Produccin de biocombustibles: Etanol. PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLES: ETANOL. 1.

- OBJETIVOS GENERALES:

1.1.- OBJETIVOS ESPECIFICOS:

2.- GENERALIDADES: PRODUCCIN DE BIOETANOL. 2.1.- INTRODUCCIN: El bioetanol, producto de fermentacin alcohlica de diversos materiales orgnicos a travs de la accin de microorganismos, est siendo de nuevo seriamente considerado luego de la elevacin de los precios del petrleo. En la actualidad se trabaja fundamentalmente en la bsqueda de materias primas baratas, que sustituyan a las tradicionales materias azucaradas, para alcanzar mayor eficiencia en los procesos de fermentacin, recuperacin y purificacin de alcohol producido. La produccin de bioetanol perdi importancia a finales de la primera mitad del siglo XX, al ser sustituida por la produccin de etanol por va sinttica, a partir de derivados del petrleo, que resulta ms barata, pero no puede ser utilizado en la preparacin de alimentos, bebidas alcohlicas, ni medicamentos. La elevacin de los precios del petrleo hizo volver los ojos hacia la va fermentativa de produccin de etanol. 2.2.- PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLES: BIOETANOL. MATERIAS PRIMAS Y SU IMPORTANCIA EN EL PROCESO FERMENTATIVO. Para la produccin de etanol han sido utilizadas diferentes fuentes de carbono como materia prima; estas deben ser transformadas con facilidad en azcar fermentable. Su uso prctico estar determinado por el rendimiento en etanol, por su costo y el tipo de microorganismo que se utilice. Varios autores, coinciden en definir 3 tipos de materias primas para la produccin de etanol: a) Materiales portadores de azcares simples que contienen carbohidratos como fuente de azucares (tales como jugo de caa de azcar, melazas, sorgo dulce, etc.) b) Materiales amilceos los cuales contienen almidn como fuente de azcares (tales como la yuca, maz, papa, etc.) c) Materiales celulsicos, que contienen celulosa, hemicelulosa (tales como el bagazo, la madera, residuos agrcolas, etc.) El etanol se produce por fermentacin de estas materias primas con levaduras u otros microorganismos. Las de la primera clase fermentan directamente. El segundo tipo consta de hidratos de carbono complejos, como el almidn, que primero se deben convertir en azcares fermentables mediante la accin de enzimas. Las sustancias celulsicas de la tercera clase se convierten en azcares fermentables por hidrlisis con cidos inorgnicos, principalmente. 2.2.2.- FUNDAMENTOS BIOQUMICOS DE LA FERMENTACIN ALCOHLICA.

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Produccin de biocombustibles: Etanol. La secuencia de reacciones entre la glucosa y el piruvato se conoce por el nombre de ruta de Embden- Meyerhof, o tambin de Embden-Meyerhof-Parnas, en honor a sus descubridores. Los sustratos ms comnmente usados para la fermentacin son los azcares, en especial la D-glucosa. Una clase de fermentacin importante de la glucosa es la fermentacin alcohlica. Para muchas levaduras en un medio adecuado, la fermentacin significa la conversin de hexosas, principalmente glucosa, fructosa, manosa y galactosa, en ausencia de aire, en los siguientes productos finales: Glucosa + 2 Pi + 2 ADP 2 Etanol + 2 CO2 + 2 ATP + 2 H2O Alrededor del 70 % de la energa es liberada como calor; el resto es preservado en dos enlaces fosfatos terminales de ATP (trifosfato de Adenosina), para usarlo en las reacciones de transferencia, tales como la activacin de la glucosa (fosforilacin) y de aminocidos antes de las polimerizacin. 2.2.3.- PRINCIPALES PRODUCTOS DE LA FERMENTACIN ALCOHLICA. Alcoholes: etanol, metanol, alcoholes alifticos con ms de 2 tomos de C, y alcoholes superiores (isobutanol, alcohol isoamlico, amlico, llamados genricamente aceite de fusel). Aldehdos: primordialmente acetaldehdo. . steres: acetato de isobutilo y acetato de isoamilo. cidos orgnicos: cidos voltiles: frmico, actico, propinico, butrico y lctico y trazas de otros cidos grasos. cidos tartrico y mlico. Dixido de Carbono. 2.2.5.MICROORGANISMOS UTILIZADOS EN LA FERMENTACIN ALCOHLICA. El etanol se produce por va fermentativa siendo posible emplear diferentes microorganismos en el proceso, entre los cuales se destacan la levadura S. cereviseae y la bacteria Z. mobilis. LEVADURAS: Las levaduras son los microorganismos ms utilizados para la produccin de etanol por la va fermentativa, debido a su alta productividad en la conversin de azcares a bioetanol y a que se separan mejor despus de la fermentacin. Adems, la produccin de toxinas es muy inferior a la de otros microorganismos. Entre las especies ms utilizadas estn: Saccharomyces cerevisiae, S. ellipsoideus, S. anamensisi, Candida seudotropicalis, S. carlsbergensis, Kluyveromyces marxianus, Candida bytyrii, Pichia stipatis, Schizosaccharomyces pombe y Pichia membranaefaciens. Caractersticas de las levaduras: Grupo de hongos Ascomicetes (unicelulares), orden Endomicetales. Colonias muy parecidas a bacterias macroscpicamente pero ms cremosas y de colores; blancos, beiges o un poco ms oscuros. Algunas son rosadas o rojas porque tienen carotenoides. Manipulacin y siembra muy similar a las bacterias. Pared: quitinosa delgada. Ncleo muy cercano a la zona de gemacin. A ms vieja es la clula, mayor es la vacuola. Dimensiones: ancho 25 10 um y largo 45-21 um. Microbiologa Industrial. 2

Produccin de biocombustibles: Etanol. Saccharomyces cerevisiae.

Saccharomyces cerevisiae: 10X, 40X.

REPRODUCCIN GEMATIVA. clula Hongos unicelulares. La reproduccin asexual normalmente por gemacin. Poblacin en crecimiento de levaduras presenta yemas, producidas cuando la se divide.

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Principales levaduras:

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Produccin de biocombustibles: Etanol. CONDICIONES AMBIENTALES: Temperatura: La mayora son mesfilas, temperatura mxima de crecimiento 24 y 48C. Pocas (2%) son psicrfilas, temperatura mxima de crecimiento por debajo de 24C. No hay levaduras que puedan crecer a 50C. Kluyveromyces marxianus crece a 48C, otras de molinos azucareros son capaces de proliferar sobre los 40C, ejemplo: Pichia polymorpha, Geotrichum capitatum, Saccharomyces cerevisiae y especies de Candida y Debaryomyces. Pocas desarrollan cerca de 0C, ejemplo: Yarrowia lipolytica, Debaryomyces hansenii y Pichia membranaefaciens. PH: La mayora toleran pH 3 a 10. Prefieren ligeramente cido pH de 4,5 a 6,5. Issatchenkia orientalis, P. membranaefaciens, Dekkera intermedia y Saccharomyces exiguus pueden crecer a 1.3-1,7. Las levaduras basidiomicticas, Rhodotorula y Crytococcus son especialmente tolerantes a los medios alcalinos, Saccharomycodes, Schizosaccharomyces y Dekkera no crecen a pH mayor que 8. Son inactivadas a presiones 7 a20 MPa. ASILAMIENTO Y CONSERVACIN: Aislamiento en Agar Sabouraud Dextrosa.

Para determinar el gnero se observan caractersticas morfolgicas y sexuales. Para determinar especie deben hacerse pruebas bioqumicas y fisiolgicas. Probando la capacidad para fermentar diversos azucares. Conservacin.

Se pueden conservar por: Subcultivo (resiembra) en medio Yeast morphology o yeast nitrogen base (DIFCO). Refrigeracin: Levadura fresca. Liofilizacin: Con caractersticas. prdida de viabilidad de 1%/ao, y baja modificacin de

Congelacin: En presencia de crioprotectores (glicerol) 5-20%. La velocidad de congelacin debe ser 10C/min. MEDIO DE CULTIVO: Sabouraud Glucosado Agar: Medio utilizado para el aislamiento, identificacin y conservacin de hongos patgenos y saprfitos. Tambin es til para el cultivo de levaduras. Fundamento: Medio de cultivo recomendado para el aislamiento y desarrollo de hongos, particularmente los asociados con infecciones cutneas (piel, pelo, etc.). En el medio de cultivo, la pluripeptona y la glucosa, son los nutrientes para el desarrollo de microorganismos. El alto contenido de glucosa, la presencia de cloranfenicol y el pH cido, favorecen el crecimiento de hongos por sobre el de bacterias.

