Medios de cultivo de bacterias

Preparación y colonias de
bacterias

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 Tipos de medios
Los medios de cultivo se dividen acorde a sus
características en generales, selectivos o
diferenciales.
Generales: permiten el crecimiento de cualquier
tipo de bacteria.
Selectivos: sólo permiten crecer un cierto tipo,
p.ej. sólo un género.
Diferenciales: permiten distinguir entre dos o
mas bacterias por características coloniales.
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 Medios generales
• Agar Soya Tripticasa
(TSA)*
• Agar marino 2216 o Zobell
• Agar Nutritivo**

* añadir 2.0 % NaCl

** añadir 2.5 % NaCl

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 Medios selectivos
• Agar Tiosulfato, Citrato, Sales de bilis,
Sacarosa (TCBS): Vibrio
• Agar Cetrimida: Pseudomonas

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 Medios diferenciales
• Agar Eosina Azul de Metileno:
coliformes y E. coli

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 Preparación de medios
• Siempre preparar los medios con agua
destilada (salvo el Marino).
• Es necesario ajustar simpre el pH.
• Todos los utensilios deben estar
perfectamente limpios.
• Todos los medios deben esterilizarse de
alguna forma.

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 • Los medios se preparan en matraces cónicos
con tapa
• Se pesa la cantidad de medio requerida, se
disuelve o suspende en el agua.
• Se ajusta el pH.
• Se esteriliza a 121°C por 20 min
• Se espera a que enfrie (42°C o hasta que se
pueda sostener el recipiente sin quemarse la
mano)
• Servir 20 ml Aprox. en cada caja de Petri

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 Esterilización
Es el proceso mediante el cual se destruyen o
remueven todos los microrganismos
• Tipos de
esterilización
– Húmeda, autoclave
– Seca, horno
– Gaseosa: óxido
etileno, formaldehído o
H2O2.
– Filtración:
membranas de 0.45 y
0.22 µm.

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 Esterilización húmeda
• No colocar recipientes completamente cerrados en
la autoclave.
• El vapor debe entrar en contacto con todo lo que
se quiere esterilizar
• No esterilizar solventes o químicos corrosivos
• Si se esterilizan líquidos, bajar la presión
lentamente y dejar enfriar los recipientes dentro de
la autoclave
• Se esterilizan mejor los líquidos si se dividen en
pequeños recipientes que en uno grande (> 1 lt)
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 Esterilización húmeda (Cont.)
• Temperatura: 121 -123°C (250-254°F)
• Presión: 15 psi
• Tiempo: 10-15 min instrumentos*
20 -30 min líquidos*

* el tiempo depende de que tan llena este la cámara de

la autoclave, muy llena mas tiempo.

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 Agar TCBS

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 agar Marino y TSA

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 Colonias en agar TCBS

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 Purificación de vibrios

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 Colonias en agar Marino

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 Vibrios en TSA

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2-sep-05 19