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PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR OSMOSIS Y PRESIN OSMTICA

Elaborado por: MSc. ngela P. Navas Berdugo Adaptado de: Guas laboratorio de biologa celular, Universidad de los Andes. Guas laboratorio de biologa, Universidad Central. 1. OBJETIVOS Identificar la composicin qumica y funcin de las membranas celulares Comprobar el proceso de osmosis en un Osmmetro Observar el efecto de la concentracin del medio sobre las clulas 2. MARCO TERICO Toda clula posee un sistema completo de membranas cuya funcin general es el intercambio de materiales entre la clula y el medio acuoso externo o fluido extracelular y entre los organismos y el citoplasma de la clula. Las membranas biolgicas pueden ser diferentes en cuanto a estructura y funcin. Sin embargo, tienen en comn ciertas propiedades, por ejemplo su estructura laminar de naturaleza fluida, su composicin lipoprotica, con partes hidroflicas e hidrofbicas, etc. (Fig. 1). Adems, poseen la propiedad funcional de permeabilidad selectiva, por ser permeables a las molculas de agua, pero ms o menos impermeables a los solutos. Tal permeabilidad puede verse afectada por cambios de temperatura, txicos, solventes orgnicos y la composicin qumica del medio que rodea a la clula (Curtis, 1999).

Fig. 1: Vista lateral de una membrana celular tpica, mostrando los fosfolpidos y las protenas Los principales tipos de transporte a travs de membranas biolgicas son: Difusin Es un movimiento de partculas o molculas de una regin donde se encuentra en mayor concentracin a una de menor concentracin. Por ejemplo, una gota de tinta agregada en un recipiente con agua, pigmenta el lquido completamente.

Osmosis y presin osmtica Osmosis es la difusin del agua a travs de membranas con permeabilidad selectiva. Cuando una solucin acuosa se separa mediante una membrana con permeabilidad selectiva, de un solvente puro (agua en organismos) o bien una concentrada de una diluida, se origina difusin de agua a travs de la membrana, proceso denominado OSMOSIS. En este proceso se crea un movimiento de agua en una direccin tal que las concentraciones se igualan. O sea de la regin de mayor potencial hdrico (mayor concentracin de agua) hacia la regin de menor concentracin de agua. La difusin de agua desde el solvente puro hacia la solucin o desde la solucin mas diluida hacia la solucin qumicamente ms concentrada, da como resultado un incremento en el volumen y la fuerza de empuje de las molculas de agua que crea una presin denominada PRESIN OSMTICA. El efecto de la presin osmtica puede medirse de manera sencilla en un osmmetro (Curtis, 1999). Desde el punto de vista de la concentracin del medio se aplican lo siguientes trminos: Si la clula se halla en un medio de mayor concentracin con respecto al del interior de la clula, se dice que el medio es hipertnico y sale agua de la clula. Mientras que si ste es menos concentrado que el interior celular, la clula se halla en un medio hipotnico y entra agua a la clula. Estas condiciones hacen que el protoplasma se encoja al deshidratarse (plasmlisis) o se hinche al hidratarse (deplasmlisis). Acarreo mediado por transportador Las molculas cruzan la membrana celular por difusin simple o son aceleradas por protenas de transporte incrustadas en la membrana. Si un trasporte mediado por protenas es impulsado por el gradiente de concentracin, este se conoce como difusin facilitada. Por el contrario, si requiere gasto de energa, se conoce como trasporte activo. Este ltimo puede movilizar contra su gradiente de concentracin. Uno de los sistemas ms importantes de trasporte activo es la bomba Sodio - Potasio, que mantiene los iones Na+ en una concentracin relativamente baja y los iones K+ en una concentracin relativamente alta en el citoplasma (De Robertis & Robertis, 1981). 3. MATERIALES Y REACTIVOS 1. Difusin: Materiales Soluciones Reactivos

Tubos de ensayo. Plancha de calentamiento. Gradilla. Papel celofn.* Hilo o caucho.* 2 Beakers de 500ml. Goteros.

Glucosa 2%. Almidn 2%. NaCl 20%.

Lugol. AgNO3. KMnO4. Reactivo de Benedict o Fehling.

2. smosis: 2.1. Eritrocitos como osmmetros naturales: Materiales Soluciones

Material biolgico

Lminas. Laminillas. Palillos. Algodn y alcohol. Lanceta.

Solucin salina 0.4%, 0.9% y 2.0%.

Sangre.

2.2. Plasmlisis: Materiales

Soluciones

Material biolgico

Lminas. Laminillas. 2 cajas de Petri. Goteros.

Solucin de sucrosa 20%. Agua destilada.

Hojas de Elodea.

4. PROCEDIMIENTO 1. Difusin: 1.1. Difusin simple: Llene dos tubos de ensayo, uno con agua caliente y otro con agua fra, casi hasta el borde. Coloque simultneamente cristales de permanganato de potasio (KMnO4). Observe lo que sucede en cada tubo. 1.2. Difusin a travs de una membrana artificial: Acondicionar dos bolsas de celofn y llenar cada una de ellas con: 5ml de solucin de glucosa 2%, 5ml de solucin de almidn 2% y 5ml de solucin de NaCl 20%.

Cerrar la bolsa con un pedazo de hilo. Ponga durante 30 minutos una de las bolsas dentro de un beaker con agua a 37C y la otra en un beaker con agua fra. Tome los tubos y realice las siguientes pruebas:

Prueba de azcares reductores: Tubo Muestra (2ml) + Fehling A (1ml) + Fehling B (1ml) 1 Agua 2 Glucosa 2% 3 Agua beaker 37C 4 Agua beaker fro

Prueba de almidones: Tubo 1 2 3 4 Prueba de sales: Tubo

Muestra (1ml) + Lugol (3 gotas) Agua Almidn 2% Agua beaker 37C Agua beaker fro

1 2 3 4

Muestra (2ml) + Nitrato de plata (20 gotas) Agua NaCl 20% Agua beaker 37C Agua beaker fro

2. smosis: 2.1. Eritrocitos como osmmetros naturales: Tome cuatro lminas y en cada una de ellas coloque una gota de sangre, luego adicione dos gotas de solucin salina as: Lmina 1 2 3 4 Solucin salina 0.4% 0.9% 2.0% Control (sin solucin)

2.2. Plasmlisis (Fig. 2): Coloque varios minutos las hojas de Elodea en una caja de Petri con agua destilada. Observe al microscopio la apariencia de las clulas. Coloque las mismas hojas que observ en una solucin de sucrosa al 20% por 10 minutos y observe al microscopio. Las mismas hojas colquelas de nuevo en agua destilada por otros 10 minutos y observe al microscopio.

Fig. 2: Clulas de Elodea sp. 1. turgente, 4. plasmolizada

5-BIBLIOGRAFA Curtis H, & Barnes, N S. 1993. Biologa. Quinta Edicin. Editorial Mdica Panamericana S.A. Buenos Aires, Argentina, 1280 pp. Curtis, H. 1999. Biologa. Editorial Mdica Panamericana S.A. sexta edicin. Buenos Aires 1199. Universidad de los Andes. 2006. Guas laboratorio de biologa celular.