Universidad Mariano Glvez Facultad de Ciencias Mdicas y de la Salud Carrera de Mdico y Cirujano 2014

Nombre: _______________________________________________________ Carnet: _____________________ Seccin: ____________________ ACCIN ENZIMTICA I. Introduccin Para que una reaccin qumica tenga lugar se debe superar el valor de la energa de activacin. Las nicas molculas que reaccionan son aquellas que al chocar llevan consigo una energa mayor que un cierto valor mnimo. A este valor de energa necesaria se lo denomina energa de activacin y es un factor de suma importancia para determinar la magnitud de la velocidad de reaccin. Una ve vencida esa barrera el sistema evoluciona de forma tal que llegar! al estado final de la reaccin. La velocidad de reaccin podra incrementarse de dos maneras" aumentando la concentracin del #comple$o activado# o eventualmente disminuyendo la energa de activacin. %ste ltimo mecanismo es el que se pone de manifiesto cuando se emplea determinadas sustancias llamadas catali adores. %stas sustancias aceleran las reacciones qumicas disminuyendo la energa libre de activacin& se combinan con los reactivos para producir un estrato de transicin de menor energa que el estado de transicin de la reaccin no catali ada. Las reacciones qumicas en sistemas biolgicos raramente ocurren en ausencia de un catali ador. %stos catali adores se denominan en imas y son en su totalidad molculas de naturale a proteica. Las funciones vitales de cualquier clula seran imposibles de mantener si las reacciones que ocurren en ella fueran e'tremadamente lentas. Adem!s de incrementar la velocidad& las en imas e'hiben una elevada especificidad y en algunos casos pueden ser reguladas por diferentes metabolitos& aumentando y otras veces disminuyendo& de acuerdo a las necesidades del momento& su actividad. (odas estas propiedades pueden ser cumplidas por molculas altamente comple$as& que al ser molculas org!nicas )macromolculas* comparten caractersticas con las protenas no en im!ticas y difieren de los catali adores inorg!nicos" a* +on termol!biles y su actividad depende en ciertos casos del p, del medio. b* %l reconocimiento de la en ima con el reactivo a procesar )denominado sustrato* es altamente especfico. c* (ienen gran eficiencia& es decir& transforman un gran nmero de molculas de sustrato por unidad de tiempo. d* %st!n su$etas a una gran variedad de controles celulares& genticos y alostricos. -omo todos los catali adores las en imas aceleran notablemente la velocidad de una reaccin qumica y cumplen con las siguientes caractersticas"

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.* +on efectivas en peque/as cantidades 0* 1o sufren modificaciones qumicas irreversibles durante la cat!lisis. %s decir que luego de la reaccin en im!tica& las molculas de en imas que reaccionaron son indistinguibles de las que no lo han hecho& )la estructura de la molcula se mantiene& al principio y final de la reaccin& e'actamente igual*. 2* 1o afectan la posicin de equilibrio de la reaccin que catali an. %l estado inicial y final de la reaccin es el mismo& solo que se llega al equilibrio mucho m!s r!pidamente. Accin de amilasa salival La amilasa es una en ima que catali a la hidrlisis del almidn en molculas de carbohidratos mas peque/as. La 3amilasa& que se encuentra en la saliva& $ugo pancre!tico& malta y algunas bacterias& catali a la hidrlisis de los almidones a de'trinas& maltosa y maltotriosas. La saliva es una me cla derivada de la secrecin de 2 pares de gl!ndulas& las partidas& subma'ilar y sublingual& como tambin de peque/as gl!ndulas mucosas ubicadas difusamente sobre la mucosa de la boca. La en ima 3amilasa& presente en la saliva& inicia la degradacin del almidn& la principal fuente de carbohidratos de la dieta humana. %sta en ima hidroli a al a ar los enlaces que unen residuos de glucosa en el almidn& a e'cepcin de los enlaces cercanos a los e'tremos y a los puntos de ramificacin de las cadenas. Por la accin de esta en ima activada por iones cloruro& en la boca la longitud de la cadena del almidn se reduce de varios miles a unas ocho unidades de glucosa. La alta concentracin de protones del estmago inactiva la 3amilasa salival. La digestin del almidn contina en el intestino delgado por la accin de la 3amilasa pancre!tica& como producto se forma una me cla del disac!rido maltosa& el trisac!rido maltotriosa y oligosac!ridos conocidos como de'trinas.
almidn
amilasa

maltosa + maltotriosa +

dextrinas

La maltosa y otros carbohidratos reductores producidos en la reaccin pueden ser detectados por el test de 4enedict. %ste mtodo es cualitativo& consiste en una solucin alcalina de -u 05 que se encuentra formando un comple$o con citrato. %l in cprico es reducido a -u .5 por compuestos reductores con formacin de hidr'ido cuproso amarillo o de 'ido cuproso ro$o. %l cambio de coloracin o la formacin de un precipitado ro$o3ladrillo )-u 06* indica la presencia de un compuesto reductor. II. Objetivos III. 7nterpretar los mecanismos subyacentes de la accin en im!tica sobre sustratos especficos. -ompruebe la accin en im!tica de la amilasa salival sobre el almidn. Materiales

28 tubos de ensayo 9radillas

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:; ml ,-l al .; < Agua destilada 8 pipetas Pasteur 8 probetas .; ml 0 probetas :; ml 8 bea=ers :; ml 2 varillas agitacin +olucin de almidn 9oteros con Lugol 9oteros con 4enedict 4a/o >aria IV. rocedimiento

Accin de la renina sobre la case!na de la lec"e .. 0. 2. A. :. 8. B. ?isuelva @ de pastilla de cua$o )renina* en 0: ml de agua destilada. 1umere dos tubos de ensayo ). y 0*. %n el tubo . coloque :ml de leche. %n el tubo 0 coloque :ml de leche 5 0 gotas de ,-l al .; <. Agregue .; gotas de solucin de renina a cada tubo numerado ). y 0*. 6bserve y anote sus resultados. CDu puede concluir acerca de cmo afecta a la actividad en im!tica& el tiempo& la concentracin y la temperaturaE

#i$estin del almidn %&idrlisis en'im(tica) .. -olocar un tro o peque/o de papa directamente en la boca y me clar con la saliva por espacio de 8 a B minutos. )1o tragarlo* 0. +eguidamente transferirlo a un beac=er y triturarlo perfectamente con un agitador de vidrio. 2. Preparar dos series de tubos ): tubos cada serie* y rotularlos con tiempo ;& :& .;& .:& 0; minutos las dos series. A. Al mismo tiempo tome . tubo de ensayo de cada serie )iniciando con el de ; minutos* y colocarle . ml de almidn a cada uno. (ratar cada tubo como sigue" a uno agregarle lugol y al otro agregarle .; gotas de reactivo de 4enedict y calentar. 6bservar. :. Al cabo de : minutos hacer el mismo procedimiento )mencionado en el paso A* y as sucesivamente hasta llegar a 0; minutos. V. *iblio$ra+!a Frea de 4iologa. Gase 7. Gacultad de >edicina. 0;;:. Universidad de +an -arlos de 9uatemala. -U>. >anual de Pr!cticas de Laboratorio. Gacultad de -iencias Dumicas y Garmacia. 0;;:. Universidad de +an -arlos de 9uatemala. >anual de Pr!cticas de Laboratorio.