtOH+VITB
0 salina
salina
IN
GLUC
VIT B
EtOH
EtOH+IN
EtOH+GLUC
EtOH+VITB
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de salina. Todos os animais apresentaram nveis de atividade locomotora similares (p>0,05).
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de etanol e componentes das bebidas energticas usados durante o tratamento de seus respectivos grupos. * difere do grupo salina # difere do grupo glucoronolactona $ difere do grupo vitamina B
Atividade Locomotora
2500
2000
1500 1000
500
Atividade locomotora (mdia + erro padro) avaliada na caixa de atividade durante 15 minutos aps a administrao de 2,2 g/kg de etanol + 3,5 mg/kg de cafena + 43 mg/kg de taurina. Todos os animais apresentaram nveis de atividade similares (p>0,05).
Tratamento com etanol induziu desenvolvimento da sensibilizao comportamental ao seu efeito estimulante. Nenhum destes trs componentes alterou a sensibilidade ao efeito do etanol.
Desafio com salina: tratamento crnico com etanol tambm no teve efeito residual. Desafio com etanol: todos os grupos apresentaram resposta semelhante.
Metodologia
Grupo 1 gua (CTRL). Grupo 2 bebida energtica (BE).
Suo albino macho 3 meses 30 a 50g. n = 40
5 minutos
Resultados
Nmero total de entradas nos braos do Labirinto em Cruz Elevado (abertos+fechados)
Porcentagem de tempo de permanncia nos braos fechados abertos em relao ao tempo total de teste 100
Tempo nos Braos Abertos (%)
40
35
*
Nmero de entradas
80 60 40 20
30
25
20
15
10
5
Figura 1: Relao entre o tempo de permanncia nos braos abertos do aparelho e o tempo total de teste (5 minutos) no LEC, 10 minutos aps a administrao das drogas (mdia erro padro). * difere dos grupos CTRL e BE (p<0,01).
Figura 2: Nmero total de entradas nos braos do LCE (nmero de entradas nos braos abertos + nmero de entradas nos braos fechados), 10 minutos aps a administrao das drogas (mdia erro padro). * difere dos demais grupos (p<0,001).
EtOH teve efeito ansioltico esperado. Em relao a atividade locomotora, o etanol no causou alterao na dose utilizada. BE no alterou efeito ansioltico do EtOH na dose utilizada, mas provocou aumento da atividade locomotora.
Materials and Methods: All the experiments were carried out at the Department of Psychobiology of the Federal University of So Paulo UNIFESP, and all the procedures were carried out in accordance with the norms of the International Guiding Principles for Biomedical Research Involving Animals (CIOMS, 1986) and Guide for the care and use of laboratory animals (1996). The research project was approved by the Committee of Ethics in Research (563/01). We used 60 male Swiss mice, 72 days old, weighing between 35 and 50 grams in the beginning of the experiments. Groups of 5 to 6 animals were housed in plastic cages (30x20x13cm). The room temperature was kept at 22 1o C, with a light/dark cycle of 12h (lights turned on at 7:00h), with water and food Purina ad libitum. The MC was evaluated by means of a Rota rod (Marques et al., 2004). In order to be included in the sample, the animals had to obtain a minimum mean score of 30 seconds on the rotarod, in 03 attempts, at a fixed speed of 12 rotations per minute (rpm), in the initial selection test. The animals were randomly allocated to the groups Control (water, n=15), ED (10.71 ml/kg, n=16), ETOH (2.0 g/kg19.7%v/v, n= 15) and ETOH + ED (2.0 g/kg19.7%v/v + 10.71 ml/kg, n= 14) Performance on the Rota Rod The animals were initially tested under the control situation (without the drug) for the determination of their basal performance, evaluated by the time they remained on the rotarod at a constant speed of 20 rpm. After this basal test, the animals were tested on the rotarod (20 rpm) weekly (1st, 4th, 7th, 10th, 13th and 16th days), always 15, 30 and 60 minutes after the drug administration. They were placed on the rotarod up to 3 times in each test. The mean time of the three trials was used in the statistical analysis. Statistical Analysis Since the dependent variable did not present normal distribution, we chose to use non-parametric tests. We used the Kruskal-Wallis non-parametric analysis of variance, followed by the test of multiple comparisons to compare the groups between each other 11. The Friedmans test, followed by the Wilcoxons test, was used to compare the animals performance on the task over the treatment. The level of significance of 5% was adopted for all the analyses. We used the software STATISTICA (StatSoft, Inc).