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Produccin de biocombustibles: Etanol. Adems, al medio de cultivo, pueden agregarse otros agentes selectivos de crecimiento. Frmula (en gramos por litro) Pluripeptona 10.0 Glucosa 40.0 Cloranfenicol 0.05 Agar 15.0 Instrucciones Suspender 65 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar agitando frecuentemente y hervir 1 minuto hasta disolver. Distribuir y esterilizar 15 minutos a 118121C. Mantener en lugar fresco, pues la exposicin al calor hidroliza los componentes. Distribuir en placas o en tubos con cierre hermtico

pH final: 5.6 0.2 Siembra: Depende del uso, puede ser tanto en tubo como en placa. Consultar referencias de mtodos recomendados. Incubacin: El tiempo de incubacin depender del microorganismo que se est buscando aislar. Resultados: Microorganismos Saccharomyces cerevisiae Aspergillus niger Candida albicans ATCC 10231 Crecimiento Bueno Bueno Bueno

Caractersticas del medio: Medio preparado: mbar claro, ligeramente opalescente sin ningn precipitado. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 C. Medio preparado: a 2-8 C. Presentacin x 500g :Cdigo: B02150-06

x 100g :Cdigo: B02150-05

6x50ml: B04-150-84

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Saccharomyces cerevisiae: La levadura Saccharomyces cerevisiae, es el organismo universal para la produccin de bioetanol usando materias primas ricas en azcar y almidn. Tiene una tolerancia a la concentracin de etanol de 10% (v/v) es la concentracin mxima que permite el crecimiento de la levadura mientras que 15% (v/v) es la mxima para el metabolismo fermentativo. En el caso de la temperatura la tasa de produccin de etanol incrementa constantemente hasta 30C y suavemente hasta 36C, pero decrece a temperaturas por encima de 37C. 2.2.5.1.- Zymomonas mbilis: Zymomonas mobilis es una bacteria Gram-negativa, anaerobia facultativa que lleva a cabo el metabolismo de la glucosa mediante la ruta de Entner-Doudoroff. Su metabolismo es muy especializado y aporta la ventaja de que el 98% de la glucosa metabolizada se convierte en etanol y CO2 equimolarmente y slo el 2% de la glucosa se va a biomasa, de ah que se obtenga 1 mol de ATP por mol de glucosa fermentada. La desventaja ms importante de Zymomonas mobilis es la limitada variedad de fuentes de carbono que puede metabolizar (glucosa, fructosa y sacarosa). 2.2.5.1.1.- PRESENTAN LAS SIGUIENTES CARACTERISTICAS: Tiene capacidad de produccin de bioetanol. Originalmente fue aislado de las bebidas alcohlicas, de palma africana, el mexicano pulque, y como un contaminante de la sidra y la cerveza en Europa. Z. mobilis degrada azcares a piruvato utilizando la va de Entner-Doudoroff. Una caracterstica interesante de Z. mobilis es que su membrana plasmtica contiene hopanoides, compuestos pentacclicos similares a eucariotas esteroles. Esto le permite tener una extraordinaria tolerancia al etanol en el medio ambiente, alrededor del 13%. 2.2.5.1.2.- PRINCIPALES VENTAJAS: Mayor absorcin de azcar y rendimiento de etanol (hasta 2,5 veces ms alta). Produccin de biomasa inferior. Mayor tolerancia al etanol de hasta 16% (v / v). No requiere la adicin controlada de oxgeno durante la fermentacin. Susceptibilidad a las manipulaciones genticas.

Comparacin con Saccharomyces cerevisiae en la produccin de etanol: Ventajas. Tolera altas concentraciones de alcohol (127 g/L) y glucosa (300g/L). Posee una alta tasa especfica de crecimiento (para Zymomonas mobilis de 10 a 13 h-1y para Saccharomyces cerevisiae de 5 a 6 h-1). Alta productividad. 80 g/L de glucosa son metabolizados por Zymomonas mobilis produciendo una concentracin final de 39 g/L de etanol en 9 horas, mientras que Saccharomyces cerevisiae produce 36 g/L de etanol en 11 horas, lo que corresponde a una productividad de 4.3 g/Lh y 3.3 g/Lh respectivamente. Produce alto rendimiento de etanol 0.48 g etanol/g glucosa. Baja produccin de biomasa. Por ser un procariote puede ser fcilmente manipulada genticamente. No requiere control ni adicin de oxgeno durante la fermentacin. Su membrana plasmtica contiene hopanoides, compuestos pentacclicos similares a los Microbiologa Industrial. 7

Produccin de biocombustibles: Etanol. esteroles eucariticos (permite una adaptacin de la membrana a los cambios de temperatura y a concentraciones de etanol de hasta el 10% durante la fermentacin). Lleva a cabo la sntesis metablica de hopanoides que le proporcionan la gran capacidad de crecer y sobrevivir en presencia de etanol. Su necesidad nutricional es simple. Otras ventajas que presenta para llevar a cabo el proceso, destacndose entre otras por: Alta velocidad especifica de consumo de sustrato y de produccin de etanol. Rendimientos de etanol cercanos a los mximos tericos con relativamente baja formacin de biomasa. Alta tolerancia al etanol hasta del 16% v/v. La facilidad con la que se puede manipular genticamente. La bacteria Zymomonas mobilis realiza la degradacin de azcares a piruvato mediante la ruta de Entner-Doudoroff, esta es una va ms simple que la ruta Embden- Meyerhof y permite una mayor tasa de produccin de etanol. Mayor velocidad especifica de consumo de sustrato y de produccin de etanol (Velocidad especifica 2-3 veces mayor que las levaduras). Alto rendimiento para el etanol y bajo para la biomasa comparado con las levaduras, debido a las diferencias en el metabolismo del carbono (Entner-Doudoroff Vs Glucolisis). Condiciones simples de crecimiento, pues Zymomonas mobilis es anaerobia (pero no es estricta) y no requiere la adicin controlada de oxigeno con el fin de mantener la viabilidad celular a altas concentraciones de etanol, como si pasa con las levaduras. Tolerancia al etanol comparable o mayor que las levaduras. Se han reportado concentraciones de etanol de 85g/l (11% v/v) para cultivo en continuo y de hasta 127g/l (16% v/v) en cultivo Batch. Estudios a escala de laboratorio con Zymomonas mobilis durante muchos aos no han revelado problemas significativos de contaminacin o problemas ocasionados por infeccin de bacterifagos. El amplio rango de tcnicas de ingeniera gentica desarrollados para las bacterias pueden ser utilizadas en Zymomonas mobilis con el fin de generar cepas recombinantes. La secuencia completa del genoma de Zymomonas mobilis ZM4 provee nueva informacin para emplear la ingeniera metablica con el fin de desarrollar productos adicionales de alto valor agregado. Uso potencial de las enzimas de Zymomonas mobilis en biotransformacin qumica. 2.2.5.1.3.- PRINCIPALES DESVENTAJAS: A pesar de estas ventajas, varios factores impiden el uso comercial de Z.mobilis en produccin de etanol. El obstculo ms importante es que su gama de sustrato se limita a la glucosa, fructosa y sacarosa. De tipo salvaje Z.mobilis no pueden fermentar azcares C5 como xilosa y arabinosa que son componentes importantes de hidrolizados lignocelulsicos. A diferencia de E.coli y levadura, Z.mobilis no pueden tolerar los inhibidores txicos presentes en los hidrolizados lignocelulsicos tales como cido actico y varios compuestos fenlicos. Microbiologa Industrial. 8

Produccin de biocombustibles: Etanol. La concentracin de cido actico en hidrolizados lignocelulsicos puede ser tan alta como 1,5% (w / v), que es muy por encima del umbral de tolerancia de Z .mobilis. Varios intentos se han hecho para disear Z.mobilis para superar sus deficiencias inherentes. Cepas resistentes al cido actico de Z.mobilis se han desarrollado por ingeniera metablica, tcnicas de mutagnesis o mutacin adaptativa. Sin embargo, cuando estas cepas de ingeniera metabolizan azcares mixtos en presencia de inhibidores, el rendimiento y la productividad son mucho ms bajos, evitando de este modo su aplicacin industrial. Comparacin con Saccharomyces cerevisiae en la produccin de etanol: Desventajas. La bacteria Zymomonas mobilis es considerada una gran productora de etanol pero tiene las desventajas siguientes: Slo cataboliza glucosa, fructosa y sacarosa. Es inhbil para convertir el almidn de manera directa a azcares simples. No puede catabolizar manosa, galactosa, maltosa, lactosa, rafinosa, arabinosa, dextrina y manitol. Lleva a cabo el catabolismo de los carbohidratos mediante la ruta de Entner-Doudoroff, esto ocasiona que haya un rendimiento de ATP de 1 mol por mol de glucosa fermentada, lo que hace que requiera de un flujo de carbono rpido, lo que la convierte en no apropiada para la formacin de biomasa. Los sustratos que puede catabolizar (glucosa, fructosa y sacarosa) son costosos. La siguiente tabla resume algunos de los microorganismos utilizados y/o investigados para la produccin de etanol a partir de diversos sustratos.

Tabla N 1: Microorganismos a partir de diferentes sustratos para la produccin de etanol.

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Produccin de biocombustibles: Etanol. Uso de cultivos mixtos:

Otros tipos de microorganismos que se utilizan en estos procesos son las bacterias y algunos hongos como Mucor racemosus y del gnero Rhizopus. Con relacin al empleo de cultivos mixtos en la fermentacin alcohlica la Universidad Rafael Landvar de Guatemala reportan algunos trabajos con levaduras. Con cultivos formados por dos levaduras: S. cerevisiae - S. carlsbergensis, en proporcin 4:1 en el orden mencionado, se favoreci el incremento en la produccin de alcohol, como resultado de la fermentacin completa de la rafinosa por la segunda. 2.2.5.2.- Caractersticas principales de los cultivos microbianos utilizados en la fermentacin alcohlica. Diferentes investigadores han realizado evaluaciones de cepas alcoholeras de levadura atendiendo a varios aspectos tales como: Tolerancia al etanol, Tolerancia a las altas temperaturas, Tolerancia a altas concentraciones de azcar, Rendimiento alcohlico, Eficiencia en la fermentacin y productividad. Tolerancia al alcohol: La tolerancia al etanol es un elemento importante en la seleccin de una cepa de levadura, pues de su capacidad de mantenerse activa en condiciones crecientes de concentracin alcohlica en el medio depender el rendimiento del proceso. Tolerancia a la alta temperatura: Muchas levaduras son sensibles a la temperatura; si sta se eleva, la productividad puede disminuir; los sistemas de enfriamiento son caros, por lo que hay una razn econmica para desarrollar cepas termotolerantes, que trabajen a temperaturas por encima de 40C sin prdidas en la eficiencia, y que a la vez mantengan la estabilidad gentica. Tolerancia a la alta concentracin de azcares: Trabajar con altas concentraciones de azcares produce mayor eficiencia y productividad del proceso fermentativo. Se reporta que la cepa T-17 de levadura S. cerevisiae, aislada del jugo de caa, posee alta tolerancia a la concentracin de azcares y a la temperatura, con elevada produccin de bioetanol. Se han realizado experiencias con cepas osmoflicas de S. cerevisiae, en la fermentacin del mosto a 26 Bx y se han alcanzado concentraciones de alcohol del orden de 11,4 % v/v. PH: El pH tiene una gran influencia en los productos finales del metabolismo anaerobio, por lo tanto es importante tener un control sobre esta variable durante el desarrollo del proceso de fermentacin puesto que los microorganismos poseen un pH ptimo en el cual tienen mayor velocidad de crecimiento y rendimiento. Las levaduras tienen rango ptimo de pH que va desde 3.5 hasta 5.5. En el proceso de fermentacin, el pH tiende a disminuir debido a la produccin de cidos, formados al tomar los nitrgenos de los aminocidos perdiendo su carcter anftero. 2.2.7.- SISTEMAS TECNOLGICOS A TEMPLA UTILIZADOS EN LA ACTUALIDAD PARA LA PRODUCCIN DE BIOETANOL. El bioetanol se produce fundamentales son: mayoritariamente en procesos discontinuos. Los

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Produccin de biocombustibles: Etanol. Sistema Jackemine: sin recirculacin celular, tiempos de fermentacin relativamente largos y baja productividad, comparada con la del Melle Boinot. Sistema Melle- Boinot: recircula la levadura, limita el crecimiento celular y maximiza la produccin de alcohol, a la vez que logra disminuir sensiblemente los tiempos de fermentacin debido a la alta densidad celular en el fermentador. Se caracteriza por su elevada productividad, 20-25 veces ms que el sistema Jackemine. 2.2.7.1.- PROCESO CONTNUO DE FERMENTACIN ALCOHLICA. Un proceso continuo debe garantizar que los reactivos estn suficiente tiempo en contacto para que la reaccin ocurra en la extensin que se desea. A este tiempo se le llama tiempo de residencia y es igual al volumen del reactor sobre el flujo volumtrico. En los procesos microbiolgicos aerbicos se prefiere el uso de reactores de mezcla completa.

PROCESO BIOSTIL ALFA-LAVAL:

El proceso Biostil Alfa-Laval, es un sistema continuo de produccin de etanol donde hay recirculacin de vinazas a la etapa de fermentacin. Mostos o vinazas de destilera: El mosto se obtiene como residuo de la destilacin de la baticin fermentada. El mosto o vinaza de destilera, que se considera un desecho, puede ser utilizado como una de las alternativas para las mezclas de sustratos en la fermentacin alcohlica, con un conjunto de beneficios al proceso de fermentacin, entre los cuales se puede citar: Fermentaciones ms rpidas debido al retorno de los nutrientes, principalmente compuestos nitrogenados y sales minerales. Mayor acidez en los fermentadores, por tanto, fermentacin ms sana. Recirculacin de azcares eventualmente no fermentables y de levaduras muertas que van a servir como nutrientes. ANTECEDENTES DEL BIOETANOL 1908: Henry Ford diseo el primer automvil que empleo bioetanol. 1920: Se comercializ en USA un 25 % de bioetanol en la gasolina.

1930: Construccin de una planta de etanol a partir de maz al que llamaron gasohol". 1940: Cierre de la planta de gasohol, por los bajos precios del petrleo. 1970's: Crisis del petrleo. Microbiologa Industrial. 11

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1980's: Surgen polticas energticas en busca de alternativas a la dependencia de los combustibles fsiles. 2.2.8.- MERCADO DEL ETANOL: 2.2.8.1.- Por qu se desarroll un mercado de etanol? La dcada de los 90 fue la ms clida desde que se tienen registros. El siglo pasado, la Tierra se calent 0.6 C pero, segn el Panel Internacional sobre Cambio Climtico (PICC), las temperaturas aumentaran todava ms: de entre 1.4 C y 5.8 C para el ao 2100. Ello se debe a gran parte a las crecientes emisiones de gases, en especial el dixido de carbono generado por petrleo, que producen el efecto invernadero. Por ello, se ha invertido en distintas alternativas a travs de los biocombustibles y en especial etanol, que representa el 90 % de ellos y es producido principalmente en Brasil. Existen distintas razones por las cuales se debe desarrollar el bioetanol como combustible: Energa: Sustituir combustibles basados en petrleo para aumentar la seguridad energtica, disminuir la dependencia frente a la volatilidad de los precios de petrleo, bajar los costos de combustibles o de las importaciones, disminuir la dependencia de pases polticamente inestables. Medio Ambiente: Disminuir daos ambientales relacionados con la cadena del petrleo, como por ejemplo los derrames de petrleo, adems de reducir la contaminacin. Es importante mencionar que el etanol contamina un 60 % menos que la gasolina, una cifra que algunos expertos consideran que podra ser todava mayor. Desarrollo Rural y Agrcola: Apoyar a la agricultura nacional, mejorar las situaciones econmicas de las reas rurales y de los ingresos de los agricultores. El etanol tambin utilizado por aprovechando sus propiedades desinfectantes, sin embargo, el principal mercado a futuro se encuentra enfocado en su aplicacin como combustible debido a las grandes ventajas que ofrece en esta rama. ESTADO ACTUAL PERSPECTIVA MUNDIAL Los biocombustibles, a pesar de su gran expansin en los ltimos aos, cubren apenas al 1 % del consumo total de combustibles para el transporte. Sin embargo, algunos pases han llegado a porcentajes ms altos de substitucin. Brasil llega a casi 50 % en gasolina y EE.UU., segundo productor de etanol, al 2.5 %. En Brasil, el total de la substitucin de los combustibles en base a petrleo llega actualmente a un poco ms del 20 % mientras que en EE.UU. es apenas del 1.8 %.

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Produccin de biocombustibles: Etanol. Tabla 3.1: Principales productores de bioetanol en el mundo (2005). Pas Brasil Estados unidos China Unin europea india Produccin (millones por litro) 16,500 16,230 2,000 950 300

La Tabla 3.1 muestra a los principales productores de bioetanol en el mundo. Resulta de gran importancia considerar que EE.UU. y la Unin Europea no podrn ser autosuficientes en biocombustibles considerando la tecnologa actual. Si quieren cumplir con las metas establecidas o por establecerse, tendrn que importar parte de los biocombustibles, bajar las restricciones comerciales y establecer un mercado global. Amrica Latina es una de las regiones con ms potencial para ofrecer biocombustibles, y etanol en especial, dadas sus ventajas climticas combinadas con una baja densidad poblacional. As se refleja si comparamos los mayores productores de etanol, Brasil y EE.UU., que producen el 80 % de la oferta mundial. Para producir el mismo volumen de etanol, EE.UU. necesita el doble del rea de maz que Brasil con caa de azcar. Por tanto, para implementar una mezcla del 10 % en la gasolina, EE.UU. tendr que transformar la mitad de la produccin de maz en etanol, utilizando un 15 % de su tierra agrcola para la produccin de etanol. Brasil, por el contrario, con el 1 % o 1.5 % de sus tierras actualmente cultivadas, podra reemplazar totalmente su gasolina por etanol. Para producir el etanol necesario para sustituir 10 % de gasolina en Estados Unidos, Brasil necesitar al 3 % de su tierra actualmente utilizada para agricultura. Sin embargo, esto podra cambiar en cinco a 10 aos, una vez creada la posibilidad de producir etanol en base a celulosa a gran escala. Por otro lado, Universidad de Toronto concluye que no ser posible aumentar la produccin de etanol con base en maz en EE.UU. ms all de una substitucin del 15 % del consumo de gasolina. Solo con la produccin de etanol de celulosa ser posible llegar a niveles ms altos, de hasta el 50 % de reemplazo de la gasolina, utilizando materia prima producida en EE.UU. 2.2.9.- USOS Y APLICACIONES DEL ETANOL COMO BIOCOMBUSTIBLE: Como biocombustible el etanol es ms puro que el empleado para los otros fines. Por ejemplo, mientras que la pureza del etanol o alcohol etlico para la medicina y las bebidas alcohlicas es de 96% la del biocombustible debe ser del 99.5% al 99.9%. Puede ser empleado directamente como combustible o como un aadido a la gasolina en distintas concentraciones. La mezcla ms comn es para oxigenar a la gasolina, en una concentracin de alrededor de 5%, remplazando a un oxigenante llamado metil terbutil ter (MTBE), que es altamente contaminante del suelo y del agua subterrnea. Tambin se usa en otras concentraciones que van del 10% al 85% del volumen total de la gasolina, pero en esos casos los vehculos deben contar con modificaciones especiales (vehculos Flex Fuel), debido a que el etanol puede corroer algunas partes plsticas de los sistemas de inyeccin en el vehculo. Microbiologa Industrial. 13

Produccin de biocombustibles: Etanol.

E5: El biocombustible E5 significa una mezcla del 5 % de bioetanol y el 95 % de gasolina normal. Esta es la mezcla habitual y mezcla mxima autorizada en la actualidad por la regulacin europea, sin embargo, es previsible una modificacin de la normativa europea que aumentar este lmite al 10 % (E10) ya que diferentes estudios constatan que los vehculos actuales toleran sin problemas mezclas hasta el 10 % de bioetanol y los beneficios para el medioambiente son significativos. E10: El biocombustible E10 significa una mezcla del 10 % de bioetanol y el 90 % de gasolina normal. Esta mezcla es la ms utilizada en EEUU ya que hasta esta proporcin de mezcla los motores de los vehculos no requieren ninguna modificacin e incluso produce las elevaciones en octano en la gasolina mejorando su resultado y obteniendo una notable reduccin en la emisin de gases contaminantes. E85: Mezcla de 85 % de bioetanol y 15 % de gasolina, utilizada en vehculos con motores especiales. En EE.UU. las marcas ms conocidas ofrecen vehculos adaptados a estas mezclas. Tambin se comercializan, en algunos pases (EE.UU., Brasil, Suecia) los llamados vehculos FFV o Vehculos de Combustibles Flexibles con motores adaptados que permiten una variedad de mezclas. Los Fuel Flexible Vehicules" (FFV) son vehculos de turismo que pueden utilizar como combustible tanto gasolina convencional derivada del petrleo como bioetanol en mezclas de hasta un 85 % (E85). Por tanto, son vehculos totalmente polivalentes, que ofrecen la posibilidad de utilizar energa renovable en su mximo estado de mezcla sin la necesidad de consumir ms energa. Debido al respaldo de los gobiernos e instituciones hacia el desarrollo de las energas renovables aplicadas en el sector de la automovilizacin, cada vez son ms los fabricantes que investigan y desarrollan vehculos de este tipo. E95 y E100: Mezclas hasta el 95 % y 100 % de bioetanol son utilizados en algunos pases como Brasil con motores especiales. E-DIESEL: El bioetanol permite su mezcla con gasoil utilizando un aditivo solvente y produciendo un biocombustible diesel el E-Diesel, con muy buenas caractersticas en cuanto a combustin y reduccin de contaminacin ofreciendo otras alternativas al bioetanol en el campo de los vehculos diesel. El E-Diesel ya se comercializa con xito en EEUU y Brasil y pronto har su aparicin en Espaa y Europa. ETBE: No se comercializa como un biocombustible, sino que se utiliza como un aditivo de la gasolina. El ETBE (etil terbutil ter) se obtiene por sntesis del bioetanol con el isobutileno, subproducto de la destilacin del petrleo. El ETBE posee las ventajas de ser menos voltil y ms miscible con la gasolina que el propio etanol y, como el etanol, se aditiva a la gasolina en proporciones del 10-15 %. La adicin de ETBE al etanol sirve para aumentar el ndice de octano de la gasolina, evitando la adicin de sales de plomo. 2.2.9.2.- VENTAJAS EN EL USO DE BIOETANOL: Generar etanol a partir de productos agrcolas presenta varias ventajas. Es una fuente de combustible renovable. Reduce dependencia del petrleo del extranjero. Es una fuente ms limpia de combustible. Aumenta el octano del combustible con un coste pequeo. Virtualmente utilizable en todos los vehculos. Microbiologa Industrial. 14

Produccin de biocombustibles: Etanol. Fcil de producir y almacenar. Los biocarburantes emiten un 40-80 % menos de gases invernaderos que los combustibles fsiles. El bioetanol es superior medioambientalmente al resto de los carburantes ms importantes. Reduce la formacin de la lluvia acida. Mejora la calidad del aire en zonas urbanas. No contamina el agua. Con su produccin puede reducirse los residuos. En mezcla con gasolina, aumenta el nmero de octanos y promueve una mejor combustin. Reduce las emisiones contaminantes como monxido de carbono (CO) e hidrocarburos, con un bajo costo. Se estima que la reduccin es de 40 a 80 % menos de gases invernadero que los combustibles fsiles. Es virtualmente utilizable en todos los vehculos con motor a gasolina. 2.2.9.3.- INCONVENIENTES EN EL USO DE BIOETANOL: Para poder utilizar el bioetanol como combustible puro (E100) se necesita llevar a cabo varias modificaciones dentro del motor, y as no alterar significativamente el consumo. Estas son: Aumentar la relacin de compresin. Variar la mezcla de combustible / aire. Bujas resistentes a mayores temperaturas y presiones. Conductos resistentes al ataque de alcoholes. Se debe agregar un mecanismo que facilite el arranque en frio. 4.- PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLE ETANOL A PARTIR DEL MAZ. 4.1.- RESUMEN: El etanol es el alcohol producido a partir de la fermentacin de los azucares que se encuentran en los productos vegetales combinados en forma de sacarosa, almidn, hemicelulosa y celulosa. Dependiendo de su fuente de obtencin, su produccin implica fundamentalmente molienda, fermentacin y destilacin de las mismas. Se puede obtener a partir de 3 principales tipos de materias primas, como: Materia rica en sacarosa (la melaza de caa de azcar y sorgo dulce), materia rica en almidn (cereales y tubrculos), materia rica en celulosa (madera y residuos agrcolas). En la actualidad se conocen tres procesos: Molienda en hmedo; donde se remueve la mxima cantidad de almidn del grano siendo este posteriormente fermentado. Molienda en seco; el grano limpio se muele para reducir el tamao de las partculas y se fermenta. Molienda en seco modificada; se introduce mejoras al proceso para el aprovechamiento del germen y las fibras, que son separadas y el resto del grano se enva a la fermentacin. Dando mayor valor agregado a los coproductos que la molienda en seco tradicional. En este trabajo se analizaran comparativamente los principales procesos para la obtencin de etanol utilizando como materia prima maz. Examinndose los beneficios y limitaciones de cada proceso considerando requerimiento de capital, capacidad de produccin, rendimientos de etanol y coproductos, entre otros factores importantes. 4.2.- INTRODUCCION: La produccin de etanol a partir de maz ha sido refinada y actualizada en aos recientes, ganando en eficacia. Esta se realiza por dos procesos convencionales de molienda en hmedo y en seco. Esta ltima, ha sido modificada con el objetivo de Microbiologa Industrial. 15

Produccin de biocombustibles: Etanol. aumentar el valor y la calidad de los coproductos. Existen tres procesos de modificacin de la molienda seca; Quick Germ (recupera el germen), Quick Germ and Quick Fiber (extrae el germen y la fibra) y la Enzymatic Milling (recupera el germen, la fibra del pericarpio y la fibra del endospermo). El beneficio de estos procesos es la eliminacin de material no fermentable, incrementando la capacidad de produccin de etanol. 4.3.- DESARROLLO: Se detallan los distintos procesos para la obtencin de etanol. Molienda en hmedo: Recepcin y limpieza: la materia prima se recibe y se analiza el contenido de humedad, presencia de mohos y apariencia general. Si cumple con los controles estndar de calidad se enva a un sistema de limpieza y posterior almacenamiento. Maceracin del grano: el grano se remoja en tanques por 30- 50 horas a temperaturas de 49-54 C en agua que contiene del 0,1 al 0,2 % de dixido de azufre, este ayuda a separar el almidn y la protena soluble y permite prevenir el crecimiento de microorganismos no deseados manteniendo el pH cerca de 4. En el agua de remojo se disuelve un 6% de materia seca utilizable en la alimentacin de ganados. Molienda gruesa: se muele el grano ablandado en un molino de friccin y se libera el germen sin fragmentarlo, el cual se separa del resto del grano con hidrociclon, se lava para quitarle el almidn adherido y se deseca para la posterior produccin de aceite. Molienda fina: el material restante se muele con molinos de impacto. Con el objetivo de separar el almidn y las protenas de la fibra. La fibra (salvado) se elimina por tamizado y se lava para quitar el almidn adherido, se escurre (con presin) y se deseca para su utilizacin como alimento animal. Separacin del gluten y almidn: la mezcla almidn-protenas (gluten) se separa mediante centrifugas continuas. El gluten con un 60 -70% de protena es centrifugado y secado. Este es utilizado como alimento animal. El almidn es purificado por recentrifugacin para reducir el contenido de protenas a menos de 0.3 %. Este puede ser enviado a la etapa de hidrlisis o secado y modificado qumicamente para su venta. Licuefaccin: el almidn mezclado con agua de proceso y enzimas (alfa-amilasa), es calentado para permitir la licuefaccin a 83 C. Posteriormente se agregan componentes qumicos (nutrientes y regulacin de pH) y se esteriliza a 110 C. Sacarificacin: la solucin es enfriada a 60 C tras el agregado de otra enzima (glucoamilasa) que convierte las molculas de almidn en azucares simples. Fermentacin: al mosto enfriado a 35 C se le adiciona levadura (Saccharomyces cerevisiae). Esta mezcla es fermentada por 2 das donde los azucares simples son convertidos en etanol y dixido de carbono. Recuperacin de la levadura: el producto de la fermentacin se pasa a travs de una centrifuga donde se separa la levadura del resto. Esta es concentrada y tratada con cido para eliminar las bacterias con el objetivo de ser reutilizada. Destilacin: el mosto, en una primera etapa, es concentrado hasta un 50-70%. Luego es enviado a una columna de purificacin donde se separa por cabeza las impurezas (aldehdos y algunos esteres) y por la parte inferior un lquido residual que es conducido a la columna de rectificacin. En esta se obtiene los aceites de fusel constituidos por cidos y alcoholes superiores y el etanol azeotrpico. Almacenamiento: el alcohol se condensa y se enva a tanque de almacenamiento. En la figura N 3 se puede observar el diagrama de flujo del proceso, y en la tabla N 2 los principales productos obtenidos. Microbiologa Industrial. 16

Produccin de biocombustibles: Etanol.

Figura N 3: Molienda en hmedo. Tabla N 2: Principales productos de la molienda hmeda. Productos 1 Tn de Maz Etanol 372,58 lt Gluten Feed 241,08 kg Gluten Meal 46,43 kg Aceite de maz 26,79 kg Dixido de 303,58 kg Carbono Coproductos derivados del sistema de produccin. Los principales coproductos se describen a continuacin: Germen: se obtiene en menor cantidad y es el coproducto ms valioso. Se utiliza en la produccin de aceite de maz. El residuo de la extraccin, al tener una proporcin de aceite incluida, se utiliza como componente de alimentacin animal adicionada al gluten feed o como harina de germen de maz. Gluten Meal: (harina de gluten de maz) es un producto de alto contenido proteico y energtico. Consiste en un 60 % de protenas y pequeas cantidades de almidn y fibras no recuperadas en el proceso. Gluten Feed: (alimento de gluten) es un producto de protena intermedio rico en fibra altamente digerible. Contiene aproximadamente 21% protena, 2.5% grasa, 8% fibra, y en menor proporcin vitaminas y aminocidos. Puede adicionarse licor de remojo y harina de germen de maz. Este producto se vende tanto hmedo como desecado. En el producto seco el salvado, los elementos extractivos del maz y la harina de germen se mezclan, se secan, se muelen y se peletizan para facilitar el manejo. El alimento de gluten de maz hmedo se prensa hasta un 35% de materia seca, antes de que se agregue el licor de remojo. Estos se utilizan para alimentacin de ganado, aves, cerdos y mascotas. Licor de Remojo: se conoce tambin como elementos extractivos fermentados de maz condensados. Este contiene disuelto un 6% de materia seca que se concentra hasta Microbiologa Industrial. 17

Produccin de biocombustibles: Etanol. un 50%, para luego ser combinado con el alimento de gluten de maz o vendido como aglutinante de pelets. Dixido de Carbono: en la actualidad se captura solo un tercio de la produccin. En general son las plantas de mayor capacidad de produccin las que lo aprovechan comercialmente, ya que normalmente no se justifica en fbricas menores la inversin requerida, a menos que existan condiciones especiales de comercializacin. El anhidro carbnico se utiliza para carbonatacin de bebidas (previa desodorizacin), para la extincin y prevencin de fuego. Molienda en seco: Recepcin y limpieza Molienda: se utiliza un molino de martillo con el propsito de romper el grano facilitando la penetracin del agua en la etapa de coccin. Licuefaccin, sacarificacin y fermentacin: son semejantes a las correspondientes en la molienda hmeda, diferencindose en que el total de los componentes del grano son utilizados en estas etapas. Destilacin: se carga el mosto fermentado en la primera columna donde se separa el material slido depositado en el fondo, continuando las etapas de concentracin, purificacin y rectificacin, coincidiendo estas con las de la molienda en hmedo. Almacenamiento El diagrama del proceso se observa en la figura N 2, seguido por la tabla N 2 donde se resumen los principales productos.

Figura N 4: Molienda en seco. Tabla N 3: Principales productos de la molienda en seco. Productos Etanol DDGS Dixido de Carbono 1 Tn de maz 405,27 l 321,44 kg 321,44 kg

Coproductos derivados del sistema de produccin. El principal coproducto son los granos de destileras, que pueden ser procesados para obtener algunos de los siguientes suplementos: El residuo procedente de la primer columna de destilacin se bombea a los decantadores de centrifugacin donde se separan la mayor parte de los slidos en Microbiologa Industrial. 18

Produccin de biocombustibles: Etanol. suspensin en forma de una torta denominados granos de destilados hmedos y un lquido llamado solubles de destileras (DDS). Estos se pueden reciclar una fraccin, a la conversin de almidn y el resto se concentra en evaporadores para formar un jarabe espeso (CDS) que es utilizado para alimentacin de ganado. Los granos destilados hmedos (DWG) contienen aproximadamente el 65 % de humedad, residuos no fermentados de los granos originales, levaduras y nutrientes solubles. El cual puede ser vendido como tal o desecarlo hasta un contenido de 10% de humedad (DDG). Si se agrega el jarabe (CDS) a los granos de destilera hmedos (DWG) y si luego se secan, el producto resultante se refiere como granos de destilera desecados con solubles (DDGS) el cual es una fuente importante para la alimentacin de ganado, cerdos y aves de corral. Molienda Modificada: Quick Germ: (Germen Rpido) El grano se remoja en tanques por 3-12 horas a 60 C en agua. Luego el grano entero pasa a travs de un molino de discos de friccin, el producto resultante es incubado con la enzima amilasa con el objetivo de incrementar la gravedad especfica lo que permitir la recuperacin del germen en un sistema de hidrociclones, el cual es secado para la posterior extraccin de aceite. El resto del grano es molido en hmedo y enviado a las siguientes etapas; licuefaccin, sacarificacin, fermentacin y destilacin, comunes a todos los procesos. Quick Germ- Quick Fiber: (Germen Rpido-Fibra Rpida) el grano es mojado, molido e incubado. Los parmetro del mojado e incubacin se ajustan para producir la flotacin de la fibra del pericarpio con el germen. Usando hidrociclones, estos son separados de los otros componentes. En una etapa posterior de aspiracin se separa el germen de la fibra. A continuacin, el resto del grano es molido en hmedo y enviado a las siguientes etapas; licuefaccin, sacarificacin, fermentacin y destilacin, comunes a todos los procesos. La fibra recuperada se utiliza para la produccin de goma de fibra de maz como sustituto de la goma arbica, como aceite de fibra de maz y como fibra dietaria. Enzymatic dry grind process: (Proceso Enzimtico de Molienda en Seco) comienza con un mojado de 12 horas, una molienda gruesa y una posterior incubacin enzimtica con amilasa y proteasa durante 4 horas (45- 55 C y pH 5.0). Despus de la etapa de incubacin, el germen y la fibra del pericarpio son separados como en el proceso QGQF. El resto se enva a una molienda fina, recuperndose la fibra del endospermo por medio de un cribado. El material remanente contina las etapas comunes a los procesos anteriores. En figura N 3 se muestra el diagrama de flujo de las moliendas modificadas.

Microbiologa Industrial. 19

Produccin de biocombustibles: Etanol.

Figura N 5: Molienda modificada. Principales coproductos de la molienda modificada. Los procesos modificados de molienda en seco incrementan la cantidad de coproductos obtenidos, siendo mxima en la molienda enzimtica debido a la separacin de los materiales no fermentables del grano (germen, fibra del pericarpio y fibra del endospermo). Como consecuencia de sta se incrementa la capacidad de fermentacin y se reduce la proporcin de fibra en el DGS. En la tabla N 3 se puede observar la proporcin obtenida de coproductos en los distintos procesos modificados. Tabla N 4: Coproductos producidos en los procesos modificados. Coproductos Germen (%) Fibra del pericarpio (%) Fibra del endospermo (%) Etanol (lt / Kg) DDGS (% protena) QG 6,1 QGQF 7,7 9,1 0,323 49 E - Mill 8,1 10,2 4,6 0,334 58

0,324 36

Comparacin de los procesos de molienda modificada En la tabla N 5 se puede observar que con la misma cantidad de agua se procesa, para la molienda enzimtica, mayor cantidad de grano. En los tiempos de mojado y fermentacin no presenta variacin en los distintos procesos, verificndose una considerable disminucin en el tiempo de fermentacin para QGQF y E - Mill debido a que se extrae una mayor proporcin de material no fermentable. Tabla N 5: Parmetros operacionales de los procesos modificados.

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Produccin de biocombustibles: Etanol. 4.4.- RESULTADOS: La mayor produccin de etanol se obtiene en la molienda en seco convencional (405,27 lt/ tn) seguida por la molienda en hmedo (372,53 lt/ tn) y por ltimo la molienda enzimtica (334 lt/ tn), esta disminucin se debe a la perdida de almidn durante la recuperacin de coproductos. Con respecto a la capacidad de fermentacin, se puede decir, que es mayor en la molienda hmeda, debido a que se fermenta el almidn, continuada por la molienda enzimtica, donde se fermenta el almidn y el gluten y la molienda en seco que procesa el grano entero. Los tiempos de fermentacin disminuyen a medida que se extrae material no fermentable. En la molienda hmeda se obtiene la mayor cantidad de coproductos (germen, fibra, gluten, almidn y dixido de carbono), teniendo como ventaja que una parte del almidn se puede destinar a la produccin de etanol y el resto ser comercializado como tal. La molienda seca es en la que menor cantidad de coproducto se obtienen (DDGS y dixido de carbono) por lo cual, se han desarrollado nuevos procesos con el objetivo de recuperar ms cantidad (germen y fibra) y mayor valor de coproductos durante la produccin de etanol. La molienda en seco es la que tiene menor requerimiento de capital tanto en el momento de construir como de operar la planta, en cambio la molienda en hmedo es un proceso de capital intensivo debido a la tecnologa aplicada, a los grandes volmenes procesados de grano, entre otros. En los procesos de molienda modificada, es evidente que a medida que se extrae mayor cantidad de coproductos, mayor es el requerimiento de capital tanto para construir como para operar la planta. 4.5.- CONCLUSIONES DE LA PRODUCCIN DE BIOCOMBUSTIBLE A PARTIR DEL MAZ: ETANOL

La molienda en hmedo es un proceso de capital intensivo donde se procesa un gran volumen de granos obtenindose una elevada cantidad de coproductos. En la Molienda en seco, se requiere un bajo capital en la instalacin y operacin de la planta, existiendo pequeas perdidas de almidn en la recuperacin del coproducto. El proceso Quick Germ posee como ventaja la recuperacin del germen, incremento de protena en el DGS, aumento de la capacidad de produccin y prdidas en pequeas proporciones de almidn por la recuperacin de coproductos. Los aspectos favorables del Quick Germ Quick Fiber son la recuperacin tanto del germen como de la fibra y se incrementa an ms la capacidad de produccin. En Enzymatic Milling se recupera el germen y la fibra del endospermo y pericarpio, este proceso es en el que obtiene la mxima capacidad de produccin de etanol. Con el anlisis anteriormente expuesto, se concluye que el proceso conveniente a desarrollar en el proyecto final es la molienda enzimtica.

Universidad Iberoamericana Ciudad de Mxico.

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Produccin de biocombustibles: Etanol.

1.- RESUMEN En la actualidad hablar de energa y no hablar de biocombustibles es casi imperdonable. El mercado de biocombustibles crece con pasos agigantados, mientras los avances tecnolgicos procuran mantener ese ritmo de crecimiento. Es por ello que a lo largo de este proyecto se estudia la produccin de etanol en todas sus etapas; desde la fermentacin del almidn de trigo, hasta la purificacin del etanol. Si bien la concentracin obtenida es lejana al grado anhidro, el trabajo plantea un amplio panorama para su produccin, utilizando una materia prima poco estudiada. El proceso seguido se detalla a lo largo del presente trabajo. Objetivos Obtener etanol a partir de la fermentacin de almidn de trigo en el laboratorio. 2.- INTRODUCCION En la actualidad hablar de energa y no hablar de biocombustibles es casi imperdonable. El tema del calentamiento global es de igual forma uno de los ms mencionados, no solo en el argot poltico, sino entre la comunidad cientfica. Los aumentos en la temperatura del planeta han sido el principal motor de una serie de teoras alrededor de los gases invernadero y sus efectos demoledores para el planeta. Para solucionar, o por lo menos parchar temporalmente este grave problema, una de las herramientas ms aceptadas social y cientficamente es la sustitucin de los combustibles fsiles por energas alternativas y concretamente, hoy en da la ms viable, la produccin de bioetanol. El mercado de biocombustibles crece con pasos agigantados, mientras los avances tecnolgicos procuran mantener ese ritmo de crecimiento. Es por ello que a lo largo de este proyecto se estudia la produccin de etanol en todas sus etapas; desde la fermentacin del almidn de trigo, hasta la purificacin del etanol, buscando idealmente una solucin anhidra. Si bien esta ltima condicin no se cumpli, se llevaron a cabo todas las etapas. El proceso se describe a detalle a lo largo del trabajo. 1. 1.1 MARCO TEORICO. BIOETANOL

El alcohol etlico o etanol es un producto qumico obtenido a partir de la fermentacin de los azucares que se encuentran en los productos vegetales, tales como cereales, remolacha, caa de azcar, sorgo o biomasa. Estos azucares estn combinados en forma de sacarosa, almidn, hemicelulosa y celulosa. Las plantas crecen gracias al proceso de fotosntesis, en el que la luz del sol, el dixido de carbono de la atmosfera, el agua y los nutrientes de la tierra forman molculas orgnicas complejas como el azcar, los hidratos de carbono y la celulosa, que se concentra en la parte fibrosa de la planta. El bioetanol se produce por la fermentacin de los azucares contenidos en la materia orgnica de las plantas. En este proceso se obtiene el alcohol hidratado, con un Microbiologa Industrial. 22

Produccin de biocombustibles: Etanol. contenido aproximado del 5 % de agua, que tras ser deshidratado se puede utilizar como combustible.

El bioetanol mezclado con la gasolina produce un biocombustible de alto poder energtico con caractersticas muy similares a la gasolina pero con una importante reduccin de las emisiones contaminantes en los motores tradicionales de combustin. El etanol se usa en mezclas con la gasolina en concentraciones del 5 o el 10 %, E5 y E10 respectivamente, que no requieren modificaciones en los motores actuales. Un obstculo importante es la legislacin europea sobre la volatilidad de las gasolinas que a la proporcin de etanol en mezclas E5. Concentraciones ms elevadas, autorizadas en Suecia y Estados Unidos, implica que se debe disponer de un vehculo flexible (FFV), con un deposito, motor y sistema de combustible nico capaz de funcionar con gasolina y etanol, solos o mezclados en cualquier proporcin. La otra alternativa para su uso es en forma de aditivo de la gasolina como etil-terbutil ter (ETBE). De esta forma, los principales objetivos de la produccin de bioetanol son: Preparar mezclas con gasolina en lugar de otros aditivos como el ETBE (etilterbutil ter) o el MTBE (metil-terbutil ter) en proporciones superiores al 5 %. Usarlo como carburante en mezclas con gasolina hasta un 85 %. Suministrarlo como materia prima en la produccin del ETBE.

Las principales fuentes actuales de produccin de bioetanol a nivel mundial son en orden alfabtico: 1.2 Caa de azcar. Maz. Remolacha. Sorgo dulce. Yuca. PRODUCCIN DE ETANOL A PARTIR DE ALMIDON DE TRIGO

El esquema general de fabricacin del bioetanol (Figura 4.1), muestra las siguientes fases en el proceso: Dilucin: Es la adicin del agua para ajustar la cantidad de azcar en la mezcla o (en ltima instancia) la cantidad de alcohol en el producto. Es necesaria porque la Microbiologa Industrial. 23

Produccin de biocombustibles: Etanol. levadura, usada ms adelante en el proceso de fermentacin, puede morir debido a una concentracin demasiado grande del alcohol. Conversin: La conversin es el proceso de convertir el almidn/celulosa en azucares fermentables. Puede ser lograda por el uso de la malta, extractos de enzimas contenidas en la malta, o por el tratamiento del almidn (o de la celulosa) con el cido en un proceso de hidrolisis acida. Fermentacin: La fermentacin alcohlica es un proceso anaerbico realizado por las levaduras, bsicamente. De la fermentacin alcohlica se obtienen un gran nmero de productos, entre ellos, el alcohol. Destilacin o Deshidratacin: La destilacin es la operacin de separar, mediante calor, los diferentes componentes lquidos de una mezcla (etanol/agua). Una forma de destilacin, conocida desde la antigedad, es la obtencin de alcohol aplicando calor a una mezcla fermentada.

Figura 4.1: Esquema general de fabricacin de bioetanol. 1.2.1 SUBPRODUCTOS DE LA OBTENCIN DEL BIOETANOL Los subproductos generados en la produccin de bioetanol, es como el volumen de los mismos, dependen en parte de la materia prima utilizada. En general se pueden agrupar en dos tipos: Materiales lignocelulosicos: tallos, bagazo, etc., correspondientes a las partes estructurales de la planta. En general se utilizan para valorizacin energtica en cogeneracin, especialmente para cubrir las necesidades energticas de la fase de destilacin del bioetanol, aunque tambin se puede vender el excedente a la red elctrica (con precio primado). Materiales alimenticios: pulpa y granos de destilera de maz desecados con solubles (DDGS), que son los restos energticos de la planta despus de la fermentacin y destilacin del bioetanol. Tienen inters para el mercado de piensos animales por su riqueza en protena y valor energtico. La caa de azcar es la planta ms aprovechable por el bagazo generado para su combustin y generacin energtica. La remolacha azucarera genera, por su parte, unas 0.75 ton de pulpa por tonelada de bioetanol producido. Microbiologa Industrial. 24

Produccin de biocombustibles: Etanol.

La produccin de bioetanol a partir de trigo o maz genera en torno a 1.2 ton de DDGS por tonelada de bioetanol. En general, existen dos filosofas alimenticias en cuanto al empleo del DDGS. Cuando el pienso est en el 15 % o menos de la dieta, el DDGS sirve como una fuente de protena suplementaria. Cuando el pienso esta en los niveles ms altos (superior al 15 % de la dieta de la materia seca) su papel primario es como fuente de energa. El DDGS est compuesto de grasa en un 10-15 %, de fibra neutra detergente en un 40-55 %, de protena de crudo (CP) en un 30-35 % y de ceniza en un 5 %. 1.3 Produccin Industrial de Alcohol a partir de Almidn

Figura 4.2: Esquema general de produccin industrial de bioetanol. 1.4 Balance Energtico de la Produccin de Bioetanol

Para que el etanol contribuya perceptiblemente a las necesidades de combustible para el transporte, necesita tener un balance energtico neto positivo. Para evaluar la energa neta del etanol hay que considerar cuatro variables: la cantidad de energa contenida en el producto final del etanol, la cantidad de energa consumida directamente para hacer el etanol, la calidad del etanol resultante comparado con la calidad de la gasolina y la energa consumida indirectamente para hacer la planta de proceso de etanol. Aunque es un asunto que crea discusin, algunas investigaciones que hagan caso de la calidad de la energa sugieren que el proceso toma tanta o ms energa combustible fsil (en las formas de gas natural, diesel y de carbn) para crear una cantidad equivalente de energa bajo la forma de etanol. Es decir, la energa necesitada para funcionar los tractores, para producir el fertilizante, para procesar el etanol, y la energa asociada al desgaste y al rasgn en todo el equipo usado en el proceso (conocido como amortizacin del activo por los economistas) puede ser mayor que la energa derivada del etanol al quemarse. Se suelen citar dos defectos de esta argumentacin como respuesta, en primer lugar el no dar importancia a la calidad de la energa del bioetanol, cuyos efectos Microbiologa Industrial. 25

Produccin de biocombustibles: Etanol. econmicos son importantes. Si se compara la calidad de la energa con los costes de descontaminacin del suelo que provocan los derrames de gasolina al ambiente y los costes mdicos" de la contaminacin atmosfrica (porque no se puede descontaminar la atmosfera), resultado de la refinacin y de la gasolina quemada. Por otro lado, el desarrollo de las plantas de etanol implica un prejuicio contra este producto basado estrictamente sobre la preexistencia de la capacidad de refinacin de la gasolina. La decisin ltima se deber a fundar sobre razonamientos econmicos y sociales a largo plazo. El primer argumento, sin embargo, sigue debatindose. No tiene sentido quemar 1 litro de etanol si requiere quemar 2 litros de gasolina (o incluso de etanol) para crear ese litro. La mayor parte de la discusin cientfica actual en lo que al etanol se refiere gira actualmente alrededor de las aplicaciones en las fronteras del sistema. Esto se refiere a lo completo que pueda ser el esquema de entradas y salidas de energa. Se discute si se deben incluir temas como la energa requerida para alimentar a la gente que cuida y procesa el maz, para levantar y reparar las cercas de la granja, incluso la cantidad de energa que consume un tractor. Adems, no hay acuerdo en que clase de valor dar para el resto del maz, como el tallo por ejemplo, lo que se conoce comnmente como coproductor. Algunos estudios propugnan que es mejor dejarlo en el campo para proteger el suelo contra la erosin y para agregar materia orgnica. Mientras que otros queman el coproductor para accionar la planta del etanol, pero no evitan la erosin del suelo que resulta, lo cual requerir a ms energa en forma de fertilizante. Dependiendo del estudio, la energa neta vara de 0.7 a 1.5 unidades de etanol por unidad de energa de combustible fsil consumida. En comparacin si el combustible fsil utilizado para extraer etanol se hubiese utilizado para extraer petrleo y gas se hubiesen llenado 15 unidades de gasolina, que es un orden de magnitud mayor. Pero, la extraccin no es igual que la produccin. Cada litro de petrleo extrado es un litro de petrleo agotado. Para comparar el balance energtico de la produccin de la gasolina a la produccin de etanol, debe calcularse tambin la energa requerida para producir el petrleo de la atmosfera y para meterlo nuevamente dentro de la tierra, un proceso que har que la eficiencia de la produccin de la gasolina fuese fraccionaria comparada a la del etanol. Se calcula que se necesita un balance energtico de 200 %, o 2 unidades de etanol por unidad de combustible fsil invertida, antes de que la produccin en masa del etanol llegue a ser econmicamente factible. La Tabla 4.1 muestra el rendimiento de los cultivos utilizados para la produccin de bioetanol. En la Tabla 4.2 se presenta la relacin entre la energa generada y la energa consumida para los mismos cultivos.

Microbiologa Industrial. 26

Produccin de biocombustibles: Etanol. Tabla 4.1: Rendimiento de cultivos en la produccin de alcohol.

Tabla 4.2: Relacin entre la energa generada y la energa consumida.

5.

Procedimiento Experimental

El procedimiento experimental que se llev a cabo para la realizacin de este proyecto se muestra en forma esquemtica en la Figura 5.1. Cada uno de los pasos se describe detalladamente a lo largo de esta Seccin.

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Figura 5.1: Diagrama esquemtico del procedimiento experimental.

5.1.

Pruebas Preliminares

5.1.1. Solucin Almidn de Trigo Se prepar una solucin madre de almidn de trigo para realizar las pruebas de yodo y de azucares reductores. La solucin de almidn se realiz de la siguiente manera: 1. 2. 0.507 g de almidn de trigo en 50 ml de agua destilada. Mezclar perfectamente y se almacena.

5.1.2. Prueba de Yodo La prueba de yodo se realiz con la finalidad de determinar la presencia de almidn en la muestra. Una coloracin azul-morado, por la formacin de un complejo almidnyodo indica un resultado positivo. Reactivos: Solucin de yoduro de potasio (KI) 5mM. Solucin de yodo (I2) 5 mM. Preparacin: 1. 2. 3. Se prepararon 6ml de una solucin KI/I2 1:1. Se tom una alcuota de 1ml de la muestra y se coloc en un tubo de ensayo. Se adicion 1.5 ml de agua destilada al tubo descrito anteriormente.

4. Se colocaron 2.5 ml de la solucin KI/I2 y se agregaron al tubo de ensaye con la muestra y el agua. Se observ el cambio de coloracin. 5. Se calibra el espectrofotmetro a una longitud de onda de 580 nm con un blanco que contiene una solucin de 1:1 de la solucin KI/I2 y agua destilada. 6. Se colocaron 3mL de la muestra del tubo de ensayo en una celda.

7. Se introdujo la celda al espectrofotmetro, se ley el valor y se registr en la bitcora. Notas: Al inicio de la hidrolisis cuando haba mucho almidn y forma el complejo con el yodo y se obtiene una coloracin azul intenso. Al final de la hidrolisis cuando el almidn es muy poco y ya no hay complejo con el yodo y la coloracin es casi imperceptible. 5.1.3. Prueba de Azucares Reductores La prueba de azucares reductores tiene como objetivo determinar la presencia de Microbiologa Industrial. 28

Produccin de biocombustibles: Etanol. grupos carbonilo libres (C=O), de ah su nombre. Esto implica la oxidacin del grupo aldehdo de la glucosa. Reactivos: 1. 2. Solucin de Sal de Rochelle (40 % w/v). Solucin DNS (cido dinitrosaliclico).

Preparacin: 1. 2. Se tom una alcuota de 2 ml de la muestra y se colocaron en un tubo de ensayo. Se adicion 2 ml de reactivo DNS.

3. La mezcla se coloc en bao Mara a una temperatura de 90 C durante 15 minutos hasta que se desarrolle una coloracin rojiza casi caf. 4. Se calibr el espectrofotmetro a una longitud de onda es 575 nm. Con un blanco que contiene una solucin 1:1 del reactivo de DNS y agua destilada. 5. Se enfri a temperatura ambiente y se registr el valor de la absorbancia que registra el espectrofotmetro a una longitud de onda de 575 nm. Notas: Antes de llevar la solucin a 95 C, cuando todava no hay reaccin entre la oxidacin del grupo aldehdo de la glucosa. Despus de que se oxid el grupo aldehdo de la glucosa, por la accin de la temperatura, tornndose la solucin a color marrn. 5.2. Hidrolisis de Almidn de Trigo

La hidrolisis del almidn se llev a cabo en dos etapas. En la primera etapa se llev a cabo la reaccin de la enzima -amilasa y la segunda por medio de la enzima glucoamilasa, esto se realiz para obtener glucosa, porque esta es la fuente de carbono (sustrato) que requiere la levadura para crecer y poder producir el etanol. Procedimiento: 1. 2. 3. 4. En un matraz de 4 L se colocaron 3L de agua de la llave. Se pesaron 90 g de almidn de trigo y se colocaron en dicho matraz. Se pesaron 0.6 g de CaCl2 y se coloraron en el matraz anterior. Se esper que la solucin gelatinizara.

5. Despus se esper a que la temperatura alcanzara los 72 C y se colocaron 6 g de la enzima -amilasa. La reaccin se dej a temperatura constante durante 5 horas. 6. Se realiz una prueba de cuantificacin de almidn por medio de la prueba de yodo. Si la coloracin observada era lila o casi blanca se podra seguir con la segunda etapa de la hidrolisis. De otro modo, se dejaba reaccionar por ms tiempo hasta que se presentara este color. Microbiologa Industrial. 29

Produccin de biocombustibles: Etanol. 7. Se enfri el matraz en un bao de hielo a 4 C y se adicion 1 ml de H3PO4 para obtener un pH de 4.2. 8. Se llev la solucin del matraz a una temperatura de 60 C y se adicionaron 9 ml de la enzima glucoamilasa, la reaccin se dej por 2.5 horas a temperatura constante. 9. Se realiz una prueba de azucares reductores, si la coloracin es rojo casi caf la reaccin de la hidrolisis est terminada. 5.3. Experimentacin de la Cintica Procedimiento: 1. En un reactor biolgico de 3.25 L de volumen nominal se agregaron 2 L de solucin de almidn hidrolizada, el cual es el medio de cultivo y se le agregaron 10 g de nutrientes para levadura. 2. Se inocul al medio de cultivo del biorreactor, 500 ml de la solucin de levadura, que llevaba 24 hr con el inoculo. 3. Se esteriliz el inoculo y se lav perfectamente el biorreactor antes de la operacin. 4. Se ajust el biorreactor a una temperatura de 30 C y una agitacin de 150 rpm.

5. Se tomaron muestras de 10 ml aproximadamente cada 5 horas y se tom de ah una alcuota de 6 ml y se colocaron en un tubo de centrifuga y se introdujo al equipo por 15 minuto a 4000 rpm. 6. Mientras tanto, a los 4 ml sobrantes se les realizo un anlisis de absorbancia.

7. Al terminar el tiempo en la centrifuga se tomaron 3 ml del sobrenadante y se filtr, se guard en un tubo con tapn, se etiquet y se guard en el congelador. Medio de cultivo: 10 g/L dextrosa diluido en 100 ml. 10 g/L peptona de casena. 5 g/L de extractos de levadura (yeast extract). 1 g/L de NaCl. Estos ltimos tres diluidos todos en 400 ml. 5.4. Pruebas de Alcohol

1. Se tomaron 5 ml de la muestra sin diluir a la que previamente se le midi la absorbancia. 2. Se colocaron en un tubo de centrfuga y se introdujo en el equipo, se ajust a 4000 rpm durante 15 minutos. 3. Con una jeringa centrifugacin. 4. 5. se tomaron 2 ml del sobrenadante resultante de la

Se filtr la solucin a un tubo con tapn. Se etiquet el tubo. Microbiologa Industrial. 30

Produccin de biocombustibles: Etanol. 6. Se tap el tubo y se almacen en el congelador.

7. Al finalizar el experimento se recolectaron todos los tubos y se llevaron al laboratorio en donde se midi la concentracin de etanol utilizando una cromatografa de gases (CG). Descripcin del equipo: Marca: Waters. Modelo: 2695. Columna C-18 de 5 micras de 150 * 4.6 mm. Condiciones de operacin del CG: Isopropanol-Agua: 58-42. Flujo: 1.2 ml/min. 5.4.1. Curva de calibracin Utilizando los datos que se muestran en la Tabla 5.1 se realiz una curva de calibracin, para estimar los valores de concentracin para la prueba de alcohol. La Figura 6.1 muestra la ecuacin de la regresin lineal obtenida. Tabla 5.1: Curva de Calibracin.

5.5.

Destilacin y Purificacin

Para aumentar la concentracin de alcohol de la solucin obtenida posterior a la fermentacin se llevaron a cabo cuatro etapas. Dos destilaciones y dos purificaciones en las cuales se utiliz acetato de sodio anhidro. La Tabla 5.2 muestra un resumen de los datos experimentales obtenidos para estas cuatro etapas. 5.5.1. Primera y Segunda Destilacin La primera destilacin se llev a cabo la destilacin en la columna de destilacin del laboratorio de Ingeniera Qumica donde se hicieron 6 cortes midiendo la concentracin de alcohol como %v utilizando un refractmetro. Cabe destacar que el refractmetro est referenciado a 20 C, lo que puede causar errores en las mediciones, no obstante, de acuerdo a los fines de este trabajo, dichas variaciones Microbiologa Industrial. 31

Produccin de biocombustibles: Etanol. sern despreciadas. La segunda destilacin se llev a cabo en una columna a escala laboratorio utilizando una columna larga. De igual forma se midi la concentracin puntual en funcin del tiempo, as como la concentracin de los cortes. 5.5.2. Primera y Segunda Purificacin Las purificaciones se llevaron a cabo a escala laboratorio utilizando en ambas ocasiones una columna corta. En ambos casos se utiliz acetato de sodio anhidro para favorecer la separacin. 6. Resultados 6.1. Pruebas Preliminares

Tanto la prueba del yodo, como la de azucares reductores se llevaron a cabo de forma cualitativa, resultando ambas positivas. 6.2. Balance de Masa

Rendimiento terico Se realiza un balance de materia comenzando por los 90 g de almidn de trigo. Considerando que el almidn de trigo utilizado estuviera compuesto al 100 % de almidn se hacen los siguientes clculos:

Tabla 5.2: Datos Experimentales para las Destilaciones y las Purificaciones.

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Asumiendo que el almidn est compuesto por n glucosas que todo el carbono de estas estuviera disponible para la produccin de alcohol, el rendimiento ser de 69 g de C2H5OH. Si se considera una densidad a 25 C de 798.5096 kg/m3:

Con base en el resultado obtenido y considerando que se obtuvieron 2.135 L al 2 %v Alc/Vol, es posible calcular el rendimiento terico de la fermentacin. Para el caso de las destilaciones se utiliz la ecuacin:

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Para el clculo del rendimiento de la etapa se considera que el valor de la destilacin n es el mismo que el final de la destilacin n-1. Los resultados se muestran en la Tabla 6.1. Si bien los rendimientos por etapa resultan altos es posible notar que disminuyen a partir de la segunda destilacin. Asimismo, por ms alto que sea el rendimiento, no justifica el aumento mnimo en la concentracin de la solucin. El peor rendimiento se obtuvo para el caso de la primera destilacin. Esto debido quiz al ser desproporcionadamente grande respecto a nuestra muestra. A lo largo de la columna y al haber tanto volumen muerto existen una considerable cantidad de fugas y posibles mermas. El rendimiento de la fermentacin resulta sorpresivamente alto, ms si se considera que para obtener el valor terico se supuso que la totalidad de la masa utilizada en un inicio era almidn puro de trigo y que todo el carbono disponible se convertira en etanol. Cabe recordar que el almidn no es una cadena lineal. Si bien la hidrolisis favorece la exposicin de gran parte del carbono, no todo queda expuesto y listo para la fermentacin. Cuadro 6.1: Tabla de Rendimientos por Etapa.

6.3.

Fermentacin

Durante la fermentacin se tomaron muestras del reactor para monitorear la concentracin de alcohol. Esta se determin utilizando la tcnica de cromatografa de gases. Para poder interpretar las reas de los picos fue necesario realizar una curva de calibracin (Figura 6.1). Los resultados de la concentracin de alcohol se muestran en la Figura 6.2.

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Figura 6.1: Curva de calibracin para las pruebas de alcohol en el CG. Analizando la Figura 6.2 es posible observar como en un inicio, la concentracin de alcohol aumenta con una tendencia fuerte, la cual va disminuyendo conforme avanza el tiempo, hasta llegar a un estado casi estacionario, e incluso un poco decreciente. Asimismo, es posible observar que la mxima concentracin es cercana al 5 %v, no muy lejos del 2 %v obtenido a travs del ndice de refraccin. Cabe recordar la alta imprecisin de dicho aparato, no solo por las variaciones en la temperatura, sino por la naturaleza de su lectura. 6.4. Etapas de Purificacin

La Figura 6.3 muestra una tabla comparativa con el rendimiento para cada etapa y el porcentaje de alcohol de la solucin obtenida. Claramente se observa que la segunda destilacin, es decir, la primera realizada a escala de laboratorio no solo es la de mayor rendimiento, sino la que en mayor proporcin aumenta la concentracin del destilado.

Figura 6.2: Concentracin de alcohol durante la fermentacin. Podra argumentarse que el resto de las destilaciones y purificaciones fueron un tanto obsoletas, pues ms all de purificar ligeramente la solucin, causaron mermas importantes en la muestra. La Figura 6.4 muestra la variacin de la concentracin en funcin del tiempo para cada una de las etapas de purificacin. As mismo se comparan los valores experimentales con los tericos ideales. Si bien los valores resultan poco usuales, es posible notar con claridad que la primera destilacin es la nica notablemente diferente al resto. Es decir, una vez finalizada la segunda destilacin, los cambios en la concentracin del destilado fueron prcticamente nulos. Microbiologa Industrial. 35

Produccin de biocombustibles: Etanol. 7. Conclusiones

Con base en los resultados presentados es posible afirmar que se cumplieron los objetivos del proyecto. Como se menciona a lo largo del reporte, se obtuvo etanol a partir de almidn de trigo, el cual fue posteriormente purificado. En una ltima instancia se obtuvieron 13mL con una concentracin de 19.4 %v. Si bien la pureza obtenida dista considerablemente del grado anhidro, resulta un muy buen acercamiento para una primera instancia de experimentacin, con una sustancia poco estudiada como lo es el trigo.

Figura 6.3: Rendimiento de las etapas de purificacin.

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Figura 6.4: Variacin de la concentracin en las diferentes etapas de purificacin.

El presente trabajo sienta las bases para futuras y ms minuciosas experimentaciones, donde el medio de cultivo y las levaduras podran ser factores de influencia a considerar en el rendimiento de la fermentacin. No obstante, el verdadero reto se encuentra en la purificacin. Con base en los resultados obtenidos y contrario a las expectativas, la primera destilacin, llevada a cabo en una columna ms compleja que las dems destilaciones resulto en un rendimiento casi ridculo. Valdra la pena omitir ese paso, para reconsiderar el hecho de utilizar dicho equipo. Adems de las limitaciones tcnicas propuestas en el presente trabajo es necesario considerar las limitaciones de viabilidad econmica y la sustentabilidad alimenticia. Ms aun considerando el pauprrimo rendimiento del trigo por hectrea, comparndolo con otras materias primas lignocelulosicos utilizadas para la produccin de bioetanol. Es importante recordar que el bioetanol emite igual (o muy similar) cantidad de CO2 que los combustibles fsiles y si bien uno de sus beneficios es ser un recurso renovable, el verdadero incentivo en su uso est en el balance global de CO2, pues los plantos necesarios para producir bioetanol consumen ms CO2 del que emite el bioetanol producido. Desde el punto de vista energtico an se debate si su balance es favorable o desfavorable. Estudiar un proceso desde su inicio hasta sus etapas finales resulta no solo muy interesante, sino enriquecedor, pues en ocasiones se cree que para producir etanol hay que meter harina en un reactor, esperar, y cargar el tanque. Los procesos industriales son mucho ms complejos que esto y nuevamente se demuestra que las etapas de purificacin son sin duda alguna las ms caras del proceso. El reto para el Ingeniero Qumico esta en mejorar estas etapas, aumentar los rendimientos y encontrar soluciones alternativas que permitan un desarrollo integral y sustentable. 5.- CONCLUSIONES:

6.- BIBLIOGRAFIA: ALVREZ, R.M. Y COL. (1992). Efecto de la temperatura sobre la produccin de alcohol en levaduras. II Seminario Internacional sobre Azcar y Derivados de la caa. Diversificacin92. Comunicaciones cortas. Tomo I, p. 120-122. ALVREZ, R.M. Y COL. (1993). Efecto del tamao del inculo en la fermentacin alcohlica por lotes. Rev. Latinoamericana de Microbiologa 35: 33-38. Microbiologa Industrial. 37

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