450
A) 15 minutes
300
150 a 0
Basal T1 T4 T7 T10 T13 T16
450
B) 30 minutes
300
150 b 0
Basal T1 T4 T7 T10 T13 T16
1,2 1 0,8
450
C) 60 minutes
0,6
300
0,4 0,2 0
150 c 0
Basal T1 T4 T7
T10
T13
T16
Control
ED
ETOH
ETOH + ED
Figure 1 Time on rotarod (median semi-interquartile range) in the tests performed before (basal) and in the first, 4, 7, 10, 13 and 16 days of treatment (T1-T16), 15, 30 and 60 minutes after water (control) or drug administration (ETOH= ethanol; ED= energy drink; ETOH + ED = ethanol + energy drink). a ETOH group differs from control in T1 and from control and ED groups from T4 to T16; ETOH + ED group differs from the control in T7 and of the control and ED groups in T10, T13 and T16. b ETOH group differs from control and ED in T4 to T16; ETOH + ED group differs from the control and ED groups in T10 to T16. c ETOH group differs from control in T10 and T13; ETOH + ED group differs from the control in T10 to T13. Utilized the test of Kruskal-Wallis followed for the test of multiple comparisons and used as level of significance p<0,05.
Padro de sono
Metodologia
Cirurgia para implantao do eletrodo 10 dias de recuperao
Incio
Fim
12h Fase claro 12h Fase escuro
6h
6h
Fase claro
100
A - Eficincia
100 90 80
B - NREM
C - REM
10
90
80
Sleep Ef f iciency (%)
9
8 7
REM (%)
70
70
NREM (%)
60
50 40
60
6
5 4
50
40 30 20 10 0
30
20 10
3
2 1
0
CTRL ED EtOH EtOH+ED
0
CTRL ED EtOH EtOH+ED
CTRL
ED
EtOH
EtOH+ED
Figure 1 Painel A.: Percentage of sleep in relation of total sleep time (Sleep efficiency) Painel B.: Percentage of NREM sleep in relation of total sleep time. Painel C.: Percentage of REM sleep in relation of total sleep time, 2 hours after drug administration. Mice received water (CTRL, n=5), energy drink (ED, n=6), ethanol (EtOH, n=7) or ethanol combined with energy drink (EtOH+ED, n=7) orally.
* differ significantly from ED group (p 0.05).
A - Eficincia
100 90 80
Sleep Ef f iciency (%)
B - NREM
100 90 80 70
NREM (%) REM (%)
C - REM
10 9 8
70 60 50 40 30 20 10
7
6
60 50 40 30 20 10
5
4 3 2 1 0
0
CTRL ED EtOH EtOH+ED
0
CTRL ED EtOH EtOH+ED
CTRL
ED
EtOH
EtOH+ED
Figure 2 Painel A.: Percentage of sleep in relation of total sleep time (Sleep efficiency) Painel B.: Percentage of NREM sleep in relation of total sleep time. Painel C.: Percentage of REM sleep in relation of total sleep time, 3 hours after drug administration. Mice received water (CTRL, n=5), energy drink (ED, n=6), ethanol (EtOH, n=7) or ethanol combined with energy drink (EtOH+ED, n=7) orally.
* differ significantly from Control and ED groups (p 0.05).
Agenda
Humanos
Atualizao do Padro de Uso
Camundongos
Consumo voluntrio de etanol Padro de EEG de sono e viglia Apoptose neuronal
Ratos
Atividade locomotora, consumo voluntrio, LCE, Padro de Sono
Equipe
Alyson Monteiro
Graduando em Educao Fsica UNIFESP CBS
Gabriela N. K. Fujisaka
Biomdica, Mestranda em Cincias
Luciana Umisedo
Graduanda em Educao Fsica UNIFESP CBS
Colaboradores
Apoio: